ក្នុងអំឡុងពេលនៃការសិក្សា cytological រចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិកាត្រូវបានសិក្សាដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណដុំសាច់សាហាវ ស្លូតបូត និងដំបៅនៃធម្មជាតិដែលមិនមែនជាដុំសាច់។ គោលបំណងសំខាន់នៃការសិក្សាគឺដើម្បីបញ្ជាក់ ឬបដិសេធការពិតនៃភាពសាហាវនៃកោសិកាដែលយកមកធ្វើការវិភាគ។

វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវ cytological គឺផ្អែកលើការសិក្សារចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិកា សមាសភាពកោសិកានៃសារធាតុរាវ និងជាលិកាក្រោមមីក្រូទស្សន៍។

មានវិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវ cytological ដូចខាងក្រោមៈ

• មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ;
• មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង;
• វិធីសាស្រ្ត centrifugation ។ វាត្រូវបានគេប្រើនៅពេលដែលវាចាំបាច់ដើម្បីបំបែកភ្នាសកោសិកាពីរចនាសម្ព័ន្ធទូទៅ;
• វិធីសាស្រ្តអាតូមដែលបានដាក់ស្លាក។ ពួកវាត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាដំណើរការជីវគីមីនៅក្នុងកោសិកា៖ សម្រាប់គោលបំណងនេះ អ៊ីសូតូបវិទ្យុសកម្មដែលមានស្លាកសញ្ញាត្រូវបានណែនាំទៅក្នុងពួកវា។
• ការសិក្សាពេញមួយជីវិត។ វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវនេះធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាពីដំណើរការថាមវន្តដែលកើតឡើងនៅក្នុងកោសិកា។

ការសន្និដ្ឋាននៃការសិក្សា cytological គឺផ្អែកលើលក្ខណៈពិសេសនៃការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុង cytoplasm កោសិកាស្នូល សមាមាត្រនុយក្លេអ៊ែរ-cytoplasmic ការបង្កើតស្មុគស្មាញ និងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា។

ការវិភាគ cytological ត្រូវបានប្រើក្នុងអំឡុងពេលពិនិត្យបង្ការ ដើម្បីបញ្ជាក់ពីរោគវិនិច្ឆ័យ កំឡុងពេលវះកាត់ សម្រាប់ការរកឃើញទាន់ពេលវេលានៃការកើតឡើងវិញ និងដើម្បីតាមដានវឌ្ឍនភាពនៃការព្យាបាល។

ការពិនិត្យ cytological នៃ smears

សម្ភារៈខាងក្រោមត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការវិភាគ៖

• វត្ថុរាវ៖ ទឹកនោម, ក្រពេញប្រូស្តាត, ទឹករំអិល, ទឹករំអិលដែលទទួលបានក្នុងអំឡុងពេលថតឆ្លុះនៃសរីរាង្គផ្សេងៗ, ការបញ្ចេញទឹករំអិលចេញពីក្បាលសុដន់, ស្នាមប្រេះនិងសំណល់អេតចាយពីផ្ទៃដំបៅនិងសំណឹក, របួសនិង fistulas, សារធាតុរាវចេញពីបែហោងធ្មែញ serous និង articular;
• punctates: សមា្ភារៈជីវសាស្រ្តដែលទទួលបានកំឡុងពេលចាក់ម្ជុលរោគវិនិច្ឆ័យដោយម្ជុលស្តើង។
• ស្នាមប្រេះចេញពីមាត់ស្បូន និងមាត់ស្បូន។

ភាគច្រើននៃការសិក្សា cytological នៃ smears ត្រូវបានអនុវត្តប្រសិនបើចាំបាច់ ដើម្បីបង្កើត និងបញ្ជាក់ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យ។ ប៉ុន្តែការពិនិត្យ cytological នៃមាត់ស្បូន (pap smear) ត្រូវបានណែនាំ: ម្តងក្នុងមួយឆ្នាំ - សម្រាប់ស្ត្រីដែលមានអាយុលើសពី 19 ឆ្នាំដែលសកម្មផ្លូវភេទ; ពីរដងក្នុងមួយឆ្នាំ - សម្រាប់ស្ត្រីដែលប្រើថ្នាំពន្យារកំណើតដោយអរម៉ូនហើយមានប្រដាប់បន្តពូជ; ច្រើនជាង 2 ដងក្នុងមួយឆ្នាំ - សម្រាប់ស្ត្រីដែលទទួលរងពីភាពគ្មានកូន ការហូរឈាមស្បូន ភាពធាត់ ដែលជារឿយៗផ្លាស់ប្តូរដៃគូរួមភេទ ប្រើថ្នាំ estrogens អ្នកដែលមានឬសនៅលើប្រដាប់បន្តពូជ ហើយត្រូវបានគេធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យថាមានមេរោគប្រដាប់បន្តពូជ។

ការពិនិត្យ Cytological នៃមាត់ស្បូន

សម្រាប់ការពិនិត្យ cytological នៃមាត់ស្បូន ការលាបមួយត្រូវបានយកចេញពីផ្នែកខាងក្រៅ និងខាងក្នុងនៃមាត់ស្បូន និងពីទ្វាមាសដោយប្រើ spatula ឈើពិសេស។ បន្ទាប់មកវាត្រូវបានផ្ទេរទៅកញ្ចក់និងជួសជុល។

ការពិនិត្យ cytological នៃមាត់ស្បូនត្រូវបានអនុវត្តដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណការផ្លាស់ប្តូរមហារីកនៅក្នុងកោសិកាហើយនៅក្នុងការសន្និដ្ឋានវេជ្ជបណ្ឌិតបង្ហាញពីដំណាក់កាលមួយក្នុងចំណោមដំណាក់កាលទាំងប្រាំនៃស្ថានភាពនៃកោសិកា:

• ដំណាក់កាលទី 1. កោសិកាដែលមានភាពមិនប្រក្រតីមិនត្រូវបានរកឃើញ;
• ដំណាក់កាលទី 2. មានការផ្លាស់ប្តូរតិចតួចនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិកាដែលបណ្តាលមកពីការរលាកនៃសរីរាង្គប្រដាប់បន្តពូជខាងក្នុង។ ស្ថានភាពនៃកោសិកានេះមិនបង្កឱ្យមានការព្រួយបារម្ភនោះទេប៉ុន្តែស្ត្រីត្រូវបានផ្ដល់អនុសាសន៍ឱ្យឆ្លងកាត់ការពិនិត្យបន្ថែមនិងការព្យាបាល;
• ដំណាក់កាលទី 3. កោសិកាមួយចំនួនតូចដែលមានភាពមិនប្រក្រតីនៃរចនាសម្ព័ន្ធត្រូវបានរកឃើញ។ ក្នុងករណីនេះវាត្រូវបានផ្ដល់អនុសាសន៍ឱ្យធ្វើការលាបម្តងទៀតឬធ្វើការត្រួតពិនិត្យ histological នៃជាលិកាដែលបានផ្លាស់ប្តូរ;
• ដំណាក់កាលទី 4. កោសិកាបុគ្គលដែលមានការផ្លាស់ប្តូរសាហាវត្រូវបានរកឃើញ។ ការធ្វើរោគវិនិច្ឆ័យចុងក្រោយមិនត្រូវបានធ្វើឡើង, ការពិនិត្យបន្ថែមត្រូវបានចេញវេជ្ជបញ្ជា;
• ដំណាក់កាលទី 5. កោសិកាមហារីកមួយចំនួនធំត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងការលាប។

ភាពជឿជាក់នៃការសិក្សា cytological បែបនេះគឺខ្ពស់ ប៉ុន្តែវាគ្រាន់តែអាចផ្តល់ព័ត៌មានអំពីតំបន់ដែលកោសិកាត្រូវបានគេយកទៅវិភាគប៉ុណ្ណោះ។ ដើម្បីវាយតម្លៃស្ថានភាពនៃបំពង់ fallopian, ovaries និងស្បូន អ្នកគួរតែឆ្លងកាត់ការពិនិត្យដ៏ទូលំទូលាយ។

លក្ខណៈពិសេសចម្បងនៃវិធីសាស្រ្តមុខងារ morpho សម្រាប់សិក្សាកោសិកាគឺការចង់ស្វែងយល់ពីមូលដ្ឋានរចនាសម្ព័ន្ធនៃដំណើរការជីវគីមីដែលកំណត់មុខងារដែលបានផ្តល់ឱ្យ ពោលគឺដើម្បីភ្ជាប់ដំណើរការទាំងនេះជាមួយនឹងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាជាក់លាក់។

គោលដៅចុងក្រោយជាមួយនឹងវិធីសាស្រ្តនេះគឺដូចគ្នាបេះបិទទៅនឹងគោលដៅដែលបន្តដោយជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល និងជីវគីមីរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ វិធីសាស្រ្តដែលប្រើដោយវិទ្យាសាស្ត្រទាំងនេះដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហាទូទៅគឺខុសគ្នាជាមូលដ្ឋាន។ ប្រសិនបើនៅក្នុងជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល និងជីវគីមីរចនាសម្ព័ន្ធ លក្ខខណ្ឌដែលមិនអាចខ្វះបានគឺការបំផ្លិចបំផ្លាញកោសិកា និងឯកោនៃរចនាសម្ព័ន្ធដែលកំពុងសិក្សាក្នុងទម្រង់ជាប្រភាគសុទ្ធ ច្រើនឬតិច នោះនៅក្នុងការសិក្សា cytological តម្រូវការជាមុន ផ្ទុយទៅវិញគឺការរក្សា ភាពសុចរិតនៃកោសិកា។ ក្នុងករណីនេះ ចាំបាច់ត្រូវខិតខំកាត់បន្ថយការជ្រៀតជ្រែកពីខាងក្រៅឱ្យនៅកម្រិតអប្បបរមា ហើយព្យាយាមសិក្សាពីរចនាសម្ព័ន្ធ និងជីវគីមីនៃសមាសធាតុមួយចំនួននៅក្នុងប្រព័ន្ធកោសិកាទាំងមូល។

ការស្រាវជ្រាវលើទិសដៅ morphofunctional បានអភិវឌ្ឍយ៉ាងឆាប់រហ័សក្នុងរយៈពេលប៉ុន្មានទសវត្សរ៍កន្លងមកនេះ។ នៅពេលនេះ វិធីសាស្រ្តថ្មីជាមូលដ្ឋានមួយចំនួនធំសម្រាប់ការវិភាគគុណភាព និងបរិមាណនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាត្រូវបានបង្កើតឡើង។ វិធីសាស្រ្តនេះគឺទាក់ទងយ៉ាងជិតស្និទ្ធទៅនឹងសាខាថ្មីនៃវិទ្យាសាស្ត្រជីវសាស្រ្ត និងជាពិសេសចំពោះជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល ដែលកំណត់ការរួមចំណែកយ៉ាងសំខាន់នៃការស្រាវជ្រាវបែបនេះចំពោះវឌ្ឍនភាពនៃចំណេះដឹងរបស់យើងអំពីច្បាប់ទូទៅនៃអង្គការកោសិកា។

មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង

មួយក្នុងចំណោមទូទៅបំផុតដែលបានក្លាយជាវិធីសាស្រ្តបុរាណដែលត្រូវបានប្រើនៅក្នុងការសិក្សារចនាសម្ព័ន្ធនិងជីវគីមីគឺជាវិធីសាស្រ្តនៃមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងនៅក្នុងការកែប្រែផ្សេងៗរបស់វា។ ការកែប្រែទាំងនេះគឺដោយសារតែវិធីសាស្រ្តផ្សេងគ្នាទាំងពីរចំពោះការវិភាគនៃរចនាសម្ព័ន្ធដែលកំពុងសិក្សា និងភាពបារម្ភនៃការរៀបចំកោសិកាសម្រាប់ការសិក្សាលើរចនាសម្ព័ន្ធ។ ដំណោះស្រាយខ្ពស់នៃមីក្រូទស្សន៍បញ្ជូន (ការបញ្ជូន) សាមញ្ញធ្វើឱ្យវាអាចវិភាគមិនត្រឹមតែសរីរាង្គទាំងអស់នៃបរិធាននុយក្លេអ៊ែរ និងស៊ីតូប្លាស្មិកប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែវាក៏មានរចនាសម្ព័ន្ធមួយចំនួនដែលមានទីតាំងនៅកម្រិត supramolecular នៃអង្គការ ឧទាហរណ៍ មីក្រូហ្វីលដែលទ្រទ្រង់ និង contractile microtubules និងមួយចំនួនទៀត។ ស្មុគស្មាញ multienzyme ។ បច្ចុប្បន្ននេះវិធីសាស្រ្តនៃមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងវ៉ុលខ្ពស់កំពុងត្រូវបានប្រើប្រាស់ដោយជោគជ័យដើម្បីសិក្សាកោសិកានៅកម្រិតប្រព័ន្ធ និងប្រព័ន្ធរងនៃអង្គការរបស់ពួកគេ។ ដោយសារតែថាមពលកាន់តែខ្ពស់នៃធ្នឹមអេឡិចត្រុងដែលជ្រៀតចូលបើប្រៀបធៀបទៅនឹងមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងបញ្ជូន វិធីសាស្ត្រនេះធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាផ្នែក "ក្រាស់" ឬសូម្បីតែកោសិការាលដាលទាំងមូលនៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍ដែលអនុញ្ញាតឱ្យឧទាហរណ៍ វិភាគសរុប។ ប្រព័ន្ធស្មុគស្មាញនៃសរសៃ submembrane នៃបរិធានផ្ទៃក្រឡា។

នៅក្នុងការសិក្សាអំពីមុខងារនៃបរិធានផ្ទៃក្រឡា ទំនាក់ទំនងនៃប្រព័ន្ធរងនីមួយៗនៃបរិធានផ្ទៃនៃស្នូល និងបញ្ហាមួយចំនួនទៀតនៃ cytology ទូទៅ វិធីសាស្រ្តនៃការស្កែនមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង ដែលធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាបាន ផ្ទៃនៃវត្ថុក្នុងបរិមាណ ទទួលបានសារៈសំខាន់យ៉ាងសំខាន់។

វិធីសាស្ត្របង្កកឈីប

កន្លែងពិសេស និងសំខាន់ជាមូលដ្ឋានក្នុងការសិក្សា cytological នៃទិសដៅ morphobiochemical ត្រូវបានកាន់កាប់ដោយវិធីសាស្ត្រត្រជាក់-បំបែក។ វាគឺជាវិធីសាស្រ្តដ៏ទន់ភ្លន់បំផុតសម្រាប់ការរៀបចំវត្ថុជីវសាស្រ្តសម្រាប់ការវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធជ្រុល ពោលគឺវាបណ្តាលឱ្យមានការផ្លាស់ប្តូរតិចតួចបំផុតនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាបើប្រៀបធៀបទៅនឹងស្ថានភាពដើមរបស់វា។ ខ្លឹមសារនៃវិធីសាស្រ្តមានដូចខាងក្រោម។ វត្ថុត្រូវបានដាក់ក្នុងបរិយាកាសនៃអាសូតរាវ ដែលបញ្ឈប់ដំណើរការមេតាបូលីសទាំងអស់ភ្លាមៗ។ បន្ទាប់មកបន្ទះសៀគ្វីត្រូវបានផលិតចេញពីវត្ថុដែលកក។ ការចម្លងត្រូវបានទទួលបានពីផ្ទៃនៃបន្ទះសៀគ្វីដោយអនុវត្តខ្សែភាពយន្តដែកទៅពួកគេ។ ខ្សែភាពយន្តទាំងនេះត្រូវបានពិនិត្យជាបន្តបន្ទាប់ក្រោមមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង។ អត្ថប្រយោជន៍នៃវិធីសាស្រ្តបំបែកដោយត្រជាក់គឺថា យន្តហោះបំបែកជាធម្មតាឆ្លងកាត់ដំណាក់កាល hydrophobic នៃភ្នាស ហើយនេះធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាពីបរិមាណ ទំហំ និងធម្មជាតិនៃការរៀបចំប្រូតេអ៊ីនភ្នាសអាំងតេក្រាល ពោលគឺដោយផ្ទាល់ពីអង្គការ morphobiochemical ខាងក្នុង។ នៃភ្នាស, នៅលើការបំបែក។ វិធីសាស្រ្តបានផ្តល់លទ្ធផលដ៏មានតម្លៃក្នុងការសិក្សាអំពីប្រភេទផ្សេងៗនៃរចនាសម្ព័ន្ធភ្នាស និងការបង្កើតពិសេស ឧទាហរណ៍ ប្រភេទមួយចំនួននៃទំនាក់ទំនងកោសិកា។

វិធីសាស្រ្ត cytochemical

សម្រាប់ភារកិច្ចចម្បងនៃទិដ្ឋភាពរចនាសម្ព័ន្ធ - ជីវគីមីនៃការស្រាវជ្រាវ cytological - បំភ្លឺពីសារៈសំខាន់មុខងារនៃរចនាសម្ព័ន្ធតាមរយៈការវិភាគនៃអង្គការជីវគីមីរបស់ពួកគេ - វិធីសាស្រ្ត cytochemical ដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់។ បច្ចុប្បន្ននេះ ពួកគេកំពុងត្រូវបានកែលម្អជាបន្តបន្ទាប់ទាំងក្នុងន័យនៃការកំណត់គុណភាពត្រឹមត្រូវនៃសមាសធាតុគីមីនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធដែលកំពុងសិក្សា និងក្នុងន័យនៃការវាយតម្លៃបរិមាណរបស់ពួកគេ។ ដោយប្រើឧបករណ៍ពិសេសដែលអនុញ្ញាតឱ្យ cytospectrophotometry បរិមាណ វាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីកំណត់មាតិកានៃសារធាតុដែលបានផ្តល់ឱ្យឧទាហរណ៍ RNA និង DNA មិនត្រឹមតែនៅក្នុងកោសិកាទាំងមូលប៉ុណ្ណោះទេថែមទាំងនៅកម្រិតនៃរចនាសម្ព័ន្ធនុយក្លេអ៊ែរឬ cytoplasmic ផងដែរ។ សូមអរគុណចំពោះការជ្រៀតជ្រែកមីក្រូទស្សន៍ វាអាចវាយតម្លៃបរិមាណប្រូតេអ៊ីនសរុបនៅក្នុងកោសិកា និងការផ្លាស់ប្តូររបស់វាក្នុងអំឡុងពេលនៃជីវិតរបស់វា។

មានវិធីសាស្រ្តនៃការកំណត់អត្តសញ្ញាណ cytochemical នៃអង់ស៊ីមដែលអនុញ្ញាតឱ្យមនុស្សម្នាក់វិនិច្ឆ័យមិនត្រឹមតែការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនិងបរិមាណនៃសមាសធាតុជាក់លាក់មួយនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែថែមទាំងដំណើរការនៃការសំយោគនិងការដឹកជញ្ជូន intracellular នៃសមាសធាតុទាំងនេះផងដែរ។

cytochemistry នៃអង់ស៊ីមគឺផ្អែកលើគោលការណ៍នៃអន្តរកម្មអង់ស៊ីមស្រទាប់ខាងក្រោមដោយប្រើសមាសធាតុសម្គាល់ដែល precipitate ។ ដោយកំណត់ការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្ម ហើយក្នុងករណីខ្លះ សកម្មភាពនៃប្រព័ន្ធអង់ស៊ីម យើងអាចវិនិច្ឆ័យការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃដំណើរការជីវគីមីមួយចំនួននៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា។

ស្វ័យ​ថត​រូប

វិធីសាស្ត្រ autoradiography ដូចជា cytochemistry នៃអង់ស៊ីម បើកលទ្ធភាពក្នុងការសិក្សាការសំយោគ និងការដឹកជញ្ជូនក្នុងកោសិកា ប៉ុន្តែក្នុងពេលតែមួយវាមានលទ្ធភាពកាន់តែទូលំទូលាយ។ វិធីសាស្ត្រ autograph គឺផ្អែកលើការប្រើប្រាស់សារធាតុវិទ្យុសកម្មមុនគេសម្រាប់ការសំយោគម៉ាក្រូម៉ូលេគុលដែលមានស្លាកអ៊ីសូតូបសិប្បនិម្មិត (3 H, 14 C, 35 S ។ល។)។ វាអនុញ្ញាតឱ្យមិនត្រឹមតែធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មទីតាំងនៃការសំយោគនៃ macromolecules ជាក់លាក់ប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែថែមទាំងដើម្បីតាមដានផ្លូវជាក់លាក់នៃការដឹកជញ្ជូន intracellular នៃសមាសធាតុទាំងនេះដើម្បីផ្តល់នូវការវាយតម្លៃបរិមាណទាក់ទងនៃអាំងតង់ស៊ីតេនៃការសំយោគនិងល្បឿននៃចលនានៃ macromolecules នៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា។ នៅក្នុងវិធីនេះជាពិសេសចលនានៃ RNA ពីស្នូលចូលទៅក្នុង cytoplasm នៃកោសិកាត្រូវបានបង្ហាញជាលើកដំបូងការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃការសំយោគនិងការដឹកជញ្ជូនខាងក្នុងនៃកោសិកាសម្ងាត់នៅក្នុងកោសិកា secretory ត្រូវបានតាមដានយ៉ាងលម្អិតនិងការពិតជាច្រើនទៀតដែលមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ទូទៅ។ cytology ត្រូវបានបង្ហាញ។ នៅស្នូលរបស់វា វិធីសាស្រ្តនេះគឺជាវិធីសាស្រ្តធម្មតាបំផុតមួយដែលមានលក្ខណៈនៃទិសដៅរចនាសម្ព័ន្ធ-ជីវគីមីនៃការស្រាវជ្រាវ ព្រោះវាអនុញ្ញាតឱ្យមនុស្សម្នាក់សិក្សាដោយផ្ទាល់នូវដំណើរការមេតាបូលីសនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងកោសិកានៅក្នុងកោសិកាដែលនៅដដែល និងមិនមានការខូចខាត (ដូចនៅក្នុងការសិក្សាជីវគីមី)។ ខ្លឹមសារនៃវិធីសាស្រ្តនេះគឺផ្អែកលើការរកឃើញនៃម៉ូលេគុលដែលមានស្លាកអ៊ីសូតូបសិប្បនិម្មិតដោយប្រើសារធាតុ emulsion រូបថត ដែលគ្របដណ្តប់ផ្នែកនៃកោសិកា និងជាលិកាដែលបានជួសជុលនៅពេលវេលាផ្សេងៗគ្នា បន្ទាប់ពីការណែនាំមុនគេដែលមានស្លាក។

វិធីសាស្រ្ត Immunocytochemical

បច្ចុប្បន្ននេះ ការវិភាគគុណភាពត្រឹមត្រូវបំផុតនៃប្រូតេអ៊ីនបុគ្គលនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកានៅក្នុងប្រព័ន្ធកោសិកាទាំងមូលគឺអាចធ្វើទៅបាន។ ការវិភាគនេះត្រូវបានអនុវត្តដោយប្រើវិធីសាស្រ្ត immunocytochemical ។ ខ្លឹមសារនៃវិធីសាស្រ្តទាំងនេះគឺថាប្រូតេអ៊ីនជាក់លាក់មួយបម្រើជាអង់ទីហ្សែនដែលអង្គបដិប្រាណជាក់លាក់ត្រូវបានផលិតនៅក្នុងខ្លួនរបស់ថនិកសត្វណាមួយ។ ក្រោយមកទៀតត្រូវបានផ្សំជាមួយថ្នាំជ្រលក់ fluorescent ឬសញ្ញាសម្គាល់ផ្សេងទៀត។ បន្ទាប់មកកោសិកាដែលកំពុងសិក្សាត្រូវបានព្យាបាលដោយសេរ៉ូមដែលមានអង្គបដិប្រាណដែលមានស្លាក។ អង្គបដិប្រាណដែលមានស្លាកជាក់លាក់ចងយ៉ាងតឹងរ៉ឹងជ្រើសរើសយ៉ាងតឹងរ៉ឹងទៅនឹងរចនាសម្ព័ន្ធដែលមានប្រូតេអ៊ីនដែលកំពុងសិក្សា។ ដោយប្រើវិធីសាស្រ្តនេះជាពិសេសការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃប្រូតេអ៊ីន contractile សំខាន់និងជំនួយនៃប្រព័ន្ធ actin-myosin នៅក្នុងបរិធាន submembrane fibrillar នៃកោសិកាត្រូវបានបង្ហាញហើយការកែប្រែនៃការចែកចាយរបស់ពួកគេក្នុងអំឡុងពេលនៃការបង្កើតឧបករណ៍ mitotic និងនៅក្នុងដំណើរការនៃ cytotomy ។ ត្រូវបានបង្ហាញ។ វិធីសាស្រ្តដូចគ្នានេះត្រូវបានប្រើដោយជោគជ័យដើម្បីបញ្ជាក់សុពលភាពនៃគំរូវត្ថុរាវ-mosaic នៃអង្គការភ្នាស។

វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវកោសិកាដ៏ទូលំទូលាយ

ថ្មីៗនេះ ជោគជ័យដ៏អស្ចារ្យជាពិសេសក្នុងការសិក្សាអំពីរចនាសម្ព័ន្ធ និងរចនាសម្ព័ន្ធជីវគីមីនៃកោសិកាត្រូវបានសម្រេចជាមួយនឹងការប្រើប្រាស់រួមបញ្ចូលគ្នានៃវិធីសាស្ត្រវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធ និងវិធីសាស្រ្តនៃ cytochemistry និង autoradiography ។ ជោគជ័យទាំងនេះគឺដោយសារតែការអភិវឌ្ឍនៃវិធីសាស្រ្តពិសេសនៃ cytochemistry និង autoradiography នៅកម្រិត ultrastructural ដែលធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីវិភាគដោយផ្ទាល់នូវដំណើរការមេតាប៉ូលីសនៅកម្រិតនៃកោសិកាដែលមានឈ្មោះថា "រចនាសម្ព័ន្ធ" ដំណើរការជីវគីមី និងស្វែងរកអត្ថន័យជាក់លាក់នៃ រចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាមួយចំនួននៅក្នុងតំណភ្ជាប់បុគ្គលនៃដំណើរការស្មុគស្មាញនៃការរំលាយអាហារក្នុងកោសិកា។ ក្នុងន័យនេះ សម្ភារៈយ៉ាងទូលំទូលាយត្រូវបានបង្គរលើតួនាទីនៃពូជផ្សេងៗនៃដំណាក់កាលភ្នាសនៃ cytoplasm ក្នុងដំណើរការសំយោគ anabolic និងដំណើរការនៃ catabolism intracellular ។

ភាពជឿនលឿនសំខាន់ៗត្រូវបានសម្រេចជាពិសេសក្នុងការសិក្សាអំពីការរៀបចំ និងការប្រព្រឹត្តទៅនៃបរិធាន lysosomal នៃកោសិកា។ អង្គហេតុថ្មីសំខាន់ៗត្រូវបានទទួលក្នុងអំឡុងពេលសិក្សាឧបករណ៍នុយក្លេអ៊ែរនៃកោសិកា។ ដោយប្រើវិធីសាស្រ្ត cytochemical វាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីកំណត់អត្តសញ្ញាណ ribonucleoproteins (RNPs) និង deoxyribonucleoproteins (DNPs) នៅកម្រិត ultrastructural ហើយដោយហេតុនេះធ្វើឱ្យមានការរីកចម្រើនគួរឱ្យកត់សម្គាល់ក្នុងការសិក្សាអំពីការរៀបចំប្រតិចារិក ភាពចាស់ទុំ និងការដឹកជញ្ជូន intranuclear នៃប្រភេទផ្សេងៗនៃ RNPs នៅក្នុងកោសិកា eukaryotic និងការប្រើប្រាស់។ នៃ autoradiography អេឡិចត្រូនិកធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីលម្អិតអំពីតួនាទីនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាបុគ្គលនៅក្នុងដំណើរការទាំងនេះ។ ជាឧទាហរណ៍ គេអាចសិក្សាលម្អិតអំពីមុខងាររបស់នុយក្លេអូល និងជាពិសេសរៀបចំរចនាសម្ព័ន្ធដំណើរការនៃការបង្កើត ribosomal RNA នៅក្នុងវា។

ការសំយោគនៃទិដ្ឋភាព និងវិធីសាស្រ្តជីវគីមីនៃរចនាសម្ព័ន្ធម៉ូលេគុល និងជីវគីមីក៏ជាតួយ៉ាងសម្រាប់ការបង្កើតសំណួរសំខាន់ៗជាច្រើនទៀតអំពីការរៀបចំដ៏ល្អនៃសមាសធាតុកោសិកានីមួយៗ។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ ទំនាក់ទំនងជិតស្និទ្ធរវាងម៉ូលេគុលជីវសាស្ត្រ និងការវិភាគ cytological morphobiochemical ត្រូវបានបង្ហាញមិនត្រឹមតែនៅក្នុងការសំយោគនៃលទ្ធផលចុងក្រោយប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែថែមទាំងនៅក្នុងអន្តរកម្មរបស់ពួកគេក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការស្រាវជ្រាវផងដែរ។ អន្តរកម្មបែបនេះត្រូវបានអនុវត្តដោយការអនុវត្តការងារស្មុគ្រស្មាញដោយប្រើទាំងវិធីសាស្រ្តគីមីជីវៈ និង cytological ដោយអ្នកឯកទេសខាងជីវគីមី និង cytologist ឬដោយប្រើវិធីសាស្រ្តស្មុគ្រស្មាញពិសេសដែលមានព្រំដែននៃការវិភាគជីវគីមី និង cytological នៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា។

ឧទាហរណ៏នៃប្រភេទទីមួយគឺការបញ្ចូលគ្នានៃវិធីសាស្រ្តនៃការបែងចែកគីមីជីវៈនៃសមាសធាតុកោសិកាជាមួយនឹងការវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធល្អរបស់វា។ នៅក្នុងវិធីនេះ រូបថតនៃហ្សែនដែលធ្វើការជាមួយនឹងការកំណត់អត្តសញ្ញាណ DNA, RNA polymerases និងម៉ូលេគុល RNA ដែលបានចម្លងត្រូវបានទទួលជាលើកដំបូង។ ការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនៃវិធីសាស្រ្តនេះឥឡូវនេះអនុញ្ញាតឱ្យនៅក្នុងករណីមួយចំនួនដើម្បីយកទៅក្នុងគណនីអាំងតង់ស៊ីតេនៃការចម្លងដោយរាប់ដោយផ្ទាល់ចំនួននៃ RNA polymerase complexes ។ ដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង មនុស្សម្នាក់អាចសិក្សាដោយផ្ទាល់នូវគំរូនៃការចម្លង DNA លើម៉ូលេគុល DNA រាងជារង្វង់ ឬលីនេអ៊ែរ ដែលដាច់ដោយឡែកពីគ្នាដោយវិធីសាស្ត្រជីវគីមី។ វិធីសាស្រ្តនៃការវិភាគលើរចនាសម្ព័ន្ធក៏ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុងការសិក្សា immunocytochemical នៃការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃប្រូតេអ៊ីនបុគ្គលនៅក្នុងភាគល្អិត ribosomal នៅក្នុងការសិក្សានៃកម្រិតផ្សេងៗនៃអង្គការ DNP និងនៅក្នុងករណីជាច្រើនទៀត។

ឧទាហរណ៍ធម្មតានៃវិធីសាស្រ្តស្មុគស្មាញដែលត្រូវបានអភិវឌ្ឍជាពិសេសគឺការបង្កាត់ DNA និង RNA នៅលើផ្នែក។ ខ្លឹមសាររបស់វាគឺដូចខាងក្រោម។ DNA ដែលជាផ្នែកមួយនៃ DNP នៃកោសិកាទាំងមូលត្រូវបាន denatured ហើយបន្ទាប់មកត្រូវបានដំណើរការដោយប្រភាគ RNA ដែលមានស្លាកជាមួយអ៊ីសូតូបវិទ្យុសកម្ម។ ជាលទ្ធផលនៃបញ្ហានេះ តំបន់នៅលើ DNA ត្រូវបានរកឃើញដោយស្វ័យប្រវតិ្តសាស្រ្ត ដែលបំពេញបន្ថែមទៅនឹងប្រភាគ RNA ទាំងនេះ ពោលគឺ គេហទំព័រនៃការចម្លងនៃក្រោយ ឬនិយាយម្យ៉ាងទៀត វាអាចកំណត់បានត្រឹមត្រូវនូវការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃហ្សែនជាក់លាក់។

នៅក្នុងវិធីសាស្រ្តពិសោធន៍ អង្គការមុខងារនៃកោសិកាទាំងមូល ឬធាតុផ្សំនីមួយៗរបស់វាត្រូវបានសិក្សាដោយការផ្លាស់ប្តូរស្ថានភាពរបស់វាដោយមានជំនួយពីឥទ្ធិពលខាងក្រៅ។ បន្ទាប់មកដោយការសង្កេតលើការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងសកម្មភាពសំខាន់នៃកោសិកា ឬសមាសធាតុរបស់វា នោះគេអាចធ្វើការសន្និដ្ឋានអំពីលក្ខណៈសម្បត្តិជាក់លាក់នៃយន្តការដែលកំពុងសិក្សា។ ប្រភេទនៃវិធីសាស្រ្តនេះឥឡូវនេះបានរីករាលដាលយ៉ាងខ្លាំងនៅក្នុងផ្នែកខ្លះនៃ cytology ហើយនៅក្នុងផ្នែកខ្លះនៃផ្នែករបស់វា ទិដ្ឋភាព cytophysiological នៃការវិភាគនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកានៅតែកាន់កាប់ទីតាំងលេចធ្លោមួយ។

នេះពិតជាស្ថានភាពនៃបញ្ហាទាក់ទងនឹងមុខងារដឹកជញ្ជូននៃបរិធានផ្ទៃក្រឡា។ ម៉្យាងវិញទៀត ការវិវឌ្ឍន៍ដ៏សំខាន់ត្រូវបានធ្វើឡើងក្នុងការសិក្សាអំពីបញ្ហានេះ៖ ដោយផ្អែកលើលទ្ធផលនៃការវិភាគ cytophysiological វាអាចកំណត់ប្រភេទនៃការដឹកជញ្ជូនសារធាតុ transmembrane និងកំណត់លក្ខណៈផ្សេងៗនៃប្រព័ន្ធដឹកជញ្ជូន។ ម៉្យាងវិញទៀតដំណោះស្រាយចុងក្រោយចំពោះសំណួរនៃយន្តការនៃការដឹកជញ្ជូនឆ្លងកាត់ភ្នាសគឺអាចធ្វើទៅបានលុះត្រាតែអង្គការជាក់លាក់នៃប្រព័ន្ធ lipid-protein នៃភ្នាសត្រូវបានបញ្ជាក់ និងចំណេះដឹងត្រឹមត្រូវអំពីលក្ខណៈសម្បត្តិ និងតួនាទីនៃសមាសធាតុដែលនៅសល់។ ប្រព័ន្ធដឹកជញ្ជូនភ្នាស ពោលគឺនៅការវិភាគកម្រិតរចនាសម្ព័ន្ធ-ជីវគីមីនៃភ្នាសប្លាស្មា និងបរិធានផ្ទៃទាំងមូលនៃកោសិកា។

សមត្ថភាពមានកម្រិតនៃការសិក្សា cytophysiological នៃការដឹកជញ្ជូន transmembrane ត្រូវបានបង្ហាញយ៉ាងច្បាស់ដោយស្ថានភាពនៃសំណួរនៃការរៀបចំបណ្តាញអ៊ីយ៉ុងដែលដើរតួយ៉ាងសំខាន់ក្នុងដំណើរការសំខាន់ៗជាច្រើនដូចជាការបន្តពូជនៃសរសៃប្រសាទ។ ដោយប្រើឃ្លាំងទាំងមូលនៃវិធីសាស្រ្ត cytophysiological ជាច្រើនវាត្រូវបានបង្ហាញថានៅក្នុងភ្នាសប្លាស្មាមានបណ្តាញពិសេសសម្រាប់ Na, K, Cl ions ដែលខុសគ្នានៅក្នុងលក្ខណៈសម្បត្តិរបស់ពួកគេ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ចំណេះដឹងជាក់លាក់នៃអង្គការរចនាសម្ព័ន្ធរបស់ពួកគេ រហូតមកដល់ពេលនេះត្រូវបានកំណត់ចំពោះទិន្នន័យដោយប្រយោលអំពីធម្មជាតិប្រូតេអ៊ីនរបស់ពួកគេ។ ដូច្នេះដំណោះស្រាយចំពោះសំណួរនៃការរៀបចំបណ្តាញអ៊ីយ៉ុងជាពិសេសនិងប្រព័ន្ធដឹកជញ្ជូនភ្នាសជាទូទៅឆ្លងកាត់ជាក់ស្តែងទៅក្នុងដៃរបស់អ្នកវិទ្យាសាស្ត្រដែលស្ទាត់ជំនាញក្នុងវិធីសាស្រ្តរចនាសម្ព័ន្ធនិងជីវគីមីពីព្រោះក្នុងករណីនេះការពិតជាច្រើននិងមានតម្លៃណាស់ដែលទទួលបាននៅក្នុង cytophysiological ។ ការសិក្សាតំណាងឱ្យតែដំណាក់កាលបាតុភូតដំបូងក្នុងការវិភាគនៃយន្តការកោសិកាទូទៅទាំងនេះ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយនៅក្នុងទិដ្ឋភាពមួយចំនួននៃការសិក្សាអំពីកោសិកា វិធីសាស្រ្ត cytophysiological អាចផ្តល់នូវច្រើន។

បច្ចុប្បន្ននេះ ភាពខុសគ្នានៃបច្ចេកទេសស្រាវជ្រាវ cytophysiological ត្រូវបានកំណត់ដោយទាំងឃ្លាំងអាវុធដែលតែងតែកើនឡើងនៃភ្នាក់ងារដែលអាចរកបានសម្រាប់ cytologist និងដោយការប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្តដ៏កម្រសម្រាប់ការវិភាគការផ្លាស់ប្តូរដែលកើតឡើងជាលទ្ធផលនៃសកម្មភាពរបស់ភ្នាក់ងារទាំងនេះនៅលើកោសិកា។ កាលពីមុន ដើម្បីវិភាគការផ្លាស់ប្តូរកោសិកាក្រោមឥទ្ធិពលនៃភ្នាក់ងារខាងក្រៅ វិធីសាស្ត្រដែលធ្លាប់ស្គាល់ចំពោះអ្នកសរីរវិទ្យាត្រូវបានគេប្រើ ដូចជាការកត់ត្រាសក្តានុពលអគ្គិសនី ការវាយតម្លៃការដកដង្ហើមកោសិកាដោយការស្រូបអុកស៊ីសែន ការវាយតម្លៃបរិមាណនៃការជ្រលក់ពណ៌ ការកត់ត្រាការផ្លាស់ប្តូរគុណភាពនៃស្ថេរភាពកោសិកា។ល។ បន្ទាប់មកឥឡូវនេះ សម្រាប់គោលបំណងស្រដៀងគ្នា វិធីសាស្រ្តលក្ខណៈនៃទិសដៅមុខងាររចនាសម្ព័ន្ធត្រូវបានប្រើប្រាស់កាន់តែខ្លាំងឡើង៖ ការសិក្សាមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងនៃការផ្លាស់ប្តូររចនាសម្ព័ន្ធអ៊ុលត្រាសោន ការវិភាគ autoradiographic នៃដំណើរការសំយោគ។ល។

ក្នុងចំណោមភ្នាក់ងារដែលប្រើក្នុងការសិក្សាពិសោធន៍ ក្រុមសំខាន់ពីរអាចត្រូវបានសម្គាល់។ ក្រុមទី 1 មានសារធាតុដែល "ចំណុចនៃការអនុវត្ត" នៅខាងក្នុងកោសិកាត្រូវបានគេស្គាល់ច្រើនឬតិច - ទាំងនេះគឺជាសារធាតុដែលរារាំងផ្នែកនីមួយៗនៃការរំលាយអាហារក្នុងកោសិកា (ឧទាហរណ៍ actinomycin D ដែលរារាំងការចម្លងឬ puromycin ដែលរារាំងការសំយោគប្រូតេអ៊ីន។ 2,4-dinitrophenol ដែលរារាំងការដកដង្ហើម និង phosphorylation អុកស៊ីតកម្ម) សារធាតុដែលជ្រើសរើសបំផ្លាញរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាមួយចំនួន (ឧទាហរណ៍ colchicine ដែលបំផ្លាញ microtubules ឬ cytochalasin B ដែលធ្វើសកម្មភាពលើ microfibrils) ។ ក្រុមទី 2 មានភ្នាក់ងារនៃសកម្មភាពស្មុគ្រស្មាញដែលផ្លាស់ប្តូរការរំលាយអាហារកោសិកាជាទូទៅ - សីតុណ្ហភាពសម្ពាធ osmotic pH ជាដើម។ ការប្រើប្រាស់ភ្នាក់ងារដូចជាឧទាហរណ៍ 2,4-dinitrophenol ធ្វើឱ្យវាអាចបញ្ជាក់ បញ្ហាមួយចំនួនដែលទាក់ទងនឹងការភ្ជាប់គ្នានៃការដកដង្ហើម និងផូស្វ័រនៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ផ្លូវដង្ហើមនៃ mitochondria; ការប្រើប្រាស់ RNA និងថ្នាំទប់ស្កាត់ការសំយោគប្រូតេអ៊ីនបានធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាផ្នែកខ្លះនៃការសំយោគប្រូតេអ៊ីននៅក្នុង ribosomes និងដំណើរការចម្លង។ ដោយមានជំនួយពី colchicine និង cytochalasin តួនាទីរបស់ microtubules និង microfilaments នៅក្នុងដំណើរការនៃការដឹកជញ្ជូន intracellular ត្រូវបានបញ្ជាក់ឱ្យច្បាស់លាស់។

ភ្នាក់ងារនៃក្រុមទីពីរ (សកម្មភាពស្មុគ្រស្មាញ) មានគុណសម្បត្តិដែលពួកវាមានលក្ខណៈធម្មជាតិជាងសម្រាប់កោសិកាព្រោះកោសិកាដែលស្ថិតនៅក្រោមលក្ខខណ្ឌធម្មជាតិជួបប្រទះនឹងការផ្លាស់ប្តូរស្រដៀងគ្នានៅក្នុងបរិយាកាសខាងក្រៅ។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះពួកវាប៉ះពាល់ដល់ស្ទើរតែគ្រប់ទិដ្ឋភាពទាំងអស់នៃការរំលាយអាហារកោសិកាដែលធ្វើឱ្យពិបាកក្នុងការវិភាគការផ្លាស់ប្តូរដែលកើតឡើង។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ការសិក្សាអំពីឥទ្ធិពលនៃភ្នាក់ងារបែបនេះលើកោសិកាគឺមានសារៈសំខាន់ដោយឯករាជ្យ ហើយពិតជាចាំបាច់សម្រាប់ការសិក្សាអំពីយន្តការនៃការសម្របខ្លួនរបស់កោសិកាទៅនឹងការផ្លាស់ប្តូរកត្តាបរិស្ថាន ការដោះស្រាយបញ្ហានៃទំនាក់ទំនងរវាងដំណើរការជាក់លាក់និងមិនជាក់លាក់នៅក្នុងប្រតិកម្មនៃកោសិកាទៅនឹង ឥទ្ធិពលខាងក្រៅ និងកិច្ចការស្រដៀងគ្នាផ្សេងទៀត ដែលដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់ក្នុងការអភិវឌ្ឍបញ្ហានៃការរួមបញ្ចូលកោសិកា។

នៅក្នុងការសិក្សាអំពីការរៀបចំមុខងារនៃកោសិកា ការវិភាគនៃយន្តការនៃអន្តរកម្មរវាងប្រព័ន្ធកោសិកានីមួយៗមានសារៈសំខាន់ណាស់។ ក្នុងករណីជាច្រើនបញ្ហានេះអាចត្រូវបានដោះស្រាយដោយការបង្កើតគំរូពិសោធន៍ពិសេស។ ឧទាហរណ៍ធម្មតាបំផុតនៃប្រភេទនេះគឺការប្តូរនុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុងវត្ថុផ្សេងៗគ្នា (ប្រូហ្សូអា ស៊ុត amphibian); ការបង្កាត់កោសិកា somatic; ការប្តូរផ្នែកកោសិកាពីប្រូតូហ្សូអា; ការសិក្សាដោយប្រើប្រាស់បច្ចេកទេសមីក្រូវះកាត់មួយចំនួនផ្សេងទៀត ធ្វើឡើងលើវត្ថុប្រូតូហ្សូល និងកោសិកាថនិកសត្វដែលដាំដុះនៅក្នុងវីត្រូ។

ដោយមានជំនួយពីគំរូបែបនេះបញ្ហា cytological ទូទៅសំខាន់បំផុតត្រូវបានសិក្សា។ ជាឧទាហរណ៍ លទ្ធផលនៃការពិសោធន៍លើការស្ទូងស្នូលនៃកោសិកា amphibian ខុសគ្នាចូលទៅក្នុងស៊ុតដែលគ្មានស្នូលរបស់វាបានផ្តល់អំណះអំណាងមួយដែលគួរឱ្យជឿជាក់បំផុតក្នុងការពេញចិត្តចំពោះទ្រឹស្តីនៃសកម្មភាពហ្សែនឌីផេរ៉ង់ស្យែល។ ខ្លឹមសារនៃចុងក្រោយគឺការបង្កើតអត្តសញ្ញាណរចនាសម្ព័ន្ធនៃហ្សែននៃកោសិកាដែលខុសគ្នានៃសារពាង្គកាយពហុកោសិកា។ ពីនេះធ្វើតាមសំណើសំខាន់ជាមូលដ្ឋានដែលថាដំណើរការនៃភាពខុសគ្នាកើតឡើងមិនមែនតាមរយៈការផ្លាស់ប្តូរដែលមិនអាចត្រឡប់វិញបាននៅក្នុងឧបករណ៍តំណពូជនៃកោសិកានោះទេប៉ុន្តែតាមរយៈបទប្បញ្ញត្តិនៃសកម្មភាពនៃសំណុំហ្សែនដែលដូចគ្នាសម្រាប់កោសិកាទាំងអស់នៃសារពាង្គកាយដែលបានផ្តល់ឱ្យ។

ការពិតគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ត្រូវបានគេរកឃើញនៅក្នុងគំរូពិសោធន៍មួយសម្រាប់សិក្សាពីដំណើរការនៃការបែងចែកកោសិកាកូនកាត់ - erythrocyte មាន់ និងកោសិកាមហារីកថនិកសត្វ។ ភាពប្លែកនៃ heterokaryon នេះគឺថានៅពេលដែល erythrocyte មាន់មួយបញ្ចូលគ្នាជាមួយកោសិកាមហារីក hemoglobin hemolysis កើតឡើង ហើយស្នូល erythrocyte ធម្មតាដែលស្ទើរតែអសកម្មនឹងបញ្ចប់នៅក្នុង cytoplasm នៃកោសិកាមហារីក។ ដូច្នេះ នៅទីនេះ ស្នូលដែលខុសប្លែកគ្នាមួយត្រូវបានប្តូរទៅក្នុងលក្ខខណ្ឌមិនធម្មតានៃ cytoplasm សកម្ម។ ការសង្កេតដោយប្រុងប្រយ័ត្ននៃការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងអង្គការរចនាសម្ព័ន្ធនៃស្នូលទាំងនេះបានបង្ហាញថានៅក្រោមលក្ខខណ្ឌថ្មីមានការកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃបរិមាណរបស់វា។ ប្រូតេអ៊ីនដែលចេញមកពី cytoplasm ដើរតួយ៉ាងសំខាន់ក្នុងការហើមនុយក្លេអ៊ែរ។ ការផ្លាស់ប្តូរខាងក្រៅទាំងនេះនៅក្នុងបរិធាននុយក្លេអ៊ែរនៃ erythrocyte ឆ្លុះបញ្ចាំងពីដំណើរការដ៏ស៊ីជម្រៅនៃការរៀបចំរចនាសម្ព័ន្ធផ្ទៃក្នុងរបស់ខ្លួន ដែលនាំឱ្យមានការបន្តការចម្លងនៃ RNAs អ្នកនាំសារ "មាន់" ឡើងវិញ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយការអនុវត្តព័ត៌មានដែលមាននៅក្នុងវាក្នុងទម្រង់នៃការសំយោគប្រូតេអ៊ីន "សាច់មាន់" មិនកើតឡើងទេរហូតទាល់តែ nucleolus ត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅក្នុងបរិធាននុយក្លេអ៊ែរនៃ erythrocytes មាន់ ហើយការសំយោគនៃ ribosomal RNA ចាប់ផ្តើម។ ដូច្នេះការវិភាគហ្មត់ចត់នៃគំរូពិសោធន៍បានបង្ហាញពីវត្តមាននៃការគ្រប់គ្រង cytoplasmic ស្មុគស្មាញលើសកម្មភាពរបស់ឧបករណ៍នុយក្លេអ៊ែរ។

ដោយមានជំនួយពីគំរូពិសោធន៍ វាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហា cytological ទូទៅសំខាន់ៗមួយចំនួនទៀត។ ឧទាហរណ៍ សំណួរនៃយន្តការនៃចលនានៃក្រូម៉ូសូមអាណាផាសត្រូវបានសិក្សាដោយជោគជ័យលើឧបករណ៍ mitotic ដើមដែលដាច់ឆ្ងាយពី blastomeres ដែលបែកខ្ញែកនៃ urchin សមុទ្រ និងដំណើរការនៅខាងក្រៅកោសិកា។ ជាចម្បងដោយប្រើគំរូពិសោធន៍ វាអាចបង្កើតគំរូទូទៅនៃការរៀបចំកោសិកា ពោលគឺអវត្ដមាននៃគោលការណ៍មូលហេតុ និងផលប៉ះពាល់ដ៏តឹងរឹងក្នុងការភ្ជាប់ទំនាក់ទំនងគ្នានៃដំណើរការខាងក្នុងស្មុគស្មាញ។ វាបានប្រែក្លាយថាដំណើរការពហុផ្នែកដូចជាការបន្តពូជកោសិកា ដំណើរការនៃការសំយោគ និងការដឹកជញ្ជូនខាងក្នុងកោសិកានៃសមាសធាតុប៉ូលីម៊ែរខ្ពស់ជាដើម មានដំណាក់កាលដាច់ដោយឡែក ស្វយ័តដែលទាក់ទងគ្នា មិនត្រូវបានភ្ជាប់ដោយទំនាក់ទំនងបុព្វហេតុ និងផលប៉ះពាល់ដ៏តឹងរឹងនោះទេ។ ការបំភ្លឺនៃគំរូនេះនៅលើដៃមួយបង្កើតតម្រូវការជាមុនសម្រាប់ការយល់ដឹងអំពីយន្តការនៃប្លាស្ទិចដ៏អស្ចារ្យនៃអង្គការកោសិកា។ ម្យ៉ាងវិញទៀត គំរូដូចគ្នានេះគឺជាមូលដ្ឋានសម្រាប់សិក្សាពីយន្តការនៃការរួមបញ្ចូលនៃដំណើរការបែបនេះនៅក្នុងប្រព័ន្ធកោសិកាទាំងមូលក្រោមលក្ខខណ្ឌធម្មតា។

បច្ចុប្បន្ននេះចំនួន និងភាពខុសគ្នានៃគំរូពិសោធន៍ដែលបានរចនាឡើងដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហា cytological ជាក់លាក់ជាក់លាក់មួយចំនួនកំពុងកើនឡើង។ នេះរួមចំណែកយ៉ាងសំខាន់ដល់វឌ្ឍនភាពនៃចំណេះដឹងរបស់យើងនៅក្នុងតំបន់ដែលសិក្សាតិចតួចនៃ cytology - យន្តការនៃអន្តរកម្មនិងការរួមបញ្ចូលនៃការងារនៃប្រព័ន្ធកោសិការង។

វាត្រូវតែត្រូវបានសង្កត់ធ្ងន់ថាភាពជាក់លាក់នៃការស្រាវជ្រាវដែលបានធ្វើឡើងនៅក្នុងក្របខ័ណ្ឌនៃវិធីសាស្រ្តពិសោធន៍ចំពោះការវិភាគនៃគំរូនៃអង្គការកោសិកាគឺជាការធ្វើឱ្យស៊ីជម្រៅកាន់តែខ្លាំងឡើងនៃលក្ខណៈវិនិច្ឆ័យ និងលក្ខណៈដែលការវិភាគនៃយន្តការរួមបញ្ចូល និងមុខងារជាក់លាក់នៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកានីមួយៗ។ ក្នុងពេលជាមួយគ្នានេះ វាច្បាស់ណាស់ថាដំណោះស្រាយជោគជ័យនៃបញ្ហាដែលកំពុងប្រឈមនឹងការស្រាវជ្រាវគឺអាចធ្វើទៅបានលុះត្រាតែមានការណែនាំយ៉ាងទូលំទូលាយទៅក្នុងការអនុវត្តនៃវិធីសាស្រ្តនៃវិធីសាស្រ្តរចនាសម្ព័ន្ធ-មុខងារ។

ខ្លឹមសារនៃវិធីសាស្រ្ត cytological ប្រៀបធៀបនៃការស្រាវជ្រាវនៅក្នុង cytology ទូទៅគឺដើម្បីបញ្ជាក់អំពីគំរូទូទៅនៃការរៀបចំកោសិកាដោយប្រើប្រភេទទាំងមូលនៃពូជរបស់ពួកគេដែលបានផ្តល់ឱ្យអ្នកវិទ្យាសាស្ត្រដោយធម្មជាតិរស់នៅ។ វិធីសាស្រ្តប្រៀបធៀបមានទិដ្ឋភាពពីរ។ ម្យ៉ាងវិញទៀត វាត្រូវបានគេប្រើជាប្រពៃណីដើម្បីកំណត់ទំនាក់ទំនងដែលទាក់ទងគ្នារវាងប្រភេទកោសិកានីមួយៗ (ជាពិសេសសម្រាប់សារពាង្គកាយកោសិកាតែមួយ)។ ដោយផ្អែកលើប្រព័ន្ធ phylogenetic នៃកោសិកា eukaryotic ទាប និងខ្ពស់ដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងតាមរបៀបនេះ និងអនុវត្តដោយលក្ខណៈវិនិច្ឆ័យ cytological ស្រាល វាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីតាមដានការបង្កើតប្រព័ន្ធកោសិកាឯកជនទាំងពីរ និងយន្តការទូទៅនៃបទប្បញ្ញត្តិ និងការរួមបញ្ចូលកោសិកាជា ជាឧទាហរណ៍ ប្រភេទនៃការអនុវត្តការវិភាគ cytological ប្រៀបធៀបនៅក្នុងការស្រាវជ្រាវកោសិកាអាចផ្តល់នូវទិន្នន័យគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍អំពីការរៀបចំដ៏ល្អនៃបរិធាននុយក្លេអ៊ែរនៅក្នុងកោសិកា prokaryotic ទាប និងខ្ពស់ជាង eukaryotic ។

លក្ខណៈពិសេសជាមូលដ្ឋាននៃការរៀបចំបរិធាននុយក្លេអ៊ែរនៃកោសិកា eukaryotic គឺវត្តមាននៃឧបករណ៍ផ្ទៃស្មុគស្មាញនៃស្នូលដែលជាចំនួនដ៏ធំនៃ DNA ដែលប្រមូលផ្តុំនៅក្នុងក្រូម៉ូសូមបើប្រៀបធៀបទៅនឹងកោសិកា prokaryotic ហើយទីបំផុតការវេចខ្ចប់តែមួយគត់នៃ DNA ដោយប្រើ ប្រូតេអ៊ីនសំខាន់ៗ - អ៊ីស្តូន ការវិភាគស៊ីតូឡូស៊ីប្រៀបធៀបនៃបរិធាននុយក្លេអ៊ែរនៃ eukaryotes ទាបបានធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់អត្តសញ្ញាណក្នុងចំណោមកោសិកាទាំងនោះ ដែលនៅក្នុងលក្ខខណ្ឌនៃរចនាសម្ព័ន្ធនុយក្លេអ៊ែរកាន់កាប់ទីតាំងមធ្យមរវាងកោសិកា pro- និង eukaryotic ។ ពាសដែក flagellates មានបរិធាននុយក្លេអ៊ែរផ្ទៃធម្មតា ប៉ុន្តែក្រូម៉ូសូមរបស់ពួកគេ ដូចជានៅក្នុងករណីនៃ prokaryotes ត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយម៉ូលេគុល DNA រាងជារង្វង់ ដែលត្រូវបានរៀបចំជារចនាសម្ព័ន្ធបង្រួមដោយគ្មានការចូលរួមពីអ៊ីស្តូន លក្ខណៈនៃ eukaryotes ទាំងអស់។

ថ្មីៗនេះ ពាក់ព័ន្ធនឹងការរកឃើញនៃលក្ខណៈជាមូលដ្ឋាននៅក្នុងការរៀបចំហ្សែននៃកោសិកា pro- និង eukaryotic ការប្រៀបធៀបដំណើរការនៃប្រតិចារិកនិងភាពចាស់ទុំ RNA នៅក្នុងសារពាង្គកាយទាំងនេះ ក៏ដូចជានៅក្នុង mesokaryotes និងកោសិកានៃ eukaryotes ទាបបានក្លាយជាសារៈសំខាន់។ ជាលទ្ធផលនៃការប្រៀបធៀបបែបនេះ វាអាចទៅរួចដែលថានឹងមានការផ្លាស់ប្តូរគួរឱ្យកត់សម្គាល់ចំពោះគំនិតប្រពៃណីរបស់យើងអំពីទំនាក់ទំនងគ្រួសារនៅក្នុងក្រុមសំខាន់ៗនៃសារពាង្គកាយ និងជាពិសេសទំនាក់ទំនងរវាងកោសិកា pro- និង eukaryotic ។

ឧទាហរណ៍ទីពីរនៃការអនុវត្តបែបប្រពៃណីនៃវិធីសាស្រ្តវិវត្តន៍ចំពោះបញ្ហា cytological អាចជាការប៉ុនប៉ងដើម្បីស្នើសម្មតិកម្មសម្រាប់ភាពស្មុគស្មាញនៃយន្តការនៃការបែងចែកក្រូម៉ូសូមដែលស្មើគ្នារវាងកោសិកាកូនស្រីនៅក្នុងដំណើរការនៃការវិវត្តន៍ ដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយផ្អែកលើការវិភាគប្រៀបធៀបនៃ វ៉ារ្យ៉ង់ជាច្រើននៃការបង្វែរក្រូម៉ូសូមនៅក្នុង protozoa និងរុក្ខជាតិទាប។ នៅក្នុងករណីទាំងនេះ ភ្នាសភ្នាសនុយក្លេអ៊ែរចូលរួមចំណែកយ៉ាងសកម្មក្នុងដំណើរការនៃការបែងចែកក្រូម៉ូសូម ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានភាពដូចគ្នាជាក់លាក់ជាមួយកោសិកា prokaryotic ដែលក្នុងនោះភ្នាសកោសិកាដើរតួនាំមុខគេក្នុងការចែកចាយក្រូម៉ូសូមបងស្រីរវាងកោសិកាកូនស្រី។

ជាចុងក្រោយ គំរូទីបីនៃវិធីសាស្រ្តវិវត្តន៍បែបប្រពៃណីចំពោះបញ្ហា cytological ទូទៅអាចជាសម្មតិកម្ម symbiotic រីករាលដាលនៃប្រភពដើមនៃ mitochondria និង chloroplasts ។ ខ្លឹមសាររបស់វាស្ថិតនៅក្នុងការសន្មត់ថាសរីរាង្គសំខាន់ៗនៃការរំលាយអាហារថាមពលទាំងនេះបានកើតចេញពីសារពាង្គកាយ prokaryotic ដែលបានលុកលុយកោសិកា eukaryotic នៅដំណាក់កាលដំបូងនៃការវិវត្តន៍នៃ eukaryotes ។

ទោះបីជាមានសារៈសំខាន់នៃសំណង់ជីវសាស្ត្រទូទៅប្រភេទនេះសម្រាប់ការអភិវឌ្ឍនៃ cytology ទូទៅ វិធីសាស្រ្តប្រវត្តិសាស្រ្តបែបប្រពៃណីចំពោះការអភិវឌ្ឍនៃបញ្ហា cytological ទូទៅឥឡូវនេះនៅតែមានការប្រើប្រាស់តិចតួច។ មូលហេតុចម្បងមួយសម្រាប់ស្ថានភាពនេះគឺវត្តមាននៃលក្ខណៈពិសេសជាក់លាក់ និងមិនទាន់បានសិក្សាគ្រប់គ្រាន់នៃដំណើរការវិវត្តន៍នៅកម្រិតកោសិកា និងកោសិការងនៃអង្គការ ដែលធ្វើឱ្យវាពិបាកខ្លាំងណាស់ក្នុងការកំណត់ទំនាក់ទំនងដែលពាក់ព័ន្ធរវាងក្រុមបុគ្គលនៃសារពាង្គកាយឯកតា ហើយជាលទ្ធផល។ ដើម្បីបង្កើតសម្មតិកម្មថ្មីនៃការវិវត្តន៍ជាក់ស្តែងនៅក្នុងវិស័យ cytology ទូទៅ។

បច្ចុប្បន្ននេះ ទិដ្ឋភាពមួយផ្សេងទៀតនៃការប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រ cytological ប្រៀបធៀបគឺកាន់តែរីករាលដាល ដែលមិនបន្តគោលដៅនៃការបកស្រាយដោយផ្ទាល់នូវលក្ខខណ្ឌប្រវត្តិសាស្ត្រនៃរចនាសម្ព័ន្ធ ឬដំណើរការកោសិកាជាក់លាក់មួយ។ នៅក្នុង cytology ទូទៅសម័យទំនើប ទិដ្ឋភាពនៃការប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្តប្រៀបធៀបនេះបានឆ្លងកាត់ការកែប្រែជាច្រើន។

នៅដំណាក់កាលដំបូងក្នុងអំឡុងពេលនៃការណែនាំវិធីសាស្រ្ត morphobiochemical ថ្មីជាមូលដ្ឋានទៅក្នុងការអនុវត្តនៃការវិភាគ cytological ជម្រើសនៃវត្ថុនៃការសិក្សាត្រូវបានកំណត់ដោយការពិចារណាដូចខាងក្រោម។ ទីមួយភាពងាយស្រួលនៃវត្ថុជាក់លាក់មួយសម្រាប់ការអនុវត្តវិធីសាស្រ្តដែលបានប្រើគឺមានសារៈសំខាន់។ ទីពីរ កម្រិតនៃការបញ្ចេញមតិនៃសញ្ញានេះនៅក្នុងកោសិកាដែលកំពុងសិក្សាបានដើរតួនាទីយ៉ាងសំខាន់។ ដូច្នេះ ដើម្បីសិក្សាពីច្បាប់ទូទៅនៃការរៀបចំកោសិកា eukaryotic វត្ថុដែលចូលចិត្តគឺកោសិកាថ្លើមថនិកសត្វ ជាមួយនឹងប្រព័ន្ធបង្កើតភាពចុះសម្រុងគ្នានៃសារពាង្គកាយភ្នាស។ ការងារបុរាណលើការវិភាគនៃដំណើរការនៃការដឹកជញ្ជូនខាងក្នុង និងភាពចាស់ទុំនៃសំងាត់ត្រូវបានអនុវត្តលើកោសិកាលំពែង និង mucous ។ កោសិកា goblet ថនិកសត្វ។

Escherichia coli ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការសិក្សាជីវសាស្ត្រ cytological និងម៉ូលេគុលស្មុគស្មាញនៃអង្គការនៃកោសិកា prokaryotic; គំរូសម្រាប់សិក្សាការរៀបចំនៃ eukaryotes ទាបគឺ yeast និងផ្សិត។ វាបានប្រែក្លាយថាលំនាំដែលបានបង្កើតឡើងនៅក្នុងវត្ថុទាំងនេះមានសារៈសំខាន់ជាសកល ចាប់តាំងពីក្នុងករណីជាច្រើនពួកវាមានលក្ខណៈស្រដៀងគ្នាជាមូលដ្ឋាននៅក្នុងកោសិកា eukaryotic ឬ prokaryotic ទាំងអស់។ លើសពីនេះទៅទៀត គំរូមួយចំនួននៃអង្គការកោសិការង ជាពិសេសនៅកម្រិតម៉ូលេគុល និង supramolecular បានប្រែក្លាយទៅជាសកលសម្រាប់កោសិកាទាំងប្រភេទ pro- និង eukaryotic (ការរៀបចំភ្នាស គោលការណ៍នៃរចនាសម្ព័ន្ធ ribosome ។ល។) ទោះបីជាការពិតក៏ដោយ។ ថាប្រភេទក្រឡាដែលមានឈ្មោះខុសគ្នាជាមូលដ្ឋានពីគ្នាទៅវិញទៅមកក្នុងន័យមួយចំនួន។ កាលៈទេសៈនេះបានបង្កើតឱ្យមានគំនិតដែលថាវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីអភិវឌ្ឍបញ្ហា cytological ទូទៅជាមូលដ្ឋាននៅលើជួរមានកំណត់នៃវត្ថុដែលងាយស្រួលតាមទស្សនៈវិធីសាស្រ្តហើយបន្ទាប់មកពង្រីកលំនាំដែលបានបង្កើតឡើងទៅកោសិកាផ្សេងទៀតដោយសារតែអង្គការស្រដៀងគ្នាជាមូលដ្ឋានរបស់ពួកគេ។

ទោះបីជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ក្នុងប៉ុន្មានឆ្នាំថ្មីៗនេះ ការប្រើប្រាស់ដ៏សាមញ្ញនៃវិធីសាស្រ្តប្រៀបធៀបនេះ បានចាប់ផ្តើមត្រូវបានរិះគន់ថា វិធីសាស្រ្ត cytological ទំនើបត្រូវបានណែនាំទៅក្នុងវិទ្យាសាស្ត្រជីវសាស្រ្តពិសេសនៃកោសិកា - cytology ពិសេស protozoology និងរុក្ខសាស្ត្រនៃរុក្ខជាតិទាប។ ការវិភាគ morphobiochemical ដែលប្រើក្នុងផ្នែកនៃវិទ្យាសាស្ត្រទាំងនេះបានធ្វើឱ្យវាអាចបង្កើតការពិតដែលបង្ហាញពីភាពចម្រុះដ៏ធំនៅក្នុងការអនុវត្តជាក់លាក់នៃលក្ខណៈទូទៅមួយឬមួយផ្សេងទៀតនៃអង្គការកោសិកា ភាពចម្រុះច្រើនជាងការធ្វើតាមពីលទ្ធផលដែលទទួលបានមុនលើវត្ថុ "គំរូ"។ ភាពចម្រុះនេះគឺអស្ចារ្យជាពិសេសនៅកម្រិតប្រព័ន្ធរង និងប្រព័ន្ធខ្ពស់បំផុតនៃអង្គការកោសិកា។ វាក៏ជាតួយ៉ាងសម្រាប់ដំណើរការស្មុគ្រស្មាញ និងពហុសមាសភាគ ដូចជាដំណើរការនៃដំណើរការមេតាបូលីសក្នុងកោសិកា និងការដឹកជញ្ជូន ឬការចែកចាយតំណពូជស្មើគ្នានៃសម្ភារៈហ្សែនក្នុងអំឡុងពេលការបែងចែកកោសិកា។

ការធ្វើទូទៅនៃបរិមាណដ៏ធំនៃសម្ភារៈ cytological ប្រៀបធៀបដែលទទួលបាននៅកម្រិតនៃសមត្ថភាពវិធីសាស្រ្តទំនើបបានបង្ខំឱ្យយើងបោះបង់ចោលគំនិតសាមញ្ញដែលបានរៀបរាប់ខាងលើនៃតួនាទីនៃវិធីសាស្រ្តប្រៀបធៀប។ ក្នុងន័យនេះនៅក្នុង cytology ទូទៅ (ជាពិសេសទាក់ទងទៅនឹងកោសិកា eukaryotic) ទីតាំងលេចធ្លោត្រូវបានទទួលបានដោយគំនិតនៃតម្រូវការក្នុងការប្រើវិធីសាស្រ្តប្រៀបធៀបសម្រាប់ការវិភាគនៃប្រព័ន្ធកោសិកាបុគ្គលឬដំណើរការដែលស្រដៀងគ្នានៅក្នុងមុខងារ។ សកម្មភាពនៅក្នុងភាពចម្រុះនៃការបង្ហាញរបស់ពួកគេនៅក្នុងកោសិកាជាក់លាក់។ ជាមួយនឹងវិធីសាស្រ្តនេះ ភាពវៃឆ្លាតពិសេសគឺមិនត្រូវបានបង្កឡើងដោយកោសិកា "ធម្មតា" "មធ្យម" នោះទេ ប៉ុន្តែផ្ទុយទៅវិញដោយកោសិកាដែលខុសគ្នាយ៉ាងខ្លាំងពីប្រភេទមធ្យមនៃអង្គការ។ កោសិកា​ដែល​លក្ខណៈ​មួយ​ចំនួន​ត្រូវ​បាន​ hypertrophied ។

ចំនួនដ៏ធំបំផុតនៃបំរែបំរួល "គេចចេញ" បែបនេះត្រូវបានរកឃើញក្នុងចំណោមកោសិកានៃសារពាង្គកាយពហុកោសិកាខ្ពស់ ដែលជាកន្លែងឯកទេសទូលំទូលាយនៃកោសិកានៅក្នុងប្រព័ន្ធជាលិកានីមួយៗត្រូវបានបង្កើតឡើង។ ករណីនៃ "ការគេចវេស" ពីប្រភេទមធ្យមក៏រីករាលដាលផងដែរក្នុងចំណោមប្រូតូហ្សូអាខ្ពស់ជាង ដែលបានឆ្លងកាត់ការវិវត្តន៍ ខណៈពេលដែលរក្សាបាននូវកម្រិតនៃអង្គការតែមួយ។ វាគឺជាអំឡុងពេលនៃការសិក្សាអំពីប្រភេទកោសិកា atypical នេះ ដែលវាអាចកំណត់អត្តសញ្ញាណការពិតគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍ថ្មីៗមួយចំនួនធំ ដែលធ្វើឲ្យការយល់ដឹងរបស់យើងកាន់តែស៊ីជម្រៅអំពីច្បាប់ទូទៅនៃអង្គការកោសិកា និងការវិវត្តន៍របស់វា ប្លាស្ទិក ដែលកំណត់ពីភាពចម្រុះនៃប្រព័ន្ធកោសិកាដែលបានសង្កេតឃើញ។ . ក្នុងពេលជាមួយគ្នាដូចដែលបានកត់សម្គាល់ខាងលើនៅក្នុងករណីនៃវិទ្យាសាស្រ្តពិសេសចំណាប់អារម្មណ៍ដ៏អស្ចារ្យបំផុតគឺបណ្តាលមកពីភាពជាក់លាក់នៃការបង្ហាញនៅក្នុងវត្ថុផ្សេងៗនៃលក្ខណៈទូទៅនៃកោសិកាទាំងអស់។

ផ្ទុយទៅនឹងវិទ្យាសាស្ត្រពិសេស ជាមួយនឹងវិធីសាស្រ្ត cytological ទូទៅ សំណួរនេះត្រូវបានដាក់នៅលើយន្តហោះខុសគ្នាបន្តិច ពីព្រោះអ្នកស្រាវជ្រាវស្វែងរកថាតើការរីករាលដាលនៃការបង្ហាញជាក់លាក់នៃលក្ខណៈដែលបានផ្តល់ឱ្យនៅក្នុងកោសិកាខុសគ្នាយ៉ាងណា ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃយន្តការទូទៅ និង តើវាបណ្តាលមកពីអ្វី? ឧទាហរណ៍ អ្នកជំនាញខាង protozoologist បានរកឃើញថាមវន្តគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍នៃការបង្កើត macronucleus បន្ទាប់ពីការភ្ជាប់គ្នានៅក្នុង ciliates gastrociliary ។ នៅក្នុងការបង្កើត macronucleus មានការកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃចំនួន DNA ហើយបន្ទាប់មកការថយចុះយ៉ាងខ្លាំងនៃសម្ភារៈតំណពូជត្រូវបានគេសង្កេតឃើញ (រហូតដល់ 93%) ។ ដំណើរការនៃការកាត់បន្ថយសម្ភារៈហ្សែននេះក៏កើតឡើងនៅក្នុងកោសិកា somatic នៃក្រុមសត្វពហុកោសិកាមួយចំនួន (សត្វល្អិតមួយចំនួន ពពួក nematodes) ។ DNA ដែលនៅសេសសល់ ដែលមានទំហំតូចក្នុងបរិមាណសរុប ប៉ុន្តែមានព័ត៌មានទាំងអស់ដែលចាំបាច់សម្រាប់ដំណើរការនៃ macronucleus ត្រូវបានចម្លងជាច្រើនដង។ ជាលទ្ធផល macronucleus ច្បាស់លាស់មួយត្រូវបានបង្កើតឡើង ដែលខុសពីមីក្រូនុយក្លេអ៊ែរមិនត្រឹមតែបរិមាណ DNA ប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែវាក៏មាននៅក្នុងសមាសភាពគុណភាពរបស់វាផងដែរ។ ភាគច្រើនលើសលប់នៃហ្សែនដែលមិនដំណើរការគឺអវត្តមាននៅទីនេះ ខណៈពេលដែលមុខងារ loci ត្រូវបានតំណាងដោយចំនួនច្បាប់ចម្លងសំខាន់ៗ។

ការពិតទាំងនេះមានការចាប់អារម្មណ៍លើ cytological ទូទៅយ៉ាងជាក់លាក់ ពីព្រោះតាមក្បួនមួយ បាតុភូតដែលបានសង្កេតនៅទីនេះ មិនមែនគ្រាន់តែដើរតួជាសញ្ញាផ្ទុយពីលក្ខណៈនៃសារពាង្គកាយកោសិកាខ្ពស់ជាងប៉ុណ្ណោះ។ ដូច្នេះដំណើរការនៃ polytenization ការចម្លងជ្រើសរើសនៃផ្នែកនីមួយៗនៃ DNA ក្រូម៉ូសូម ហើយចុងក្រោយ ការជ្រើសរើសផ្នែកសំខាន់ៗនៃហ្សែន - បាតុភូតទាំងអស់នេះក៏កើតឡើងនៅក្នុងកោសិកាឯកទេសនៃសារពាង្គកាយពហុកោសិកាផងដែរ។ ពួកគេប្រហែលជាត្រូវបានអនុវត្តនៅលើមូលដ្ឋាននៃយន្តការបឋមទូទៅ។ ហើយភាពជាក់លាក់នៃដំណើរការស្មុគ្រស្មាញនៃការផ្លាស់ប្តូរនៅក្នុងបរិធាននុយក្លេអ៊ែរកំឡុងពេលបង្កើត macronucleus នៅក្នុង gastrociliary ciliates គឺដោយសារតែការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏ចម្លែកនៃយន្តការបឋមសកលទូទៅសម្រាប់កោសិកា eukaryotic ។ គំនិតប្រភេទនេះឥឡូវនេះកំពុងរីករាលដាលនៅក្នុង cytology ទូទៅ។ ពួកគេជំរុញយ៉ាងខ្លាំងដល់ការសិក្សា cytological ប្រៀបធៀបដែលមានគោលបំណងដើម្បីស្រាយបញ្ហាទូទៅសំខាន់ៗនៃ cytological ។ សម្ភារៈពីគេហទំព័រ

ឧទាហរណ៏នៃការសិក្សា cytological ប្រៀបធៀបគោលដៅគឺការសិក្សាអំពីយន្តការនៃការបែងចែកក្រូម៉ូសូមស្មើគ្នាក្នុងអំឡុងពេល mitosis ក្នុង eukaryotes ដោយការវិភាគ mitosis នៃប្រភេទផ្សេងគ្នានៃ diatoms: នៅលើវត្ថុទាំងនេះ ផ្ទុយទៅនឹង mitoses ធម្មតានៃកោសិកា metazoan វាគឺអាចធ្វើទៅបានដើម្បី តាមដានយ៉ាងច្បាស់នូវការផ្លាស់ប្តូរស្មុគ្រស្មាញនៅក្នុងមជ្ឈមណ្ឌលរៀបចំ microtubule ការបង្កើត និងការបង្វែរទៅវិញទៅមកនៃពាក់កណ្តាល spindles microtubular ការបង្វែរក្រូម៉ូសូមទៅប៉ូលនៃកោសិកាតាមរយៈការបង្កើតរចនាសម្ព័ន្ធពិសេសនៅក្នុង metaphase - កអាវមួយ។

នៅក្នុងពន្លឺនៃទិន្នន័យចុងក្រោយបំផុតស្តីពីតួនាទីឈានមុខគេនៃប្រព័ន្ធមេកាណូគីមី tubulin-dynein នៅក្នុងចលនា anaphase នៃក្រូម៉ូសូមនៅក្នុងកោសិកា metazoan វាទំនងជាសន្មតថាប្រព័ន្ធនេះក៏មាននៅក្នុង diatoms ពោលគឺនៅទីនេះផងដែរ មានតែ a ការរួមបញ្ចូលគ្នាដ៏ពិសេសនៃយន្តការបឋមទូទៅនៃកោសិកាទាំងអស់ និងកំណត់ដំណើរការមេកានិចក្នុងអំឡុងពេល mitosis ។

ជាក់ស្តែងសម្រាប់ការវិភាគនៃយន្តការទាំងនេះ ការបកស្រាយដែលតំណាងឱ្យបញ្ហាសំខាន់មួយនៃ cytology ទូទៅ វានឹងត្រូវបានគេសន្យាថានឹងមានវត្ថុមួយដែលពួកគេត្រូវបានបែងចែកយ៉ាងច្បាស់ និងបង្ហាញតាមរូបវិទ្យា។

ចំនួនឧទាហរណ៍នៃប្រភេទនេះកំពុងកើនឡើងឥតឈប់ឈរ។ ម្យ៉ាងវិញទៀត នេះគឺដោយសារតែការណែនាំដែលមិនធ្លាប់មាន នៃវិធីសាស្រ្តទំនើបស្មុគស្មាញ ទៅក្នុងការអនុវត្តនៃការស្រាវជ្រាវ cytological, protozoological និងរុក្ខសាស្ត្រពិសេស ម៉្យាងវិញទៀត ដល់ការប្រមូលផ្តុំនៅក្នុងការសិក្សា cytological ប្រៀបធៀបនៃអង្គហេតុដែលកំពុងក្លាយជាកាន់តែខ្លាំងឡើង។ មានសារៈសំខាន់សម្រាប់ cytology ទូទៅ និងជាការផ្តោតអារម្មណ៍នៃការយកចិត្តទុកដាក់របស់វា។ ហើយទាំងអស់នេះជាលទ្ធផលនាំឱ្យការពិតដែលថាការវិភាគ cytological ប្រៀបធៀបចាប់ផ្តើមកាន់កាប់កន្លែងដ៏សំខាន់បំផុតនៅក្នុង cytology ។

ការពិពណ៌នាសង្ខេបនៃទិសដៅសំខាន់ៗ និងទិដ្ឋភាពនៃការស្រាវជ្រាវ cytological ទូទៅសម័យទំនើបបង្ហាញថានៅដំណាក់កាលនៃការអភិវឌ្ឍន៍នៃ cytology នេះ មានទាំងការកំណត់ច្បាស់លាស់ត្រឹមត្រូវនៃទិសដៅបុគ្គល និងការសំយោគរបស់ពួកគេ។ ភាពខុសគ្នាកើតឡើងទាំងក្នុងន័យវិធីសាស្រ្ត និងទាក់ទងនឹងតក្កវិជ្ជានៃការដោះស្រាយបញ្ហាជាក់លាក់ដែលមាននៅក្នុងទិសដៅ និងវិធីសាស្រ្តនីមួយៗ។ ទិដ្ឋភាព morphofunctional នៃការសិក្សា cytological ត្រូវបានគ្របដណ្ដប់ដោយវិធីសាស្រ្តដាច់ដោយឡែកមួយចំពោះការវិភាគនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា។ លក្ខណៈពិសេសដ៏សំខាន់បំផុតមួយនៃវិធីសាស្រ្តពិសោធន៍ក្នុងការសិក្សាអំពីគំរូនៃអង្គការកោសិកាគឺការផ្តោតអារម្មណ៍របស់វាទៅលើការវិភាគនៃយន្តការរួមបញ្ចូលទូទៅនៃការរៀបចំប្រព័ន្ធកោសិកា និងកោសិកាទាំងមូល។ ទន្ទឹមនឹងនេះ ដូចដែលបានបញ្ជាក់រួចមកហើយខាងលើ ការដោះស្រាយបញ្ហាប្រឈមមុខនឹងការសិក្សាគឺមិនអាចទៅរួចទេបើគ្មានការប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយនៃវិធីសាស្រ្តដែលមាននៅក្នុងវិធីសាស្រ្ត morphofunctional ។ ការវិភាគពិសោធន៍ផ្តល់នូវលក្ខណៈបាតុភូតនៃលក្ខណៈសម្បត្តិនៃយន្តការកោសិកាជាក់លាក់ និងដំណើរការខាងក្នុងកោសិកា ដោយហេតុនេះបង្កើតមូលដ្ឋានចាំបាច់សម្រាប់ការប្រើប្រាស់ឃ្លាំងអាវុធដ៏សម្បូរបែបនៃវិធីសាស្ត្ររចនាសម្ព័ន្ធ និងជីវគីមី។

ដូច្នេះនៅដំណាក់កាលបច្ចុប្បន្ននៃការអភិវឌ្ឍន៍នៃ cytology ទូទៅ មានតម្រូវការជាមុនសម្រាប់ការរួមបញ្ចូលគ្នាយ៉ាងជិតស្និទ្ធនៃទិដ្ឋភាពទាំងពីរនៃការស្រាវជ្រាវ cytological ។ នេះគឺជាធម្មជាតិ ចាប់តាំងពីទីបំផុតវិធីសាស្រ្តទាំងពីរនេះបន្តគោលដៅដូចគ្នា - ការបំភ្លឺនៃអង្គការមុខងារនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា និងយន្តការនៃបទប្បញ្ញត្តិនៃដំណើរការនៅក្នុងប្រព័ន្ធកោសិកាទាំងមូល។

វិធីសាស្រ្ត cytological ប្រៀបធៀបទៅនឹងការវិភាគនៃបញ្ហា cytological ទូទៅកាន់កាប់ទីតាំងពិសេសមួយនៅក្នុង cytology ទូទៅទំនើប។ ការវិភាគ cytological ប្រៀបធៀបត្រូវបានអនុវត្តនៅលើមូលដ្ឋាននៃទិន្នន័យដែលទទួលបាននៅលើមូលដ្ឋាននៃវិធីសាស្រ្ត morphofunctional និងពិសោធន៍, ឧ, វិធីសាស្រ្ត, ទិដ្ឋភាពសំខាន់ទាំងអស់នៃការស្រាវជ្រាវ cytological មានទំនាក់ទំនងយ៉ាងជិតស្និទ្ធទៅគ្នាទៅវិញទៅមក។

ភាពជាក់លាក់នៃវិធីសាស្រ្ត cytological ប្រៀបធៀប ភាពជាក់លាក់ដែលកំណត់ទីតាំងពិសេសរបស់វា គឺជាការប្រើប្រាស់គោលបំណងនៃវត្ថុផ្សេងៗនៃធម្មជាតិរស់នៅ ដើម្បីសិក្សាពីគំរូទូទៅនៃការរៀបចំរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាបុគ្គល ដំណើរការខាងក្នុងកោសិកា និងយន្តការរួមបញ្ចូលនៅក្នុងភាពចម្រុះទាំងអស់នៃការបង្ហាញរបស់ពួកគេ។ នៅក្នុងប្រភេទផ្សេងៗនៃកោសិកា។

ដូច្នេះ ដូចដែលអាចមើលឃើញពីខាងលើ ទិសដៅសំខាន់នៃការស្រាវជ្រាវ cytological ភាគច្រើនកំណត់ជាក់លាក់នៃដំណាក់កាលទំនើបនៃការអភិវឌ្ឍនៃ cytology ទូទៅ និងកំណត់ទំនាក់ទំនងជិតស្និទ្ធរបស់វាជាមួយនឹងវិទ្យាសាស្រ្តជីវសាស្រ្តដែលពាក់ព័ន្ធ។ លក្ខណៈពិសេសមួយក្នុងចំណោមលក្ខណៈពិសេសបំផុតនៃដំណាក់កាលនេះគឺទំនាក់ទំនងជិតស្និទ្ធនៃផ្នែកសំខាន់បំផុតទាំងអស់នៃការស្រាវជ្រាវ cytological ក្នុងន័យវិធីសាស្រ្តមួយ។ ជាងនេះទៅទៀត ការរួមបញ្ចូលវិធីសាស្រ្តបែបនេះច្រើនតែហួសពីវិសាលភាពនៃ cytology ទូទៅ។

នៅក្នុងការងារ cytological វិធីសាស្រ្តជីវគីមី និងម៉ូលេគុលសុទ្ធសាធត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយ ហើយផ្ទុយទៅវិញនៅក្នុងការសិក្សាជីវគីមី និងម៉ូលេគុល វិធីសាស្ត្រ cytological morphological ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយ។ ការរួមបញ្ចូលវិធីសាស្រ្តនៃវិទ្យាសាស្រ្តដែលពាក់ព័ន្ធនិងការរួបរួមនៃគោលដៅចុងក្រោយរបស់ពួកគេបានកំណត់ការបង្កើតវិទ្យាសាស្ត្រសំយោគថ្មីនៃកោសិកា - ជីវវិទ្យាកោសិកា។ វារួមបញ្ចូលគ្នានូវ cytology, ជីវគីមីរចនាសម្ព័ន្ធ, ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល, ហ្សែនម៉ូលេគុល និងវិទ្យាសាស្រ្តជីវសាស្រ្តពិសេសអំពីកម្រិតកោសិកានៃអង្គការ។ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃវិទ្យាសាស្ត្រដែលពាក់ព័ន្ធបែបនេះគឺពិតជាបាតុភូតរីកចម្រើន។ ទោះបីជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ទោះបីជាមានការសំយោគបែបនេះក៏ដោយ ក៏វិទ្យាសាស្ត្រនីមួយៗរក្សានូវភាពជាក់លាក់នៃវិធីសាស្រ្ត និងជាក់លាក់របស់វានៅក្នុងការបង្កើត និងវិធីសាស្រ្តនៃការបង្កើតបញ្ហានៃអង្គការកោសិកា។ បច្ចុប្បន្ននេះ ទីតាំងលេចធ្លោនៅក្នុងវិទ្យាសាស្ត្រសំយោគនេះជាកម្មសិទ្ធិរបស់ការស្រាវជ្រាវក្នុងទិសដៅហ្សែនម៉ូលេគុល និងជីវសាស្ត្រ។ ស្ថានភាពនេះគឺដោយសារតែការរីកចម្រើនយ៉ាងឆាប់រហ័សនៃចំណេះដឹងរបស់យើងអំពីកម្រិតទាបនៃអង្គការកោសិកាប៉ុន្តែវាគ្រាន់តែជាបាតុភូតបណ្តោះអាសន្នប៉ុណ្ណោះ។

ជាការពិតកន្លែងឈានមុខគេនៅក្នុងវិទ្យាសាស្ត្រសំយោគថ្មីនៃកោសិកាគួរតែត្រូវបានយកដោយ cytology ទូទៅ - វិទ្យាសាស្រ្តនៃច្បាប់ទូទៅនៃកម្រិតកោសិកានៃអង្គការនៃសារធាតុរស់នៅ។ នៃវិទ្យាសាស្រ្តជីវសាស្រ្តទំនើបដែលទាក់ទងនឹងកម្រិតនៃការរៀបចំនៃសារធាតុរស់នៅនេះ cytology ទូទៅ ការពង្រីកវិធីសាស្រ្ត cytological ប្រៀបធៀបគោលដៅដោយផ្អែកលើវិធីសាស្រ្តរចនាសម្ព័ន្ធ និងជីវគីមី ត្រូវបានរៀបចំច្រើនបំផុតសម្រាប់ការធ្វើទូទៅជីវសាស្រ្តដ៏ជ្រៅនៃសម្ភារៈការពិតដ៏ធំនៅលើការវិភាគដាច់ដោយឡែកនៃ - រចនាសម្ព័ន្ធកោសិកានៅក្នុងប្រភេទកោសិកាជាច្រើន។ cytology ទូទៅគួរតែកាន់តំណែងនាំមុខក្នុងការវិភាគនៃយន្តការរួមបញ្ចូលកោសិកាទូទៅ។ តម្រូវការជាមុនដ៏សំខាន់មួយសម្រាប់នេះគឺការអភិវឌ្ឍន៍យ៉ាងឆាប់រហ័សនៃគំរូពិសោធន៍ថ្មី។ ការវិភាគស៊ីជម្រៅរបស់ពួកគេដោយប្រើវិធីសាស្រ្តទំនើប និងការណែនាំយ៉ាងទូលំទូលាយនៃគំរូពិសោធន៍ទៅក្នុងការសិក្សា cytological ប្រៀបធៀបគោលដៅគួរតែធានាបាននូវវឌ្ឍនភាពក្នុងការដោះស្រាយបញ្ហាចម្បងមួយនៃអង្គការកោសិកា - បញ្ហានៃការរួមបញ្ចូលកោសិកា។

ដោយសារវត្ថុធាតុពិតប្រមូលផ្តុំអំពីយន្តការសកលបឋមនៃការរួមបញ្ចូលកោសិកា និងវិសាលភាពនៃការកែប្រែរបស់ពួកគេ វាគឺជា cytology ទូទៅដែលប្រឈមមុខនឹងភារកិច្ចនៃការវិភាគស៊ីជម្រៅនៃលក្ខខណ្ឌប្រវត្តិសាស្ត្រនៃការរៀបចំប្រព័ន្ធកោសិកាជាក់លាក់ និងអង្គការកោសិកាជាទូទៅ ដូចជា ក៏ដូចជាភាពជាក់លាក់នៃដំណើរការវិវត្តន៍លើកម្រិតកោសិកា និងកោសិការងនៃការរៀបចំសារធាតុរស់នៅ។ ដំណោះស្រាយចំពោះបញ្ហានេះត្រូវបានសម្របសម្រួលដោយទំនោរដែលអាចមើលឃើញយ៉ាងច្បាស់នៅក្នុងការសិក្សា cytological ទូទៅដើម្បីបញ្ចូលគ្នានូវការវិភាគដាច់ដោយឡែកនៃសមាសធាតុនីមួយៗនៃកោសិកាជាមួយនឹងការសិក្សាអំពីគីឡូក្រាមរបស់វា។ ទៅប្រព័ន្ធពេញលេញ។

នៅលើទំព័រនេះមានខ្លឹមសារលើប្រធានបទខាងក្រោម៖

ផែនការ៖

1. តើ cytology សិក្សាអ្វីខ្លះ?

2. គំនិតដែលសារពាង្គកាយត្រូវបានបង្កើតឡើងពីកោសិកា។

3. វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវដែលប្រើក្នុង cytology ។

4. ការបំបែកកោសិកា។

5. Autoradiography ។

6. ការកំណត់រយៈពេលនៃដំណាក់កាលមួយចំនួននៃវដ្តកោសិកាដោយប្រើ autoradiography ។

Cytology គឺជាវិទ្យាសាស្ត្រនៃកោសិកា។ វាកើតចេញពីវិទ្យាសាស្ត្រជីវសាស្រ្តផ្សេងទៀតជិត 100 ឆ្នាំមុន។ ជាលើកដំបូង ព័ត៌មានទូទៅអំពីរចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិកាត្រូវបានប្រមូលនៅក្នុងសៀវភៅដោយ J.-B. ជីវវិទ្យានៃកោសិការបស់ Carnoy បោះពុម្ពនៅឆ្នាំ 1884 ។ cytology ទំនើបសិក្សាពីរចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិកា មុខងាររបស់ពួកវាជាប្រព័ន្ធរស់នៅបឋម៖ មុខងារនៃសមាសធាតុកោសិកានីមួយៗ ដំណើរការនៃការបង្កើតកោសិកាឡើងវិញ ការជួសជុលរបស់ពួកគេ ការសម្របខ្លួនទៅនឹងលក្ខខណ្ឌបរិស្ថាន និងដំណើរការផ្សេងទៀតជាច្រើនត្រូវបានសិក្សា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមនុស្សម្នាក់វិនិច្ឆ័យលក្ខណៈសម្បត្តិ និងមុខងារ។ ធម្មតាចំពោះកោសិកាទាំងអស់។ Cytology ក៏ពិនិត្យមើលលក្ខណៈរចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិកាឯកទេសផងដែរ។ នៅក្នុងពាក្យផ្សេងទៀត cytology ទំនើបគឺជាសរីរវិទ្យានៃកោសិកា។ Cytology ត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់យ៉ាងជិតស្និទ្ធជាមួយនឹងសមិទ្ធិផលវិទ្យាសាស្ត្រ និងវិធីសាស្រ្តនៃជីវគីមី ជីវរូបវិទ្យា ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល និងហ្សែន។ នេះបានបម្រើជាមូលដ្ឋានសម្រាប់ការសិក្សាស៊ីជម្រៅអំពីកោសិកាពីទស្សនៈនៃវិទ្យាសាស្ត្រទាំងនេះ និងការលេចឡើងនៃវិទ្យាសាស្ត្រសំយោគជាក់លាក់អំពីកោសិកា - ជីវវិទ្យាកោសិកា ឬជីវវិទ្យាកោសិកា។ បច្ចុប្បន្ននេះពាក្យ cytology និងកោសិកាជីវវិទ្យាស្របគ្នា ចាប់តាំងពីប្រធានបទនៃការសិក្សារបស់ពួកគេគឺជាកោសិកាដែលមានលំនាំនៃការរៀបចំ និងមុខងាររបស់វាផ្ទាល់។ វិន័យ "ជីវវិទ្យាកោសិកា" សំដៅលើផ្នែកមូលដ្ឋាននៃជីវវិទ្យា ព្រោះវាសិក្សា និងពិពណ៌នាអំពីឯកតានៃជីវិតទាំងអស់នៅលើផែនដី គឺកោសិកា។

ការសិក្សាយ៉ាងយូរ និងដោយប្រុងប្រយ័ត្ននៃកោសិកាបែបនេះបាននាំឱ្យមានការបង្កើតទ្រឹស្តីទូទៅដ៏សំខាន់មួយដែលមានសារៈសំខាន់ជីវសាស្ត្រទូទៅ ពោលគឺការកើតឡើងនៃទ្រឹស្តីកោសិកា។ នៅសតវត្សទី 17 Robert Hooke ជាអ្នករូបវិទ្យា និងជីវវិទូ ដែលសម្គាល់ដោយភាពប៉ិនប្រសប់ដ៏អស្ចារ្យ បានបង្កើតមីក្រូទស្សន៍។ ដោយពិនិត្យមើលផ្នែកស្តើងនៃឆ្នុកនៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍របស់គាត់ លោក Hooke បានរកឃើញថាវាត្រូវបានបង្កើតឡើងពីកោសិកាទទេតូចៗដែលបំបែកដោយជញ្ជាំងស្តើង ដែលដូចដែលយើងដឹងស្រាប់ហើយថាមានផ្ទុកនូវសែលុយឡូស។ គាត់បានហៅកោសិកាតូចៗទាំងនេះ។ ក្រោយមក នៅពេលដែលអ្នកជីវវិទូផ្សេងទៀតចាប់ផ្តើមពិនិត្យមើលជាលិការុក្ខជាតិក្រោមមីក្រូទស្សន៍ វាបានប្រែក្លាយថាកោសិកាតូចៗដែលរកឃើញដោយ Hooke នៅក្នុងដោតងាប់ក៏មាននៅក្នុងជាលិការុក្ខជាតិដែលនៅមានជីវិតដែរ ប៉ុន្តែវាមិនទទេទេ ប៉ុន្តែពួកវានីមួយៗមានផ្ទុកនូវសារធាតុ gelatinous តូចមួយ។ រាងកាយ។ បន្ទាប់ពីជាលិកាសត្វត្រូវបានពិនិត្យដោយមីក្រូទស្សន៍ វាត្រូវបានគេរកឃើញថាពួកវាក៏មានសាកសព gelatinous តូចៗផងដែរ ប៉ុន្តែសាកសពទាំងនេះកម្រត្រូវបានបំបែកចេញពីគ្នាទៅវិញទៅមកដោយជញ្ជាំង។ ជាលទ្ធផលនៃការសិក្សាទាំងអស់នេះ នៅឆ្នាំ 1939 Schleiden និង Schwann បានបង្កើតទ្រឹស្តីកោសិកាដោយឯករាជ្យ ដែលចែងថាកោសិកាគឺជាឯកតាបឋមដែលរុក្ខជាតិ និងសត្វទាំងអស់ត្រូវបានបង្កើតឡើងនៅទីបំផុត។ សម្រាប់ពេលខ្លះ អត្ថន័យទ្វេនៃពាក្យកោសិកានៅតែបណ្តាលឱ្យមានការយល់ច្រឡំមួយចំនួន ប៉ុន្តែក្រោយមកវាបានក្លាយទៅជារឹងមាំនៅក្នុងរាងកាយដែលស្រដៀងនឹងចាហួយតូចៗទាំងនេះ។

ការយល់ដឹងសម័យទំនើបនៃក្រឡាគឺទាក់ទងយ៉ាងជិតស្និទ្ធទៅនឹងភាពជឿនលឿនផ្នែកបច្ចេកទេស និងការកែលម្អវិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវ។ បន្ថែមពីលើមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺធម្មតាដែលមិនបាត់បង់តួនាទីរបស់វា ប៉ូឡារីស អ៊ុលត្រាវីយូឡេ ហ្វ្លុយអូរ៉េស និងមីក្រូទស្សន៍កម្រិតពណ៌ដំណាក់កាលបានទទួលសារៈសំខាន់យ៉ាងខ្លាំងក្នុងរយៈពេលប៉ុន្មានទសវត្សរ៍ចុងក្រោយនេះ។ ក្នុងចំណោមពួកគេ មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងកាន់កាប់កន្លែងពិសេសមួយ ដែលដំណោះស្រាយដែលធ្វើឱ្យវាអាចជ្រាបចូល និងសិក្សារចនាសម្ព័ន្ធ submicroscopic និងម៉ូលេគុលនៃកោសិកា។ វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវទំនើបបានធ្វើឱ្យវាអាចបង្ហាញរូបភាពលម្អិតនៃអង្គការកោសិកា។

កោសិកានីមួយៗមានស្នូល និង cytoplasm ដែលបំបែកពីគ្នាទៅវិញទៅមក និងពីបរិយាកាសខាងក្រៅដោយភ្នាស។ សមាសធាតុនៃ cytoplasm គឺ៖ ភ្នាស, hyaloplasm, endoplasmic reticulum និង ribosomes, Golgi apparatus, lysosomes, mitochondria, inclusions, cell center, organelles ឯកទេស។

ផ្នែកមួយនៃសារពាង្គកាយដែលបំពេញមុខងារពិសេសត្រូវបានគេហៅថាសរីរាង្គ។ សរីរាង្គណាមួយ - សួត ថ្លើម តំរងនោម ឧទាហរណ៍ - នីមួយៗមានរចនាសម្ព័ន្ធពិសេសរបស់វា ដោយសារវាដើរតួនាទីជាក់លាក់នៅក្នុងរាងកាយ។ នៅក្នុងវិធីដូចគ្នានេះដែរមានរចនាសម្ព័ន្ធពិសេសនៅក្នុង cytoplasm ដែលជារចនាសម្ព័ន្ធបារម្ភនៃការដែលផ្តល់ឱ្យពួកគេនូវឱកាសដើម្បីអនុវត្តមុខងារមួយចំនួនដែលចាំបាច់សម្រាប់ការរំលាយអាហារនៃកោសិកា; រចនាសម្ព័ន្ធទាំងនេះត្រូវបានគេហៅថាសរីរាង្គ ("សរីរាង្គតូច") ។

ការបំភ្លឺនៃធម្មជាតិ មុខងារ និងការចែកចាយនៃសរីរាង្គ cytoplasmic អាចធ្វើទៅបានលុះត្រាតែមានការអភិវឌ្ឍន៍នៃវិធីសាស្រ្តនៃជីវវិទ្យាកោសិកាទំនើប។ មានប្រយោជន៍បំផុតក្នុងន័យនេះគឺ៖ 1) មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង; 2) ការបែងចែកកោសិកា ដោយមានជំនួយពីជីវគីមីវិទ្យាអាចញែកប្រភាគសុទ្ធនៃកោសិកាដែលមានសារពាង្គកាយមួយចំនួន ហើយដូច្នេះសិក្សាពីប្រតិកម្មមេតាបូលីសបុគ្គលដែលចាប់អារម្មណ៍ចំពោះពួកគេ។ 3) autoradiography ដែលធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីសិក្សាដោយផ្ទាល់នូវប្រតិកម្មមេតាប៉ូលីសដែលកើតឡើងនៅក្នុងសរីរាង្គ។

វិធីសាស្រ្តដែលសរីរាង្គត្រូវបានញែកចេញពីកោសិកាត្រូវបានគេហៅថា ប្រភាគ។ វិធីសាស្រ្តនេះបានប្រែទៅជាមានផ្លែផ្កាច្រើន ដោយផ្តល់ឱ្យអ្នកជីវគីមីនូវឱកាសដើម្បីញែកកោសិកាសរីរាង្គផ្សេងៗក្នុងទម្រង់ដ៏បរិសុទ្ធ។ វាក៏អនុញ្ញាតឱ្យមនុស្សម្នាក់កំណត់សមាសធាតុគីមីនៃសរីរាង្គ និងអង់ស៊ីមដែលពួកវាមាន ហើយផ្អែកលើទិន្នន័យដែលទទួលបាន ដើម្បីធ្វើការសន្និដ្ឋានអំពីមុខងាររបស់វានៅក្នុងកោសិកា។ ជាជំហានដំបូង កោសិកាត្រូវបានបំផ្លាញដោយការធ្វើឱ្យដូចគ្នានៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកសមស្របមួយចំនួន ដែលរក្សាសរីរាង្គ និងការពារការប្រមូលផ្តុំរបស់វា។ ជាញឹកញាប់ណាស់ដំណោះស្រាយ sucrose ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការនេះ។ ទោះបីជា mitochondria និងសរីរាង្គកោសិកាជាច្រើនទៀតនៅតែនៅដដែល រចនាសម្ព័ន្ធភ្នាសដូចជា endoplasmic reticulum និងភ្នាសប្លាស្មាបានបំបែកទៅជាបំណែក។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ បំណែកភ្នាសជាលទ្ធផលតែងតែបិទនៅលើខ្លួនវា ដែលបណ្តាលឱ្យមាន vesicles មូលនៃទំហំផ្សេងៗ។

នៅដំណាក់កាលបន្ទាប់, កោសិកា homogenate ត្រូវបានទទួលរងនូវស៊េរីនៃការ centrifugations, ល្បឿននិងរយៈពេលនៃការដែលកើនឡើងរាល់ពេល; ដំណើរការនេះត្រូវបានគេហៅថា centrifugation ឌីផេរ៉ង់ស្យែល។ សរីរាង្គកោសិកាផ្សេងៗគ្នាត្រូវបានដាក់នៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់ centrifuge ក្នុងល្បឿន centrifugation ផ្សេងៗគ្នា ដែលអាស្រ័យលើទំហំ ដង់ស៊ីតេ និងរូបរាងរបស់សរីរាង្គ។ លទ្ធផលទឹកភ្លៀងអាចប្រមូលបាន និងពិនិត្យ។ រចនាសម្ព័ន្ធដង់ស៊ីតេធំជាង ដូចជាស្នូលគឺលឿនបំផុតក្នុងការដោះស្រាយ ខណៈពេលដែលរចនាសម្ព័ន្ធតូចជាង និងក្រាស់ដូចជា vesicles endoplasmic reticulum ទាមទារអត្រាខ្ពស់ និងពេលវេលាយូរជាងក្នុងការដោះស្រាយ។ ដូច្នេះ នៅល្បឿន centrifugation ទាប ស្នូលត្រូវបាន sedimented ខណៈពេលដែល organelles កោសិកាផ្សេងទៀតនៅតែស្ថិតក្នុងការផ្អាក។ ក្នុងល្បឿនកាន់តែខ្ពស់ មីតូខនឌ្រី និងលីសូសូម កកកុញ ហើយជាមួយនឹងការប្រមូលផ្តុំអូសបន្លាយ និងល្បឿនខ្ពស់ សូម្បីតែភាគល្អិតតូចៗដូចជា រីបូសូម ក៏មានភ្លៀងធ្លាក់ផងដែរ។ Precipitates អាចត្រូវបានពិនិត្យដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងដើម្បីកំណត់ភាពបរិសុទ្ធនៃប្រភាគលទ្ធផល។ ប្រភាគទាំងអស់ត្រូវបានបំពុលក្នុងកម្រិតខ្លះជាមួយសរីរាង្គផ្សេងទៀត។ បើទោះជាយ៉ាងនេះក្តី វាអាចសម្រេចបាននូវភាពបរិសុទ្ធគ្រប់គ្រាន់នៃប្រភាគ នោះពួកវាត្រូវឆ្លងកាត់ការវិភាគជីវគីមីដើម្បីកំណត់សមាសភាពគីមី និងសកម្មភាពអង់ស៊ីមនៃសរីរាង្គដែលដាច់ឆ្ងាយ។

សម្រាប់វឌ្ឍនភាពនៃ histology, cytology និង embryology ការណែនាំអំពីសមិទ្ធិផលក្នុងរូបវិទ្យា និងគីមីវិទ្យា វិធីសាស្រ្តថ្មីនៃវិទ្យាសាស្ត្រដែលពាក់ព័ន្ធ - ជីវគីមី ជីវវិទ្យាម៉ូលេគុល វិស្វកម្មហ្សែន - មានសារៈសំខាន់ដ៏អស្ចារ្យ។

វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវទំនើបធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាជាលិកាមិនត្រឹមតែទាំងមូលប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែថែមទាំងញែកប្រភេទកោសិកានីមួយៗចេញពីពួកវា ដើម្បីសិក្សាពីសកម្មភាពជីវិតរបស់ពួកគេក្នុងរយៈពេលយូរ ដើម្បីញែកសរីរាង្គកោសិកានីមួយៗ និងម៉ាក្រូម៉ូលេគុលដែលមានធាតុផ្សំរបស់វា (ឧទាហរណ៍។ DNA) និងសិក្សាពីលក្ខណៈមុខងាររបស់វា។

ឱកាសបែបនេះបានបើកឡើងទាក់ទងនឹងការបង្កើតឧបករណ៍ និងបច្ចេកវិទ្យាថ្មីៗ - ប្រភេទផ្សេងៗនៃមីក្រូទស្សន៍ បច្ចេកវិទ្យាកុំព្យូទ័រ ការវិភាគរចនាសម្ព័ន្ធកាំរស្មីអ៊ិច ការប្រើប្រាស់អនុភាពម៉ាញេទិកនុយក្លេអ៊ែរ (NMR) អ៊ីសូតូបវិទ្យុសកម្ម និងស្វ័យរ៉ាឌីយ៉ូ អេឡិចត្រុស និងក្រូម៉ាតូក្រាម ប្រភាគ នៃមាតិកាកោសិកាដោយប្រើ ultracentrifugation ការបំបែកនិងការដាំដុះនៃកោសិកាការផលិតកូនកាត់; ការប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្តជីវបច្ចេកវិទ្យា - ការផលិត hybridomas និងអង្គបដិប្រាណ monoclonal, DNA recombinant ជាដើម។

ដូច្នេះវត្ថុជីវសាស្រ្តអាចត្រូវបានសិក្សានៅកម្រិតជាលិកា កោសិកា កោសិការង និងម៉ូលេគុល។ ទោះបីជាមានការបញ្ចូលទៅក្នុងវិទ្យាសាស្ត្រធម្មជាតិនៃវិធីសាស្រ្តជីវគីមី ជីវរូបវិទ្យា រូបវន្ត និងបច្ចេកវិទ្យាជាច្រើនដែលចាំបាច់ដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហាជាច្រើនទាក់ទងនឹងជីវិតរបស់កោសិកា និងជាលិកាក៏ដោយ ជីវវិទ្យាជាមូលដ្ឋាននៅតែជាវិទ្យាសាស្ត្រ morphological ជាមួយនឹងសំណុំនៃវិធីសាស្រ្តផ្ទាល់ខ្លួនរបស់វា។ ក្រោយមកទៀតធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់លក្ខណៈនៃដំណើរការដែលកើតឡើងនៅក្នុងកោសិកា និងជាលិកា និងលក្ខណៈរចនាសម្ព័ន្ធរបស់វា។

ដំណាក់កាលសំខាន់នៃការវិភាគ cytological និង histological គឺការជ្រើសរើសវត្ថុនៃការសិក្សា ការរៀបចំសម្រាប់ការពិនិត្យនៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍ ការប្រើប្រាស់វិធីសាស្ត្រមីក្រូទស្សន៍ និងការវិភាគរូបភាពគុណភាព និងបរិមាណ។

វត្ថុនៃការស្រាវជ្រាវគឺកោសិកា និងជាលិកាដែលរស់នៅ និងថេរ រូបភាពរបស់វាទទួលបានក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ និងអេឡិចត្រុង ឬនៅលើអេក្រង់ទូរទស្សន៍។ មានវិធីសាស្រ្តមួយចំនួនដែលអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកវិភាគវត្ថុទាំងនេះ។

វិធីសាស្រ្តមីក្រូទស្សន៍នៃការត្រៀមលក្ខណៈ histological

វិធីសាស្រ្តសំខាន់សម្រាប់សិក្សាមីក្រូជីវសាស្រ្តគឺមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ និងអេឡិចត្រុង ដែលត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុងការពិសោធន៍ និងការអនុវត្តជាក់ស្តែង។

មីក្រូទស្សន៍គឺជាវិធីសាស្រ្តចម្បងសម្រាប់សិក្សាមីក្រូវត្ថុដែលប្រើក្នុងជីវវិទ្យាអស់រយៈពេលជាង 300 ឆ្នាំមកហើយ។ ចាប់តាំងពីការបង្កើត និងប្រើប្រាស់មីក្រូទស្សន៍ដំបូង ពួកគេត្រូវបានកែលម្អឥតឈប់ឈរ។ មីក្រូទស្សន៍ទំនើបគឺជាប្រព័ន្ធអុបទិកស្មុគ្រស្មាញជាច្រើនប្រភេទដែលមានគុណភាពបង្ហាញខ្ពស់។ ទំហំ​នៃ​រចនាសម្ព័ន្ធ​តូច​បំផុត​ដែល​អាច​មើល​ឃើញ​ក្នុង​មីក្រូទស្សន៍​ត្រូវ​បាន​កំណត់​ដោយ​ចម្ងាយ​ដែល​អាច​ដោះស្រាយ​បាន​តូច​បំផុត (d o) ដែល​ជា​ចម្បង​អាស្រ័យ​លើ​រលក​ពន្លឺ (\) និងរលកនៃលំយោលអេឡិចត្រូម៉ាញ៉េទិចនៃលំហូរអេឡិចត្រុង។ល។ ការពឹងផ្អែកនេះត្រូវបានកំណត់ប្រមាណដោយរូបមន្ត d 0 = 1 / 2 \. ដូច្នេះ ប្រវែងរលកកាន់តែខ្លី ចម្ងាយដែលដោះស្រាយបានកាន់តែតូច ហើយរចនាសម្ព័ន្ធខ្នាតតូចអាចមើលឃើញក្នុងការរៀបចំ។ ដើម្បីសិក្សាការត្រៀមលក្ខណៈ histological ប្រភេទផ្សេងៗនៃមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ និងមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងត្រូវបានប្រើប្រាស់។

អង្ករ។ 1. មីក្រូទស្សន៍សម្រាប់ការស្រាវជ្រាវជីវសាស្រ្ត។

A - មីក្រូទស្សន៍ជីវសាស្រ្តពន្លឺ "Biolam-S": 1 - មូលដ្ឋាន; 2 - អ្នកកាន់បំពង់; 3 - បំពង់ inclined; 4 - កែវភ្នែក, 5 - កាំភ្លើងវែង; 6 - កែវភ្នែក; 7 - តារាង; 8 - condenser ជាមួយ iris diaphragm មួយ; 9 - វីស condenser; 10 - កញ្ចក់; 11 - វីសមីក្រូម៉ែត្រ; 12 - វីសម៉ាក្រូម៉ែត្រ។ ខ - មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង EMV-100AK ជាមួយនឹងប្រព័ន្ធដំណើរការរូបភាពស្វ័យប្រវត្តិ៖ 1 - ជួរឈរមីក្រូទស្សន៍ (ជាមួយប្រព័ន្ធអេឡិចត្រុងអុបទិក និងអង្គជំនុំជម្រះគំរូ); 2 - ផ្ទាំងបញ្ជា; 3 - កាមេរ៉ាជាមួយអេក្រង់ luminescent; 4 - អង្គភាពវិភាគរូបភាព; 5 - ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាវីដេអូ។

មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ។ដើម្បីសិក្សាអំពីអតិសុខុមជីវសាស្រ្ត មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺធម្មតា និងពូជរបស់វាត្រូវបានគេប្រើ ដែលប្រើប្រភពពន្លឺដែលមានរលកពន្លឺខុសៗគ្នា។ នៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺធម្មតា ប្រភពបំភ្លឺគឺជាពន្លឺធម្មជាតិ ឬសិប្បនិម្មិត (រូបភាពទី 1, ក)។ រលកអប្បបរមានៃផ្នែកដែលអាចមើលឃើញនៃវិសាលគមគឺប្រហែល 0.4 µm ។ ដូច្នេះសម្រាប់មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺធម្មតាគឺតូចបំផុត។ ចម្ងាយដំណោះស្រាយគឺប្រហែល 0.2 µm (ឃ o = "/,- 0.4 µm = 0.2 µm) និងការពង្រីកសរុប (ផលិតផលនៃការពង្រីកគោលបំណង និងការពង្រីកកែវភ្នែក) អាចមាន 1500-2500 ។

ដូច្នេះនៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺអ្នកអាចមើលឃើញមិនត្រឹមតែកោសិកាបុគ្គលដែលមានទំហំពី 4 ទៅ 150 មីក្រូនប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែថែមទាំងរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងកោសិការបស់ពួកគេផងដែរ - សរីរាង្គ, ការដាក់បញ្ចូល។ ដើម្បីបង្កើនភាពផ្ទុយគ្នានៃវត្ថុតូចៗ ការលាបពណ៌របស់ពួកគេត្រូវបានប្រើប្រាស់។

មីក្រូទស្សន៍អ៊ុលត្រាវីយូឡេ. នេះគឺជាប្រភេទមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ។ មីក្រូទស្សន៍អ៊ុលត្រាវីយូឡេប្រើកាំរស្មីអ៊ុលត្រាវីយូឡេខ្លីជាងដែលមានរលកចម្ងាយប្រហែល 0.2 មីក្រូ។ ចម្ងាយដែលបានដោះស្រាយនៅទីនេះគឺតូចជាង 2 ដងក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺធម្មតា ហើយមានប្រហែល 0.1 μm (d o = V 2 - 0.2 μm = 0.1 μm) ។ រូបភាពដែលមិនអាចមើលឃើញដោយភ្នែក ដែលទទួលបានក្នុងកាំរស្មីអ៊ុលត្រាវីយូឡេ ត្រូវបានបំប្លែងទៅជារូបភាពដែលអាចមើលឃើញដោយការថតនៅលើចានរូបថត ឬដោយប្រើឧបករណ៍ពិសេស (អេក្រង់ fluorescent ឧបករណ៍បំប្លែងអេឡិចត្រុងអុបទិក)។

មីក្រូទស្សន៍ហ្វ្លុយអូរីស (ពន្លឺ) ។បាតុភូតនៃ fluorescence មាននៅក្នុងការពិតដែលថាអាតូមនិងម៉ូលេគុលនៃសារធាតុមួយចំនួនស្រូបយកកាំរស្មីរលកខ្លីចូលទៅក្នុងស្ថានភាពរំភើប។ ការផ្លាស់ប្តូរបញ្ច្រាសពីស្ថានភាពរំភើបទៅស្ថានភាពធម្មតាកើតឡើងជាមួយនឹងការបំភាយពន្លឺប៉ុន្តែជាមួយនឹងរលកវែងជាង។ នៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ហ្វ្លុយអូរ៉េស ចង្កៀងបារត ឬចង្កៀង xenon សម្ពាធខ្ពស់ ត្រូវបានប្រើជាប្រភពពន្លឺ ដើម្បីបញ្ចេញពន្លឺដែលមានពន្លឺខ្ពស់នៅក្នុងតំបន់វិសាលគមនៃ 0.25-0.4 μm (ជិតកាំរស្មីអ៊ុលត្រាវីយូឡេ) និង 0.4-0.5 μm (កាំរស្មីពណ៌ខៀវ-violet ។ ) កាំរស្មី) ។ រលកនៃពន្លឺ fluorescence តែងតែធំជាងរលកនៃពន្លឺដ៏រំភើប ដូច្នេះពួកវាត្រូវបានបំបែកដោយប្រើតម្រងពន្លឺ ហើយរូបភាពនៃវត្ថុត្រូវបានសិក្សាតែនៅក្នុងពន្លឺ fluorescence ប៉ុណ្ណោះ។ ភាពខុសគ្នាមួយត្រូវបានបង្កើតឡើងរវាង ខាងក្នុង ឬបឋម និងជំរុញ ឬអនុវិទ្យាល័យ ហ្វ្លុយអូរីស។ កោសិកាណាមួយនៃសារពាង្គកាយមានជីវិតមាន fluorescence របស់វា ប៉ុន្តែជារឿយៗវាខ្សោយខ្លាំង។

fluorescence បឋមត្រូវបានបង្ហាញដោយ serotonin, catecholamines (adrenaline, norepinephrine) ដែលមាននៅក្នុងសរសៃប្រសាទ, mast និងកោសិកាផ្សេងទៀតបន្ទាប់ពីការជួសជុលជាលិកានៅក្នុងចំហាយ formaldehyde នៅ 60-80 ° C (វិធីសាស្រ្ត Falck) ។

fluorescence ទីពីរកើតឡើងនៅពេលដែលថ្នាំត្រូវបានដំណើរការជាមួយនឹងថ្នាំជ្រលក់ពិសេស - fluorochromes ។

មាន fluorochromes ជាច្រើនដែលភ្ជាប់ជាពិសេសទៅនឹង macromolecules មួយចំនួន (acridine ពណ៌ទឹកក្រូច, rhodamine, fluorescein ជាដើម)។ ឧទហរណ៍ acridine ពណ៌ទឹកក្រូច fluorochrome ត្រូវបានគេប្រើញឹកញាប់បំផុតនៅពេលកែច្នៃថ្នាំ។ ក្នុងករណីនេះ DNA និងសមាសធាតុរបស់វានៅក្នុងកោសិកាមានពណ៌បៃតងភ្លឺ និង RNAនិងនិស្សន្ទវត្ថុរបស់វា - ពន្លឺពណ៌ក្រហមភ្លឺ។ ដូច្នេះ សមាសភាពវិសាលគមនៃវិទ្យុសកម្មផ្ទុកព័ត៌មានអំពីរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងនៃវត្ថុ និងសមាសធាតុគីមីរបស់វា។ វ៉ារ្យ៉ង់នៃវិធីសាស្ត្រមីក្រូស្កុបហ្វ្លុយអូរីស ដែលទាំងការរំភើប និងការបំភាយហ្វ្លុយអូរីសកើតឡើងនៅក្នុងតំបន់អ៊ុលត្រាវីយូឡេនៃវិសាលគម ត្រូវបានគេហៅថាវិធីសាស្ត្រ មីក្រូទស្សន៍ fluorescence អ៊ុលត្រាវីយូឡេ.

មីក្រូទស្សន៍កម្រិតពណ៌ដំណាក់កាល។វិធីសាស្រ្តនេះត្រូវបានប្រើដើម្បីទទួលបានរូបភាពកម្រិតពណ៌នៃវត្ថុមានជីវិតថ្លា និងគ្មានពណ៌ ដែលមើលមិនឃើញជាមួយនឹងវិធីសាស្ត្រមីក្រូទស្សន៍ធម្មតា។ ដូចដែលបានបញ្ជាក់រួចមកហើយនៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺធម្មតាភាពផ្ទុយគ្នានៃរចនាសម្ព័ន្ធត្រូវបានសម្រេចដោយស្នាមប្រឡាក់។ វិធីសាស្រ្តកម្រិតពណ៌នៃដំណាក់កាលផ្តល់នូវភាពផ្ទុយគ្នាទៅនឹងរចនាសម្ព័ន្ធដែលមិនបានលាបពណ៌ដែលបានសិក្សាដោយសារតែ diaphragm annular ពិសេសដែលដាក់នៅក្នុង condenser និងអ្វីដែលគេហៅថាដំណាក់កាលដំណាក់កាលដែលមានទីតាំងនៅក្នុងកែវ។ ការរចនានៃមីក្រូទស្សន៍អុបទិកនេះ ធ្វើឱ្យវាអាចបំប្លែងការផ្លាស់ប្តូរដំណាក់កាលនៃពន្លឺដែលឆ្លងកាត់គំរូដែលគ្មានស្នាមប្រឡាក់ ដែលមិនត្រូវបានមើលឃើញដោយភ្នែកទៅជាការផ្លាស់ប្តូរទំហំរបស់វា ពោលគឺឧ។ ពន្លឺនៃរូបភាពលទ្ធផល។ ការបង្កើនកម្រិតពណ៌អនុញ្ញាតឱ្យអ្នកមើលឃើញរចនាសម្ព័ន្ធទាំងអស់ដែលខុសគ្នានៅក្នុងសន្ទស្សន៍ចំណាំងបែរ។ បំរែបំរួលនៃវិធីសាស្ត្រកម្រិតពណ៌ដំណាក់កាល គឺជាវិធីសាស្ត្រ ដំណាក់កាល - កម្រិតពណ៌វាលងងឹត,ផ្តល់រូបភាពកម្រិតពណ៌ដំណាក់កាលអវិជ្ជមានធៀបនឹងវិជ្ជមាន។

មីក្រូទស្សន៍វាលងងឹត។នៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍វាលងងឹត មានតែពន្លឺដែលបង្កើតការបង្វែរនៃរចនាសម្ព័ន្ធនៅក្នុងគំរូប៉ុណ្ណោះ ទើបឈានដល់គោលដៅ។ វាកើតឡើងដោយសារតែវត្តមាននៃ condenser ពិសេសនៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ដែលបំភ្លឺគំរូជាមួយនឹងពន្លឺ oblique យ៉ាងតឹងរឹង; កាំរស្មីពីឧបករណ៍បំភ្លឺត្រូវបានដឹកនាំពីចំហៀង។ ដូច្នេះ វាលនេះហាក់ដូចជាងងឹត ហើយភាគល្អិតតូចៗនៅក្នុងការរៀបចំឆ្លុះបញ្ចាំងពីពន្លឺ ដែលបន្ទាប់មកចូលទៅក្នុងកញ្ចក់។ គុណភាពបង្ហាញនៃមីក្រូទស្សន៍នេះមិនអាចប្រសើរជាងមីក្រូទស្សន៍វាលភ្លឺបានទេ ដោយសារប្រវែងរលកដូចគ្នាត្រូវបានប្រើ។ ប៉ុន្តែនៅទីនេះភាពផ្ទុយគ្នាកាន់តែច្រើនត្រូវបានសម្រេច។ វា​ត្រូវ​បាន​គេ​ប្រើ​ដើម្បី​សិក្សា​វត្ថុ​មាន​ជីវិត វត្ថុ​ស្វ័យ​ប្រវត្តិ ដូចជា​គ្រាប់​ប្រាក់​ដែល​មាន​ពន្លឺ​ភ្លឺ​ក្នុង​ទីងងឹត។ នៅក្នុងគ្លីនិក គេប្រើដើម្បីសិក្សាគ្រីស្តាល់ក្នុងទឹកនោម (អាស៊ីតអ៊ុយរិក អូសាឡាត) ដើម្បីបង្ហាញ spirochetes ជាពិសេស treponema pallidum ដែលបណ្តាលឱ្យកើតរោគស្វាយ។ល។

មីក្រូទស្សន៍ជ្រៀតជ្រែក។ប្រភេទនៃមីក្រូទស្សន៍កម្រិតផ្ទុយដំណាក់កាល គឺជាមីក្រូទស្សន៍ជ្រៀតជ្រែក ដែលត្រូវបានរចនាឡើងដើម្បីកំណត់បរិមាណនៃជាលិកា និងមីក្រូទស្សន៍ជ្រៀតជ្រែកឌីផេរ៉ង់ស្យែល (ជាមួយអុបទិក Nomarski) ដែលត្រូវបានប្រើជាពិសេសដើម្បីសិក្សាពីភាពធូរស្រាលលើផ្ទៃនៃកោសិកា និងវត្ថុជីវសាស្រ្តផ្សេងទៀត។

នៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ជ្រៀតជ្រែក ធ្នឹមពន្លឺពីឧបករណ៍បំភ្លឺត្រូវបានបែងចែកទៅជាស្ទ្រីមពីរ៖ មួយឆ្លងកាត់វត្ថុ និងផ្លាស់ប្តូរដំណាក់កាលយោល ទីពីរឆ្លងកាត់វត្ថុ។ នៅក្នុងព្រីសគោលបំណង ធ្នឹមទាំងពីរត្រូវបានតភ្ជាប់ និងជ្រៀតជ្រែកគ្នាទៅវិញទៅមក។ ជាលទ្ធផល រូបភាពមួយត្រូវបានសាងសង់ឡើង ដែលផ្នែកនៃវត្ថុតូចៗដែលមានកម្រាស់ និងដង់ស៊ីតេខុសគ្នាក្នុងកម្រិតនៃភាពផ្ទុយគ្នា។ បន្ទាប់ពីកំណត់បរិមាណនៃការផ្លាស់ប្តូរ កំណត់កំហាប់ និងម៉ាសនៃសារធាតុស្ងួត។

កម្រិតពន្លឺដំណាក់កាល និងមីក្រូទស្សន៍ជ្រៀតជ្រែក ធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាកោសិការស់បាន។ ពួកគេប្រើឥទ្ធិពលជ្រៀតជ្រែកដែលកើតឡើងនៅពេលដែលរលកពីរបញ្ចូលគ្នាដើម្បីបង្កើតរូបភាពនៃរចនាសម្ព័ន្ធមីក្រូ។ អត្ថប្រយោជន៍នៃកម្រិតពណ៌ដំណាក់កាល ការជ្រៀតជ្រែក និងមីក្រូទស្សន៍វាលងងឹត គឺជាសមត្ថភាពក្នុងការសង្កេតមើលកោសិកាក្នុងដំណើរការនៃចលនា និង mitosis ។ ក្នុងករណីនេះ ចលនាកោសិកាអាចត្រូវបានកត់ត្រាដោយប្រើមីក្រូហ្វីលតាមពេលវេលា (ស៊ុមដោយស៊ុម) ។

មីក្រូទស្សន៍ Polarization ។មីក្រូទស្សន៍រាងប៉ូលគឺជាការកែប្រែនៃមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺដែលតម្រងប៉ូឡារីសពីរត្រូវបានដំឡើង - ទីមួយ (ប៉ូឡា) រវាងធ្នឹមពន្លឺ និងវត្ថុ និងទីពីរ (ឧបករណ៍វិភាគ) រវាងកញ្ចក់វត្ថុ និងភ្នែក។ តាមរយៈតម្រងទីមួយ ពន្លឺឆ្លងកាត់ក្នុងទិសដៅតែមួយ តម្រងទីពីរមានអ័ក្សសំខាន់ដែលកាត់កែងទៅនឹងតម្រងទីមួយ ហើយវាមិនបញ្ជូនពន្លឺទេ។ នេះបង្កើតឥទ្ធិពលវាលងងឹត។ តម្រងទាំងពីរអាចបង្វិលដោយផ្លាស់ប្តូរទិសដៅនៃធ្នឹមពន្លឺ។ ប្រសិនបើឧបករណ៍វិភាគត្រូវបានបង្វិល 90° ទាក់ទងទៅនឹងប៉ូល័រ នោះពន្លឺនឹងមិនឆ្លងកាត់ពួកវាទេ។ រចនាសម្ព័ន្ធដែលមានម៉ូលេគុលតម្រង់ទិសបណ្តោយ (collagen, microtubules, microfilaments) និងរចនាសម្ព័ន្ធគ្រីស្តាល់ (នៅក្នុងកោសិកា Leydig 1) លេចចេញជាពន្លឺនៅពេលដែលការផ្លាស់ប្តូរអ័ក្សបង្វិល។ សមត្ថភាពនៃការបង្កើតគ្រីស្តាល់ ឬ paracrystalline ដើម្បីបំបែករលកពន្លឺទៅជារលកធម្មតា ហើយកាត់កែងទៅវាត្រូវបានគេហៅថា birefringence ។ fibrils នៃសាច់ដុំ striated មានសមត្ថភាពនេះ។

មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង។ជំហានដ៏ធំមួយឆ្ពោះទៅមុខក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍បច្ចេកវិទ្យាមីក្រូទស្សន៍គឺការបង្កើត និងប្រើប្រាស់មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង (សូមមើលរូបទី 1, ខ)។ មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងប្រើចរន្តអេឡិចត្រុងដែលមានរលកខ្លីជាងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ។ នៅវ៉ុល 50,000 V រលកនៃលំយោលអេឡិចត្រូម៉ាញ៉េទិចកើតឡើងនៅពេលដែលលំហូរនៃអេឡិចត្រុងផ្លាស់ទីក្នុងកន្លែងទំនេរគឺ 0.0056 nm ។ វាត្រូវបានគណនាតាមទ្រឹស្តីថាចម្ងាយដែលបានដោះស្រាយក្រោមលក្ខខណ្ឌទាំងនេះអាចមានប្រហែល 0.002 nm ឬ 0.000002 µm ពោលគឺឧ។ តិចជាង 100,000 ដង; ជាងនៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ។ នៅក្នុងការអនុវត្តនៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងទំនើបចម្ងាយដែលបានដោះស្រាយគឺប្រហែល 0.1-0.7 nm ។

បច្ចុប្បន្ននេះ ការបញ្ជូន (ការបញ្ជូន) មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង (TEM) និងការស្កែន (raster) មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង (SEM) ត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយ។ ដោយប្រើ TEM អ្នកអាចទទួលបានរូបភាពប្លង់នៃមីក្រូវត្ថុដែលកំពុងសិក្សាប៉ុណ្ណោះ។ ដើម្បីទទួលបានការតំណាងជាលំហនៃរចនាសម្ព័ន្ធ SEMs ត្រូវបានប្រើដែលមានសមត្ថភាពបង្កើតរូបភាពបីវិមាត្រ។ មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងស្កែនដំណើរការលើគោលការណ៍ស្កែនវត្ថុដែលកំពុងសិក្សាជាមួយមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង ពោលគឺវា "ស៊ើបអង្កេត" ជាបន្តបន្ទាប់គ្នាលើចំណុចនីមួយៗនៃផ្ទៃជាមួយនឹងធ្នឹមអេឡិចត្រុងផ្តោតខ្លាំង។ ដើម្បីសិក្សាតំបន់ដែលបានជ្រើសរើស មីក្រូទស្សន៍ផ្លាស់ទីតាមបណ្តោយផ្ទៃរបស់វាក្រោមឥទ្ធិពលនៃរបុំផ្លាត (គោលការណ៍ស្កែនទូរទស្សន៍)។ ការសិក្សាលើវត្ថុនេះត្រូវបានគេហៅថាការស្កែន (ការអាន) ហើយលំនាំដែលមីក្រូទស្សន៍ផ្លាស់ទីត្រូវបានគេហៅថា raster ។ រូបភាពលទ្ធផលត្រូវបានបង្ហាញនៅលើអេក្រង់ទូរទស្សន៍ ធ្នឹមអេឡិចត្រុងដែលផ្លាស់ទីក្នុងពេលដំណាលគ្នាជាមួយ microprobe ។

គុណសម្បត្តិចម្បងនៃការស្កែនមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងគឺជម្រៅធំនៃវាល ជួរធំទូលាយនៃការផ្លាស់ប្តូរជាបន្តបន្ទាប់ក្នុងការពង្រីក (ពីរាប់សិបទៅរាប់ម៉ឺនដង) និងគុណភាពបង្ហាញខ្ពស់។

មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងដោយប្រើវិធីត្រជាក់- ការច្រេះប្រើដើម្បីសិក្សាលម្អិតនៃរចនាសម្ព័ន្ធនៃភ្នាស និងទំនាក់ទំនងរវាងកោសិកា។ ដើម្បីបង្កើតបន្ទះសៀគ្វី កោសិកាត្រូវកកនៅសីតុណ្ហភាពទាប (-160 °C)។ នៅពេលពិនិត្យភ្នាស យន្តហោះបំបែកឆ្លងកាត់ពាក់កណ្តាលនៃស្រទាប់ខ្លាញ់។ បន្ទាប់មក លោហធាតុ (ប្លាទីន ប៉ាឡាដ្យូម អ៊ុយរ៉ាញ៉ូម) ត្រូវបានបាញ់ទៅលើផ្ទៃខាងក្នុងនៃភ្នាសលទ្ធផល ហើយសិក្សាដោយប្រើ TEM និងមីក្រូថតរូប។

វិធីសាស្រ្តមីក្រូទស្សន៍ Cryoelectron ។ស្រទាប់ស្តើងដែលបង្កកយ៉ាងឆាប់រហ័ស (ប្រហែល 100 nm) នៃគំរូជាលិកាត្រូវបានដាក់នៅលើក្រឡាចត្រង្គមីក្រូទស្សន៍ ហើយពិនិត្យក្នុងម៉ាស៊ីនបូមធូលីមីក្រូទស្សន៍នៅ -160 C ។

វិធីសាស្រ្តមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង "ត្រជាក់"- ឆ្លាក់ "ប្រើដើម្បីសិក្សាផ្ទៃខាងក្រៅនៃភ្នាសកោសិកា។ បន្ទាប់ពីបង្កកកោសិកាយ៉ាងលឿននៅសីតុណ្ហភាពទាប ប្លុកត្រូវបានបំបែកដោយកាំបិត។ គ្រីស្តាល់ទឹកកកជាលទ្ធផលត្រូវបានយកចេញដោយទឹក sublimating នៅក្នុងកន្លែងទំនេរមួយ។ បន្ទាប់មកតំបន់នៃកោសិកាត្រូវបានដាក់ស្រមោលដោយការបញ្ចេញខ្សែភាពយន្តស្តើងនៃលោហៈធ្ងន់ (ឧទាហរណ៍ផ្លាទីន) ។ វិធីសាស្រ្តធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់អត្តសញ្ញាណអង្គការបីវិមាត្រនៃរចនាសម្ព័ន្ធ។

ដូច្នេះ វិធីសាស្រ្តនៃការបំបែកដោយត្រជាក់ និងបង្កក - etching ធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីសិក្សាកោសិកាដែលមិនបានជួសជុលដោយគ្មានការបង្កើតវត្ថុបុរាណដែលបណ្តាលមកពីការជួសជុល។

វិធីសាស្រ្តផ្ទុយគ្នាជាមួយអំបិលលោហៈធ្ងន់ធ្វើឱ្យវាអាចពិនិត្យមើលម៉ាក្រូម៉ូលេគុលនីមួយៗ - DNA ប្រូតេអ៊ីនធំ (ឧទាហរណ៍ myosin) នៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង។ ជាមួយនឹងភាពផ្ទុយគ្នាអវិជ្ជមាន ការប្រមូលផ្តុំនៃ macromolecules (ribosomes, virus) ឬ protein filaments (actin filaments) ត្រូវបានសិក្សា។

មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងនៃផ្នែក ultrathin ទទួលបានដោយ cryo-ultra-microtomy ។នៅក្នុងវិធីនេះ បំណែកនៃជាលិកាដោយគ្មានការជួសជុល ឬបង្កប់នៅក្នុងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយរឹងត្រូវបានធ្វើឱ្យត្រជាក់យ៉ាងឆាប់រហ័សនៅក្នុងអាសូតរាវនៅសីតុណ្ហភាព -196 ° C ។ នេះធានាការរារាំងដំណើរការមេតាបូលីសកោសិកា និងការផ្លាស់ប្តូរទឹកពីដំណាក់កាលរាវទៅដំណាក់កាលរឹង។ បន្ទាប់មកប្លុកត្រូវបានកាត់ដោយប្រើអ៊ុលត្រាសោមនៅសីតុណ្ហភាពទាប។ វិធីសាស្រ្តនៃការរៀបចំផ្នែកនេះជាធម្មតាត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់សកម្មភាពអង់ស៊ីមក៏ដូចជាដើម្បីអនុវត្តប្រតិកម្ម immunochemical ។ ដើម្បីរកឃើញអង់ទីហ្សែន អង្គបដិប្រាណត្រូវបានគេប្រើដែលត្រូវបានផ្សារភ្ជាប់ជាមួយនឹងភាគល្អិតនៃមាស colloidal ដែលការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មដែលងាយស្រួលក្នុងការកំណត់អត្តសញ្ញាណលើការត្រៀមលក្ខណៈ។

វិធីសាស្រ្តនៃមីក្រូទស្សន៍វ៉ុលខ្ពស់ជ្រុល។មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងដែលមានវ៉ុលបង្កើនល្បឿនដល់ទៅ 3,000,000 V ត្រូវបានគេប្រើប្រាស់។ អត្ថប្រយោជន៍នៃមីក្រូទស្សន៍ទាំងនេះគឺថាពួកគេធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាវត្ថុដែលមានកម្រាស់ធំ (1-10 មីក្រូ) ចាប់តាំងពីថាមពលអេឡិចត្រុងខ្ពស់ពួកវាត្រូវបានស្រូបយកតិចដោយវត្ថុ។ . ការថតរូបភាពស្តេរ៉េអូស្កុបអនុញ្ញាតឱ្យមនុស្សម្នាក់ទទួលបានព័ត៌មានអំពីអង្គការបីវិមាត្រនៃរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងកោសិកាជាមួយនឹងគុណភាពបង្ហាញខ្ពស់ (ប្រហែល 0.5 nm) ។

ការវិភាគកាំរស្មីអ៊ិច។ដើម្បីសិក្សារចនាសម្ព័ន្ធនៃម៉ាក្រូម៉ូលេគុលនៅកម្រិតអាតូម វិធីសាស្ត្រត្រូវបានប្រើប្រាស់ដោយប្រើកាំរស្មីអ៊ិចដែលមានរលកចម្ងាយប្រហែល 0.1 nm (អង្កត់ផ្ចិតនៃអាតូមអ៊ីដ្រូសែន)។ ម៉ូលេគុលដែលបង្កើតជាបន្ទះឈើគ្រីស្តាល់ត្រូវបានសិក្សាដោយប្រើលំនាំនៃការសាយភាយ ដែលត្រូវបានកត់ត្រានៅលើចានរូបថតក្នុងទម្រង់ជាចំណុចជាច្រើននៃអាំងតង់ស៊ីតេខុសៗគ្នា។ អាំងតង់ស៊ីតេនៃចំណុចគឺអាស្រ័យលើសមត្ថភាពរបស់វត្ថុផ្សេងៗនៅក្នុងអារេដើម្បីកំចាត់វិទ្យុសកម្ម។ ទីតាំងនៃចំណុចនៅក្នុងលំនាំនៃការបង្វែរគឺអាស្រ័យលើទីតាំងរបស់វត្ថុនៅក្នុងប្រព័ន្ធ ហើយអាំងតង់ស៊ីតេរបស់វាបង្ហាញពីរចនាសម្ព័ន្ធអាតូមិចខាងក្នុងរបស់វា។

វិធីសាស្រ្តសិក្សាកោសិកា និងជាលិកាថេរ

ការសិក្សាអំពីកោសិកា និងជាលិកាថេរ។វត្ថុសំខាន់នៃការសិក្សាគឺ ការត្រៀមលក្ខណៈ histological,រៀបចំពីរចនាសម្ព័ន្ធថេរ។ ការរៀបចំអាចជា smear (ឧទាហរណ៍ លាបឈាម ខួរឆ្អឹង ទឹកមាត់ សារធាតុរាវ cerebrospinal ។ peritoneum, pleura, pia mater), ចំណិតស្តើង។ ភាគច្រើនជាញឹកញាប់ ផ្នែកមួយនៃជាលិកា ឬសរីរាង្គត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសិក្សា។ ការត្រៀមលក្ខណៈ Histological អាចត្រូវបានសិក្សាដោយគ្មានដំណើរការពិសេស។ ឧទាហរណ៍ ការលាបឈាម ការបោះពុម្ព ខ្សែភាពយន្ត ឬផ្នែកសរីរាង្គអាចត្រូវបានពិនិត្យភ្លាមៗនៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍។ ប៉ុន្តែដោយសារតែរចនាសម្ព័ន្ធមានកម្រិតពណ៌ទាប ពួកវាអាចមើលឃើញយ៉ាងលំបាកនៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺធម្មតា ហើយការប្រើប្រាស់មីក្រូទស្សន៍ពិសេស (កម្រិតពណ៌ដំណាក់កាល។

ដំណើរការនៃការរៀបចំ histological សម្រាប់មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺនិងអេឡិចត្រុងរួមមានជំហានសំខាន់ៗដូចខាងក្រោមៈ 1) យកសម្ភារៈនិងជួសជុលវា 2) បង្រួមសម្ភារៈ 3) រៀបចំផ្នែក 4) ផ្នែកស្នាមប្រឡាក់ឬផ្ទុយ។ សម្រាប់មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ ជំហានមួយទៀតត្រូវបានទាមទារ - ការបិទផ្នែកនៅក្នុងប្រទាលមុខ ឬប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយថ្លាផ្សេងទៀត (5) ។ ការជួសជុលធានានូវការការពារនៃដំណើរការ decomposition ដែលជួយរក្សាភាពសុចរិតនៃរចនាសម្ព័ន្ធ។ នេះត្រូវបានសម្រេចដោយការពិតដែលថាគំរូតូចមួយដែលយកចេញពីសរីរាង្គត្រូវបានជ្រមុជនៅក្នុងឧបករណ៍ជួសជុល (ជាតិអាល់កុល, សារធាតុ formaldehyde, ដំណោះស្រាយនៃអំបិលលោហៈធ្ងន់, អាស៊ីត osmic, ល្បាយ fixative ពិសេស) ឬទទួលរងនូវការព្យាបាលកំដៅ។ នៅក្រោមឥទ្ធិពលនៃ fixative នេះ ការផ្លាស់ប្តូររាងកាយ និងគីមីស្មុគស្មាញកើតឡើងនៅក្នុងជាលិកា និងសរីរាង្គ។ សារៈសំខាន់បំផុតនៃពួកវាគឺដំណើរការនៃការ coagulation ប្រូតេអ៊ីនដែលមិនអាចត្រឡប់វិញបានដែលជាលទ្ធផលដែលសកម្មភាពសំខាន់ឈប់ដំណើរការហើយរចនាសម្ព័ន្ធបានងាប់និងជួសជុល។ ការ​ជួសជុល​នាំ​ឱ្យ​មាន​ការ​បង្រួម និង​ការ​កាត់​បន្ថយ​បរិមាណ​នៃ​បំណែក ព្រម​ទាំង​ការ​ធ្វើ​ឱ្យ​ប្រសើរ​ឡើង​នូវ​ពណ៌​បន្តបន្ទាប់​នៃ​កោសិកា និង​ជាលិកា ។

ការបង្រួមបំណែកចាំបាច់សម្រាប់ការរៀបចំផ្នែក ត្រូវបានផលិតដោយ impregnating សម្ភារៈខ្វះជាតិទឹកពីមុនជាមួយ paraffin, celloidin និងជ័រសរីរាង្គ។ ការបង្រួមលឿនជាងមុនត្រូវបានសម្រេចដោយប្រើវិធីសាស្រ្តនៃការបង្កកបំណែកឧទាហរណ៍នៅក្នុងកាបូនឌីអុកស៊ីតរាវ។

ការរៀបចំផ្នែកផលិតនៅលើឧបករណ៍ពិសេស - microtomes(សម្រាប់មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ) និង អ៊ុលត្រាសោម(សម្រាប់មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង) ។

ស្នាមប្រឡាក់ផ្នែក(ក្នុងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ) ឬ បាញ់ពួកវាជាមួយអំបិលដែក(នៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង) ត្រូវបានប្រើដើម្បីបង្កើនភាពផ្ទុយគ្នានៃរូបភាពនៃរចនាសម្ព័ន្ធនីមួយៗ នៅពេលមើលពួកវានៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍។ វិធីសាស្រ្តសម្រាប់ស្នាមប្រឡាក់រចនាសម្ព័ន្ធ histological គឺមានភាពចម្រុះណាស់ហើយត្រូវបានជ្រើសរើសអាស្រ័យលើគោលបំណងនៃការសិក្សា។ ស្នាមប្រឡាក់ Histological ត្រូវបានបែងចែកទៅជាអាស៊ីត មូលដ្ឋាន និងអព្យាក្រឹត។ ឧទាហរណ៏មួយគឺថ្នាំជ្រលក់មូលដ្ឋានដ៏ល្បីល្បាញបំផុតគឺ azure II ដែលប្រឡាក់ nuclei violet និង eosin dye acidic dye ដែលប្រឡាក់ស៊ីតូប្លាស្មាពណ៌ផ្កាឈូក-ទឹកក្រូច។ ភាពស្និទ្ធស្នាលជ្រើសរើសនៃរចនាសម្ព័ន្ធសម្រាប់ការជ្រលក់ពណ៌ជាក់លាក់ត្រូវបានកំណត់ដោយសមាសធាតុគីមីនិងលក្ខណៈសម្បត្តិរូបវន្តរបស់វា។ រចនាសម្ព័ន្ធដែលប្រឡាក់បានល្អជាមួយថ្នាំជ្រលក់អាស៊ីតត្រូវបានគេហៅថា អុកស៊ីហ្វីលីក(acidophilic, eosinophilic) និង​អ្នក​ដែល​ប្រឡាក់​ដោយ​សារធាតុ​មូលដ្ឋាន - basophilic ។រចនាសម្ព័នដែលទទួលយកទាំងទឹកអាស៊ីត និងថ្នាំពណ៌មូលដ្ឋានគឺ neutrophil(តំណពូជ) ។ ការត្រៀមលក្ខណៈពណ៌ជាធម្មតាត្រូវបានខ្សោះជាតិទឹកនៅក្នុងជាតិអាល់កុលបង្កើនកម្លាំង និងជម្រះនៅក្នុង xylene, benzene, toluene ឬប្រេងមួយចំនួន។ សម្រាប់ការរក្សាទុករយៈពេលវែង ផ្នែក histological ដែលខ្សោះជាតិទឹកត្រូវបានរុំព័ទ្ធរវាងកញ្ចក់ស្លាយ និងគម្របនៅកាណាដាបាសាំ ឬសារធាតុផ្សេងទៀត។ សំណាក histological ដែលបានបញ្ចប់អាចត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសិក្សានៅក្រោមមីក្រូទស្សន៍អស់រយៈពេលជាច្រើនឆ្នាំ។ សម្រាប់មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង ផ្នែកដែលទទួលបានជាមួយនឹងអ៊ុលត្រាសោម ត្រូវបានដាក់នៅលើក្រឡាចត្រង្គពិសេស ផ្ទុយពីអំបិលម៉ង់ហ្គាណែស កូបែល ជាដើម បន្ទាប់ពីនោះពួកវាត្រូវបានមើលក្រោមមីក្រូទស្សន៍ និងថតរូប។ លទ្ធផលមីក្រូរូបថតបម្រើជាវត្ថុនៃការសិក្សារួមជាមួយនឹងការត្រៀមលក្ខណៈ histological ។

វិធីសាស្រ្តសិក្សាកោសិការស់ និងជាលិកា

ការសិក្សាអំពីកោសិការស់ និងជាលិកាអនុញ្ញាតឱ្យយើងទទួលបានព័ត៌មានពេញលេញបំផុតអំពីសកម្មភាពជីវិតរបស់ពួកគេ - ដើម្បីតាមដានចលនា ដំណើរការនៃការបែងចែក ការបំផ្លិចបំផ្លាញ ការលូតលាស់ ភាពខុសគ្នា និងអន្តរកម្មនៃកោសិកា រយៈពេលនៃវដ្តជីវិតរបស់ពួកគេ ការផ្លាស់ប្តូរប្រតិកម្មក្នុងការឆ្លើយតប ទៅនឹងសកម្មភាពនៃកត្តាផ្សេងៗ។

ការសិក្សាអំពីកោសិកាក្នុងរាងកាយ (Intravital Study)នៅក្នុងvivo). វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវមួយក្នុងចំនោមវិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវ intravital គឺការសង្កេតនៃរចនាសម្ព័ន្ធនៅក្នុងសារពាង្គកាយមានជីវិត។ ដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍បំភ្លឺបញ្ជូនពិសេស វាអាចសិក្សាពីសក្ដានុពលនៃចរន្តឈាមនៅក្នុងមីក្រូវ៉េវ។ បន្ទាប់ពីការប្រើថ្នាំសន្លប់ត្រូវបានគ្រប់គ្រងលើសត្វ វត្ថុនៃការសិក្សា (ឧទាហរណ៍ ពោះវៀនធំ) ត្រូវបានបញ្ចេញ និងពិនិត្យក្រោមមីក្រូទស្សន៍ ខណៈដែលជាលិកាត្រូវតែមានសំណើមជានិច្ចជាមួយនឹងដំណោះស្រាយក្លរួ sodium isotonic ។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយរយៈពេលនៃការសង្កេតបែបនេះមានកំណត់។ លទ្ធផលល្អបំផុតគឺទទួលបានដោយវិធីសាស្ត្រនៃការផ្សាំកាមេរ៉ាថ្លាទៅក្នុងខ្លួនរបស់សត្វ។

សរីរាង្គដែលងាយស្រួលបំផុតសម្រាប់ការផ្សាំកាមេរ៉ាបែបនេះ និងការសង្កេតជាបន្តបន្ទាប់គឺត្រចៀករបស់សត្វ (ឧទាហរណ៍ ទន្សាយ)។ ផ្នែកមួយនៃត្រចៀកដែលមានអង្គជំនុំជម្រះថ្លាត្រូវបានដាក់នៅលើដំណាក់កាលមីក្រូទស្សន៍ហើយនៅក្រោមលក្ខខណ្ឌទាំងនេះថាមវន្តនៃការផ្លាស់ប្តូរកោសិកានិងជាលិកាត្រូវបានសិក្សាក្នុងរយៈពេលយូរ។ នៅក្នុងវិធីនេះ, ដំណើរការនៃការបណ្តេញ leukocytes ពីសរសៃឈាម, ដំណាក់កាលផ្សេងគ្នានៃការបង្កើតជាលិកាភ្ជាប់, capillaries, សរសៃប្រសាទនិងដំណើរការផ្សេងទៀតអាចត្រូវបានសិក្សា។ ភ្នែករបស់សត្វពិសោធន៍អាចប្រើជាកាមេរ៉ាថ្លាធម្មជាតិ។ កោសិកា ជាលិកា ឬសំណាកសរីរាង្គត្រូវបានដាក់ក្នុងអង្គធាតុរាវនៃបន្ទប់ខាងមុខនៃភ្នែកនៅមុំដែលបង្កើតឡើងដោយកែវភ្នែក និងអាយរីស ហើយអាចមើលបានតាមរយៈកែវភ្នែកច្បាស់។ តាមវិធីនេះ ស៊ុតបង្កកំណើតត្រូវបានប្តូរ ហើយដំណាក់កាលដំបូងនៃការអភិវឌ្ឍន៍អំប្រ៊ីយ៉ុងត្រូវបានតាមដាន។ បំណែកតូចៗនៃស្បូនត្រូវបានប្តូរទៅជាសត្វស្វា ហើយការផ្លាស់ប្តូរនៃភ្នាសស្បូនក្នុងដំណាក់កាលផ្សេងៗគ្នានៃវដ្តរដូវត្រូវបានសិក្សា។

វិធីសាស្រ្តនៃការប្តូរកោសិកាឈាម និងខួរឆ្អឹងពីសត្វម្ចាស់ជំនួយដែលមានសុខភាពល្អទៅសត្វអ្នកទទួលដែលប៉ះពាល់នឹងវិទ្យុសកម្មដ៍សាហាវបានរកឃើញថាមានការប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយ។ សត្វ​អ្នក​ទទួល​នៅ​មាន​ជីវិត​បន្ទាប់​ពី​ការ​ប្តូរ​សរីរាង្គ​ដោយ​សារ​ការ​បញ្ចូល​កោសិកា​អ្នក​ផ្តល់​ជំនួយ ដែល​បង្កើត​ជា​អាណានិគម​នៃ​កោសិកា hematopoietic នៅ​ក្នុង​លំពែង។ ការសិក្សាអំពីចំនួនអាណានិគម និងសមាសភាពកោសិការបស់វា ធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់អត្តសញ្ញាណចំនួនកោសិកាឈាមមេ និងដំណាក់កាលផ្សេងៗនៃភាពខុសគ្នារបស់វា។ ដោយប្រើវិធីសាស្ត្របង្កើតអាណានិគម ប្រភពនៃការអភិវឌ្ឍន៍កោសិកាឈាមទាំងអស់ត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ។

ស្នាមប្រឡាក់សំខាន់និង supravital ។នៅក្នុងការប្រឡាក់កោសិកា និងជាលិកាសំខាន់ៗ (intravital) ថ្នាំជ្រលក់ត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុងខ្លួនរបស់សត្វ ហើយវាជ្រើសរើសស្នាមប្រឡាក់កោសិកាមួយចំនួន សរីរាង្គ ឬសារធាតុអន្តរកោសិកា។ ឧទាហរណ៍ phagocytes ត្រូវបានរកឃើញដោយប្រើ trypan blue ឬ lithium carmine ហើយម៉ាទ្រីសឆ្អឹងដែលទើបបង្កើតថ្មីត្រូវបានរកឃើញដោយប្រើ alizarin ។

ស្នាមប្រឡាក់ Supravital គឺជាស្នាមប្រឡាក់នៃកោសិការស់នៅដាច់ដោយឡែកពីរាងកាយ។ នៅក្នុងវិធីនេះទម្រង់វ័យក្មេងនៃ erythrocytes ត្រូវបានកំណត់អត្តសញ្ញាណ - reticulocytes ឈាម (ជ្រលក់ពណ៌ខៀវដ៏អស្ចារ្យ cresyl), mitochondria នៅក្នុងកោសិកា (លាបពណ៌បៃតង Janus), lysosomes (ជ្រលក់ពណ៌ក្រហមអព្យាក្រឹត) ។

ការសិក្សាអំពីកោសិការស់ និងជាលិកាក្នុងវប្បធម៌ (នៅក្នុងvitro). វិធីសាស្រ្តនេះគឺជារឿងធម្មតាបំផុត។ កោសិកា សំណាកជាលិកាតូចៗ ឬសរីរាង្គដែលដាច់ឆ្ងាយពីរាងកាយមនុស្ស ឬសត្វ ត្រូវបានដាក់ក្នុងកែវ ឬថង់ប្លាស្ទិកដែលមានផ្ទុកសារធាតុចិញ្ចឹមពិសេស - ប្លាស្មាឈាម សារធាតុចម្រាញ់ពីអំប្រ៊ីយ៉ុង ក៏ដូចជាប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយសិប្បនិម្មិត។ មានវប្បធម៌ព្យួរ (កោសិកាដែលផ្អាកក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុក) ជាលិកា សរីរាង្គ និងវប្បធម៌ monolayer (កោសិកាដែលបានពង្រីកបង្កើតជាស្រទាប់បន្តនៅលើកញ្ចក់)។ ភាពក្រៀវនៃបរិស្ថាន និងសីតុណ្ហភាពដែលត្រូវគ្នានឹងសីតុណ្ហភាពរាងកាយត្រូវបានធានា។ នៅក្រោមលក្ខខណ្ឌទាំងនេះ កោសិការក្សាបាននូវសញ្ញាសំខាន់ៗក្នុងរយៈពេលយូរ - សមត្ថភាពក្នុងការលូតលាស់ បង្កើតឡើងវិញ ភាពខុសគ្នា និងផ្លាស់ទី។ វប្បធម៌បែបនេះអាចមានច្រើនថ្ងៃ ខែ និងច្រើនឆ្នាំ ប្រសិនបើឧបករណ៍ផ្ទុកវប្បធម៌ត្រូវបានធ្វើបច្ចុប្បន្នភាព ហើយកោសិកាដែលអាចដំណើរការបានត្រូវបានប្តូរទៅក្នុងនាវាផ្សេងទៀត។ ប្រភេទកោសិកាមួយចំនួន ដោយសារការផ្លាស់ប្តូរហ្សែនរបស់ពួកវា អាចរស់បាន និងគុណនៅក្នុងវប្បធម៌ បង្កើតជាកោសិកាបន្តបន្ទាប់គ្នា។ A. A. Maksimov, A.V. Rumyantsev, N. G. Khlopin, A. D. Timofeevsky, F. M. Lazarenko បានចូលរួមចំណែកយ៉ាងធំធេងក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍វិធីសាស្រ្តសម្រាប់បណ្តុះកោសិកា និងជាលិកា។ បច្ចុប្បន្ននេះ ខ្សែកោសិកានៃ fibroblasts, myocytes, កោសិកា epithelial, macrophages ជាដើមត្រូវបានទទួល ដែលមានតាំងពីច្រើនឆ្នាំមកហើយ។

ការប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្តដាំដុះបានធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់អត្តសញ្ញាណគំរូមួយចំនួននៃភាពខុសគ្នា ការចុះខ្សោយនៃកោសិកាសាហាវ អន្តរកម្មកោសិកា និងអន្តរកម្មនៃកោសិកាជាមួយមេរោគ និងអតិសុខុមប្រាណ។ សមត្ថភាពនៃកោសិកាឆ្អឹងខ្ចីដើម្បីបង្កើតសារធាតុអន្តរកោសិកាក្នុងវប្បធម៌ និងសមត្ថភាពរបស់កោសិកា adrenal ក្នុងការផលិតអរម៉ូនត្រូវបានបង្ហាញ។ ការដាំដុះនៃជាលិកា និងសរីរាង្គនៃអំប្រ៊ីយ៉ុងបានធ្វើឱ្យវាអាចតាមដានការវិវត្តនៃឆ្អឹង ស្បែក និងសរីរាង្គដទៃទៀត។ បច្ចេកទេសសម្រាប់បណ្តុះកោសិកាសរសៃប្រសាទត្រូវបានបង្កើតឡើង។

វិធីសាស្ត្រវប្បធម៌ជាលិកាមានសារៈសំខាន់ជាពិសេសសម្រាប់ធ្វើការអង្កេតពិសោធន៍លើកោសិកា និងជាលិការបស់មនុស្ស។ កោសិកាដែលយកចេញពីរាងកាយមនុស្សកំឡុងពេលចាក់ឬធ្វើកោសល្យវិច័យអាចប្រើក្នុងវប្បធម៌ជាលិកាដើម្បីកំណត់ភេទ ជំងឺតំណពូជ ភាពចុះខ្សោយនៃសាហាវ និងដើម្បីកំណត់ពីផលប៉ះពាល់នៃសារធាតុពុលមួយចំនួន។

ក្នុងប៉ុន្មានឆ្នាំថ្មីៗនេះ វប្បធម៌កោសិកាត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការបង្កាត់កោសិកា។

វិធីសាស្រ្តត្រូវបានបង្កើតឡើងសម្រាប់ការបែងចែកជាលិកាទៅជាកោសិកា ញែកប្រភេទកោសិកានីមួយៗ និងបណ្តុះពួកវា។

ទីមួយ ជាលិកាត្រូវបានបំប្លែងទៅជាការព្យួរកោសិកាដោយបំផ្លាញទំនាក់ទំនងរវាងកោសិកា និងម៉ាទ្រីស intercellular ដោយប្រើអង់ស៊ីម proteolytic (trypsin, collagenase) និង Ca 2+ binding compounds (ដោយប្រើ EDTA - ethylenediaminetetraacetic acid) ។ បន្ទាប់មក ការព្យួរលទ្ធផលត្រូវបានបែងចែកទៅជាប្រភាគនៃកោសិកានៃប្រភេទផ្សេងៗគ្នាដោយប្រើ centrifugation ដែលធ្វើឱ្យវាអាចបំបែកកោសិកាធ្ងន់ជាងពីកោសិកាពន្លឺ កោសិកាធំពីតូច ឬដោយការភ្ជាប់កោសិកាទៅនឹងកញ្ចក់ ឬផ្លាស្ទិច ដែលសមត្ថភាពរបស់វាប្រែប្រួលក្នុងចំណោម ប្រភេទផ្សេងគ្នានៃកោសិកា។ ដើម្បីធានាបាននូវការស្អិតជាប់ជាក់លាក់នៃកោសិកាទៅលើផ្ទៃកញ្ចក់ អង្គបដិប្រាណត្រូវបានប្រើដែលភ្ជាប់ជាពិសេសទៅនឹងកោសិកានៃប្រភេទមួយ។ បន្ទាប់មកកោសិកាដែលប្រកាន់ខ្ជាប់ត្រូវបានបំបែកដោយការបំផ្លាញម៉ាទ្រីសជាមួយនឹងអង់ស៊ីមដែលបណ្តាលឱ្យមានការផ្អាកនៃកោសិកាដូចគ្នា។ វិធីសាស្ត្រ​ដែល​ងាយ​ស្រួល​ជាង​នេះ​នៃ​ការ​បំបែក​កោសិកា​គឺ​ការ​ដាក់​ស្លាក​ជាមួយ​អង្គបដិប្រាណ​ដែល​មាន​ទំនាក់ទំនង​ជាមួយ​នឹង​សារធាតុ​ពណ៌​ fluorescent ។ កោសិកាដែលមានស្លាកត្រូវបានបំបែកចេញពីកោសិកាដែលមិនមានស្លាកដោយប្រើឧបករណ៍តម្រៀប (ឧបករណ៍វិភាគកោសិកាដែលដំណើរការដោយ fluorescence អេឡិចត្រូនិក)។ ឧបករណ៍វិភាគកោសិកាតម្រៀបកោសិកាប្រហែល 5000 ក្នុង 1 ។ កោសិកាដាច់ស្រយាលអាចត្រូវបានសិក្សាក្រោមលក្ខខណ្ឌវប្បធម៌។

វិធីសាស្រ្តនៃការបណ្តុះកោសិកាធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាពីសកម្មភាពសំខាន់របស់ពួកគេ ការបន្តពូជ ភាពខុសគ្នា អន្តរកម្មជាមួយកោសិកាផ្សេងទៀត ឥទ្ធិពលនៃអរម៉ូន កត្តាលូតលាស់។ល។

វប្បធម៌ជាធម្មតាត្រូវបានរៀបចំពីការព្យួរកោសិកាដែលទទួលបានដោយវិធីសាស្ត្របំបែកជាលិកាដែលបានពិពណ៌នាខាងលើ។ កោសិកាភាគច្រើនមិនអាចលូតលាស់នៅក្នុងការព្យួរបានទេ ពួកគេត្រូវការផ្ទៃរឹង ដែលជាផ្ទៃនៃចានវប្បធម៌ផ្លាស្ទិច ជួនកាលមានសមាសធាតុម៉ាទ្រីសក្រៅកោសិកា ដូចជាកូឡាជែនជាដើម។ ដំណាំបឋមសំដៅទៅលើវប្បធម៌ដែលបានរៀបចំភ្លាមៗបន្ទាប់ពីដំណាក់កាលដំបូងនៃការបែងចែកកោសិកា។ អនុវិទ្យាល័យ- វប្បធម៌កោសិកាបានប្តូរពីវប្បធម៌បឋមទៅជាឧបករណ៍ផ្ទុកថ្មី។ កោសិកាអាចត្រូវបានប្តូរបន្តបន្ទាប់គ្នាក្នុងរយៈពេលមួយសប្តាហ៍ ឬច្រើនខែ ដោយកោសិការក្សានូវលក្ខណៈនៃភាពខុសគ្នារបស់វា (ឧទាហរណ៍ កោសិកា epithelial បង្កើតជាស្រទាប់)។ សម្ភារៈចាប់ផ្តើមសម្រាប់វប្បធម៌កោសិកា ជាធម្មតាគឺជាលិកាទារក និងទារកទើបនឹងកើត។

ល្បាយនៃអំបិល អាស៊ីតអាមីណូ វីតាមីន សេរ៉ូមសេះ សារធាតុចម្រាញ់ពីអំប្រ៊ីយ៉ុងមាន់ សេរ៉ូមគភ៌ ជាដើម ត្រូវបានគេប្រើជាប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយសារធាតុចិញ្ចឹម។ ប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយពិសេសត្រូវបានបង្កើតឡើងសម្រាប់បណ្តុះកោសិកាជាច្រើនប្រភេទ។ ពួកវាមានកត្តាលូតលាស់ប្រូតេអ៊ីនមួយ ឬច្រើនដែលចាំបាច់សម្រាប់កោសិកាដើម្បីដំណើរការ និងបង្កើតឡើងវិញ។ ឧទាហរណ៍ កត្តាលូតលាស់សរសៃប្រសាទ (NGF) ត្រូវបានទាមទារសម្រាប់ការលូតលាស់នៃកោសិកាសរសៃប្រសាទ។

កោសិកាភាគច្រើននៅក្នុងវប្បធម៌ឆ្លងកាត់ចំនួនជាក់លាក់នៃការបែងចែក (50-100) ហើយបន្ទាប់មកស្លាប់។ ជួនកាលកោសិកា mutant លេចឡើងនៅក្នុងវប្បធម៌ដែលគុណនឹងគ្មានទីបញ្ចប់និងបង្កើតជាបន្ទាត់កោសិកា (fibroblasts កោសិកា epithelial myoblasts ជាដើម) ។ កោសិកា mutant ខុសពីកោសិកាមហារីក ដែលមានសមត្ថភាពបែងចែកជាបន្ត ប៉ុន្តែអាចលូតលាស់ដោយមិនជាប់នឹងផ្ទៃរឹង។ កោសិកាមហារីកនៅក្នុងចានវប្បធម៌បង្កើតចំនួនប្រជាជនក្រាស់ជាងចំនួនកោសិកាធម្មតា។ ទ្រព្យសម្បត្តិស្រដៀងគ្នាអាចត្រូវបានជំរុញដោយពិសោធន៍នៅក្នុងកោសិកាធម្មតាដោយបំប្លែងពួកវាជាមួយនឹងមេរោគដែលមកពីដុំសាច់ ឬសមាសធាតុគីមី ដែលនាំឱ្យបង្កើតកោសិកាដែលបំប្លែង neoplastically ។ បន្ទាត់កោសិកានៃកោសិកាដែលមិនផ្លាស់ប្តូរនិងបំប្លែងអាចត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងរយៈពេលយូរនៅសីតុណ្ហភាពទាប (-70 ° C) ។ ភាពដូចគ្នា។ ក្លូនគឺជាចំនួនកោសិកាដែលកើតចេញពីកោសិកា progenitor តែមួយ។

កូនកាត់កោសិកា។នៅពេលដែលកោសិកាពីរនៃប្រភេទផ្សេងគ្នាបញ្ចូលគ្នា heterokaryon ត្រូវបានបង្កើតឡើង - កោសិកាដែលមានស្នូលពីរ។ ដើម្បីទទួលបាន heterokaryon ការព្យួរកោសិកាត្រូវបានព្យាបាលដោយសារធាតុ polyethylene glycol ឬមេរោគអសកម្ម ដើម្បីធ្វើឱ្យខូចភ្នាសប្លាស្មានៃកោសិកា បន្ទាប់ពីនោះកោសិកាមានសមត្ថភាពបញ្ចូលគ្នា។ ឧទាហរណ៍ ស្នូលអសកម្មនៃ erythrocyte មាន់ក្លាយជាសកម្ម (ការសំយោគ RNA ការចម្លង DNA) លើការលាយបញ្ចូលគ្នានៃកោសិកា និងផ្ទេរចូលទៅក្នុង cytoplasm នៃកោសិកាមួយផ្សេងទៀតដែលលូតលាស់នៅក្នុងវប្បធម៌ជាលិកា។ heterokaryon មានសមត្ថភាព mitosis ដែលនាំឱ្យមានការបង្កើត កោសិកាកូនកាត់។សែលនៃស្នូលនៃ heterokaryon ត្រូវបានបំផ្លាញ ហើយក្រូម៉ូសូមរបស់វាត្រូវបានរួមបញ្ចូលគ្នានៅក្នុងស្នូលដ៏ធំមួយ។

ការក្លូនកោសិកាកូនកាត់នាំទៅរកការបង្កើតកោសិកាកូនកាត់ ដែលត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសិក្សាអំពីហ្សែន ឧទាហរណ៍ នៅក្នុងខ្សែកោសិកាកូនកាត់កណ្តុរ-មនុស្ស តួនាទីនៃក្រូម៉ូសូមរបស់មនុស្ស 11 ក្នុងការសំយោគអាំងស៊ុយលីនត្រូវបានបង្កើតឡើង។

កូនកាត់។ខ្សែកោសិកា Hybridoma ត្រូវបានប្រើដើម្បីផលិតអង្គបដិប្រាណ monoclonal ។ អង្គបដិប្រាណត្រូវបានផលិតដោយកោសិកាប្លាស្មាដែលត្រូវបានបង្កើតឡើងពី B lymphocytes កំឡុងពេលចាក់ថ្នាំបង្ការ។ ប្រភេទអង់ទីករជាក់លាក់មួយត្រូវបានទទួលដោយការចាក់ថ្នាំបង្ការសត្វកណ្តុរជាមួយនឹងអង់ទីហ្សែនជាក់លាក់។ ប្រសិនបើ lymphocytes ភាពស៊ាំបែបនេះត្រូវបានក្លូន នោះចំនួនអង្គបដិប្រាណដូចគ្នាច្រើនអាចទទួលបាន។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយអាយុកាលរបស់ B lymphocytes នៅក្នុងវប្បធម៌មានកំណត់។ ដូច្នេះពួកវាបញ្ចូលគ្នាជាមួយកោសិកាដុំសាច់ "អមតៈ" (B-lymphomas) ។ ជាលទ្ធផលកូនកាត់ត្រូវបានបង្កើតឡើង (កោសិកាកូនកាត់,ជាមួយនឹងហ្សែនពីកោសិកាពីរផ្សេងគ្នា; អូម៉ា -បញ្ចប់ដោយឈ្មោះនៃដុំសាច់) ។ hybridomas បែបនេះមានសមត្ថភាពក្នុងការគុណសម្រាប់រយៈពេលយូរនៅក្នុងវប្បធម៌និងសំយោគអង្គបដិប្រាណនៃប្រភេទជាក់លាក់មួយ។ ក្លូន hybridoma នីមួយៗគឺជាប្រភពនៃអង្គបដិប្រាណ monoclonal ។ ម៉ូលេគុលអង្គបដិប្រាណទាំងអស់នៃប្រភេទដែលបានផ្តល់ឱ្យមានភាពជាក់លាក់នៃការភ្ជាប់អង់ទីហ្សែនដូចគ្នា។ វាអាចទៅរួចដើម្បីទទួលបានអង្គបដិប្រាណ monoclonal ប្រឆាំងនឹងប្រូតេអ៊ីនណាមួយដែលមាននៅក្នុងកោសិកាហើយប្រើពួកវាដើម្បីកំណត់ការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃប្រូតេអ៊ីននៅក្នុងកោសិកាក៏ដូចជាការញែកប្រូតេអ៊ីនចេញពីល្បាយ (ការបន្សុតប្រូតេអ៊ីន) ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមនុស្សម្នាក់សិក្សារចនាសម្ព័ន្ធនិងមុខងារ។ នៃប្រូតេអ៊ីន។ អង្គបដិបក្ខ Monoclonal ក៏ត្រូវបានគេប្រើនៅក្នុងបច្ចេកវិទ្យាក្លូនហ្សែនផងដែរ។

អង្គបដិប្រាណអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាមុខងារនៃម៉ូលេគុលផ្សេងៗដោយណែនាំពួកវាតាមរយៈប្លាស្មាដោយផ្ទាល់ទៅក្នុង cytoplasm នៃកោសិកាជាមួយនឹងបំពង់កែវស្តើង។ ជាឧទាហរណ៍ ការណែនាំអង្គបដិប្រាណទៅនឹង myosin ចូលទៅក្នុង cytoplasm នៃស៊ុត urchin សមុទ្របង្កកំណើត បញ្ឈប់ការបែងចែកនៃ cytoplasm ។

បច្ចេកវិទ្យា DNA បញ្ចូលគ្នា។វិធីសាស្រ្តហ្សែនបុរាណធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាមុខងារហ្សែនដោយការវិភាគ phenotypes នៃសារពាង្គកាយ mutant និងកូនចៅរបស់វា។ បច្ចេកវិជ្ជា DNA ដែលផ្សំឡើងវិញបានបំពេញបន្ថែមវិធីសាស្ត្រទាំងនេះ ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានការវិភាគលម្អិតអំពីសារធាតុគីមីនៃសម្ភារៈហ្សែន និងការផលិតប្រូតេអ៊ីនកោសិកាក្នុងបរិមាណដ៏ច្រើន។

វិធីសាស្រ្តបង្កាត់ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុងជីវវិទ្យាទំនើបដើម្បីសិក្សាពីរចនាសម្ព័ន្ធនៃហ្សែន និងការបញ្ចេញមតិរបស់វា។

វិធីសាស្រ្តសិក្សាសមាសភាពគីមី និងការរំលាយអាហារនៃកោសិកា និងជាលិកា

ដើម្បីសិក្សាសមាសភាពគីមីនៃរចនាសម្ព័ន្ធជីវសាស្រ្ត - ការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃសារធាតុការប្រមូលផ្តុំនិងថាមវន្តរបស់ពួកគេនៅក្នុងដំណើរការមេតាប៉ូលីសវិធីសាស្ត្រស្រាវជ្រាវពិសេសត្រូវបានប្រើ។

ស៊ីតូ-និង វិធីសាស្រ្ត histochemical ។វិធីសាស្រ្តទាំងនេះធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់អត្តសញ្ញាណការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃសារធាតុគីមីផ្សេងៗនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធនៃកោសិកា ជាលិកា និងសរីរាង្គ - DNA, RNA, ប្រូតេអ៊ីន, កាបូអ៊ីដ្រាត, lipid, អាស៊ីតអាមីណូ, សារធាតុរ៉ែ, វីតាមីន, សកម្មភាពអង់ស៊ីម។ វិធីសាស្រ្តទាំងនេះគឺផ្អែកលើភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្មរវាងសារធាតុប្រតិកម្មគីមី និងស្រទាប់ខាងក្រោមដែលជាផ្នែកមួយនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា និងជាលិកា និងការលាបពណ៌នៃផលិតផលនៃប្រតិកម្មគីមី។ ដើម្បីបង្កើនភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្ម ការគ្រប់គ្រងអង់ស៊ីមត្រូវបានគេប្រើជាញឹកញាប់។ ឧទាហរណ៍ ដើម្បី​រក​ឃើញ​អាស៊ីត ribonucleic (RNA) ក្នុង​កោសិកា ហ្គាឡូស៊ីយ៉ានីន​ត្រូវ​បាន​ប្រើ​ជា​ញឹកញាប់ ថ្នាំ​ជ្រលក់​ពណ៌​ដែល​មាន​លក្ខណៈ​សម្បត្តិ​មូលដ្ឋាន និង​វត្តមាន។ RNAបញ្ជាក់ដោយការគ្រប់គ្រងដោយ ribonuclease ដែលបំបែក RNA ។ ស្នាមប្រឡាក់ Gallocyanine RNAនៅក្នុងពណ៌ខៀវ - violet ។ ប្រសិនបើផ្នែកត្រូវបានព្យាបាលមុនដោយ ribonuclease ហើយបន្ទាប់មកប្រឡាក់ដោយ gallocyanin នោះអវត្ដមាននៃស្នាមប្រឡាក់បញ្ជាក់ពីវត្តមានអាស៊ីត ribonucleic នៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធ។ ការពិពណ៌នាអំពីវិធីសាស្រ្ត cyto- និង histochemical ជាច្រើនត្រូវបានផ្តល់ឱ្យនៅក្នុងសៀវភៅណែនាំពិសេស។

ក្នុងប៉ុន្មានឆ្នាំថ្មីៗនេះ ការរួមបញ្ចូលគ្នានៃវិធីសាស្រ្តគីមីជីវៈជាមួយមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងបាននាំឱ្យមានការវិវត្តនៃទិសដៅថ្មី - អេឡិចត្រុង histochemistry ។ វិធីសាស្រ្តនេះធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីសិក្សាការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃសារធាតុគីមីផ្សេងៗមិនត្រឹមតែនៅកោសិកាប៉ុណ្ណោះទេប៉ុន្តែថែមទាំងនៅកម្រិតកោសិការងនិងម៉ូលេគុលផងដែរ។

ដើម្បីសិក្សាម៉ាក្រូម៉ូលេគុលនៃកោសិកា វិធីសាស្ត្ររសើបខ្លាំងត្រូវបានប្រើដោយប្រើអ៊ីសូតូបវិទ្យុសកម្ម និងអង្គបដិប្រាណ ដែលធ្វើឱ្យវាអាចរកឃើញម៉ូលេគុលតិចតួច (តិចជាង 1000) ។

អ៊ីសូតូមវិទ្យុសកម្មនៅពេលដែលនុយក្លេអ៊ែររលួយ ពួកវាបញ្ចេញភាគល្អិតដែលមានបន្ទុក (អេឡិចត្រុង) ឬវិទ្យុសកម្ម (ឧទាហរណ៍ កាំរស្មីហ្គាម៉ា) ដែលអាចត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងឧបករណ៍ពិសេស។ អ៊ីសូតូបវិទ្យុសកម្មត្រូវបានប្រើក្នុងវិធីសាស្ត្រ autoradiography ។ ឧទាហរណ៍ ដោយប្រើអ៊ីសូតូបវិទ្យុសកម្មនៃ 3 H-thymidine DNA នុយក្លេអ៊ែរត្រូវបានសិក្សា ហើយ RNA ត្រូវបានសិក្សាដោយប្រើ 3 H-uridine ។

វិធីសាស្ត្រ Autoradiography ។វិធីសាស្រ្តនេះធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីសិក្សាពេញលេញបំផុតនៃការរំលាយអាហារនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធផ្សេងគ្នា។ វិធីសាស្រ្តនេះគឺផ្អែកលើការប្រើប្រាស់ធាតុវិទ្យុសកម្ម (ឧទាហរណ៍ផូស្វ័រ - 32 P, កាបូន - 14 C, ស្ពាន់ធ័រ - 35 S, អ៊ីដ្រូសែន - 3 H) ឬសមាសធាតុដែលមានស្លាកជាមួយពួកគេ។ សារធាតុវិទ្យុសកម្មនៅក្នុងផ្នែក histological ត្រូវបានរកឃើញដោយប្រើ emulsion រូបថតដែលត្រូវបានអនុវត្តទៅការរៀបចំហើយបន្ទាប់មកត្រូវបានបង្កើតឡើង។ នៅក្នុងតំបន់នៃថ្នាំដែល photoemulsion ប៉ះនឹងសារធាតុវិទ្យុសកម្ម ប្រតិកម្ម photoreaction កើតឡើងជាលទ្ធផលដែលតំបន់បំភ្លឺ (ផ្លូវ) ត្រូវបានបង្កើតឡើង។ វិធីសាស្រ្តនេះអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់ឧទាហរណ៍ អត្រានៃការបញ្ចូលអាស៊ីតអាមីណូដែលមានស្លាកទៅក្នុងប្រូតេអ៊ីន ការបង្កើតអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក ការរំលាយអាហារអ៊ីយ៉ូតនៅក្នុងកោសិកាទីរ៉ូអ៊ីត។ល។

វិធីសាស្រ្តនៃការវិភាគ immunofluorescence ។ ការអនុវត្តអង្គបដិប្រាណ។អង្គបដិប្រាណគឺជាប្រូតេអ៊ីនការពារដែលផលិតដោយកោសិកាប្លាស្មា (ដេរីវេនៃ B lymphocytes) ដើម្បីឆ្លើយតបទៅនឹងសកម្មភាពនៃសារធាតុបរទេស (អង់ទីហ្សែន) ។ ចំនួននៃទម្រង់ផ្សេងគ្នានៃអង្គបដិប្រាណឈានដល់មួយលាន។ អង្គបដិប្រាណនីមួយៗមានកន្លែងសម្រាប់ "ការទទួលស្គាល់" នៃម៉ូលេគុលដែលបណ្តាលឱ្យមានការសំយោគអង្គបដិប្រាណនេះ។ ដោយសារតែភាពជាក់លាក់ខ្ពស់នៃអង្គបដិបក្ខសម្រាប់អង់ទីហ្សែន ពួកវាអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីរកមើលប្រូតេអ៊ីនកោសិកាណាមួយ។ ដើម្បីបង្ហាញពីការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃប្រូតេអ៊ីន អង្គបដិប្រាណត្រូវបានប្រឡាក់ដោយសារធាតុ fluorescent ហើយបន្ទាប់មកកោសិកាត្រូវបានពិនិត្យដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍ fluorescence ។ អង្គបដិប្រាណក៏អាចត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាអង់ទីហ្សែននៅកម្រិតរចនាសម្ព័ន្ធជ្រុលដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង។ ដើម្បីធ្វើដូចនេះអង្គបដិប្រាណត្រូវបានដាក់ស្លាកដោយភាគល្អិតក្រាស់អេឡិចត្រុង (មីក្រូស្វែរមាស colloidal) ។ ដើម្បីបង្កើនភាពជាក់លាក់នៃប្រតិកម្ម អង្គបដិប្រាណ monoclonal ត្រូវបានប្រើដែលបង្កើតឡើងដោយខ្សែកោសិកា - ក្លូនដែលទទួលបានដោយវិធីសាស្ត្រ hybridoma ពីកោសិកាមួយ។ វិធីសាស្រ្ត hybridoma អនុញ្ញាតឱ្យមនុស្សម្នាក់ទទួលបានអង្គបដិប្រាណ monoclonal ជាមួយនឹងភាពជាក់លាក់ដូចគ្នានិងក្នុងបរិមាណគ្មានដែនកំណត់។

វិធីសាស្រ្តវិភាគ Immunofluorescent ត្រូវបានប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយ និងមានប្រសិទ្ធភាពក្នុងជីវវិទ្យាទំនើប។ វិធីសាស្រ្តទាំងនេះត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាពីដំណើរការនៃភាពខុសគ្នានៃកោសិកា និងកំណត់អត្តសញ្ញាណសមាសធាតុគីមីជាក់លាក់ និងរចនាសម្ព័ន្ធនៅក្នុងពួកវា។ ពួកវាផ្អែកលើប្រតិកម្មអង់ទីហ្សែន - អង្គបដិប្រាណ។ កោសិកានីមួយៗនៃរាងកាយមានសមាសធាតុ antigenic ជាក់លាក់ដែលត្រូវបានកំណត់ជាចម្បងដោយប្រូតេអ៊ីន។ ផលិតផលប្រតិកម្មអាចត្រូវបានប្រឡាក់ និងរកឃើញនៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ហ្វ្លុយអូរីស ឧទាហរណ៍ ការរកឃើញសារធាតុ actin និង tubulin នៅក្នុងកោសិកាដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ immunofluorescence (សូមមើលជំពូកទី IV) ។

វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវទំនើបធ្វើឱ្យវាអាចវិភាគសមាសធាតុគីមីនៃសមាសធាតុរចនាសម្ព័ន្ធផ្សេងៗនៃកោសិកាទាំងថេរនិងរស់នៅ។ ការសិក្សាអំពីរចនាសម្ព័ន្ធខាងក្នុងនៃកោសិកានីមួយៗបានក្លាយទៅជាអាចធ្វើទៅបានបន្ទាប់ពីការអភិវឌ្ឍនៃបច្ចេកវិទ្យាសម្រាប់ការបំបែកមាតិកាកោសិកា។

ប្រភាគនៃមាតិកាកោសិកា

រចនាសម្ព័ន្ធកោសិកា និងម៉ាក្រូម៉ូលេគុលអាចត្រូវបានប្រភាគដោយប្រើវិធីសាស្រ្តផ្សេងៗ - អ៊ុលត្រាហ្សិនទ្រីហ្វហ្គេសិន ក្រូម៉ាតអេក អេឡិចត្រុស។ វិធីសាស្រ្តទាំងនេះត្រូវបានពិពណ៌នាលម្អិតបន្ថែមទៀតនៅក្នុងសៀវភៅសិក្សាជីវគីមី។

Ultracentrifugation ។ ដោយប្រើវិធីសាស្រ្តនេះ កោសិកាអាចត្រូវបានបែងចែកទៅជា organelles និង macromolecules ។ ដំបូងកោសិកាត្រូវបានបំផ្លាញដោយការឆក់ osmotic, អ៊ុលត្រាសោនឬសកម្មភាពមេកានិច។ ក្នុងករណីនេះភ្នាស (plasmolemma, endoplasmic reticulum) បែកខ្ញែកទៅជាបំណែកដែល vesicles តូចៗត្រូវបានបង្កើតឡើង ហើយស្នូល និងសរីរាង្គ (mitochondria, Golgi apparatus, lysosomes និង peroxisomes) នៅតែនៅដដែល ហើយស្ថិតក្នុងដំណាក់កាលបង្កើតការព្យួរ។

ដើម្បីបំបែកសមាសធាតុក្រឡាខាងលើ ឧបករណ៍ centrifuge ល្បឿនលឿន (80,000-150,000 rpm) ត្រូវបានប្រើ។ ទីមួយ ផ្នែកធំ ៗ (ស្នូល ស៊ីតូស្កេតុន) តាំងលំនៅ (ដីល្បាប់) នៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់សាកល្បង។ ជាមួយនឹងការកើនឡើងបន្ថែមទៀតនៅក្នុងល្បឿននៃការប្រមូលផ្តុំនៃប្រភាគ supernatant ភាគល្អិតតូចៗបានដោះស្រាយជាបន្តបន្ទាប់ - ទីមួយ mitochondria, lysosomes និង peroxisomes បន្ទាប់មក microsomes និង vesicles តូចៗ ហើយទីបំផុត ribosomes និង macromolecules ធំ។ ក្នុងអំឡុងពេល centrifugation, ប្រភាគផ្សេងគ្នាដោះស្រាយក្នុងអត្រាផ្សេងគ្នា, បង្កើតជាក្រុមដាច់ដោយឡែកនៅក្នុងបំពង់សាកល្បងដែលអាចត្រូវបានដាច់ឆ្ងាយនិងពិនិត្យ។ ការដកស្រង់កោសិកាប្រភាគ (ប្រព័ន្ធគ្មានកោសិកា) ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយដើម្បីសិក្សាពីដំណើរការខាងក្នុងកោសិកា ឧទាហរណ៍ ដើម្បីសិក្សាជីវសំយោគប្រូតេអ៊ីន ការឌិកូដហ្សែន។ល។

Chromatography ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយសម្រាប់ការបំបែកប្រូតេអ៊ីន។

Electrophoresis អនុញ្ញាតឱ្យបំបែកម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនជាមួយនឹងការចោទប្រកាន់ផ្សេងៗគ្នាដោយដាក់វានៅក្នុងដំណោះស្រាយ aqueous (ឬនៅក្នុងម៉ាទ្រីស porous រឹង) នៅក្នុងវាលអគ្គិសនី។

វិធីសាស្រ្តនៃ chromatography និង electrophoresis ត្រូវបានប្រើដើម្បីវិភាគ peptides ដែលទទួលបានដោយការបំបែកម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីន និងទទួលបានអ្វីដែលគេហៅថា peptide maps នៃប្រូតេអ៊ីន។ វិធីសាស្រ្តទាំងនេះត្រូវបានពិពណ៌នាលម្អិតនៅក្នុងសៀវភៅសិក្សាជីវគីមី។

ការសិក្សាអំពីសមាសធាតុគីមីនៃកោសិការស់។ដើម្បីសិក្សាពីការចែកចាយសារធាតុ និងការបំប្លែងសារជាតិរបស់វានៅក្នុងកោសិការស់ វិធីសាស្ត្រអនុភាពម៉ាញេទិកនុយក្លេអ៊ែរ និងបច្ចេកវិទ្យាមីក្រូអេឡិចត្រូនិចត្រូវបានប្រើប្រាស់។

អនុភាពម៉ាញេទិកនុយក្លេអ៊ែរ (NMR) អនុញ្ញាតឱ្យសិក្សាអំពីម៉ូលេគុលតូចៗនៃសារធាតុទម្ងន់ម៉ូលេគុលទាប។ គំរូជាលិកាមានអាតូមនៅក្នុងម៉ូលេគុលផ្សេងគ្នា និងក្នុងបរិយាកាសផ្សេងៗគ្នា ដូច្នេះវានឹងស្រូបយកថាមពលនៅប្រេកង់ resonant ផ្សេងៗគ្នា។ ដ្យាក្រាមស្រូបយកនៅប្រេកង់ resonant សម្រាប់គំរូដែលបានផ្តល់ឱ្យនឹងជាវិសាលគមរបស់វា។ NMRនៅក្នុងជីវវិទ្យា សញ្ញា NMR ពីប្រូតុង (ស្នូលអ៊ីដ្រូសែន) ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយដើម្បីសិក្សាពីប្រូតេអ៊ីន អាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក។ សញ្ញា NMR និងតាមដានការផ្លាស់ប្តូររបស់វាក្នុងអំឡុងពេលជីវិតរបស់កោសិកា។ ដូច្នេះ, ៣| P ត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាពីការកន្ត្រាក់សាច់ដុំ - ការផ្លាស់ប្តូរខ្លឹមសារនៃ ATP និងផូស្វ័រអសរីរាង្គនៅក្នុងជាលិកា។ អ៊ីសូតូប 13 C ធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាដំណើរការជាច្រើនដែលគ្លុយកូសជាប់ពាក់ព័ន្ធដោយប្រើ NMR ។ ការប្រើប្រាស់ NMR ត្រូវបានកំណត់ដោយភាពប្រែប្រួលទាបរបស់វា៖ 1 ក្រាមនៃជាលិការស់ត្រូវតែមានយ៉ាងហោចណាស់ 0.2 មីលីម៉ែត្រនៃសារធាតុដែលកំពុងសិក្សា។ អត្ថប្រយោជន៍នៃវិធីសាស្រ្តគឺថាវាមិនបង្កគ្រោះថ្នាក់ដល់កោសិការស់។

បច្ចេកវិទ្យាមីក្រូអេឡិចត្រូនិច។ មីក្រូអេឡិចត្រូនិចគឺជាបំពង់កែវដែលពោរពេញទៅដោយដំណោះស្រាយចរន្តអគ្គិសនី (ជាទូទៅជាដំណោះស្រាយនៃ KS1 ក្នុងទឹក) អង្កត់ផ្ចិតនៃចុងបញ្ចប់ត្រូវបានវាស់ជាប្រភាគនៃមីក្រូ។ ព័ត៌មានជំនួយនៃបំពង់បែបនេះអាចត្រូវបានបញ្ចូលទៅក្នុង cytoplasm នៃកោសិកាតាមរយៈ plasmalemma និងកំណត់កំហាប់នៃ H + , Na + , K + , C1 ", Ca 2+, Mg 2+ ions, ភាពខុសគ្នាសក្តានុពលនៅទូទាំងប្លាស្មា។ ហើយ​ក៏​ចាក់​ម៉ូលេគុល​ទៅក្នុង​កោសិកា។​ ដើម្បី​កំណត់​កំហាប់​នៃ​អ៊ីយ៉ុង​ជាក់លាក់​ អេឡិចត្រូត​ជ្រើសរើស​អ៊ីយ៉ុង​ត្រូវ​បាន​ប្រើ​ ដែល​ត្រូវ​បាន​បំពេញ​ដោយ​ជ័រ​ផ្លាស់ប្តូរ​អ៊ីយ៉ុង​ ដែល​អាច​ជ្រាប​ចូល​បាន​តែ​អ៊ីយ៉ុង​ដែល​បាន​ផ្តល់​ឱ្យ​ប៉ុណ្ណោះ​។​ ក្នុង​ប៉ុន្មាន​ឆ្នាំ​ថ្មីៗ​នេះ បច្ចេកវិទ្យា​មីក្រូអេឡិចត្រូត​មាន ត្រូវបានប្រើដើម្បីសិក្សាការដឹកជញ្ជូនអ៊ីយ៉ុងតាមរយៈបណ្តាញអ៊ីយ៉ុងពិសេស (បណ្តាញប្រូតេអ៊ីនពិសេស) នៅក្នុងភ្នាសប្លាស្មា។ ក្នុងករណីនេះ មីក្រូអេឡិចត្រូតដែលមានព័ត៌មានជំនួយក្រាស់ជាង ដែលត្រូវបានសង្កត់យ៉ាងតឹងទៅនឹងផ្នែកដែលត្រូវគ្នានៃប្លាស្មា។ វិធីសាស្ត្រនេះអនុញ្ញាតឱ្យអ្នក សិក្សាមុខងារនៃម៉ូលេគុលប្រូតេអ៊ីនតែមួយ ការផ្លាស់ប្តូរកំហាប់អ៊ីយ៉ុងនៅខាងក្នុងកោសិកាអាចត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើសូចនាករ luminescent ។ ឧទាហរណ៍ ដើម្បីសិក្សាកំហាប់ខាងក្នុងកោសិកានៃ Ca 2+ ប្រូតេអ៊ីន luminescent aquarin (ដាច់ដោយឡែកពី jellyfish) ត្រូវបានគេប្រើ។ ដែលបញ្ចេញពន្លឺនៅក្នុងវត្តមាននៃអ៊ីយ៉ុង Ca 2+ និងឆ្លើយតបទៅនឹងការផ្លាស់ប្តូរកំហាប់នៃសារធាតុក្រោយក្នុងចន្លោះ 0.5-10 µM ។ សូចនាករ fluorescent ដែលភ្ជាប់យ៉ាងរឹងមាំទៅនឹង Ca 2+ ក៏ត្រូវបានសំយោគផងដែរ។ ការបង្កើតសូចនាករ intracellular ប្រភេទថ្មី និងវិធីសាស្រ្តទំនើបនៃការវិភាគរូបភាពធ្វើឱ្យវាអាចកំណត់បានយ៉ាងត្រឹមត្រូវ និងឆាប់រហ័សនូវកំហាប់ intracellular នៃសារធាតុម៉ូលេគុលទាបជាច្រើន។

វិធីសាស្រ្តបរិមាណ

បច្ចុប្បន្ននេះ រួមជាមួយនឹងវិធីសាស្រ្តគុណភាព វិធីសាស្ត្រជីវគីមីបរិមាណត្រូវបានបង្កើតឡើង និងប្រើប្រាស់ដើម្បីកំណត់ខ្លឹមសារនៃសារធាតុផ្សេងៗនៅក្នុងកោសិកា និងជាលិកា។ ភាពប្លែកនៃវិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវជីវគីមីបរិមាណ (ផ្ទុយពីគីមីជីវៈ) គឺជាលទ្ធភាពនៃការសិក្សាពីការប្រមូលផ្តុំ និងខ្លឹមសារនៃសមាសធាតុគីមីនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធជាក់លាក់នៃកោសិកា និងជាលិកា។

cytospectrophotometry- វិធីសាស្រ្តសម្រាប់ការសិក្សាបរិមាណនៃសារធាតុ intracellular ដោយផ្អែកលើវិសាលគមស្រូបរបស់វា។

Cytospectrofluorimetry- វិធីសាស្រ្តនៃការសិក្សាបរិមាណនៃសារធាតុ intracellular ដោយ fluorescence spectra ឬ fluorescence intensity នៅ wavelength ដែលបានជ្រើសរើសជាមុនមួយ (cytofluorimetry) ។

មីក្រូទស្សន៍ទំនើប - cytofluorimetersធ្វើឱ្យវាអាចរកឃើញបរិមាណតិចតួចនៃសារធាតុនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធផ្សេងៗ (រហូតដល់ 10~14 -10~16 ក្រាម) និងវាយតម្លៃការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃសារធាតុដែលកំពុងសិក្សានៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធមីក្រូ។

វិធីសាស្រ្តសម្រាប់ការវិភាគរូបភាពនៃរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកានិងជាលិកា

រូបភាពលទ្ធផលនៃវត្ថុក្នុងមីក្រូទស្សន៍នៅលើអេក្រង់ទូរទស្សន៍ មីក្រូក្រាហ្វអេឡិចត្រុងអាចត្រូវបានទទួលរងនូវការវិភាគពិសេស - ការកំណត់អត្តសញ្ញាណនៃប៉ារ៉ាម៉ែត្រ morphometric, densitometric និងដំណើរការស្ថិតិរបស់ពួកគេ។

វិធីសាស្រ្ត Morphometricអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកកំណត់ដោយជំនួយពីក្រឡាចត្រង្គពិសេស (E. Weibel, A. A. Glagolev, S. B. Stefanov) ចំនួននៃរចនាសម្ព័ន្ធណាមួយ តំបន់ អង្កត់ផ្ចិត។ បានវាស់វែង ទំនាក់ទំនងនុយក្លេអ៊ែរ-ស៊ីតូប្លាមិក។

ក្នុងរយៈពេលប៉ុន្មានឆ្នាំចុងក្រោយនេះ ពួកគេបានរីករាលដាលកាន់តែខ្លាំងឡើង ស្វ័យប្រវត្តិកម្មប្រព័ន្ធដំណើរការរូបភាព (AIS),អនុញ្ញាតឱ្យការអនុវត្តប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពបំផុតនៃវិធីសាស្រ្តបរិមាណខាងលើសម្រាប់ការសិក្សាកោសិកា និងជាលិកា។ ទន្ទឹមនឹងនេះ សមត្ថភាពវិភាគនៃមីក្រូទស្សន៍បរិមាណត្រូវបានបំពេញបន្ថែមដោយវិធីសាស្រ្តនៃការវិភាគ និងការទទួលស្គាល់គំរូដោយផ្អែកលើដំណើរការព័ត៌មានដែលស្រង់ចេញពីរូបភាពនៃកោសិកា និងជាលិកាដោយប្រើកុំព្យូទ័រអេឡិចត្រូនិច។ ជាសំខាន់ យើងអាចនិយាយអំពីឧបករណ៍ដែលមិនត្រឹមតែបង្កើនសមត្ថភាពអុបទិករបស់អ្នកវិភាគដែលមើលឃើញរបស់មនុស្សប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែថែមទាំងពង្រីកសមត្ថភាពវិភាគរបស់វាយ៉ាងខ្លាំងផងដែរ។ វាត្រូវបានណែនាំថា ACOIs កំពុងធ្វើបដិវត្តដូចគ្នានៅក្នុងរូបវិទ្យាដែលបានកើតឡើងប្រហែល 300 ឆ្នាំមុនដោយសារការច្នៃប្រឌិតនៃមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ ហើយប្រហែល 50 ឆ្នាំមុន - មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងចាប់តាំងពីពួកគេមិនត្រឹមតែបង្កើនផលិតភាពរបស់អ្នកស្រាវជ្រាវមិនអាចវាស់វែងបាននោះទេ។ កំណត់តែការសង្កេតប៉ុណ្ណោះ ប៉ុន្តែក៏អនុញ្ញាតឱ្យទទួលបានព័ត៌មានថ្មីអំពីដំណើរការដែលមិនបានរកឃើញពីមុន ធ្វើគំរូជាលេខ និងព្យាករណ៍ពីការអភិវឌ្ឍន៍របស់ពួកគេនៅក្នុងកោសិកា និងជាលិកា។

ទន្ទឹមនឹងនេះ ការចូលរួមក្នុងការពិសោធន៍កុំព្យូទ័រទាមទារឱ្យអ្នកស្រាវជ្រាវមានវិធីសាស្រ្តថ្មីក្នុងការអនុវត្តរបស់ខ្លួន មានជំនាញក្នុងការគូរឡើងនូវក្បួនដោះស្រាយសម្រាប់ដំណើរការស្រាវជ្រាវ ភាពត្រឹមត្រូវនៃការវែកញែក និងទីបំផុត ដើម្បីបង្កើនកម្រិតវិទ្យាសាស្ត្រ និងវិធីសាស្រ្ត។ នៃការស្រាវជ្រាវ។

វិធីសាស្រ្តមួយក្នុងចំណោមវិធីសាស្រ្តដែលបានពង្រីកយ៉ាងខ្លាំងចំនួននៃបញ្ហា morphological ដែលអាចដោះស្រាយបានគឺ ការវិភាគម៉ាស៊ីនរចនាសម្ព័ន្ធអុបទិក (OSMA),ស្នើឡើងនៅឆ្នាំ ១៩៦៥ ដោយ K.M. Bogdanov ។ នៅឆ្នាំ 1978 អ្នកនិពន្ធនៃវិធីសាស្រ្តនេះបានទទួលរង្វាន់រដ្ឋសហភាពសូវៀត។ ជាមួយនឹងការមកដល់នៃ OSMA ជំហានថ្មីប្រកបដោយគុណភាពត្រូវបានយកទៅក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍វិធីសាស្រ្តបង្រួបបង្រួមសម្រាប់ការវិភាគបរិមាណនៃរចនាសម្ព័ន្ធមីក្រូដោយផ្អែកលើលក្ខណៈស្ថិតិ។ ថ្មីៗនេះ OSMA បានរកឃើញកម្មវិធីដ៏មានប្រសិទ្ធភាពក្នុងការអនុវត្តការស្រាវជ្រាវ និងសេដ្ឋកិច្ចជាតិ។

នៅក្នុងរូបភព។ រូបភាពទី 2 បង្ហាញពីប្រព័ន្ធដំណើរការរូបភាពស្វ័យប្រវត្តិ Protva-MP ដែលបង្កើតនៅក្នុងប្រទេសរបស់យើងដោយក្រុមហ៊ុន LOMO ។ ប្រព័ន្ធនេះត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់ការសិក្សាស្មុគ្រស្មាញនៃកោសិកា និងជាលិកាដោយប្រើការស្រូប មីក្រូទស្សន៍ fluorescence និងវិធីសាស្ត្រ autoradiography ។

ការស្កែនអុបទិក ឬមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុងពិសេសដែលរួមបញ្ចូលក្នុងប្រព័ន្ធ ធ្វើការមើលរូបភាពថ្នាំតាមលំដាប់លំដោយក្នុងកូអរដោណេពីរ បំប្លែងវាទៅជាទម្រង់ឌីជីថល ហើយបញ្ចូលវាទៅក្នុងកុំព្យូទ័រ ដែលដំណើរការរូបភាពឌីជីថល និងផ្តល់ព័ត៌មានអំពីធរណីមាត្រ។ និងលក្ខណៈផ្សេងទៀតនៃវត្ថុដែលបានវិភាគ។

ដោយប្រើការបង្ហាញពណ៌ អ្នកស្រាវជ្រាវអាច "បំបែក" រូបភាពដោយរំលេចតែសមាសធាតុរចនាសម្ព័ន្ធទាំងនោះដែលគាត់ចាប់អារម្មណ៍។ ឧបករណ៍ផ្ទុកព័ត៌មានដែលមានសមត្ថភាពនៅលើថាសម៉ាញ៉េទិច ឬខ្សែអាត់ដែលរួមបញ្ចូលក្នុងកុំព្យូទ័រ ធ្វើឱ្យវាអាចរក្សាទុកទាំងរូបភាពដោយខ្លួនឯង និងលទ្ធផលនៃការដំណើរការរបស់ពួកគេសម្រាប់ការរក្សាទុក និងឯកសារជាបន្តបន្ទាប់។

ចូរយើងពិចារណាអំពីការប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្តសម្រាប់ការវិភាគដោយស្វ័យប្រវត្តិនៃវត្ថុតូចៗដោយប្រើឧទាហរណ៍នៃដំណើរការរូបភាពនៃ leukocyte ឈាម (រូបភាពទី 3) ។ មីក្រូទស្សន៍ស្កែនរូបថតអនុញ្ញាតឱ្យអ្នក "មើល" តម្លៃដង់ស៊ីតេអុបទិកតាមបន្ទាត់ជាមួយ ជំហានដែលបានបញ្ជាក់ដោយអ្នកស្រាវជ្រាវ។ ជាលទ្ធផល សញ្ញាអុបទិកដែលត្រូវគ្នានឹងដង់ស៊ីតេអុបទិករបស់វត្ថុត្រូវបានបំប្លែងទៅជាទម្រង់ឌីជីថល។ លទ្ធផលម៉ាទ្រីសឌីជីថលជាកម្មវត្ថុនៃការរៀបចំដោយប្រើឧបករណ៍គណិតវិទ្យាពិសេស។

ទីមួយ ផ្ទៃខាងក្រោយត្រូវបានដកចេញ ហើយវត្ថុ "បរិសុទ្ធ" ដាច់ឆ្ងាយពីគ្នា - រូបភាពនៃក្រឡា (1a) បន្ទាប់មកព័ត៌មានលម្អិតដែលអ្នកស្រាវជ្រាវត្រូវបានញែកចេញពីរូបភាពកោសិកា ឧទាហរណ៍ ស៊ីតូប្លាស (16) និងស្នូល (I លំដាប់មធ្យម និងតម្លៃអាំងតេក្រាលនៃដង់ស៊ីតេអុបទិក ការបែកខ្ញែក asymmetry, kurtosis ជាដើម។ ពីរូបភាពនៃវត្ថុ ប៉ារ៉ាម៉ែត្រ morphometric ត្រូវបានទទួល៖ តំបន់ បរិមាត្រ អង្កត់ផ្ចិត សមាមាត្រនុយក្លេអ៊ែរ-ស៊ីតូប្លាមិក មេគុណរាង។ល។

ដំណាក់កាលបន្ទាប់នៃដំណើរការរូបភាពគឺការស្ថាបនាដ្យាក្រាមពីរវិមាត្រនៃភាពអាស្រ័យគ្នាទៅវិញទៅមកនៃដង់ស៊ីតេអុបទិកសម្រាប់កោសិកាទាំងមូល (សូមមើលរូបទី 3) ស៊ីតូប្លាស្មារបស់វា (Shb) និងស្នូល (Shv) ដូចគ្នានឹងករណីទីមួយដែរ នៅក្នុង ដ្យាក្រាមនៃក្រឡាទាំងមូល (Sha) ដំណាក់កាល cytoplasmic អាចត្រូវបានសម្គាល់ ហើយខឺណែល ដ្យាក្រាមទាំងនេះអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកគណនាប៉ារ៉ាម៉ែត្រអ៊ីស្តូក្រាមនៃលំដាប់ទីពីរ៖ ភាពដូចគ្នា កម្រិតពណ៌ក្នុងមូលដ្ឋាន ធាតុបញ្ចូល។ល។

អង្ករ។ H. ដំណើរការរូបភាពក្រឡាដោយស្វ័យប្រវត្តិ (ដ្យាក្រាម)។

រូបភាពនៃ leukocyte (a), cytoplasm (b) និង nucleus (c) ។ ខ្ញុំ - រូបភាពឌីជីថល; II - អ៊ីស្តូក្រាមដង់ស៊ីតេអុបទិក; III - អ៊ីស្តូក្រាមពីរវិមាត្រនៃការពឹងផ្អែកនៃតម្លៃដង់ស៊ីតេអុបទិក។

ប៉ារ៉ាម៉ែត្រដែលទទួលបានតាមវិធីនេះតំណាងឱ្យ "បញ្ឈរ" ពហុវិមាត្រនៃក្រឡា និងមានកន្សោមលេខជាក់លាក់។ ពួកវាអាចត្រូវបានទទួលរងនូវវិធីសាស្រ្តផ្សេងៗនៃដំណើរការស្ថិតិ ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានការចាត់ថ្នាក់យ៉ាងត្រឹមត្រូវនៃវត្ថុមីក្រូ កំណត់លក្ខណៈនៃរចនាសម្ព័ន្ធរបស់ពួកគេដែលមិនអាចរកឃើញដោយមើលឃើញ។

ដូច្នេះការប្រើប្រាស់វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវថ្មីនៅក្នុង histology, cytology និង embryology ធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីបញ្ជាក់អំពីគំរូទូទៅនៃការរៀបចំជាលិកានិងកោសិកាដែលជាមូលដ្ឋានរចនាសម្ព័ន្ធនៃដំណើរការជីវគីមីដែលកំណត់មុខងារនៃសមាសធាតុរចនាសម្ព័ន្ធជាក់លាក់នៃកោសិកា។

រចនាសម្ព័ន រចនាសម្ព័ន្ធអ៊ុលត្រាសោន និងការដំណើរការនៃសរីរាង្គកោសិកាបច្ចុប្បន្នកំពុងត្រូវបានសិក្សាដោយប្រើវិធីសាស្ត្រសំខាន់ៗដូចខាងក្រោមៈ ពន្លឺ និងអេឡិចត្រុង វាលងងឹត កម្រិតកម្រិតពណ៌ ប៉ូលឡាសៀស មីក្រូទស្សន៍ fluorescent ដែលប្រើដើម្បីសិក្សារចនាសម្ព័ន្ធ រចនាសម្ព័ន្ធជ្រុលនៃកោសិកាថេរ និងការផ្ចិតឌីផេរ៉ង់ស្យែល ដែលអនុញ្ញាតឱ្យញែកសរីរាង្គនីមួយៗដាច់ដោយឡែក និងវិភាគពួកវាដោយប្រើ cytochemical, biochemical, biophysical និងវិធីសាស្រ្តផ្សេងទៀត។

មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ។

គោលការណ៍នៃវិធីសាស្ត្រគឺ ពន្លឺដែលឆ្លងកាត់វត្ថុមួយចូលទៅក្នុងប្រព័ន្ធកែវភ្នែក ហើយបង្កើតរូបភាពបឋម ដែលត្រូវបានពង្រីកដោយប្រើកែវភ្នែក។ ផ្នែកអុបទិកសំខាន់នៃមីក្រូទស្សន៍ដែលកំណត់សមត្ថភាពចម្បងរបស់វាគឺកញ្ចក់។

នៅក្នុងមីក្រូទស្សន៍ទំនើប កញ្ចក់អាចផ្លាស់ប្តូរបាន ដែលធ្វើឱ្យវាអាចសិក្សាកោសិកានៅកម្រិតពង្រីកផ្សេងៗគ្នា។ លក្ខណៈសំខាន់នៃមីក្រូទស្សន៍ជាប្រព័ន្ធអុបទិកគឺដំណោះស្រាយ ពោលគឺឧ។ សមត្ថភាពក្នុងការផ្តល់រូបភាពដាច់ដោយឡែកនៃវត្ថុពីរនៅជិតគ្នាទៅវិញទៅមក។

រូបភាពដែលផលិតដោយកញ្ចក់អាចពង្រីកបានច្រើនដង ដោយប្រើកែវភ្នែកខ្លាំង ឬឧទាហរណ៍ ការបញ្ចាំងលើអេក្រង់ (រហូតដល់ 10 5 ដង)។ អំណាចដោះស្រាយនៃមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺត្រូវបានកំណត់ដោយរលកពន្លឺ៖ ប្រវែងរលកកាន់តែខ្លី ថាមពលដោះស្រាយកាន់តែខ្ពស់។ ជាធម្មតា មីក្រូទស្សន៍ពន្លឺប្រើប្រាស់ប្រភពពន្លឺនៅក្នុងតំបន់ដែលអាចមើលឃើញនៃវិសាលគម (400-700 nm) ដូច្នេះដំណោះស្រាយអតិបរមានៃមីក្រូទស្សន៍ក្នុងករណីនេះអាចមិនខ្ពស់ជាង 200-350 nm (0.2-0.35 µm) ទេ។ ប្រសិនបើអ្នកប្រើពន្លឺ violet (260-280 nm) អ្នកអាចបង្កើនគុណភាពបង្ហាញដល់ 130 - 140 nm (0.13-0.14 microns) ។ នេះនឹងជាដែនកំណត់នៃដំណោះស្រាយទ្រឹស្តីនៃមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ ដែលកំណត់ដោយធម្មជាតិរលកនៃពន្លឺ។

ដូច្នេះ អ្វីទាំងអស់ដែលមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺអាចផ្តល់ជាឧបករណ៍ជំនួយដល់ភ្នែករបស់យើងគឺបង្កើនគុណភាពបង្ហាញរបស់វាប្រហែល 1000 ដង (ភ្នែកទទេរបស់មនុស្សមានគុណភាពបង្ហាញប្រហែល 0.1 មីលីម៉ែត្រ ដែលស្មើនឹង 100 មីក្រូន)។ នេះគឺជាការពង្រីក "មានប្រយោជន៍" នៃមីក្រូទស្សន៍ ដែលយើងនឹងបង្កើនវណ្ឌវង្កនៃរូបភាពដោយមិនបង្ហាញព័ត៌មានលម្អិតថ្មីនៅក្នុងវា។ ដូច្នេះនៅពេលប្រើពន្លឺដែលអាចមើលឃើញ 0.2-0.3 µm គឺជាដែនកំណត់ដំណោះស្រាយចុងក្រោយនៃមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ។

មីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង។

សម្រាប់ការស្កែនមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង សម្ភារៈត្រូវបានកកជាញឹកញាប់ដើម្បីបង្កើតផ្ទៃដែលគ្របដណ្តប់ដោយទឹកកក។ ក្នុងករណីនេះការបាត់បង់ទឹកនិងសារធាតុរលាយក្នុងទឹកត្រូវបានលុបចោលហើយការផ្លាស់ប្តូរគីមីនៅក្នុងរចនាសម្ព័ន្ធក៏តូចជាងផងដែរ។ នៅពេលវិភាគទិន្នន័យដែលទទួលបានដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង វាត្រូវតែចងចាំថាវិធីសាស្ត្រនេះពិនិត្យស្ថានភាពឋិតិវន្តនៃកោសិកានៅពេលនៃការបញ្ឈប់យ៉ាងឆាប់រហ័សនៃចលនារបស់ cytoplasm ដែលបណ្តាលមកពីឥទ្ធិពលនៃការជួសជុលសារធាតុគីមី។

មីក្រូទស្សន៍វាលងងឹត.

ខ្លឹមសាររបស់វាគឺថា ដូចជាភាគល្អិតធូលីនៅក្នុងធ្នឹមពន្លឺ (ឥទ្ធិពល Tyndall) ភាគល្អិតតូចៗ (តិចជាង 0.2 មីក្រូ) បញ្ចេញពន្លឺនៅក្នុងក្រឡាក្រោមពន្លឺចំហៀង ដែលជាពន្លឺឆ្លុះបញ្ចាំងដែលចូលទៅក្នុងកញ្ចក់មីក្រូទស្សន៍។ វិធីសាស្រ្តនេះត្រូវបានប្រើប្រាស់ដោយជោគជ័យក្នុងការសិក្សាអំពីកោសិការស់។

ដើម្បីកំណត់ការធ្វើមូលដ្ឋានីយកម្មនៃទីតាំងនៃការសំយោគ biopolymer ដើម្បីកំណត់ការដឹកជញ្ជូនសារធាតុនៅក្នុងកោសិកាមួយ ដើម្បីតាមដានការធ្វើចំណាកស្រុក ឬលក្ខណៈសម្បត្តិនៃកោសិកានីមួយៗ ពួកវាត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយ។ វិធីសាស្រ្ត autoradiography- ការចុះបញ្ជីសារធាតុដែលមានស្លាកអ៊ីសូតូប។ ជាឧទាហរណ៍ ដោយប្រើវិធីសាស្ត្រនេះ ដោយប្រើស្លាកសញ្ញា RNA មុនគេ វាត្រូវបានបង្ហាញថា RNA ទាំងអស់ត្រូវបានសំយោគតែនៅក្នុងស្នូល interphase ហើយវត្តមានរបស់ cytoplasmic RNA គឺជាលទ្ធផលនៃការធ្វើចំណាកស្រុកនៃម៉ូលេគុលសំយោគពីស្នូល។

នៅក្នុង cytology, ផ្សេងគ្នា វិធីសាស្រ្តវិភាគនិងការរៀបចំជីវគីមី។ ក្នុងករណីចុងក្រោយ គេអាចទទួលបានសមាសធាតុកោសិកាផ្សេងៗក្នុងទម្រង់ជាប្រភាគដាច់ដោយឡែក ហើយសិក្សាពីគីមីវិទ្យា រចនាសម្ព័ន្ធ និងលក្ខណៈសម្បត្តិរបស់វា។ បច្ចុប្បន្ននេះ សរីរាង្គ និងរចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាស្ទើរតែទាំងអស់ត្រូវបានទទួលក្នុងទម្រង់ជាប្រភាគសុទ្ធ។

មធ្យោបាយសំខាន់មួយដើម្បីបំបែករចនាសម្ព័ន្ធកោសិកាគឺ ឌីផេរ៉ង់ស្យែល (ការបំបែក) ការផ្តោតអារម្មណ៍។គោលការណ៍នៃការអនុវត្តរបស់វាគឺថា ពេលវេលាសម្រាប់ភាគល្អិតដើម្បីតាំងលំនៅក្នុងភាពដូចគ្នាគឺអាស្រ័យលើទំហំ និងដង់ស៊ីតេរបស់វា៖ ភាគល្អិតធំជាង ឬធ្ងន់ជាង វានឹងកាន់តែលឿនជាងមុន វានឹងទៅនៅខាងក្រោមបំពង់សាកល្បង។ ដើម្បីបង្កើនល្បឿនដំណើរការ sedimentation ការបង្កើនល្បឿនដែលបង្កើតឡើងដោយ centrifuge ត្រូវបានប្រើ។

ដោយការបង្វែរប្រភាគម្តងហើយម្តងទៀតនៃប្រភាគចម្រុះ ប្រភាគសុទ្ធអាចទទួលបាន។ នៅក្នុងករណីនៃការបំបែកផ្នែកល្អិតល្អន់នៃប្រភាគ ការ centrifugation នៅក្នុងជម្រាលដង់ស៊ីតេ sucrose ត្រូវបានប្រើដែលធ្វើឱ្យវាអាចធ្វើទៅបានដើម្បីបំបែកសមាសធាតុបានយ៉ាងល្អដែលសូម្បីតែខុសគ្នាបន្តិចពីគ្នាទៅវិញទៅមកនៅក្នុងទំនាញជាក់លាក់។ ប្រភាគលទ្ធផល មុននឹងវិភាគដោយវិធីសាស្ត្រជីវគីមី ត្រូវតែពិនិត្យរកភាពបរិសុទ្ធដោយប្រើមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង។

ត្រួតពិនិត្យសំណួរ៖

1. កម្រិតនៃការរៀបចំសារធាតុរស់នៅ

2. ទ្រឹស្តីកោសិកានៃអង្គការនៃសារពាង្គកាយ

3. វិធីសាស្រ្តស្រាវជ្រាវក្នុង cytology

4. គោលបំណងនិងប្រធានបទនៃ cytology

5. ការរចនាមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺ

6. រចនាសម្ព័ន្ធមីក្រូទស្សន៍អេឡិចត្រុង

7. ការប្រុងប្រយ័ត្នសុវត្ថិភាពក្នុងអំឡុងពេលការងារ cytological

8. តម្រូវការសម្រាប់ការរៀបចំសម្ភារៈជីវសាស្រ្តសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវ cytological

9. ជួសជុលសារធាតុ យន្តការនៃសកម្មភាព

10. Cytochemistry តម្រូវការសម្ភារៈ និងសមត្ថភាព

11. ការវិភាគបរិមាណ (morphometry) តម្រូវការ និងសមត្ថភាព

12. វត្ថុបុរាណក្នុង cytology វិធីដើម្បីជំទាស់លទ្ធផល

1. Zavarzin A.A., Kharazova A.D. មូលដ្ឋានគ្រឹះនៃ cytology ទូទៅ។ - អិល, ១៩៨២ ។

2. Chentsov Yu.S. មូលដ្ឋានគ្រឹះនៃ cytology ។ - M. , 1984 ។

3. Shubnikova E.A. morphology មុខងារនៃជាលិកា។ - M. , Moscow State University Publishing House, 1981 ។