អង់ស៊ីម។ អង់ស៊ីមបាក់តេរី

អង់ស៊ីមគឺជាកាតាលីករសម្រាប់ប្រតិកម្មគីមីនៃធម្មជាតិប្រូតេអ៊ីនដែលខុសគ្នានៅក្នុងភាពជាក់លាក់នៃសកម្មភាពរបស់ពួកគេទាក់ទងនឹងកាតាលីករនៃប្រតិកម្មគីមីមួយចំនួន។ ពួកវាជាផលិតផលនៃជីវសំយោគនៃសារពាង្គកាយដីមានជីវិតទាំងអស់៖ រុក្ខជាតិឈើ និងស្មៅ ស្លែ លីចេន សារាយ មីក្រូសារពាង្គកាយ ប្រូហ្សូអា សត្វល្អិត សត្វឆ្អឹងខ្នង និងសត្វឆ្អឹងខ្នង ដែលតំណាងនៅក្នុងការកំណត់ធម្មជាតិដោយការប្រមូលផ្តុំជាក់លាក់ - biocenoses ។

ជីវសំយោគនៃអង់ស៊ីមនៅក្នុងសារពាង្គកាយមានជីវិតត្រូវបានអនុវត្តដោយសារតែកត្តាហ្សែនដែលទទួលខុសត្រូវចំពោះការបញ្ជូនបន្តពូជនៃប្រភេទមេតាប៉ូលីសនិងភាពប្រែប្រួលនៃការបន្សាំរបស់វា។ អង់ស៊ីមគឺជាឧបករណ៍ធ្វើការដែលសកម្មភាពរបស់ហ្សែនត្រូវបានដឹង។ ពួកវាបំប្លែងប្រតិកម្មគីមីរាប់ពាន់នៅក្នុងសារពាង្គកាយ ដែលនៅទីបំផុតបង្កើតការរំលាយអាហារកោសិកា។ សូមអរគុណដល់ពួកគេប្រតិកម្មគីមីនៅក្នុងរាងកាយត្រូវបានអនុវត្តក្នុងល្បឿនលឿន។

បច្ចុប្បន្ននេះមានអង់ស៊ីមជាង 900 ត្រូវបានគេស្គាល់។ ពួកគេត្រូវបានបែងចែកជា 6 ថ្នាក់សំខាន់ៗ។

1. Oxireductases ជំរុញឱ្យមានប្រតិកម្ម redox ។

2. ផ្ទេរកាតាលីករប្រតិកម្មនៃការផ្ទេរអន្តរម៉ូលេគុលនៃក្រុមគីមីផ្សេងៗ និងសំណល់។

3. Hydrolases កាតាលីករប្រតិកម្មនៃការបំបែក hydrolytic នៃចំណង intramolecular ។

4. Lyases ដែលជំរុញការបន្ថែមក្រុមទៅជាចំណងទ្វេរដង និងប្រតិកម្មបញ្ច្រាសនៃភាពអរូបីនៃក្រុមបែបនេះ។

5. Isomerases កាតាលីករប្រតិកម្ម isomerization ។

6. Ligases ដែលបំប្លែងប្រតិកម្មគីមីជាមួយនឹងការបង្កើតចំណងដោយសារ ATP (អាស៊ីតអាឌីណូស៊ីន triphosphoric) ។

នៅពេលដែលសារពាង្គកាយមានជីវិតស្លាប់ និងរលួយ អង់ស៊ីមមួយចំនួនរបស់វាត្រូវបានបំផ្លាញ ហើយខ្លះទៀតចូលទៅក្នុងដី រក្សាសកម្មភាពរបស់វា និងជំរុញឱ្យមានប្រតិកម្មគីមីក្នុងដីជាច្រើន ចូលរួមក្នុងដំណើរការនៃការបង្កើតដី និងបង្កើតសញ្ញាគុណភាពនៃដី។ ការមានកូន។ នៅក្នុងប្រភេទផ្សេងគ្នានៃដីនៅក្រោម biocenoses ជាក់លាក់ ស្មុគស្មាញអង់ស៊ីមរបស់ពួកគេត្រូវបានបង្កើតឡើង ដែលខុសគ្នានៅក្នុងសកម្មភាពនៃប្រតិកម្ម biocatalytic ។

VF Kuprevich និង TA Shcherbakova (1966) កត់សម្គាល់ថាលក្ខណៈពិសេសសំខាន់នៃស្មុគស្មាញអង់ស៊ីមដីគឺរបៀបរៀបរយនៃសកម្មភាពនៃក្រុមអង់ស៊ីមដែលមានស្រាប់ដែលត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងការពិតដែលថាសកម្មភាពដំណាលគ្នានៃអង់ស៊ីមមួយចំនួនដែលតំណាងឱ្យក្រុមផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានធានា។ ; ការបង្កើតនិងការប្រមូលផ្តុំនៃសមាសធាតុដែលមាននៅក្នុងដីលើសគឺត្រូវបានដកចេញ។ សមាសធាតុសាមញ្ញចល័តដែលកកកុញលើស (ឧទាហរណ៍ NH 3) ត្រូវបានចងជាបណ្តោះអាសន្នក្នុងមធ្យោបាយមួយឬផ្សេងទៀត ហើយត្រូវបានបញ្ជូនទៅវដ្តដែលឈានដល់ការបង្កើតសមាសធាតុស្មុគស្មាញច្រើនឬតិច។ អង់ស៊ីមស្មុគ្រស្មាញគឺជាប្រព័ន្ធគ្រប់គ្រងខ្លួនឯងដែលមានតុល្យភាព។ អតិសុខុមប្រាណ និងរុក្ខជាតិដើរតួនាទីសំខាន់ក្នុងរឿងនេះ បំពេញអង់ស៊ីមដីឥតឈប់ឈរ ដោយសារពួកវាជាច្រើនមានអាយុខ្លី។ ចំនួនអង់ស៊ីមត្រូវបានវិនិច្ឆ័យដោយប្រយោលដោយសកម្មភាពរបស់ពួកគេតាមពេលវេលា ដែលអាស្រ័យលើលក្ខណៈគីមីនៃសារធាតុប្រតិកម្ម (ស្រទាប់ខាងក្រោម អង់ស៊ីម) និងលើលក្ខខណ្ឌអន្តរកម្ម (ការប្រមូលផ្តុំសមាសធាតុ pH សីតុណ្ហភាព សមាសភាពនៃឧបករណ៍ផ្ទុក សកម្មភាពរបស់សារធាតុសកម្ម។ inhibitors ជាដើម) ។

ជំពូកនេះពិភាក្សាអំពីការចូលរួមក្នុងដំណើរការដីគីមីមួយចំនួននៃអង់ស៊ីមពីថ្នាក់នៃ hydrolases - សកម្មភាពនៃ invertase, urease, phosphatase, protease និងពីថ្នាក់នៃ oxidoreductases - សកម្មភាពនៃ catalase, peroxidase និង polyphenol oxidase ដែលមានសារៈសំខាន់ដ៏អស្ចារ្យ។ នៅក្នុងការបំប្លែងអាសូត- និងសារធាតុសរីរាង្គដែលមានផូស្វ័រ សារធាតុនៃធម្មជាតិកាបូអ៊ីដ្រាត និងនៅក្នុងដំណើរការនៃការបង្កើត humus ។ សកម្មភាពនៃអង់ស៊ីមទាំងនេះគឺជាសូចនាករសំខាន់នៃភាពមានកូនរបស់ដី។ លើសពីនេះ សកម្មភាពនៃអង់ស៊ីមទាំងនេះនៅក្នុងព្រៃ និងដីដែលអាចបង្កបង្កើនផលនៃកម្រិតផ្សេងៗនៃការដាំដុះនឹងត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយប្រើប្រាស់ដី sod-podzolic ព្រៃពណ៌ប្រផេះ និងដី sod-calcareous ជាឧទាហរណ៍។

លក្ខណៈនៃអង់ស៊ីមដី

Invertase - បំប្លែងប្រតិកម្មនៃការបំបែក hydrolytic នៃ sucrose ទៅជាបរិមាណស្មើគ្នានៃគ្លុយកូសនិង fructose ក៏ធ្វើសកម្មភាពលើកាបូអ៊ីដ្រាតផ្សេងទៀតជាមួយនឹងការបង្កើតម៉ូលេគុល fructose ដែលជាផលិតផលថាមពលសម្រាប់សកម្មភាពសំខាន់នៃអតិសុខុមប្រាណជំរុញឱ្យមានប្រតិកម្ម fructose transferase ។ ការសិក្សាដោយអ្នកនិពន្ធជាច្រើនបានបង្ហាញថាសកម្មភាពរបស់ invertase ប្រសើរជាងអង់ស៊ីមផ្សេងទៀតឆ្លុះបញ្ចាំងពីកម្រិតនៃការមានកូនរបស់ដី និងសកម្មភាពជីវសាស្រ្ត។

អ៊ុយរ៉េស - កាតាលីករប្រតិកម្មនៃការបំបែកអ៊ីដ្រូលីកនៃអ៊ុយទៅជាអាម៉ូញាក់និងកាបូនឌីអុកស៊ីត។ នៅក្នុងការតភ្ជាប់ជាមួយនឹងការប្រើប្រាស់អ៊ុយក្នុងការអនុវត្ត agronomic វាត្រូវតែត្រូវបានដោយសារក្នុងចិត្តថាសកម្មភាព urease គឺខ្ពស់ជាងនៅក្នុងដីមានជីជាតិកាន់តែច្រើន។ វាកើនឡើងនៅក្នុងដីទាំងអស់ក្នុងអំឡុងពេលនៃសកម្មភាពជីវសាស្រ្តដ៏អស្ចារ្យបំផុតរបស់ពួកគេ - ក្នុងខែកក្កដាដល់ខែសីហា។

Phosphatase (អាល់កាឡាំងនិងអាស៊ីត) - ជំរុញការបំប្លែងសារជាតិអ៊ីដ្រូលីសនៃសមាសធាតុ organophosphorus មួយចំនួនជាមួយនឹងការបង្កើត orthophosphate ។ សកម្មភាព Phosphatase គឺទាក់ទងច្រាសទៅនឹងការផ្តល់រុក្ខជាតិជាមួយនឹងផូស្វ័រដែលមាន ដូច្នេះវាអាចត្រូវបានប្រើជាសូចនាករបន្ថែមនៅពេលកំណត់តម្រូវការសម្រាប់ជីផូស្វ័រដើម្បីអនុវត្តលើដី។ សកម្មភាព phosphatase ខ្ពស់បំផុតគឺនៅក្នុង rhizosphere នៃរុក្ខជាតិ។

Proteases គឺជាក្រុមនៃអង់ស៊ីម ដោយមានការចូលរួមពីប្រូតេអ៊ីនដែលត្រូវបានបំបែកទៅជា polypeptides និងអាស៊ីតអាមីណូ បន្ទាប់មកពួកគេត្រូវបាន hydrolyzed ទៅអាម៉ូញាក់ កាបូនឌីអុកស៊ីត និងទឹក។ ក្នុងន័យនេះ proteases មានសារៈសំខាន់យ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងជីវិតរបស់ដីព្រោះវាត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងសមាសភាពនៃសមាសធាតុសរីរាង្គនិងថាមវន្តនៃទម្រង់អាសូត assimilated ដោយរុក្ខជាតិ។

Catalase - ជាលទ្ធផលនៃសកម្មភាពសកម្មរបស់វាអ៊ីដ្រូសែន peroxide ដែលជាជាតិពុលដល់សារពាង្គកាយមានជីវិតត្រូវបានបំបែកទៅជាទឹកនិងអុកស៊ីសែនដោយឥតគិតថ្លៃ។ បន្លែមានឥទ្ធិពលយ៉ាងខ្លាំងទៅលើសកម្មភាព catalase នៃដីរ៉ែ។ តាមក្បួនមួយ ដីនៅក្រោមរុក្ខជាតិដែលមានប្រព័ន្ធប្ញសជ្រាបចូលជ្រៅដ៏មានអានុភាពត្រូវបានកំណត់ដោយសកម្មភាព catalase ខ្ពស់។ លក្ខណៈពិសេសនៃសកម្មភាព catalase គឺថាវាផ្លាស់ប្តូរទម្រង់តិចតួច មានទំនាក់ទំនងបញ្ច្រាសជាមួយសំណើមដី និងទំនាក់ទំនងផ្ទាល់ជាមួយសីតុណ្ហភាព។

Polyphenol oxidase និង peroxidase - ពួកវាដើរតួយ៉ាងសំខាន់ក្នុងដំណើរការនៃការបង្កើត humus នៅក្នុងដី។ Polyphenol oxidase កាតាលីករអុកស៊ីតកម្មនៃ polyphenols ទៅ quinones នៅក្នុងវត្តមាននៃអុកស៊ីសែនបរិយាកាសដោយឥតគិតថ្លៃ។ Peroxidase ជំរុញការកត់សុីនៃសារធាតុ polyphenols នៅក្នុងវត្តមាននៃអ៊ីដ្រូសែន peroxide ឬ peroxides សរីរាង្គ។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះតួនាទីរបស់វាគឺដើម្បីធ្វើឱ្យ peroxides សកម្មព្រោះវាមានឥទ្ធិពលអុកស៊ីតកម្មខ្សោយនៅលើ phenols ។ ការ condensation បន្ថែមទៀតនៃ quinones ជាមួយនឹងអាស៊ីតអាមីណូ និង peptides អាចកើតឡើងជាមួយនឹងការបង្កើតម៉ូលេគុលអាស៊ីត humic បឋម ដែលអាចកាន់តែស្មុគស្មាញដោយសារតែការ condensation ម្តងហើយម្តងទៀត (Kononova, 1963) ។

វាត្រូវបានគេកត់សម្គាល់ (Chunderova, 1970) ថាសមាមាត្រនៃសកម្មភាពរបស់ polyphenol oxidase (S) ទៅនឹងសកម្មភាពនៃ peroxidase (D) ដែលត្រូវបានបង្ហាញជាភាគរយ () គឺទាក់ទងទៅនឹងការប្រមូលផ្តុំនៃ humus នៅក្នុងដី ដូច្នេះតម្លៃនេះគឺ ហៅថាមេគុណតាមលក្ខខណ្ឌនៃការប្រមូលផ្តុំ humus (K) ។ នៅក្នុងដីដាំដុះមិនល្អនៃ Udmurtia សម្រាប់រយៈពេលពីខែឧសភាដល់ខែកញ្ញាវាគឺ: នៅក្នុងដី soddy-podzolic - 24%, នៅក្នុងដី podzolized ព្រៃពណ៌ប្រផេះ - 26% និងនៅក្នុងដី soddy-calcareous - 29% ។

ដំណើរការអង់ស៊ីមនៅក្នុងដី

សកម្មភាព biocatalytic នៃដីគឺស្ថិតនៅក្នុងការព្រមព្រៀងគ្នាយ៉ាងសំខាន់ជាមួយនឹងកម្រិតនៃការបង្កើនរបស់ពួកគេជាមួយនឹងអតិសុខុមប្រាណ (តារាងទី 11) អាស្រ័យលើប្រភេទនៃដី និងប្រែប្រួលតាមផ្តេកហ្សែនដែលត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការផ្លាស់ប្តូរនៃមាតិកា humus ប្រតិកម្ម Red-Ox សក្តានុពល និងសូចនាករផ្សេងទៀតតាមទម្រង់។

នៅក្នុងដីព្រៃព្រហ្មចារី អាំងតង់ស៊ីតេនៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីមត្រូវបានកំណត់ជាចម្បងដោយជើងមេឃនៃការទុកដាក់សំរាមក្នុងព្រៃ និងក្នុងដីដែលអាចបង្កបង្កើនផល ដោយស្រទាប់ដែលអាចបង្កបង្កើនផល។ ទាំងនៅក្នុងដីខ្លះ និងនៅក្នុងដីផ្សេងទៀត គ្រប់ឋានានុក្រមហ្សែនដែលមិនសូវសកម្មជីវសាស្រ្តទាំងអស់ ដែលមានទីតាំងនៅក្រោមផ្តេក A ឬ A p មានសកម្មភាពអង់ស៊ីមទាប ដែលផ្លាស់ប្តូរបន្តិចក្នុងទិសដៅវិជ្ជមាននៅពេលដីត្រូវបានដាំដុះ។ បន្ទាប់ពីការអភិវឌ្ឍន៍ដីព្រៃសម្រាប់ដីបង្កបង្កើនផល សកម្មភាពអង់ស៊ីមនៃផ្តេកបង្កបង្កើនផល ធៀបនឹងការទុកដាក់សំរាមក្នុងព្រៃប្រែទៅជាថយចុះយ៉ាងខ្លាំង ប៉ុន្តែនៅពេលដែលវាដាំដុះ វាកើនឡើង ហើយនៅក្នុងប្រភេទសត្វដែលដាំដុះខ្ពស់ ខិតជិត ឬលើសពីនោះ។ នៃសំរាមព្រៃ។

11. ការប្រៀបធៀបជីវគីមី និងសកម្មភាពអង់ស៊ីមនៃដីនៅមជ្ឈិមស៊ីស-អ៊ុយរ៉ាល់ (Pukhidskaya និង Kovrigo, 1974)

លេខផ្នែក ឈ្មោះដី	ផ្តេក, ជម្រៅគំរូ, សង់ទីម៉ែត្រ	ចំនួនសរុបនៃ microorganisms, ពាន់ក្នុងមួយ 1 ក្រាម abs ។ ស្ងួត ដី (ជាមធ្យមសម្រាប់ឆ្នាំ 1962, ១៩៦៤-១៩៦៥)	សូចនាករសកម្មភាពអង់ស៊ីម (ជាមធ្យមសម្រាប់ឆ្នាំ 1969-1971)
			Invertase, គ្លុយកូស mg ក្នុង 1 ក្រាមនៃដីសម្រាប់ថ្ងៃដំបូង	Phosphatase, mg phenolphthalein ក្នុង 100 ក្រាមនៃដីរយៈពេល 1 ម៉ោង។	អ៊ុយរ៉េស, mg NH, ក្នុង 1 ក្រាមនៃដីរយៈពេល 1 ថ្ងៃ។	Catalase, មីលីលីត្រ 0 2 ក្នុង 1 ក្រាមនៃដីរយៈពេល 1 នាទី។	Polyphenol oxidase	Peroxidase
			Invertase, គ្លុយកូស mg ក្នុង 1 ក្រាមនៃដីសម្រាប់ថ្ងៃដំបូង		អ៊ុយរ៉េស, mg NH, ក្នុង 1 ក្រាមនៃដីរយៈពេល 1 ថ្ងៃ។	Catalase, មីលីលីត្រ 0 2 ក្នុង 1 ក្រាមនៃដីរយៈពេល 1 នាទី។	purpurogallin មីលីក្រាមក្នុង 100 ក្រាម។
3. Sod-medium podzolic loamy មធ្យម (ក្រោមព្រៃ)


				មិនបានកំណត់
1. Soddy មធ្យម podzolic loamy មធ្យម ដាំដុះមិនបានល្អ។


10. ព្រៃប្រផេះ podzolized loamy ធ្ងន់ ដាំដុះមិនបានល្អ។


2. Sod-carbonate, leached បន្តិច, loamy ពន្លឺ, ដាំដុះមិនបានល្អ។

សកម្មភាពនៃប្រតិកម្ម biocatalytic នៅក្នុងដីផ្លាស់ប្តូរ។ វាទាបបំផុតនៅនិទាឃរដូវ និងរដូវស្លឹកឈើជ្រុះ ហើយខ្ពស់បំផុតគឺជាធម្មតានៅខែកក្កដាដល់ខែសីហា ដែលត្រូវនឹងសក្ដានុពលនៃដំណើរទូទៅនៃដំណើរការជីវសាស្ត្រនៅក្នុងដី។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ អាស្រ័យលើប្រភេទដី និងទីតាំងភូមិសាស្រ្តរបស់វា ថាមវន្តនៃដំណើរការអង់ស៊ីមគឺខុសគ្នាខ្លាំង។

គ្រប់គ្រងសំណួរ និងកិច្ចការ

1. តើសមាសធាតុអ្វីខ្លះហៅថាអង់ស៊ីម? តើការផលិត និងសារៈសំខាន់របស់វាសម្រាប់សារពាង្គកាយមានជីវិតអ្វីខ្លះ? 2. ដាក់ឈ្មោះប្រភពនៃអង់ស៊ីមដី។ តើអង់ស៊ីមបុគ្គលមានតួនាទីអ្វីខ្លះក្នុងគីមីវិទ្យាដី? 3. ផ្តល់គំនិតនៃស្មុគស្មាញអង់ស៊ីមនៃដី និងដំណើរការរបស់វា។ 4. ផ្តល់ការពិពណ៌នាទូទៅអំពីដំណើរនៃដំណើរការអង់ស៊ីមនៅក្នុងដីព្រហ្មចារី និងដីបង្កបង្កើនផល។

សកម្មភាពអង់ស៊ីមនៃអតិសុខុមប្រាណគឺសម្បូរបែបនិងផ្លាស់ប្តូរ។ ដោយប្រើវា មនុស្សម្នាក់អាចបង្កើតមិនត្រឹមតែប្រភេទ និងប្រភេទនៃអតិសុខុមប្រាណប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែថែមទាំងកំណត់នូវការប្រែប្រួលរបស់វា (ដែលគេហៅថា biovars) ផងដែរ។ ពិចារណាអំពីលក្ខណៈសម្បត្តិអង់ស៊ីមសំខាន់ៗ និងនិយមន័យគុណភាពរបស់វា។

ការបំបែកកាបូអ៊ីដ្រាត (សកម្មភាព saccharolytic) ពោលគឺ សមត្ថភាពក្នុងការបំបែកជាតិស្ករ និងជាតិអាល់កុល polyhydric ជាមួយនឹងការបង្កើតអាស៊ីត ឬអាស៊ីត និងឧស្ម័ន ត្រូវបានសិក្សានៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយ Hiss ដែលមានផ្ទុកកាបូអ៊ីដ្រាតមួយ ឬមួយផ្សេងទៀត និងសូចនាករ។ នៅក្រោមសកម្មភាពនៃអាស៊ីតដែលបានបង្កើតឡើងកំឡុងពេលបំបែកកាបូអ៊ីដ្រាតសូចនាករផ្លាស់ប្តូរពណ៌នៃឧបករណ៍ផ្ទុក។ ដូច្នេះប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយទាំងនេះត្រូវបានគេហៅថា "ស៊េរី variegated" ។ មីក្រុបដែលមិនមានជាតិ ferment កាបូអ៊ីដ្រាតនេះលូតលាស់នៅលើឧបករណ៍ផ្ទុកដោយមិនផ្លាស់ប្តូរវា។ វត្តមាននៃឧស្ម័នត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការបង្កើតពពុះនៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយជាមួយ agar ឬដោយការប្រមូលផ្តុំរបស់វានៅក្នុង "អណ្តែត" នៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយរាវ។ "អណ្តែត" - បំពង់កែវតូចចង្អៀតដែលមានចុងបិទជិតដែលបែរមុខទៅខាងលើដែលត្រូវបានដាក់ក្នុងបំពង់សាកល្បងជាមួយឧបករណ៍ផ្ទុកមុនពេលក្រៀវ។

លើសពីនេះទៀតសកម្មភាព saccharolytic ត្រូវបានសិក្សានៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយ Endo, EMS, Ploskirev ។ មីក្រូសរីរាង្គ fermenting ស្ករទឹកដោះគោ (lactose) នៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយទាំងនេះទៅជាអាស៊ីតបង្កើតអាណានិគមពណ៌ - អាស៊ីតផ្លាស់ប្តូរពណ៌នៃសូចនាករដែលមានវត្តមាននៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុក។ អាណានិគមនៃអតិសុខុមប្រាណដែលមិន ferment lactose គឺគ្មានពណ៌។

ទឹកដោះគោជាមួយនឹងការលូតលាស់នៃអតិសុខុមប្រាណ fermenting lactose coagulates ។

ជាមួយនឹងការរីកលូតលាស់នៃអតិសុខុមប្រាណដែលបង្កើតជាអាមីឡាសនៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយដែលមានម្សៅរលាយវាត្រូវបានសម្អាត។ នេះត្រូវបានគេដឹងដោយការបន្ថែមដំណក់ពីរបីនៃដំណោះស្រាយរបស់ Lugol ទៅនឹងវប្បធម៌ - ពណ៌នៃឧបករណ៍ផ្ទុកមិនផ្លាស់ប្តូរទេ។ ម្សៅដែលមិនបានរំលាយផ្តល់ពណ៌ខៀវជាមួយនឹងដំណោះស្រាយនេះ។

លក្ខណៈសម្បត្តិ Proteolytic (ឧទាហរណ៍សមត្ថភាពក្នុងការបំបែកប្រូតេអ៊ីន polypeptides ។ ជាមួយនឹងការរីកលូតលាស់នៃអតិសុខុមប្រាណ gelatin-fermenting នៅលើឧបករណ៍ផ្ទុក gelatin មធ្យម liquefies ។ ធម្មជាតិនៃសារធាតុរាវដែលបណ្តាលមកពីអតិសុខុមប្រាណផ្សេងៗគ្នាគឺខុសគ្នា។ អតិសុខុមប្រាណដែលបំបែក casein (ប្រូតេអ៊ីនទឹកដោះគោ) បណ្តាលឱ្យមាន peptonization ទឹកដោះគោ - វាត្រូវការរូបរាងនៃ whey ។ ក្នុងអំឡុងពេលនៃការបំបែកនៃ peptones, indole, អ៊ីដ្រូសែនស៊ុលហ្វីត, អាម៉ូញាក់អាចត្រូវបានបញ្ចេញ។ ការបង្កើតរបស់ពួកគេត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយប្រើក្រដាសចង្អុលបង្ហាញ។ ក្រដាសតម្រងត្រូវបាន impregnated ជាមុនជាមួយនឹងដំណោះស្រាយជាក់លាក់, ស្ងួតហួតហែង, កាត់ចូលទៅក្នុងច្រូតតូចចង្អៀតប្រវែង 5-6 សង់ទីម៉ែត្រ, ហើយបន្ទាប់ពីការសាបព្រួសវប្បធម៌នៅលើ BCH, ដាក់នៅក្រោមឆ្នុករវាងវានិងជញ្ជាំងបំពង់សាកល្បង។ បន្ទាប់ពី incubation នៅក្នុង thermostat មួយលទ្ធផលត្រូវបានយកទៅក្នុងគណនី។ អាម៉ូញាក់ធ្វើឱ្យក្រដាស litmus ប្រែទៅជាពណ៌ខៀវ; នៅពេលដែលអ៊ីដ្រូសែនស៊ុលហ្វីតត្រូវបានបញ្ចេញនៅលើក្រដាសដែលត្រាំក្នុងដំណោះស្រាយ 20% នៃអាសេតាតនាំមុខ និងសូដ្យូមប៊ីកាកាបូណាត ស៊ុលហ្វាតនាំមុខត្រូវបានបង្កើតឡើង - ក្រដាសប្រែទៅជាខ្មៅ។ indole បណ្តាលឱ្យមានពណ៌ក្រហមនៃក្រដាសដែលត្រាំក្នុងដំណោះស្រាយនៃអាស៊ីត oxalic ។

បន្ថែមពីលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយទាំងនេះ សមត្ថភាពរបស់អតិសុខុមប្រាណក្នុងការបំបែកស្រទាប់ខាងក្រោមសារធាតុចិញ្ចឹមផ្សេងៗត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើឌីសក្រដាសដែលដាក់ជាមួយសារធាតុប្រតិកម្មមួយចំនួន (ប្រព័ន្ធសូចនាករក្រដាស "SIB") ។ ថាសទាំងនេះត្រូវបានជ្រលក់ចូលទៅក្នុងបំពង់សាកល្បងជាមួយនឹងវប្បធម៌ដែលកំពុងសិក្សា ហើយបន្ទាប់ពីរយៈពេល 3 ម៉ោងនៃការភ្ញាស់ក្នុងទែម៉ូស្ដាតនៅសីតុណ្ហភាព 37 អង្សារ ការរលាយនៃកាបូអ៊ីដ្រាត អាស៊ីតអាមីណូ ប្រូតេអ៊ីន។ល។ ត្រូវបានវិនិច្ឆ័យដោយការផ្លាស់ប្តូរពណ៌នៃថាស។ .

លក្ខណៈសម្បត្តិ hemolytic (សមត្ថភាពក្នុងការបំផ្លាញកោសិកាឈាមក្រហម) ត្រូវបានសិក្សានៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយជាមួយនឹងឈាម។ ក្នុងករណីនេះ ប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយរាវក្លាយទៅជាថ្លា ហើយតំបន់ថ្លាមួយលេចឡើងនៅជុំវិញអាណានិគមនៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយក្រាស់។ នៅពេលដែល methemoglobin ត្រូវបានបង្កើតឡើង ឧបករណ៍ផ្ទុកប្រែទៅជាពណ៌បៃតង។

ការអភិរក្សដំណាំ

វប្បធម៌ដាច់ដោយឡែក និងសិក្សា (ប្រភេទ) នៃតម្លៃសម្រាប់វិទ្យាសាស្ត្រ ឬផលិតកម្មត្រូវបានរក្សាទុកនៅក្នុងសារមន្ទីរនៃវប្បធម៌រស់នៅ។ សារមន្ទីរ All-Union មានទីតាំងនៅក្នុងវិទ្យាស្ថានស្រាវជ្រាវរដ្ឋសម្រាប់ស្តង់ដារ និងការត្រួតពិនិត្យការត្រៀមលក្ខណៈជីវសាស្ត្រវេជ្ជសាស្ត្រ ដាក់ឈ្មោះតាម V.I. L.A. Tarasevich (GISK) ។

ភារកិច្ចនៃការផ្ទុកគឺដើម្បីរក្សាលទ្ធភាពជោគជ័យនៃ microorganisms និងការពារភាពប្រែប្រួលរបស់វា។ ដើម្បីធ្វើដូចនេះវាចាំបាច់ក្នុងការចុះខ្សោយឬបញ្ឈប់ការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងកោសិកាអតិសុខុមប្រាណ។

វិធីសាស្រ្តទំនើបបំផុតមួយនៃការអភិរក្សវប្បធម៌យូរអង្វែង - lyophilization - ការស្ងួតដោយកន្លែងទំនេរពីស្ថានភាពកកអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកបង្កើតស្ថានភាពនៃចលនាដែលផ្អាក។ ការសម្ងួតត្រូវបានអនុវត្តនៅក្នុងឧបករណ៍ពិសេស។ វប្បធម៌ត្រូវបានរក្សាទុកក្នុង ampoules បិទជិតនៅសីតុណ្ហភាព 4 ° C និយមនៅ -30-70 ° C ។

ការងើបឡើងវិញនៃដំណាំស្ងួត។

ចុងនៃអំពែរត្រូវបានកំដៅយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងអណ្តាតភ្លើងរបស់ឧបករណ៍ដុត ហើយប៉ះនឹងសំឡីដែលសើមបន្តិចដោយទឹកត្រជាក់ដើម្បីឱ្យ microcracks បង្កើតនៅលើកញ្ចក់ ដែលតាមរយៈនោះខ្យល់ចូលបន្តិចម្តងៗចូលទៅក្នុងអំពែ។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះឆ្លងកាត់គែមដែលគេឱ្យឈ្មោះថានៃស្នាមប្រេះខ្យល់ត្រូវបានក្រៀវ។

កុំភ្លេចថាមានកន្លែងទំនេរនៅក្នុង ampoule បិទជិត។ ប្រសិនបើខ្យល់ចូលក្នុងវាភ្លាមៗតាមរន្ធធំ វប្បធម៌នៅក្នុងអំពែអាចត្រូវបានបាញ់ និងច្រានចេញ។

បនា្ទាប់ពីអនុញ្ញាតឱ្យខ្យល់ចូលរួច បំបែកយ៉ាងលឿនដោយប្រើ tweezers ហើយយកផ្នែកខាងលើនៃ ampoule ចេញ។ រន្ធត្រូវបានដុតស្រាល ហើយសារធាតុរំលាយ (ទំពាំងបាយជូរ ឬដំណោះស្រាយអ៊ីសូតូនិក) ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងអំពែរជាមួយនឹងបំពង់ប៉ាស្ទ័រ ឬសឺរាុំងដែលគ្មានមេរោគ។ លាយមាតិកានៃ ampoule និង inoculate នៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយ។ ការលូតលាស់របស់ដំណាំកកើតឡើងវិញក្នុងដំណាំដំបូងអាចថយចុះ។

វាក៏អាចធ្វើទៅបានផងដែរដើម្បីរក្សាទុកវប្បធម៌សម្រាប់រយៈពេលដ៏យូរនៅក្នុងអាសូតរាវ (-196 ° C) នៅក្នុងឧបករណ៍ពិសេស។

វិធីសាស្រ្តនៃការអភិរក្សរយៈពេលខ្លីនៃវប្បធម៌មានដូចខាងក្រោម: 1) ការដាំដុះបន្តបន្ទាប់គ្នា (ការផ្ទេរតាមកាលកំណត់ទៅប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយស្រស់) នៅចន្លោះពេលអាស្រ័យលើលក្ខណៈសម្បត្តិរបស់មីក្រូសរីរាង្គ លក្ខខណ្ឌមធ្យម និងការដាំដុះ។ វប្បធម៌ត្រូវបានរក្សាទុកនៅ 4 ° C រវាងការបន្តពូជ; 2) ការអភិរក្សនៅក្រោមស្រទាប់នៃប្រេង។ វប្បធម៌ត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុង agar នៅក្នុងជួរឈរកម្ពស់ 5-6 សង់ទីម៉ែត្រចាក់ជាមួយប្រេង vaseline មាប់មគ (ស្រទាប់ប្រេងប្រហែល 2 សង់ទីម៉ែត្រ) ហើយរក្សាទុកបញ្ឈរនៅក្នុងទូទឹកកក។ អាយុកាលធ្នើនៃអតិសុខុមប្រាណផ្សេងៗគ្នាគឺខុសគ្នា ដូច្នេះហើយ វប្បធម៌មួយត្រូវបានសាបព្រោះតាមកាលកំណត់ពីបំពង់សាកល្បង ដើម្បីពិនិត្យមើលលទ្ធភាពជោគជ័យរបស់វា។ 3) ការផ្ទុកនៅ -20-70 °С; 4) ការផ្ទុកនៅក្នុងបំពង់បិទជិត។ តាមតម្រូវការ សម្ភារៈដែលរក្សាទុកត្រូវបានសាបព្រួសនៅលើឧបករណ៍ផ្ទុកស្រស់។

ជំពូកទី 8. FAGI

Phages គឺជាមេរោគនៃបាក់តេរី និងមីក្រូសារពាង្គកាយមួយចំនួនទៀត។ នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌជាក់លាក់ពួកគេបណ្តាលឱ្យ lysis (ការរំលាយ) នៃម៉ាស៊ីនរបស់ពួកគេ។ សកម្មភាពរបស់ phages បង្ហាញខ្លួនវានៅក្នុងធម្មជាតិ ហើយត្រូវបានគេប្រើនៅក្នុងការអនុវត្ត។

Fig.42 Bacteriophages

ប្រវត្តិនៃការរកឃើញ និងការសិក្សារបស់ភី. នៅឆ្នាំ 1898 N. F. Gamaleya បានបង្ហាញថាការច្រោះនៃ anthrax bacilli បណ្តាលឱ្យ lysis នៃវប្បធម៌ស្រស់នៃ microorganisms ទាំងនេះ។ តម្រងបាក់តេរីខណៈពេលដែលរក្សាបាននូវសមត្ថភាពក្នុងការរំលាយវប្បធម៌ស្រស់នៃ microorganisms ។ បាតុភូតនៃ lysis នៃ microorganisms ត្រូវបានពិពណ៌នាប៉ុន្តែធម្មជាតិរបស់វាមិនត្រូវបានសិក្សាទេ។ នោះហើយជាមូលហេតុដែលកិត្តិយសនៃការរកឃើញ bacteriophage ជាកម្មសិទ្ធិរបស់អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រកាណាដា d'Herelle ។

D "Erell (1917) បានសិក្សាពីតម្រងលាមក ដែលគាត់បានយកជារៀងរាល់ថ្ងៃពីអ្នកជំងឺដែលមានជំងឺរាក ហើយបញ្ចូលទៅក្នុងបំពង់សាកល្បងជាមួយនឹងវប្បធម៌ដាំថ្មីៗនៃភ្នាក់ងារមូលហេតុនៃជំងឺនេះ។ បន្ទាប់ពី incubation នៅក្នុង thermostat វប្បធម៌បានរីកចម្រើន។ ប៉ុន្តែថ្ងៃមួយ វាមិនរីកដុះដាលទេ ប៉ុន្តែត្រូវបានរំលាយ។ វាស្របគ្នានឹងការចាប់ផ្តើមនៃការជាសះស្បើយរបស់អ្នកជំងឺ។

D "Erell បានបង្ហាញថា សមត្ថភាពក្លែងបន្លំនៃសារធាតុចម្រោះលាមកបានកើនឡើងជាមួយនឹងការឆ្លងកាត់ជាបន្តបន្ទាប់លើវប្បធម៌ថ្មីៗនៃបាក់តេរី។ ពីនេះអ្នកវិទ្យាសាស្ត្របានសន្និដ្ឋានថាវារំលាយភ្នាក់ងាររស់នៅរបស់ពួកគេឆ្លងកាត់តម្រងបាក់តេរី ពោលគឺវីរុស។ បច្ចុប្បន្ននេះ ទស្សនៈរបស់គាត់ត្រូវបានទទួលយក។ ដោយអ្នកវិទ្យាសាស្ត្រភាគច្រើន។

មេរោគបើកចំហ d "Erell ហៅថា bacteriophage-devourer នៃបាក់តេរី (ពីភាសាក្រិច phagos - លេបត្របាក់) និងបាតុភូត - bacteriophagy ។

ជាមួយនឹងការរកឃើញនៃមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង លក្ខណៈរាងកាយរបស់ phage ត្រូវបានបញ្ជាក់ ហើយ morphology របស់វាត្រូវបានសិក្សា។

របកគំហើញរបស់ d'Herelle បានទាក់ទាញចំណាប់អារម្មណ៍របស់គ្រូពេទ្យដែលបានប្រើ phages ដើម្បីព្យាបាល និងការពារជំងឺឆ្លងមួយចំនួន។ បច្ចុប្បន្ននេះ phages ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយក្នុងការអនុវត្តផ្នែកវេជ្ជសាស្រ្ត និងក្នុងការសិក្សាជីវសាស្ត្រផ្សេងៗ។ អ្នកជំនាញផ្នែកមហារីកពិសោធន៍ត្រូវបានចូលរួមនៅក្នុង phages អ្នកឯកទេសផ្នែកវិស្វកម្មហ្សែន និងបច្ចេកវិទ្យាជីវសាស្រ្ត។ល។

លក្ខណៈសម្បត្តិនៃ PHAGES

សរីរវិទ្យា Phage ។ phages ភាគច្រើនមានក្បាល និងកន្ទុយ ដូច្នេះពួកវាត្រូវបានគេប្រៀបធៀបទៅនឹង tadpoles ឬ spermatozoa ។ T-phages នៃ Escherichia coli ត្រូវបានសិក្សាច្រើនបំផុត) ។ ដំណើរការរបស់ពួកគេគឺជាស៊ីឡាំងប្រហោង (ដំបង) ដែលគ្របដណ្ដប់ដោយសំបក ហើយបញ្ចប់ដោយបន្ទះមូលដែលមានឆ្អឹងខ្នង និងសរសៃ។ ទំហំនៃ phages រូបរាងនិងទំហំនៃក្បាលប្រវែងនិងរចនាសម្ព័ន្ធនៃដំណើរការគឺខុសគ្នានៅក្នុង phages ផ្សេងគ្នា។ ឧទាហរណ៍ មាន phages ដែលមានដំណើរការដ៏វែងមួយ សំបកដែលមិនចុះកិច្ចសន្យា ហ្វាសដែលមានដំណើរការខ្លី ដោយគ្មានដំណើរការ និងសរសៃ។

សមាសធាតុគីមីនៃ phages ។ ដូចមេរោគទាំងអស់ដែរ phages ត្រូវបានផ្សំឡើងពីប្រភេទតែមួយនៃអាស៊ីត nucleic (DNA phages គឺជារឿងធម្មតាជាង) និងប្រូតេអ៊ីនមួយ។ ម៉ូលេគុលអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក បត់ជាវង់ មានទីតាំងនៅក្បាលហ្វា។ សែលនៃ phage (capsid) និងដំណើរការគឺមានលក្ខណៈប្រូតេអ៊ីន។ ការបញ្ចប់ដោយឥតគិតថ្លៃនៃដំណើរការមានផ្ទុកអង់ស៊ីម lytic ជាធម្មតា lysozyme ឬ hyaluronidase ។

អន្តរកម្មនៃ phage ជាមួយកោសិការសើបឆ្លងកាត់ដំណាក់កាលបន្តបន្ទាប់។ វដ្តទាំងមូលចំណាយពេលនៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សេងៗគ្នា phage-bacteria ពីច្រើននាទីទៅ 1-2 ម៉ោង។អនុញ្ញាតឱ្យយើងវិភាគលំដាប់នៃដំណើរការនេះដោយប្រើឧទាហរណ៍ T-even phage នៃ Escherichia coli ។

ដំណាក់កាលទី 1 - ការស្រូបយកភាគល្អិត phage លើផ្ទៃទទួលនៃកោសិកាត្រូវបានអនុវត្តដោយជំនួយពីសរសៃនៃដំណើរការកន្ទុយ។ រាប់រយ phages អាចត្រូវបាន adsorbed នៅលើកោសិកាមួយ (មួយគឺគ្រប់គ្រាន់សម្រាប់ lysis កោសិកា) ។ ការស្រូបយក Phage គឺជាក់លាក់។

ដំណាក់កាលទី II - ការជ្រៀតចូល (ការចាក់) នៃអាស៊ីត nucleic នៃ phage ចូលទៅក្នុងកោសិកាក្នុង phage ផ្សេងគ្នាកើតឡើងតាមវិធីផ្សេងគ្នា។ នៅក្នុង E. coli T-phages, spikes នៃ lamina basal មានទំនាក់ទំនងជាមួយជញ្ជាំងកោសិកា។ ដំបង "ទម្លុះ" ជញ្ជាំងកោសិកា។ អង់ស៊ីមដែលមាននៅក្នុងដំណើរការនេះ ភាគច្រើនជាញឹកញាប់ lysozyme បំផ្លាញភ្នាស cytoplasmic ។ នៅពេលដំណាលគ្នានោះស្រទាប់នៃដំណើរការចុះកិច្ចសន្យាហើយអាស៊ីត nucleic នៃ phage ត្រូវបាន "ចាក់" ចូលទៅក្នុងកោសិកាតាមរយៈឆានែលនៃដំបង។ សែលប្រូតេអ៊ីនទទេនៃ phage ("ស្រមោល") នៅតែនៅខាងក្រៅ។

ដំណាក់កាលទី III - ការបន្តពូជនៃប្រូតេអ៊ីននិងអាស៊ីត nucleic នៃ phage នៅខាងក្នុងកោសិកា។

ដំណាក់កាលទី IV - ការប្រមូលផ្តុំនិងការបង្កើតភាគល្អិត phage ចាស់ទុំ។

Fig.43 រចនាសម្ព័ន្ធនៃ phage ។

1 - ក្បាល; 2 - ឌីអិនអេ; 3 - ដំបង; 4 - ករណី; 5 - ចាន basal; 6 spikes; 7 - សរសៃកន្ទុយ។

រូបភាពទី ៤៤ ទម្រង់រូបវិទ្យា Phage ។

1 - phages ដែលមានក្បាលដំណើរការនិងស្រោមកិច្ចសន្យា; 2 - ក្បាលនិងដំណើរការដោយគ្មានកិច្ចសន្យា; 3 - ក្បាលនិងដំណើរការខ្លី; 4 - phages គ្មានកន្ទុយ; 5- ហ្វាយហ្វាយ។

ដំណាក់កាលទី V - កោសិកា lysis និងការបញ្ចេញភាគល្អិត phage ចាស់ទុំពីវា។ ជាធម្មតា ជញ្ជាំងកោសិកាប្រេះឆា និងហ្វាយថ្មីជាច្រើនរយត្រូវបានបញ្ចេញទៅក្នុងបរិស្ថាន ដែលមានសមត្ថភាពឆ្លងកោសិកាស្រស់ៗ។ លីសបែបនេះត្រូវបានគេហៅថា លីសពីខាងក្នុង។

ផ្ទុយទៅនឹង lysis ពីខាងក្នុង lysis ពីខាងក្រៅកើតឡើងនៅពេលដែល phages មួយចំនួនធំត្រូវបានស្រូបយកនៅលើកោសិកាក្នុងពេលតែមួយ។ ពួកវាបង្កើតរន្ធជាច្រើននៅក្នុងជញ្ជាំងកោសិកា ដែលតាមរយៈនោះមាតិកានៃកោសិកាហូរចេញមក។ ដូច្នេះក្នុងអំឡុងពេល lysis ពីខាងក្រៅ phage មិនកើនឡើងទេហើយចំនួននៃភាគល្អិតរបស់វាមិនកើនឡើងទេ។

យោងទៅតាមធម្មជាតិនៃសកម្មភាពលើអតិសុខុមប្រាណ phages មេរោគនិងសីតុណ្ហភាពត្រូវបានសម្គាល់។

មេរោគ phages បណ្តាលឱ្យ lysis នៃកោសិកាដែលមានមេរោគជាមួយនឹងការចេញផ្សាយចូលទៅក្នុងបរិស្ថាននៃចំនួនដ៏ច្រើននៃភាគល្អិត phage ដែលមានសមត្ថភាពនៃការឆ្លងកោសិកាថ្មី។ ក្នុងករណីនេះវប្បធម៌នៃ microorganisms ត្រូវបាន lysed ។ ឧបករណ៍ផ្ទុករាវក្លាយជាថ្លា - ការបង្កើត phagolysate កើតឡើង - ឧបករណ៍ផ្ទុកដែលចំនួន phage ជាច្រើនមានទីតាំងនៅ។ ជាមួយនឹងការអភិវឌ្ឍនៃ phage មេរោគនៅក្នុងបាក់តេរីដែលរីកលូតលាស់នៅលើឧបករណ៍ផ្ទុកក្រាស់ទាំងតំបន់តម្លាភាពនៃ lysis បន្តត្រូវបានបង្កើតឡើងឬទម្រង់ថ្លាដាច់ដោយឡែកកើនឡើង - អាណានិគម phage ។ ពួកគេត្រូវបានគេហៅថាអាណានិគមអវិជ្ជមាន (បន្ទះ) ។ អាណានិគម - phages ផ្សេងគ្នាខុសគ្នានៅក្នុងទំហំនិងរចនាសម្ព័ន្ធ។

ហ្វាហ្សេសសីតុណ្ហភាពមិន lyse កោសិកាទាំងអស់នៅក្នុងចំនួនប្រជាជនទេ។ ជាមួយនឹងមួយចំនួននៃពួកគេ phages ចូលទៅក្នុង symbiosis: អាស៊ីត nucleic នៃ phage (ហ្សែនរបស់វា) ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងក្រូម៉ូសូមកោសិកាហើយត្រូវបានគេហៅថា pro Phage ។ ក្រូម៉ូសូមតែមួយត្រូវបានបង្កើតឡើង។ កោសិកាបាក់តេរីមិនស្លាប់ទេ។ ការព្យាករណ៍ដែលបានក្លាយជាផ្នែកមួយនៃហ្សែនរបស់កោសិកាអាចត្រូវបានបញ្ជូនទៅកូនចៅដោយគ្មានដែនកំណត់ក្នុងអំឡុងពេលបន្តពូជរបស់វា ពោលគឺទៅកាន់កោសិកាថ្មី។ បាតុភូតនៃភាពស៊ីសង្វាក់គ្នានៃកោសិកាអតិសុខុមប្រាណដែលមាន phage សីតុណ្ហភាព (prophage) ត្រូវបានគេហៅថា lysogeny ហើយវប្បធម៌ដែលមាន prophage ត្រូវបានគេហៅថា lysogenic ។ ឈ្មោះនេះឆ្លុះបញ្ចាំងពីសមត្ថភាពរបស់ prophage ក្នុងការចាកចេញពីក្រូម៉ូសូមកោសិកាដោយឯកឯង ហើយការចូលទៅក្នុង cytoplasm ប្រែទៅជា phage ដ៏សាហាវ។ កោសិកាវប្បធម៌ទាំងនោះដែល phage មេរោគត្រូវបានបង្កើតឡើងស្លាប់ (lyse) នៅសល់នៅតែជា lysogenic ។

គ្រោងការណ៍នៃដំណាក់កាលសំខាន់នៃអន្តរកម្មរវាង phage និងកោសិកាបាក់តេរី។

1 - ការបញ្ចូលអាស៊ីត phage nucleic ទៅក្នុងស្មៀន; 2- វ័យក្មេង, ពូជ

phages; 3 - phages ចាស់ទុំ; 4 - ភាពឯកោនៃ phages ។

វប្បធម៌ Lysogenic មិនមានភាពខុសប្លែកគ្នានៅក្នុងលក្ខណៈសម្បត្តិជាមូលដ្ឋានរបស់ពួកគេពីវត្ថុដើមនោះទេ ប៉ុន្តែពួកវាមានភាពធន់នឹងការឆ្លងឡើងវិញជាមួយនឹង phage នៃឈ្មោះដូចគ្នា។ នៅពេលដែលវប្បធម៌ lysogenic ត្រូវបានប៉ះពាល់នឹងវិទ្យុសកម្មជ្រៀតចូល (កម្រិតជាក់លាក់ និងការប៉ះពាល់នឹងកាំរស្មីអ៊ិច កាំរស្មីលោហធាតុ) សារធាតុគីមីមួយចំនួន និងកត្តាមួយចំនួនទៀត ការផលិតនៃ phage មេរោគ និង lysis នៃកោសិកាវប្បធម៌ដោយវាកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំង។

ហ្វ្លាសសីតុណ្ហភាពអាចរំខានដល់ការផលិតមីក្រូជីវសាស្រ្ត។ ឧទាហរណ៍ ប្រសិនបើប្រភេទដែលផលិតវ៉ាក់សាំង ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិច និងសារធាតុជីវសាស្រ្តផ្សេងទៀតមានសារធាតុ lysogenic នោះ វាមានហានិភ័យដែលថា ហ្វែហ្សេ សីតុណ្ហភាពនឹងក្លាយទៅជាមេរោគ ដែលនឹងនាំទៅដល់ លីសនៃសំពាធផលិតកម្ម។

ហ្វៀសសីតុណ្ហភាពគឺជាកត្តាដ៏មានឥទ្ធិពលមួយនៅក្នុងភាពប្រែប្រួលនៃអតិសុខុមប្រាណ។ ការព្យាករណ៍អាចផ្លាស់ប្តូរលក្ខណៈសម្បត្តិមួយចំនួននៃវប្បធម៌អតិសុខុមប្រាណ ជាឧទាហរណ៍ ធ្វើឱ្យវាមានសមត្ថភាពផលិតជាតិពុល ដែលត្រូវបានគេសង្កេតឃើញក្នុងចំណោម bacilli រោគខាន់ស្លាក់ ដែលជាភ្នាក់ងារបង្កជំងឺគ្រុនក្រហម។ល។ phage អាចចាប់យកផ្នែកមួយនៃក្រូម៉ូសូមរបស់កោសិកាម៉ាស៊ីន ហើយផ្ទេរផ្នែកនៃក្រូម៉ូសូមនេះទៅកោសិកាមួយទៀត ដែល phage នឹងប្រែទៅជា prophage ម្តងទៀត ហើយកោសិកានឹងទទួលបានលក្ខណៈសម្បត្តិថ្មី។

ការចែកចាយ phages នៅក្នុងធម្មជាតិគឺគ្រប់ទីកន្លែង។ Phages ត្រូវបានគេរកឃើញនៅកន្លែងដែលមីក្រូសរីរាង្គងាយនឹងពួកវាត្រូវបានរកឃើញ៖ នៅក្នុងទឹក ដី ទឹកសំអុយ ការបញ្ចេញរបស់មនុស្ស និងសត្វ។ល។ បាក់តេរីដែលគេស្គាល់ស្ទើរតែទាំងអស់គឺជាមេនៃ phages ជាក់លាក់ចំពោះពួកវា។

ភាពធន់នៃ phages ទៅនឹងកត្តារាងកាយ និងគីមីគឺខ្ពស់ជាងទម្រង់លូតលាស់នៃម៉ាស៊ីនរបស់ពួកគេ។ Phages ទប់ទល់នឹងកំដៅរហូតដល់ .75 ° C, ស្ងួតយូរ, pH ពី 2.0 ទៅ 8.5 ។ ពួកវាមិនមានភាពរសើបចំពោះថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិច thymol chloroform និងសារធាតុមួយចំនួនទៀតដែលបំផ្លាញ microflora ដែលភ្ជាប់មកជាមួយនោះទេ។ ដូច្នេះសារធាតុទាំងនេះត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងភាពឯកោ និងការរក្សាទុកសារធាតុ phages ។ អាស៊ីត និងថ្នាំសម្លាប់មេរោគមានឥទ្ធិពលអាក្រក់ទៅលើសារធាតុ Phaages ។

ការអនុវត្តជាក់ស្តែងនៃ PHAGES

ការប្រើប្រាស់ phages គឺផ្អែកលើភាពជាក់លាក់ និងសមត្ថភាពដ៏តឹងរឹងរបស់ពួកគេក្នុងការបំផ្លាញកោសិកាអតិសុខុមប្រាណ ឬចូលទៅក្នុងភាពស៊ីសង្វាក់គ្នាជាមួយពួកគេ។

ការព្យាបាលដោយ Phage prophylaxis និង phage ការការពារនិងការព្យាបាលការឆ្លងមេរោគដោយមានជំនួយពី phage គឺផ្អែកលើការពិតដែលថានៅពេលដែល phage ជួបប្រទះនឹងធាតុបង្កជំងឺនៅក្នុងខ្លួនរបស់អ្នកជំងឺវាបំផ្លាញវា។ បច្ចុប្បន្ននេះ phages ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយក្នុងការព្យាបាល និងការពារការឆ្លងមេរោគ staphylococcal និង streptococcal សូម្បីតែថ្នាំដែលមិនមានលទ្ធភាពសម្រាប់ថ្នាំអង់ទីប៊ីយោទិច ក៏ដូចជាជំងឺអាសន្នរោគ ប៉េស្ត និងការឆ្លងមេរោគមួយចំនួនទៀត ដូចជាការឆ្លងមេរោគដែលបណ្តាលមកពី Escherichia coli និង Proteus ។

ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ Phage រួមមាន: ក) ការកំណត់អត្តសញ្ញាណនៃវប្បធម៌ដាច់ស្រយាលដោយប្រើប្រាស់ PHages ដែលគេស្គាល់ (រោគវិនិច្ឆ័យ) ។ វប្បធម៌ត្រូវគ្នាទៅនឹង phage ដែលកុហកវា។ ឧទាហរណ៍ប្រសិនបើជំងឺអាសន្នរោគ phage បណ្តាលឱ្យ lysis នោះនេះគឺជាវប្បធម៌នៃជំងឺអាសន្នរោគ vibrio ។ ភាពជាក់លាក់ដ៏តឹងរឹងនៃ phages ធម្មតាធ្វើឱ្យវាអាចវាយបញ្ចូលវ៉ារ្យ៉ង់នៅក្នុងប្រភេទមួយ (fagovars) ។ ការវាយអក្សរ Phage គឺមានសារៈសំខាន់យ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងរោគរាតត្បាតព្រោះវាអាចបង្កើតប្រភពនៃការឆ្លងមេរោគ និងដោះស្រាយបញ្ហាមួយចំនួនផ្សេងទៀត។ ខ) ការកំណត់អត្តសញ្ញាណ phage មិនស្គាល់ដោយវប្បធម៌សាកល្បងនៃអតិសុខុមប្រាណ។ ប្រសិនបើ phage lyzes វប្បធម៌នៃភ្នាក់ងារមូលហេតុនៃជំងឺមួល, បន្ទាប់មកនេះគឺជា phage មួល; គ) វិធីសាស្ត្រធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យដែលពន្លឿនដោយប្រើប្រតិកម្មបង្កើន RNTF phage titer មិនតម្រូវឱ្យមានភាពឯកោនៃវប្បធម៌សុទ្ធនៃធាតុបង្កជំងឺនោះទេ។ សម្ភារៈធ្វើតេស្ត (ពីអ្នកជំងឺឬពីវត្ថុបរិស្ថាន) និងសូចនាករ phage ដែលជា titer ដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងយ៉ាងតឹងរ៉ឹងត្រូវបានបន្ថែមទៅទំពាំងបាយជូរ។

Temperate phages ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយក្នុងការដោះស្រាយបញ្ហាសំខាន់ៗនៃជីវវិទ្យា។ ដោយមានជំនួយរបស់ពួកគេ លេខកូដហ្សែនត្រូវបានសិក្សា ជោគជ័យដ៏អស្ចារ្យត្រូវបានសម្រេចក្នុងវិស្វកម្មហ្សែន ពួកវាត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាពីការលូតលាស់ដុំសាច់ ជាកត្តានៃភាពប្រែប្រួលនៃអតិសុខុមប្រាណ និងក្នុងការសិក្សាផ្សេងៗទៀត។ ចាប់តាំងពីវប្បធម៌ lysogenic ផ្ទុយទៅនឹងវប្បធម៌ "មានសុខភាពល្អ" មានភាពរសើបទៅនឹងវិទ្យុសកម្មពួកគេបម្រើដើម្បីកំណត់ភាពជឿជាក់នៃការការពារយានអវកាសពីកាំរស្មីលោហធាតុ: ជាមួយនឹងការការពារដែលមិនគួរឱ្យទុកចិត្តការព្យាករណ៍បានឆ្លងចូលទៅក្នុងទម្រង់ដ៏សាហាវនិងធ្វើឱ្យវប្បធម៌។

ការរៀបចំ PHAGE

នៅក្នុងការផលិតការត្រៀមលក្ខណៈ phage ប្រភេទ microorganisms និង phages ដែលបានសិក្សាយ៉ាងល្អត្រូវបានគេប្រើដែលជាធម្មតាត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុងរ៉េអាក់ទ័រដែលធ្វើឱ្យវាអាចទទួលបានបរិមាណដ៏ច្រើននៃ phagolysate ។

Phages ត្រូវបានផលិតជាទម្រង់រាវ (ampoules និង vials) ក្នុងគ្រាប់ និងថ្នាំគ្រាប់។ ថ្នាំ Phage ដែលមានបំណងសម្រាប់ការគ្រប់គ្រងមាត់ត្រូវបានស្រោបដោយថ្នាំកូតធន់នឹងអាស៊ីត ដែលការពារ phages ពីសកម្មភាពនៃអាស៊ីត hydrochloric ក្រពះ។

ការត្រៀមលក្ខណៈ phage ទាំងអស់គឺស្ថិតនៅក្រោមការត្រួតពិនិត្យជាកាតព្វកិច្ចសម្រាប់អវត្តមាននៃរុក្ខជាតិបរទេស ភាពគ្មានគ្រោះថ្នាក់ និងសកម្មភាព (titer) ដែលត្រូវបានអនុវត្តនៅរោងចក្រផលិតដែលផលិតពួកវា។ ការត្រួតពិនិត្យជ្រើសរើសត្រូវបានអនុវត្តនៅវិទ្យាស្ថានស្រាវជ្រាវរដ្ឋសម្រាប់ស្តង់ដារនិងការត្រួតពិនិត្យនៃការត្រៀមលក្ខណៈជីវសាស្ត្រវេជ្ជសាស្រ្តដែលមានឈ្មោះតាម V.I. L.A. តារ៉ាសេវិច។ phage ដែលត្រូវបានចេញផ្សាយត្រូវបានផ្តល់ជូនជាមួយនឹងស្លាកដែលបង្ហាញថា: ស្ថាប័នដែលផលិតវា ឈ្មោះ phage ស៊េរី លេខត្រួតពិនិត្យ និងកាលបរិច្ឆេទផុតកំណត់។ កញ្ចប់នីមួយៗត្រូវបានផ្គត់ផ្គង់ជាមួយនឹងការណែនាំសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ និងការផ្ទុក phage ។

សកម្មភាពអង់ស៊ីម។នៅក្រោម សកម្មភាពអង់ស៊ីម យល់ពីបរិមាណរបស់វា ដែលជំរុញការផ្លាស់ប្តូរនៃចំនួនជាក់លាក់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមក្នុងមួយឯកតានៃពេលវេលា។ ដើម្បីបង្ហាញពីសកម្មភាពនៃការត្រៀមអង់ស៊ីម ឯកតាជំនួសពីរត្រូវបានប្រើ៖ អន្តរជាតិ (IU) និងកាតាល់ (ឆ្មា)។ នៅខាងក្រោយ អង្គភាពសកម្មភាពអន្តរជាតិ បរិមាណអង់ស៊ីមដែលបានយកគឺវាជំរុញការបំប្លែង 1 μmol នៃស្រទាប់ខាងក្រោមទៅក្នុងផលិតផលក្នុងរយៈពេល 1 នាទីក្រោមលក្ខខណ្ឌស្តង់ដារ (ជាធម្មតាល្អបំផុត)។ មួយរមៀល បង្ហាញពីបរិមាណនៃអង់ស៊ីមដែលជំរុញការបំប្លែង 1 mol នៃស្រទាប់ខាងក្រោមក្នុង 1 s (1 cat = 6 ∙ 10 7 IU) ។ នៅក្នុងប្រតិកម្ម bimolecular A + B = C + D ឯកតាសកម្មភាពអង់ស៊ីមមួយត្រូវបានគេយកជាបរិមាណដែលជំរុញការបំប្លែង 1 µmol A ឬ B ឬ 2 µmol A (ប្រសិនបើ B = A) រយៈពេល 1 នាទី។

ជារឿយៗការត្រៀមលក្ខណៈអង់ស៊ីមត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយសកម្មភាពជាក់លាក់ដែលឆ្លុះបញ្ចាំងពីកម្រិតនៃការបន្សុតអង់ស៊ីម។ សកម្មភាពជាក់លាក់ គឺជាចំនួនឯកតានៃសកម្មភាពអង់ស៊ីមក្នុង 1 មីលីក្រាមនៃប្រូតេអ៊ីន។

សកម្មភាពម៉ូលេគុល (ចំនួននៃការផ្លាស់ប្តូរអង់ស៊ីម) គឺជាចំនួននៃម៉ូលេគុលស្រទាប់ខាងក្រោមដែលត្រូវបានបំប្លែងដោយម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមមួយក្នុងរយៈពេល 1 នាទី នៅពេលដែលអង់ស៊ីមត្រូវបានឆ្អែតទាំងស្រុងជាមួយនឹងស្រទាប់ខាងក្រោម។ វាស្មើនឹងចំនួនឯកតានៃសកម្មភាពអង់ស៊ីមដែលបែងចែកដោយបរិមាណអង់ស៊ីមដែលបង្ហាញជាមីក្រូម៉ូល។ គំនិតនៃសកម្មភាពម៉ូលេគុលគឺអាចអនុវត្តបានតែចំពោះអង់ស៊ីមសុទ្ធប៉ុណ្ណោះ។

នៅពេលដែលចំនួននៃមជ្ឈមណ្ឌលសកម្មនៅក្នុងម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមត្រូវបានគេស្គាល់ គំនិតត្រូវបានណែនាំ សកម្មភាពកន្លែងកាតាលីករ . វាត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយចំនួននៃម៉ូលេគុលស្រទាប់ខាងក្រោមដែលឆ្លងកាត់ការផ្លាស់ប្តូរក្នុងរយៈពេល 1 នាទីក្នុងមួយមជ្ឈមណ្ឌលសកម្មមួយ។

សកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីមពឹងផ្អែកយ៉ាងខ្លាំងទៅលើលក្ខខណ្ឌខាងក្រៅ ដែលក្នុងនោះសីតុណ្ហភាព និង pH របស់ឧបករណ៍ផ្ទុកមានសារៈសំខាន់បំផុត។ ការកើនឡើងនៃសីតុណ្ហភាពក្នុងចន្លោះពី 0-50°C ជាធម្មតានាំទៅរកការកើនឡើងបន្តិចម្តងៗនៃសកម្មភាពអង់ស៊ីម ដែលត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងការបង្កើនល្បឿននៃដំណើរការនៃការបង្កើតអង់ស៊ីមស្រទាប់ខាងក្រោម និងព្រឹត្តិការណ៍ជាបន្តបន្ទាប់ទាំងអស់នៃកាតាលីករ។ សម្រាប់រាល់ការកើនឡើងសីតុណ្ហភាព 10°C អត្រានៃប្រតិកម្មនឹងកើនឡើងទ្វេដង (ច្បាប់របស់ Van't Hoff)។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយ ការកើនឡើងបន្ថែមទៀតនៃសីតុណ្ហភាព (> 50 ° C) ត្រូវបានអមដោយការកើនឡើងនៃបរិមាណអង់ស៊ីមអសកម្មដោយសារតែការ denaturation នៃផ្នែកប្រូតេអ៊ីនរបស់វា ដែលត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងការថយចុះនៃសកម្មភាព។ អង់ស៊ីមនីមួយៗត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈ សីតុណ្ហភាពល្អបំផុត- តម្លៃសីតុណ្ហភាពដែលសកម្មភាពដ៏អស្ចារ្យបំផុតរបស់វាត្រូវបានកត់ត្រា។

ការពឹងផ្អែកនៃសកម្មភាពអង់ស៊ីមលើតម្លៃ pH នៃឧបករណ៍ផ្ទុកគឺស្មុគស្មាញ។ អង់ស៊ីមនីមួយៗមានរបស់វា។ pH ល្អបំផុត បរិស្ថានដែលវាសកម្មបំផុត។ នៅពេលអ្នកផ្លាស់ទីឆ្ងាយពីតម្លៃនេះក្នុងទិសដៅមួយឬមួយផ្សេងទៀត សកម្មភាពអង់ស៊ីមថយចុះ។ នេះគឺដោយសារតែការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងស្ថានភាពនៃមជ្ឈមណ្ឌលសកម្មនៃអង់ស៊ីម (ការថយចុះឬការកើនឡើងនៃអ៊ីយ៉ូដនៃក្រុមមុខងារ) ក៏ដូចជារចនាសម្ព័ន្ធទីបីនៃម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនទាំងមូលដែលអាស្រ័យលើសមាមាត្រនៃមជ្ឈមណ្ឌល cationic និង anionic ។ នៅក្នុងវា។ អង់ស៊ីមភាគច្រើនមាន pH ល្អបំផុតក្នុងជួរអព្យាក្រឹត។ ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយមានអង់ស៊ីមដែលបង្ហាញពីសកម្មភាពអតិបរមានៅ pH 1.5 (pepsin) ឬ 9.5 (arginase) ។ នៅពេលធ្វើការជាមួយអង់ស៊ីម pH ត្រូវតែរក្សាជាមួយនឹងដំណោះស្រាយសតិបណ្ដោះអាសន្នសមស្រប។

សកម្មភាពអង់ស៊ីមអាចប្រែប្រួលយ៉ាងសំខាន់អាស្រ័យលើការប៉ះពាល់ ថ្នាំទប់ស្កាត់(សារធាតុដែលកាត់បន្ថយសកម្មភាពដោយផ្នែក ឬទាំងស្រុង) និង ភ្នាក់ងារសកម្ម(សារធាតុដែលបង្កើនសកម្មភាព) ។ តួនាទីរបស់ពួកគេត្រូវបានលេងដោយ cations ដែក, anions មួយចំនួន, នាវានៃក្រុមផូស្វាត, កាត់បន្ថយសមមូល, ប្រូតេអ៊ីនជាក់លាក់, ផលិតផលកម្រិតមធ្យមនិងចុងក្រោយនៃការរំលាយអាហារ, ល។

គោលការណ៍នៃ kinetics អង់ស៊ីម។ខ្លឹមសារនៃការសិក្សា kinetic គឺដើម្បីកំណត់អត្រាអតិបរមានៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីម ( វ max) និង Michaelis constant K M. Enzymatic kinetics សិក្សាពីអត្រានៃការបំប្លែងបរិមាណនៃសារធាតុមួយចំនួនទៅជាសារធាតុផ្សេងទៀតក្រោមសកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីម។ អត្រានៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីមត្រូវបានវាស់ដោយការបាត់បង់ស្រទាប់ខាងក្រោម ឬការកើនឡើងនៃផលិតផលលទ្ធផលក្នុងមួយឯកតានៃពេលវេលា ឬដោយការផ្លាស់ប្តូរកំហាប់នៃទម្រង់ coenzyme មួយនៅជាប់គ្នា។

ឥទ្ធិពល កំហាប់អង់ស៊ីមនៅលើអត្រាប្រតិកម្មត្រូវបានបង្ហាញដូចខាងក្រោម: ប្រសិនបើកំហាប់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមគឺថេរ (សន្មត់ថាលើសពីស្រទាប់ខាងក្រោម) នោះអត្រាប្រតិកម្មគឺសមាមាត្រទៅនឹងកំហាប់នៃអង់ស៊ីម។ សម្រាប់ការសិក្សា kinetic កំហាប់អង់ស៊ីម 10-8 M នៃមជ្ឈមណ្ឌលសកម្មត្រូវបានប្រើប្រាស់។ តម្លៃល្អបំផុតនៃការប្រមូលផ្តុំអង់ស៊ីមត្រូវបានកំណត់ពីក្រាហ្វនៃការពឹងផ្អែកនៃសកម្មភាពអង់ស៊ីមលើការប្រមូលផ្តុំរបស់វា។ តម្លៃល្អបំផុតត្រូវបានគេចាត់ទុកថាស្ថិតនៅលើខ្ពង់រាបនៃក្រាហ្វដែលទទួលបានក្នុងជួរនៃតម្លៃសកម្មភាពអង់ស៊ីមដែលអាស្រ័យតិចតួចលើការប្រមូលផ្តុំរបស់វា (រូបភាព 4.3) ។

អង្ករ។ ៤.៣. ការពឹងផ្អែកនៃអត្រានៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីម

នៅលើកំហាប់អង់ស៊ីម

ដើម្បីសិក្សាឥទ្ធិពល ការផ្តោតអារម្មណ៍នៃស្រទាប់ខាងក្រោមនៅលើអត្រានៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីម ដំបូងត្រូវបង្កើតខ្សែកោង kinetic ដែលឆ្លុះបញ្ចាំងពីការផ្លាស់ប្តូរកំហាប់នៃស្រទាប់ខាងក្រោម (S 1) ឬផលិតផល (P 1) ក្នុងរយៈពេល (រូបភាព 4.4) និងវាស់អត្រាដំបូង ( វ 1) ប្រតិកម្មជាតង់សង់នៃជម្រាលនៃតង់សង់ទៅខ្សែកោងនៅចំណុចសូន្យ។

អង្ករ។ ៤.៤. ខ្សែកោង Kinetic នៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីម

តាមរយៈការសាងសង់ខ្សែកោង kinetic សម្រាប់ការប្រមូលផ្តុំផ្សេងទៀតនៃស្រទាប់ខាងក្រោមដែលបានផ្តល់ឱ្យ (S 2 , S 3 , S 4 , ល។ ) ឬផលិតផល (P 2 , P 3 , P 4 ។ វ 2, វ 3 , វ 4 ។

អង្ករ។ ៤.៥. ការពឹងផ្អែកលើអត្រាដំបូងនៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីម

ពីការប្រមូលផ្តុំស្រទាប់ខាងក្រោម

kinetics នៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីមជាច្រើនត្រូវបានពិពណ៌នាដោយសមីការ Michaelis-Menten ។ នៅកំហាប់អង់ស៊ីមថេរនិង ការប្រមូលផ្តុំស្រទាប់ខាងក្រោមទាប[S] អត្រាប្រតិកម្មដំបូងគឺសមាមាត្រដោយផ្ទាល់ទៅនឹង [S] (រូបភាព 4.5) ។ ក្នុងករណីនេះ យើងនិយាយអំពីការឆ្អែតពាក់កណ្តាលនៃអង់ស៊ីមជាមួយនឹងស្រទាប់ខាងក្រោម នៅពេលដែលពាក់កណ្តាលនៃម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមស្ថិតនៅក្នុងទម្រង់នៃស្មុគស្មាញអង់ស៊ីម-ស្រទាប់ខាងក្រោម និងអត្រាប្រតិកម្ម។ វ = 1/2វអតិបរមា ទាក់ទងទៅនឹងស្រទាប់ខាងក្រោម ប្រតិកម្មមានលំដាប់ទី 1 (អត្រាប្រតិកម្មគឺសមាមាត្រដោយផ្ទាល់ទៅនឹងកំហាប់នៃសារធាតុប្រតិកម្មមួយ) ឬលំដាប់ទី 2 (អត្រាប្រតិកម្មគឺសមាមាត្រទៅនឹងផលិតផលនៃការប្រមូលផ្តុំនៃប្រតិកម្មទាំងពីរ) ។

នៅ តម្លៃខ្ពស់។ ការផ្តោតអារម្មណ៍នៃស្រទាប់ខាងក្រោម[S] អត្រាប្រតិកម្មគឺស្ទើរតែឯករាជ្យនៃ [S]៖ ជាមួយនឹងការកើនឡើងបន្ថែមទៀតនៅក្នុង [S] អត្រាប្រតិកម្មនឹងកើនឡើងយឺតៗ ហើយនៅទីបំផុតក្លាយជាថេរ (អតិបរមា) (រូបភាព 4.5)។ ក្នុងករណីនេះ ការតិត្ថិភាពពេញលេញនៃអង់ស៊ីមជាមួយនឹងស្រទាប់ខាងក្រោមត្រូវបានសម្រេច នៅពេលដែលម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមទាំងអស់ស្ថិតក្នុងទម្រង់នៃស្មុគស្មាញអង់ស៊ីម និងស្រទាប់ខាងក្រោម។ វ = វអតិបរមា ទាក់ទងទៅនឹងស្រទាប់ខាងក្រោម ប្រតិកម្មមានលំដាប់ទី 0 (អត្រាប្រតិកម្មមិនអាស្រ័យលើកំហាប់នៃសារធាតុប្រតិកម្មទេ)។

នៅឆ្នាំ 1913 L. Michaelis និង M. Menten បានស្នើគំរូសាមញ្ញមួយដើម្បីពន្យល់អំពី kinetics បែបនេះ។ យោងតាមគំរូនេះ ការបង្កើតស្មុគស្មាញអង់ស៊ីម-ស្រទាប់ខាងក្រោមជាក់លាក់ គឺជាជំហានមធ្យមចាំបាច់ក្នុងកាតាលីករ។

k 1 k 3

E + S ⇄ ES → E + P

អង់ស៊ីម E រួមបញ្ចូលគ្នាជាមួយស្រទាប់ខាងក្រោម S ដើម្បីបង្កើតជាស្មុគស្មាញ ES ។ អត្រាថេរនៃដំណើរការនេះ។ kមួយ។ ជោគវាសនានៃស្មុគស្មាញ ES គឺពីរដង៖ វាអាចបំបែកទៅជាអង់ស៊ីម E និងស្រទាប់ខាងក្រោម S ជាមួយនឹងអត្រាថេរ។ k 2 ឬឆ្លងកាត់ការបំប្លែងបន្ថែមទៀត បង្កើតជាផលិតផល P និងអង់ស៊ីម E ដោយឥតគិតថ្លៃ ជាមួយនឹងអត្រាថេរ k៣. វាត្រូវបានប្រកាសថាផលិតផលប្រតិកម្មមិនត្រូវបានបំប្លែងទៅជាស្រទាប់ខាងក្រោមដើមទេ។ ស្ថានភាពនេះត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅដំណាក់កាលដំបូងនៃប្រតិកម្មខណៈពេលដែលកំហាប់នៃផលិតផលមានកម្រិតទាប។

អត្រាកាតាលីករត្រូវបានកំណត់នៅក្នុង លក្ខខណ្ឌស្ថានីនៅពេលដែលការប្រមូលផ្តុំនៃផលិតផលកម្រិតមធ្យមនៅតែថេរ ខណៈពេលដែលការប្រមូលផ្តុំនៃវត្ថុធាតុដើមចាប់ផ្តើម និងផលិតផលចុងក្រោយផ្លាស់ប្តូរ។ វាកើតឡើងនៅពេលដែលអត្រានៃការបង្កើត ES complex គឺស្មើនឹងអត្រានៃការពុកផុយរបស់វា។

អ្នកអាចណែនាំ K M ថេរថ្មី - Michaelis ថេរ(mol/l) ដែលស្មើនឹង

សមីការ Michaelis-Mentenដែលបង្ហាញពីទំនាក់ទំនងបរិមាណរវាងអត្រានៃប្រតិកម្មអង់ស៊ីម និងការប្រមូលផ្តុំនៃស្រទាប់ខាងក្រោម មានទម្រង់

(4.2)

សមីការនេះត្រូវគ្នាទៅនឹងគ្រោងនៃអត្រាប្រតិកម្មធៀបនឹងកំហាប់ស្រទាប់ខាងក្រោម។ នៅ ការប្រមូលផ្តុំស្រទាប់ខាងក្រោមទាបនៅពេលដែល [S] ទាបជាង K M, វ = វអតិបរមា [S] / K M, ពោលគឺ អត្រាប្រតិកម្មគឺសមាមាត្រដោយផ្ទាល់ទៅនឹងកំហាប់នៃស្រទាប់ខាងក្រោម។ នៅ ការប្រមូលផ្តុំស្រទាប់ខាងក្រោមខ្ពស់។នៅពេលដែល [S] ខ្ពស់ជាង K M, វ = វអតិបរមា ពោលគឺ អត្រាប្រតិកម្មគឺអតិបរមា ហើយមិនអាស្រ័យលើកំហាប់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមទេ។

ប្រសិនបើ [S] = K M, បន្ទាប់មក វ = វអតិបរមា / 2 ។

ដូច្នេះ K M ស្មើនឹងកំហាប់ស្រទាប់ខាងក្រោម ដែលអត្រាប្រតិកម្មគឺពាក់កណ្តាលអតិបរមា.

Michaelis ថេរ (KM) និងអត្រាប្រតិកម្មអតិបរមា ( វអតិបរមា) គឺជាលក្ខណៈល្បឿនដ៏សំខាន់នៅកំហាប់ស្រទាប់ខាងក្រោមផ្សេងៗគ្នា។ វអតិបរមាគឺជាតម្លៃថេរសម្រាប់អង់ស៊ីមនីមួយៗ ដែលធ្វើឱ្យវាអាចវាយតម្លៃប្រសិទ្ធភាពនៃសកម្មភាពរបស់វា។

ថេរ Michaelis បង្ហាញពីភាពស្និទ្ធស្នាលនៃស្រទាប់ខាងក្រោមសម្រាប់អង់ស៊ីម (ក្នុងករណី k 2 >> k 3): K M ទាប ភាពស្និទ្ធស្នាលកាន់តែច្រើន និងអត្រាប្រតិកម្មកាន់តែខ្ពស់ ហើយផ្ទុយទៅវិញ។ ស្រទាប់ខាងក្រោមនីមួយៗត្រូវបានកំណត់លក្ខណៈដោយតម្លៃ KM របស់វាសម្រាប់អង់ស៊ីមដែលបានផ្តល់ឱ្យ ហើយតម្លៃរបស់វាអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីវិនិច្ឆ័យភាពជាក់លាក់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមនៃអង់ស៊ីម។ ថេរ Michaelis អាស្រ័យលើធម្មជាតិនៃស្រទាប់ខាងក្រោម សីតុណ្ហភាព pH កម្លាំងអ៊ីយ៉ុងនៃដំណោះស្រាយ និងវត្តមានរបស់ inhibitors ។

ដោយសារតែនិយមន័យ វអតិបរមា និង K M ដោយផ្ទាល់ពីការពឹងផ្អែកក្រាហ្វិករបស់ Michaelis - Menten (រូបភាព 4.5) គឺមិនច្បាស់លាស់ ពួកគេងាកទៅរកលីនេអ៊ែរនៃសមីការនេះ។ ដើម្បីធ្វើដូច្នេះ វាត្រូវបានបំប្លែងទៅជាទម្រង់បែបនោះ ដែលវាត្រូវបានបង្ហាញជាក្រាហ្វិកជាបន្ទាត់ត្រង់។ មានវិធីសាស្រ្តលីនេអ៊ែរជាច្រើន ដែលក្នុងនោះវិធីសាស្ត្រ Lineweaver-Burk និង Edie-Hofstee ត្រូវបានគេប្រើច្រើនបំផុត។

ការផ្លាស់ប្តូរ Lineweaver-Burke មានទម្រង់

(4.3)

បង្កើតក្រាហ្វភាពអាស្រ័យ 1/ វ = f(1/[S]) ហើយទទួលបានបន្ទាត់ត្រង់ចំនុចប្រសព្វដែលអ័ក្ស y ផ្តល់តម្លៃ 1/ វអតិបរមា; ផ្នែកដែលកាត់ផ្តាច់ដោយបន្ទាត់ត្រង់នៅលើអ័ក្ស abscissa ផ្តល់តម្លៃ −1 / K M ហើយតង់សង់នៃមុំទំនោរនៃបន្ទាត់ត្រង់ទៅអ័ក្ស abscissa គឺ K M / វអតិបរមា (រូបភាព 4.6) ។ ក្រាហ្វនេះអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកកំណត់បានកាន់តែត្រឹមត្រូវ។ វអតិបរមា ដូចដែលយើងនឹងឃើញខាងក្រោម ព័ត៌មានដ៏មានតម្លៃទាក់ទងនឹងការរារាំងសកម្មភាពអង់ស៊ីមក៏អាចដកស្រង់ចេញពីគ្រោងនេះផងដែរ។

អង្ករ។ ៤.៦. វិធីសាស្រ្តសម្រាប់លីនេអ៊ែរនៃសមីការ Michaelis-Menten

(យោងតាម Lineweaver-Burke)

វិធីសាស្រ្ត Edie - Hofsty គឺផ្អែកលើការបំប្លែងសមីការ Michaelis-Menten ដោយគុណភាគីទាំងពីរដោយ វអតិបរមា៖

(4.4)

ក្រាហ្វក្នុងកូអរដោណេ វនិង វ/[S] គឺជាបន្ទាត់ត្រង់ចំនុចប្រសព្វដែលអ័ក្ស y ផ្តល់តម្លៃ វអតិបរមា ហើយផ្នែកដែលកាត់ផ្តាច់ដោយបន្ទាត់ត្រង់នៅលើអ័ក្ស abscissa គឺជាតម្លៃ វអតិបរមា / K M (រូបភាព 4.7) ។ វាធ្វើឱ្យមានភាពងាយស្រួលក្នុងការកំណត់ K M និង វអតិបរមា ក៏ដូចជារកឃើញគម្លាតដែលអាចកើតមានពីលីនេអ៊ែរ ដែលមិនត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងក្រាហ្វមុន។

អង្ករ។ ៤.៧. វិធីសាស្រ្តសម្រាប់លីនេអ៊ែរនៃសមីការ Michaelis-Menten

(យោងទៅតាម Edie-Hofsty)

ការរារាំងសកម្មភាពអង់ស៊ីម។សកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីមអាចត្រូវបានបង្ក្រាបទាំងស្រុង ឬដោយផ្នែកដោយសារធាតុគីមីមួយចំនួន - ថ្នាំទប់ស្កាត់ . ដោយធម្មជាតិនៃសកម្មភាពរបស់ពួកគេ inhibitors ត្រូវបានបែងចែកទៅជាបញ្ច្រាសនិងមិនអាចត្រឡប់វិញបាន។ ការបែងចែកនេះគឺផ្អែកលើកម្លាំងចងរបស់ inhibitor ទៅនឹងអង់ស៊ីម។

ថ្នាំទប់ស្កាត់បញ្ច្រាស - ទាំងនេះគឺជាសមាសធាតុដែលធ្វើអន្តរកម្មមិនទាក់ទងនឹងអង់ស៊ីម ហើយនៅពេលដែលពួកវាត្រូវបានយកចេញ សកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីមត្រូវបានស្ដារឡើងវិញ។ ការរារាំងបញ្ច្រាសអាចជាការប្រកួតប្រជែង មិនប្រកួតប្រជែង និងមិនប្រកួតប្រជែង។

ឧទាហរណ៍មួយ។ ការរារាំងការប្រកួតប្រជែងគឺជាសកម្មភាពនៃអាណាឡូករចនាសម្ព័ន្ធនៃស្រទាប់ខាងក្រោម ដែលអាចភ្ជាប់ទៅនឹងមជ្ឈមណ្ឌលសកម្មនៃអង់ស៊ីមក្នុងវិធីស្រដៀងនឹងស្រទាប់ខាងក្រោម ប៉ុន្តែដោយមិនប្រែទៅជាផលិតផល និងការពារអន្តរកម្មនៃអង់ស៊ីមជាមួយស្រទាប់ខាងក្រោមពិត ពោលគឺមានការប្រកួតប្រជែង រវាងស្រទាប់ខាងក្រោម និងសារធាតុ inhibitor សម្រាប់ភ្ជាប់ទៅនឹងមជ្ឈមណ្ឌលសកម្មនៃអង់ស៊ីម។ ជាលទ្ធផលនៃការបង្កើតអង់ស៊ីម inhibitor (EI) complexes កំហាប់នៃ ES-complexes មានការថយចុះ ហើយជាលទ្ធផល អត្រាប្រតិកម្មថយចុះ។ នៅក្នុងពាក្យផ្សេងទៀត inhibitor ប្រកួតប្រជែងកាត់បន្ថយអត្រានៃកាតាលីករដោយកាត់បន្ថយសមាមាត្រនៃម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមដែលចងស្រទាប់ខាងក្រោម។

ការវាស់ស្ទង់អត្រាប្រតិកម្មនៅកំហាប់ស្រទាប់ខាងក្រោមផ្សេងៗគ្នា ធ្វើឱ្យវាអាចបែងចែកការទប់ស្កាត់ការប្រកួតប្រជែងពីការរារាំងមិនប្រកួតប្រជែង។ ជាមួយនឹងការរារាំងការប្រកួតប្រជែងនៅលើក្រាហ្វនៃការពឹងផ្អែក 1/ វ=f(1/[S]) បន្ទាត់កាត់អ័ក្ស y នៅចំណុចមួយ 1/ វអតិបរមា ដោយមិនគិតពីវត្តមានរបស់ inhibitor ប៉ុន្តែនៅក្នុងវត្តមាននៃ inhibitor តង់សង់នៃជម្រាលនៃបន្ទាត់ត្រង់ទៅអ័ក្ស abscissa កើនឡើង i.e. វអតិបរមាមិនផ្លាស់ប្តូរទេខណៈពេលដែល KM កើនឡើងដែលបង្ហាញពីការថយចុះនៃទំនាក់ទំនងនៃស្រទាប់ខាងក្រោមសម្រាប់អង់ស៊ីមនៅក្នុងវត្តមានរបស់ inhibitor (រូបភាព 4.8) ។ ដូច្នេះនៅកំហាប់ខ្ពស់គ្រប់គ្រាន់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមក្រោមលក្ខខណ្ឌនៃការប្រកួតប្រជែងសម្រាប់កន្លែងសកម្មនៃអង់ស៊ីម នៅពេលដែលស្រទាប់ខាងក្រោមផ្លាស់ប្តូរសារធាតុ inhibitor ពីកន្លែងសកម្ម ការទប់ស្កាត់អាចត្រូវបានលុបចោល ហើយអត្រានៃប្រតិកម្មកាតាលីករត្រូវបានស្តារឡើងវិញ។ ក្នុងករណីនេះសមីការ Michaelis - Menten មានទម្រង់

(4.5)

ដែល [I] គឺជាកំហាប់ inhibitor; ខេ ខ្ញុំ គឺជាការរារាំងថេរ។

ថេរ inhibition កំណត់លក្ខណៈនៃទំនាក់ទំនងនៃអង់ស៊ីមសម្រាប់ inhibitor និងជាថេរ dissociation នៃស្មុគស្មាញ EI:

(4.6)

នៅក្នុងវត្តមាននៃឧបករណ៍ទប់ស្កាត់ការប្រកួតប្រជែង ជម្រាលនៃបន្ទាត់ត្រង់ទៅអ័ក្ស x កើនឡើងដោយ (1 + [I]/ ខេ ខ្ញុំ).

អង្ករ។ ៤.៨. ការរារាំងការប្រកួតប្រជែង៖

a - គ្រោងការណ៍; ខ - កន្សោមក្រាហ្វិកយោងទៅតាម Lineweaver - Burke

នៅ ការរារាំងមិនប្រកួតប្រជែង inhibitor មានភាពខុសប្លែកគ្នានៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធពីស្រទាប់ខាងក្រោម ហើយភ្ជាប់មិនទៅនឹងសកម្ម ប៉ុន្តែទៅកន្លែង allosteric នៃអង់ស៊ីម។ នេះនាំឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងការអនុលោមតាមទីតាំងសកម្មនៃអង់ស៊ីមដែលត្រូវបានអមដោយការថយចុះនៃសកម្មភាពកាតាលីករនៃអង់ស៊ីម។ ជាងនេះទៅទៀត សារធាតុ inhibitor អាចភ្ជាប់មិនត្រឹមតែទៅនឹងអង់ស៊ីមសេរី (E + I → EI) ប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែថែមទាំងភ្ជាប់ទៅនឹងអង់ស៊ីមស្រទាប់ខាងក្រោមស្មុគស្មាញ (ES + I → ESI) ផងដែរ។ ទម្រង់ទាំងពីរ EI និង ESI មិនសកម្មទេ។ ស្រទាប់ខាងក្រោម និងសារធាតុ inhibitor អាចត្រូវបានចងក្នុងពេលដំណាលគ្នាដោយម៉ូលេគុលអង់ស៊ីម ប៉ុន្តែកន្លែងចងរបស់ពួកគេមិនត្រួតលើគ្នា។ សកម្មភាពរបស់ inhibitor ដែលមិនមានការប្រកួតប្រជែងគឺដើម្បីកាត់បន្ថយចំនួននៃការផ្លាស់ប្តូរអង់ស៊ីម និងមិនកាត់បន្ថយសមាមាត្រនៃម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមដែលចងនៅស្រទាប់ខាងក្រោម។ inhibitor មិនការពារការបង្កើត ES complexes ទេ ប៉ុន្តែរារាំងការបំប្លែងស្រទាប់ខាងក្រោមទៅក្នុងផលិតផល។ ដោយហេតុនេះ។ វការថយចុះអតិបរមា ពោលគឺនៅក្នុងវត្តមានរបស់ inhibitor ចំនុចប្រសព្វនៃបន្ទាត់ត្រង់ជាមួយអ័ក្ស y នឹងកើតឡើងនៅចំណុចខ្ពស់ (រូបភាព 4.9)។ ក្នុងវិសាលភាពដូចគ្នាតង់សង់នៃមុំទំនោរនៃបន្ទាត់ត្រង់ទៅអ័ក្ស abscissa ស្មើនឹង K M / វអតិបរមា I ។ K M ផ្ទុយពី វអតិបរមាមិនផ្លាស់ប្តូរទេ ដូច្នេះការទប់ស្កាត់មិនប្រកួតប្រជែងមិនអាចត្រូវបានលុបចោលដោយការបង្កើនកំហាប់ស្រទាប់ខាងក្រោមទេ។

អង្ករ។ ៤.៩. ការរារាំងមិនប្រកួតប្រជែង៖

a - គ្រោងការណ៍; ខ - កន្សោមក្រាហ្វិកយោងទៅតាម Lineweaver - Burke

អត្រាប្រតិកម្មអតិបរមា វអតិបរមា I នៅក្នុងវត្តមាននៃ inhibitor ដែលមិនប្រកួតប្រជែងត្រូវបានពិពណ៌នាដោយសមីការ

(4.7)

ក្នុងករណីជាក់លាក់មួយ។ ការរារាំងដែលមិនអាចប្រកួតប្រជែងបាន។នៅពេលដែល inhibitor ភ្ជាប់ទៅនឹង ES-complex ហើយមិនភ្ជាប់ទៅនឹងអង់ស៊ីមសេរី នៅលើក្រាហ្វការពឹងផ្អែក 1/ វ = f(1/[S]) បន្ទាត់ស្របទៅនឹងគ្នា ហើយប្រសព្វអ័ក្ស ordinate និង abscissa នៅចំណុចផ្សេងគ្នា (រូបភាព 4.10)។

អង្ករ។ ៤.១០. ការរារាំងដែលមិនអាចប្រកួតប្រជែងបាន៖

a - គ្រោងការណ៍; ខ - កន្សោមក្រាហ្វិកយោងទៅតាម Lineweaver - Burke

ថ្នាំទប់ស្កាត់ដែលមិនអាចត្រឡប់វិញបាន។ - ទាំងនេះគឺជាសមាសធាតុប្រតិកម្មខ្ពស់នៃធម្មជាតិគីមីផ្សេងៗ ដែលអាចធ្វើអន្តរកម្មជាមួយក្រុមសំខាន់ៗដែលមានមុខងារនៃមជ្ឈមណ្ឌលសកម្ម បង្កើតជាចំណងកូវ៉ាឡេនដ៏រឹងមាំ។ នេះនាំឱ្យមានការបាត់បង់សកម្មភាពអង់ស៊ីមដែលមិនអាចត្រឡប់វិញបាន។ ក្នុងន័យនេះ ទ្រឹស្ដី Michaelis-Menten ដែលផ្អែកលើការសន្មត់ថា ការភ្ជាប់នៃសារធាតុ inhibitor ទៅនឹងអង់ស៊ីមគឺអាចបញ្ច្រាស់បាន គឺមិនអាចអនុវត្តបានទេក្នុងករណីនេះ។

ឧទាហរណ៏នៃការរារាំងដែលមិនអាចត្រឡប់វិញបានគឺអន្តរកម្មនៃអង់ស៊ីមជាមួយអ៊ីយ៉ុងដែកធ្ងន់ ដែលត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងក្រុម sulfhydryl នៃសំណល់ cysteine របស់អង់ស៊ីម និងបង្កើតជាសារធាតុ mercaptides ដែលជាសមាសធាតុមិនរលាយ ឬបំរែបំរួល covalent នៃអង់ស៊ីមក្រោម សកម្មភាពរបស់ភ្នាក់ងារ alkylating ។

គំនិតនៃសកម្មភាពអង់ស៊ីម

នៅក្នុងការអនុវត្តគីមីជីវៈប្រចាំថ្ងៃ បរិមាណនៃអង់ស៊ីមមិនត្រូវបានគេប៉ាន់ស្មានឡើយ ប៉ុន្តែមានតែសកម្មភាពរបស់វាប៉ុណ្ណោះ។ សកម្មភាពគឺជាគំនិតទូលំទូលាយជាងបរិមាណ។ វាបង្កប់ន័យចម្បងនៃលទ្ធផលនៃប្រតិកម្មពោលគឺការបាត់បង់ស្រទាប់ខាងក្រោមឬការប្រមូលផ្តុំនៃផលិតផល។ តាមធម្មជាតិ មនុស្សម្នាក់មិនអាចព្រងើយកន្តើយនឹងពេលវេលាដែលអង់ស៊ីមបានដំណើរការ និងចំនួនម៉ូលេគុលអង់ស៊ីមនោះទេ។ ប៉ុន្តែដោយសារវាជាធម្មតាមិនប្រាកដក្នុងការគណនាចំនួនម៉ូលេគុលអង់ស៊ីម នោះបរិមាណនៃសារធាតុជីវសាស្ត្រដែលមានអង់ស៊ីម (បរិមាណ ឬម៉ាស) ត្រូវបានប្រើ។

ដូច្នេះនៅពេលកំណត់សកម្មភាពរបស់អង់ស៊ីម អថេរចំនួនបីត្រូវតែយកមកពិចារណាក្នុងពេលដំណាលគ្នា៖

ម៉ាស់នៃផលិតផលដែលទទួលបានឬស្រទាប់ខាងក្រោមដែលបាត់;
ពេលវេលាចំណាយលើប្រតិកម្ម;
បរិមាណនៃអង់ស៊ីម ប៉ុន្តែតាមពិតគឺម៉ាស់ ឬបរិមាណនៃសារធាតុជីវសាស្រ្តដែលមានអង់ស៊ីម។

ដើម្បីយល់ពីទំនាក់ទំនងរវាងកត្តាទាំងនេះ ឧទាហរណ៍ច្បាស់លាស់ និងសាមញ្ញអាចជាការសាងសង់អាគារពីរ។ អាគារគឺស្មើនឹងផលិតផលនៃប្រតិកម្ម, កម្មករគឺជាអង់ស៊ីម, អនុញ្ញាតឱ្យក្រុមឆ្លើយតបទៅនឹងបរិមាណនៃសម្ភារៈជីវសាស្រ្ត។ ដូច្នេះភារកិច្ចចាប់ពីថ្នាក់ទី ៣៖

ក្រុមមួយមានមនុស្ស១០នាក់ធ្វើការលើការសាងសង់អគារមួយ ក្រុមមនុស្ស៥នាក់ធ្វើការលើអគារផ្សេងទៀតដែលមានលក្ខណៈដូចគ្នា។ ការសាងសង់ត្រូវបានបញ្ចប់ក្នុងពេលដំណាលគ្នា និងពេញលេញ។ តើសកម្មភាពរបស់កម្មករខ្ពស់ជាងនៅឯណា?
ក្រុមមួយមានមនុស្ស១០នាក់ធ្វើការលើការសាងសង់អគារមួយមាន៣ជាន់ អគារមួយទៀតមាន១២ជាន់ មួយក្រុមមាន១០នាក់។ ការសាងសង់ត្រូវបានបញ្ចប់ក្នុងពេលដំណាលគ្នា និងពេញលេញ។ តើសកម្មភាពរបស់កម្មករខ្ពស់ជាងនៅឯណា?
នៅលើការសាងសង់អាគារមួយមាន 5 ជាន់ក្រុមមនុស្ស 10 នាក់បានធ្វើការហើយមួយទៀតនៃអគារដូចគ្នា - ក្រុមមនុស្ស 10 ។ ការសាងសង់អគារទី១ប្រើពេល២០ថ្ងៃ អគារទី២ត្រូវបញ្ចប់ក្នុងរយៈពេល១០ថ្ងៃ ។ តើសកម្មភាពរបស់កម្មករខ្ពស់ជាងនៅឯណា?

មូលដ្ឋានគ្រឹះនៃបរិមាណសកម្មភាពអង់ស៊ីម

1. សកម្មភាពអង់ស៊ីមត្រូវបានបង្ហាញជាអត្រានៃការប្រមូលផ្តុំផលិតផលឬអត្រានៃការបាត់បង់ស្រទាប់ខាងក្រោមក្នុងលក្ខខណ្ឌនៃបរិមាណនៃសារធាតុដែលមានអង់ស៊ីម។

នៅក្នុងការអនុវត្តពួកគេជាធម្មតាប្រើ៖

ឯកតានៃបរិមាណនៃសារធាតុមួយ - mol (និងនិស្សន្ទវត្ថុរបស់វា mmol, µmol), ក្រាម (kg, mg),
ឯកតានៃពេលវេលា - នាទី, ម៉ោង, វិនាទី,
ឯកតានៃម៉ាសឬបរិមាណ - ក្រាម (គីឡូក្រាម, មីលីក្រាម), លីត្រ (មីលីលីត) ។

និស្សន្ទវត្ថុផ្សេងទៀតក៏ត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងសកម្មផងដែរ - catal (mol / s) ឯកតាសកម្មភាពអន្តរជាតិ (IU, Unit) ត្រូវគ្នាទៅនឹង μmol / min ។

ដូច្នេះសកម្មភាពអង់ស៊ីមអាចត្រូវបានបង្ហាញជាឧទាហរណ៍ក្នុង mmol/s×l, g/h×l, IU/l, cat/ml ជាដើម។

ឧទាហរណ៍វាត្រូវបានគេស្គាល់

2. ការបង្កើតលក្ខខណ្ឌស្តង់ដារដើម្បីអាចប្រៀបធៀបលទ្ធផលដែលទទួលបាននៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ផ្សេងៗគ្នា - pH ល្អបំផុត និងសីតុណ្ហភាពថេរ ឧទាហរណ៍ 25°C ឬ 37°C ការប្រកាន់ខ្ជាប់នូវពេលវេលាភ្ញាស់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមជាមួយនឹងអង់ស៊ីម។

ការបំបែកកាបូអ៊ីដ្រាត(សកម្មភាព saccharolytic) ពោលគឺ សមត្ថភាពក្នុងការបំបែកជាតិស្ករ និងជាតិអាល់កុល polyhydric ជាមួយនឹងការបង្កើតអាស៊ីត ឬអាស៊ីត និងឧស្ម័ន ត្រូវបានសិក្សានៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយ Giss ដែលមានផ្ទុកកាបូអ៊ីដ្រាតមួយ ឬមួយផ្សេងទៀត និងសូចនាករ។ នៅក្រោមសកម្មភាពនៃអាស៊ីតដែលបានបង្កើតឡើងកំឡុងពេលបំបែកកាបូអ៊ីដ្រាតសូចនាករផ្លាស់ប្តូរពណ៌នៃឧបករណ៍ផ្ទុក។ ដូច្នេះប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយទាំងនេះត្រូវបានគេហៅថា "ស៊េរី variegated" ។ មីក្រុបដែលមិនមានជាតិ ferment កាបូអ៊ីដ្រាតនេះលូតលាស់នៅលើឧបករណ៍ផ្ទុកដោយមិនផ្លាស់ប្តូរវា។ វត្តមាននៃឧស្ម័នត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការបង្កើតពពុះនៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយជាមួយ agar ឬដោយការប្រមូលផ្តុំរបស់វានៅក្នុង "អណ្តែត" នៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយរាវ។ "អណ្តែត" - បំពង់កែវតូចចង្អៀតដែលមានចុងបិទជិតបែរមុខទៅខាងលើដែលត្រូវបានដាក់ក្នុងបំពង់សាកល្បងជាមួយឧបករណ៍ផ្ទុកមុនពេលក្រៀវ (រូបភាព 18) ។

អង្ករ។ 18. ការសិក្សាអំពីសកម្មភាព saccharolytic នៃ microorganisms ។ ខ្ញុំ - "ស៊េរី variegated": a - ឧបករណ៍ផ្ទុករាវជាមួយកាបូអ៊ីដ្រាតនិងសូចនាកររបស់ Andrede; ខ - ឧបករណ៍ផ្ទុកពាក់កណ្តាលរាវដែលមានសូចនាករ BP: 1 - មីក្រូសរីរាង្គមិន ferment កាបូអ៊ីដ្រាត; 2 - microorganisms ferment កាបូអ៊ីដ្រាតជាមួយនឹងការបង្កើតអាស៊ីត; 3 - អតិសុខុមប្រាណ ferment កាបូអ៊ីដ្រាតជាមួយនឹងការបង្កើតអាស៊ីតនិងឧស្ម័ន; II - អាណានិគមនៃអតិសុខុមប្រាណដែលមិនរលួយ (គ្មានពណ៌) និង decompose lactose (ពណ៌ស្វាយនៅលើឧបករណ៍ផ្ទុក EMS - នៅខាងឆ្វេងពណ៌ក្រហមនៅលើឧបករណ៍ផ្ទុក Endo - នៅខាងស្តាំ)

ទឹកដោះគោជាមួយនឹងការលូតលាស់នៃអតិសុខុមប្រាណ fermenting lactose coagulates ។

លក្ខណៈសម្បត្តិ Proteolytic(ឧ. សមត្ថភាពបំបែកប្រូតេអ៊ីន ប៉ូលីភីទីត។ ជាមួយនឹងការរីកលូតលាស់នៃអតិសុខុមប្រាណ gelatin-fermenting នៅលើឧបករណ៍ផ្ទុក gelatin មធ្យម liquefies ។ ធម្មជាតិនៃទឹករំអិលដែលបណ្តាលមកពីអតិសុខុមប្រាណខុសៗគ្នា (រូបភាព 19) ។ អតិសុខុមប្រាណដែលបំបែក casein (ប្រូតេអ៊ីនទឹកដោះគោ) បណ្តាលឱ្យមាន peptonization នៃទឹកដោះគោ - វាត្រូវការរូបរាងនៃ whey ។ ក្នុងអំឡុងពេលនៃការបំបែកនៃ peptones, indole, អ៊ីដ្រូសែនស៊ុលហ្វីត, អាម៉ូញាក់អាចត្រូវបានបញ្ចេញ។ ការបង្កើតរបស់ពួកគេត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយប្រើក្រដាសចង្អុលបង្ហាញ។ ក្រដាសតម្រងត្រូវបាន impregnated ជាមុនជាមួយនឹងដំណោះស្រាយជាក់លាក់, ស្ងួតហួតហែង, កាត់ចូលទៅក្នុងច្រូតតូចចង្អៀតប្រវែង 5-6 សង់ទីម៉ែត្រ, ហើយបន្ទាប់ពីការសាបព្រួសវប្បធម៌នៅលើ BCH, បានដាក់នៅក្រោមឆ្នុករវាងវានិងជញ្ជាំងបំពង់សាកល្បង។ បន្ទាប់ពី incubation នៅក្នុង thermostat មួយលទ្ធផលត្រូវបានយកទៅក្នុងគណនី។ អាម៉ូញាក់ធ្វើឱ្យក្រដាស litmus ប្រែទៅជាពណ៌ខៀវ; នៅពេលដែលអ៊ីដ្រូសែនស៊ុលហ្វីតត្រូវបានបញ្ចេញនៅលើក្រដាសដែលត្រាំក្នុងដំណោះស្រាយ 20% នៃអាសេតាតនាំមុខ និងសូដ្យូមប៊ីកាកាបូណាត ស៊ុលហ្វាតនាំមុខត្រូវបានបង្កើតឡើង - ក្រដាសប្រែទៅជាខ្មៅ។ សារធាតុ indole បណ្តាលឱ្យមានក្រដាសក្រហមដែលត្រាំក្នុងដំណោះស្រាយអាស៊ីត oxalic (សូមមើលរូបទី 19)។

អង្ករ។ 19. លក្ខណៈសម្បត្តិ Proteolytic នៃ microorganisms ។ 1 - ទម្រង់នៃការ liquefaction នៃ gelatin; II - ការកំណត់អ៊ីដ្រូសែនស៊ុលហ្វីត; III - ការប្តេជ្ញាចិត្តនៃ indole: 1 - លទ្ធផលអវិជ្ជមាន; 2 - លទ្ធផលវិជ្ជមាន

បន្ថែមពីលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយទាំងនេះ សមត្ថភាពរបស់អតិសុខុមប្រាណក្នុងការបំប្លែងស្រទាប់ខាងក្រោមសារធាតុចិញ្ចឹមផ្សេងៗត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើឌីសក្រដាសដែលដាក់ជាមួយសារធាតុប្រតិកម្មមួយចំនួន (ប្រព័ន្ធសូចនាករក្រដាស "SIB") ។ ថាសទាំងនេះត្រូវបានជ្រលក់ចូលទៅក្នុងបំពង់សាកល្បងជាមួយនឹងវប្បធម៌ដែលកំពុងសិក្សា ហើយបន្ទាប់ពីរយៈពេល 3 ម៉ោងនៃការភ្ញាស់ក្នុងទែម៉ូស្ដាតនៅសីតុណ្ហភាព 37 អង្សារ ការរលាយនៃកាបូអ៊ីដ្រាត អាស៊ីតអាមីណូ ប្រូតេអ៊ីន។ល។ ត្រូវបានវិនិច្ឆ័យដោយការផ្លាស់ប្តូរពណ៌ ថាស។

លក្ខណៈសម្បត្តិ hemolytic (សមត្ថភាពក្នុងការបំផ្លាញកោសិកាឈាមក្រហម) ត្រូវបានសិក្សានៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយជាមួយនឹងឈាម។ ក្នុងករណីនេះ ប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយរាវក្លាយទៅជាថ្លា ហើយនៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយក្រាស់ តំបន់ថ្លាលេចឡើងនៅជុំវិញអាណានិគម (រូបភាព 20) ។ នៅពេលដែល methemoglobin ត្រូវបានបង្កើតឡើង ឧបករណ៍ផ្ទុកប្រែទៅជាពណ៌បៃតង។

អង្ករ។ 20. Hemolysis នៅជុំវិញអាណានិគមរីកលូតលាស់នៅលើ agar ឈាម

ការអភិរក្សដំណាំ

ការងើបឡើងវិញនៃដំណាំស្ងួត។ ចុងនៃអំពែរត្រូវបានកំដៅយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងអណ្តាតភ្លើងរបស់ឧបករណ៍ដុត ហើយប៉ះនឹងសំឡីដែលសើមបន្តិចដោយទឹកត្រជាក់ដើម្បីឱ្យ microcracks បង្កើតនៅលើកញ្ចក់ ដែលតាមរយៈនោះខ្យល់ចូលបន្តិចម្តងៗចូលទៅក្នុងអំពែ។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះឆ្លងកាត់គែមដែលគេឱ្យឈ្មោះថានៃស្នាមប្រេះខ្យល់ត្រូវបានក្រៀវ។

* (ជាមួយនឹងទឹកលើសនៅលើ swab វាអាចចូលទៅក្នុង ampoule និងរំលោភលើភាពគ្មានកូននៃវប្បធម៌: វានឹងត្រូវបានបូមតាមរយៈ microcracks ដែលបានបង្កើតឡើងចាប់តាំងពីមានកន្លែងទំនេរនៅក្នុង ampoule ។)

យកចិត្តទុកដាក់! កុំភ្លេចថាមានកន្លែងទំនេរនៅក្នុង ampoule បិទជិត។ ប្រសិនបើខ្យល់ចូលក្នុងវាភ្លាមៗតាមរន្ធធំ វប្បធម៌នៅក្នុងអំពែអាចត្រូវបានបាញ់ និងច្រានចេញ។

វាក៏អាចធ្វើទៅបានដើម្បីរក្សាវប្បធម៌ក្នុងរយៈពេលយូរនៅក្នុងអាសូតរាវ (-196 ° C) នៅក្នុងឧបករណ៍ពិសេស។

វិធីសាស្រ្តសម្រាប់ការអភិរក្សរយៈពេលខ្លីនៃវប្បធម៌មានដូចខាងក្រោម៖ 1) ការដាំដុះបន្តបន្ទាប់ (ការផ្ទេរតាមកាលកំណត់ទៅប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយស្រស់) នៅចន្លោះពេលអាស្រ័យលើលក្ខណៈសម្បត្តិរបស់មីក្រូសរីរាង្គ លក្ខខណ្ឌមធ្យម និងលក្ខខណ្ឌដាំដុះ។ វប្បធម៌ត្រូវបានរក្សាទុកនៅ 4 ° C រវាងការបន្តពូជ; 2) ការអភិរក្សនៅក្រោមស្រទាប់នៃប្រេង។ វប្បធម៌ត្រូវបានដាំដុះនៅក្នុង agar នៅក្នុងជួរឈរកម្ពស់ 5-6 សង់ទីម៉ែត្រចាក់ជាមួយប្រេង vaseline មាប់មគ (ស្រទាប់ប្រេងប្រហែល 2 សង់ទីម៉ែត្រ) ហើយរក្សាទុកបញ្ឈរនៅក្នុងទូទឹកកក។ អាយុកាលធ្នើនៃអតិសុខុមប្រាណផ្សេងៗគ្នាគឺខុសគ្នា ដូច្នេះហើយ វប្បធម៌មួយត្រូវបានសាបព្រោះតាមកាលកំណត់ពីបំពង់សាកល្បង ដើម្បីពិនិត្យមើលលទ្ធភាពជោគជ័យរបស់វា។ 3) ការផ្ទុកនៅ -20-70 ° C; 4) ការផ្ទុកនៅក្នុងបំពង់បិទជិត។ តាមតម្រូវការ សម្ភារៈដែលរក្សាទុកត្រូវបានសាបព្រួសនៅលើឧបករណ៍ផ្ទុកស្រស់។

សំណួរសាកល្បង

1. តើអ្វីត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងគំនិតនៃ "ការស្រាវជ្រាវបាក់តេរី"?

2. តើវប្បធម៌គួរជាអ្វីសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវបែបនេះ?

3. តើអាណានិគមអតិសុខុមប្រាណ វប្បធម៌ សំពាធ ក្លូនជាអ្វី?

4. តើអ្វីត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងគំនិតនៃ "លក្ខណៈសម្បត្តិវប្បធម៌នៃអតិសុខុមប្រាណ"?

លំហាត់ប្រាណ

1. សិក្សា និងពិពណ៌នាអំពីអាណានិគមមួយចំនួន។ ផ្ទេរពួកវាទៅ agar slant និងទៅវិស័យ។

2. សិក្សានិងពណ៌នាអំពីគំរូនៃការលូតលាស់ - វប្បធម៌ agar slant ។ កំណត់ភាពបរិសុទ្ធ និងសរីរវិទ្យានៃវប្បធម៌ក្នុងការរៀបចំស្នាមប្រឡាក់។

3. ផ្ទេរវប្បធម៌ពី agar slant ទៅទំពាំងបាយជូរ និងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយរោគវិនិច្ឆ័យឌីផេរ៉ង់ស្យែល។ ពិនិត្យ និងកត់ត្រានៅក្នុងពិធីការនូវគំរូលូតលាស់នៃវប្បធម៌នៅលើប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយទាំងនេះ និងលក្ខណៈសម្បត្តិអង់ស៊ីមរបស់វា។

វិបផតថលសម្រាប់សិស្ស។ ការបណ្តុះបណ្តាលខ្លួនឯង

លក្ខណៈនៃអង់ស៊ីមដី

ដំណើរការអង់ស៊ីមនៅក្នុងដី

គំនិតនៃសកម្មភាពអង់ស៊ីម

មូលដ្ឋានគ្រឹះនៃបរិមាណសកម្មភាពអង់ស៊ីម

អត្ថបទ​ដែល​ទាក់ទង

អត្ថបទដែលទាក់ទង