संगठनात्मक संकेतक

महकप्राकृतिक जल वाष्पशील गंध वाले पदार्थों के कारण होता है जो प्राकृतिक रूप से या सीवेज के साथ पानी में प्रवेश करते हैं। केवल अकार्बनिक पदार्थ वाले स्प्रिंग्स में हाइड्रोजन सल्फाइड की गंध आ सकती है। गंध की तीव्रता का अनुमान पांच-बिंदु पैमाने पर बिंदुओं में लगाया जाता है, जो 20 डिग्री सेल्सियस के पानी के तापमान पर निर्धारित होता है। GOST के अनुसार, पीने के पानी में 2 अंक तक गंध आ सकती है।

अध्ययन किए गए झरनों में मुख्य गंध हाइड्रोजन सल्फाइड है। प्राकृतिक जल में हाइड्रोजन सल्फाइड का स्रोत पुनर्प्राप्ति प्रक्रिया है जो बैक्टीरिया के अपघटन और प्राकृतिक मूल के कार्बनिक पदार्थों के जैव रासायनिक ऑक्सीकरण और अपशिष्ट जल के साथ जल निकायों में प्रवेश करने वाले पदार्थों के दौरान होती है। हाइड्रोजन सल्फाइड स्प्रिंग्स के पानी में गैर-विघटित H2S अणुओं और हाइड्रोसल्फेट HS आयनों के रूप में पाया जाता है। पानी में हाइड्रोजन सल्फाइड की उपस्थिति इसके गंभीर प्रदूषण और अवायवीय स्थितियों का सूचक है। यह इसकी खपत की असंभवता का कारण है, क्योंकि हाइड्रोजन सल्फाइड में एक उच्च विषाक्तता, एक खराब गंध है, जो पानी के ऑर्गेनोलेप्टिक गुणों को तेजी से खराब कर देता है, जिससे यह पेयजल आपूर्ति, तकनीकी और आर्थिक उद्देश्यों के लिए अनुपयुक्त हो जाता है।

क्रोमापानी में रंगीन कार्बनिक यौगिकों की सामग्री, ह्यूमिक यौगिकों की उपस्थिति, फेरिक आयरन की सामग्री, मिट्टी से विभिन्न पदार्थों की लीचिंग और दूषित अपशिष्ट जल के प्रवेश के कारण। ह्यूमिक पदार्थ - पौधे के अवशेषों के अपघटन का परिणाम - पानी को रंग दें, यह एकाग्रता पर निर्भर करता है, पीला या भूरा। रंग की डिग्री प्लैटिनम-कोबाल्ट पैमाने की डिग्री में व्यक्त की जाती है। उच्च या बढ़ा हुआ रंग जीवित जीवों के विकास पर प्रतिकूल प्रभाव डालता है, पानी में घुलने वाले लोहे के ऑक्सीकरण की स्थिति को खराब करता है।

SanPiN के अनुसार रंग मानक 30 डिग्री है।

गंदगी SanPiN मानकों के अनुसार, यह 1.5 mg / l से अधिक नहीं होना चाहिए। झरनों में पानी की गंदलापन अक्सर गाद के निलंबित कणों, महीन मिट्टी, कुल लोहे की उच्च सामग्री और कई अन्य पदार्थों की उपस्थिति पर निर्भर करती है, जो अक्सर अविकसित या खराब सुसज्जित स्थानों से जुड़े होते हैं जहां स्प्रिंग्स बाहर निकलते हैं और पानी के भंडारण टैंक होते हैं, और स्प्रिंग्स की कम प्रवाह दर।

हाइड्रोजन इंडेक्स (पीएच)एक मान है जो समाधान में हाइड्रोजन आयनों की एकाग्रता की गतिविधि की विशेषता है और संख्यात्मक रूप से इस गतिविधि या एकाग्रता के नकारात्मक दशमलव लघुगणक के बराबर है, जिसे mol/dm3 में व्यक्त किया गया है:

यदि 22°C पर जल में 10-7.2 mol/dm3 हाइड्रोजन आयन (H+) है, तो इसकी उदासीन प्रतिक्रिया होगी; एच + की कम सामग्री के साथ, प्रतिक्रिया क्षारीय होगी, उच्च सामग्री के साथ, यह अम्लीय होगी। अतः pH = 7.2 पर जल की अभिक्रिया उदासीन होती है, pH 7.2 पर यह क्षारीय होती है।

पीएच मान पानी की गुणवत्ता निर्धारित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। नदी और झरने के पानी में इसका मान 6 से 8.5 तक होता है। एकाग्रता मौसमी उतार-चढ़ाव के अधीन है - सर्दियों में यह आमतौर पर 6.8 - 7.4, गर्मियों में - 7.4 - 8.2 है।

प्राकृतिक जल में होने वाली रासायनिक और जैविक प्रक्रियाओं के लिए हाइड्रोजन आयनों की सांद्रता का बहुत महत्व है। यह जलीय पौधों के विकास और महत्वपूर्ण गतिविधि, तत्वों के प्रवास के विभिन्न रूपों की स्थिरता, धातुओं, कंक्रीट आदि के संबंध में पानी की आक्रामकता की डिग्री को निर्धारित करता है।

एक व्यक्ति के लिए, थोड़ा अम्लीय पानी (पीएच - 6.7 - 6.8) क्षारीय लोगों की तुलना में अधिक स्वादिष्ट लगता है, इसलिए ठंडे सर्दियों के पानी गर्म गर्मी के पानी की तुलना में "स्वादिष्ट" होते हैं।

सामान्यीकृत संकेतक

कठोरता- प्राकृतिक जल की एक संपत्ति, इसमें क्षारीय पृथ्वी धातुओं - कैल्शियम, मैग्नीशियम और कुछ अन्य के भंग लवणों की उपस्थिति से निर्धारित होती है। पानी की कठोरता को निर्धारित करने वाली मुख्य विशेषताएं पानी में कैल्शियम और मैग्नीशियम आयनों की उपस्थिति है। जल आपूर्ति प्रणालियों में पेयजल कठोरता की ऊपरी सीमा, वर्तमान स्वच्छता मानकों के अनुसार, 7-10 mg * eq / l से अधिक नहीं होनी चाहिए। कठोरता का एक मिलीसमतुल्य 20.04 mg/l Ca2+ या 12.16 mg/l Mg2+ से मेल खाती है। जब पानी को लंबे समय तक उबाला जाता है, तो उसमें से कार्बन डाइऑक्साइड निकलता है और कैल्शियम कार्बोनेट युक्त अवक्षेप अवक्षेपित होता है, जबकि पानी की कठोरता कम हो जाती है। इसलिए, पानी में हाइड्रोकार्बोनेट लवण की उपस्थिति को समझते हुए, "पानी की अस्थायी या हटाने योग्य कठोरता" शब्द का उपयोग किया जाता है, जिसे एक घंटे तक उबालकर पानी से हटाया जा सकता है। उबालने के बाद बचे हुए पानी की कठोरता को स्थिरांक कहते हैं।

प्राकृतिक जल की कठोरता व्यापक रूप से भिन्न होती है। उसी जल निकाय में समय के अनुसार इसके मान बदलते रहते हैं।

प्राकृतिक जल को कुल कठोरता द्वारा निम्नानुसार वर्गीकृत किया जाता है:

बहुत नरम - 1.5 mmol/dm3 . तक

शीतल - 1.5 - 3.0 मिमीोल / डीएम 3

मध्यम कठोर -3.0 - 6.0 mmol/dm3

कठोर - 6.0 - 9.0 mmol/dm3

बहुत कठोर > 9.0 mmol/dm3.

वर्तमान मानक के अनुसार, पीने के पानी की कठोरता 7 mmol/dm3 से अधिक नहीं होनी चाहिए। पीने के लिए, अपेक्षाकृत कठोर पानी के उपयोग की अनुमति है, क्योंकि कैल्शियम और मैग्नीशियम लवण की उपस्थिति स्वास्थ्य के लिए हानिकारक नहीं है और पानी के स्वाद को खराब नहीं करती है।

हाल के अध्ययनों में पाया गया है कि कठोर पानी, जिसमें कैल्शियम और मैग्नीशियम लवण की मात्रा अधिक होती है, गुर्दे पर अतिरिक्त दबाव डालता है और गुर्दे की पथरी का कारण बन सकता है। मानव शरीर के लिए सबसे अनुकूल 3-4.5 mmol/dm3 की कठोरता वाला पानी है। कम कठोरता वाला पानी शरीर से लवण को बाहर निकालता है और फिर ऑस्टियोपोरोसिस का खतरा होता है। दूसरी ओर, ऐसे अध्ययन हैं जो उच्च कठोरता वाले पानी के लगातार सेवन से हृदय रोग के जोखिम में कमी दिखाते हैं।

सूखा अवशेषसभी पानी की अशुद्धियों का योग है, जो नमूने को वाष्पित करके निर्धारित किया जाता है। सूखा अवशेष पानी के सामान्य खनिजकरण की विशेषता है। पानी की आपूर्ति के लिए उपयुक्त पानी की लवणता 1000 mg/dm3 से अधिक नहीं होनी चाहिए। पानी के खनिजकरण की डिग्री के अनुसार, इसे चार समूहों में विभाजित करने की प्रथा है: 200 मिलीग्राम / डीएम 3 तक की नमक सामग्री के साथ अल्ट्रा-फ्रेश, ताजा - 200 से 500 तक, खनिजकरण में वृद्धि - 500 से 1000 तक और उच्च लवणता। - 1000 मिलीग्राम / डीएम 3 से ऊपर।

नमक की कुल मात्रा में वृद्धि के साथ, पानी की विद्युत चालकता बढ़ जाती है और इससे संक्षारण प्रक्रियाओं में तेजी आती है। नमक की मात्रा बढ़ने से वनस्पति और ऑक्सीजन में कमी आ सकती है।

अकार्बनिक पदार्थ

नाइट्राइट्स (NO2-)प्राकृतिक जल में वे कार्बनिक पदार्थों के अपघटन और उनके नाइट्रीकरण के संबंध में पाए जाते हैं। नाइट्राइट प्राकृतिक जल के अस्थिर घटक हैं। गर्मी के ठहराव के दौरान उनकी उच्चतम सांद्रता (नाइट्रोजन की 10-20 मिलीग्राम/डीएम3 तक) देखी जाती है। ऑक्सीजन की पर्याप्त सांद्रता के साथ, बैक्टीरिया की क्रिया के तहत ऑक्सीकरण प्रक्रिया आगे बढ़ती है, और नाइट्राइट्स नाइट्रेट्स में ऑक्सीकृत हो जाते हैं।

नाइट्राइट्स की बढ़ी हुई सामग्री NO2- से NO3- के धीमी ऑक्सीकरण की स्थितियों में कार्बनिक पदार्थों के अपघटन की प्रक्रियाओं की उपस्थिति को इंगित करती है, जो कार्बनिक पदार्थों के साथ जल निकाय के प्रदूषण को इंगित करती है, अर्थात। एक महत्वपूर्ण स्वास्थ्य संकेतक है।

पीने के पानी में नाइट्राइट के लिए एमपीसी 3.0 mg/dm3 है।

नाइट्रेट्स (NO3-)- नाइट्रिक एसिड के यौगिक। प्राकृतिक जल में नाइट्रेट आयनों की उपस्थिति नाइट्रिफाइंग बैक्टीरिया की क्रिया के तहत ऑक्सीजन की उपस्थिति में अमोनियम आयनों के नाइट्रिफिकेशन की इंट्रा-जलीय प्रक्रियाओं से जुड़ी होती है। नाइट्रेट्स की सामग्री शरद ऋतु से बढ़ जाती है और सर्दियों में अधिकतम तक पहुंच जाती है। नाइट्रेट्स की बढ़ी हुई सामग्री जल निकाय की स्वच्छता की स्थिति में गिरावट का संकेत देती है। साथ ही, नाइट्रेट सभी नाइट्रोजन यौगिकों (नाइट्राइट्स, अमोनियम) का सबसे कम जहरीला रूप है और केवल बहुत अधिक सांद्रता में स्वास्थ्य के लिए हानिकारक हो सकता है।

पीने के पानी में नाइट्रेट के लिए MPC 45 mg/dm3 है।

क्लोराइड- क्लोराइड आयन प्राकृतिक जल की रासायनिक संरचना के मुख्य आयन हैं। स्प्रिंग्स में क्लोराइड की सांद्रता एक मिलीग्राम के अंश से लेकर सैकड़ों और हजारों प्रति 1 डीएम 3 तक होती है।

प्राकृतिक जल में क्लोराइड का प्राथमिक स्रोत आग्नेय चट्टानें हैं, जिनमें क्लोरीन युक्त खनिज (सोडालाइट, क्लोरापाटाइट, आदि) शामिल हैं। क्लोराइड की एक महत्वपूर्ण मात्रा वातावरण के माध्यम से समुद्र से प्राकृतिक जल में प्रवेश करती है। क्लोराइड में उच्च प्रवासन क्षमता होती है, निलंबित ठोस पदार्थों पर सोखने और जलीय जीवों द्वारा उपभोग करने की कमजोर क्षमता होती है।

क्लोराइड की बढ़ी हुई मात्रा पानी के स्वाद को खराब कर देती है और इसे पीने के पानी की आपूर्ति के लिए अनुपयुक्त बना देती है। सतही जल में क्लोराइड की सांद्रता ध्यान देने योग्य मौसमी उतार-चढ़ाव के अधीन है, जो पानी की लवणता में परिवर्तन के साथ सहसंबद्ध है। क्लोराइड के लिए MPC 350 mg/dm3 है।

सल्फेट्स- भूजल में सल्फेट्स की प्राकृतिक सामग्री चट्टानों के अपक्षय और जलभृतों में होने वाली जैव रासायनिक प्रक्रियाओं के कारण होती है। उनमें से कुछ जीवों की मृत्यु और पौधों और जानवरों की उत्पत्ति के पदार्थों के ऑक्सीकरण की प्रक्रिया में आते हैं। सल्फेट्स की बढ़ी हुई सामग्री पानी के ऑर्गेनोलेप्टिक गुणों को खराब करती है और मानव शरीर पर प्रतिकूल शारीरिक प्रभाव डालती है।

एरोबिक स्थितियों के तहत, सल्फेट नहीं बदलते हैं, जबकि अवायवीय परिस्थितियों में, सल्फेट को कम करने वाले बैक्टीरिया को सल्फाइड से कम करके सल्फाइड को कम किया जाता है, जो तब मुख्य रूप से आयरन सल्फाइड के रूप में अवक्षेपित होता है। यह प्रक्रिया झरने के पानी के भंडारण टैंकों और कुओं में देखी जाती है, यदि उनका बहुत कम उपयोग किया जाता है, और उनमें पानी जमा हो जाता है।

पीने के पानी में एमपीसी 500 mg/dm3 तक।

लौह यौगिकलगभग हमेशा प्राकृतिक जल में मौजूद होता है। पानी में लोहे की उपस्थिति के रूप विविध हैं। द्विसंयोजक अवस्था में, लोहा केवल कम pH और Eh मान पर पानी में मौजूद हो सकता है। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि केवल लौह लोहे को शरीर द्वारा अवशोषित किया जा सकता है, न कि इसका सबसे सामान्य त्रिसंयोजक रूप।

लोहे के यौगिक जल में घुले, कोलॉइडी और अघुलनशील रूप में मौजूद होते हैं।

पीने के पानी में 1 mg/dm3 से अधिक आयरन की बढ़ी हुई मात्रा पानी की गुणवत्ता और भोजन के लिए इसके उपयोग की संभावना को खराब करती है। आहार में बहुत अधिक आयरन शरीर पर कई प्रतिकूल प्रभाव डाल सकता है।

जल विश्लेषण आमतौर पर निम्नलिखित मापदंडों के अनुसार किया जाता है:

पैरामीटर	इकाइयों
क्रोमा
गंदगी	एफएमयू / मिलीग्राम / एल
ऑक्सीडेबिलिटी परमैंगनेट
सूखा अवशेष
प्रवाहकत्त्व
सामान्य कठोरता
क्षारीयता
बाइकार्बोनेट
सल्फेट्स
अमोनियम लवण (NH4)
नाइट्राइट्स (NO2 द्वारा)
नाइट्रेट्स (NO3 के अनुसार)
अल्युमीनियम
फीरोज़ा
लोहा (कुल)
आयरन फे++
सिलिकॉन (सी में)
मैंगनीज
मोलिब्डेनम
तेल के पदार्थ
हाइड्रोजन सल्फाइड
स्ट्रोंटियम
कार्बन डाइआक्साइड
क्लोरीन अवशिष्ट मुक्त
अवशिष्ट क्लोरीन बाध्य
फॉस्फेट (पीओ4 में)

सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेतक

ओकेबी- पानी में सामान्य कोलीफॉर्म बैक्टीरिया की मात्रा पीने के पानी की गुणवत्ता का सूचक है। उनका पता लगाना और मात्रा निर्धारित करना आसान है, इसलिए कई वर्षों से उनका उपयोग पानी की गुणवत्ता के संकेतक के रूप में किया जाता रहा है।

ओकेबी एक अंतरराष्ट्रीय योग्यता है और वे बीजीकेपी (एसचेरीचिया कोलाई समूह के बैक्टीरिया) के एक बड़े समूह का हिस्सा हैं। पानी में टीसीबी की सामग्री को दो तरीकों से निर्धारित किया जा सकता है: झिल्ली फिल्टर की विधि और अनुमापन (किण्वन) विधि।

मेम्ब्रेन फिल्टर की विधि से पानी की जांच। विधि झिल्ली फिल्टर के माध्यम से पानी की एक निर्दिष्ट मात्रा को छानने, एक विभेदक निदान माध्यम पर फसल उगाने और सांस्कृतिक और जैव रासायनिक विशेषताओं द्वारा कॉलोनियों की बाद की पहचान पर आधारित है।

जल के अध्ययन के लिए अनुमापन विधि। विधि एक तरल पोषक माध्यम में पानी की एक निर्दिष्ट मात्रा के टीकाकरण के बाद बैक्टीरिया के संचय पर आधारित है, इसके बाद एक विभेदक निदान माध्यम पर पुन: टीकाकरण और सांस्कृतिक और जैव रासायनिक परीक्षणों द्वारा कॉलोनियों की पहचान पर आधारित है।

"कोलीफॉर्म जीव" ग्राम-नकारात्मक, रॉड के आकार के जीवाणुओं के एक वर्ग से संबंधित हैं जो मनुष्यों के निचले पाचन तंत्र में रहते हैं और गुणा करते हैं और कई गर्म रक्त वाले जानवरों जैसे पशुधन और जलपक्षी, 35-37 डिग्री सेल्सियस पर लैक्टोज को किण्वित करने में सक्षम हैं। एसिड, गैस और एल्डिहाइड बनाते हैं। एक बार मल बहिःस्राव के साथ पानी में, वे कई हफ्तों तक जीवित रहने में सक्षम होते हैं, हालांकि उनमें से अधिकांश में पुनरुत्पादन की क्षमता नहीं होती है।

हाल के अध्ययनों के अनुसार, बैक्टीरिया एस्चेरिचिया (ई.कोली), सिट्रोबैक्टर, एंटरोबैक्टर और क्लेबसिएला के साथ-साथ आमतौर पर इस वर्ग के लिए जिम्मेदार बैक्टीरिया एंटरोबैक्टर क्लोसे और सिट्रोबैडर फ्रींडी बैक्टीरिया भी लैक्टोज को किण्वित करने में सक्षम होते हैं। ये बैक्टीरिया न केवल मल में, बल्कि पर्यावरण में और यहां तक ​​कि पीने के पानी में भी पोषक तत्वों की अपेक्षाकृत उच्च सांद्रता में पाए जा सकते हैं। इसके अलावा, इसमें ऐसी प्रजातियां शामिल हैं जो शायद ही कभी मल में पाई जाती हैं और काफी अच्छी गुणवत्ता के पानी में प्रजनन करने में सक्षम हैं।

टीकेबी- थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया। टीसीबी की संख्या जल निकायों में पानी के मल संदूषण की डिग्री की विशेषता है और अप्रत्यक्ष रूप से आंतों के संक्रमण के रोगजनकों के संबंध में महामारी के खतरे को निर्धारित करती है। टीकेबी बीजीकेपी (ओकेबी) के समान तरीकों से निर्धारित होता है।

ओएमसी 37- कुल माइक्रोबियल गिनती। पानी के जैविक विश्लेषण में रोगजनक बैक्टीरिया की संख्या निर्धारित करना एक कठिन और समय लेने वाला कार्य है; बैक्टीरियोलॉजिकल संदूषण के लिए एक मानदंड के रूप में, 1 मिली पानी में कॉलोनी बनाने वाले बैक्टीरिया (कॉलोनी बनाने वाली इकाइयाँ - CFU) की कुल संख्या का उपयोग किया जाता है। .

संख्या पी / पी	संकेतक, माप की इकाइयाँ	मानक*, अब और नहीं							टिप्पणी
		सैनपिन 2.1.4.1175-02	जीएन 2.1.5.1315-03	सैनपिन 2.1.4.1116-02		WHO	यूरोपीय संघ	अमेरीका
				पहली श्रेणी।	उच्चतर श्रेणी
1	2	4	5	6	7	8	9	10	11
1	गंध, अंक 20 डिग्री सेल्सियस पर	3	–	0	0	0	बिना किसी परिवर्तन के उपभोक्ता के लिए स्वीकार्य	–	गंध की तीव्रता का अनुमान 5-बिंदु पैमाने पर लगाया जाता है: 0 - कोई गंध नहीं, 1 - बहुत कमजोर (एक अनुभवी विशेषज्ञ द्वारा पता लगाया गया), 2 - कमजोर (यदि आप ध्यान दें तो पता चला), 3 - ध्यान देने योग्य (आसानी से पता लगाने योग्य), 4 - विशिष्ट (ध्यान आकर्षित करता है और पानी को पीने के लिए अप्रिय बनाता है), 5 - बहुत मजबूत (अचूक)
2	60 डिग्री सेल्सियस पर	–	–	1	0	–		–
3	स्वाद (20 डिग्री सेल्सियस पर), अंक	3	–	0	0	0		–	स्वाद की तीव्रता का मूल्यांकन 5-बिंदु पैमाने पर किया जाता है (सूचक संख्या 1 "गंध" देखें)
4	पीएच	6-9 . के भीतर	–	अंदर 6,5-8,5		6,5-8,5	6,5-9,5	6,5-8,5	पीएच के आधार पर, प्राकृतिक जल समूहों में विभाजित हैं: अत्यधिक अम्लीय (पीएच .)<3), кислые (3–5), слабокислые (5–6,5), нейтральные (6,5–7,5), слабощелочные (7,5–8,5), щелочные (8,5-9,5), сильнощелочные (>9,5).
5	ओह, एमवी	–	–	–		–	–	–	रेडॉक्स क्षमता भू-रासायनिक वातावरण के प्रकार को दर्शाती है। भूजल की निम्नलिखित लंबवत क्षेत्रीयता है: ऑक्सीजन पानी (एएच> 200 एमवी), ऑक्सीजन मुक्त और सल्फाइड मुक्त पानी (एएच = 200-100 एमवी), सल्फाइड पानी (एह)<100 мВ, а чаще менее 0 мВ). ईएच और पीएच विभिन्न तत्वों के पानी में प्रवासन के रूपों और सूक्ष्मजीवों की महत्वपूर्ण गतिविधि पर निर्भर करता है। इन दोनों संकेतकों को नमूना लेने के तुरंत बाद निर्धारित किया जाना चाहिए।
6	25°С, µS/cm . पर विद्युत चालकता	–	–	–		–	2500	–	विद्युत चालकता से, पानी में घुले खनिज लवणों की कुल मात्रा का लगभग अंदाजा लगाया जा सकता है।
7	वर्णानुक्रम, °	30	–	5	5	15	20	15	यह सूचक पानी के रंग की तीव्रता को दर्शाता है और क्रोमियम-कोबाल्ट पैमाने पर डिग्री में व्यक्त किया जाता है। प्राकृतिक जल में रंग की उपस्थिति आमतौर पर ह्यूमिक पदार्थों या उनमें घुले लौह लवण के कारण होती है। जल आपूर्ति स्रोतों के पानी को रंग के आधार पर निम्न-रंग (35° तक), मध्यम रंग (35 से 120° तक), उच्च रंग (>120°) में विभाजित किया जाता है।
8	गंदगी "फॉर्माज़िन के अनुसार", EMF	3,5	–	1,0	0,5	4,9	4,0	5	जल मैलापन 100 एनएम से बड़े निलंबित कणों के कारण होता है।
9	कठोरता सामान्य, मिलीग्राम-ईक्यू / एल	10	–	7	1.5-7.0 . के भीतर	10	–	–	शर्त कठोरतायह उन गुणों को निर्धारित करता है जो इसमें घुले हुए कैल्शियम और मैग्नीशियम यौगिक पानी को देते हैं। कठोरता से, पानी को बहुत नरम में विभाजित किया जाता है (<1,5 мг-экв/л), мягкие (1,5–3), умеренно жесткие (3–5,4), жесткие (5,4–10,7), очень жесткие (>10,7). घरेलू पहलू में, बढ़ी हुई कठोरता (> 8 मिलीग्राम-ईक्यू / एल) के साथ पानी पैमाने के गठन, डिटर्जेंट की बढ़ती खपत और मांस और सब्जियों के खराब खाना पकाने के कारण प्रतिकूल है। कठोरता लवण के संदर्भ में पीने के पानी की शारीरिक उपयोगिता का मानक 1.5 से 7.0 mg-eq / l है।
	मुख्य आयन:
10	बाइकार्बोनेट (एचसीओ 3-), मिलीग्राम / एल	–	–	400	30-400 . के भीतर	–	–	–	बाइकार्बोनेट के संदर्भ में पीने के पानी की शारीरिक उपयोगिता का मानक 30 से 400 मिलीग्राम / लीटर है।
11	सल्फेट्स (SO42-), मिलीग्राम/ली	500	500 (एलपीवी - संगठन।, खतरा वर्ग 4)	250	150	250	250	250	पानी में बड़ी मात्रा में सल्फेट्स की उपस्थिति अवांछनीय है, क्योंकि वे 1) इसका स्वाद खराब कर देते हैं (MgSO4 के रूप में सल्फेट्स की उपस्थिति में, एक कड़वा स्वाद होता है, CaSO4 - कसैले के रूप में), 2) में रेचक गुण होते हैं (Na2SO4 के रूप में सल्फेट्स की उपस्थिति में), 3) पानी की सतह पर झाग का निर्माण होता है।
12	क्लोराइड (Сl-), मिलीग्राम / एल	350	350 (संगठन, 4)	250	150	250	250	250	क्लोराइड की उच्च सांद्रता पानी के स्वाद को खराब कर देती है (सोडियम आयनों की उपस्थिति में, वे नमकीन स्वाद देते हैं)।
13	कैल्शियम (Ca2+), मिलीग्राम/ली	–	–	130	25-80 . के भीतर	–	100	–	कैल्शियम के लिए शारीरिक उपयोगिता का मानक 25 से 130 मिलीग्राम / लीटर है।
14	मैगनीशियम (एमजी2+), मिलीग्राम/ली	–	50 (संगठन।, 3)	65	अंदर 5-50	–	50	–	कठोरता और कैल्शियम के निर्धारण के परिणामों से गणना करके मैग्नीशियम की एकाग्रता प्राप्त की गई थी। मैग्नीशियम के लिए शारीरिक उपयोगिता का मानक 5 से 65 mg / l तक है।
15	सोडियम (ना+), मिलीग्राम/ली	–	200 (एस-टी, 2)	200	20	200	200	–
16	आयरन टोटल, mg/l	–	0,3 (संगठन।, 3)	0,3	0,3	0,3	0,2	0,3	जब पानी में कुल आयरन की मात्रा 1-2 mg / l (लौह लोहा - 0.3 mg / l से अधिक) से अधिक हो, तो यह पानी को एक अप्रिय कसैला स्वाद देना शुरू कर देता है। कोलॉइडी लौह यौगिक पानी को एक रंग देते हैं (पीले से हरे रंग तक)। जब वायुमंडलीय ऑक्सीजन के संपर्क में आता है, तो Fe (OH) 3 ठोस कणों की वर्षा के कारण उच्च लौह सामग्री वाला पानी बादल बन जाता है। उच्च लौह सामग्री वाले पानी के लंबे समय तक मानव सेवन से यकृत रोग (हेमोसाइडराइटिस), एलर्जी, गुर्दे की पथरी का निर्माण हो सकता है, और दिल के दौरे और कंकाल प्रणाली के रोगों का खतरा भी बढ़ सकता है।
17	मैंगनीज, मिलीग्राम / एल	–	0,1 (संगठन।, 3)	0,05	0,05	0,5	0,05	0,05	लौह लोहा और मैंगनीज दोनों ही कम मात्रा में पानी के स्वाद को खराब कर देते हैं। जब मैंगनीज सामग्री 0.5 मिलीग्राम/ली से अधिक होती है, तो पानी एक अप्रिय स्वाद प्राप्त करता है। अतिरिक्त मैंगनीज स्वास्थ्य के लिए खतरनाक है: शरीर में इसके संचय से पार्किंसंस रोग हो सकता है। आमतौर पर यह स्वीकार किया जाता है कि पीने के पानी में आयरन और मैंगनीज की कुल मात्रा 0.5-1.0 मिलीग्राम/लीटर से अधिक नहीं होनी चाहिए।
18	फ्लोरीन, मिलीग्राम/ली		1,5 (एस-टी।, 2)	1,5	0.6-1.2 . की सीमा में	1,5	0.7-1.5 . की सीमा में	4,0	शारीरिक उपयोगिता का मानक 0.5-1.5 mg / l की सीमा में है। 1.5 मिलीग्राम/लीटर से अधिक सांद्रता में, यह दंत फ्लोरोसिस और 4 मिलीग्राम/ली से ऊपर, गंभीर हड्डी रोग का कारण बन सकता है।
19	अमोनियम (एन-एनएच4+), मिलीग्राम/ली	–	1,5 अमोनिया (NH3) और अमोनियम (NH4) के योग के लिए (संगठन, 4)	0,1	0,05	1,5	0,5	–	नाइट्रोजन युक्त पदार्थ (अमोनियम आयन, नाइट्राइट और नाइट्रेट आयन) मुख्य रूप से प्रोटीन यौगिकों के अपघटन के परिणामस्वरूप पानी में बनते हैं जो लगभग हमेशा घरेलू अपशिष्ट जल या पशुधन अपशिष्ट के साथ इसमें प्रवेश करते हैं। अमोनियम आयन, नाइट्राइट आयन की तरह, जैविक जल प्रदूषण का एक अच्छा संकेतक है। दलदली जल भी नाइट्रोजन यौगिकों का स्रोत हो सकता है। उनमें ह्यूमस यौगिकों द्वारा नाइट्रेट्स की कमी के कारण अमोनियम आयन बनता है।
20	नाइट्राइट (NO2-), मिलीग्राम/ली	–	3,3 (एस-टी।, 2)	0,5	0,005	3,0	0,5	3,3	नाइट्राइट अमोनियम के नाइट्रेट (एरोबिक स्थितियों के तहत) के जीवाणु ऑक्सीकरण में एक मध्यवर्ती कदम है, या इसके विपरीत, नाइट्रेट से अमोनियम में कमी (अवायवीय स्थितियों के तहत)। नाइट्राइट आयनों की उपस्थिति आमतौर पर पानी के मौजूदा कार्बनिक संदूषण को इंगित करती है।
21	नाइट्रेट (NO32-), मिलीग्राम/ली	45	45 (एस-टी।, 3)	20	5	50	50	44	भूजल में नाइट्रेट की उत्पत्ति या तो अकार्बनिक है - नाइट्रोजन युक्त खनिजों (जैसे साल्टपीटर) के लीचिंग के कारण - या कार्बनिक, जब नाइट्रेट कार्बनिक पदार्थों के खनिजकरण का अंतिम उत्पाद है। बाद के मामले में, नाइट्रेट आयन की उपस्थिति कार्बनिक अपशिष्ट के साथ पानी के पूर्व प्रदूषण को इंगित करती है, और यदि नाइट्राइट और अमोनियम के साथ मौजूद है, तो यह वर्तमान समय में मौजूद प्रदूषण को इंगित करता है। यदि पीने की जरूरतों के लिए ऐसे पानी का उपयोग करना आवश्यक है, तो बैक्टीरियोलॉजिकल विश्लेषण की आवश्यकता होती है। पानी में 50 मिलीग्राम / लीटर से अधिक नाइट्रेट की उपस्थिति में, रक्त के ऑक्सीडेटिव फ़ंक्शन का उल्लंघन देखा जाता है - मेथेमोग्लोबिनेमिया।
22	फॉस्फेट, (पीओ43-), मिलीग्राम/ली	–	3,5 पॉलीफॉस्फेट के लिए (org., 3)	3,5	3,5	–	–	–	भूजल में, फॉस्फेट की सामग्री आमतौर पर कम होती है। फॉस्फेट की एक उच्च सामग्री के साथ, यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि उर्वरकों के पानी में अशुद्धियाँ हैं, घरेलू अपशिष्ट जल के घटक (मुख्य रूप से डिटर्जेंट), और बायोमास को विघटित करते हैं।
23	सामान्य खनिजकरण, मिलीग्राम / एल	1500	–	1000	पूर्व मामलों में 200-500	–	–	500	शारीरिक उपयोगिता का मानक 100 से 1000 मिलीग्राम/लीटर तक है। खनिजकरण का मूल्य पानी में कुल सामग्री की विशेषता है खनिजपदार्थ। इस मामले में, कुल खनिजकरण परीक्षण पानी में निहित सभी आयनों की मात्रा के अंकगणितीय योग के रूप में प्राप्त किया जाता है। 1000 मिलीग्राम / लीटर से अधिक के खनिज वाले पानी को खनिज के रूप में वर्गीकृत किया जाता है। खनिजकरण की निचली सीमा, जिस पर शरीर से लवण का रिसाव नहीं होता है, 100 mg/l के मान से मेल खाती है। पीने के पानी के खनिजकरण का इष्टतम स्तर 200-500 मिलीग्राम / लीटर की सीमा में है।
24	सूखा अवशेष, मिलीग्राम/ली	1500	–	1000	200-500 . के भीतर	–	–	500	सूखा अवशेष एक सशर्त संकेतक है जो पानी के वाष्पीकरण के दौरान शेष भंग और कोलाइडल अशुद्धियों की सामग्री को निर्धारित करता है। यह 0.45 माइक्रोन के छिद्र आकार के साथ एक झिल्ली फिल्टर के माध्यम से फ़िल्टर किए गए पानी को वाष्पित करके प्राप्त किया गया था।
25	परमैंगनेट ऑक्सीकरण क्षमता, मिलीग्राम О2/ली	7	–	3	2	–	5	–	ऑक्सीडेबिलिटी पानी में निहित मात्रा के अप्रत्यक्ष संकेतकों में से एक है कार्बनिकपदार्थ। पोटेशियम परमैंगनेट आमतौर पर पानी में निहित कार्बनिक पदार्थों का 25-50% ऑक्सीकरण करता है।
26	तेल के पदार्थ	–	0,3	0,05	0,01	–	–	–	पानी के विश्लेषण में तेल उत्पादों को पारंपरिक रूप से केवल गैर-ध्रुवीय और निम्न-ध्रुवीय हाइड्रोकार्बन माना जाता है, जो हेक्सेन में घुलनशील होते हैं, जो तेल का बड़ा हिस्सा बनाते हैं। फ्लोरैट-02 तरल विश्लेषक पर फ्लोरीमेट्रिक विधि द्वारा पेट्रोलियम उत्पादों का निर्धारण किया गया था।

जल विश्लेषण की इस पद्धति के साथ, लगभग 0.45 माइक्रोन के छिद्र आकार के साथ एक विशेष झिल्ली के माध्यम से पानी की एक निश्चित मात्रा को पारित किया जाता है। नतीजतन, पानी में मौजूद सभी बैक्टीरिया झिल्ली की सतह पर बने रहते हैं। उसके बाद, बैक्टीरिया के साथ झिल्ली को एक विशेष पोषक माध्यम में 30-37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक निश्चित समय के लिए रखा जाता है। इस अवधि के दौरान, जिसे ऊष्मायन अवधि कहा जाता है, बैक्टीरिया को गुणा करने और अच्छी तरह से परिभाषित कॉलोनियों को बनाने का अवसर मिलता है जिन्हें गिनना आसान होता है। परिणामस्वरूप, आप इसे देख सकते हैं: या यह चित्र भी: चूंकि जल विश्लेषण की इस पद्धति में केवल विभिन्न प्रकार के कॉलोनी बनाने वाले जीवाणुओं की कुल संख्या निर्धारित करना शामिल है, इसके परिणाम स्पष्ट रूप से पानी में रोगजनक रोगाणुओं की उपस्थिति का न्याय नहीं कर सकते हैं। हालांकि, एक उच्च माइक्रोबियल गिनती पानी के एक सामान्य बैक्टीरियोलॉजिकल संदूषण और रोगजनक जीवों की उपस्थिति की उच्च संभावना को इंगित करती है।

पानी का विश्लेषण करते समय, न केवल जहरीले रसायनों की सामग्री को नियंत्रित करना आवश्यक है, बल्कि सूक्ष्मजीवों की संख्या भी है जो पीने के पानी के बैक्टीरियोलॉजिकल संदूषण की विशेषता रखते हैं। टीएमएफ कुल माइक्रोबियल संख्या है। केंद्रीकृत जल आपूर्ति के पानी में, यह संख्या होनी चाहिए 50 सीएफयू / एमएल से अधिक नहीं, और कुओं, कुओं में - 100 सीएफयू / एमएल . से अधिक नहीं

पानी का स्वच्छता और सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान एक योजनाबद्ध तरीके से किया जाता है
वर्तमान निगरानी के उद्देश्य के साथ-साथ विशेष महामारी विज्ञान के लिए आदेश
किम गवाही। इस तरह के शोध के मुख्य उद्देश्य हैं:

- केंद्रीय जल आपूर्ति (नल का पानी) का पेयजल;

- गैर-केंद्रीकृत जल आपूर्ति का पेयजल;

- सतही और भूमिगत जल स्रोतों से पानी;

- अपशिष्ट जल;

- समुद्र के तटीय क्षेत्रों का पानी;

- स्विमिंग पूल का पानी।

वर्तमान नियामक दस्तावेजों के अनुसार पीने के पानी की सूक्ष्मजीवविज्ञानी स्थिति का आकलन करने के लिए मुख्य संकेतक हैं:

1. टोटल माइक्रोबियल काउंट (TMC) - 1 मिली पानी में मेसोफिलिक बैक्टीरिया की संख्या।

अगर अनुमापांक- पानी की सबसे छोटी मात्रा (मिलीलीटर में) जिसमें कम से कम एक जीवित हो
बीजीकेपी से संबंधित माइक्रोबियल सेल।
बीजीकेपी सूचकांक- 1 लीटर पानी में बीजीकेपी की मात्रा।

3. 20 मिली पानी में सल्फाइट कम करने वाले क्लोस्ट्रीडिया के बीजाणुओं की संख्या।

4. 100 मिली पानी में कोलिफेज की संख्या।

टीएमसी का निर्धारण पीने के पानी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी संदूषण के स्तर का आकलन करना संभव बनाता है। बड़े पैमाने पर माइक्रोबियल संदूषण का तत्काल पता लगाने के लिए यह संकेतक अपरिहार्य है।

कुल माइक्रोबियल गिनती- यह 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पोषक तत्व अगर पर उपनिवेश बनाने में सक्षम मेसोफिलिक एरोबिक और वैकल्पिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या है और 24 घंटों के भीतर, दो गुना वृद्धि पर दिखाई देता है।

कुल माइक्रोबियल संख्या का निर्धारण करते समय, परीक्षण पानी का 1 मिलीलीटर एक बाँझ पेट्री डिश में जोड़ा जाता है और 10-12 मिलीलीटर गर्म (44 डिग्री सेल्सियस) पिघला हुआ पोषक तत्व अगर डाला जाता है। माध्यम धीरे-धीरे पानी के साथ मिश्रित होता है, समान रूप से और
बिना हवा के बुलबुले कप के नीचे वितरित करें, फिर ढक्कन के साथ कवर करें और जमने के लिए छोड़ दें। फसलों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टैट में इनक्यूबेट किया जाता है। दोनों व्यंजनों में उगाई गई कॉलोनियों की कुल संख्या की गणना करें और औसत मूल्य निर्धारित करें। अंतिम परिणाम परीक्षण पानी के 1 मिलीलीटर में कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीएफयू) की संख्या के रूप में व्यक्त किया जाता है। 1 मिली पीने के पानी में 50 CFU से अधिक नहीं होना चाहिए

बीजीकेपी की परिभाषा
इसी समय, सामान्य कॉलीफॉर्म बैक्टीरिया - ओकेबी और थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया - टीकेबी निर्धारित किए जाते हैं।

जीकेबी ग्राम-नकारात्मक, गैर-बीजाणु बनाने वाली छड़ें हैं जो 24-48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एसिड और गैस के लिए लैक्टोज को किण्वित करती हैं। टीकेबी ओकेबी में से हैं, उनके पास उनके संकेत हैं, लेकिन मैं 44 डिग्री सेल्सियस पर किण्वन करता हूं। एंटरोबैक्टीरिया के निर्धारण के लिए - झिल्ली फिल्टर या अनुमापन की विधि।

माइक्रोबियल संख्या - पेयजल की सूक्ष्मजीवविज्ञानी स्थिति का आकलन करने के लिए मुख्य मानदंड,वर्तमान नियामक दस्तावेजों के आधार पर, टीएमसी (कुल माइक्रोबियल संख्या) है, जो एक पोषक माध्यम में 37 डिग्री के तापमान पर प्रति दिन बनने वाले एक मिलीलीटर पानी में एरोबिक और एनारोबिक बैक्टीरिया की संख्या को दर्शाता है।

जल आपूर्ति प्रणालियों के पेयजल के गुणवत्ता संकेतक।

बड़े पैमाने पर माइक्रोबियल संदूषण का तेजी से पता लगाने के लिए यह संकेतक वस्तुतः अपरिहार्य है।

के लिये कुल माइक्रोबियल संख्या का निर्धारणपरीक्षण पानी का एक मिलीलीटर एक बाँझ पेट्री डिश में जोड़ा जाता है, फिर 10-15 मिलीलीटर गर्म (लगभग 44 डिग्री सेल्सियस) पोषक तत्व अगर पिघला हुआ रूप में डाला जाता है। माध्यम को सावधानी से पानी के साथ मिलाया जाता है, समान रूप से वितरित किया जाता है और डिश के तल पर हवा के बुलबुले के बिना, फिर ढक्कन के साथ बंद कर दिया जाता है और पेट्री डिश में जमने तक छोड़ दिया जाता है। दूसरे कप में भी ऐसा ही किया जाता है। थर्मोस्टेट में बुवाई दिन के दौरान 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर की जाती है। फिर, एक माइक्रोस्कोप के तहत डबल आवर्धन पर, दो कप में उगाई गई कॉलोनियों की कुल संख्या की गणना की जाती है, और औसत मूल्य निर्धारित किया जाता है। 1 मिली पीने के पानी में 50 CFU से अधिक नहीं होना चाहिए।

(मुख्य विधि)

विधि झिल्ली फिल्टर के माध्यम से पानी की एक निश्चित मात्रा (300 मिली) को छानने पर आधारित है, लैक्टोज (एंडो) के साथ एक विभेदक निदान माध्यम पर फसल उगाना और सांस्कृतिक और जैव रासायनिक विशेषताओं द्वारा उपनिवेशों की पहचान करना।

विश्लेषण के लिए तैयार किए गए मेम्ब्रेन फिल्टर (उबले या किसी अन्य तरीके से निष्फल) को फिल्टर उपकरण के कीप में बाँझ चिमटी के साथ रखा जाता है। डिवाइस के फ़नल में पानी की एक मापी गई मात्रा डाली जाती है और एक वैक्यूम बनाया जाता है। छानने के बाद, फिल्टर को हटा दिया जाता है और एंडो पोषक माध्यम की सतह पर बिना पलटे रख दिया जाता है।

एक कप में 3 फिल्टर फिट हो सकते हैं। पीने के पानी के अध्ययन में, 100 मिलीलीटर की 3 मात्रा को फ़िल्टर किया जाता है। अज्ञात गुणवत्ता के पानी का विश्लेषण करते समय, फिल्टर (10.40, 100 और 150 मिलीलीटर) पर पृथक कॉलोनियां प्राप्त करने के लिए पानी की अन्य मात्राओं को फ़िल्टर करने की सलाह दी जाती है।

फिल्टर डिश 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एक इनक्यूबेटर में उल्टा इनक्यूबेट किया जाता है।

यदि फिल्टर पर कोई वृद्धि नहीं हुई है या असामान्य झिल्लीदार, फफूंदी, धुंधली कॉलोनियां बढ़ी हैं, तो वे एक नकारात्मक परिणाम देते हैं। अध्ययन किए गए पानी के 100 मिलीलीटर में ओकेबी और टीकेबी अनुपस्थित हैं।

फिल्टर पर विशिष्ट पृथक लैक्टोज-पॉजिटिव (फिल्टर के रिवर्स साइड पर प्रिंट के साथ गहरे लाल) कॉलोनियों की वृद्धि के साथ, उनकी संख्या की गणना की जाती है और वे ओकेबी और टीकेबी से संबंधित होने की पुष्टि करना शुरू करते हैं।

3-4 ग्राम-दाग वाली कॉलोनियों से स्मीयरों की सूक्ष्म जांच की जाती है (ग्राम-नकारात्मक को ध्यान में रखा जाता है);

ऑक्सीडेज की उपस्थिति निर्धारित की जाती है (ऑक्सीडेज-नेगेटिव को ध्यान में रखा जाता है, क्योंकि ऑक्सीडेज-पॉजिटिव ग्राम-नेगेटिव रॉड्स एंटरोबैक्टीरिया से संबंधित नहीं होते हैं, लेकिन उदाहरण के लिए, स्यूडोमोनैड्स हो सकते हैं);

एसिड और गैस के लिए लैक्टोज का किण्वन 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर निर्धारित किया जाता है, जो कि थोड़ी रंगीन कॉलोनियों और टीकेबी से उनके संबंध के लिए महत्वपूर्ण है, और 44 ± 0.5 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर, यह तय करने के लिए कि वे संबंधित हैं या नहीं टीकेबी.

ऑक्सीडेज परीक्षण की स्थापना

कागज पर α-नैफ्थोल के 1% अल्कोहल घोल और डाइमिथाइलफेनिलेनेडियम के 1% जलीय घोल से सिक्त, रंगीन कॉलोनी के एक हिस्से को प्लैटिनम लूप या ग्लास रॉड के साथ लगाया जाता है। प्रतिक्रिया को सकारात्मक माना जाता है यदि 1 मिनट के भीतर, अधिकतम 4 मिनट, एक नीला या बैंगनी रंग दिखाई देता है। ऑक्सीडेज-पॉजिटिव कॉलोनियों को ध्यान में नहीं रखा जाता है और आगे के शोध के अधीन नहीं हैं।

कालोनियों के साथ फिल्टर को अभिकर्मक के साथ सिक्त कागज में स्थानांतरित करना संभव है। आप आसुत जल से सिक्त रेडीमेड पेपर सिस्टम (एनआईबी) का उपयोग कर सकते हैं।

ग्राम-नेगेटिव ऑक्सीडेज-नेगेटिव बैक्टीरिया के कुछ कॉलोनियों का परीक्षण लैक्टोज को किण्वित करने की क्षमता के लिए किया जाता है। यह लैक्टोज के साथ एक अर्ध-तरल माध्यम और एक पीएच संकेतक का उपयोग करता है। 2 परखनलियों में नीचे तक इंजेक्शन लगाकर बुवाई की जाती है। एक को टीकेबी से संबंध की पुष्टि करने के लिए 24-48 घंटों के लिए 37 ± 1 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ऊष्मायन किया जाता है, दूसरा 24 घंटे के लिए 44 ± 0.5 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर, पुष्टि करने के लिए 4-6 घंटे के बाद पंजीकरण संभव है। टीकेबी की उपस्थिति।

जब फिल्टर पर कॉलोनियों को सुपरइम्पोज़ करते हैं, तो उन्हें छलनी किया जाता है, फिर परिणामी पृथक कॉलोनियों की पहचान की जाती है। कालोनियों को OKB के रूप में गिना जाता है - यदि वे एंडो पर लाल हैं, तो उनमें ग्राम-नकारात्मक ऑक्सीडेज-नकारात्मक छड़ें होती हैं जो लैक्टोज को 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एसिड और गैस में विघटित करती हैं। कालोनियों को टीकेबी के रूप में गिना जाता है यदि उनमें ग्राम-नकारात्मक ऑक्सीडेज-नकारात्मक छड़ें होती हैं जो एसिड और गैस के लिए 44 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर लैक्टोज को किण्वित करती हैं (योजना संख्या 2)।

योजना 2

प्रकाशन तिथि: 2014-11-02; पढ़ें: 1811 | पेज कॉपीराइट उल्लंघन

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कुल माइक्रोबियल गिनती

जल विश्लेषण की इस पद्धति के साथ, लगभग 0.45 माइक्रोन के छिद्र आकार के साथ एक विशेष झिल्ली के माध्यम से पानी की एक निश्चित मात्रा को पारित किया जाता है। नतीजतन, पानी में मौजूद सभी बैक्टीरिया झिल्ली की सतह पर बने रहते हैं। उसके बाद, बैक्टीरिया के साथ झिल्ली को एक विशेष पोषक माध्यम में 30-37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक निश्चित समय के लिए रखा जाता है। इस अवधि के दौरान, जिसे ऊष्मायन अवधि कहा जाता है, बैक्टीरिया को गुणा करने और अच्छी तरह से परिभाषित कॉलोनियों को बनाने का अवसर मिलता है जिन्हें गिनना आसान होता है। परिणामस्वरूप, आप इसे देख सकते हैं: या यह चित्र भी: चूंकि जल विश्लेषण की इस पद्धति में केवल विभिन्न प्रकार के कॉलोनी बनाने वाले जीवाणुओं की कुल संख्या निर्धारित करना शामिल है, इसके परिणाम स्पष्ट रूप से पानी में रोगजनक रोगाणुओं की उपस्थिति का न्याय नहीं कर सकते हैं। हालांकि, एक उच्च माइक्रोबियल गिनती पानी के एक सामान्य बैक्टीरियोलॉजिकल संदूषण और रोगजनक जीवों की उपस्थिति की उच्च संभावना को इंगित करती है।

पानी का विश्लेषण करते समय, न केवल जहरीले रसायनों की सामग्री को नियंत्रित करना आवश्यक है, बल्कि सूक्ष्मजीवों की संख्या भी है जो पीने के पानी के बैक्टीरियोलॉजिकल संदूषण की विशेषता रखते हैं। टीएमएफ कुल माइक्रोबियल संख्या है। केंद्रीकृत जल आपूर्ति के पानी में, यह संख्या होनी चाहिए 50 सीएफयू / एमएल से अधिक नहीं, और कुओं, कुओं में - 100 सीएफयू / एमएल . से अधिक नहीं

पानी का स्वच्छता और सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान एक योजनाबद्ध तरीके से किया जाता है
वर्तमान निगरानी के उद्देश्य के साथ-साथ विशेष महामारी विज्ञान के लिए आदेश
किम गवाही। इस तरह के शोध के मुख्य उद्देश्य हैं:

- केंद्रीय जल आपूर्ति (नल का पानी) का पेयजल;

- गैर-केंद्रीकृत जल आपूर्ति का पेयजल;

- सतही और भूमिगत जल स्रोतों से पानी;

- अपशिष्ट जल;

- समुद्र के तटीय क्षेत्रों का पानी;

- स्विमिंग पूल का पानी।

वर्तमान नियामक दस्तावेजों के अनुसार पीने के पानी की सूक्ष्मजीवविज्ञानी स्थिति का आकलन करने के लिए मुख्य संकेतक हैं:

1. टोटल माइक्रोबियल काउंट (TMC) - 1 मिली पानी में मेसोफिलिक बैक्टीरिया की संख्या।

अगर अनुमापांक- पानी की सबसे छोटी मात्रा (मिलीलीटर में) जिसमें कम से कम एक जीवित हो
बीजीकेपी से संबंधित माइक्रोबियल सेल।
बीजीकेपी सूचकांक- 1 लीटर पानी में बीजीकेपी की मात्रा।

3. 20 मिली पानी में सल्फाइट कम करने वाले क्लोस्ट्रीडिया के बीजाणुओं की संख्या।

4. 100 मिली पानी में कोलिफेज की संख्या।

टीएमसी का निर्धारण पीने के पानी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी संदूषण के स्तर का आकलन करना संभव बनाता है। बड़े पैमाने पर माइक्रोबियल संदूषण का तत्काल पता लगाने के लिए यह संकेतक अपरिहार्य है।

कुल माइक्रोबियल गिनती- यह 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पोषक तत्व अगर पर उपनिवेश बनाने में सक्षम मेसोफिलिक एरोबिक और वैकल्पिक अवायवीय सूक्ष्मजीवों की संख्या है और 24 घंटों के भीतर, दो गुना वृद्धि पर दिखाई देता है।

कुल माइक्रोबियल संख्या का निर्धारण करते समय, परीक्षण पानी का 1 मिलीलीटर एक बाँझ पेट्री डिश में जोड़ा जाता है और 10-12 मिलीलीटर गर्म (44 डिग्री सेल्सियस) पिघला हुआ पोषक तत्व अगर डाला जाता है। माध्यम धीरे-धीरे पानी के साथ मिश्रित होता है, समान रूप से और
बिना हवा के बुलबुले कप के नीचे वितरित करें, फिर ढक्कन के साथ कवर करें और जमने के लिए छोड़ दें। फसलों को 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टैट में इनक्यूबेट किया जाता है। दोनों व्यंजनों में उगाई गई कॉलोनियों की कुल संख्या की गणना करें और औसत मूल्य निर्धारित करें। अंतिम परिणाम परीक्षण पानी के 1 मिलीलीटर में कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीएफयू) की संख्या के रूप में व्यक्त किया जाता है। 1 मिली पीने के पानी में 50 CFU से अधिक नहीं होना चाहिए

बीजीकेपी की परिभाषा
इसी समय, सामान्य कॉलीफॉर्म बैक्टीरिया - ओकेबी और थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया - टीकेबी निर्धारित किए जाते हैं।

जीकेबी ग्राम-नकारात्मक, गैर-बीजाणु बनाने वाली छड़ें हैं जो 24-48 घंटों के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर एसिड और गैस के लिए लैक्टोज को किण्वित करती हैं। टीकेबी ओकेबी में से हैं, उनके पास उनके संकेत हैं, लेकिन मैं 44 डिग्री सेल्सियस पर किण्वन करता हूं। एंटरोबैक्टीरिया के निर्धारण के लिए - झिल्ली फिल्टर या अनुमापन की विधि।

माइक्रोबियल संख्या - पेयजल की सूक्ष्मजीवविज्ञानी स्थिति का आकलन करने के लिए मुख्य मानदंड,वर्तमान नियामक दस्तावेजों के आधार पर, टीएमसी (कुल माइक्रोबियल संख्या) है, जो एक पोषक माध्यम में 37 डिग्री के तापमान पर प्रति दिन बनने वाले एक मिलीलीटर पानी में एरोबिक और एनारोबिक बैक्टीरिया की संख्या को दर्शाता है। बड़े पैमाने पर माइक्रोबियल संदूषण का तेजी से पता लगाने के लिए यह संकेतक वस्तुतः अपरिहार्य है।

के लिये कुल माइक्रोबियल संख्या का निर्धारणपरीक्षण पानी का एक मिलीलीटर एक बाँझ पेट्री डिश में जोड़ा जाता है, फिर 10-15 मिलीलीटर गर्म (लगभग 44 डिग्री सेल्सियस) पोषक तत्व अगर पिघला हुआ रूप में डाला जाता है। माध्यम को सावधानी से पानी के साथ मिलाया जाता है, समान रूप से वितरित किया जाता है और डिश के तल पर हवा के बुलबुले के बिना, फिर ढक्कन के साथ बंद कर दिया जाता है और पेट्री डिश में जमने तक छोड़ दिया जाता है।

पेयजल राशनिंग के सिद्धांत

दूसरे कप में भी ऐसा ही किया जाता है। थर्मोस्टेट में बुवाई दिन के दौरान 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर की जाती है। फिर, एक माइक्रोस्कोप के तहत डबल आवर्धन पर, दो कप में उगाई गई कॉलोनियों की कुल संख्या की गणना की जाती है, और औसत मूल्य निर्धारित किया जाता है। 1 मिली पीने के पानी में 50 CFU से अधिक नहीं होना चाहिए।

8.1. पोषक तत्व अगर पर उपनिवेश बनाने वाले सूक्ष्मजीवों की कुल संख्या का निर्धारण

8.1.1. एक संकेतक की अवधारणा की परिभाषा

यह विधि पीने के पानी में 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पोषक तत्व अगर पर कॉलोनियां बनाने में सक्षम मेसोफिलिक एरोबिक और वैकल्पिक एनारोबिक सूक्ष्मजीवों (एफएमसी) की कुल संख्या निर्धारित करती है, जो 2 गुना वृद्धि के साथ दिखाई देती है।

8.1.2. विश्लेषण करना

प्रत्येक नमूने से, 1 मिली के कम से कम दो खंडों को टीका लगाया जाता है।

पूरी तरह से मिलाने के बाद, पानी के नमूनों को 1 मिली बाँझ पेट्री डिश में मिलाया जाता है, जिससे ढक्कन थोड़ा खुल जाता है। पानी डालने के बाद, (8-12) मिली (प्रति कप 90-100 मिमी के व्यास के साथ) पिघला हुआ और (45-49) डिग्री सेल्सियस तक ठंडा किया जाता है। जिसमें यह निहित है। फिर जल्दी से कप की सामग्री को मिलाएं, पूरे तल पर समान रूप से वितरित करें, हवा के बुलबुले के गठन से बचें, कप के किनारों और ढक्कन पर आगर हो जाएं। यह प्रक्रिया एक क्षैतिज सतह पर की जाती है, जहां प्लेटों को तब तक छोड़ दिया जाता है जब तक कि अगर ठोस न हो जाए।

विश्लेषण की अवधि के लिए पिघला हुआ अगर पानी के स्नान या थर्मोस्टेट में रखा जाता है जो तापमान (45-49) डिग्री सेल्सियस बनाए रखता है।

आगर के जमने के बाद, संस्कृतियों वाली प्लेटों को थर्मोस्टेट में उल्टा रखा जाता है और (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस (24 ± 2) घंटों के तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है।

8.1.3. सम परिणाम

प्लेट पर उगाई गई सभी कॉलोनियों को 2 गुना आवर्धन पर प्रेक्षित किया जाता है। केवल उन व्यंजनों को ध्यान में रखा जाता है, जिन पर 300 से अधिक अलग-अलग कॉलोनियां नहीं उगाई गई हैं।

दोनों प्लेटों पर कॉलोनियों की संख्या को संक्षेप में दो से विभाजित किया जाता है। परिणाम परीक्षण पानी के नमूने के 1 मिलीलीटर में कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीएफयू) की संख्या के रूप में व्यक्त किया जाता है।

यदि 2 प्लेटों में से किसी एक पर गिनती संभव नहीं है, तो परिणाम एक प्लेट पर कॉलोनियों की संख्या के आधार पर दिया जाता है। यदि दो प्लेटें फैलाना कॉलोनी विकास दिखाती हैं जो प्लेट की पूरी सतह को कवर नहीं करती है, या 300 से अधिक कॉलोनियां विकसित हो गई हैं और परख को दोहराया नहीं जा सकता है, तो डिश के क्षेत्र की गणना करें और फिर पूरी सतह की पुनर्गणना करें । इन मामलों में, प्रोटोकॉल "सीएफयू / एमएल की संख्या - लगभग" नोट करता है।

यदि प्लेटों पर कॉलोनी की गणना संभव नहीं है, तो प्रोटोकॉल पर "निरंतर विकास" रिकॉर्ड करें।

8.2. झिल्ली निस्पंदन (मुख्य विधि) द्वारा सामान्य और थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया का निर्धारण

8.2.1. एक संकेतक की अवधारणा की परिभाषा

सामान्य कोलीफॉर्म बैक्टीरिया (सीबीसी) ग्राम-नकारात्मक, ऑक्सीडेज-नकारात्मक, बीजाणु-मुक्त छड़ें हैं जो अंतर लैक्टोज मीडिया पर बढ़ने में सक्षम हैं, लैक्टोज को एसिड, एल्डिहाइड और गैस के लिए (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस (24- के लिए) के तापमान पर किण्वित करते हैं। 48) एच।

थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया (टीसीबी) सामान्य कॉलीफॉर्म बैक्टीरिया में से हैं, उनकी सभी विशेषताएं हैं और इसके अलावा, 24 घंटे के लिए (44 ± 0.5) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एसिड, एल्डिहाइड और गैस में लैक्टोज को किण्वित करने में सक्षम हैं।

8.2.2. विधि सिद्धांत

विधि झिल्ली फिल्टर के माध्यम से पानी की एक निर्धारित मात्रा को छानने, लैक्टोज के साथ एक विभेदक पोषक माध्यम पर फसल उगाने और सांस्कृतिक और जैव रासायनिक गुणों द्वारा उपनिवेशों की पहचान पर आधारित है।

8.2.3. विश्लेषण करना

8.2.3.1. अनुसंधान आदेश

पीने के पानी के अध्ययन में, 100 मिलीलीटर की 3 मात्रा का विश्लेषण किया जाता है।

यदि स्थिर नकारात्मक परिणाम प्राप्त होते हैं, तो एक फिल्टर के माध्यम से 300 मिलीलीटर पानी को फ़िल्टर किया जा सकता है।

अज्ञात गुणवत्ता के पानी को छानते समय, फिल्टर पर पृथक कॉलोनियों (उदाहरण के लिए, 10, 40, 100, 150 मिलीलीटर पानी) प्राप्त करने के लिए फ़िल्टर किए गए वॉल्यूम की संख्या बढ़ाने की सलाह दी जाती है।

पानी की मापी गई मात्रा को पैरा 7 में निर्धारित आवश्यकताओं के अनुपालन में झिल्ली फिल्टर के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है।

फिल्टर 5.4 के अनुसार तैयार किए गए एंडो माध्यम पर रखे गए हैं। फिल्टर वाले कप को थर्मोस्टेट में उल्टा रखा जाता है और (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस (24 ± 2) घंटों के तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है।

यदि फिल्टर पर कोई वृद्धि नहीं होती है या कॉलोनियां झिल्लीदार, स्पंजी, फफूंदीदार, पारदर्शी, अस्पष्ट हैं, तो वे एक नकारात्मक उत्तर देते हैं: परीक्षण पानी के 100 मिलीलीटर में ओकेबी और टीकेबी की अनुपस्थिति। विश्लेषण 24 घंटे के बाद पूरा हो गया है।

यदि फिल्टर पर अलग-थलग विशिष्ट लैक्टोज-पॉजिटिव कॉलोनियों की वृद्धि पाई जाती है: गहरे लाल, धात्विक चमक के साथ या बिना लाल, या फिल्टर के पीछे एक छाप के साथ अन्य समान प्रकार की कॉलोनियां, प्रत्येक प्रकार की कॉलोनियों की संख्या गिनें अलग से और ओकेबी और टीकेबी से संबंधित होने की पुष्टि करने के लिए आगे बढ़ें।

OKB की उपस्थिति की पुष्टि करने के लिए, जाँच करें:

5 कॉलोनियों से कम होने पर सभी कॉलोनियां फिल्टर पर बढ़ीं;

प्रत्येक प्रकार की कम से कम 3-4 कॉलोनियां।

टीकेबी की उपस्थिति की पुष्टि करने के लिए, सभी विशिष्ट कॉलोनियों की जांच की जाती है, लेकिन 10 से अधिक नहीं।

प्रत्येक चयनित पृथक कॉलोनी की जांच की जाती है:

ऑक्सीडेज गतिविधि की उपस्थिति;

ग्राम संबद्धता (ग्राम-सना हुआ तैयारी या ग्रेगर्सन परीक्षण की माइक्रोस्कोपी);

लैक्टोज का अम्ल और गैस में किण्वन।

8.2.3.2. ऑक्सीडेज परीक्षण की स्थापना

फिल्टर पेपर की एक पट्टी को एक साफ पेट्री डिश में रखा जाता है और पैरा 5.7 के अनुसार ऑक्सीडेज परीक्षण अभिकर्मक की 2-3 बूंदों से सिक्त किया जाता है। तैयार पेपर सिस्टम को आसुत जल से सिक्त किया जाता है। कांच के फोल्डर या प्लेटिनम लूप (निक्रोम से बना धातु का लूप झूठी सकारात्मक प्रतिक्रिया दे सकता है) के साथ पृथक कॉलोनी का हिस्सा तैयार फिल्टर पेपर पर स्ट्रीक किया जाता है। प्रतिक्रिया को सकारात्मक माना जाता है यदि स्ट्रोक का एक बैंगनी-भूरा (धारा 5.7.1 विकल्प 1) या नीला (धारा 5.7.2 विकल्प 2 और एनआईबी ऑक्सीडेज) धुंधला 1 मिनट के भीतर दिखाई देता है। एक नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ, संस्कृति के आवेदन के स्थल पर रंग नहीं बदलता है। सकारात्मक परिणाम के साथ, इस कॉलोनी को आगे के शोध से बाहर रखा गया है।

यदि, गहरे लाल रंग में रंगी हुई कॉलोनियों की जांच करते समय, एक अपर्याप्त स्पष्ट परिणाम प्राप्त होता है, तो संस्कृति को एंडो माध्यम से पोषक तत्व अगर में स्थानांतरित करना आवश्यक है। ऊष्मायन के बाद, परीक्षण दोहराया जाता है।

8.2.3.3. ग्राम से संबंधित का निर्धारण

ऑक्सीडेज-नेगेटिव कॉलोनी से एक स्मीयर लिया जाता है, ग्राम-दाग, और सूक्ष्म रूप से जांच की जाती है।

अल्कोहल से युक्त एक ग्लास स्लाइड पर, आसुत जल की 1 बूंद को लूप में लगाया जाता है, विश्लेषण की गई कॉलोनी से थोड़ी मात्रा में कल्चर जोड़ा जाता है और कांच की सतह पर फैला दिया जाता है। स्मीयर को कमरे के तापमान पर सुखाया जाता है और बर्नर की लौ के माध्यम से तीन बार तय किया जाता है। तैयारी के लिए फिल्टर पेपर की एक पट्टी लगाई जाती है और उस पर (0.5-1) मिनट के लिए वायलेट जेंटियन का एक कार्बोलिक घोल डाला जाता है, कागज को हटा दिया जाता है, लुगोल का घोल (0.5-1) मिनट के लिए डाला जाता है, लुगोल का घोल निकल जाता है और कांच को एथिल अल्कोहल में (0.5-1) मिनट के लिए धोया जाता है, जब तक कि डाई निकलना बंद न हो जाए। फिर गिलास को पानी से अच्छी तरह से धोया जाता है और (1-2) मिनट के लिए ज़ील के फुकसिन के साथ दाग दिया जाता है, आसुत जल के साथ 1:10 पतला होता है। तैयारी को धोने और सुखाने के बाद, स्मीयर की सूक्ष्म जांच की जाती है।

ग्राम धुंधला के लिए अभिकर्मकों की तैयारी धारा 5.9 में वर्णित है।

ग्राम-नकारात्मक सूक्ष्मजीव गुलाबी हैं, ग्राम-पॉजिटिव नीले हैं। कोलीफॉर्म बैक्टीरिया ग्राम-नकारात्मक छड़ हैं।

ग्राम दाग को ग्रेगर्सन परीक्षण से बदला जा सकता है, जिसमें प्रकाशिकी के उपयोग की आवश्यकता नहीं होती है।

ग्रेगर्सन का परीक्षण: कांच की स्लाइड पर KOH के 3% जलीय घोल की एक बूंद में, एक ठोस माध्यम से लिया गया एक जीवाणु द्रव्यमान पायसीकारी होता है। लूप के साथ हिलाने के कुछ सेकंड के बाद, निलंबन श्लेष्मा बन जाता है और श्लेष्म धागे लूप के पीछे खिंच जाते हैं, जो इंगित करता है कि परीक्षण संस्कृति या कॉलोनी एक ग्राम-नकारात्मक प्रजाति से संबंधित है। ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया में, श्लेष्म धागे नहीं बनते हैं - प्रतिक्रिया नकारात्मक होती है।

8.2.3.4. लैक्टोज किण्वन का निर्धारण

शेष ऑक्सीडेज-नकारात्मक ग्राम-नकारात्मक पृथक कॉलोनी को लैक्टोज माध्यम (पृष्ठ 5.6) के साथ दो टेस्ट ट्यूबों में समानांतर में बीज दिया जाता है:

OKB की उपस्थिति की पुष्टि करने के लिए, संस्कृति को 48 घंटों के लिए (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है;

टीकेबी की उपस्थिति की पुष्टि करने के लिए, टीकाकरण (43-44) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पहले से गरम माध्यम में किया जाता है और 24 घंटे के लिए (44 ± 0.5) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है।

अर्ध-तरल मीडिया और एनआईबी (धारा 5.6) की पुष्टि पर एसिड और गैस के गठन के लिए प्राथमिक लेखांकन (4-6) घंटों के बाद संभव है। यदि एसिड और गैस का पता चला है, तो एक सकारात्मक उत्तर दिया जाता है। एसिड और गैस की अनुपस्थिति में या केवल एसिड की उपस्थिति में, टीकेबी की अंतिम गणना के लिए संस्कृतियों वाली ट्यूब 24 घंटे तक छोड़ दी जाती है। 24 घंटे के बाद देखने और नकारात्मक परिणाम प्राप्त करने के बाद टीटीबी की उपस्थिति की पुष्टि करने के लिए फसलों के साथ ट्यूब 48 घंटे तक की अंतिम गिनती के लिए छोड़ दिया गया है।

यदि जांच की जाने वाली कॉलोनी छोटे आकार की है, तो इसे पोषक तत्व अगर तिरछा पर उपसंस्कृति करें और, (18-24) घंटों के लिए ऊष्मायन के बाद, सभी आवश्यक पुष्टिकरण परीक्षण करें।

8.2.3.5. कॉलोनी ओवरले या निरंतर वृद्धि में पुष्टिकरण परीक्षण करें

यदि कॉलोनियों या निरंतर वृद्धि को आंशिक या सभी फिल्टर सतह पर देखा जाता है, तो झिल्ली फिल्टर को फिल्टर से बड़े व्यास के फिल्टर पेपर के एक सर्कल पर रखकर, अभिकर्मक के साथ बड़े पैमाने पर सिक्त, या एक एनआईबी पर एक ऑक्सीडेज परीक्षण किया जाता है। आसुत जल से सिक्त ऑक्सीडेज डिस्क। जब प्रतिक्रिया के पहले लक्षण दिखाई देते हैं, लेकिन 5 मिनट से अधिक नहीं, झिल्ली फिल्टर को वापस एंडो माध्यम में स्थानांतरित कर दिया जाता है। प्रतिक्रिया की स्पष्ट अभिव्यक्ति के बाद, परिणाम निर्धारित किया जाता है। यदि बैंगनी-भूरा या नीला रंग दिखाई देता है (प्रयुक्त अभिकर्मक के आधार पर), तो ऑक्सीडेज परीक्षण सकारात्मक माना जाता है।

यदि फिल्टर पर सभी कॉलोनियां ऑक्सीडेज-पॉजिटिव हैं, तो उन्हें ध्यान में नहीं रखा जाता है और ओकेबी और टीकेबी की अनुपस्थिति के बारे में प्रतिक्रिया देते हैं और विश्लेषण पूरा करते हैं।

एक नकारात्मक ऑक्सीडेज प्रतिक्रिया के मामले में, अलग-अलग कॉलोनियों को प्राप्त होने तक छलनी की जाती है और ओकेबी और टीकेबी से संबंधित होने की पुष्टि पैराग्राफ 8.2.3.3-8.2.3.4 (गुणात्मक विश्लेषण) के अनुसार की जाती है।

8.2.4। परिणामों के लिए लेखांकन

8.2.4.1. ग्राम-नकारात्मक कॉलोनियों को नकारात्मक ऑक्सीडेज परीक्षण के लिए टीबीसी के रूप में गिना जाता है और एसिड और गैस का उत्पादन करने के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर लैक्टोज किण्वन होता है।

ग्राम-नकारात्मक कॉलोनियों को एक नकारात्मक ऑक्सीडेज परीक्षण में टीकेबी और एसिड और गैस उत्पादन के साथ 44 डिग्री सेल्सियस पर लैक्टोज किण्वन के रूप में गिना जाता है।

8.2.4.2. सभी फिल्टर पर सामान्य और थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया की अनुपस्थिति में, परिणाम "100 मिलीलीटर में टीसीबी का कोई सीएफयू" और "100 मिलीलीटर में टीसीबी का कोई सीएफयू नहीं" के रूप में दर्ज किया जाता है।

8.2.4.3. सभी विकसित संदिग्ध कॉलोनियों की पहचान के मामले में, टीकेबी और टीकेबी की कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों की संख्या सभी फिल्टर पर गिना जाता है और सीएफयू विश्लेषण का परिणाम 100 मिलीलीटर पानी में व्यक्त किया जाता है।

गणना सूत्र के अनुसार की जाती है:

एक्स 100 मिलीलीटर में कॉलोनियों की संख्या है;

फ़िल्टर के माध्यम से पानी की फ़िल्टर की गई मात्रा जिस पर खाता रखा गया था;

a इन फ़िल्टरों पर गिने जाने वाली कॉलोनियों की कुल संख्या है।

1. 100 मिली के 3 फिल्टर बोते समय 100 मिली में दो कॉलोनियां बढ़ीं, बाकी दो फिल्टर पर कोई ग्रोथ नहीं हुई। कुल या थर्मोटोलरेंट कॉलीफॉर्म की संख्या होगी:

सीएफयू ओकेबी (टीकेबी) 100 मिली . में

2. 40 मिलीलीटर की फ़िल्टर्ड मात्रा के साथ फिल्टर पर 10, 40, 100 और 150 मिलीलीटर की बुवाई करते समय, 4 पृथक कॉलोनियां बढ़ीं, जिनमें 100-3 ओकेबी की फ़िल्टर्ड मात्रा थी। 10 मिली और 150 मिली की मात्रा वाले फिल्टर अतिवृद्धि हैं और लेखांकन के अधीन नहीं हैं। उन फिल्टरों पर ओकेबी (टीकेबी) कॉलोनियों की कुल संख्या जहां पृथक कॉलोनियां प्राप्त की गई थीं, को सारांशित किया गया है और 100 मिलीलीटर की मात्रा के लिए पुनर्गणना की गई है।

100 मिली . में सीएफयू

8.2.4.4. यदि, एक ही प्रकार की कॉलोनियों की चयनात्मक जाँच के दौरान, असमान परिणाम प्राप्त होते हैं, तो इस प्रकार की कॉलोनियों के बीच OKB या TKB की संख्या की गणना सूत्र के अनुसार की जाती है:

, कहाँ पे

X एक ही प्रकार के पुष्टि किए गए जीवाणुओं की संख्या है;

a इस प्रकार की कॉलोनियों की कुल संख्या है;

- परीक्षण किए गए लोगों की संख्या;

c सकारात्मक परिणाम वाली कॉलोनियों की संख्या है।

प्रत्येक प्रकार की कॉलोनियों के लिए लेखांकन के परिणामों को सारांशित किया जाता है और फिर खंड 8.2.4.3-8.2.4.4 के अनुसार गणना की जाती है।

8.2.4.5. अंतिम परिणाम दिया गया है: 100 मिलीलीटर में सीएफयू टीसीबी की संख्या, जिसमें से 100 मिलीलीटर में सीएफयू टीसीबी की संख्या।

ग्राम-नेगेटिव ऑक्सीडेज-नेगेटिव बैक्टीरिया द्वारा गठित एंडो के माध्यम पर विशिष्ट कॉलीफॉर्म कॉलोनियों का पता लगाकर एक सांकेतिक परिणाम जारी किया जा सकता है। अंतिम उत्तर की पुष्टि लैक्टोज किण्वन के परिणामों से होती है।

8.2.4.6. ओकेबी और टीकेबी से संबंधित होने की पुष्टि के मामले में, कॉलोनियों या सभी फिल्टर (खंड 8.2.3.5) पर निरंतर वृद्धि के मामले में, गुणात्मक परिणाम "100 मिलीलीटर में ओकेबी का पता चला" जारी किया जाता है।

यदि फिल्टर पर सभी कॉलोनियां ऑक्सीडेज-पॉजिटिव हैं या ओकेबी और टीकेबी से संबंधित हैं, तो इसकी पुष्टि नहीं होती है, विश्लेषण पूरा हो गया है, प्रोटोकॉल कहता है "फिल्टर दफन"।

दोनों ही मामलों में, विश्लेषण दोहराया जाता है।

8.3. अनुमापन विधि द्वारा सामान्य और थर्मोटोलेरिक कोलीफॉर्म बैक्टीरिया का निर्धारण

8.3.1. एक संकेतक की अवधारणा की परिभाषा

खंड 8.2.1 के अनुसार OKB और TKB संकेतकों की अवधारणा की परिभाषा।

8.3.2. आवेदन क्षेत्र

अनुमापन विधि का उपयोग किया जा सकता है:

झिल्ली निस्पंदन द्वारा विश्लेषण करने के लिए आवश्यक सामग्री और उपकरणों की अनुपस्थिति में;

निलंबित ठोस पदार्थों की उच्च सामग्री वाले पानी का विश्लेषण करते समय;

पानी में विदेशी माइक्रोफ्लोरा की प्रबलता के मामले में, जो फिल्टर पर सामान्य कोलीफॉर्म बैक्टीरिया की पृथक कॉलोनियों के उत्पादन को रोकता है।

8.3.3. विधि सिद्धांत

विधि एक तरल पोषक माध्यम में पानी की एक निश्चित मात्रा के टीकाकरण के बाद बैक्टीरिया के संचय पर आधारित है, इसके बाद लैक्टोज के साथ एक अंतर घने पोषक माध्यम पर फिर से चढ़ाना और सांस्कृतिक और जैव रासायनिक परीक्षणों द्वारा कॉलोनियों की पहचान करना है।

8.3.4. विश्लेषण करना

पीने के पानी के अध्ययन में गुणात्मक विधि(वर्तमान सैनिटरी और महामारी विज्ञान पर्यवेक्षण, उत्पादन नियंत्रण) 100 मिलीलीटर के 3 खंड टीका लगाते हैं।

उद्देश्य के लिए पानी का अध्ययन करते समय मात्रा का ठहराव OKB और TKB, जब पुन: विश्लेषण किया जाता है, टीका लगाया जाता है: 100 मिलीलीटर के 3 खंड, 10 मिलीलीटर के 3 खंड, 1 मिलीलीटर के 3 खंड।

परीक्षण पानी की प्रत्येक मात्रा को क्लॉज 5.5 के अनुसार तैयार किए गए लैक्टोज-पेप्टोन माध्यम में टीका लगाया जाता है। 100 मिलीलीटर और 10 मिलीलीटर पानी का टीकाकरण 10 और 1 मिलीलीटर केंद्रित लैक्टोज-पेप्टोन माध्यम में किया जाता है, नमूने के 1 मिलीलीटर का टीकाकरण सामान्य एकाग्रता के 10 मिलीलीटर माध्यम में किया जाता है।

फसलों को 48 घंटों के लिए (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। 24 घंटों से पहले नहीं। ऊष्मायन, फसलों का प्रारंभिक मूल्यांकन किया जाता है। कंटेनरों से, जहां वृद्धि (गंदगी) की उपस्थिति और गैस के गठन का उल्लेख किया जाता है, पृथक कॉलोनियों को प्राप्त करने के लिए एंडो माध्यम (खंड 5.4.1) के क्षेत्रों में एक बैक्टीरियोलॉजिकल लूप को टीका लगाया जाता है।

वृद्धि और गैस गठन के बिना कंटेनरों को थर्मोस्टेट में छोड़ दिया जाता है और अंत में 48 घंटों के बाद जांच की जाती है। वृद्धि के संकेतों के बिना फसलों को नकारात्मक माना जाता है और वे आगे के शोध के अधीन नहीं हैं। कंटेनरों से जहां मैलापन और गैस का बनना या केवल मैलापन नोट किया जाता है, एंडो माध्यम के क्षेत्रों पर सीडिंग की जाती है।

एंडो माध्यम पर टीकाकरण (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर (18-20) घंटों के लिए इनक्यूबेट किया जाता है।

संचय माध्यम में मैलापन और गैस के निर्माण के साथ और लैक्टोज-पॉजिटिव बैक्टीरिया की विशिष्ट कॉलोनियों के एंडो माध्यम पर वृद्धि के साथ: गहरा लाल या लाल, धात्विक चमक के साथ या बिना, लाल केंद्र के साथ उत्तल और पोषक तत्व पर एक छाप माध्यम, वे दिए गए नमूने की मात्रा में सामान्य कोलीफॉर्म बैक्टीरिया की उपस्थिति के लिए सकारात्मक प्रतिक्रिया देते हैं।

OKB की उपस्थिति की पुष्टि करना आवश्यक है:

यदि संचय माध्यम में केवल मैलापन देखा जाता है;

यदि लैक्टोज-पॉजिटिव कॉलोनियों से संबंधित है तो शोधकर्ता द्वारा संदेहास्पद है। ऐसे मामलों में:

एक संदिग्ध कॉलोनी को लूप करने के बाद एंडो के माध्यम पर एक छाप की जाँच करें;

8.2.3.2 खंड के अनुसार ऑक्सीडेज परीक्षण करें;

खंड 8.2.3.3 के अनुसार ग्राम से संबंधित होने की पुष्टि करें;

क्लॉज 5.6 के अनुसार लैक्टोज के साथ माध्यम पर प्रत्येक सेक्टर से प्रत्येक प्रकार की पृथक 1-2 कॉलोनियों के टीकाकरण द्वारा गैस निर्माण की क्षमता की पुष्टि की जाती है, इसके बाद (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर इनोक्यूलेशन का ऊष्मायन किया जाता है ( 24-48) घंटे।

पृथक कॉलोनियों की अनुपस्थिति में, एंडो माध्यम पर पारंपरिक बैक्टीरियोलॉजिकल विधियों द्वारा छानबीन की जाती है।

एक नकारात्मक उत्तर दिया जाता है यदि:

संचय वातावरण में वृद्धि के कोई संकेत नहीं हैं;

एंडो पर्यावरण के क्षेत्रों में कोई वृद्धि नहीं हुई है;

एंडो माध्यम के क्षेत्रों पर कॉलीफॉर्म बैक्टीरिया (दांतेदार किनारों, धुंधली, आदि के साथ पारदर्शी) की विशेषता नहीं कालोनियों में वृद्धि हुई;

सभी कॉलोनियां ऑक्सीडेज पॉजिटिव थीं;

सभी कॉलोनियां ग्राम-पॉजिटिव थीं;

यदि कार्बोहाइड्रेट के साथ माध्यम पर पुष्टिकरण परीक्षण में गैस गठन का उल्लेख नहीं किया गया है।

निर्धारण के लिए थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरियाएंडो माध्यम के क्षेत्रों के साथ काम करें जहां विशिष्ट लैक्टोज-पॉजिटिव कॉलोनियां विकसित हुई हैं। पैराग्राफ 5.6 के अनुसार तैयार किए गए किसी भी लैक्टोज मीडिया के साथ टेस्ट ट्यूब में प्रत्येक सेक्टर से प्रत्येक प्रकार की 2-3 अलग-अलग कॉलोनियों की बुवाई करें।

बुवाई से पहले, माध्यम को पानी के स्नान में या थर्मोस्टेट में 44 डिग्री सेल्सियस तक गरम किया जाता है। टीकाकरण के तुरंत बाद, ट्यूबों को थर्मोस्टैट में रखा जाता है और 24 घंटों के लिए (44 ± 0.5) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर इनक्यूबेट किया जाता है। इसे (4-6) घंटों के बाद टीकाकरण देखने की अनुमति है।

संचय माध्यम में गैस बनने के साथ, एंडो माध्यम पर लैक्टोज-पॉजिटिव बैक्टीरिया की वृद्धि, और इन बैक्टीरिया की क्षमता का पता लगाने के लिए 44 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 24 घंटे के लिए लैक्टोज को एसिड और गैस में किण्वित किया जाता है, वे इस मात्रा में टीकेबी पानी के नमूने की उपस्थिति के लिए सकारात्मक प्रतिक्रिया दें। अन्य सभी मामलों में, वे नकारात्मक उत्तर देते हैं।

संचय माध्यम की मात्रा से 1 मिलीलीटर टीका लगाने के लिए टीकेबी की उपस्थिति की प्रतिक्रिया जारी करने में तेजी लाने की अनुमति है, जहां एक फ्लोट के साथ लैक्टोज-पेप्टोन माध्यम के साथ एक टेस्ट ट्यूब में मैलापन और गैस गठन नोट किया जाता है खंड 5.6 और 44 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर प्रीहीट किया गया। फसलों को 24 घंटे के लिए (44 ± 0.5) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टैट में रखा जाता है। यदि एसिड और गैस का पता चला है, तो वे सकारात्मक उत्तर देते हैं।

8.3.5. परिणामों के लिए लेखांकन

100 मिलीलीटर के 3 संस्करणों की जांच करते समय, परिणामों का गुणात्मक रूप से मूल्यांकन किया जाता है, और यदि ओकेबी और टीकेबी को 3 संस्करणों में से कम से कम एक में पाया जाता है, तो "100 मिलीलीटर में पाया गया" प्रोटोकॉल में एक प्रविष्टि की जाती है।

मात्रात्मक विधि के अध्ययन में ओकेबी और टीकेबी की सबसे संभावित संख्या (एमपीएन) तालिका के अनुसार निर्धारित की जाती है। 1.1 आवेदन 1.

परिणाम विश्वास अंतराल के बिना रिपोर्ट किया जाता है।

सभी जांच किए गए संस्करणों में टीकेबी और टीकेबी की उपस्थिति के लिए नकारात्मक प्रतिक्रिया के मामले में, "100 मिलीलीटर में नहीं मिला" प्रोटोकॉल में एक निष्कर्ष जारी किया जाता है।

8.4. सल्फाइट को कम करने वाले क्लोस्ट्रीडिया के बीजाणुओं का निर्धारण

8.4.1. एक संकेतक की अवधारणा की परिभाषा

सल्फाइट को कम करने वाले क्लोस्ट्रीडिया बीजाणु बनाने वाले अवायवीय छड़ के आकार के सूक्ष्मजीव हैं जो (16-18) घंटों के लिए (44 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर आयरन-सल्फाइट अगर पर सोडियम सल्फाइट को कम करते हैं।

8.4.2. विधि सिद्धांत

यह विधि अवायवीय परिस्थितियों में आयरन सल्फाइट अगर में फसल उगाने और काली कॉलोनियों की संख्या की गणना पर आधारित है।

8.4.3. विश्लेषण करना

8.4.3.1. वानस्पतिक रूपों को बाहर करने के लिए पानी के 20 मिलीलीटर नमूने को टेस्ट ट्यूबों में (75 ± 5) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 15 मिनट के लिए पानी के स्नान में गर्म किया जाता है।

क्लोरीनयुक्त जल के अध्ययन में नमूने के तापन को छोड़ा जा सकता है।

पीने के पानी के प्रत्येक नमूने से, 20 मिलीलीटर सुसंस्कृत या फ़िल्टर किया जाता है। यदि आवश्यक हो, तो मात्रा का चयन करें ताकि फसलों में (फिल्टर पर) 10-15 से अधिक कॉलोनियां न उगें। इस मामले में, वे पिछले अध्ययनों के परिणामों द्वारा निर्देशित होते हैं।

जल निस्पंदन पैराग्राफ 7 में निर्धारित आवश्यकताओं के अनुसार किया जाता है।

8.4.3.2. परखनली में निस्यंदन द्वारा निर्धारण

टीकाकरण से पहले, 5.8 के अनुसार तैयार आयरन सल्फाइट अगर के साथ ट्यूबों को पानी के स्नान में पिघलाया जाता है (उबालें नहीं!) बुवाई के दौरान, माध्यम को पानी के स्नान में (70-80) डिग्री सेल्सियस तक गर्म रखा जाता है।

पानी की स्थापित मात्रा को छानने के बाद, झिल्ली फिल्टर को दो विपरीत किनारों से फ्लेमेड चिमटी के साथ लिया जाता है और, ट्यूब के रूप में मुड़ा हुआ, एक टेस्ट ट्यूब में गर्म अगर के साथ रखा जाता है। बसे हुए बैक्टीरिया के साथ फिल्टर का किनारा अंदर की ओर है। इस मामले में, फिल्टर को सीधा किया जाता है और टेस्ट ट्यूब की दीवार के साथ स्थित होता है।

टीकाकरण के तुरंत बाद, अवायवीय स्थिति बनाने के लिए अगर और फिल्टर के साथ ट्यूब को ठंडे पानी के कंटेनर में रखकर तेजी से ठंडा किया जाता है। (16-18) घंटों के लिए (44 ± आई) डिग्री सेल्सियस पर फसलों की खेती करें।

8.4.3.3. पेट्री डिश में निस्पंदन द्वारा निर्धारण

(55-60) मिमी व्यास वाले पेट्री डिश आयरन-सल्फाइट अगर की एक पतली परत से भरे होते हैं। छानने के बाद, फिल्टर सतह के साथ फिल्टर को ठोस पोषक माध्यम पर नीचे रखें ताकि फिल्टर के नीचे हवा के बुलबुले न हों। फिर पिघले हुए आयरन सल्फाइट अगर को डिश के ऊपर तक डालें ताकि ढक्कन अवायवीय स्थिति बनाने के लिए माध्यम पर अच्छी तरह से फिट हो जाए। (16 - 1 8) घंटों के लिए (44 ± 1) डिग्री सेल्सियस पर फसलों की खेती करें।

8.4.3.4. सीधी बुवाई द्वारा निर्धारण

आयरन सल्फाइट अगर शीशियों और पानी के नमूने 8.4.3.1 में वर्णित अनुसार तैयार किए जाते हैं ।

बाँझ टेस्ट ट्यूब में जोड़ें:

2 परखनलियों में 10 मिली (मात्रा में कम से कम 30 मिली) या

4 परखनलियों में 5 मिली (प्रत्येक में 15 मिली)।

पानी की मात्रा से 2 गुना अधिक मात्रा में गर्म आयरन-सल्फाइट अगर के साथ फसलें डाली जाती हैं। हवा के बुलबुले के गठन से बचने के लिए, टेस्ट ट्यूब की दीवार के साथ माध्यम डालें। उसके बाद, अवायवीय स्थिति बनाने के लिए ट्यूब को ठंडे पानी के कंटेनर में रखकर तेजी से ठंडा किया जाता है। टीकाकरण (44 ± 1) डिग्री सेल्सियस (16-18) घंटों के लिए इनक्यूबेट किया जाता है।

8.4.4. परिणामों के लिए लेखांकन

केवल वे फसलें जहां पृथक कॉलोनियां प्राप्त होती हैं, मात्रात्मक लेखांकन के अधीन हैं। काली कालोनियों की गणना की जाती है, दोनों फिल्टर पर और पोषक माध्यम की मोटाई में उगाई जाती हैं।

विश्लेषण का परिणाम 20 मिलीलीटर पानी में सल्फाइट-कम करने वाले क्लॉस्ट्रिडिया के बीजाणुओं की कॉलोनी बनाने वाली इकाइयों (सीएफयू) की संख्या के रूप में व्यक्त किया जाता है।

यदि सभी फिल्टरों पर काली कॉलोनियों की वृद्धि नहीं होती है, तो उत्तर "20 मिली पानी में नहीं पाया जाता है"।

यदि संगम वृद्धि के कारण कालोनियों की गणना करना असंभव है, तो परिणाम का मूल्यांकन गुणात्मक के रूप में किया जाता है, प्रोटोकॉल नोट "20 मिलीलीटर में पाया जाता है"। यदि आवश्यक हो, तो मात्रात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए, विश्लेषण दोहराया जाता है।

8.5. कोलिफेज की परिभाषा

8.5.1. एक संकेतक की अवधारणा की परिभाषा

कोलीफेज जीवाणु विषाणु होते हैं जो ई. कोलाई को नष्ट करने में सक्षम होते हैं और पोषक तत्व अगर पर (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर (18 ± 2) एच बैक्टीरियल लॉन लिसीज़ ज़ोन (सजीले टुकड़े) बनते हैं।

8.5.2. कोलिफेज के निर्धारण के लिए अनुमापन विधि

8.5.2.1. विधि सिद्धांत

पीने के पानी में कोलीफेज का निर्धारण ई. कोलाई की संस्कृति पर संवर्धन माध्यम में कोलिफेज के प्रारंभिक संचय और पोषक तत्व अगर पर ई. कोलाई लॉन के लिसिस (ज्ञानोदय) के क्षेत्रों की बाद की पहचान में होता है।

8.5.2.2. आवेदन क्षेत्र

यह विधि पीने के पानी की गुणवत्ता की वर्तमान निगरानी के लिए है।

8.5.2.3. परीक्षण संस्कृति ई. कोलाई K12 StrR की तैयारी।

अध्ययन के सभी चरणों में, निम्नानुसार तैयार एक जीवाणु निलंबन का उपयोग किया जाता है: ई. कोलाई की संस्कृति को स्ट्रेप्टोमाइसिन (धारा 5.3.5) के साथ झुके हुए पोषक तत्व अगर के साथ एक परखनली में टीका लगाया जाता है। (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर ऊष्मायन के बाद (18 ± 2) घंटे के बाद, संयुक्त से बैक्टीरिया को 5 मिलीलीटर बाँझ खारा (0.85% NaCl समाधान) से धोएं और, मैलापन मानक के अनुसार, एक निलंबन तैयार करें ई. कोलाई का 1 मिली में 109 जीवाणु कोशिकाओं की सांद्रता पर।

थर्मोस्टेट में 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर बढ़ने से प्राप्त ई. कोलाई की 4 घंटे की शोरबा संस्कृति का उपयोग करने की अनुमति है। 109 ई. कोलाई जीवाणु कोशिकाओं की सांद्रता 2 मिली में निहित है।

8.5.2.4। गुणात्मक विश्लेषण करना

परीक्षण पानी में 10 गुना पोषक तत्व शोरबा (खंड 5.2.2 के अनुसार तैयार) के 10 मिलीलीटर और परीक्षण संस्कृति के तैयार धोने के 1 मिलीलीटर या 4 घंटे के शोरबा संस्कृति के 2 मिलीलीटर (खंड 8.5.2.3) जोड़ें। 100 मिलीलीटर की मात्रा के साथ नमूना।

कल्चर नियंत्रण के लिए, ई. कोलाई वॉश का 0.1 मिली (या 4 घंटे के ब्रोथ कल्चर का 0.2 मिली) पेट्री डिश में रखा जाता है और पोषक तत्व अगर से ढक दिया जाता है।

परीक्षण पानी का नमूना (100 मिली) और ई. कोलाई नियंत्रण वाली पेट्री डिश को थर्मोस्टेट में रखा जाता है और (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर (18 ± 2) घंटों के लिए इनक्यूबेट किया जाता है।

ऊष्मायन के बाद, परीक्षण पानी के नमूने का 10 मिलीलीटर एक परखनली में डाला जाता है और 1 मिलीलीटर क्लोरोफॉर्म मिलाया जाता है।

टेस्ट ट्यूब को एक बाँझ रबर या सिलिकॉन स्टॉपर के साथ बंद कर दिया जाता है, नमूना मात्रा पर क्लोरोफॉर्म को समान रूप से वितरित करने के लिए सख्ती से हिलाया जाता है, और कमरे के तापमान पर कम से कम 15 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है जब तक कि क्लोरोफॉर्म पूरी तरह से अवक्षेपित न हो जाए।

प्री-मेल्टेड और कूल्ड (45-49) डिग्री सेल्सियस पोषक तत्व अगर में, ई. कोलाई बैक्टीरिया (क्लॉज 8.5.2.3) के तैयार वॉशआउट को 1.0 मिली वॉशआउट (या 4 घंटे के शोरबा के 2 मिली) की दर से मिलाएं। संस्कृति) प्रति 100 मिलीलीटर अगर।

एक परखनली से पिपेट के साथ एक बाँझ पेट्री डिश में क्लोरोफॉर्म (क्लोरोफॉर्म को छुए बिना) के साथ इलाज किए गए नमूने के 1 मिलीलीटर को स्थानांतरित करें और इसे पिघले हुए मिश्रण के साथ भरें और (45-49) डिग्री सेल्सियस पोषक तत्व अगर की मात्रा के साथ ठंडा करें (12-15) मिली, साथ ही ई. कोलाई कल्चर को नियंत्रित करने के लिए एक अतिरिक्त पेट्रीड डिश और पानी और अगर के नमूनों को समान रूप से मिलाने के लिए धीरे से हिलाएं। पूरी तरह से जमने के लिए, कपों को टेबल पर कमरे के तापमान पर 10 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है। जमने के बाद, कपों को पलट दिया जाता है और 37 डिग्री सेल्सियस पर (18 ± 2) घंटे के लिए थर्मोस्टैट में रखा जाता है।

नमूनों की एक श्रृंखला करते समय, पूरी श्रृंखला के लिए एक सामान्य नियंत्रण रखा जाता है।

परिणामों के लिए लेखांकन

संचरित प्रकाश में की गई फसलों को देखें।

नियंत्रण प्लेट पर लसीका क्षेत्रों की अनुपस्थिति में पानी के नमूने के साथ प्लेट पर एक पट्टिका, कई पट्टिकाओं को साफ करने, पूर्ण लसीका की उपस्थिति में नमूना सकारात्मक माना जाता है।

विश्लेषण प्रोटोकॉल नोट: 100 मिलीलीटर पानी (गुणात्मक परिणाम) में कोलिफेज पाए गए या नहीं पाए गए।

यदि संस्कृति नियंत्रण में लसीका क्षेत्र हैं, तो परिणाम को अमान्य माना जाता है।

8.5.2.5. मात्रात्मक विश्लेषण करना

जांचे गए पानी के नमूने को 100 मिली की मात्रा में 6 मात्रा में डालें: 50 मिली की 1 बोतल और 10 मिली की 5 टेस्ट ट्यूब। नमूने के 50 मिलीलीटर में, ई. कोलाई बैक्टीरिया (खंड 8.5.2.3) के 5 मिलीलीटर दस गुना पोषक तत्व शोरबा (5.2.2 के अनुसार) और 0.5 मिलीलीटर वाश (या 4 घंटे के शोरबा संस्कृति का 1 मिलीलीटर) मिलाएं। . नमूने के प्रत्येक 10 मिलीलीटर में, ई. कोलाई बैक्टीरिया का 1 मिलीलीटर दस गुना पोषक तत्व शोरबा और 0.1 मिलीलीटर वाश (या 4-घंटे शोरबा संस्कृति का 0.2 मिलीलीटर) मिलाएं।

कल्चर कंट्रोल के लिए, ई. कोलाई के ओडी एमएल बैक्टीरिया वॉश (या 4-घंटे ब्रोथ कल्चर का 0.2 मिली) को पेट्री डिश में रखा जाता है और पोषक तत्व अगर से भर दिया जाता है।

फसलों को (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 18 ± 2 घंटे के लिए इनक्यूबेट किया जाता है।

ऊष्मायन के बाद, एक परखनली में 50 मिलीलीटर की मात्रा से 10 मिलीलीटर डालें। सभी 6 परीक्षण मात्राओं में 1 मिली क्लोरोफॉर्म मिलाएं। बाँझ रबर या सिलिकॉन स्टॉपर्स के साथ टेस्ट ट्यूब को बंद करें, नमूना मात्रा पर क्लोरोफॉर्म को समान रूप से वितरित करने के लिए सख्ती से हिलाएं, और क्लोरोफॉर्म को कम करने के लिए कम से कम 15 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर छोड़ दें।

पहले पिघला हुआ और ठंडा (45-49) डिग्री सेल्सियस पोषक तत्व अगर में, ई. कोलाई बैक्टीरिया (खंड 8.5.2.3) के तैयार वॉशआउट को 1.0 मिली वॉशआउट (या 4 घंटे के ब्रोथ कल्चर के 2 मिली) की दर से मिलाएं। ) प्रति 100 मिलीलीटर अगर। तैयार मिश्रण को पेट्री डिश में डालें: लाइसोजेनिसिटी के लिए ई. कोलाई की संस्कृति को नियंत्रित करने के लिए 1 कप और अध्ययन के तहत प्रत्येक पानी के नमूने के लिए एक कप। कई पानी के नमूनों के एक साथ विश्लेषण के साथ, ई. कोलाई संस्कृति का एक नियंत्रण रखा गया है।

आगर के जमने के बाद, नमूनों के टीकाकरण के लिए अभिप्रेत व्यंजन को 6 क्षेत्रों में विभाजित किया जाता है, जिन्हें अध्ययन के तहत मात्रा के अनुसार लेबल किया जाता है। संबंधित टेस्ट ट्यूब से प्रत्येक सेक्टर में एक पाश्चर पिपेट (माइक्रोपिपेट या बैक्टीरियोलॉजिकल लूप के साथ एक अनुदैर्ध्य स्ट्रोक) के साथ सतह पर तैरनेवाला (क्लोरोफॉर्म के बिना) की 1 बूंद लागू करें।

बूंदों के सूख जाने के बाद, कपों को परीक्षण नमूनों और नियंत्रण कप के साथ थर्मोस्टैट में (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस पर (18 ± 2) घंटों के लिए रखें।

परिणामों के लिए लेखांकन

परिणाम संचरित प्रकाश में देखे जाते हैं।

ई। कोलाई लॉन के क्षेत्रों पर ज्ञानोदय (लिसिस) के क्षेत्रों की उपस्थिति से लेखांकन किया जाता है।

एक पिपेट के साथ ड्रिप सीडिंग विधि का उपयोग करते समय, एक गोल स्थान या व्यक्तिगत सजीले टुकड़े के रूप में एक लसीका क्षेत्र बनता है। बैक्टीरियोलॉजिकल लूप के साथ एक अनुदैर्ध्य स्ट्रोक की बुवाई करते समय, स्ट्रोक के साथ लसीका का उल्लेख किया जाता है।

नमूना सकारात्मक माना जाता है यदि नियंत्रण प्लेट पर lysis ज़ोन की अनुपस्थिति में कम से कम एक सेक्टर पर एक lysis ज़ोन है।

मूल्यांकन पट्टिका बनाने वाली इकाइयों (पीएफयू) (तालिका 1.2) की सबसे संभावित संख्या (एमपीएन) की तालिका के अनुसार किया जाता है। विश्लेषण प्रोटोकॉल 100 मिलीलीटर पानी में कोलिफेज की सबसे संभावित संख्या और संभावित उतार-चढ़ाव की सीमा को इंगित करता है: 100 मिलीलीटर में कोलिफेज की एलएफ पीएफयू (निचली सीमा - ऊपरी सीमा)। परिणाम अर्ध-मात्रात्मक है।

यदि नियंत्रण डिश में लसीका के क्षेत्र हैं, तो परिणाम को अमान्य माना जाता है।

8.5.3. कोलिफेज के निर्धारण की सीधी विधि

।एक। विधि सिद्धांत

पीने के पानी में कोलीफेज के निर्धारण में पोषक तत्व अगर के साथ पेट्री डिश में ई. कोलाई लॉन पर प्रत्यक्ष टीकाकरण और बाद में लसीका क्षेत्रों (सजीले टुकड़े) के पंजीकरण द्वारा पानी की एक सामान्यीकृत मात्रा (100 मिलीलीटर) का अध्ययन शामिल है।

8.5.3.2. कार्यक्षेत्र

कोलिफेज को पानी से अलग करने की सीधी विधि महामारी के संकेतों के अनुसार अध्ययनों में अनुमापन विधि के समानांतर की जाती है।

8.5.3.3. विश्लेषण का संचालन

डबल सांद्रण (p. 5.3.2) के पोषक तत्व अगर में, पिघलाकर (45-49) ° C तक ठंडा किया जाता है, तो 2.0 ml वॉश (या 4 ml) की दर से E. कोलाई वॉश (p. 8.5.2.3) मिलाएं। 4 घंटे की शोरबा संस्कृति) प्रत्येक 100 मिलीलीटर अगर के लिए, मिश्रण। जांचे गए 100 मिली पानी को 20 मिली बड़ी परखनलियों में डालें, (35-44) डिग्री सेल्सियस तक गरम करें और तुरंत (आवश्यक तापमान तक पहुँचने के 5 मिनट से अधिक नहीं) 5 पेट्री डिश में डालें और तुरंत प्रत्येक डिश में 20 मिली डालें। ई. कोलाई कल्चर के साथ अगर मिश्रण।

ई. कोलाई कल्चर को नियंत्रित करने के लिए, एक पेट्री डिश में (35-44) डिग्री सेल्सियस पर पहले से गरम किए गए 20 मिलीलीटर बाँझ नल का पानी डालें, तैयार ई. कोलाई अगर के 20 मिलीलीटर डालें और धीरे से मिलाएं।

कप की सामग्री को धीरे से हिलाएं और कमरे के तापमान पर जमने तक छोड़ दें। जमे हुए अगर के साथ प्लेटों को थर्मोस्टेट में उल्टा रखें और (37 ± 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर (18 ± 2) घंटे के लिए इनक्यूबेट करें।

परिणामों के लिए लेखांकन

फसलों को देखने का कार्य संचरित प्रकाश में किया जाता है।

परिणामों के लिए लेखांकन 5 पेट्री डिश पर उगाई गई पट्टिकाओं की गिनती और योग करके किया जाता है। परिणाम प्रति 100 मिलीलीटर पानी के नमूने में पट्टिका बनाने वाली इकाइयों (पीएफयू) में व्यक्त किए जाते हैं। नियंत्रण डिश में कोई पट्टिका नहीं होनी चाहिए।

सबसे अधिक बार, स्पष्ट रूप से परिभाषित या मिटाए गए सीमाओं के साथ गोल पृथक सजीले टुकड़े (1 से 5-7) मिमी व्यास के रूप में पोषक तत्व अगर परीक्षण संस्कृति लॉन की पृष्ठभूमि के खिलाफ पारदर्शी धब्बे की तरह दिखते हैं।

उच्च फेज सांद्रता में, लसीका का एक अलग पैटर्न देखा जाता है।

नकारात्मक कॉलोनियों का संलयन ई. कोलाई का "ओपनवर्क" लॉन देता है, निरंतर लसीका की पृष्ठभूमि के खिलाफ ई. कोलाई की एकल कॉलोनियों का विकास, या डिश पर विकास का पूर्ण अभाव।

प्रत्यक्ष टीकाकरण के साथ, लसीका संभव है, अमानवीय रूप से ठोस अगर द्वारा मुखौटा किया जाता है, साथ ही साथ माइक्रोफ्लोरा द्वारा बंद किया जाता है। सीधे टीकाकरण से घनीभूत और अमानवीय रूप से सेट अगर की बूंदों से ई कोलाई लॉन में कलाकृतियों का निर्माण हो सकता है जो नेत्रहीन रूप से लसीका जैसा दिखता है।

ऊष्मायन के (5-6) घंटों के बाद परिणामों का प्रारंभिक लेखा-जोखा किया जा सकता है। इस स्तर पर, लसीका के स्पष्ट क्षेत्रों की उपस्थिति में, पानी में कोलिफेज की उपस्थिति के बारे में प्रारंभिक उत्तर जारी किया जा सकता है।

प्रत्यक्ष टीकाकरण का अंतिम मात्रात्मक रिकॉर्ड (18 ± 2) घंटों के बाद किया जाता है। परिणाम प्रति 100 मिलीलीटर पानी के नमूने में पट्टिका बनाने वाली इकाइयों (पीएफयू) की संख्या के रूप में व्यक्त किए जाते हैं।

यदि मिला हुआ पट्टिका विकास नोट किया जाता है और गिनती मुश्किल होती है, तो प्रत्यक्ष बोने के अनुसार एक गुणात्मक परिणाम जारी किया जा सकता है: "100 मिलीलीटर पानी में पाया जाता है"।

यदि प्रत्यक्ष विधि के साथ काम करने पर नकारात्मक परिणाम प्राप्त होता है, तो अंतिम उत्तर अनुमापन विधि के परिणामों के अनुसार जारी किया जाता है।

यदि नियंत्रण डिश में लसीका के क्षेत्र हैं, तो अध्ययन के परिणाम को अमान्य माना जाता है।

8.5.4. नियंत्रण स्थापित करना

8.5.4.1. नकारात्मक नियंत्रण

नकारात्मक नियंत्रण तैयारी और विश्लेषण के चरणों में पोषक तत्व मीडिया, प्रयोगशाला कांच के बने पदार्थ, उपकरण के फेज संदूषण की अनुपस्थिति की पुष्टि करता है, और आपको परीक्षण संस्कृति ई की क्षमता का मूल्यांकन करने की भी अनुमति देता है। कोलाई एक समान लॉन देने के लिए।

नकारात्मक नियंत्रण बाँझ नल के पानी का अध्ययन है, जो विश्लेषण किए गए पानी के नमूने के समान किया जाता है। इसलिए, अनुमापन विधि द्वारा पानी का विश्लेषण करते समय, एक अतिरिक्त टेस्ट ट्यूब में 10 मिलीलीटर बाँझ नल का पानी मिलाया जाता है। प्रत्यक्ष टीकाकरण द्वारा पानी का विश्लेषण करते समय, अतिरिक्त छठे पेट्री डिश में 20 मिलीलीटर बाँझ नल का पानी मिलाया जाता है।

मुख्य नमूनों की तरह ही कोलिफेज के लिए अतिरिक्त फसलों की जांच की जाती है।

नमूनों की एक श्रृंखला का विश्लेषण करते समय, प्रत्येक प्रकार के विश्लेषण के लिए एक नकारात्मक नियंत्रण हो सकता है: अनुमापन और प्रत्यक्ष। इस मामले में, इस श्रृंखला के सभी नमूनों को संसाधित करने के बाद नकारात्मक नियंत्रण का मंचन किया जाता है।

यदि नकारात्मक नियंत्रण प्लेटों में कोलिफेज की पट्टिकाएँ पाई जाती हैं, तो पानी के नमूनों की पूरी श्रृंखला के अध्ययन के परिणाम अमान्य हैं।

प्रयोगशाला उपकरण, बर्तन, पोषक माध्यम की बाँझपन की जांच करना और ई. कोलाई K12 F + StrR परीक्षण तनाव की शुद्धता के लिए नियंत्रण टीकाकरण को दोहराना आवश्यक है।

नकारात्मक नियंत्रण की आवृत्ति - प्रति दिन 1 बार।

8.5.4.2. लसीका की फेज प्रकृति की पुष्टि करने की विधि

संदिग्ध मामलों में, अनुमापन और प्रत्यक्ष दोनों तरीकों के साथ काम करते समय, लसीका की फेज प्रकृति की पुष्टि करने के लिए एक नियंत्रण टीकाकरण करना आवश्यक है।

इस प्रयोजन के लिए, एक बैक्टीरियोलॉजिकल लूप का उपयोग अगर के एक खंड को हटाने के लिए किया जाता है, जो कोलीफेज के लिए संदिग्ध है, इसे 5 मिलीलीटर पोषक शोरबा में रखें, जहां ई। कोलाई परीक्षण संस्कृति की एक बूंद को जोड़ा जाता है और 37 डिग्री सेल्सियस (16) के लिए ऊष्मायन किया जाता है। -18) घंटे। परिणामी संस्कृति को क्लोरोफॉर्म के साथ इलाज किया जाता है और फेज की उपस्थिति के लिए जांच की जाती है। पोषक तत्व अगर क्षेत्रों पर लूप या पिपेट के साथ सीडिंग उसी तरह से की जाती है जैसे पैराग्राफ 8.5.2.5 में वर्णित है। किसी भी क्षेत्र पर विश्लेषण को फेज की उपस्थिति की पुष्टि के रूप में माना जाता है।

पेय जल

पानी के साथ-साथ रासायनिक का बेमेल होना इसे पीने योग्य नहीं बनाता है। यदि आपका जल स्रोत प्रत्यक्ष पर्यावरणीय जोखिम से सुरक्षित नहीं है या उपयोगिता प्रणालियां पुरानी हैं या लंबे समय से साफ नहीं की गई हैं, तो सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षण आवश्यक है। आपका स्वास्थ्य और सुरक्षा इस पर निर्भर करता है! यह उन लोगों के लिए विशेष रूप से महत्वपूर्ण है जो कुएं का उपयोग करते हैं। - जमीन, यह सीधे मिट्टी से संपर्क करता है, जिसका अर्थ है कि यह आपको नाइट्रेट्स, भारी धातुओं, अमोनिया और निश्चित रूप से हानिकारक कार्बनिक पदार्थों के साथ "पीने" की धमकी देता है जो कृषि खेतों या भूमि की गतिविधियों के परिणामस्वरूप मिट्टी में प्रवेश करते हैं।

तालिका 1 पीने के पानी के लिए वर्तमान मानक SanPiN 2.1.4.1074-01 के सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेतक दिखाती है:

तालिका 1. पीने के पानी के लिए सूक्ष्मजीवविज्ञानी मानक

मानक सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण

मॉस्को स्टेट यूनिवर्सिटी में पीने के पानी के मानक सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में तीन संकेतकों का निर्धारण शामिल है: कुल माइक्रोबियल संख्या, कुल कॉलीफॉर्म और थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया की संख्या।

उन्नत सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण

पानी के एक विस्तारित सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में पांच संकेतकों का विश्लेषण शामिल है: कुल माइक्रोबियल गिनती, कुल कोलीफॉर्म बैक्टीरिया गिनती, थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया गिनती, कोलीफेज टिटर और सल्फाइट-कम करने वाले बैक्टीरिया के बीजाणुओं की सामग्री।

सतही जल निकायों (तालाबों, नदियों, तालों) का सूक्ष्मजैविक विश्लेषण

अक्सर हमारे स्थलों पर या आस-पास पानी के पिंड होते हैं, जहां हम और हमारे बच्चे मजे से समय बिताना पसंद करते हैं। बेशक, इन जलाशयों का पानी पीने योग्य नहीं है, लेकिन मनुष्यों के लिए इसकी सुरक्षा के साथ-साथ पीने को भी नियंत्रित किया जाता है। तालिका 2 सतही जल संरक्षण के लिए स्वच्छ आवश्यकताओं के लिए वर्तमान मानक के सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेतक प्रस्तुत करती है (SanPiN 2.1.5.980-00)

तालिका 2. मनोरंजक जल उपयोग के साथ-साथ आबादी वाले क्षेत्रों की सीमाओं के भीतर सूक्ष्मजीवविज्ञानी मानक

मानक सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण (सतह जल)

पीने के लिए अभिप्रेत नहीं पानी के सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण में दो संकेतकों की संख्या का निर्धारण शामिल है: कुल कोलीफॉर्म और कोलीफॉर्म थर्मोटोलरेंट बैक्टीरिया।

उन्नत सूक्ष्मजीवविज्ञानी विश्लेषण (सतह जल):

दो मुख्य संकेतकों के अलावा, हम सामग्री के लिए एक अतिरिक्त विश्लेषण करने का प्रस्ताव करते हैं: कोलिफेज, अवसरवादी खमीर और माइक्रोमाइसेट्स (अवसरवादी रोगों के लगातार उपग्रह) और जलाशय का आत्म-शुद्धिकरण सूचकांक।

जीनस साल्मोनेला और जीनस एंटरोकोकस के बैक्टीरिया का निर्धारण

SanPiN 2.1.5.980-00 मानकों की एक महत्वपूर्ण अधिकता के साथ-साथ जलाशय के संभावित मल संदूषण के साथ, हम आंतों के संक्रमण (जीनस साल्मोनेला और एंटरोकोकस) के रोगजनकों की उपस्थिति के लिए विश्लेषण करने का प्रस्ताव करते हैं।

शब्दकोष

कुल माइक्रोबियल बहुतायत (टीएमसी)

विधि पीने के पानी में मेसोफिलिक एरोबिक और फैकल्टी एनारोबिक सूक्ष्मजीवों (एफएमसी) की कुल संख्या निर्धारित करती है, जो 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर पोषक तत्व अगर पर कॉलोनियां बनाने में सक्षम है, जो 2 गुना वृद्धि के साथ दिखाई देती है। यह संकेतक संभावित बैक्टीरिया की पहचान करता है जो मानव स्वास्थ्य को नुकसान पहुंचा सकते हैं।

आम कोलीफॉर्म बैक्टीरिया (टीसीबी)

सामान्य कोलीफॉर्म बैक्टीरिया (सीबीसी) ग्राम-नकारात्मक, ऑक्सीडेज-नकारात्मक, गैर-बीजाणु-गठन छड़ें हैं जो अंतर लैक्टोज मीडिया पर बढ़ सकती हैं, लैक्टोज को एसिड, एल्डिहाइड और गैस के लिए (37 + 1) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर (37 + 1) डिग्री सेल्सियस पर किण्वित कर सकती हैं। 24-48) घंटे। इस समूह के कई प्रतिनिधि पेट के सामान्य माइक्रोफ्लोरा के सूक्ष्मजीव हैं, इसलिए सूक्ष्मजीवों के इस समूह की अधिकता संभावित मानवजनित (फेकल सहित) जल प्रदूषण का संकेत दे सकती है।

थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया (टीसीबी)

थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया (टीसीबी) सामान्य कॉलीफॉर्म बैक्टीरिया में से हैं, उनकी सभी विशेषताएं हैं और इसके अलावा, 24 घंटे के लिए (44 ± 0.5) डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एसिड, एल्डिहाइड और गैस के लिए लैक्टोज को किण्वित करने में सक्षम हैं। OKB की तरह, वे एक संकेतक समूह हैं, लेकिन पर्यावरण में अधिक स्थिर हैं: यही कारण है कि पानी में सूक्ष्मजीवों के इस समूह का पता लगाना मानव अपशिष्ट उत्पादों के साथ इसके स्पष्ट प्रदूषण का संकेत दे सकता है।

कोलिफेज

मानक विधि (एमयूके 4.2.1018-01) द्वारा निर्धारित कोलीफेज, एस्चेरिचिया कोलाई वायरस हैं और महामारी विज्ञानियों द्वारा एस्चेरिचिया कोलाई समूह के सूक्ष्मजीवों द्वारा जल प्रदूषण का निर्धारण करने में एक अतिरिक्त, और कभी-कभी अधिक संवेदनशील, विधि के रूप में माना जाता है। विषाणु कण, और विशेष रूप से कोलिफेज, अपने मेजबान बैक्टीरिया की तुलना में पर्यावरण के प्रति अधिक प्रतिरोधी होते हैं। इस संबंध में, कोलिफेज की उपस्थिति जल स्रोत के पुराने मल संदूषण के एक विश्वसनीय मार्कर के रूप में काम कर सकती है। पानी में कोलिफेज की सामग्री और मनुष्यों के लिए खतरनाक एंटरोवायरस के बीच एक सीधा संबंध दिखाया गया था, इसलिए पानी में कोलिफेज की उपस्थिति स्रोत के वायरल संक्रमण का संकेत दे सकती है। वर्तमान नियामक दस्तावेज (SanPiN 2.1.4.1074-01) का तात्पर्य 100 मिलीलीटर पानी में कोलिफेज की अनुपस्थिति से है।

सल्फाइट को कम करने वाले क्लोस्ट्रीडिया के बीजाणु

सल्फाइट को कम करने वाले क्लॉस्ट्रिडिया बीजाणु बनाने वाले अवायवीय छड़ के आकार के सूक्ष्मजीव हैं, जो एक जलाशय के मल प्रदूषण का एक अतिरिक्त सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेतक हैं। अपेक्षाकृत अस्थिर कोलीफॉर्म और थर्मोटोलरेंट कोलीफॉर्म बैक्टीरिया के विपरीत, क्लोस्ट्रीडियम बीजाणु लंबे समय तक जल निकायों में बने रह सकते हैं। क्लोस्ट्रीडिया मनुष्यों और घरेलू पशुओं की आंतों में पाए जाते हैं, हालांकि, अगर बड़ी मात्रा में पानी के साथ निगला जाता है, तो वे फूड पॉइज़निंग का कारण बन सकते हैं। सल्फाइट को कम करने वाले क्लोस्ट्रीडिया में क्लोस्ट्रीडियम शामिल हैं जो मनुष्यों के लिए खतरनाक हैं (क्लोस्ट्रीडियम बोटुलिनम, क्लोस्ट्रीडियम परफिरिंगेंस, क्लोस्ट्रीडियम टेटानी), जो गंभीर बीमारियों का कारण बनते हैं। वर्तमान मानक (SanPiN 2.1.4.1074-01) के अनुसार, क्लोस्ट्रीडिया बीजाणु 20 मिलीलीटर पानी में अनुपस्थित होना चाहिए।

अवसरवादी यीस्ट और माइक्रोमाइसेट्स

सशर्त रूप से रोगजनक यीस्ट और माइक्रोमाइसेट्स (मोल्ड्स) में फफूंद जीवों का एक बड़ा विषम समूह शामिल होता है जो 37 डिग्री सेल्सियस पर सैप्रोट्रोफिक रूप से विकसित हो सकता है। इसमें कैंडिडा एल्बिकैंस और क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स जैसे प्रतिनिधि शामिल हैं, जो मानव अवसरवादी रोगों में एक लगातार कारक हैं, जिससे कैंडिडिआसिस (फंगल त्वचा रोग), थ्रश, और इसी तरह होते हैं। अन्य माइक्रोमाइसेट जीव (क्लैडोस्पोरियम क्लैडोस्पोरियोइड्स, एस्परगिलसनिगर) एलर्जी प्रतिक्रियाओं के सक्रिय संवेदीकरणकर्ता हो सकते हैं, और कभी-कभी स्वयं एलर्जी भी हो सकते हैं। रूसी संघ में, पानी में मोल्ड और खमीर जीवों के लिए पानी मानकीकृत नहीं है।

स्व-सफाई सूचकांक का निर्धारण (एमयूके 4.2.1884-04 से)

मनोरंजन क्षेत्रों में जलाशयों के पानी में सूक्ष्मजीवों की कुल संख्या का मानकीकरण नहीं किया जाता है, क्योंकि सूक्ष्मजीवों के इस समूह का स्तर काफी हद तक प्रत्येक वस्तु, मौसम आदि की प्राकृतिक विशेषताओं पर निर्भर करता है।

हालांकि, जलाशयों के पानी में पानी की आपूर्ति का एक नया स्रोत या मनोरंजन की जगह चुनते समय, कुल माइक्रोबियल आबादी का निर्धारण करना अतिरिक्त रूप से आवश्यक है, जो बढ़ती है:

• 24 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर;
• 22 डिग्री सेल्सियस पर 72 घंटे के लिए।

यह मान लिया है कि:

1. 37 डिग्री सेल्सियस पर टीएमपी को ज्यादातर एलोचथोनस माइक्रोफ्लोरा द्वारा दर्शाया जाता है (फेकल प्रदूषण सहित मानवजनित प्रदूषण के परिणामस्वरूप जलाशय में पेश किया जाता है);
2. 20-22 डिग्री सेल्सियस पर टीएमपी का प्रतिनिधित्व अलौकिक, आदिवासी माइक्रोफ्लोरा (प्राकृतिक, इस जलाशय की विशेषता) के अलावा किया जाता है।

सूक्ष्मजीवों के इन समूहों की संख्या का अनुपात आत्म-शुद्धि प्रक्रिया की तीव्रता का न्याय करना संभव बनाता है। स्व-सफाई प्रक्रिया के अंत में, OMC गुणांक 22 ° C / OMC 37 ° C होता है। घरेलू सीवेज द्वारा प्रदूषण के स्थानों में, दोनों समूहों के संख्यात्मक मान करीब हैं।

संकेतक जल निकायों की स्वच्छता स्थिति, प्रदूषण के स्रोतों और आत्म-शुद्धि प्रक्रियाओं के बारे में अतिरिक्त जानकारी प्रदान करता है।