Batas Kuantitas
"...Limit of quantitation (LOQ) (dalam definisi analitis): konsentrasi terendah atau analit dalam analit yang dapat diukur dengan tingkat akurasi dan kepercayaan yang dapat diterima, seperti yang dapat ditunjukkan oleh pengujian laboratorium kolaboratif atau lainnya yang sesuai validasi metode..."
Sumber:
"PRODUK MAKANAN. METODE ANALISIS UNTUK DETEKSI ORGANISMA YANG DIUBAH SECARA GENETIK DAN PRODUK YANG BERASAL DARINYA. PERSYARATAN DAN DEFINISI UMUM. GOST R 53214-2008 (ISO 24276:2006)"
(disetujui oleh Ordo Rostekhregulirovanie tertanggal 25 Desember 2008 N 708-st)
Terminologi resmi. Akademik.ru. 2012 .
Lihat apa "Batas Kuantitas" di kamus lain:
batas kuantitasi- 3,7 batas kuantifikasi [ LOQ ] perkiraan sepuluh kali lipat dari standar deviasi massa sampel Catatan Nilai LOQ digunakan sebagai nilai ambang batas dimana massa ... ...
batas pengulangan- 3,7 batas pengulangan Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
batas reproduktifitas- 2.9 nilai batas reproduktifitas di bawahnya, dengan probabilitas 95%, terletak nilai absolut dari perbedaan antara dua hasil pengujian yang diperoleh dalam kondisi reproduktifitas Sumber … Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
batas pengulangan (konvergensi) 3.11 nilai batas pengulangan yang, dengan tingkat kepercayaan 95%, tidak dilampaui oleh nilai absolut dari perbedaan antara hasil dua pengukuran (atau pengujian) yang diperoleh dalam kondisi pengulangan ... Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
Batas presisi intralaboratorium- 3.11 batas presisi dalam laboratorium perbedaan absolut yang diperbolehkan untuk probabilitas yang diasumsikan P antara dua hasil analisis yang diperoleh dalam kondisi presisi dalam laboratorium. Sumber … Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
batas reproduktifitas R- 2.19.2 batas reproduktifitas R 2.19.1, 2.19.2 (Edisi diubah, judul = Perubahan No. 1, IUS 12 2002). ... ... Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
MI 2881-2004: Rekomendasi. GSI. Metode analisis kimia kuantitatif. Prosedur untuk memeriksa keberterimaan hasil analisis- Terminologi MI 2881 2004: Rekomendasi. GSI. Metode analisis kimia kuantitatif. Tata cara pemeriksaan keberterimaan hasil analisis: 3.17 perbedaan kritis: Selisih mutlak yang diperbolehkan untuk probabilitas diterima 95% antara ... ... Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
GOST R 50779.11-2000: Metode statistik. Kontrol kualitas statistik. Istilah dan Definisi- Terminologi GOST R 50779.11 2000: Metode statistik. Kontrol kualitas statistik. Istilah dan definisi dokumen asli: 3.4.3 (atas dan bawah) batas peraturan Batas pada peta kendali, di atasnya batas atas, ... ... Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
GOST R 50779.10-2000: Metode statistik. Probabilitas dan dasar statistik. Istilah dan Definisi- Terminologi GOST R 50779.10 2000: Metode statistik. Probabilitas dan dasar statistik. Istilah dan definisi dokumen asli : 2.3. (umum) set Himpunan semua unit yang dipertimbangkan. Catatan Untuk variabel acak ... ... Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
RMG 61-2003: Sistem negara untuk memastikan keseragaman pengukuran. Indikator akurasi, kebenaran, ketepatan metode analisis kimia kuantitatif. Metode penilaian- Terminologi RMG 61 2003: Sistem negara untuk memastikan keseragaman pengukuran. Indikator akurasi, kebenaran, ketepatan metode analisis kimia kuantitatif. Metode evaluasi: 3.12 presisi dalam laboratorium: Presisi … Buku referensi kamus istilah dokumentasi normatif dan teknis
PAPAN
KEPUTUSAN
Sesuai dengan Pasal 30 Perjanjian Uni Ekonomi Eurasia tertanggal 29 Mei 2014 dan paragraf 2 Pasal 3 Perjanjian tentang Prinsip dan Aturan yang Seragam untuk Peredaran Obat-obatan di dalam Uni Ekonomi Eurasia tertanggal 23 Desember 2014, Collegium dari Komisi Ekonomi Eurasia
diputuskan:
1. Menyetujui terlampir Pedoman Validasi Metode Analisis Pengujian Produk Obat.
2. Keputusan ini mulai berlaku setelah 6 bulan sejak tanggal diumumkan secara resmi.
Ketua Dewan
Komisi Ekonomi Eurasia
T. Sargsyan
Pedoman Validasi Metode Analisis untuk Pengujian Produk Obat
DISETUJUI
keputusan dewan
Komisi Ekonomi Eurasia
tanggal 17 Juli 2018 N 113
I. Ketentuan Umum
1. Panduan ini menetapkan aturan untuk validasi metode analitis untuk pengujian produk obat, serta daftar karakteristik yang akan dinilai selama validasi metode ini dan termasuk dalam berkas pendaftaran yang diserahkan ke badan resmi Negara Anggota Uni Ekonomi Eurasia (selanjutnya, masing-masing, Negara Anggota, Serikat).
2. Tujuan validasi metode analisis untuk pengujian produk obat adalah untuk mendokumentasikan kesesuaiannya dengan tujuan yang dimaksudkan.
II. definisi
3. Untuk tujuan Panduan ini, istilah yang digunakan berarti sebagai berikut:
"prosedur analitis" (prosedur analitis) - metodologi untuk menguji produk obat, yang mencakup deskripsi rinci tentang urutan tindakan yang diperlukan untuk melakukan uji analitis (termasuk deskripsi persiapan sampel uji, bahan referensi, reagen, penggunaan peralatan, konstruksi kurva kalibrasi, rumus perhitungan yang digunakan, dll.);
"reproduktifitas" - properti yang mencirikan presisi dalam pengujian antar laboratorium;
"rentang aplikasi (area analitik)" (rentang) - interval antara konsentrasi (jumlah) tertinggi dan terendah dari analit dalam sampel (termasuk konsentrasi ini), di mana metode analitik terbukti memiliki tingkat presisi yang dapat diterima , akurasi dan linearitas;
"linearitas" (linearitas) - ketergantungan proporsional langsung dari sinyal analitik pada konsentrasi (jumlah) analit dalam sampel dalam rentang aplikasi (area analitik) teknik;
"penemuan (pemulihan)" (pemulihan) - rasio antara nilai rata-rata yang diperoleh dan nilai (referensi) yang sebenarnya, dengan mempertimbangkan interval kepercayaan yang sesuai;
"pengulangan (presisi intra-assay)" - ketepatan metode ketika pengujian berulang dilakukan di bawah kondisi operasi yang sama (misalnya, oleh analis atau kelompok analis yang sama, pada peralatan yang sama, dengan reagen yang sama dan sama , dll.) untuk waktu yang singkat;
"kebenaran" (akurasi, kebenaran) - kedekatan antara nilai benar (referensi) yang diterima dan nilai yang diterima, yang dinyatakan oleh nilai keterbukaan;
"batas penentuan kuantitatif" (batas kuantitatif) - jumlah terkecil zat dalam sampel yang dapat ditentukan secara kuantitatif dengan presisi dan akurasi yang sesuai;
"batas deteksi" - jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi, tetapi tidak harus diukur secara akurat;
"presisi" (presisi) - ekspresi kedekatan (tingkat penyebaran) hasil (nilai) antara serangkaian pengukuran yang dilakukan pada sejumlah sampel yang diambil dari sampel homogen yang sama, di bawah kondisi yang ditentukan oleh prosedur;
"ketepatan menengah (intralaboratorium)" (presisi menengah) - efek variasi dalam laboratorium (hari yang berbeda, analis yang berbeda, peralatan yang berbeda, seri (batch) reagen yang berbeda, dll.) pada hasil pengujian sampel identik yang diambil dari seri yang sama;
"spesifisitas" (spesifisitas) - kemampuan teknik analisis untuk secara jelas mengevaluasi zat yang ditentukan, terlepas dari zat lain (pengotor, produk degradasi, eksipien, matriks (lingkungan), dll.) yang ada dalam sampel uji;
"stabilitas (kekokohan)" (kekokohan) - kemampuan metode analitik untuk tahan terhadap pengaruh perubahan kecil yang ditentukan dalam kondisi pengujian, yang menunjukkan keandalannya dalam penggunaan normal (standar).
AKU AKU AKU. Jenis metode analisis yang akan divalidasi
4. Panduan ini mencakup pendekatan validasi untuk 4 jenis metode analisis yang paling umum:
a) uji identifikasi (keaslian);
b) pengujian untuk menentukan kandungan kuantitatif pengotor (tes kuantitatif untuk kandungan pengotor);
c) pengujian untuk menentukan batas pengotor dalam sampel (pengujian batas untuk pengotor kontrol);
d) uji kuantitatif (untuk kandungan atau aktivitas) (uji kuantitatif dari bagian aktif) untuk menentukan bagian aktif dari molekul zat aktif dalam sampel uji.
5. Semua metode analisis yang digunakan untuk pengendalian mutu produk obat harus divalidasi. Panduan ini tidak mencakup validasi metode analitis untuk jenis pengujian yang tidak termasuk dalam paragraf 4 Panduan ini (misalnya, pengujian untuk pelarutan atau penentuan ukuran partikel (dispersi) bahan farmasi, dll.).
6. Pengujian untuk identifikasi (keaslian) biasanya terdiri dari membandingkan sifat-sifat (misalnya karakteristik spektral, perilaku kromatografi, reaktivitas, dll.) dari sampel uji dan sampel referensi.
7. Pengujian untuk mengetahui kandungan kuantitatif pengotor dan pengujian untuk menentukan batas kandungan pengotor dalam sampel ditujukan untuk gambaran yang benar tentang karakteristik kemurnian sampel. Persyaratan validasi metode untuk penentuan kuantitatif pengotor berbeda dengan persyaratan validasi metode untuk menentukan kandungan pembatas pengotor dalam sampel.
8. Metode pengujian kuantitatif bertujuan untuk mengukur kandungan analit dalam sampel uji. Dalam Pedoman ini, kuantifikasi mengacu pada pengukuran kuantitatif komponen utama bahan farmasi. Parameter validasi serupa berlaku untuk pengujian zat aktif atau komponen lain dari produk obat. Parameter kuantisasi validasi dapat digunakan dalam prosedur analitis lainnya (misalnya pengujian disolusi).
Tujuan metode analisis harus didefinisikan dengan jelas, karena hal ini menentukan pilihan karakteristik validasi yang harus dievaluasi selama validasi.
9. Karakteristik validasi tipikal berikut dari metode analitik harus dievaluasi:
a) ketepatan (accuracy (kebenaran));
b) presisi (presisi):
pengulangan;
presisi menengah (intralaboratory) (presisi menengah);
c) kekhususan;
d) batas deteksi;
e) batas kuantitatif;
f) linearitas;
g) rentang aplikasi (area analitis) (rentang).
10. Karakteristik validasi yang paling penting untuk validasi berbagai jenis metode analisis dirangkum dalam tabel.
Meja. Karakteristik validasi untuk validasi berbagai jenis metode analisis
Validasi | Jenis teknik analisis |
||||
ciri | tes untuk | tes pengotor | tes kuantitatif |
||
(keaslian) | kuantitatif | batasi konten | pembubaran (pengukuran saja), konten (aktivitas) |
||
Benar | |||||
presisi | |||||
pengulangan | |||||
presisi menengah | |||||
Kekhususan** | |||||
Batas deteksi | |||||
Batas Kuantitas | |||||
Linearitas | |||||
Rentang aplikasi | |||||
________________
* Jika reproduktifitas ditentukan, penentuan presisi menengah tidak diperlukan.
** Kekhususan yang tidak memadai dari satu metode analitik dapat dikompensasikan dengan menggunakan satu atau lebih metode analitik tambahan.
*** Mungkin diperlukan dalam beberapa kasus (misalnya, ketika batas deteksi dan batas normalisasi konten pengotor yang ditentukan mendekati).
Catatan. "-" - karakteristik tidak dievaluasi, "+" - karakteristik dievaluasi.
Daftar ini harus dianggap sebagai salah satu yang khas untuk validasi metode analitis. Mungkin ada pengecualian yang memerlukan pembenaran terpisah oleh produsen produk obat. Karakteristik metode analisis seperti stabilitas (kekokohan) tidak tercantum dalam tabel, tetapi harus dipertimbangkan pada tahap yang tepat dalam pengembangan metode analisis.
Validasi ulang (validasi ulang) mungkin diperlukan dalam kasus berikut (namun tidak terbatas pada):
perubahan skema sintesis zat farmasi;
perubahan komposisi produk obat;
perubahan dalam metodologi analitis.
Validasi ulang tidak dilakukan jika pabrikan memberikan justifikasi yang sesuai. Tingkat validasi ulang tergantung pada sifat perubahan yang dibuat.
IV. Metodologi untuk validasi metode analitis
1. Persyaratan umum untuk metodologi validasi metode analitik
11. Bagian ini menguraikan karakteristik yang harus dipertimbangkan dalam validasi metode analisis dan memberikan beberapa pendekatan dan rekomendasi untuk menetapkan karakteristik validasi yang berbeda dari setiap metode analisis.
12. Dalam beberapa kasus (misalnya, ketika membuktikan spesifisitas), kombinasi beberapa metode analisis dapat digunakan untuk memastikan kualitas bahan farmasi atau produk obat.
13. Semua data relevan yang dikumpulkan selama validasi dan rumus yang digunakan untuk menghitung kinerja validasi harus disajikan dan dianalisis.
14. Pendekatan selain yang diuraikan dalam Panduan ini dapat digunakan. Pilihan prosedur dan protokol validasi menjadi tanggung jawab pemohon. Dalam hal ini, tujuan utama validasi suatu metode analitik adalah untuk memastikan kesesuaian metode tersebut dengan tujuan yang dimaksudkan. Karena kerumitannya, pendekatan metode analisis untuk produk biologi dan bioteknologi mungkin berbeda dari yang dijelaskan dalam Panduan ini.
15. Sepanjang studi kinerja validasi, bahan referensi dengan karakteristik yang diketahui dan terdokumentasi harus digunakan. Tingkat kemurnian bahan referensi yang diperlukan tergantung pada tujuan penggunaan.
16. Berbagai karakteristik validasi dibahas dalam subbagian terpisah dari bagian ini. Struktur bagian ini mencerminkan proses pengembangan dan evaluasi metodologi analitis.
17. Pekerjaan eksperimental harus dirancang sedemikian rupa sehingga karakteristik validasi yang relevan dipelajari secara bersamaan, memberikan data yang dapat diandalkan tentang kemampuan metode analitik (misalnya, spesifisitas, linieritas, jangkauan aplikasi, kebenaran dan presisi).
2. Kekhususan
18. Studi spesifisitas harus dilakukan selama validasi uji untuk identifikasi, pengotor dan kuantisasi. Prosedur validasi kekhususan tergantung pada tujuan penggunaan metode analitis.
19. Bagaimana spesifisitas dapat dikonfirmasi tergantung pada tujuan metode analisis yang dimaksudkan. Tidak semua kasus dapat dipastikan bahwa metode analisis spesifik untuk analit ini (selektivitas lengkap). Dalam hal ini, disarankan untuk menggunakan kombinasi 2 atau lebih metode analisis.
Kurangnya kekhususan satu metode analisis dapat dikompensasikan dengan penggunaan satu atau lebih metode analisis tambahan.
20. Kekhususan untuk berbagai jenis pengujian berarti sebagai berikut:
a) saat menguji identifikasi - konfirmasi bahwa metode tersebut memungkinkan Anda mengidentifikasi secara tepat zat yang akan ditentukan;
b) ketika menguji pengotor, konfirmasi bahwa metode tersebut dengan benar mengidentifikasi pengotor dalam sampel (misalnya, pengujian untuk senyawa terkait, logam berat, pelarut residu, dll.);
c) dalam tes kuantitatif - konfirmasi bahwa metode ini memungkinkan Anda untuk menentukan konten atau aktivitas zat yang ditentukan dalam sampel.
Identifikasi
21. Uji identifikasi yang memuaskan harus dapat membedakan antara senyawa-senyawa yang secara struktural berkaitan erat yang mungkin ada dalam sampel. Selektivitas prosedur analitis dapat dikonfirmasi dengan memperoleh hasil positif (mungkin dengan membandingkan dengan standar yang diketahui) untuk sampel yang mengandung analit dan hasil negatif untuk sampel yang tidak mengandung analit.
22. Untuk memastikan tidak adanya hasil positif palsu, uji identifikasi dapat dilakukan untuk zat dengan struktur serupa atau zat yang terkait dengan analit.
23. Pilihan zat yang berpotensi mengganggu harus dibenarkan.
Kuantifikasi dan pengujian untuk pengotor
24. Ketika mengkonfirmasi kekhususan untuk prosedur analitis menggunakan metode pemisahan kromatografi, kromatogram yang representatif harus dilengkapi dengan identifikasi yang tepat dari masing-masing komponen. Pendekatan serupa harus digunakan untuk teknik berbasis pemisahan lainnya.
25. Pemisahan kritis dalam kromatografi harus dipelajari pada tingkat yang sesuai. Dalam kasus pemisahan kritis, nilai resolusi dari 2 komponen yang paling mendekati eluting harus ditetapkan.
26. Saat menggunakan metode kuantifikasi non-spesifik, metode analisis tambahan harus digunakan dan kekhususan seluruh rangkaian metode harus dikonfirmasi. Misalnya, jika penentuan kuantitatif dilakukan dengan metode titrimetri selama pelepasan zat farmasi, dapat dilengkapi dengan uji yang sesuai untuk pengotor.
27. Pendekatannya serupa untuk kuantifikasi dan pengujian pengotor.
Kehadiran sampel pengotor
28. Dengan adanya sampel pengotor, penentuan kekhususan prosedur analitis adalah sebagai berikut:
a) ketika mengukur, perlu untuk mengkonfirmasi selektivitas penentuan suatu zat dengan adanya pengotor dan (atau) komponen lain dari sampel. Dalam prakteknya, hal ini dilakukan dengan menambahkan pengotor dan (atau) eksipien ke sampel (bahan farmasi atau produk obat) dalam jumlah yang sesuai dan jika ada bukti bahwa mereka tidak mempengaruhi hasil penentuan kuantitatif zat aktif;
b) ketika menguji pengotor, spesifisitas dapat ditentukan dengan menambahkan sejumlah pengotor ke bahan farmasi atau produk obat dan jika ada bukti pemisahan pengotor ini satu sama lain dan (atau) dari komponen lain dari sampel.
Tidak ada sampel kotoran
29. Jika bahan acuan untuk pengotor atau produk degradasi tidak tersedia, spesifisitas dapat dikonfirmasi dengan membandingkan hasil uji sampel yang mengandung pengotor atau produk degradasi dengan hasil metode lain yang divalidasi (misalnya, farmakope atau analisis tervalidasi lainnya (independen) metode). Jika sesuai, standar referensi pengotor harus mencakup sampel yang disimpan di bawah kondisi tegangan tertentu (cahaya, panas, kelembaban, hidrolisis asam (basa) dan oksidasi).
30. Dalam hal penentuan kuantitatif, 2 hasil harus dibandingkan.
31. Dalam hal uji pengotor, profil pengotor harus dibandingkan.
32. Untuk membuktikan bahwa puncak analit hanya sesuai dengan satu komponen, disarankan untuk melakukan studi kemurnian puncak (misalnya, penggunaan deteksi susunan dioda, spektrometri massa).
3. Linieritas
33. Hubungan linier harus dievaluasi pada seluruh penerapan teknik analisis. Ini dapat dikonfirmasi secara langsung pada zat farmasi (dengan pengenceran larutan standar utama) dan (atau) pada sampel terpisah dari campuran buatan (model) komponen obat menggunakan metode yang diusulkan. Aspek yang terakhir dapat dipelajari dalam rangka menentukan jangkauan aplikasi (area analitis) dari metodologi.
34. Linearitas dinilai secara visual dengan memplot sinyal analitis sebagai fungsi dari konsentrasi atau jumlah analit. Jika terdapat hubungan linier yang jelas, maka hasil yang diperoleh harus diolah dengan metode statistik yang sesuai (misalnya dengan menghitung garis regresi menggunakan metode kuadrat terkecil). Transformasi matematis dari hasil pengujian mungkin diperlukan untuk mendapatkan linearitas antara hasil kuantisasi dan konsentrasi sampel sebelum analisis regresi. Hasil analisis garis regresi dapat digunakan untuk penilaian matematis derajat linieritas.
35. Jika tidak ada linearitas, data uji harus ditransformasikan secara matematis sebelum analisis regresi.
36. Untuk mengkonfirmasi linearitas, koefisien korelasi atau koefisien determinasi, suku konstan dari regresi linier, tangen kemiringan garis regresi dan jumlah sisa deviasi kuadrat harus ditentukan dan disajikan, dan grafik dengan semua eksperimen data dilampirkan.
37. Jika linearitas tidak teramati pada semua jenis transformasi matematis (misalnya, saat memvalidasi metode immunoassay), sinyal analitis harus dijelaskan menggunakan fungsi konsentrasi (jumlah) analit yang sesuai dalam sampel.
V. Rentang Aplikasi (Area Analitis)
39. Jangkauan penerapan teknik analisis tergantung pada tujuannya dan ditentukan dalam studi linieritas. Dalam rentang aplikasi, teknik harus memberikan linearitas, kebenaran dan presisi yang diperlukan.
40. Rentang penerapan (area analitik) metode analitik berikut ini harus dianggap sebagai batas minimum yang diizinkan:
a) untuk penentuan kuantitatif zat aktif dalam zat farmasi atau produk obat - dari konsentrasi (kandungan) 80 persen ke konsentrasi (kandungan) 120 persen dari konsentrasi nominal (kandungan);
b) untuk keseragaman dosis - dari konsentrasi (kandungan) 70 persen ke konsentrasi (kandungan) 130 persen, kecuali rentang yang lebih luas dibenarkan untuk produk obat tergantung pada bentuk sediaan (misalnya, inhaler dosis terukur);
c) untuk uji disolusi, ±20 persen (mutlak) dari rentang aplikasi pengenal. Misalnya, jika spesifikasi untuk produk rilis yang dimodifikasi mencakup kisaran dari 20 persen dalam satu jam pertama hingga 90 persen dari konten yang diklaim dalam 24 jam, rentang penggunaan yang divalidasi harus 0 hingga 110 persen dari konten yang diklaim;
d) untuk penentuan pengotor - dari batas deteksi pengotor hingga 120% dari nilai yang ditentukan dalam spesifikasi;
e) untuk pengotor yang sangat kuat atau memiliki efek farmakologis toksik atau tak terduga, batas deteksi dan batas kuantitasi harus sepadan dengan tingkat di mana pengotor ini harus dikontrol. Untuk memvalidasi metode pengujian pengotor yang digunakan selama pengembangan, mungkin perlu untuk mengatur area analitis mendekati batas yang diharapkan (mungkin);
f) jika kuantisasi dan kemurnian dipelajari secara simultan dengan pengujian yang sama dan hanya menggunakan standar 100%, hubungan tersebut harus linier pada seluruh rentang penerapan metode analisis dari ambang pelaporan untuk pengotor (sesuai dengan aturan untuk mempelajari pengotor dalam produk obat dan menetapkan persyaratannya dalam spesifikasi yang disetujui oleh Komisi Ekonomi Eurasia) hingga kandungan 120 persen yang ditentukan dalam spesifikasi untuk penentuan kuantitatif.
VI. Benar
41. Kebenaran harus ditetapkan untuk seluruh penerapan prosedur analitis.
1. Penentuan kuantitatif zat aktif farmasi
zat farmasi
42. Beberapa metode untuk menilai kebenaran dapat digunakan:
penerapan teknik analisis pada zat yang dianalisis dengan tingkat kemurnian yang diketahui (misalnya, pada bahan referensi);
perbandingan hasil analisis yang diperoleh dengan menggunakan metode analisis yang divalidasi, dan hasil yang diperoleh dengan menggunakan metode yang diketahui kebenarannya, dan (atau) metode independen.
Kesimpulan tentang kebenaran dapat dibuat setelah menetapkan presisi, linieritas dan spesifisitas.
produk obat
43. Beberapa metode untuk menilai kebenaran dapat digunakan:
penerapan teknik analisis pada campuran (model) buatan dari komponen produk obat, yang ditambahkan sejumlah analit yang diketahui sebelumnya;
dengan tidak adanya sampel dari semua komponen produk obat, dimungkinkan untuk menambahkan jumlah yang diketahui sebelumnya dari bahan farmasi ke produk obat atau membandingkan hasil yang diperoleh dengan menggunakan metode lain, yang kebenarannya diketahui, dan (atau) sebuah metode independen.
Kesimpulan tentang kebenaran dapat dibuat setelah menentukan presisi, linieritas dan spesifisitas.
2. Kuantifikasi pengotor
44. Akurasi ditentukan pada sampel (bahan farmasi dan produk obat) yang telah ditambahkan sejumlah pengotor yang diketahui.
45. Dengan tidak adanya sampel pengotor yang terdeteksi dan (atau) produk degradasi, dapat diterima untuk membandingkan hasil dengan hasil yang diperoleh dengan menggunakan metode independen. Penggunaan sinyal analitik dari zat aktif diperbolehkan.
46. Perlu untuk menunjukkan cara spesifik untuk mengekspresikan kandungan masing-masing pengotor atau jumlahnya (misalnya, dalam persen massa atau dalam persen sehubungan dengan luas puncak, tetapi dalam semua kasus sehubungan dengan analit utama) .
47. Ketepatan dinilai untuk setidaknya 9 penentuan dari 3 konsentrasi berbeda yang mencakup seluruh rentang aplikasi (yaitu 3 konsentrasi dan 3 ulangan untuk setiap konsentrasi). Definisi harus mencakup semua langkah metodologi.
48. Akurasi dinyatakan dengan nilai keterbukaan dalam persen berdasarkan hasil penentuan kuantitatif zat yang ditambahkan dalam jumlah yang diketahui ke sampel yang dianalisis, atau perbedaan antara nilai rata-rata yang diperoleh dan nilai (referensi) yang benar, dengan mempertimbangkan interval kepercayaan yang sesuai.
VII. presisi
49. Validasi pengujian untuk kuantisasi dan pengotor melibatkan penentuan presisi.
50. Presisi diatur pada 3 level: pengulangan, presisi menengah, dan reproduktifitas. Presisi harus ditetapkan dengan menggunakan sampel yang seragam dan otentik. Jika tidak mungkin untuk mendapatkan sampel yang homogen, diperbolehkan untuk menentukan presisi menggunakan sampel (model) yang disiapkan secara artifisial atau larutan sampel. Ketepatan prosedur analitis biasanya dinyatakan dalam varians, standar deviasi, atau koefisien variasi dari serangkaian pengukuran.
VIII. Pengulangan
51. Pengulangan ditentukan dengan melakukan setidaknya 9 penentuan konsentrasi dalam rentang penerapan teknik analisis (3 konsentrasi dan 3 pengulangan untuk setiap konsentrasi), atau setidaknya 6 penentuan konsentrasi untuk sampel dengan kandungan analit 100%.
IX. Ketepatan menengah (intralaboratorium)
52. Sejauh mana presisi antara ditetapkan tergantung pada kondisi di mana metode analitik digunakan. Pemohon harus menetapkan pengaruh faktor acak pada ketepatan prosedur analitis. Faktor (variabel) yang diselidiki secara umum adalah hari yang berbeda, analis, peralatan, dll. Tidak perlu mempelajari pengaruh-pengaruh ini secara terpisah. Saat mempelajari pengaruh berbagai faktor, lebih baik menggunakan desain eksperimen.
X. Reproduksibilitas
53. Reproduksibilitas mencirikan presisi dalam eksperimen antar laboratorium. Reproduksibilitas harus ditentukan dalam hal standarisasi metode analitis (misalnya, bila termasuk dalam Union Pharmacopoeia atau dalam farmakope Negara Anggota). Pencantuman data reproduktifitas dalam berkas pendaftaran tidak diperlukan.
XI. Representasi data
54. Untuk setiap jenis presisi, simpangan baku, simpangan baku relatif (koefisien variasi) dan selang kepercayaan harus dilaporkan.
XII. Batas deteksi
55. Pendekatan yang berbeda untuk menentukan batas deteksi dimungkinkan tergantung pada apakah tekniknya instrumental atau non-instrumental. Pendekatan lain juga dapat digunakan.
XIII. penilaian visual
56. Penilaian visual dapat digunakan untuk metode non-instrumental dan instrumental. Batas deteksi ditetapkan dengan menganalisis sampel dengan konsentrasi analit yang diketahui dan menentukan kandungan minimumnya yang dapat dideteksi secara andal.
XIV. Evaluasi batas deteksi dalam hal rasio signal-to-noise
57. Pendekatan ini hanya dapat diterapkan untuk prosedur analitis dimana kebisingan dasar diamati.
58. Penentuan rasio signal-to-noise dilakukan dengan membandingkan sinyal yang diperoleh dari sampel dengan konsentrasi rendah yang diketahui dengan sinyal yang diperoleh dari sampel kosong dan menetapkan konsentrasi minimum di mana analit dapat dideteksi secara andal. Untuk memperkirakan batas deteksi, rasio signal-to-noise 3:1 hingga 2:1 dianggap dapat diterima.
XV. Estimasi batas deteksi dari standar deviasi sinyal analitis dan kemiringan kurva kalibrasi
59. Batas deteksi (LO) dapat dinyatakan sebagai berikut:
di mana:
60. Nilai k dihitung dari kurva kalibrasi untuk analit. Menaksir s dapat dilakukan dengan beberapa cara:
b) menurut kurva kalibrasi. Hal ini diperlukan untuk menganalisis kurva kalibrasi yang dihasilkan, dibuat untuk sampel dengan kandungan analit yang mendekati batas deteksi. Simpangan baku residual dari garis regresi atau simpangan baku titik perpotongan dengan sumbu y (standar deviasi suku bebas regresi linier) dapat digunakan sebagai simpangan baku.
XVI. Representasi data
61. Perlu untuk menentukan batas deteksi dan metode penentuannya. Jika penentuan batas deteksi didasarkan pada penilaian visual atau penilaian rasio signal-to-noise, penyajian kromatogram yang relevan dianggap cukup untuk membenarkannya.
62. Jika nilai batas deteksi diperoleh dengan perhitungan atau ekstrapolasi, perkiraan harus dikonfirmasi dengan pengujian independen dari sejumlah sampel yang cukup dengan kandungan analit yang sesuai dengan batas deteksi atau mendekatinya.
XVII. Batas Kuantitas
63. Batas kuantisasi adalah karakteristik validasi yang diperlukan dari prosedur yang digunakan untuk menentukan rendahnya kandungan zat dalam sampel, khususnya untuk penentuan pengotor dan/atau produk degradasi.
64. Beberapa pendekatan untuk menentukan batas kuantisasi dimungkinkan, tergantung pada apakah tekniknya instrumental atau non-instrumental. Pendekatan lain diperbolehkan.
XVIII. penilaian visual
65. Penilaian visual dapat digunakan untuk metode non-instrumental dan instrumental.
66. Batas kuantisasi biasanya ditetapkan dengan menganalisis sampel dengan konsentrasi analit yang diketahui dan memperkirakan kandungan minimum di mana analit dapat diukur dengan akurasi dan presisi yang dapat diterima.
XIX. Evaluasi batas kuantifikasi dengan rasio signal-to-noise
67. Pendekatan ini hanya berlaku untuk metode pengukuran di mana kebisingan dasar diamati.
68. Penentuan rasio signal-to-noise dilakukan dengan membandingkan sinyal terukur yang diperoleh dari sampel dengan konsentrasi rendah analit yang diketahui, dengan sinyal yang diperoleh dari sampel kosong, dan menetapkan konsentrasi minimum di mana analit dapat terukur secara andal. Rasio signal-to-noise yang khas adalah 10:1.
XX. Evaluasi batas kuantisasi dari standar deviasi sinyal dan kemiringan kurva kalibrasi
69. Batas kuantifikasi (LOQ) dapat dinyatakan sebagai berikut:
di mana:
s adalah deviasi standar dari sinyal analitis;
k adalah tangen kemiringan kurva kalibrasi.
70. Nilai k dihitung dari kurva kalibrasi untuk analit. Menaksir s dapat dilakukan dengan beberapa cara:
a) sesuai dengan standar deviasi sampel kosong. Besarnya sinyal analitik diukur untuk jumlah sampel kosong yang cukup, dan standar deviasi nilainya dihitung;
b) menurut kurva kalibrasi. Hal ini diperlukan untuk menganalisis kurva kalibrasi yang dihasilkan, dibangun untuk sampel dengan kandungan analit mendekati batas penentuan kuantitatif. Simpangan baku residual dari garis regresi atau simpangan baku titik perpotongan dengan sumbu y (standar deviasi suku bebas regresi linier) dapat digunakan sebagai simpangan baku.
XXI. Representasi data
71. Perlu ditentukan batas kuantisasi dan metode penentuannya.
72. Batas kuantisasi selanjutnya harus dikonfirmasi dengan menganalisis jumlah sampel yang cukup yang mengandung analit yang sama dengan atau mendekati batas kuantisasi.
73. Pendekatan lain selain yang tercantum di atas mungkin dapat diterima.
XXII. Stabilitas (kekokohan)
74. Studi stabilitas (kekokohan) harus dilakukan pada tahap pengembangan, ruang lingkup studi tergantung pada metode analisis yang dipertimbangkan. Hal ini diperlukan untuk menunjukkan keandalan analisis di bawah variasi parameter (kondisi) metode yang disengaja.
75. Jika hasil pengukuran bergantung pada perubahan kondisi penerapan metode analitis, maka perlu untuk secara ketat mengontrol kepatuhan terhadap kondisi tersebut atau menetapkan tindakan pencegahan selama pengujian.
76. Untuk memastikan bahwa validitas metode analitik dipertahankan saat digunakan, salah satu konsekuensi dari studi ketahanan harus menetapkan serangkaian parameter kesesuaian sistem (misalnya uji resolusi).
77. Variasi parameter yang umum adalah:
stabilitas solusi yang digunakan dalam prosedur analitis;
waktu ekstraksi.
Variasi parameter untuk kromatografi cair adalah:
mengubah pH fase gerak;
perubahan komposisi fase gerak;
kolom berbeda (seri dan pemasok berbeda);
suhu;
kecepatan fase gerak (laju aliran).
Variasi parameter untuk kromatografi gas adalah:
kolom berbeda (seri dan pemasok berbeda);
suhu;
kecepatan gas pembawa.
XXIII. Penilaian Kesesuaian Sistem
78. Penilaian kesesuaian sistem merupakan bagian integral dari banyak prosedur analitis. Pengujian ini didasarkan pada konsep bahwa peralatan, elektronik, operasi analitik dan sampel yang dianalisis merupakan sistem yang lengkap dan harus dievaluasi seperti itu. Kriteria kesesuaian sistem harus ditetapkan untuk metode tertentu dan bergantung pada jenis metode analisis yang divalidasi. Informasi tambahan dapat diperoleh dari Union Pharmacopoeia atau farmakope Negara Anggota.
Teks elektronik dokumen
disiapkan oleh Kodeks JSC dan diverifikasi terhadap:
situs resmi
Persatuan Ekonomi Eurasia
www.eaeunion.org, 20.07.2018
Setiap metode instrumental dicirikan oleh tingkat kebisingan tertentu yang terkait dengan spesifikasi proses pengukuran. Oleh karena itu, selalu ada batas kelimpahan di bawahnya di mana suatu zat tidak dapat dideteksi secara andal sama sekali.
Batas deteksi C min , P - konten terendah di mana keberadaan komponen dengan probabilitas kepercayaan tertentu dapat dideteksi menggunakan metode ini.
Batas deteksi juga dapat diatur oleh sinyal analitik minimum y min , yang dapat dengan yakin dibedakan dari sinyal latar belakang eksperimen kontrol - y.
Metode statistik menggunakan pertidaksamaan Chebyshev membuktikan bahwa batas deteksi dapat ditentukan secara kuantitatif menggunakan ekspresi
Dimana latar belakang adalah deviasi standar dari sinyal analitis latar belakang; S adalah koefisien sensitivitas (kadang-kadang disebut hanya "sensitivitas"), ini mencirikan respons sinyal analitik terhadap konten komponen. Koefisien sensitivitas adalah nilai turunan pertama dari fungsi kalibrasi untuk penentuan konsentrasi tertentu. Untuk grafik kalibrasi bujursangkar, ini adalah tangen sudut kemiringan:
(Perhatian: jangan bingung faktor sensitivitasS bersama simpangan bakus!)
Ada cara lain untuk menghitung limit deteksi, tetapi persamaan ini adalah yang paling umum digunakan.
Dalam analisis kimia kuantitatif, kisaran kandungan atau konsentrasi yang dapat dideteksi biasanya diberikan. Ini berarti kisaran nilai dari konten yang ditentukan (konsentrasi) yang disediakan oleh metode ini dan dibatasi oleh batas bawah dan atas dari konsentrasi yang ditentukan.
Analytics lebih sering tertarik pada batas bawah konsentrasi yang ditentukan dengan n atau konten m n komponen ditentukan dengan metode ini. Di luar batas bawah konten yang ditentukan biasanya mengambil jumlah atau konsentrasi minimum yang dapat ditentukan dengan standar deviasi relatif
. .
Contoh
Konsentrasi massa besi dalam larutan ditentukan dengan metode spektrofotometri, yaitu dengan mengukur kerapatan optik larutan yang diwarnai sebagai hasil interaksi ion Fe3+ dengan asam sulfosalisilat. Untuk membangun ketergantungan kalibrasi, kerapatan optik larutan dengan konsentrasi besi yang meningkat (diberikan) yang diperlakukan dengan asam sulfosalisilat diukur.
Densitas optik larutan referensi (percobaan kontrol untuk reagen, yaitu tanpa penambahan besi, (latar belakang) adalah 0,002; 0,000; 0,008; 0,006; 0,003.
Menghitung batas deteksi besi.
Keputusan
1) Sebagai hasil perhitungan dengan metode kuadrat terkecil (lihat contoh untuk tugas kontrol No. 5), nilai untuk membuat grafik kalibrasi diperoleh.
Nilai yang dihitung untuk membuat grafik kalibrasi
2) Kami menghitung koefisien sensitivitas, yaitu koefisien sudut ketergantungan kalibrasi (S) menurut tabel.
3) Hitung deviasi standar sinyal latar belakang, apa yang 0,0032 satuan kerapatan optik.
4) Batas deteksi adalah, mg / cm 3
Kontrol tugas nomor 6
Tentukan batas deteksi besi dalam air.
data awal : nilai kerapatan optik latar belakang (larutan referensi) saat membuat grafik kalibrasi untuk penentuan besi adalah 0,003; 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Nilai kepadatan optik yang sesuai dengan konsentrasi besi dalam larutan disajikan dalam tabel tugas kontrol No. 5.
Hitung batas deteksi besi dalam mg/cm 3 dengan koefisien sensitivitas S, dihitung berdasarkan data yang diperoleh untuk konstruksi grafik kalibrasi menggunakan metode kuadrat terkecil saat melakukan tugas kontrol No. 5;
KEMENTERIAN KESEHATAN FEDERASI RUSIA
OTORISASI FARMASI UMUM
Validasi prosedur analitis OFS.1.1.0012.15
Diperkenalkan untuk pertama kalinya
Validasi teknik analisis adalah bukti eksperimental bahwa teknik tersebut cocok untuk memecahkan masalah yang dimaksud.
Monograf Farmakope Umum ini mengatur karakteristik metode analisis yang ditentukan untuk tujuan validasinya, dan kriteria yang sesuai untuk kesesuaian metode yang divalidasi yang dimaksudkan untuk pengendalian mutu produk obat: zat farmasi dan produk obat.
Metode penentuan kuantitatif, termasuk metode untuk menentukan pengotor dan metode untuk menentukan batas kandungan, harus divalidasi. Metode otentikasi divalidasi jika perlu untuk mengkonfirmasi kekhususannya.
Selama validasi, metode analisis dievaluasi sesuai dengan karakteristik yang tercantum di bawah ini, dipilih dengan mempertimbangkan rekomendasi tipikal yang diberikan dalam tabel:
- kekhususan;
- batas deteksi;
- batas penetapan kuantitatif (batas kuantitatif);
- area analitis (rentang);
- linearitas (linieritas);
- kebenaran (trueness);
- presisi (presisi);
- stabilitas (kekokohan).
Tabel 1 — Karakteristik metode yang ditentukan selama validasi
|
Nama karakteristik |
Jenis metode utama | ||||
| Tes keaslian | Benda asing | kuantisasi | |||
| Metode kuantitatif | Batas konten | Zat aktif utama, komponen standar | Bahan aktif dalam uji "Pelarutan" | ||
| Kekhususan **) | Ya | Ya | Ya | Ya | Ya |
| Batas deteksi | Bukan | Bukan | Ya | Bukan | Bukan |
| Batas Kuantitas | Bukan | Ya | Bukan | Bukan | Bukan |
| Area analitis | Bukan | Ya | Bukan | Ya | Ya |
| Linearitas | Bukan | Ya | Bukan | Ya | Ya |
| Benar | Bukan | Ya | * | Ya | Ya |
| presisi :
– pengulangan (konvergensi) - intermediat (intralaboratorium) presisi |
|||||
| Keberlanjutan | Bukan | * | * | * | * |
*) dapat ditentukan jika perlu;
**) kurangnya kekhususan dari satu metode analisis dapat dikompensasikan dengan menggunakan metode analisis lain.
Validasi ulang (revalidasi) metode dilakukan apabila:
- teknologi untuk memperoleh objek analisis;
- komposisi produk obat (objek analisis);
- metodologi analisis yang disetujui sebelumnya.
Kekhususan
Spesifisitas adalah kemampuan prosedur analitis untuk mengevaluasi analit dengan adanya komponen yang bersamaan.
Bukti kekhususan teknik yang divalidasi biasanya didasarkan pada pertimbangan data yang diperoleh dari analisis campuran model komposisi yang diketahui.
Kekhususan teknik yang divalidasi juga dapat dibuktikan dengan pemrosesan statistik yang tepat dari hasil analisis objek nyata yang dilakukan dengan menggunakan teknik tersebut dan, secara paralel, menggunakan teknik lain yang jelas spesifik (teknik yang kekhususannya telah terbukti).
1.1 Untuk prosedur tes identitas
Metode yang divalidasi (atau serangkaian metode) harus memberikan informasi yang dapat dipercaya tentang keberadaan zat aktif yang diberikan dalam suatu zat atau bentuk sediaan jika mengandung komponen yang ditentukan dalam formulasi, yang tunduk pada konfirmasi eksperimental.
Keaslian zat aktif dalam bahan farmasi atau produk obat ditetapkan dibandingkan dengan sampel standar atau oleh sifat fisikokimia atau kimia yang bukan merupakan karakteristik komponen lain.
1.2 Untuk prosedur pengujian kuantitas dan pengotor
Untuk metode kuantifikasi yang divalidasi dan pengujian pengotor, pendekatan yang sama digunakan - spesifisitasnya dalam kaitannya dengan analit harus dievaluasi, yaitu harus dikonfirmasi secara eksperimental bahwa keberadaan komponen yang menyertainya tidak mempengaruhi hasil analisis dalam kondisi yang tidak diinginkan. jalan.
Diperbolehkan untuk menilai kekhususan metode yang divalidasi baik dengan menganalisis model campuran dari komposisi yang diketahui yang mengandung analit, dan dengan membandingkan hasil analisis objek nyata yang diperoleh secara simultan dengan penggunaan metode yang divalidasi dan metode lain yang jelas spesifik. Hasil eksperimen yang relevan harus diproses secara statistik.
Kurangnya spesifisitas tes dapat dikompensasikan dengan tes tambahan lainnya.
Ketika memvalidasi metode, jika sesuai, sampel produk obat yang mengalami kondisi ekstrim (cahaya, suhu, kelembaban) atau dimodifikasi secara kimia dengan cara apa pun yang sesuai dapat digunakan untuk mengakumulasi kotoran di dalamnya.
Untuk teknik kromatografi, tunjukkan resolusi antara dua zat yang paling dekat dielusi pada konsentrasi masing-masing.
BATAS DETEKSI
Batas deteksi adalah jumlah terkecil (konsentrasi) analit dalam sampel yang dapat dideteksi (atau didekati) menggunakan teknik yang divalidasi.
Batas deteksi dalam kasus yang ditunjukkan dalam tabel biasanya dinyatakan sebagai konsentrasi analit (dalam % relatif atau bagian per juta - ppm).
Tergantung pada jenis teknik (visual atau instrumental), metode yang berbeda digunakan untuk menentukan batas deteksi.
2.1 Untuk metode dengan penilaian visual dari hasil analisis
Uji sampel dengan berbagai jumlah (konsentrasi) analit yang diketahui dan tentukan nilai minimum di mana hasil analisis dapat dievaluasi secara visual. Nilai ini merupakan perkiraan batas deteksi.
2.2 Untuk metode dengan evaluasi instrumental dari hasil analisis
2.2.1 Dengan rasio signal-to-noise
Pendekatan ini berlaku untuk metode-metode di mana kebisingan dasar diamati. Bandingkan nilai sinyal yang diperoleh untuk eksperimen kontrol dan untuk sampel dengan konsentrasi analit yang rendah. Tetapkan jumlah minimum (konsentrasi) analit dalam sampel, di mana rasio sinyal analitis terhadap tingkat kebisingan sama dengan 3.
Nilai yang ditemukan adalah perkiraan batas deteksi.
2.2.2 Dengan nilai standar deviasi sinyal dan kemiringan kurva kalibrasi
Batas deteksi (LO) ditemukan oleh persamaan:
AKTIF = 3,3 S/b,
di mana S
b adalah koefisien sensitivitas, yang merupakan rasio sinyal analitik dengan nilai yang ditentukan (garis singgung kemiringan kurva kalibrasi).
S dan b
S S a istilah bebas dari persamaan grafik ini. Nilai batas deteksi yang diperoleh, jika perlu, dapat dikonfirmasi dengan eksperimen langsung pada jumlah (konsentrasi) analit yang mendekati nilai batas deteksi yang ditemukan.
Sebagai aturan, jika ada bukti kesesuaian metode untuk penentuan yang andal dari suatu zat pada konsentrasi baik di atas dan di bawah batas kandungannya yang ditetapkan oleh spesifikasi, tidak diperlukan untuk menentukan batas deteksi yang sebenarnya untuk metode tersebut. .
BATAS KUANTIFIKASI
Batas kuantisasi adalah jumlah terkecil (konsentrasi) suatu zat dalam sampel yang dapat diukur menggunakan metode yang divalidasi dengan akurasi yang diperlukan dan presisi di dalam laboratorium (menengah).
Batas kuantitasi adalah karakteristik validasi yang diperlukan dari prosedur yang digunakan untuk menilai sejumlah kecil (konsentrasi) zat dalam sampel dan, khususnya, untuk menilai kandungan pengotor.
Tergantung pada jenis tekniknya, metode berikut digunakan untuk mencari limit kuantisasi.
3.1 Untuk metode dengan penilaian visual dari hasil analisis
Uji sampel dengan berbagai jumlah (konsentrasi) analit yang diketahui dan tentukan nilai minimum di mana hasil analisis dapat diperoleh secara visual dengan akurasi dan presisi intralaboratorium (menengah) yang diperlukan.
3.2 Untuk metode dengan evaluasi instrumental dari hasil analisis
3.2.1 Rasio signal-to-noise
Tetapkan konsentrasi minimum analit dalam sampel, di mana rasio sinyal analitis terhadap tingkat kebisingan sekitar 10:1.
3.2.2 Dengan nilai standar deviasi sinyal dan kemiringan kurva kalibrasi
Batas kuantifikasi (LOQ) dihitung menggunakan persamaan:
PKO \u003d 10 S/b,
di mana S adalah deviasi standar dari sinyal analitis;
b– koefisien sensitivitas, yang merupakan rasio sinyal analitik dengan nilai yang ditentukan.
Di hadapan data eksperimen dalam berbagai nilai terukur S dan b dapat diperkirakan dengan metode kuadrat terkecil.
Untuk plot kalibrasi linier, nilai S diambil sama dengan simpangan baku S a istilah bebas dari persamaan grafik ini. Nilai batas penentuan kuantitatif yang diperoleh, jika perlu, dapat dikonfirmasi dengan eksperimen langsung pada jumlah (konsentrasi) analit yang mendekati nilai yang ditemukan dari batas penentuan kuantitatif.
jika ada bukti kemampuan suatu metode untuk secara andal mendeteksi analit pada konsentrasi di atas dan di bawah batas spesifikasinya, biasanya tidak perlu menentukan nilai sebenarnya dari batas kuantisasi untuk metode tersebut.
BIDANG ANALITIS METODE
Area analitik dari teknik ini adalah interval antara nilai atas dan bawah dari karakteristik analitik dari komponen yang ditentukan dalam objek analisis (kuantitas, konsentrasi, aktivitasnya, dll.). Dalam rentang ini, hasil yang diperoleh dengan menggunakan metode yang divalidasi harus memiliki tingkat akurasi yang dapat diterima dan presisi di dalam laboratorium (menengah).
Persyaratan berikut dikenakan pada ukuran area analisis metode:
– metode penentuan kuantitatif harus dapat diterapkan dalam kisaran 80 hingga 120% dari nilai nominal karakteristik analitis yang ditentukan;
- metode untuk menilai keseragaman dosis harus dapat diterapkan dalam kisaran 70 hingga 130% dari dosis nominal;
- metode kuantisasi yang digunakan dalam uji disolusi umumnya harus dapat diterapkan dalam kisaran 50 sampai 120% dari konsentrasi zat aktif yang diharapkan dalam media disolusi;
- metode uji kemurnian harus dapat diterapkan dalam kisaran dari "Batas Kuantifikasi" atau "Batas Deteksi" hingga 120% dari kandungan yang diizinkan dari pengotor yang ditentukan.
Lingkup analitik dari teknik ini dapat ditentukan oleh rentang data eksperimen yang memenuhi model linier.
LINEARITAS
Linearitas teknik adalah adanya ketergantungan linier dari sinyal analitis pada konsentrasi atau jumlah analit dalam sampel yang dianalisis dalam area analisis teknik.
Ketika memvalidasi suatu metode, linieritasnya di wilayah analitis diverifikasi secara eksperimental dengan mengukur sinyal analitis untuk setidaknya 5 sampel dengan jumlah atau konsentrasi analit yang berbeda. Data eksperimen diolah dengan metode kuadrat terkecil menggunakan model linier:
kamu = b · x + sebuah,
X- jumlah atau konsentrasi analit;
kamu adalah besarnya respon;
b- koefisien sudut;
sebuah- istilah bebas (OFS "Pemrosesan statistik hasil percobaan kimia").
Nilai harus dihitung dan disajikan. b, sebuah dan koefisien korelasi r. Dalam kebanyakan kasus, dependensi linier digunakan yang memenuhi kondisi 0,99, dan hanya ketika menganalisis jumlah jejak, dependensi linier dipertimbangkan, di mana 0,9.
Dalam beberapa kasus, kemungkinan pendekatan linier dari data eksperimen disediakan hanya setelah transformasi matematisnya (misalnya, mengambil logaritma).
Untuk beberapa metode analisis yang pada prinsipnya tidak dapat didasarkan pada hubungan linier antara data percobaan, penentuan konsentrasi atau jumlah suatu zat dilakukan dengan menggunakan grafik kalibrasi non-linier. Dalam hal ini, plot ketergantungan sinyal analitis pada jumlah atau konsentrasi analit dapat didekati dengan fungsi non-linier yang sesuai dengan menggunakan metode kuadrat terkecil, yang dapat dilakukan dengan perangkat lunak tervalidasi yang sesuai.
BAIK
Ketepatan teknik dicirikan oleh penyimpangan hasil rata-rata dari penentuan yang dibuat dengan penggunaannya dari nilai yang dianggap benar.
Teknik yang divalidasi diakui benar jika nilai yang diambil sebagai benar terletak dalam interval kepercayaan dari hasil rata-rata yang sesuai dari analisis yang diperoleh secara eksperimental menggunakan teknik ini.
Pendekatan berikut dapat diterapkan untuk mengevaluasi validitas prosedur kuantisasi:
a) analisis menggunakan metode sampel standar atau campuran model yang divalidasi dengan kandungan (konsentrasi) analit yang diketahui;
b) perbandingan hasil yang diperoleh dengan menggunakan metode yang divalidasi dan metode yang dicontohkan, yang sebelumnya telah ditetapkan kebenarannya;
c) pertimbangan hasil studi linearitas metodologi yang divalidasi: jika suku bebas dalam persamaan yang diberikan dalam Bagian 5 secara statistik tidak berbeda secara signifikan dari nol, maka penggunaan metodologi tersebut memberikan hasil yang bebas dari kesalahan sistematis.
Untuk pendekatan "a" dan "b" dimungkinkan untuk menyajikan data yang diperoleh dalam bentuk persamaan ketergantungan linier (regresi) antara nilai yang ditemukan secara eksperimental dan nilai sebenarnya. Untuk persamaan ini, hipotesis tentang persamaan garis singgung sudut kemiringan terhadap kesatuan diperiksa b dan pada persamaan dengan nol dari istilah bebas sebuah. Sebagai aturan, jika hipotesis ini diakui benar dengan tingkat reliabilitas sama dengan 0,05, maka penggunaan metodologi yang divalidasi memberikan hasil yang benar, yaitu bebas dari kesalahan sistematis.
PRESISI
Ketepatan suatu teknik dicirikan oleh dispersi hasil yang diperoleh dengan penggunaannya relatif terhadap nilai hasil rata-rata. Ukuran dispersi tersebut adalah nilai simpangan baku hasil penentuan tunggal, yang diperoleh untuk sampel dengan ukuran yang cukup besar.
Presisi dinilai untuk setiap prosedur kuantifikasi dengan setidaknya tiga penentuan untuk masing-masing dari tiga tingkat analit (rendah, menengah, dan tinggi) yang terletak dalam rentang analitis metode. Pengulangan juga dapat dinilai untuk setiap teknik pengujian dari setidaknya enam penentuan untuk sampel dengan kandungan analit mendekati nominal. Dalam banyak kasus, penilaian presisi dapat dilakukan berdasarkan hasil pengolahan data eksperimen dengan menggunakan metode kuadrat terkecil, seperti yang ditunjukkan dalam General Pharmacopoeia Monograph "Pemrosesan statistik hasil percobaan kimia".
Presisi harus diuji pada sampel yang homogen dan dapat dievaluasi dengan tiga cara:
– sebagai pengulangan (konvergensi);
– sebagai presisi intralaboratorium (menengah);
– sebagai presisi antar laboratorium (reproduktifitas).
Hasil penilaian metode analisis untuk masing-masing opsi presisi biasanya ditandai dengan nilai yang sesuai dari standar deviasi hasil penentuan terpisah.
Biasanya, ketika mengembangkan teknik asli, pengulangan (konvergensi) dari hasil yang diperoleh dengan penggunaannya ditentukan. Jika perlu untuk memasukkan metode yang dikembangkan dalam dokumentasi peraturan, presisi intralaboratorium (menengah) juga ditentukan. Ketepatan antarlaboratorium (reproduktifitas) dari suatu metode dievaluasi ketika seharusnya dimasukkan dalam draft monografi farmakope umum, monografi farmakope, atau dalam dokumentasi peraturan untuk bahan referensi farmakope.
7.1 Pengulangan (konvergensi)
Pengulangan prosedur analitis dievaluasi oleh hasil independen yang diperoleh di bawah kondisi yang diatur sama di laboratorium yang sama (pekerja yang sama, peralatan yang sama, set reagen yang sama) dalam waktu singkat.
7.2 Intralaboratorium (Menengah) Presisi
Ketepatan intra-laboratorium (menengah) dari metode yang divalidasi dievaluasi di bawah kondisi laboratorium yang sama (hari yang berbeda, pelaksana yang berbeda, peralatan yang berbeda, dll.).
7.3 Presisi antar laboratorium (reproduksibilitas)
Presisi antar laboratorium (reproduksibilitas) dari metode yang divalidasi dinilai saat pengujian di laboratorium yang berbeda.
STABILITAS
Stabilitas teknik yang divalidasi adalah kemampuan untuk mempertahankan karakteristik yang ditemukan untuknya di bawah kondisi (nominal) optimal, yang diberikan dalam tabel, dengan kemungkinan penyimpangan kecil dari kondisi analisis ini.
Kekokohan metode tidak boleh ditentukan dalam kaitannya dengan kondisi pengujian yang mudah dikontrol. Ini secara drastis mengurangi kebutuhan akan studi stabilitas khusus.
Stabilitas hanya boleh dipelajari jika metode yang divalidasi didasarkan pada penggunaan metode analisis yang sensitif terhadap lingkungan, seperti berbagai jenis kromatografi dan analisis fungsional. Jika perlu, penilaian stabilitas metodologi dilakukan pada tahap pengembangannya. Jika stabilitas teknik rendah, maka wajib untuk memeriksa kesesuaiannya secara langsung dalam proses penggunaan praktis.
Validasi Sistem Analitik
Validasi kesesuaian sistem analitis adalah verifikasi pemenuhan persyaratan dasar untuk itu. Sistem yang kesesuaiannya sedang diuji adalah kumpulan instrumen, reagen, standar, dan sampel tertentu yang sedang dianalisis. Persyaratan untuk sistem seperti itu biasanya ditentukan dalam monografi umum untuk metode analisis yang sesuai. Dengan demikian, pengujian kesesuaian sistem analitik menjadi prosedur yang termasuk dalam metode yang divalidasi.
Presentasi hasil validasi
Protokol validasi untuk metode analitik harus berisi:
- deskripsi lengkapnya, cukup untuk reproduksi dan mencerminkan semua kondisi yang diperlukan untuk melakukan analisis;
– karakteristik yang dievaluasi;
- semua hasil utama yang dimasukkan dalam pemrosesan data statistik;
– hasil pemrosesan statistik data yang diperoleh secara eksperimental dalam pengembangan atau verifikasi metodologi yang divalidasi;
- bahan ilustrasi, seperti salinan kromatogram yang diperoleh dengan kromatografi cair kinerja tinggi atau kromatografi gas; elektroforogram, spektrum elektronik dan inframerah; foto atau gambar kromatogram yang diperoleh dengan kromatografi lapis tipis atau kertas; gambar kurva titrasi, grafik kalibrasi;
– kesimpulan tentang kesesuaian metodologi yang divalidasi untuk dimasukkan dalam dokumen peraturan.
Bahan validasi untuk metode analisis individual harus disajikan dalam bentuk laporan validasi gabungan.
