Centrifugation នេះគឺជាការបំបែកនៃល្បាយមេកានិចចូលទៅក្នុងផ្នែកធាតុផ្សំរបស់វា។
ដោយសកម្មភាពនៃកម្លាំង centrifugal ។ ឧបករណ៍ប្រើប្រាស់សម្រាប់ការនេះ។
គោលដៅត្រូវបានគេហៅថា centrifuges ។
ផ្នែកសំខាន់នៃ centrifuge គឺ rotor ដែលមានភ្ជាប់មកជាមួយ
វាសំបុកសម្រាប់បំពង់ centrifuge ។ rotor បង្វិលជាមួយ
ល្បឿនលឿនជាលទ្ធផលគួរឱ្យកត់សម្គាល់
ទំហំនៃកម្លាំង centrifugal ដែលស្ថិតនៅក្រោមឥទ្ធិពលរបស់វា។
ល្បាយមេកានិចត្រូវបានបំបែកជាឧទាហរណ៍
sedimentation នៃភាគល្អិតដែលផ្អាកនៅក្នុងរាវ។
ដំណើរការកើតឡើងនៅក្នុង centrifuge
Centrifuges ចែករំលែកដំណើរការដូចខាងក្រោមៈ1) តម្រង centrifugal ។
2) ការតាំងទីលំនៅ centrifugal ។
3) ការបំភ្លឺដោយ centrifugal ។
តម្រង centrifugal
ការច្រោះ centrifugal គឺដំណើរការនៃការបំបែកការព្យួរនៅក្នុង centrifuges ជាមួយ
ស្គរ perforated ។ ផ្ទៃខាងក្នុង
ស្គរបែបនេះត្រូវបានគ្របដោយកណាត់ចម្រោះ។
ការព្យួរត្រូវបានបោះចោលដោយកម្លាំង centrifugal ឆ្ពោះទៅរក
ជញ្ជាំងស្គរខណៈពេលដែលដំណាក់កាលរឹងនៅតែមាន
ផ្ទៃជាលិកា និងវត្ថុរាវនៅក្រោមសកម្មភាព
កម្លាំង centrifugal ឆ្លងកាត់ស្រទាប់ sediment និង
ក្រណាត់ត្រូវបានយកចេញទៅខាងក្រៅតាមរយៈរន្ធនៅក្នុងស្គរ។
ការច្រោះ centrifugal ជាធម្មតាមាន
ដំណើរការរាងកាយបីជាប់គ្នា៖
1) ការច្រោះជាមួយនឹងការបង្កើត precipitate មួយ;
2) ការបង្រួមដីល្បាប់;
3) ការយកចេញពីដីល្បាប់នៃវត្ថុរាវដែលបានរក្សាទុក
កម្លាំងម៉ូលេគុល;
ការតាំងទីលំនៅ centrifugal
ការតាំងទីលំនៅ centrifugalការតាំងទីលំនៅ centrifugal - ដំណើរការបំបែក
ការព្យួរនៅក្នុង centrifuges ជាមួយស្គរ
ជញ្ជាំងរឹង។ ការព្យួរត្រូវបានចាក់ចូលទៅក្នុងផ្នែកខាងក្រោម
ផ្នែកនៃស្គរ និងក្រោមសកម្មភាពនៃកម្លាំង centrifugal
បោះចោលទល់នឹងជញ្ជាំង។ ជញ្ជាំងបង្កើតជាស្រទាប់
ដីល្បាប់ ហើយអង្គធាតុរាវបង្កើតជាស្រទាប់ខាងក្នុង និង
ផ្លាស់ទីលំនៅពីស្គរចូលទៅក្នុងការបំបែក
ការព្យួរ។ សារធាតុរាវកើនឡើង
ចាក់ពីលើគែមស្គរហើយត្រូវបានយកចេញ
ចេញ។
ក្នុងករណីនេះដំណើរការរាងកាយពីរកើតឡើង:
1) ការធ្លាក់ចុះនៃដំណាក់កាលរឹង។
2) ការបង្រួមនៃដីល្បាប់។
ការបំភ្លឺ centrifugal
ការបំភ្លឺដោយ centrifugal - ដំណើរការបំបែកការព្យួរស្តើង និងដំណោះស្រាយ colloidal ។ ដូច្នេះ
ដូចគ្នានេះដែរត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងស្គររឹង។
រាងកាយ, centrifugal
ការបញ្ជាក់គឺជាដំណើរការមួយ។
ការបោះចោលដោយសេរីនៃភាគល្អិតរឹងនៅក្នុងវាល
កម្លាំង centrifugal ។
នៅក្នុងស្គរដែលមានជញ្ជាំងរឹង
ការបំបែកសារធាតុ emulsion ក៏ត្រូវបានអនុវត្តផងដែរ។ នៅក្រោម
សកម្មភាពនៃសមាសធាតុកម្លាំង centrifugal
emulsion យោងទៅតាមដង់ស៊ីតេ
មានទីតាំងនៅក្នុងទម្រង់នៃស្រទាប់កំណត់៖
ស្រទាប់ខាងក្រៅនៃអង្គធាតុរាវដែលមានដង់ស៊ីតេខ្ពស់ជាង
និងស្រទាប់ខាងក្នុងនៃរាវស្រាលជាងមុន។
សារធាតុរាវត្រូវបានបង្ហូរចេញពីស្គរដាច់ដោយឡែក។ នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ព្យាបាល និងអនាម័យ
ការប្រើប្រាស់ centrifugation
ដើម្បីបំបែក erythrocytes ពី
ប្លាស្មាឈាម, កំណកឈាម
សេរ៉ូម, ភាគល្អិតក្រាស់ពី
ផ្នែករាវនៃទឹកនោម។ល។
សម្រាប់គោលបំណងនេះឬ
ឧបករណ៍ centrifuges ដោយដៃ ឬ
centrifuges អគ្គិសនី,
ល្បឿនបង្វិលរបស់វា។
អាចត្រូវបានកែតម្រូវ។
Ultracentrifuges, ល្បឿន
ការបង្វិលនៃ rotors ដែល
លើសពី 40,000 rpm,
ជាធម្មតាត្រូវបានគេប្រើនៅក្នុង
ការអនុវត្តពិសោធន៍
ដើម្បីបំបែកសរីរាង្គ
កោសិកា, ការបំបែកនៃ colloidal
ភាគល្អិត, ម៉ាក្រូម៉ូលេគុល,
ប៉ូលីមែរ។
ការប្រើប្រាស់ centrifugation ក្នុងប៉ារ៉ាស៊ីតវិទ្យា
វិធីសាស្ត្រនេះត្រូវបានប្រើដើម្បីបែងចែកភាពស្មុគស្មាញលាយឈាម ទឹកនោម ឬលាមក បន្ទាប់មក
ភាពឯកោនៃ helminths ពីវាបន្ថែមទៀត
ការពិនិត្យក្រោមមីក្រូទស្សន៍ និងការជួសជុលសម្ភារៈ។ អេ
ដំណើរការ centrifugation មាននៅក្នុងគំរូ
ប៉ារ៉ាស៊ីតឆ្លងកាត់តម្រងនិងកកកុញនៅក្នុង
ផ្នែករាងសាជីទាបនៃបំពង់។ តម្រងសំណាញ់
ជាមួយនឹងកោសិកាដែលមានទំហំពិសេស
ជាលទ្ធផលនៅក្នុងបំពង់សាកល្បងមានទីតាំងនៅបញ្ឈរ
តើមានអ្វីកើតឡើង ផ្ដេក (ចំហៀង)
ការត្រងគំរូ។ ជាលទ្ធផលរដុប
ភាគល្អិតនៃអាហារដែលមិនបានរំលាយអាហារ, ជាតិសរសៃត្រូវបានដាក់នៅក្នុង
បន្ទប់លាយ និងប៉ារ៉ាស៊ីត និងស៊ុតរបស់វា។
ឆ្លងកាត់តម្រងដោយសេរី។ ដូច្នេះ
ដូច្នេះប៉ារ៉ាស៊ីតត្រូវបានប្រមូលផ្តុំនៅក្នុង
ស្រទាប់ផ្ទៃនៃដីល្បាប់ល្អ និង
វេជ្ជបណ្ឌិតមន្ទីរពិសោធន៍អាចជ្រើសរើសដោយប្រុងប្រយ័ត្ន
គំរូសម្រាប់មីក្រូទស្សន៍ជាមួយ
បំពង់ដោយស្វ័យប្រវត្តិ ហើយអនុវត្តវាទៅ
ស្លាយ។
វិធីសាស្រ្ត centrifugation នៅក្នុង cytology
វិធីសាស្រ្តឌីផេរ៉ង់ស្យែលcentrifugation ត្រូវបានប្រើសម្រាប់
ប្រភាគនៃកោសិកា ពោលគឺការចាត់ថ្នាក់របស់ពួកគេ។
មាតិកាទៅជាប្រភាគអាស្រ័យលើជាក់លាក់
ទម្ងន់នៃសរីរាង្គផ្សេងៗ និងការរួមបញ្ចូលកោសិកា។
ដើម្បីធ្វើដូច្នេះ កោសិកាដែលបែងចែកយ៉ាងល្អិតល្អន់ត្រូវបានបង្វិលចូល
ឧបករណ៍ពិសេស - ultracentrifuge ។ អេ
ជាលទ្ធផលនៃការ centrifugation សមាសធាតុកោសិកា
precipitate ចេញពីដំណោះស្រាយ, ដោះស្រាយនៅក្នុង
យោងទៅតាមដង់ស៊ីតេរបស់វា។ កាន់តែក្រាស់
រចនាសម្ព័ន្ធត្រូវបានដាក់ក្នុងល្បឿនទាប
centrifugation និងក្រាស់តិច - នៅខ្ពស់។
ល្បឿន។ ស្រទាប់លទ្ធផលត្រូវបានបំបែកនិងសិក្សា
ដោយឡែកពីគ្នា។
10. Centrifugation in botany and plant physiology
Centrifugation ធ្វើឱ្យវាអាចទទួលបានផ្សេងៗប្រភាគនៃភាគល្អិត subcellular និងរុករក
លក្ខណៈសម្បត្តិ និងមុខងាររបស់បក្សនីមួយៗ
ដោយឡែកពីគ្នា។ ឧទាហរណ៍ពីស្លឹក spinach អ្នកអាចធ្វើបាន
ញែក chloroplasts, លាងជម្រះពួកវាជាមួយ
re-centrifugation ក្នុងសមស្រប
មធ្យមពីបំណែកកោសិកា ហើយពិនិត្យពួកវា
ឥរិយាបថក្នុងការពិសោធន៍ផ្សេងៗ
លក្ខខណ្ឌ ឬកំណត់សមាសធាតុគីមីរបស់វា។
លើសពីនេះ វាអាចទៅរួច ដោយអនុវត្តការកែប្រែផ្សេងៗ
បច្ចេកទេស, បំផ្លាញ plastids ទាំងនេះនិងដាច់ដោយឡែក
តាមរយៈ
ឌីផេរ៉ង់ស្យែល centrifugation (ម្តងហើយម្តងទៀត
ការបែងចែកភាគល្អិតនៅតម្លៃផ្សេងៗគ្នា
ការបង្កើនល្បឿន) ធាតុផ្សំរបស់វា។ ដូច្នេះ
ដោយវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីបង្ហាញថា plastids មាន
រចនាសម្ព័ន្ធដែលមានលំដាប់ខ្ពស់។
រចនាសម្ព័ន្ធ - អ្វីដែលគេហៅថាធញ្ញជាតិ; គ្រាប់ធញ្ញជាតិទាំងអស់។
នៅខាងក្នុង chloroplast ជាប់ព្រំដែន
ភ្នាស (ភ្នាសនៃ chloroplast) ។ គុណសម្បត្តិ
វិធីសាស្រ្តនេះគឺមានតម្លៃមិនអាចកាត់ថ្លៃបានព្រោះវា
បង្ហាញពីអត្ថិភាព
អនុផ្នែកមុខងារដែលបង្កើត
ភាគល្អិត subcellular ធំជាង; ជាពិសេស,
ដោយប្រើវិធីសាស្រ្ត
11. វិធីសាស្រ្ត centrifugation ក្នុង virology
វិធីសាស្រ្ត centrifugation ជម្រាលដង់ស៊ីតេ Brakke អាចជាប្រើសម្រាប់ទាំងការជ្រើសរើស និងការទិញ
លក្ខណៈបរិមាណនៃមេរោគរុក្ខជាតិ។ ដូចដែលវាបានប្រែក្លាយ,
វិធីសាស្រ្តនេះគឺ fraught ជាមួយលទ្ធភាពជាច្រើននិងបច្ចុប្បន្ន
ប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយក្នុងវិស័យវីរសាស្ត្រ និងម៉ូលេគុល
ជីវវិទ្យា។ នៅពេលធ្វើការស្រាវជ្រាវដោយវិធីសាស្ត្រ
បំពង់ centrifugation ដង់ស៊ីតេ
បំពេញដោយផ្នែកជាមួយនឹងដំណោះស្រាយ ដង់ស៊ីតេនៃការថយចុះនៅក្នុង
ទិសដៅពីបាតទៅ meniscus ។ ដើម្បីបង្កើតជម្រាល
ប្រភាគនៃមេរោគរុក្ខជាតិត្រូវបានគេប្រើញឹកញាប់បំផុត។
sucrose ។ មុនពេលចាប់ផ្តើម centrifugation ភាគល្អិតមេរោគអាច
ត្រូវបានចែកចាយទូទាំងបរិមាណនៃដំណោះស្រាយ ឬអនុវត្តទៅ
កំពូលនៃជម្រាល។ Brakke បានស្នើវិធីសាស្រ្តបីផ្សេងគ្នា
ដង់ស៊ីតេជម្រាល centrifugation ។ នៅ isopypical
(លំនឹង) ដំណើរការ centrifugation បន្តរហូតដល់
រហូតដល់ភាគល្អិតទាំងអស់នៅក្នុងជម្រាលឈានដល់កម្រិតមួយដែលដង់ស៊ីតេ
មធ្យមគឺស្មើនឹងដង់ស៊ីតេរបស់វា។ ដោយវិធីនេះ
ប្រភាគនៃភាគល្អិតកើតឡើងនៅក្នុងករណីនេះស្របតាម
ភាពខុសគ្នានៃដង់ស៊ីតេរបស់ពួកគេ។ ដំណោះស្រាយ Sucrose មិនមានទេ។
ដង់ស៊ីតេគ្រប់គ្រាន់សម្រាប់ការបំបែក isopycnal នៃមនុស្សជាច្រើន
មេរោគ។ ជាមួយនឹងការ centrifugation zonal ល្បឿនលឿន, មេរោគ
ដំបូងបានអនុវត្តចំពោះជម្រាលដែលបានបង្កើតពីមុន។ ភាគល្អិត
នៃប្រភេទនីមួយៗនៃដីល្បាប់ក្នុងពេលតែមួយតាមរយៈជម្រាលក្នុងទម្រង់ជាតំបន់មួយ
ឬក្បាលដី ក្នុងល្បឿនមួយអាស្រ័យលើទំហំ រូបរាង និង
ដង់ស៊ីតេ។ ការ centrifugation ត្រូវបានបញ្ចប់នៅពេលដែលភាគល្អិត
នៅតែបន្តធ្លាក់ដី។ តំបន់លំនឹង
centrifugation ស្រដៀងទៅនឹង zonal ល្បឿន
centrifugation ប៉ុន្តែនៅក្នុងករណីនេះ centrifugation
12. ភាពលំបាកក្នុងការប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្ត centrifugation
ការអនុវត្តវិធីសាស្រ្ត centrifugation ឌីផេរ៉ង់ស្យែលពោរពេញដោយការលំបាកវិធីសាស្រ្តជាច្រើន។ ជាដំបូងនៅ
ការបញ្ចេញភាគល្អិតអាចបំផ្លាញរចនាសម្ព័ន្ធរបស់វា។ នោះហើយជាមូលហេតុដែល
វាចាំបាច់ក្នុងការបង្កើតវិធីសាស្រ្តពិសេសសម្រាប់ការបំផ្លាញកោសិកា,
ដែលនឹងមិនបណ្តាលឱ្យខូចខាតដល់រចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិការង
ប្រភាគ។ ទីពីរចាប់តាំងពីភាគល្អិត subcellular មាន
ភ្នាស, នៅក្នុងដំណើរការនៃការបញ្ចេញរបស់ពួកគេ,
ផលប៉ះពាល់ osmotic ផ្សេងៗគ្នា។ ដូច្នេះសម្រាប់នោះ។
ដូច្នេះថា រចនាសម្ព័ន្ធ ultrastructure នៃវត្ថុដែលកំពុងសិក្សាមិនត្រូវបានបំផ្លាញទេ។
សូម្បីតែនៅពេលដែលពួកវានៅដាច់ពីគេក៏ដោយ ចាំបាច់ត្រូវជ្រើសរើសសមាសភាពដោយប្រុងប្រយ័ត្ន
បរិស្ថានដែលបំផ្លាញកោសិកា និងស្រទាប់
ភាគល្អិត។ ហើយទីបំផុតការលាងនៃភាគល្អិត subcellular
(ផ្អាកពួកវាឡើងវិញក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុក ហើយបន្ទាប់មកម្តងទៀត
centrifugation) អាចនាំឱ្យមានការបាត់បង់មួយចំនួន
សារធាតុដែលមាននៅក្នុងពួកវាដែលស្ថិតនៅក្រោមសកម្មភាពនៃកម្លាំងសាយភាយ
ចូលទៅក្នុងដំណោះស្រាយ។
ក្នុងន័យនេះ ជួនកាលវាពិបាកយល់ថាតើមួយណាជាម៉ូលេគុលតូច
ពិតជាធាតុផ្សំនៃរចនាសម្ព័ន្ធដែលកំពុងសិក្សា ហើយដែល
ត្រូវបានស្រូបយកយ៉ាងសាមញ្ញលើផ្ទៃរបស់ពួកគេកំឡុងពេលដំណើរការដាច់ដោយឡែក។
ស្ថានភាពនេះធ្វើឱ្យមានការលំបាកក្នុងការបញ្ជាក់ខ្លះៗ
មុខងារមុខងាររបស់វត្ថុដែលបានជ្រើសរើស។
វិធីសាស្រ្ត centrifugation គឺផ្អែកលើឥរិយាបថផ្សេងគ្នានៃភាគល្អិតនៅក្នុងវាល centrifugal ដែលបង្កើតឡើងដោយ centrifuge ។ គំរូនៅក្នុងនាវា centrifuge ត្រូវបានដាក់នៅក្នុង rotor ដែលជំរុញដោយ centrifuge drive ។ ដើម្បីបំបែកល្បាយនៃភាគល្អិតមួយ សំណុំនៃលក្ខខណ្ឌត្រូវតែត្រូវបានជ្រើសរើសដូចជា ល្បឿនបង្វិល ពេលវេលា centrifugation និងកាំ rotor ។ សម្រាប់ភាគល្អិតស្វ៊ែរ អត្រានៃការតាំងលំនៅ (ដីល្បាប់) អាស្រ័យមិនត្រឹមតែទៅលើការបង្កើនល្បឿនប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែក៏អាស្រ័យលើកាំ និងដង់ស៊ីតេនៃភាគល្អិត ក៏ដូចជានៅលើ viscosity នៃឧបករណ៍ផ្ទុកដែលសំណាកគំរូត្រូវបានដាក់។
ការផ្តោតអារម្មណ៍អាចត្រូវបានបែងចែកជាពីរប្រភេទ៖ ការរៀបចំ និងការវិភាគ។ ការរៀបចំ centrifugation ត្រូវបានប្រើនៅពេលដែលវាចាំបាច់ដើម្បីញែកផ្នែកមួយនៃគំរូសម្រាប់ការវិភាគបន្ថែម។ វិធីសាស្រ្តនេះត្រូវបានប្រើដើម្បីបំបែកកោសិកាពីការព្យួរ, ម៉ាក្រូម៉ូលេគុលជីវសាស្រ្ត។ល។
ការវិភាគ centrifugation ត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាពីឥរិយាបថរបស់ម៉ាក្រូម៉ូលេគុលជីវសាស្រ្តនៅក្នុងវាល centrifugal ។ វិធីសាស្រ្តនេះធ្វើឱ្យវាអាចទទួលបានទិន្នន័យអំពីម៉ាស់ រូបរាង និងទំហំនៃម៉ូលេគុលដែលមានវត្តមានក្នុងបរិមាណគំរូតិចតួច។ ការរៀបចំ centrifugation គឺជាបច្ចេកទេសដែលប្រើជាទូទៅបំផុតក្នុងការអនុវត្តមន្ទីរពិសោធន៍ប្រចាំថ្ងៃ។
ម៉្យាងវិញទៀត ចង្រ្កាននៃមន្ទីរពិសោធន៍ដែលត្រៀមរួចជាស្រេច ត្រូវបានបែងចែកជាក្រុមទៅតាមគោលបំណងរបស់វា៖ មជ្ឈមណ្ឌលអ៊ុលត្រាហ្សេហ្វហ្គេសត្រៀម មជ្ឈមណ្ឌលផ្តោតគោលបំណងទូទៅ និងម៉ាស៊ីន centrifuges ល្បឿនលឿន។ ម៉ាស៊ីន centrifuges គោលបំណងទូទៅមានការអនុវត្តជាក់ស្តែងធំបំផុតនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍វេជ្ជសាស្រ្តមានល្បឿនអតិបរមារហូតដល់ 6 ពាន់ rpm ។ លក្ខណៈពិសេសចម្បងនៃឧបករណ៍ប្រភេទនេះគឺសមត្ថភាពធំដែលទាក់ទងរបស់ពួកគេ - រហូតដល់ 6 លីត្រដែលអនុញ្ញាតឱ្យប្រើមិនត្រឹមតែបំពង់ centrifuge រហូតដល់ 100 មីលីលីត្រប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែថែមទាំងធុងរហូតដល់ 1.25 លីត្រសម្រាប់ centrifugation ។ នៅក្នុង centrifuges គោលបំណងទូទៅទាំងអស់ rotors ត្រូវបានម៉ោនយ៉ាងតឹងរ៉ឹងនៅលើ driveshaft ដូច្នេះធុង centrifuged ត្រូវតែមានតុល្យភាពត្រឹមត្រូវ។ ដើម្បីជៀសវាងការបែកបាក់ បំពង់សាកល្បងចំនួនសេសមិនគួរត្រូវបានផ្ទុកទៅក្នុង rotor ទេ ក្នុងករណីការផ្ទុកមិនពេញលេញ ធុងគួរតែត្រូវបានដាក់ទល់មុខគ្នា។
centrifuges ល្បឿនលឿនមានល្បឿនអតិបរមា 25 ពាន់ rpm និងការបង្កើនល្បឿនរហូតដល់ 89 ពាន់ក្រាម។ អង្គជំនុំជម្រះដែលមាន rotor និងសំណាក centrifuged ត្រូវបានបំពាក់ដោយប្រព័ន្ធត្រជាក់ដើម្បីការពារកំដៅដែលបង្កើតពីការកកិតនៅពេលដែល rotor បង្វិលក្នុងល្បឿនលឿន។ ជាធម្មតា centrifuges ទាំងនេះអាចគ្រប់គ្រងបរិមាណរហូតដល់ 1.5 លីត្រ ហើយត្រូវបានបំពាក់ដោយ rotor ចានរាងមុំ ឬអាចជំនួសបាន។
Ultracentrifuges ត្រៀមបង្កើនល្បឿនដល់ 75,000 rpm និងមានការបង្កើនល្បឿន centrifugal អតិបរមា 510 ពាន់ក្រាម។ ពួកវាត្រូវបានបំពាក់ដោយម៉ាស៊ីនត្រជាក់ និងម៉ាស៊ីនបូមធូលី ដើម្បីការពារការឡើងកំដៅនៃ rotor ពីការកកិតខ្យល់។ rotors សម្រាប់ centrifuges ទាំងនេះត្រូវបានផលិតពី titanium ឬ alloys អាលុយមីញ៉ូមដែលមានកម្លាំងខ្ពស់។ ច្រាសនៃ ultracentrifuges ផ្ទុយទៅនឹងឧបករណ៍ដែលមានល្បឿនលឿន និងរៀបចំត្រូវបានធ្វើឱ្យមានភាពបត់បែនដើម្បីកាត់បន្ថយរំញ័រនៅពេលដែល rotor អស់តុល្យភាព។ សមត្ថភាពនៅក្នុង rotor ត្រូវតែមានតុល្យភាពដោយប្រុងប្រយ័ត្នទៅនឹងភាគដប់នៃក្រាមដែលនៅជិតបំផុត។
បន្ថែមពីលើការច្រោះ ការបំបែកល្បាយនៃអង្គធាតុរាវ និងសារធាតុរឹងក៏អាចធ្វើទៅបានដែរ ដោយការផ្ចិតផ្ចង់ ពោលគឺការបំបែកសារធាតុនៅក្នុងឧបករណ៍ដែលហៅថា centrifuges ។
ការប្រើប្រាស់កំលាំង centrifugal គឺផ្អែកលើការប្រើប្រាស់កំលាំង centrifugal. កំឡុងពេលបង្វិលយ៉ាងលឿន (ការផ្ចិតផ្ចង់) ភាគល្អិតរឹងដែលផ្អាកក្នុងអង្គធាតុរាវ (ដែលមានដង់ស៊ីតេធំជាងដង់ស៊ីតេនៃអង្គធាតុរាវ) ត្រូវបានបោះចោលឆ្ងាយពីចំណុចកណ្តាលក្រោមសកម្មភាពនៃកម្លាំង centrifugal ដែលកំពុងអភិវឌ្ឍកំឡុងពេលបង្វិល ហើយត្រូវបានបំបែកចេញពីអង្គធាតុរាវ។
អង្ករ។ 407. ឧបករណ៍ Thyssen សម្រាប់ការងារមីក្រូវិភាគ
អង្ករ។ 408. ម៉ាស៊ីន centrifuge ដោយដៃ
ចំណុចកណ្តាលគឺ៖ បើក និងបិទ ជាមួយនឹងដ្រាយដោយដៃ និងមេកានិច។ ផ្នែកសំខាន់នៃ centrifuge បើកដោយដៃ (រូបភាព 408) គឺជាអ័ក្សបង្វិលដែលបានកំណត់បញ្ឈរ កាត់កែងដែលនៅចុងខាងលើរបស់វាត្រូវបានភ្ជាប់ជាមួយរបារជាមួយនឹងដៃអាវដែកពីរ (ឬបួន) ដែលអាចចល័តបាន។ ដៃអាវទាំងនេះត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងបំពង់ពិសេសដែលចង្អៀតចុះក្រោម (រូបភាព 409) ជាមួយនឹងអង្គធាតុរាវដែលភាគល្អិតព្យួរត្រូវតែយកចេញ។
បំណែកនៃរោមកប្បាសត្រូវបានដាក់នៅផ្នែកខាងក្រោមនៃដៃអាវ “ដើម្បីជៀសវាងការប៉ះផ្ទាល់រវាងកញ្ចក់ និងដែក។ នៅពេលដែលបំពង់ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងដៃអាវ នោះ centrifuge ត្រូវបានកំណត់ក្នុងចលនា ហើយបន្ទាប់ពីពេលខ្លះ (អាស្រ័យលើ viscosity នៃអង្គធាតុរាវ ទំហំនៃភាគល្អិតព្យួរ និងភាពខុសគ្នានៃដង់ស៊ីតេ) សារធាតុដែលផ្អាកត្រូវបានបំបែកចេញពីអង្គធាតុរាវ បន្ទាប់ពី ដែល centrifuge ត្រូវបានបញ្ឈប់។ នៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់សាកល្បង ទឹកភ្លៀងដ៏ក្រាស់នៃវត្ថុរឹងមួយត្រូវបានប្រមូល ដែលខាងលើគឺជាអង្គធាតុរាវច្បាស់លាស់។
វ គ្របដណ្តប់ centrifuges។
ឧបករណ៍បិទជិតមេកានិច(រូបភាព 410, ខ) មានភាពងាយស្រួលជាងសៀវភៅដៃ (រូបភាព 410, ក)។ ពួកវាជាធម្មតាផ្តល់ឱ្យ 2000-3000 rpm អនុញ្ញាតឱ្យអ្នកសម្រេចបាននូវការបំបែកដ៏ល្អឥតខ្ចោះនៃរាវនិងរឹង។
បំពង់ centrifuge ត្រូវតែមានម៉ាស់ដូចគ្នាបន្ទាប់ពីត្រូវបានបំពេញដោយរាវ។ កន្លែងដែលត្រូវប្រើ centrifuge ញឹកញាប់ វាត្រូវបានណែនាំអោយមានជញ្ជីងពិសេសដែលប្រែប្រួលសម្រាប់ការថ្លឹងទម្ងន់ (ឬផ្ទុយទៅវិញ taring) បំពង់សាកល្បង។ នៅក្នុងជញ្ជីងទាំងនេះ ពែងត្រូវបានព្យួរពីធ្នឹមដោយប្រើកំណាត់ដែលភ្ជាប់ទៅនឹងកណ្តាលនៃពែង។ កំណាត់ទាំងនេះមានចិញ្ចៀនដែលបំពង់សាកល្បងត្រូវបានបញ្ចូល។
ដោយបានពង្រឹងបំពង់សាកល្បង ដំបូងត្រូវចាក់វត្ថុរាវដែលត្រូវចំកណ្តាលទៅក្នុងបំពង់សាកល្បងមួយ (ដោយប្រើបំពង់សាកល្បង) ហើយបន្ទាប់មកចូលទៅក្នុងទីពីរ ដោយព្យាយាមធ្វើឱ្យពែងមានតុល្យភាព។
កុំដាក់សារធាតុរាវច្រើនពេកទៅក្នុងបំពង់សាកល្បង។ បំពង់សាកល្បងត្រូវបានបំពេញដូច្នេះចម្ងាយពីគែមទៅកម្រិតរាវមិនតិចជាង 10 ម។
នៅពេលដែលអ្នកត្រូវការតុល្យភាពបំពង់សាកល្បងច្រើន គួរតែប្រើបច្ចេកទេសខាងក្រោម។ ដោយបានធ្វើឱ្យមានតុល្យភាពបំពង់សាកល្បងគូទីមួយ មួយក្នុងចំណោមពួកវាត្រូវបានយកចេញ ហើយដាក់នៅក្នុងរន្ធ centrifuge ហើយមួយទៀតត្រូវបានទុកនៅលើសមតុល្យ។ បំពង់សាកល្បងចុងក្រោយនេះនឹងបម្រើជាស្តង់ដារសម្រាប់នៅសល់ បញ្ចូលបំពង់សាកល្បងមួយផ្សេងទៀតទៅក្នុងលំហទំនេរនៅលើសមតុល្យ ធ្វើឱ្យមានតុល្យភាពជាមួយស្តង់ដារ ហើយយកវាចេញ។ វាត្រូវបានណែនាំផងដែរឱ្យបំពេញបំពង់សាកល្បងជាមុន (យកបរិមាណរាវតិចជាងការចាំបាច់បន្តិច) ហើយបន្ថែមបរិមាណរាវដែលត្រូវការរួចហើយក្នុងអំឡុងពេលសមតុល្យ។ វិធីសាស្រ្តនេះបង្កើនល្បឿនការងារ។
អង្ករ។ 409. បំពង់សាកល្បងសម្រាប់ centrifuges ។
បំពង់សាកល្បងដែលមានតុល្យភាពត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងរន្ធ centrifuge ។
មិនគួរចាប់ផ្តើម centrifuge ក្នុងល្បឿនពេញលេញភ្លាមៗនោះទេ ប៉ុន្តែបន្តិចម្តងៗ។ នេះអនុវត្តចំពោះទាំង centrifuges ដោយដៃ និងមេកានិច។
អង្ករ។ 410. Closed centrifuges: a - with manual drive; ខ - ជាមួយម៉ូទ័រអេឡិចត្រិច។
ឧបករណ៍ centrifuges មេកានិចសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងល្បឿនមានឧបករណ៍សមស្រប។ ដូច្នេះ centrifuges អគ្គិសនីត្រូវបានបំពាក់ដោយ rheostats សម្រាប់ការប្តូរបន្តិចម្តងៗទៅកាន់ចំនួនបដិវត្តន៍ពេញលេញ។ នៅក្នុង centrifuges ដែលជំរុញដោយទួរប៊ីនទឹក ការកើនឡើងជាលំដាប់នៃល្បឿនត្រូវបានសម្រេចដោយការគ្រប់គ្រងយន្តហោះទឹក។ ការដាក់បញ្ចូលដោយប្រុងប្រយ័ត្នកាន់តែច្រើន ដំណើរការ centrifuge កាន់តែមានភាពជឿជាក់។
centrifuge គួរតែត្រូវបានត្រួតពិនិត្យគ្រប់ពេលវេលា; ការចម្លងរោគរបស់វា ជាពិសេសផ្នែកផ្លាស់ទី គឺមិនអាចទទួលយកបានទេ។ ដៃអាវដែកគួរបត់បានយ៉ាងងាយស្រួល និងដោយសេរី។ ឧបករណ៍ជំរុញ centrifuge ត្រូវតែមានភាពងាយស្រួលក្នុងការផ្លាស់ទី; ពួកវាមិនត្រូវលាបជាមួយខាញ់ដែលអាចក្រាស់បានទេ។ អ័ក្សកណ្តាលក៏ត្រូវតែមានសណ្តាប់ធ្នាប់ និងស្អាតជានិច្ច។
ការគ្រប់គ្រងដោយឥតប្រុងប្រយ័ត្ននៃ centrifuges ជាពិសេស centrifuges ដោយដៃ អាចពត់អ័ក្ស ហើយដោយហេតុនេះបិទ centrifuge ។
បន្ទាប់ពីបិទ centrifuge ការចាប់ផ្តើមដោយខ្លួនឯងត្រូវបានអនុញ្ញាតឱ្យបញ្ឈប់ហើយមានតែបន្ទាប់ពីនោះបំពង់សាកល្បងត្រូវបានដកចេញ។
ថ្មីៗនេះ អ្វីដែលគេហៅថា supercentrifuges ដែលផ្តល់កម្លាំងដល់ទៅ 40,000 rpm ត្រូវបានរីករាលដាលកាន់តែខ្លាំង (រូបភាព 411)។
អង្ករ។ 411 super centrifuge
ឧបករណ៍ centrifuges បែបនេះគឺសមរម្យជាពិសេសសម្រាប់ centrifuging គ្រប់ប្រភេទនៃដំណោះស្រាយ viscous ដូចជា varnishes, ការបំបែកល្អ និង emulsion ។
អង្គធាតុរាវដែលត្រូវបញ្ចោញដោយ supercentrifuged ចូលទៅក្នុង nozzle 1 ដែលមានទីតាំងនៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបរិធាន។ បន្ទាប់មកអង្គធាតុរាវត្រូវបានចាក់ចូលទៅក្នុងស៊ីឡាំងធ្វើការ 2 ដោយបង្វិលក្នុងល្បឿនរហូតដល់ 40,000 rpm ដែលក្នុងនោះភាគល្អិតធ្ងន់ដែលផ្អាកនៅក្នុងអង្គធាតុរាវត្រូវបានបំបែកចេញពីគ្នា។ អង្គធាតុរាវកើនឡើងបន្តិចម្តងៗតាមស៊ីឡាំង 2 ដល់ចំណុចបំបែកទី 5 ហើយប្រសិនបើសារធាតុ emulsion ត្រូវបានបំផ្លាញ នោះអង្គធាតុរាវស្រាលជាងនឹងហូរចេញតាមបំពង់បង្ហូរ 8 ហើយទម្ងន់ធ្ងន់ជាង - តាមរយៈបង្ហូរ 4. នៅពេលបំបែកភាគល្អិតរឹងដែលមានដង់ស៊ីតេធំជាង លើសពីមួយ អង្គធាតុរាវហូរចេញតាមបំពង់បង្ហូរ 3. នៅលើជញ្ជាំងខាងក្នុង ស៊ីឡាំងដែលធ្វើការត្រូវបានដាក់បញ្ចូលនូវសំណល់រឹងដែលអាចបំបែកបាន។ Supercentrifuge ។ ពីពេលមួយទៅពេលមួយ supercentrifuge ត្រូវបានបញ្ឈប់ ស៊ីឡាំងធ្វើការ 2 ត្រូវបានយកចេញ វាត្រូវបានសម្អាតពីដីល្បាប់ ហើយដាក់នៅនឹងកន្លែង ការងារបន្ត។ ដំណើរការទាំងមូលនៃការសម្អាតស៊ីឡាំងដែលកំពុងដំណើរការចាប់ពីពេលឈប់រហូតដល់ពេលចាប់ផ្តើមថ្មីនៃ supercentrifuge ចំណាយពេលមិនលើសពី 15 នាទី។ ប្រសិនបើអ្នកត្រូវបន្សុតបរិមាណដ៏ច្រើននៃអង្គធាតុរាវ បន្ទាប់មកប្រើ 38 supercentrifuges: មួយកំពុងដំណើរការ មួយទៀតកំពុងត្រូវបានបន្សុត ទីបីគឺនៅក្នុងទុនបម្រុង។
Centrifugation គឺជាការបំបែកនៃល្បាយមេកានិចចូលទៅក្នុងផ្នែកសមាសភាគរបស់ពួកគេដោយសកម្មភាពនៃកម្លាំង centrifugal ។ ឧបករណ៍ដែលប្រើសម្រាប់គោលបំណងនេះត្រូវបានគេហៅថា centrifuges ។ ផ្នែកសំខាន់នៃ centrifuge គឺ rotor ដែលមានសំបុកសម្រាប់បំពង់ centrifuge ដែលបានម៉ោននៅក្នុងវា។ rotor បង្វិលក្នុងល្បឿនលឿន ដែលជាលទ្ធផលនៃកម្លាំង centrifugal សំខាន់ៗត្រូវបានបង្កើតឡើង ក្រោមសកម្មភាពដែលល្បាយមេកានិចត្រូវបានបំបែកជាឧទាហរណ៍ ភាគល្អិតដែលផ្អាកនៅក្នុងអង្គធាតុរាវមួយត្រូវបានដាក់បញ្ចូល។
ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញា: 1 - សៀវភៅដៃ: 2 - ជាមួយដ្រាយអគ្គីសនី។
នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍គ្លីនិក និងអនាម័យ ការប្រើ centrifugation ដើម្បីបំបែកចេញពីប្លាស្មាឈាម ពីភាគល្អិតក្រាស់ពីផ្នែករាវនៃទឹកនោម។ ដែលអាចត្រូវបានកែតម្រូវ (រូបភាពទី 2) ។
Ultracentrifuges ដែលល្បឿន rotor លើសពី 40,000 rpm ជាធម្មតាត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងការអនុវត្តពិសោធន៍សម្រាប់ការបំបែកកោសិកា organelles បំបែកភាគល្អិត colloidal macromolecules ជាដើម។
Centrifugation គឺជាការបំបែកនៃប្រព័ន្ធ coarse ដែលមានសមាសធាតុរាវ និងរឹងដែលមានដង់ស៊ីតេខុសៗគ្នា ដោយប្រើឧបករណ៍ពិសេសហៅថា centrifuges។ គោលការណ៍នៃការប្រតិបត្ដិការនៃ centrifuge គឺផ្អែកលើការបង្កើតកម្លាំង centrifugal ដ៏ធំមួយដែលស្ថិតនៅក្រោមឥទ្ធិពលដែលអត្រានៃការបំបែកនៃសមាសធាតុនៃល្បាយដែលបានដាក់នៅក្នុង centrifuge កើនឡើងជាច្រើនដងបើប្រៀបធៀបទៅនឹងអត្រានៃការបំបែករបស់ពួកគេនៅក្រោមសកម្មភាព។ នៃទំនាញផែនដី។
វិធីសាស្រ្ត centrifugation ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុងជីវវិទ្យា វេជ្ជសាស្ត្រ និងបច្ចេកវិទ្យា ដែលជារឿយៗជំនួសដំណើរការនៃការត្រង ការដោះស្រាយ និងការចុច។
centrifuge មានលំនៅដ្ឋាន យន្តការជំរុញ rotor អង្គជំនុំជម្រះដែលកំពុងដំណើរការ (រុំព័ទ្ធ) និងផ្ទាំងបញ្ជា។ ឧបករណ៍ centrifuges មួយចំនួនត្រូវបានបំពាក់ដោយនាឡិកាអគ្គិសនីដែលផ្តល់ការបិទដោយស្វ័យប្រវត្តិ និងហ្វ្រាំងក្នុងចន្លោះពី 5 ទៅ 60 នាទី។ ឧបករណ៍ centrifuges ពិសេសមានម៉ាស៊ីនត្រជាក់ និងម៉ាស៊ីនបូមធូលី ជាមួយនឹងឧបករណ៍តាមដាន និងគ្រប់គ្រងដោយស្វ័យប្រវត្តិ។ ផ្នែកសំខាន់នៃ centrifuge ណាមួយគឺ rotor (នៅក្នុង centrifuges មន្ទីរពិសោធន៍ វាជាធម្មតាមានទីតាំងនៅលើអ័ក្សម៉ូទ័រអេឡិចត្រិចដែលបានតំឡើងបញ្ឈរ ឬបង្វិលដោយឧបករណ៍ផ្សេងៗពីម៉ូទ័រ ពេលខ្លះសូម្បីតែដោយដៃ)។ rotor centrifuge គឺជាឌីស (ឈើឆ្កាង) ដែលមានរន្ធសម្រាប់ដៃអាវដែក ដែលក្នុងនោះបំពង់សាកល្បងត្រូវបានដាក់ ដែលយកទីតាំងផ្ដេកកំឡុងពេលបង្វិល។
ជួនកាល rotor ត្រូវបានផលិតក្នុងទម្រង់ជាកោណដែករឹងដែលមានកោសិកាសម្រាប់បំពង់សាកល្បង (rotor មុំ); បំពង់នៅក្នុងវាមានទីតាំងនៅមុំថេរទៅនឹងអ័ក្សនៃការបង្វិល (ជាធម្មតា 40 °) ។ ជាមួយនឹងទីតាំងទំនោរនៃបំពង់សាកល្បង សមាសធាតុនៃល្បាយបំបែកកាន់តែលឿន។ ការបំបែកល្បាយត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងបំពង់សាកល្បងនៃរាងនិងបរិមាណផ្សេងៗ (រូបភាពទី 1) ។ នៅពេលធ្វើការក្នុងល្បឿនលឿន បំពង់សាកល្បងដែលធ្វើពីប៉ូលីអេទីឡែនត្រូវបានប្រើ ចាប់តាំងពីកញ្ចក់ផ្ទុះ។ បំពង់សាកល្បងជាមួយនឹងសម្ភារៈដំណើរការដែលមានទីតាំងមួយទល់នឹងមួយទៀតនៅក្នុង rotor ត្រូវតែមានតុល្យភាព។ នេះផ្តល់នូវបន្ទុកឯកសណ្ឋាននៅលើ rotor shaft និងធានានូវការបង្វិលឯកសណ្ឋាននៃ centrifuge shaft ។ ដើម្បីធ្វើឱ្យមានតុល្យភាពបំពង់សាកល្បង មាត្រដ្ឋានពិសេសត្រូវបានប្រើប្រាស់ (រូបភាពទី 2) ។
អង្ករ។ 1. បំពង់សម្រាប់ centrifugation ។
អង្ករ។ 2. មាត្រដ្ឋាន centrifuge ។
ឧបករណ៍ centrifuges ដែលប្រើក្នុងឧស្សាហកម្មខុសពី centrifuges មន្ទីរពិសោធន៍ក្នុងការរចនា rotor ស្មុគស្មាញជាង ដែលធ្វើឱ្យវាអាច centrifuge បរិមាណដ៏ធំនៃសម្ភារៈក្នុងពេលតែមួយ ឬដើម្បីដំណើរការបំបែកជាបន្តបន្ទាប់។
ទឹក centrifuges ដែលមានល្បឿន rotor ទាប ត្រូវបានប្រើក្នុងថ្នាំ ដើម្បីបំបែកកំណកទឹកនោម សេរ៉ូមឈាមពីការកកឈាម កំណកឈាម erythrocyte ក្នុងការសិក្សា serological ។ល។
microcentrifuge (រូបភាពទី 4) ត្រូវបានដំណើរការដោយដៃ; បំពាក់ដោយក្បាលម៉ាស៊ីនពីរដែលអាចជំនួសបាន ដែលមួយក្នុងចំនោមនោះមានសំបុកសម្រាប់ microtubes និងត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់ភាពឆបគ្នានៃឈាម។ មួយទៀត - ជាមួយរន្ធសម្រាប់បញ្ចូលមីក្រូភីបភីតដែលបានបញ្ចប់ការសិក្សា ( hematocrit) - មានបំណងកំណត់ភាគរយនៃកោសិកាឈាម។
អង្ករ។ 3. ម៉ាស៊ីន centrifuge ដោយដៃ។
អង្ករ។ 4. Microcentrifuge ។
ឧបករណ៍ centrifuge ដោយដៃ (រូបភាពទី 3) មានដៃអាវដែក ឬផ្លាស្ទិចចំនួនបួនសម្រាប់បំពង់ 15 មីលីលីត្រ។
មន្ទីរពិសោធន៍ centrifuge គ្លីនិក TsLK-1 (រូបភាព 5, 7) មានល្បឿនបង្វិលបី (1000, 1500, 3000 rpm) ។ រ៉ូទ័រឆ្លងកាត់ត្រូវបានកែសម្រួលសម្រាប់បំពង់ centrifuge ធម្មតាចំនួន 12 ។ បរិមាណដ៏ធំបំផុតនៃសារធាតុរាវ centrifuged គឺ 150 មីលីលីត្រ។
Centrifuges ដែលមានល្បឿន rotor ខ្ពស់ នៅក្នុងករណីភាគច្រើនត្រូវបានបំពាក់ដោយ rotors ដែលអាចផ្លាស់ប្តូរបានដែលត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់បរិមាណផ្សេងគ្នានៃអង្គធាតុរាវ ហើយត្រូវបានប្រើដើម្បីបំបែកការព្យួរដ៏ល្អ។
ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាផ្ទៃតុមន្ទីរពិសោធន៍ TsLN-2 (រូបភាព 5, 2) មាន rotor មុំសម្រាប់បំពង់សាកល្បងខ្លីចំនួន 6 ដែលមានសមត្ថភាពសរុប 72 មីលីលីត្រ។ ល្បឿនបង្វិលអតិបរមា -9000 rpm ។
អង្ករ។ 5. ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាមន្ទីរពិសោធន៍ផ្សេងៗ: 1 - គ្លីនិក; 2 - ផ្ទៃតុ; 3 - ជ្រុងតូច; 4 - ស្ថានី; 5 - ទូទឹកកក។
មុំតូច centrifuge TsUM-1 (រូបភាព 5, 3) មាន rotor មុំដែលអាចផ្លាស់ប្តូរបានចំនួនបីជាមួយនឹងចំនួនផ្សេងគ្នានៃបំពង់សាកល្បង និង hematocrit: rotor សម្រាប់ 6 បំពង់សាកល្បងដែលមានសមត្ថភាពសរុប 150 មីលីលីត្រ rotor សម្រាប់ 10 បំពង់សាកល្បងជាមួយនឹងចំនួនសរុប។ សមត្ថភាព 120 មីលីលីត្រ rotor សម្រាប់ 24 បំពង់សាកល្បងដែលមានសមត្ថភាពសរុប 120 មីលីលីត្រ hematocrit សម្រាប់ capillaries ពីរ។ ល្បឿនបង្វិលអតិបរមាគឺ 10,000 rpm ។
ឧបករណ៍ centrifuge ត្រូវបានបំពាក់ដោយយន្តការនាឡិកាអគ្គិសនី។
បន្ទប់ពិសោធន៍ centrifuge ស្ថានី CLS-2 (រូបភាព 5, 4) មាន rotors ពីរដែលអាចជំនួសបាន។ Cross-rotor ត្រូវបានបំពាក់ដោយដៃអាវដែកចំនួន 4 ដែលមានសមត្ថភាព 500 មីលីលីត្រ និងបំពង់សាកល្បងកែវចំនួន 4 សម្រាប់ពួកគេដែលមានសមត្ថភាព 250 មីលីលីត្រ។ rotor angular ត្រូវបានផ្គត់ផ្គង់ជាមួយ 8 polyethylene និងបំពង់សាកល្បងដែកដែលមានសមត្ថភាព 50-75 មីលីលីត្រ។ ការបង្វិលអតិបរមានៃ rotors គឺរហូតដល់ 6000 rpm ។ ឧបករណ៍ centrifuge ត្រូវបានបំពាក់ដោយយន្តការនាឡិកាអគ្គិសនី។
ក្នុងចំណោម centrifuges ពិសេសគឺ centrifuge ត្រជាក់ក្នុងបន្ទប់ពិសោធន៍ CLR-1 (Fig ។ 5.5) ដែលមានបំណងសម្រាប់ centrifugation នៅសីតុណ្ហភាពទាប (-5 °និងខ្ពស់ជាងនេះ) នៃសារធាតុជាច្រើនដែលផ្លាស់ប្តូរសូម្បីតែនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ - ភាគច្រើនជាការផ្អាកប្រូតេអ៊ីន។ ម៉ាស៊ីន centrifuge មាន rotors ដែលអាចជំនួសបានបីដែលផ្តល់នូវរបៀប centrifugation ផ្សេងគ្នា។ រ៉ោតទ័រពីរគឺដូចគ្នាបេះបិទនៅក្នុងលក្ខណៈបច្ចេកទេសទៅនឹង rotors នៃ centrifuge ប្រភេទ TsLS-2 ដែលជា rotor ទីបីដែលត្រូវបានដាក់នៅលើអ័ក្សបន្ថែមមានការរីកចម្រើន 18,000-18,500 rpm ។ បរិមាណអតិបរមានៃថ្នាំសិក្សាគឺ 48 មីលីលីត្រ។ ឧបករណ៍ centrifuge ត្រូវបានបំពាក់ដោយយន្តការនាឡិកាអគ្គិសនី។ ការធ្វើឱ្យត្រជាក់នៃបន្ទប់ធ្វើការត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើម៉ាស៊ីនត្រជាក់។
សូមមើលផងដែរ Ultracentrifugation ។
2.5.1 ធម្មជាតិនៃជម្រាល
ដើម្បីបង្កើតជម្រាលដង់ស៊ីតេនៃដំណោះស្រាយ ដំណោះស្រាយ sucrose ត្រូវបានគេប្រើញឹកញាប់បំផុត ជួនកាលមាន pH ថេរ។ ក្នុងករណីខ្លះការបំបែកដ៏ល្អមួយត្រូវបានទទួលដោយប្រើ D 2 0 ជំនួសឱ្យទឹកធម្មតា។ 2.1 បង្ហាញពីលក្ខណៈសម្បត្តិនៃដំណោះស្រាយមួយចំនួននៃ sucrose ។
ជម្រើសនៃជម្រាលត្រូវបានកំណត់ដោយភារកិច្ចជាក់លាក់នៃប្រភាគ។ ឧទាហរណ៍ ficol ផលិតដោយ Pharmacia Fine Chemicals អាចជំនួស sucrose ក្នុងករណីដែលវាចាំបាច់ដើម្បីបង្កើតជម្រាលជាមួយនឹងដង់ស៊ីតេខ្ពស់ និងសម្ពាធ osmotic ទាប។ អត្ថប្រយោជន៍មួយទៀតនៃ ficol គឺថាវាមិនឆ្លងកាត់ភ្នាសកោសិកា។ អំបិលលោហៈធ្ងន់ដូចជា rubidium និង Cesium ត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើតជម្រាលនៃដង់ស៊ីតេខ្ពស់ ប៉ុន្តែដោយសារឥទ្ធិពលច្រេះនៃ CsCl ជម្រាលបែបនេះត្រូវបានប្រើតែនៅក្នុងរ៉ូទ័រដែលធ្វើពីលោហធាតុដែលធន់ទ្រាំ ដូចជាទីតានីញ៉ូម។
2.5.2 បច្ចេកទេសជម្រាលកម្រិតដង់ស៊ីតេជំហាន
ដើម្បីបង្កើតជម្រាលដង់ស៊ីតេ ដំណោះស្រាយជាច្រើនជាមួយនឹងការថយចុះដង់ស៊ីតេជាបន្តបន្ទាប់ត្រូវបានណែនាំដោយប្រុងប្រយ័ត្នទៅក្នុងបំពង់ centrifuge ដោយប្រើ pipette ។ បនា្ទាប់មកនៅលើស្រទាប់ខាងលើបំផុតដែលមានដង់ស៊ីតេទាបបំផុតគំរូត្រូវបានស្រទាប់ក្នុងទម្រង់ជាតំបន់តូចចង្អៀតបន្ទាប់ពីនោះបំពង់ត្រូវបាន centrifuged ។ ជម្រាលលីនេអ៊ែររលោងអាចទទួលបានដោយការធ្វើឱ្យជម្រាលតាមលំដាប់លំដោយរលូនក្នុងអំឡុងពេលឈរយូរនៃដំណោះស្រាយ។ ដំណើរការអាចត្រូវបានពន្លឿនដោយការកូរមាតិកានៃបំពង់ដោយថ្នមៗដោយខ្សែ ឬដោយអង្រួនបំពង់ថ្នមៗ។
2.5.3 បច្ចេកទេសបង្កើតជម្រាលដង់ស៊ីតេរលោង
ក្នុងករណីភាគច្រើនឧបករណ៍ពិសេសមួយត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើតជម្រាលដង់ស៊ីតេរលោង។ វាមាននាវាស៊ីឡាំងពីរដែលមានអង្កត់ផ្ចិតដូចគ្នាដែលបានកំណត់យ៉ាងតឹងរ៉ឹង ទាក់ទងគ្នាទៅវិញទៅមកនៅខាងក្រោមជាមួយនឹងបំពង់កែវដែលមានសន្ទះបិទបើកដែលអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកកែតម្រូវសមាមាត្រដែលមាតិកានៃនាវាទាំងពីរត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នា។ មួយក្នុងចំនោមពួកគេត្រូវបានបំពាក់ដោយឧបករណ៍កូរហើយមានច្រកចេញដែលដំណោះស្រាយហូរចូលទៅក្នុងបំពង់ centrifuge ។ ដំណោះស្រាយក្រាស់ត្រូវបានដាក់ក្នុងម៉ាស៊ីនលាយ; ស៊ីឡាំងទីពីរត្រូវបានបំពេញដោយដំណោះស្រាយនៃដង់ស៊ីតេទាប។ កម្ពស់នៃជួរឈរនៃដំណោះស្រាយនៅក្នុងស៊ីឡាំងទាំងពីរត្រូវបានកំណត់តាមរបៀបដែលសម្ពាធសន្ទនីយស្តាទិចនៅក្នុងពួកវាគឺដូចគ្នា។ ដំណោះស្រាយដង់ស៊ីតេត្រូវបានបញ្ចេញជាបណ្តើរៗពីឧបករណ៍លាយចូលទៅក្នុងបំពង់ centrifuge ហើយត្រូវបានជំនួសក្នុងពេលដំណាលគ្នាដោយបរិមាណស្មើគ្នានៃដំណោះស្រាយដង់ស៊ីតេទាបដែលចូលទៅក្នុងឧបករណ៍លាយពីស៊ីឡាំងទីពីរតាមរយៈសន្ទះត្រួតពិនិត្យ។ ភាពដូចគ្នានៃដំណោះស្រាយនៅក្នុងឧបករណ៍លាយត្រូវបានធានាដោយការលាយថេរនៃដំណោះស្រាយជាមួយឧបករណ៍កូរ។ នៅពេលដែលដំណោះស្រាយត្រូវបានបង្ហូរចូលទៅក្នុងបំពង់ centrifuge ដង់ស៊ីតេរបស់វាថយចុះ ហើយជម្រាលដង់ស៊ីតេលីនេអ៊ែរត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅក្នុងបំពង់។ ជម្រាលមិនលីនេអ៊ែរអាចត្រូវបានបង្កើតដោយប្រើប្រព័ន្ធដែលមានស៊ីឡាំងពីរដែលមានអង្កត់ផ្ចិតមិនស្មើគ្នា។
ដើម្បីបង្កើតជម្រាលដង់ស៊ីតេនៃភាពចោតខុសៗគ្នា ប្រព័ន្ធនៃសឺរាុំងដែលគ្រប់គ្រងដោយមេកានិកចំនួនពីរត្រូវបានប្រើ ដែលត្រូវបានបំពេញដោយដំណោះស្រាយនៃដង់ស៊ីតេមិនស្មើគ្នា។ ជម្រាលផ្សេងៗអាចត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការផ្លាស់ប្តូរល្បឿនដែលទាក់ទងនៃ pistons ។
2.5.4 ការទាញយកជម្រាលពីបំពង់ centrifuge
បន្ទាប់ពីការ centrifugation ត្រូវបានបញ្ចប់ហើយភាគល្អិតត្រូវបានបំបែកតំបន់ដែលបានបង្កើតឡើងត្រូវតែត្រូវបានយកចេញ។ នេះត្រូវបានធ្វើតាមវិធីជាច្រើន ដែលភាគច្រើនជាញឹកញាប់ដោយវិធីផ្លាស់ទីលំនៅ។ បំពង់ centrifuge ត្រូវបានទម្លុះនៅមូលដ្ឋាន ហើយឧបករណ៍ផ្ទុកក្រាស់ជាឧទាហរណ៍ ដំណោះស្រាយ sucrose 60-70% ត្រូវបានបញ្ចូលយឺតៗទៅក្នុងផ្នែកខាងក្រោមរបស់វា។ ដំណោះស្រាយលើសត្រូវបានផ្លាស់ទីលំនៅ ហើយប្រភាគត្រូវបានប្រមូលដោយប្រើសឺរាុំង បំពង់ ឬឧបករណ៍ពិសេសដែលភ្ជាប់តាមបំពង់ទៅឧបករណ៍ប្រមូលប្រភាគ។ ប្រសិនបើបំពង់ត្រូវបានផលិតពី celluloid ឬ nitrocellulose ប្រភាគត្រូវបានស្រង់ចេញដោយកាត់បំពង់ដោយប្រើ blade ពិសេស។ ដើម្បីធ្វើដូចនេះបំពង់ centrifuge ដែលត្រូវបានជួសជុលនៅក្នុងកន្លែងឈរមួយត្រូវបានកាត់ដោយផ្ទាល់នៅក្រោមតំបន់ដែលចង់បានហើយប្រភាគត្រូវបានបូមចេញជាមួយនឹងសឺរាុំងឬ pipette ។ ជាមួយនឹងការរចនាសមរម្យនៃឧបករណ៍កាត់ការបាត់បង់ដំណោះស្រាយនឹងមានតិចតួចបំផុត។ ការប្រមូលប្រភាគក៏ត្រូវបានអនុវត្តដោយការចោះមូលដ្ឋាននៃបំពង់សាកល្បងដោយម្ជុលប្រហោងស្តើង។ ដំណក់ទឹកដែលហូរចេញពីបំពង់តាមរយៈម្ជុលត្រូវបានប្រមូលនៅក្នុងឧបករណ៍ប្រមូលប្រភាគសម្រាប់ការវិភាគបន្ថែម។
2.5.5 ការរៀបចំ centrifuges និងកម្មវិធីរបស់ពួកគេ។
ឧបករណ៍ centrifuges ត្រៀមអាចត្រូវបានចាត់ថ្នាក់ជាបីក្រុមចម្បង: centrifuges គោលបំណងទូទៅ, centrifuges ល្បឿនលឿននិងការត្រៀមខ្លួន ultracentrifuges ។ គោលបំណងទូទៅ centrifuges ផ្តល់ល្បឿនអតិបរមា 6000 rpm -1 និង OCU រហូតដល់ 6000 g . ពួកវាខុសគ្នាពីគ្នាទៅវិញទៅមកតែនៅក្នុងសមត្ថភាពប៉ុណ្ណោះហើយមានរ៉ោតទ័រដែលអាចផ្លាស់ប្តូរបានមួយចំនួន: មុំនិងជាមួយវ៉ែនតាព្យួរ។ លក្ខណៈពិសេសមួយនៃប្រភេទនៃ centrifuges នេះគឺសមត្ថភាពដ៏ធំរបស់ពួកគេ - ពី 4 ទៅ 6 dm 3 ដែលអនុញ្ញាតឱ្យពួកគេផ្ទុកមិនត្រឹមតែជាមួយនឹងបំពង់ centrifuge នៃ 10.50 និង 100 សង់ទីម៉ែត្រ 3 ប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែថែមទាំងជាមួយនាវាដែលមានសមត្ថភាពរហូតដល់ 1.25 ផងដែរ។ dm ៣. នៅក្នុង centrifuges ទាំងអស់នៃប្រភេទនេះ rotors ត្រូវបានតំឡើងយ៉ាងតឹងរ៉ឹងនៅលើ drive shaft ហើយ centrifuge tubes រួមជាមួយនឹងមាតិការបស់វា ត្រូវតែមានតុល្យភាពដោយប្រុងប្រយ័ត្ន និងមានទម្ងន់ខុសគ្នាមិនលើសពី 0.25 g។ គួរតែត្រូវបានដាក់ស៊ីមេទ្រី មួយទល់នឹង ផ្សេងទៀតដូច្នេះធានាបាននូវការចែកចាយសូម្បីតែនៃបំពង់សាកល្បងទាក់ទងទៅនឹងអ័ក្សនៃការបង្វិលនៃ rotor នេះ។
ឧបករណ៍ centrifuges ល្បឿនលឿន ផ្តល់ល្បឿនអតិបរមា 25,000 rpm -1 និង OCU រហូតដល់ 89,000g ។ អង្គជំនុំជម្រះ rotor ត្រូវបានបំពាក់ដោយប្រព័ន្ធត្រជាក់ដែលការពារការឡើងកំដៅដែលកើតឡើងដោយសារតែការកកិតកំឡុងពេលបង្វិលរបស់ rotor ។ តាមក្បួនមួយ centrifuges ល្បឿនលឿនមានសមត្ថភាព 1.5 dm 3 និងត្រូវបានបំពាក់ដោយ rotors ដែលអាចជំនួសបានទាំងមុំនិងជាមួយវ៉ែនតាព្យួរ។
ការត្រៀមលក្ខណៈ ultracentrifuges ផ្តល់ល្បឿនអតិបរមារហូតដល់ 75,000 rpm -1 និងការបង្កើនល្បឿន centrifugal អតិបរមា 510,000 g . ពួកវាត្រូវបានបំពាក់ទាំងទូទឹកកក និងម៉ាស៊ីនបូមធូលី ដើម្បីការពារការឡើងកំដៅនៃ rotor ដោយសារតែការកកិតរបស់វាជាមួយនឹងខ្យល់។ rotors នៃ centrifuges បែបនេះត្រូវបានផលិតពីយ៉ាន់ស្ព័រដែលមានកម្លាំងខ្ពស់ ឬយ៉ាន់ស្ព័រទីតានីញ៉ូម។ រ៉ោតទ័រអាលុយមីញ៉ូត្រូវបានប្រើប្រាស់ជាចម្បង ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ក្នុងករណីដែលត្រូវការល្បឿនខ្ពស់ជាពិសេស រ៉ោតទ័រទីតានីញ៉ូមត្រូវបានប្រើ។ ដើម្បីកាត់បន្ថយរំញ័រដែលបណ្តាលមកពីអតុល្យភាពរបស់ rotor ដោយសារតែការបំពេញមិនស្មើគ្នានៃបំពង់ centrifuge, ultracentrifuges មាន shaft ដែលអាចបត់បែនបាន។ បំពង់ centrifuge និងមាតិការបស់វាត្រូវតែមានតុល្យភាពយ៉ាងប្រុងប្រយ័ត្នទៅនឹង 0.1 ក្រាមដែលនៅជិតបំផុត។ តម្រូវការស្រដៀងគ្នាគួរតែត្រូវបានសង្កេតឃើញនៅពេលផ្ទុក rotor នៃ centrifuges សម្រាប់គោលបំណងទូទៅ។
2.6 ការរចនានៃ rotors
2.6.1 rotors មុំនិង rotors ជាមួយធុងព្យួរ
rotors នៃ centrifuges ដែលត្រៀមរួចជាស្រេច ជាធម្មតាមានពីរប្រភេទ - មុំ និងធុងព្យួរ។ ពួកវាត្រូវបានគេហៅថា angular ដោយសារតែបំពង់ centrifuge ដែលដាក់នៅក្នុងពួកវាតែងតែនៅមុំជាក់លាក់មួយទៅនឹងអ័ក្សនៃការបង្វិល។ នៅក្នុង rotors ជាមួយនឹងវ៉ែនតាព្យួរ, បំពង់សាកល្បងត្រូវបានដំឡើងបញ្ឈរ, ហើយនៅពេលដែលបង្វិលនៅក្រោមសកម្មភាពនៃកម្លាំង centrifugal លទ្ធផល, ពួកគេបានផ្លាស់ទីទៅទីតាំងផ្ដេកមួយ; មុំនៃទំនោរទៅអ័ក្សនៃការបង្វិលគឺ 90 °។
នៅក្នុង rotors មុំ ចម្ងាយដែលធ្វើដំណើរដោយភាគល្អិតទៅកាន់ជញ្ជាំងដែលត្រូវគ្នានៃបំពង់សាកល្បងគឺតូចណាស់ ដូច្នេះហើយការ sedimentation កើតឡើងយ៉ាងឆាប់រហ័ស។ បន្ទាប់ពីបុកជញ្ជាំងបំពង់សាកល្បង ភាគល្អិតបានរអិលចុះក្រោម ហើយបង្កើតជាដីល្បាប់នៅខាងក្រោម។ ក្នុងអំឡុងពេល centrifugation លំហូរ convection កើតឡើងដែលធ្វើឱ្យមានភាពស្មុគស្មាញយ៉ាងខ្លាំងដល់ការបំបែកភាគល្អិតដែលមានលក្ខណៈសម្បត្តិ sedimentation ស្រដៀងគ្នា។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ rotors នៃការរចនាស្រដៀងគ្នាត្រូវបានប្រើដោយជោគជ័យដើម្បីបំបែកភាគល្អិតដែលអត្រា sedimentation ខុសគ្នាខ្លាំង។
នៅក្នុង rotors ជាមួយ hanging cups បាតុភូត convection ក៏ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញដែរ ប៉ុន្តែវាមិនត្រូវបានគេនិយាយខ្លាំងនោះទេ។ Convection គឺជាលទ្ធផលនៃការពិតដែលថានៅក្រោមសកម្មភាពនៃការបង្កើនល្បឿន centrifugal ភាគល្អិតបានតាំងលំនៅក្នុងទិសដៅមួយដែលមិនកាត់កែងយ៉ាងតឹងរឹងទៅនឹងអ័ក្សនៃការបង្វិលហើយដូច្នេះដូចនៅក្នុង rotors មុំ ពួកគេបានបុកជញ្ជាំងនៃបំពង់សាកល្បងហើយរុញទៅ បាត។
ឥទ្ធិពលនៃការបំប៉ោង និងការបង្វិលអាចត្រូវបានជៀសវាងក្នុងកម្រិតមួយចំនួនដោយប្រើបំពង់រាងតាមវិស័យនៅក្នុង rotors ព្យួរពែង និងដោយការលៃតម្រូវល្បឿន rotor ។ ដែលបានរាយខាងលើ វិធីសាស្រ្តនៃការ centrifugation នៅក្នុងជម្រាលដង់ស៊ីតេក៏ត្រូវបានដកហូតនូវគុណវិបត្តិផងដែរ។
2.6.2 rotors បន្ត
រ៉ោតទ័របន្តត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់ប្រភាគដែលមានល្បឿនលឿននៃបរិមាណតិចតួចនៃវត្ថុរឹងពីការព្យួរបរិមាណធំ ឧទាហរណ៍សម្រាប់ការញែកកោសិកាចេញពីប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយសារធាតុចិញ្ចឹម។ ក្នុងអំឡុងពេល centrifugation ការផ្អាកនៃភាគល្អិតត្រូវបានបន្ថែមទៅ rotor ជាបន្តបន្ទាប់; ចរន្តនៃ rotor អាស្រ័យលើលក្ខណៈនៃការរៀបចំដែលបានដាក់ហើយប្រែប្រួលពី 100 សង់ទីម៉ែត្រ 3 ទៅ 1 ឌីម 3 ក្នុង 1 នាទី។ ភាពបារម្ភនៃ rotor គឺថាវាជាអង្គជំនុំជម្រះអ៊ីសូឡង់នៃការរចនាពិសេស; ខ្លឹមសាររបស់វាមិនទាក់ទងជាមួយបរិយាកាសខាងក្រៅទេ ដូច្នេះហើយមិនត្រូវបានបំពុល ឬបាញ់ឡើយ។
2.6.3 រ៉ូទ័រ Zonal ឬ Anderson
រ៉ូទ័រ Zonal ត្រូវបានផលិតពីលោហធាតុអាលុយមីញ៉ូម ឬទីតានីញ៉ូម ដែលអាចទប់ទល់នឹងការបង្កើនល្បឿន centrifugal យ៉ាងសំខាន់។ ជាធម្មតាពួកវាមានបែហោងធ្មែញរាងស៊ីឡាំងបិទជាមួយនឹងគម្របដែលអាចដកចេញបាន។ នៅខាងក្នុងបែហោងធ្មែញនៅលើអ័ក្សរង្វិលមានបំពង់អ័ក្សដែលនៅលើក្បាលម៉ាស៊ីនជាមួយ blades ត្រូវបានដាក់នៅលើដែលបែងចែកបែហោងធ្មែញ rotor ជាបួនផ្នែក។ blades ឬ baffles មានឆានែលរ៉ាឌីកាល់ដែលតាមរយៈជម្រាលមួយត្រូវបានចាក់ពីបំពង់អ័ក្សទៅបរិមាត្រនៃ rotor នេះ។ សូមអរគុណចំពោះការរចនានៃ blades នេះ convection ត្រូវបានកាត់បន្ថយទៅអប្បបរមា។
ការបំពេញរបស់ rotor ត្រូវបានអនុវត្តកំឡុងពេលបង្វិលរបស់វាក្នុងល្បឿនប្រហែល 3000 rpm -1 ។ ជម្រាលដែលបានបង្កើតជាមុនត្រូវបានបូមចូលទៅក្នុង rotor ដោយចាប់ផ្តើមពីស្រទាប់នៃដង់ស៊ីតេទាបបំផុត ដែលត្រូវបានចែកចាយស្មើៗគ្នានៅតាមបណ្តោយបរិវេណនៃ rotor ហើយត្រូវបានសង្កត់នៅជញ្ជាំងខាងក្រៅរបស់វាកាត់កែងទៅនឹងអ័ក្សនៃការបង្វិលដោយសារតែកម្លាំង centrifugal . ជាមួយនឹងការបន្ថែមជាបន្តបន្ទាប់នៃស្រទាប់ជម្រាលដែលមានដង់ស៊ីតេខ្ពស់ ការផ្លាស់ប្តូរជាបន្តបន្ទាប់ឆ្ពោះទៅរកចំណុចកណ្តាលនៃស្រទាប់ក្រាស់តិចកើតឡើង។ បន្ទាប់ពីជម្រាលទាំងមូលត្រូវបានបូមចូលទៅក្នុង rotor វាត្រូវបានបំពេញទៅបរិមាណពេញលេញរបស់វាជាមួយនឹងដំណោះស្រាយមួយហៅថា "ខ្នើយ" ដង់ស៊ីតេគឺដូចគ្នាឬបន្តិចលើសពីដង់ស៊ីតេខ្ពស់បំផុតនៃជម្រាលដែលបានធ្វើមុន។
បន្ទាប់មកតាមរយៈបំពង់អ័ក្ស គំរូតេស្តត្រូវបានដាក់ជាស្រទាប់ , ដែលត្រូវបានផ្លាស់ទីលំនៅពីបំពង់ចូលទៅក្នុងបរិមាណនៃ rotor ដោយប្រើដំណោះស្រាយនៃដង់ស៊ីតេទាបខណៈពេលដែលបរិមាណដូចគ្នានៃ "ខ្នើយ" ត្រូវបានដកចេញពីបរិមាត្រ។ បន្ទាប់ពីនីតិវិធីទាំងអស់នេះ ល្បឿនបង្វិលរបស់ rotor ត្រូវបាននាំយកទៅល្បឿនធ្វើការ ហើយទាំង zonal-velocity ឬ zonal-isopycnic fractionation ត្រូវបានអនុវត្តសម្រាប់រយៈពេលដែលត្រូវការ។ . ការស្រង់ចេញនៃប្រភាគត្រូវបានអនុវត្តក្នុងល្បឿន rotor 3000 rpm -1 ។ ខ្លឹមសារនៃ rotor ត្រូវបានផ្លាស់ទីលំនៅដោយបន្ថែម "ខ្នើយ" ពីបរិមាត្រ ជាដំបូង ស្រទាប់ក្រាស់តិចត្រូវបានផ្លាស់ទីលំនៅ . ដោយសារតែការរចនាពិសេសនៃឆានែលអ័ក្សនៃ rotor Anderson មិនមានការលាយបញ្ចូលគ្នានៃតំបន់ក្នុងអំឡុងពេលការផ្លាស់ទីលំនៅរបស់ពួកគេ។ ជម្រាលដែលចេញត្រូវបានឆ្លងកាត់ឧបករណ៍ថតសំឡេង ឧទាហរណ៍ កោសិកា spectrophotometer ដែលមាតិកាប្រូតេអ៊ីនអាចត្រូវបានកំណត់ដោយការស្រូបយកនៅ 280 nm ឬតាមរយៈឧបករណ៍ចាប់វិទ្យុសកម្មពិសេស បន្ទាប់ពីនោះប្រភាគត្រូវបានប្រមូល។
សមត្ថភាពរបស់ rotors zonal ដែលប្រើក្នុងល្បឿនមធ្យមប្រែប្រួលពី 650 ទៅ 1600 សង់ទីម៉ែត្រ 3 ដែលធ្វើឱ្យវាអាចទទួលបានបរិមាណដ៏ច្រើននៃសម្ភារៈ។ Zonal rotors ត្រូវបានប្រើដើម្បីយកសារធាតុពុលប្រូតេអ៊ីនចេញពីការរៀបចំផ្សេងៗ និងដើម្បីញែក និងបន្សុទ្ធ mitochondria, lysosomes, polysomes និងប្រូតេអ៊ីន។
2.6.4 ការវិភាគប្រភាគកោសិការង
លក្ខណៈសម្បត្តិនៃការរៀបចំនៃភាគល្អិត subcellular ដែលទទួលបានដោយការប្រភាគអាចត្រូវបានកំណត់គុណលក្ខណៈលក្ខណៈសម្បត្តិនៃភាគល្អិតដោយខ្លួនឯងបានលុះត្រាតែការរៀបចំមិនមានសារធាតុមិនបរិសុទ្ធ។ ដូច្នេះវាតែងតែចាំបាច់ដើម្បីវាយតម្លៃភាពបរិសុទ្ធនៃការរៀបចំដែលទទួលបាន។ ប្រសិទ្ធភាពនៃភាពដូចគ្នា និងវត្តមាននៃភាពមិនបរិសុទ្ធក្នុងការរៀបចំអាចត្រូវបានកំណត់ដោយការពិនិត្យមីក្រូទស្សន៍។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ អវត្ដមាននៃភាពមិនបរិសុទ្ធដែលអាចមើលឃើញ មិនទាន់ជាភស្តុតាងដែលអាចទុកចិត្តបាននៃភាពបរិសុទ្ធរបស់ថ្នាំនោះទេ។ ដើម្បីកំណត់បរិមាណភាពបរិសុទ្ធនៃការរៀបចំដែលទទួលបាន វាត្រូវបានទទួលរងនូវការវិភាគគីមី ដែលអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកកំណត់មាតិកានៃប្រូតេអ៊ីន ឬ DNA នៅក្នុងវា ដើម្បីកំណត់សកម្មភាពអង់ស៊ីមរបស់វា ប្រសិនបើអាចធ្វើទៅបាន និងលក្ខណៈសម្បត្តិនៃប្រព័ន្ធភាពស៊ាំ។
ការវិភាគនៃការបែងចែកអង់ស៊ីមនៅក្នុងជាលិកាប្រភាគគឺផ្អែកលើគោលការណ៍ទូទៅពីរ។ ទីមួយនៃទាំងនេះគឺថាភាគល្អិតទាំងអស់នៃកោសិការងដែលបានផ្តល់ឱ្យមានសំណុំអង់ស៊ីមដូចគ្នា។ ទីពីរសន្មតថាអង់ស៊ីមនីមួយៗត្រូវបានធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៅកន្លែងជាក់លាក់មួយចំនួននៅក្នុងកោសិកា។ ប្រសិនបើទីតាំងនេះជាការពិត នោះអង់ស៊ីមអាចដើរតួជាសញ្ញាសម្គាល់សម្រាប់សរីរាង្គដែលត្រូវគ្នា៖ ឧទាហរណ៍ cytochrome oxidase និង monoamine oxidase នឹងបម្រើជាអង់ស៊ីម mitochondrial marker, acid hydrolases ជាសញ្ញាសម្គាល់ lysosome, catalase ជា peroxisome marker និង glucose-6- phosphatase - សញ្ញាសម្គាល់ភ្នាសមីក្រូ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ វាបានប្រែក្លាយថា អង់ស៊ីមមួយចំនួនដូចជា malate dehydrogenase ។ រ-glucuronidase, NADP "H-cytochrome-c-reductase ត្រូវបានធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មក្នុងប្រភាគច្រើនជាងមួយ។ ដូច្នេះជម្រើសនៃសញ្ញាសម្គាល់អង់ស៊ីមនៃប្រភាគកោសិការងនៅក្នុងករណីជាក់លាក់នីមួយៗគួរតែត្រូវបានទាក់ទងយ៉ាងយកចិត្តទុកដាក់។ ជាងនេះទៅទៀត អវត្ដមាននៃអង់ស៊ីមសម្គាល់ មិនមានន័យថាអវត្ដមាននៃសរីរាង្គដែលសមស្របទេ វាទំនងជាថាអង់ស៊ីមត្រូវបានបាត់បង់ដោយសរីរាង្គក្នុងអំឡុងពេលប្រភាគ ឬវាត្រូវបានរារាំង ឬអសកម្ម ដូច្នេះយ៉ាងហោចណាស់អង់ស៊ីមសញ្ញាសម្គាល់ពីរត្រូវបានកំណត់ជាធម្មតាសម្រាប់ប្រភាគនីមួយៗ។
|
ប្រភាគ |
កម្រិតសំឡេង, សង់ទីម៉ែត្រ" |
ការបង្កាត់ពូជទូទៅ |
Exnulation, 660 nm |
ឯកតានៃសកម្មភាពអង់ស៊ីម |
ទិន្នផលនៃសកម្មភាពជាប្រភាគ,% |
2.7 ប្រភាគដោយ centrifugation ឌីផេរ៉ង់ស្យែល
2.7.1 ការបង្ហាញលទ្ធផល
លទ្ធផលដែលទទួលបានពីការប្រភាគជាលិកាត្រូវបានបង្ហាញយ៉ាងងាយស្រួលបំផុតក្នុងទម្រង់ជាក្រាហ្វ។ ដូច្នេះនៅពេលសិក្សាការចែកចាយអង់ស៊ីមនៅក្នុងជាលិកា ទិន្នន័យត្រូវបានបង្ហាញយ៉ាងល្អបំផុតក្នុងទម្រង់ជាអ៊ីស្តូក្រាម ដែលធ្វើឱ្យវាអាចវាយតម្លៃលទ្ធផលពិសោធន៍ដោយមើលឃើញ។
សកម្មភាពអង់ស៊ីមនៃមាតិកាប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងគំរូត្រូវបានកំណត់ទាំងនៅក្នុង homogenate ដើម និងនៅក្នុងប្រភាគកោសិការងនីមួយៗដាច់ដោយឡែកដាច់ដោយឡែកពីគ្នា។ សកម្មភាពអង់ស៊ីមសរុប និងមាតិកាប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងប្រភាគមិនគួរមានភាពខុសគ្នាខ្លាំងពីតម្លៃដែលត្រូវគ្នានៅក្នុង homogenate ដើមនោះទេ។
បន្ទាប់មក សកម្មភាពអង់ស៊ីម និងមាតិកាប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងប្រភាគនីមួយៗត្រូវបានគណនាជា % នៃទិន្នផលសរុប ដោយឈរលើមូលដ្ឋាននៃអ៊ីស្តូក្រាម។ បរិមាណប្រូតេអ៊ីនដែលទាក់ទងគ្នាក្នុងប្រភាគនីមួយៗត្រូវបានរៀបចំតាមលំដាប់លំដោយតាមអ័ក្ស abscissa ក្នុងលំដាប់នៃភាពឯកោរបស់ពួកគេ ហើយសកម្មភាពជាក់លាក់ដែលទាក់ទងនៃប្រភាគនីមួយៗត្រូវបានគ្រោងតាមអ័ក្សកំណត់។ ដូច្នេះសកម្មភាពអង់ស៊ីមនៃប្រភាគនីមួយៗត្រូវបានកំណត់ពីតំបន់នៃរបារ។
2.7.2 ការវិភាគជ្រុលជ្រុល
មិនដូច centrifugation ត្រៀមរៀបចំទេ គោលបំណងគឺដើម្បីបំបែកសារធាតុ និងបន្សុទ្ធពួកវា ការវិភាគ ultracentrifugation ត្រូវបានប្រើជាចម្បងដើម្បីសិក្សាពីលក្ខណៈសម្បត្តិ sedimentation នៃ macromolecules ជីវសាស្រ្ត និងរចនាសម្ព័ន្ធផ្សេងទៀត។ ដូច្នេះនៅក្នុង centrifugation វិភាគ rotors និងប្រព័ន្ធកត់ត្រានៃការរចនាពិសេសមួយត្រូវបានប្រើ: ពួកគេអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកត្រួតពិនិត្យជាបន្តបន្ទាប់នៃ sedimentation នៃសម្ភារៈ។ ក្នុងវាល centrifugal ។
Ultracentrifuges វិភាគអាចឈានដល់ល្បឿនរហូតដល់ 70,000 rpm -1 ខណៈពេលដែលបង្កើតការបង្កើនល្បឿន centrifugal រហូតដល់ 500,000 g . rotor របស់ពួកគេជាក្បួនមានរូបរាងរាងអេលីប ហើយត្រូវបានភ្ជាប់ដោយខ្សែរទៅនឹងម៉ូទ័រ ដែលធ្វើឱ្យវាអាចផ្លាស់ប្តូរល្បឿននៃការបង្វិលរបស់ rotor បាន។ rotor បង្វិលនៅក្នុងបន្ទប់ខ្វះចន្លោះដែលបំពាក់ដោយឧបករណ៍ទូរទឹកកក និងមានកោសិកាពីរ ការវិភាគ និងតុល្យភាព ដែលត្រូវបានដំឡើងនៅក្នុង centrifuge បញ្ឈរយ៉ាងតឹងរ៉ឹង ស្របទៅនឹងអ័ក្សនៃការបង្វិល។ កោសិកាតុល្យភាពបម្រើដើម្បីធ្វើឱ្យកោសិកាវិភាគមានតុល្យភាព និងជាប្លុកដែកដែលមានប្រព័ន្ធច្បាស់លាស់។ វាក៏មានរន្ធសន្ទស្សន៍ពីរដែលមានទីតាំងនៅចម្ងាយដែលបានកំណត់យ៉ាងតឹងរឹងពីអ័ក្សនៃការបង្វិល ដោយមានជំនួយពីចម្ងាយដែលត្រូវគ្នានៅក្នុងក្រឡាវិភាគត្រូវបានកំណត់។ ក្រឡាវិភាគដែលជាធម្មតាមានទំហំ 1 សង់ទីម៉ែត្រ 3 មានរូបរាងតាមវិស័យ។ នៅពេលដែលបានដំឡើងត្រឹមត្រូវនៅក្នុង rotor ទោះបីជាបញ្ឈរក៏ដោយវាដំណើរការលើគោលការណ៍ដូចគ្នានឹង rotor ជាមួយនឹងធុងព្យួរដែលបង្កើតលក្ខខណ្ឌ sedimentation ស្ទើរតែល្អបំផុត។ នៅចុងបញ្ចប់នៃកោសិកាវិភាគមានបង្អួចដែលមានវ៉ែនតារ៉ែថ្មខៀវ។ Ultracentrifuges វិភាគត្រូវបានបំពាក់ដោយប្រព័ន្ធអុបទិកដែលអនុញ្ញាតឱ្យត្រួតពិនិត្យការ sedimentation នៃភាគល្អិតក្នុងអំឡុងពេល centrifugation ទាំងមូល។ នៅចន្លោះពេលដែលបានកំណត់ទុកជាមុន សម្ភារៈដែលលិចទឹកអាចត្រូវបានគេថតរូប។ នៅពេលដែលប្រភាគប្រូតេអ៊ីន និង DNA ការ sedimentation ត្រូវបានត្រួតពិនិត្យដោយការស្រូបចូលកាំរស្មីអ៊ុលត្រាវីយូឡេ ហើយក្នុងករណីដែលដំណោះស្រាយដែលបានសិក្សាមានសន្ទស្សន៍ចំណាំងបែរផ្សេងគ្នា ដោយប្រើប្រព័ន្ធ schlieren ឬប្រព័ន្ធជ្រៀតជ្រែក Rayleigh ។ វិធីសាស្រ្តពីរចុងក្រោយគឺផ្អែកលើការពិតដែលថានៅពេលដែលពន្លឺឆ្លងកាត់ដំណោះស្រាយថ្លាដែលមានតំបន់ដែលមានដង់ស៊ីតេខុសៗគ្នានោះពន្លឺត្រូវបានឆ្លុះបញ្ចាំងនៅព្រំដែនតំបន់។ កំឡុងពេលដីល្បាប់ ព្រំដែនមួយត្រូវបានបង្កើតឡើងរវាងតំបន់ដែលមានភាគល្អិតធ្ងន់ និងស្រាល ដែលដើរតួជាកញ្ចក់ឆ្លុះ។ ក្នុងករណីនេះ កំពូលមួយលេចឡើងនៅលើផ្លាករូបថតដែលប្រើជាឧបករណ៍ចាប់សញ្ញា។ នៅក្នុងដំណើរការនៃការ sedimentation ព្រំដែនផ្លាស់ទីហើយជាលទ្ធផលកំពូលល្បឿនដែលអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីវិនិច្ឆ័យអត្រានៃការ sedimentation នៃសម្ភារៈ។ ប្រព័ន្ធ Interferometric គឺមានភាពរសើបជាងប្រព័ន្ធ schlieren ។ កោសិកាវិភាគគឺជាផ្នែកតែមួយ ដែលត្រូវបានគេប្រើញឹកញាប់បំផុត និងពីរផ្នែកដែលត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសិក្សាប្រៀបធៀបនៃសារធាតុរំលាយ និងសារធាតុរំលាយ។
នៅក្នុងជីវវិទ្យា ការវិភាគ ultracentrifugation ត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់ទម្ងន់ម៉ូលេគុលនៃម៉ាក្រូម៉ូលេគុល ដើម្បីពិនិត្យមើលភាពបរិសុទ្ធនៃសំណាកដែលទទួលបាន និងសិក្សាពីការផ្លាស់ប្តូរទម្រង់នៃម៉ាក្រូម៉ូលេគុល។
2.8 ការអនុវត្តនៃការវិភាគ ultracentrifugation
2.8.1 ការកំណត់ទម្ងន់ម៉ូលេគុល
មានវិធីសាស្រ្តសំខាន់ៗចំនួនបីសម្រាប់កំណត់ទម្ងន់ម៉ូលេគុលដោយប្រើការវិភាគអ៊ុលត្រាហ្សេហ្វហ្គាសៈ ការកំណត់អត្រា sedimentation វិធីសាស្ត្រលំនឹង sedimentation និងវិធីសាស្រ្តប្រហាក់ប្រហែលនៃលំនឹង sedimentation។
ការកំណត់ទម្ងន់ម៉ូលេគុលដោយអត្រា sedimentation -នេះគឺជាវិធីសាស្រ្តទូទៅបំផុត។ ការផ្តោតអារម្មណ៍ត្រូវបានអនុវត្តក្នុងល្បឿនលឿន ដូច្នេះភាគល្អិតដែលដំបូងចែកចាយស្មើៗគ្នានៅទូទាំងបរិមាណ ចាប់ផ្តើមផ្លាស់ទីតាមលំដាប់តាមកាំពីចំណុចកណ្តាលនៃការបង្វិល។ រវាងផ្ទៃនៃសារធាតុរំលាយ ដែលមិនមានភាគល្អិតរួចហើយ ហើយផ្នែកនោះដែលមានផ្ទុកពួកវា ចំណុចប្រទាក់ច្បាស់លាស់មួយត្រូវបានបង្កើតឡើង។ ព្រំដែននេះផ្លាស់ទីក្នុងអំឡុងពេល centrifugation ដែលធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីកំណត់អត្រា sedimentation នៃភាគល្អិតដោយប្រើវិធីសាស្រ្តមួយខាងលើដោយចុះឈ្មោះចលនានេះនៅលើចានរូបថត។
អត្រា sedimentation ត្រូវបានកំណត់ដោយទំនាក់ទំនងដូចខាងក្រោមៈ
កន្លែងណា X - ចម្ងាយពីអ័ក្សបង្វិលគិតជាសង់ទីម៉ែត្រ
t - ពេលវេលានៅក្នុង s,
w គឺជាល្បឿនមុំក្នុង rad-s -1 ,
ស - មេគុណ sedimentation "ម៉ូលេគុល.
មេគុណ sedimentation គឺជាល្បឿនក្នុងមួយឯកតានៃការបង្កើនល្បឿន វាត្រូវបានវាស់នៅក្នុង ឯកតា Seedberg ; 1 ឯកតា Swedberg ស្មើនឹង 10 _13 s ។ តម្លៃជាលេខរបស់ s អាស្រ័យលើទម្ងន់ម៉ូលេគុល និងរូបរាងរបស់ភាគល្អិត ហើយជាលក្ខណៈតម្លៃនៃរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុល ឬ supramolecular ដែលបានផ្តល់ឱ្យ។ ឧទាហរណ៍មេគុណ sedimentation នៃ lysozyme គឺ 2.15 S; catalase មានមេគុណ sedimentation នៃ 11.35S, អនុក្រុម ribosome បាក់តេរី ពី 30 ទៅ 50S និង អនុក្រុម eukaryotic ribosome ពី 40 ទៅ 60S ។
កន្លែងណា ម គឺជាទម្ងន់ម៉ូលេគុលនៃម៉ូលេគុល រ គឺជាថេរនៃឧស្ម័ន ធ - សីតុណ្ហភាពដាច់ខាត, s - មេគុណ sedimentation នៃម៉ូលេគុល, ឃ គឺជាមេគុណនៃការសាយភាយនៃម៉ូលេគុល v - បរិមាណជាក់លាក់មួយផ្នែក ដែលអាចចាត់ទុកថាជាបរិមាណដែលកាន់កាប់ដោយមួយក្រាមនៃសារធាតុរំលាយ ទំ - ដង់ស៊ីតេនៃសារធាតុរំលាយ។
វិធីសាស្រ្តនៃតុល្យភាព sedimentation ។ការកំណត់ទម្ងន់ម៉ូលេគុលដោយវិធីនេះត្រូវបានអនុវត្តក្នុងល្បឿន rotor ទាបនៃលំដាប់ពី 7,000-8,000 rpm -1 ដូច្នេះម៉ូលេគុលដែលមានទម្ងន់ម៉ូលេគុលធំមិននៅដល់បាត។ Ultracentrifugation ត្រូវបានអនុវត្តរហូតដល់ភាគល្អិតឈានដល់លំនឹង ដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងក្រោមសកម្មភាពនៃកម្លាំង centrifugal នៅលើដៃម្ខាង និងកម្លាំងសាយភាយ ម្យ៉ាងវិញទៀត ពោលគឺរហូតដល់ភាគល្អិតឈប់ធ្វើចលនា។ បន្ទាប់មកយោងទៅតាមជម្រាលនៃការប្រមូលផ្តុំលទ្ធផល ទម្ងន់ម៉ូលេគុលនៃសារធាតុត្រូវបានគណនា "យោងតាមរូបមន្ត
កន្លែងណា រ គឺជាថេរនៃឧស្ម័ន ធ - សីតុណ្ហភាពដាច់ខាត, o - ល្បឿនមុំ, ទំ - ដង់ស៊ីតេនៃសារធាតុរំលាយ, v - បរិមាណជាក់លាក់មួយផ្នែក, ជាមួយ X និង ជាមួយ 2 គឺជាការផ្តោតអារម្មណ៍នៃសារធាតុរំលាយនៅលើចម្ងាយ ជី ជី និង r 2 ពីអ័ក្សនៃការបង្វិល។
គុណវិបត្តិនៃវិធីសាស្រ្តនេះគឺថាវាត្រូវចំណាយពេលយូរដើម្បីសម្រេចបាននូវលំនឹង sedimentation - ពីច្រើនថ្ងៃទៅជាច្រើនសប្តាហ៍ជាមួយនឹងប្រតិបត្តិការបន្តនៃ centrifuge ។
វិធីសាស្រ្តនៃការខិតទៅជិតលំនឹង sedimentation ត្រូវបានបង្កើតឡើងក្នុងគោលបំណងដើម្បីកម្ចាត់គុណវិបត្តិនៃវិធីសាស្រ្តមុន ដែលត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការវិនិយោគដ៏ធំនៃពេលវេលាដែលត្រូវការដើម្បី "បង្កើតលំនឹង។ ដោយប្រើវិធីសាស្រ្តនេះ ទម្ងន់ម៉ូលេគុលអាចត្រូវបានកំណត់នៅពេលដែលដំណោះស្រាយ centrifuged ស្ថិតនៅក្នុង ស្ថានភាពនៃវិធីសាស្រ្តឆ្ពោះទៅរកលំនឹង។ ទីមួយ ម៉ាក្រូម៉ូលេគុលត្រូវបានចែកចាយពាសពេញទំហំទាំងមូលនៃកោសិកាវិភាគឱ្យស្មើៗគ្នា បន្ទាប់មកនៅពេលដែលការ centrifugation ដំណើរការ ម៉ូលេគុលបានតាំងលំនៅ ហើយដង់ស៊ីតេនៃដំណោះស្រាយនៅក្នុងតំបន់ meniscus ថយចុះបន្តិចម្តងៗ។ ការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងដង់ស៊ីតេគឺ កត់ត្រាដោយប្រុងប្រយ័ត្ន ហើយបន្ទាប់មកដោយការគណនាស្មុគ្រស្មាញដែលពាក់ព័ន្ធនឹងអថេរមួយចំនួនធំ ទម្ងន់ម៉ូលេគុលនៃសមាសធាតុដែលបានផ្តល់ឱ្យត្រូវបានកំណត់ដោយរូបមន្ត៖
កន្លែងណា រ គឺជាថេរនៃឧស្ម័ន ធ គឺជាសីតុណ្ហភាពដាច់ខាត v - បរិមាណជាក់លាក់មួយផ្នែក, ទំ - ដង់ស៊ីតេសារធាតុរំលាយ, dcldr - ជម្រាលនៃការផ្តោតអារម្មណ៍នៃម៉ាក្រូម៉ូលេគុល g m និង g d - ចម្ងាយទៅ meniscus និងផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់រៀងគ្នា c m និង s d - ការផ្តោតអារម្មណ៍នៃ macromolecules នៅ meniscus និងនៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់រៀងគ្នា។ ម ម និង ម រ -តម្លៃនៃទម្ងន់ម៉ូលេគុលកំណត់ដោយការចែកចាយកំហាប់នៃសារធាតុនៅ meniscus និងផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់សាកល្បងរៀងៗខ្លួន។
2.8.2 ការវាយតម្លៃនៃភាពបរិសុទ្ធនៃការរៀបចំ
ការវិភាគអ៊ុលត្រាហ្សេហ្វហ្គាស ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយដើម្បីវាយតម្លៃភាពបរិសុទ្ធនៃ DNA, មេរោគ និងការរៀបចំប្រូតេអ៊ីន។ ភាពបរិសុទ្ធនៃការត្រៀមលក្ខណៈគឺពិតជាមានសារៈសំខាន់ខ្លាំងណាស់ក្នុងករណីដែលវាត្រូវបានទាមទារដើម្បីកំណត់យ៉ាងត្រឹមត្រូវនូវទម្ងន់ម៉ូលេគុលនៃម៉ូលេគុល។ ក្នុងករណីភាគច្រើន ភាពដូចគ្នានៃការរៀបចំអាចត្រូវបានវិនិច្ឆ័យដោយធម្មជាតិនៃព្រំប្រទល់ sedimentation ដោយប្រើវិធីសាស្រ្តអត្រា sedimentation: ការរៀបចំដូចគ្នាជាធម្មតាផ្តល់នូវព្រំដែនកំណត់យ៉ាងច្បាស់លាស់មួយ។ ភាពមិនបរិសុទ្ធដែលមានវត្តមាននៅក្នុងការរៀបចំលេចឡើងជាកំពូលឬស្មាបន្ថែម; ពួកគេក៏កំណត់ asymmetry នៃកំពូលមេ។
2.8.3 ការសិក្សាអំពីការផ្លាស់ប្តូរអនុលោមភាពនៅក្នុងម៉ាក្រូម៉ូលេគុល
តំបន់មួយផ្សេងទៀតនៃការអនុវត្តនៃការវិភាគ ultracentrifugation គឺការសិក្សានៃការផ្លាស់ប្តូរ conformational នៅក្នុង macromolecules ។ ជាឧទាហរណ៍ ម៉ូលេគុល DNA អាចជាខ្សែតែមួយ ឬពីរដង លីនេអ៊ែរ ឬរាងជារង្វង់។ ក្រោមឥទិ្ធពលនៃសមាសធាតុផ្សេងៗ ឬនៅសីតុណ្ហភាពកើនឡើង DNA ឆ្លងកាត់ការផ្លាស់ប្តូរទម្រង់ដែលអាចបញ្ច្រាស់បាន និងមិនអាចត្រឡប់វិញបាន ដែលអាចត្រូវបានកំណត់ដោយការផ្លាស់ប្តូរអត្រា sedimentation នៃគំរូ។ ម៉ូលេគុលកាន់តែបង្រួម មេគុណនៃការកកិតក្នុងសូលុយស្យុងកាន់តែទាប និងផ្ទុយមកវិញ៖ ការបង្រួមរបស់វាកាន់តែតិច មេគុណនៃការកកិតកាន់តែធំ ហើយជាលទ្ធផល វានឹងកាន់តែយឺត។ ដូច្នេះ ភាពខុសគ្នានៃអត្រា sedimentation នៃគំរូមួយមុន និងក្រោយផលប៉ះពាល់ផ្សេងៗលើវា ធ្វើឱ្យវាអាចរកឃើញការផ្លាស់ប្តូរ conformational កើតឡើងនៅក្នុង macromolecules ។
នៅក្នុងប្រូតេអ៊ីន allosteric ដូចជាឧទាហរណ៍ aspartate transcarbamoylase ការផ្លាស់ប្តូរទម្រង់កើតឡើងជាលទ្ធផលនៃការចងរបស់វាទៅនឹងស្រទាប់ខាងក្រោមនិង ligands តូច។ ការបែកខ្ញែកនៃប្រូតេអ៊ីនទៅជាអនុក្រុមអាចត្រូវបានបង្កឡើងដោយការព្យាបាលវាជាមួយនឹងសារធាតុដូចជា អ៊ុយ ឬ parachloromercuribenzoate ។ ការផ្លាស់ប្តូរទាំងអស់នេះអាចត្រូវបានត្រួតពិនិត្យយ៉ាងងាយស្រួលដោយប្រើការវិភាគ ultracentrifugation ។
ការបង្កើតផលិតផលបំពង់ដោយវិធីសាស្ត្រ centrifugation. នៅក្រោម centrifugationនៅក្នុងឧស្សាហកម្មសម្ភារៈសំណង់ ... ដែលផលប៉ះពាល់បែបនេះត្រូវបានអនុវត្តត្រូវបានគេហៅថា centrifugation. នៅក្នុងឧស្សាហកម្មនៃសាធារណរដ្ឋបេឡារុស្ស centrifuges ផ្ដេកត្រូវបានប្រើ ...
ការបំប្លែងភាគល្អិត
ការងារមន្ទីរពិសោធន៍ >> គីមីវិទ្យាក្រឡាបានបញ្ចេញរួចហើយដោយល្បឿនទាប centrifugationពី nucleus, mitochondria និង... ultracentrifugation លក្ខណៈពិសេសនៃប្រភេទនេះ។ centrifugationឆ្លុះបញ្ចាំងនៅក្នុងវា ... សម្រាប់យើងករណីប្រើប្រាស់ centrifugationនៅក្នុងជម្រាលដង់ស៊ីតេ sucrose, ...
ដោយប្រើ centrifuge
វគ្គសិក្សា >> ឧស្សាហកម្ម ផលិតកម្មនៅក្នុងបណ្តុំ centrifuges ប្រតិបត្តិការផ្សេងៗ centrifugation- ការផ្ទុក, ការបំបែក, ការ unloading - កើតឡើង ... បែងចែករវាងការរៀបចំនិងវិភាគ centrifugation. ជាមួយនឹងការរៀបចំ centrifugationប្រភពសម្ភារៈជីវសាស្រ្តត្រូវបានគេយក ...
