Trombosit dan hemostasis

MA Panteleev1-5, A.N. Sveshnikova1-3

1Pusat Masalah Teoritis Farmakologi Fisik dan Kimia, Akademi Ilmu Pengetahuan Rusia, Moskow; 2FGBU FNKTs DGOI mereka. Dmitry Rogachev, Kementerian Kesehatan Rusia, Moskow; 3Fakultas Fisika, Lembaga Pendidikan Anggaran Negara Federal Pendidikan Profesional Tinggi Universitas Negeri Moskow dinamai M.V. M.V. Lomonosov";

Pusat Ilmiah Negara 4FGBU Kementerian Kesehatan Rusia, Moskow; 5GemaKor LLC, Moskow

Kontak: Mikhail Alexandrovich Panteleev [dilindungi email]

Trombosit adalah fragmen sel non-nuklir yang berperan penting dalam hemostasis, menghentikan pendarahan jika terjadi kerusakan, dan juga dalam trombosis patologis. Cara utama untuk menjalankan fungsinya dalam trombosit adalah pembentukan agregat yang tumpang tindih dengan lokasi kerusakan. Mereka memperoleh kemampuan untuk berkumpul sebagai hasil dari proses sementara yang disebut aktivasi. Meskipun fungsinya relatif sederhana dan tidak ambigu, perangkat trombosit sangat kompleks: mereka memiliki satu set organel yang hampir lengkap, termasuk retikulum endoplasma, mitokondria dan formasi lainnya; ketika diaktifkan, trombosit mengeluarkan berbagai butiran dan berinteraksi dengan protein plasma dan sel darah dan jaringan lain; aktivasi mereka sendiri dikendalikan oleh banyak reseptor dan kaskade pensinyalan yang kompleks. Dalam ulasan ini, kami akan mempertimbangkan perangkat trombosit, mekanisme fungsinya dalam kondisi normal dan patologis, metode untuk mendiagnosis disfungsi trombosit dan pendekatan untuk koreksi mereka. Perhatian khusus akan diberikan pada bidang-bidang ilmu trombosit, di mana misteri masih mengintai.

Kata kunci: struktur trombosit, fungsi trombosit

Trombosit dan hemostasis M.A. Panteleev1-5, A.N. Sveshnikova1-3

"Pusat Masalah Teori Farmakologi Fisik dan Kimia, Akademi Ilmu Pengetahuan Rusia, Moskow; 2Federal Research Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology dinamai Dmitriy Rogachev,

Kementerian Kesehatan Rusia, Moskow; 3Lomonosov Universitas Negeri Moskow, Fakultas Fisika, Moskow; 4Pusat Penelitian Hematologi, Kementerian Kesehatan Rusia, Moskow; 5HemaCore Company, Moskow

Trombosit adalah fragmen sel anuklear yang memainkan peran penting dalam hemostasis, penghentian perdarahan setelah kerusakan, serta dalam pembentukan trombus patologis. Tindakan utama trombosit adalah pembentukan agregat, tumpang tindih dengan cedera. Mereka memperoleh kemampuan untuk berkumpul dengan proses transisi yang disebut aktivasi. Meskipun fungsi yang relatif sederhana dan pasti struktur trombosit sangat sulit: mereka memiliki hampir satu set organel lengkap, termasuk retikulum endoplasma, mitokondria dan entitas lainnya. Ketika trombosit diaktifkan mengeluarkan berbagai butiran berinteraksi dengan protein plasma dan sel darah merah dan jaringan lain. Aktivasi mereka dikendalikan oleh beberapa reseptor dan kaskade kompleks sinyal. Dalam ulasan ini struktur trombosit, mekanisme fungsinya dalam kesehatan dan penyakit, metode diagnostik fungsi trombosit dan pendekatan untuk koreksi mereka dipertimbangkan. Perhatian khusus akan diberikan pada bidang-bidang ilmu trombosit, yang masih menyimpan misteri tersembunyi.

Kata kunci: struktur trombosit, fungsi trombosit

pengantar

Trombosit kecil, berdiameter 2-4 mikrometer, fragmen sel non-nuklir (walaupun kadang-kadang disebut sel), beredar dalam aliran darah pada konsentrasi 200-400 ribu per mikroliter dan bertanggung jawab atas tahap-tahap utama proses menghentikan pendarahan - hemostasis. Dalam kasus cedera, mereka dapat menempel pada jaringan yang rusak dan satu sama lain, membentuk agregat sumbat trombosit (Gbr. 1), yang menghentikan kehilangan darah dan mencegah mikroba memasuki sistem peredaran darah. Ini bukan satu-satunya mekanisme hemostasis, tetapi sangat penting. Gangguan fungsi trombosit yang diturunkan dan didapat, seperti:

seperti trombastenia Glanzman atau trombositopenia imun, adalah penyakit serius yang ditandai dengan perdarahan berbahaya. Trombosit juga secara aktif terlibat dalam komponen lain dari mekanisme hemostasis: beberapa zat yang disekresikan oleh mereka menyebabkan vasokonstriksi lokal, sementara yang lain mempercepat reaksi pembekuan darah.

Di sisi lain, fungsi atau jumlah trombosit yang berlebihan, atau gangguan lain pada sistem kardiovaskular dapat menyebabkan pembentukan agregat trombosit tidak di luar, tetapi di dalam pembuluh - trombus (Gbr. 2). Trombus trombosit dapat terbentuk dalam berbagai situasi dan memainkan peran sentral dalam kondisi patologis tersebut.

Beras. 1. Agregat hemostatik yang dibentuk oleh trombosit di arteriol anjing. Sumbat trombosit terlihat di bawah mikroskop cahaya (H) menutup pembuluh darah yang pecah (V). Biopsi dilakukan 3 menit setelah cedera. Banyak eritrosit di bagian atas gambar terletak di lumen luka, membentang dari kiri ke kanan. Skala ukuran di sudut kanan bawah sesuai dengan 10 mikrometer. Direproduksi dari

Beras. 2. Pembentukan trombus di arteriol. Mikroskop DIC intravital pembentukan trombus dalam pembuluh tikus yang rusak oleh fotoaktivasi pewarna Rose Bengal. Trombus pada dinding pembuluh darah yang menutupi lokasi kerusakan ditunjukkan di bagian kanan atas gambar. Di dalamnya, seseorang dapat membedakan trombosit individu dan memperhatikan bahwa mereka mempertahankan bentuk diskoidnya selama tahap pertama perlekatan. Arah aliran ditunjukkan oleh panah. Skala skala sesuai dengan 5 mikrometer. Direproduksi dari

yaniyah, seperti serangan jantung dan stroke. Dengan demikian, mereka bertanggung jawab atas bagian terbesar dari kematian dan kecacatan di dunia modern, dan obat antiplatelet seperti clopidogrel menempati tempat yang membanggakan dalam daftar obat terlaris di planet ini.

Trombosit sederhana dalam banyak hal: mereka tidak memiliki nukleus, sedikit atau tidak ada sintesis protein, dan mereka tidak dapat tumbuh atau membelah. Tugas trombosit - untuk menempel pada tempat kerusakan - juga terlihat sederhana dan tidak ambigu dibandingkan dengan tugas hampir semua sel lainnya. Namun dalam praktiknya, kesederhanaan ini ternyata menipu. Untuk menjalankan fungsinya, mereka harus diaktifkan dalam proses yang dikendalikan oleh selusin aktivator yang bekerja melalui banyak reseptor. Jaringan jalur pensinyalan dalam trombosit yang mengatur responsnya kompleks dan kurang dipahami. Dengan sendirinya, respons trombosit bukanlah "lem" sederhana, tetapi mencakup puluhan fungsi, mulai dari adhesi primer hingga vesikulasi.

Selain kesulitan mendasar, trombosit penuh dengan banyak misteri praktis: saat ini, di tangan dokter tidak ada tes yang memadai untuk menilai fungsi trombosit, atau alat yang efektif untuk memperbaikinya. Meskipun kemajuan luar biasa dibuat pada akhir abad ke-20 dengan pengembangan obat antagonis reseptor glikoprotein IIb-IIIa dan P2Y12, penekanan aktivitas trombosit untuk memerangi trombosis masih merupakan masalah yang belum terselesaikan. Akhirnya, penelitian intensif sedang dilakukan tentang peran trombosit di luar hemostasis - dalam angiogenesis, kekebalan, dan sistem lainnya.

Studi klinis dan biologis trombosit menarik minat yang besar dari para spesialis di seluruh dunia. Hampir setiap tahun membawa kita penemuan baru, dan ide-ide tentang proses yang paling penting telah mengalami perubahan radikal secara harfiah dalam beberapa tahun terakhir. Dalam ulasan ini, kami telah mencoba untuk fokus pada konsep dasar trombosit dan berbicara tentang kemajuan terbaru dalam memahami fungsinya. Bagi mereka yang ingin lebih mengenal berbagai aspek kehidupan sel yang menakjubkan ini, kami dapat merekomendasikan buku teks dasar oleh A.V. Mazurova. Penutur bahasa Inggris akan menemukan informasi berharga dalam buku teks referensi Platelets, yang diedit oleh Alan Michelson, yang dicetak ulang secara teratur.

Struktur trombosit

Pada bentuk awal yang tidak teraktivasi, trombosit menyerupai “pelat” bikonveks (Gbr. 3, kiri). Karena ukurannya yang kecil (diameter 2-4 mikron), mereka melewati kapiler dengan bebas,

Beras. 3. Trombosit. Mikrograf elektron trombosit non-aktif berbentuk cakram (kiri) dan trombosit teraktivasi ADP secara agregat (kanan). Direproduksi dari

sehingga bentuknya konstan, sebagai lawan dari dipaksa untuk masuk melalui kapiler sel darah merah. Hanya setelah aktivasi, bentuk trombosit berubah, menjadi dalam banyak kasus amoeboid (Gbr. 3, kanan). Bentuk trombosit dipertahankan baik oleh sitoskeleton spektrin, yang membuat cangkangnya elastis, dan oleh cincin mikrotubulus tubulin (Gbr. 4), yang dihancurkan saat aktivasi. Sitoplasma sel mengandung banyak butiran, yang utamanya adalah butiran padat yang sebagian besar mengandung zat dengan berat molekul rendah, seperti serotonin dan adenosin difosfat (ADP), dan butiran alfa yang mengandung protein - fibrinogen, trombospondin, P-selectin, faktor koagulasi V , faktor von Willebrand dan banyak lainnya . Isi butiran ini disekresikan saat aktivasi

tion. Penting untuk dicatat bahwa bentuk trombosit dalam banyak hal adalah ilusi. Lingkungan internalnya sebenarnya adalah "spons", jaringan saluran membran yang berfungsi sebagai sumber tambahan permukaan membran ketika diaktifkan dan mendorong sekresi granul.

Kemampuan untuk mengaktifkan - transisi yang cepat dan dalam banyak kasus ireversibel ke keadaan baru - adalah kualitas utama dari trombosit. Hampir semua gangguan lingkungan yang signifikan, hingga stres mekanis sederhana, dapat berfungsi sebagai stimulus aktivasi. Namun, aktivator trombosit fisiologis utama adalah: 1) kolagen - protein utama matriks ekstraseluler; 2) trombin - serin proteinase, enzim sentral dari sistem koagulasi plasma; 3) ADP - nukleotida adenin, yang dilepaskan dari sel-sel pembuluh yang hancur atau disekresikan oleh butiran padat trombosit itu sendiri; 4) tromboksan A2 - lipid dari kelas eikosanoid, disintesis dan disekresikan oleh trombosit.

Tindakan masing-masing aktivator trombosit dimediasi melalui reseptor khusus di membran trombosit. Dengan demikian, kolagen mengaktifkan trombosit melalui glikoprotein VI, trombin memiliki 2 reseptor teraktivasi proteinase utama PAR1 dan PAR4, dan ADP bekerja melalui purinoreseptor P2Y1 dan P2Y12. Stimulasi reseptor mana pun mengarah pada aktivasi jaringan kompleks kaskade pensinyalan intraseluler yang mengontrol respons sel; dengan reseptor yang berbeda umumnya memicu jalur yang berbeda.

Selaput

Sistem tabung terbuka

Cincin mikrotubulus

Butiran padat

a-granula

Mitokondria

Sistem tabung ketat

Glikogen

Butiran padat

Beras. 4. Struktur trombosit. Pada diagram di sebelah kiri, Anda dapat membedakan elemen utama struktur trombosit, yang diamati di bawah mikroskop elektron. Direproduksi dari . Di sebelah kanan adalah rekonstruksi 3D dari jeroan trombosit dari tomografi elektron. Perhatikan bahwa sistem kanalikuli, yang ditunjukkan dengan warna biru, menempati sebagian besar volume sel. Direproduksi dari

Aktivasi trombosit secara lahiriah dimanifestasikan oleh banyak penataan ulang internal dan perubahan sifat, yang utama di antaranya adalah: 1) perubahan bentuk menjadi amoeboid, untuk beberapa trombosit - bulat; 2) memperkuat kemampuan adhesi - menempel pada lokasi kerusakan; 3) munculnya kemampuan untuk beragregasi - menempel pada trombosit lain untuk membentuk sumbat penuh; 4) sekresi banyak senyawa dengan berat molekul rendah dan tinggi yang dijelaskan di atas dari butiran padat, butiran alfa dan sumber lainnya; 5) paparan membran prokoagulan.

Beberapa sifat ini berfungsi untuk melaksanakan fungsi utama trombosit - pembentukan sumbat hemostatik, yang lain - untuk mempercepat reaksi pembekuan darah. Dengan demikian, paparan membran prokoagulan dan sekresi butiran alfa diperlukan untuk pelaksanaan fungsi kedua trombosit secara tepat.

Pembekuan darah adalah kaskade reaksi dalam plasma darah, yang berakhir dengan pembentukan jaringan serat fibrin dan transfer darah dari keadaan cair ke keadaan seperti jeli. Banyak reaksi koagulasi kunci yang bergantung pada membran (Gbr. 5), dipercepat oleh banyak urutan besarnya dengan adanya membran fosfolipid bermuatan negatif, yang mengikat protein koagulasi melalui apa yang disebut jembatan kalsium. Biasanya, membran trombosit tidak mendukung reaksi pembekuan. Fosfolipid bermuatan negatif, terutama fosfatidilserin, terkonsentrasi di internal

lapisan membran, dan fosfatidilkolin dari lapisan luar mengikat faktor koagulasi jauh lebih buruk. Terlepas dari kenyataan bahwa beberapa faktor koagulasi dapat mengikat trombosit yang tidak diaktifkan, ini tidak mengarah pada pembentukan kompleks enzim aktif.

Aktivasi trombosit mungkin mengarah pada aktivasi enzim scramblase, yang mulai dengan cepat, khususnya, secara bilateral dan secara independen ADP mentransfer fosfolipid bermuatan negatif dari satu lapisan ke lapisan lainnya. Akibatnya, terjadi percepatan pembentukan kesetimbangan, di mana konsentrasi fosfatidilserin di kedua lapisan menjadi sama. Selain itu, selama aktivasi, terjadi paparan dan/atau perubahan konformasi dari banyak protein transmembran dari lapisan luar membran, dan protein tersebut memperoleh kemampuan untuk secara spesifik mengikat faktor koagulasi, mempercepat reaksi dengan partisipasinya. Menariknya, hanya sebagian kecil dari trombosit yang menunjukkan sifat-sifat ini ketika diaktifkan.

Secara umum, keadaan teraktivasi trombosit dapat berbeda: aktivasi trombosit memiliki beberapa derajat, dan ekspresi permukaan prokoagulan adalah salah satu yang tertinggi. Hanya trombin atau kolagen yang dapat menyebabkan respons yang begitu kuat. Aktivator yang lebih lemah, terutama ADP, dapat berkontribusi pada kerja aktivator yang kuat. Namun, mereka tidak dapat secara independen menyebabkan pelepasan fosfatidilserin ke lapisan luar membran; efeknya direduksi menjadi perubahan bentuk, agregasi dan sekresi sebagian butiran.

Beras. 5. Reaksi membran pembekuan darah. Aktivasi trombosit menyebabkan munculnya fosfatidilserin di lapisan luar membran trombosit. Faktor koagulasi mengikat membran tersebut melalui jembatan kalsium, membentuk kompleks protein di mana reaksi koagulasi dipercepat oleh urutan besarnya. Ilustrasi menunjukkan kompleks protrombinase, yang terdiri dari faktor Xa, Ya, II, terletak di permukaan membran bilayer.

Bagaimana cara kerja trombosit?

Metode yang paling umum untuk menguji keadaan sistem hemostasis trombosit dalam praktik diagnostik modern adalah agregasi, di mana efek penambahan beberapa aktivator ke suspensi trombosit diperkirakan dengan kepadatan optik. Aktivator, paling sering ADP atau kolagen, ditambahkan ke plasma kaya trombosit dengan pengadukan konstan selama beberapa menit. Trombosit teraktivasi, saling berinteraksi, dan terjadi pembentukan agregat, yang dapat dilihat dari penurunan kekeruhan suspensi yang disebabkan oleh penurunan jumlah partikel penghambur cahaya. Ada varian uji agregasi yang melibatkan prinsip deteksi yang berbeda: misalnya, agregasi trombosit dalam darah lengkap dapat diukur dengan menggunakan metode impedansi, bukan metode optik.

Mungkin, justru sehubungan dengan prevalensi tes agregasi selama beberapa dekade terakhir bahwa gagasan telah ditetapkan di benak banyak spesialis bahwa pembentukan trombus trombosit atau sumbat hemostatik dalam tubuh terjadi dengan cara yang sama: pertama, aktivasi (misalnya, dilepaskan dari sel)

arus dinding pembuluh ADP yang rusak), dan kemudian agregasi. Terlepas dari kenyataan bahwa studi pertumbuhan trombus trombosit di ruang aliran memiliki sejarah hampir setengah abad, hanya dalam beberapa dekade terakhir pandangan tradisional ini mulai dipertanyakan.

Pertimbangkan tahap pertama pembentukan trombus: adhesi trombosit ke kolagen yang terpapar di tempat cedera. Mari kita coba memperkirakan waktu dan jarak yang khas untuk proses ini. Biarkan ukuran karakteristik area yang rusak, katakanlah, l = 10 mikrometer (1 sel endotel yang terlepas). Biarkan laju aliran menjadi arteri, yang berarti gradien kecepatan aliran di dinding adalah sekitar u = 1000 s - 1. Kemudian trombosit, yang memiliki ukuran karakteristik (dalam urutan besarnya) sekitar x = 1 mikrometer, akan bergerak mendekati dinding dengan kecepatan v = x x u = 1000 mikrometer per detik. Ini berarti bahwa ia akan terbang di atas tempat cedera dalam l/v = 10 mikrodetik, sedangkan waktu aktivasi trombosit tipikal adalah menit, untuk beberapa peristiwa (katakanlah, aktivasi integrin) beberapa detik, tetapi tidak seperseratus detik. Ini mengarah pada satu-satunya kesimpulan yang mungkin, yang sejauh ini telah didukung secara eksperimental: agar dapat diaktifkan secara normal, trombosit harus terlebih dahulu menempel pada tempat cedera.

Selain itu, hal yang sama berlaku untuk kejadian-kejadian selanjutnya dari peningkatan ukuran trombus - agregasi. Trombosit yang mengambang di atas trombus yang tumbuh di arteri harus memiliki waktu untuk bergabung dengannya dalam seperseratus detik. Oleh karena itu, agregasi dalam tubuh juga dapat berjalan hanya dalam satu cara: agregasi pertama, dan kemudian aktivasi.

Masalah lain adalah pergerakan trombosit di pembuluh melintasi aliran darah. Jika trombosit didistribusikan secara merata dalam darah dan dengan tenang bergerak dengan aliran laminar di sepanjang pembuluh (dan jika terjadi cedera - di sepanjang luka), masing-masing di sepanjang garisnya sendiri saat ini, maka mereka tidak dapat mendekati lokasi cedera untuk melakukan tugas mereka dalam hemostasis: untuk adhesi ke tempat kerusakan atau perlekatan pada trombosit yang sudah diaktifkan dalam trombus, semacam kekuatan fisik diperlukan untuk membawa sel-sel ke dalam kontak. Dalam uji in vitro, tugas ini biasanya dilakukan dengan pengaduk magnet; apa yang bekerja di dalam tubuh?

Alasan di atas tentu saja tidak dapat menjadi bukti adanya pola baru hemostasis dan trombosis trombosit. Gambaran baru ini, yang akan diuraikan di bawah, telah berkembang selama 10 tahun terakhir sebagai hasil kerja eksperimental aktif dari banyak peneliti, di antaranya laboratorium Shaun P. Jackson di Australia memainkan peran utama; sementara sebagian besar hasil diperoleh dengan menggunakan videomicroscopic

pengamatan pembentukan trombus in vivo. Perkiraan numerik yang disajikan untuk perhatian pembaca dimaksudkan hanya untuk menunjukkan ketidaknyataan dan inkonsistensi internal dari ide tradisional agregasi trombosit.

Bagaimana trombus trombosit terbentuk dalam kenyataan?

Langkah pertama adalah perpindahan trombosit ke dinding pembuluh darah, yang dilakukan oleh eritrosit. Sel darah merah menempati hampir setengah dari volumenya, mereka adalah urutan besarnya lebih besar dari trombosit baik dalam konsentrasi maupun dalam massa. Tabrakan eritrosit yang bergerak dengan kecepatan berbeda pada arus yang berbeda menyebabkan redistribusi dan konsentrasinya di dekat sumbu pembuluh. Banyak detail dari proses ini tidak jelas, tetapi redistribusi serupa telah diamati dalam suspensi partikel dari berbagai jenis, tidak hanya dalam darah. Trombosit ringan dan kecil terus-menerus dipaksa keluar ke pinggiran, yang sangat nyaman, karena di sana, di dekat lokasi kerusakan potensial, tempat kerja mereka berada; dengan demikian, konsentrasi lokal trombosit pada dinding pembuluh darah adalah urutan besarnya lebih tinggi dari konsentrasi rata-rata dalam darah.

Selain itu, bahkan di dinding pembuluh darah, trombosit terus-menerus bertabrakan dengan eritrosit, yang sebenarnya mengarah pada pencampuran yang sangat diperlukan agar interaksi terjadi. Karena tumbukan seperti itu, trombosit sering menekan dinding, dan jika ada tempat cedera, mereka dapat menempel padanya. Selain 2 mekanisme utama di mana teori yang andal telah dibangun - perpindahan dan dorongan konstan - yang lain sekarang sedang dibahas, tetapi fakta eksperimental tidak dapat disangkal: keberadaan eritrosit meningkatkan laju pertumbuhan agregat trombosit pada permukaan yang rusak dengan lebih dari 10 kali.

Masalah kedua adalah kebutuhan untuk secara cepat dan hati-hati menghentikan trombosit yang berada di lokasi kerusakan atau di dekat trombus yang sedang tumbuh. Untuk mengambil bagian dalam pembentukan sumbat hemostatik atau trombus, trombosit harus memadamkan kecepatannya yang cukup besar. Untuk ini, reseptor khusus pada trombosit, glikoprotein Ib-V-IX, dan faktor von Willebrand dilarutkan dalam darah (Gbr. 6) berfungsi. Faktor ini, yang bersirkulasi sebagai multimer besar dengan diameter hingga 100 nanometer, mampu mengikat kolagen dan trombosit dalam bekuan secara reversibel, sehingga dengan cepat melapisi mereka. Trombosit yang lewat menempel pada faktor von Willebrand dan mulai berhenti. Jika mereka mengikat kolagen secara langsung, menghentikannya secara tiba-tiba akan merusak, tetapi faktor von Willebrand yang terikat secara longgar dapat terlepas dan menempel kembali pada kolagen, sehingga trombosit dapat mengendap dengan cukup cepat.

meluncur hanya beberapa dari panjangnya, seperti pesawat yang mendarat di perutnya.

Aktivasi dalam pendekatan ini bukanlah yang pertama, tetapi tahap terakhir dalam pembentukan trombus. Trombosit yang telah terikat secara reversibel ke tempat cedera dapat putus; namun, aktivasi dapat menstabilkannya. Trombosit lapisan pertama, yang telah menetap langsung pada kolagen, diaktifkan oleh kolagen melalui reseptor glikoprotein VI dan kemudian berikatan kuat dengan kolagen melalui reseptor integrin a2p1: protein dari famili ini mampu mengubah konformasi dan kekuatan ikatannya. target di bawah aksi sinyal intraseluler (Gbr. 6). Dalam keadaan normal, ia tidak berinteraksi dengan kolagen, tetapi ketika diaktifkan, ia melekat erat padanya.

Perlekatan lapisan trombosit berikutnya, yaitu pertumbuhan sebenarnya dari trombus, terjadi dengan cara yang sama: pertama, sel-sel secara longgar duduk di atas faktor von Willebrand, dan setelah aktivasi, mereka difiksasi dengan aman melalui reseptor integrin. Perbedaannya terletak pada fakta bahwa trombosit berkomunikasi satu sama lain melalui integrin lain yang disebut aPbp3 (atau glikoprotein Pb-Sha): reseptor ini "mengambil" molekul fibrinogen dari 2 sisi dan mengikat masing-masing trombosit melalui "jembatan fibrinogen" tersebut. Perbedaan kedua adalah bahwa lapisan-lapisan trombosit berikutnya tidak diaktifkan melalui kontak dengan kolagen (yang sudah ditutupi oleh lapisan pertama), tetapi oleh aktivator terlarut yang disekresikan oleh trombosit itu sendiri (ADP, tromboksan A2) atau dibentuk selama operasi sistem koagulasi plasma (trombin). Penting untuk ditekankan lagi bahwa aktivator ini bertindak secara eksklusif di dalam bekuan darah: aliran cepat di luarnya membawa mereka pergi, mencegah sel-sel baru direkrut ke dalam bekuan darah.

Gambaran pertumbuhan trombus trombosit in vivo sekarang cukup mapan, dan urutan kejadian yang dijelaskan di atas diterima secara umum. Namun demikian, ada banyak tempat yang tidak jelas di dalamnya, yang akan dibahas di bawah ini.

Masalah dalam mendiagnosis fungsi trombosit

Saat ini, diagnosis fungsi trombosit setidaknya 90% dilakukan dengan menggunakan studi agregasi. Prinsip dan kekurangan dari pendekatan ini telah dibahas di atas; masalah utamanya adalah tidak ada tes agregasi yang cocok dengan apa yang terjadi di vivo.

Mungkin 10% lain dari penilaian fungsional disediakan oleh flow cytometry, yang memungkinkan Anda untuk menentukan komposisi antigenik protein pada permukaan trombosit. Spesialis yang paling terlatih juga dapat menggunakan sitometri untuk mengkarakterisasi fungsi trombosit secara lebih rinci: aktivasi integrin, pelepasan granula dan fosfatidilserin. Ini memberikan informasi yang berguna tentang molekul individu dan kemampuan sel. Namun demikian, semua ini tidak menjawab pertanyaan umum: bagaimana menilai secara memadai fungsi trombosit secara umum?

Jawaban paling alami adalah memaksa trombosit untuk membentuk bekuan darah dalam kondisi yang mendekati fisiologis. Peningkatan penggunaan sekarang sedang dibuat dari ruang aliran, di mana adhesi trombosit ke substrat berlapis kolagen dipelajari dengan mikroskop. Saat ini, sudah ada kamera yang tersedia secara komersial dan standarisasinya sedang berlangsung, meskipun masih jauh dari aplikasi klinis yang signifikan dalam praktik kompleks diagnostik. Saingan yang mungkin untuk mikroskop video adalah pendekatan serupa yang digunakan

GP Ib-V-IX | GP VI

tindakan non-tindakan

kolagen

Beras. 6. Mekanisme utama pertumbuhan awal trombus trombosit. Fiksasi utama trombosit di lokasi cedera terjadi melalui interaksi reseptor adhesi utama glikoprotein W-Y-1X dengan molekul mediator faktor von Willebrand (VW) yang melekat pada kolagen yang terpapar (langkah 1). Glikoprotein VI reseptor sinyal kemudian mengikat kolagen, menyebabkan aktivasi trombosit (langkah 2). Aktivasi reseptor agregasi integrin a2p1 (berfungsi untuk mengikat kolagen) dan aIIIp3 (untuk mengikat melalui jembatan fibrinogen dengan trombosit lain) mendorong pelekatan trombosit teraktivasi ke kolagen (langkah 3) dan menciptakan dasar untuk pertumbuhan trombus lebih lanjut. Direproduksi dari

dalam perangkat tipe RBL, yang mengevaluasi kemampuan trombosit untuk menyumbat kartrid dengan agregat yang melaluinya seluruh darah dipompa.

Masalah koreksi fungsi trombosit

Kontrol fungsi trombosit adalah salah satu cara utama untuk memerangi trombosis arteri di hampir semua jenis. Awalnya, obat utama untuk tujuan ini adalah aspirin, yang menghambat sintesis tromboksan A2: terlepas dari sejarah obat yang panjang, hanya pada paruh kedua abad ke-20 kemampuannya untuk menekan pembentukan trombus dan mengurangi risiko serangan jantung. telah menemukan. Pada 1990-an, muncul agen antiplatelet yang efektif yang menyerang reseptor fibrinogen, integrin aPp3: abciximab, tirofiban, eptifibatide, serta obat domestik Monafram. Sekarang kedua kelas obat ini sebagian besar digantikan oleh inhibitor reseptor adenosin difosfat P2Y12: ini terutama clopidogrel, serta prasugrel, ticagrelor dan cangrelor. Saat ini, pekerjaan sedang dilakukan untuk menciptakan obat baru yang lebih efektif dan mengurangi risiko pendarahan.

Tugas yang lebih sulit adalah apa yang harus dilakukan ketika ada sedikit trombosit atau tidak berfungsi dengan baik? Teknologi penyiapan dan penyimpanan konsentrat trombosit untuk transfusi mencapai hasil terbaik pada pertengahan 1980-an, dan tidak ada terobosan mendasar sejak saat itu. Rentang hidup yang pendek, risiko tinggi komplikasi kekebalan dan infeksi pasien, kekurangan donor yang terus meningkat di seluruh dunia, dan tidak adanya pengganti buatan hingga baru-baru ini membuat situasi dengan transfusi trombosit sangat tidak memuaskan, mungkin yang paling bermasalah. antara semua komponen darah.

Selama beberapa dekade terakhir, satu-satunya yang tersedia untuk penggunaan klinis

Sebuah alternatif untuk trombokonsentrat konvensional adalah cryopreservation, yang memungkinkan untuk memperpanjang umur mereka untuk beberapa tahun. Tetapi tidak mungkin untuk memecahkan masalah mempertahankan sifat-sifat trombosit selama pembekuan dan pencairan sampai akhir. Selain itu, pembekuan sel-sel ini telah dikaitkan dengan begitu banyak kesulitan teknis yang, hingga saat ini, belum berhasil bersaing dengan penggunaan konsentrat trombosit non-beku.

Itulah sebabnya setiap tahun semakin banyak perhatian diberikan pada pekerjaan yang dimulai kembali pada 1950-an dalam penciptaan obat dan metode baru yang secara radikal dapat memperpanjang umur dan kemudahan penggunaan trombosit donor, dan bahkan menciptakan kemungkinan analog yang akan benar-benar ditinggalkan. penggunaan mereka. Obat antibakteri dan penghambat trombosit, kriopreservatif baru dan protokol pembekuan, trombosit terliofilisasi dan vesikel berbasis membran trombosit, eritrosit hemostatik dan liposom - ini bukan daftar lengkap pendekatan yang digunakan untuk mencapai tujuan ini. Beberapa dari mereka - misalnya, trombosit S1a$1x yang diliofilisasi - sudah dalam uji klinis aktif.

misteri trombosit

Subpopulasi. Salah satu misteri trombosit yang paling menarik adalah heterogenitasnya. Setelah aktivasi trombosit, 2 subpopulasi dengan sifat yang sangat berbeda terbentuk. Pembentukan mereka dikendalikan oleh jalur pensinyalan yang tidak sepenuhnya dipahami. Menariknya, salah satu dari subpopulasi ini mempercepat reaksi koagulasi, sementara yang lain mampu melakukan agregasi normal (Gbr. 7). Pemisahan 2 fungsi utama trombosit ini menarik, tetapi belum ada penjelasan yang diberikan.

Beras. 7. Subpopulasi trombosit darah berbeda secara radikal dalam kemampuannya untuk mempercepat reaksi koagulasi dan agregasi. Plot titik dari suspensi trombosit yang tidak aktif (kiri) dan yang diaktifkan (kanan) pada flow cytometer. Absis menunjukkan fluoresensi annexin V, penanda fosfatidilserin. Sumbu y menunjukkan fluoresensi fibrinogen. Dapat dilihat bahwa selama aktivasi, 2 subpopulasi trombosit terbentuk, yang satu lebih tinggi dari yang lain dalam hal tingkat fosfatidilserin, tetapi sama inferiornya dalam hal pengikatan fibrinogen. Direproduksi dari

Menghentikan pertumbuhan trombus. Di atas, kami mempertimbangkan urutan peristiwa yang terjadi selama pertumbuhan trombus trombosit. Salah satu masalah terbesar yang masih belum terselesaikan adalah pertanyaan untuk menghentikan pertumbuhan ini: mengapa dalam beberapa kasus itu naik hingga oklusi total kapal, sementara di lain kapal tetap bebas? Sekarang ada sekitar selusin hipotesis yang menjelaskan terbatasnya ukuran bekuan darah. Salah satu yang paling aktif dibahas adalah asumsi bahwa dengan penghancuran periodik bagian atas trombus yang tidak stabil, fibrin yang terbentuk di dalamnya terbuka. Namun, masalah ini masih jauh dari penyelesaian. Dengan probabilitas tinggi, mungkin ada lebih dari satu mekanisme penghentian, dan untuk pembuluh yang berbeda mekanisme ini mungkin berbeda.

Trombosit dan jalur kontak. Beberapa waktu lalu, para peneliti menunjukkan bahwa trombosit berpotensi mampu mengaktifkan pembekuan darah melalui jalur kontak. Kandidat utama untuk peran aktivator adalah polifosfat yang muncul dari butiran padat saat aktivasi, meskipun ada sanggahan dari sudut pandang ini. Tampaknya karena aktivasi ini, jalur kontak aktivasi koagulasi darah penting untuk pertumbuhan trombus trombosit, seperti yang telah ditunjukkan dalam penelitian terbaru. Penemuan ini memungkinkan kita untuk berharap pada penciptaan obat antitrombotik baru.

Mikrovesikel. Trombosit, ketika diaktifkan, membelah mikropartikel lipid, juga disebut mikrovesikel. Reseptor terkonsentrasi di permukaannya, dan oleh karena itu partikel ini memiliki aktivitas prokoagulan yang luar biasa: permukaannya 50-100 kali lebih aktif daripada permukaan trombosit yang diaktifkan. Mengapa trombosit melakukan ini tidak jelas. Namun, jumlah vesikel seperti itu dalam darah bahkan orang sehat adalah signifikan, dan meningkat secara signifikan pada pasien dengan berbagai penyakit kardiovaskular dan hematologi, yang berkorelasi dengan risiko trombosis. Mempelajari ini

vesikel terhambat oleh ukurannya yang kecil (30-300 nm), jauh lebih kecil dari panjang gelombang cahaya.

Trombosit dalam onkologi. Trombosit memainkan peran ganda dalam kanker. Di satu sisi, mereka meningkatkan risiko dan keparahan trombosis vena, yang merupakan karakteristik pasien dengan tumor. Di sisi lain, mereka secara langsung mempengaruhi perjalanan penyakit dengan mengatur angiogenesis, pertumbuhan tumor, dan metastasis melalui sejumlah mekanisme. Mekanisme interaksi trombosit dengan sel kanker sangat kompleks dan kurang dipahami, tetapi kepentingannya yang luar biasa sekarang tidak diragukan lagi.

Kesimpulan

Trombosit darah adalah peserta yang paling penting baik dalam hemostasis normal dan proses trombotik patologis, keadaan yang sangat penting untuk berbagai penyakit dan kondisi. Saat ini, kemajuan signifikan telah dibuat untuk memahami fungsi trombosit dan koreksi hemostasis trombosit, tetapi jumlah misteri ilmiah masih sangat besar: interaksi trombosit dengan hemostasis plasma, kompleksitas sinyal, mekanisme pengaturan. pertumbuhan dan menghentikan trombus trombosit. Baru-baru ini, informasi telah muncul tentang interaksi trombosit dengan sistem tubuh lain, yang menunjukkan peran penting mereka dalam kekebalan dan morfogenesis. Kesulitan utama di antara kesulitan praktis adalah kurangnya tes integral yang memadai dari fungsi trombosit dan kesulitan menormalkan fungsi ini.

terima kasih

Pekerjaan penulis didukung oleh hibah Yayasan Rusia untuk Penelitian Dasar 14-04-00670, serta hibah dari Program Penelitian Dasar dari Akademi Ilmu Pengetahuan Rusia "Biologi Molekuler dan Seluler" dan "Penelitian Dasar untuk Pengembangan Teknologi Biomedis".

LITERATUR

1. Sixma J.J., van den Berg A. Sumbatan hemostatik pada hemofilia A:

sebuah studi morfologi pembentukan sumbat hemostatik pada luka kulit waktu perdarahan pasien dengan hemofilia berat A. BrJ Haematol 1984;58(4):741-53.

2. Maxwell M.J., Westein E., Nesbitt W.S.

dkk. Identifikasi proses agregasi trombosit 2 tahap yang memediasi pembentukan trombus yang bergantung pada geser. Darah 2007;109(2):566-76.

3. Mazurov A.V. Fisiologi dan patologi trombosit. M.: GEOTAR-Media, 2011. 480 hal.

4 Michelson AD trombosit. edisi ke-3, 2013. London; Waltham, MA: Pers Akademik, xliv, 1353 hal.

5. Ohlmann P., Eckly A., Freund M. et al. ADP menginduksi agregasi trombosit parsial tanpa perubahan bentuk dan mempotensiasi agregasi yang diinduksi kolagen tanpa adanya Galphaq. Darah 2000;96(6):2134-9.

6. Putih J.G. Metode mikroskop elektron untuk mempelajari struktur dan fungsi trombosit. Metode Mol Biol 2004;272:47-63.

7. van Nispent tot Pannerden H., de Haas F., Geerts W. et al. Bagian dalam trombosit ditinjau kembali:

tomografi elektron mengungkapkan subtipe granula alfa tubular. Darah 2010;116(7):1147-56.

8. Blair P., Flaumenhaft R. Trombosit alfa-butiran: biologi dasar dan korelasi klinis. Blood Rev 2009;23(4):177-89.

9. Abaeva A.A., Canault M., Kotova Y.N. dkk. Trombosit prokoagulan membentuk "tutup" yang tertutup protein alfa-granula pada permukaannya yang mendorong perlekatan mereka

untuk agregat. J Biol Chem 2013;288(41):29621-32.

10. Kaplan Z.S., Jackson S.P. Peran

trombosit pada aterotrombosis. Hematologi

Program Pendidikan Am Soc Hematol 2011;2011:51-61.

11. Tanaka K.A., Key N.S., Levy J.H. Pembekuan darah: hemostasis dan regulasi trombin. Analg Anestesi 2009;108(5): 1433-46.

12. Panteleev M.A., Ananyeva N.M., Greco N.J. dkk. Dua subpopulasi

trombosit yang teraktivasi trombin berbeda dalam pengikatannya terhadap komponen kompleks pengaktif faktor X intrinsik. J Thromb Haemost 2005;3(11):2545-53.

13. Topalov N.N., Kotova Y.N., Vasil'ev S. A., Panteleev M.A. Identifikasi jalur transduksi sinyal yang terlibat dalam pembentukan subpopulasi trombosit saat aktivasi Br J Haematol 2012;157(1):105-15.

14. Yakimenko A.O., Verholomova F.Y., Kotova Y.N. dkk. Identifikasi kemampuan proagregator yang berbeda dari subpopulasi platelet teraktivasi. Biophys J 2012;102(10):2261-9.

15. Kotova Y.N., Ataullakhanov F.I., Panteleev M.A. Pembentukan trombosit berlapis diatur oleh sekresi granula padat dari adenosin 5"difosfat yang bekerja melalui reseptor P2Y12. J Thromb Haemost 2008;6(9):1603-5.

16. Uijttewaal WS, Nijhof E.J., Bronkhorst P.J. dkk. Kelebihan trombosit di dekat dinding yang disebabkan oleh migrasi lateral eritrosit dalam darah yang mengalir. Am J Physiol 1993;264(4 Pt 2):H1239-44.

17. Tokarev A.A., Butylin A.A., Ataullakhanov F.I. Adhesi trombosit dari aliran darah geser dikendalikan oleh tumbukan rebound dekat dinding dengan eritrosit. Biophys J 2011;100(4):799-808.

18. Turitto V.T., Weiss H.J. Sel darah merah: peran ganda mereka dalam pembentukan trombus. Sains 1980;207(4430)::541-3.

19. Nieswandt B., Brakebusch C., Bergmeieret W. et al. Glikoprotein VI tetapi bukan integrin alfa2beta1 penting untuk interaksi trombosit dengan kolagen. EMBO J 2001;20(9):2120-30.

20. Westein E., de Witt S., Lamers M. et al. Pemantauan pembentukan trombus in vitro dengan perangkat mikofluida baru. Trombosit 2012;23(7):501-9.

21. Favaloro E.J., Bonar R. Penilaian kualitas eksternal/pengujian kemahiran dan kontrol kualitas internal untuk PFA-100 dan PFA-200: pembaruan. Semin Thromb Hemost 2014;40(2):239-53.

22. Kristensen S.D., Würtz M., Grove E.L. et al., Penggunaan inhibitor glikoprotein IIb/IIIa kontemporer. Thromb Haemost 2012;107(2):215-24.

23 Ferri N., Corsini A.,

Bellosta S. Farmakologi dari penghambat reseptor P2Y12 baru: wawasan tentang sifat farmakokinetik dan farmakodinamik. Narkoba 2013;73(15):1681-709.

24. Bode A.P., Fischer T.H. Trombosit terliofilisasi: lima puluh tahun dalam pembuatan. Sel Artif Darah Pengganti Immobil Biotechnol 2007;35(1):125-33.

25. Heemskerk J.W., Mattheij N.J., Cosemans J.M. Koagulasi berbasis trombosit: populasi berbeda, fungsi berbeda.

J Thromb Haemost 2013;11(1):2-16.

26. Tosenberger A., ​​Ataullakhanov F., Bessonov N. et al. Pemodelan pertumbuhan trombus dalam aliran dengan metode DPD-PDE. J Theor Biol 2013;337:30-41.

27. Kembali J., Sanchez J., Elgue G. dkk. Trombosit manusia yang teraktivasi menginduksi aktivasi kontak yang dimediasi faktor XIIa. Biochem Biophys Res Commun 2010;391(1):11-7.

28. Müller F., Mutch N.J., Schenk W.A. dkk. Polifosfat trombosit adalah mediator proinflamasi dan prokoagulan in vivo. Sel 2009; 139(6):1143-56.

29. Faxälv L., Boknäs N., Ström J.O. dkk. Menguji polifosfat: bukti terhadap aktivasi faktor XII yang diinduksi trombosit. Darah 2013;122(23):3818-24.

30. Hagedorn I., Schmidbauer S., Pleines I. et al. Faktor XIIa inhibitor albumin manusia rekombinan Infestin-4 menghapuskan pembentukan trombus arteri oklusif tanpa mempengaruhi perdarahan. Sirkulasi 2010;121(13):1510-7.

31. Sinauridze E.I., Kireev D.A., Popenko N.Y. dkk. Membran mikropartikel trombosit memiliki aktivitas prokoagulan spesifik 50 hingga 100 kali lipat lebih tinggi daripada trombosit teraktivasi. Thromb Haemost 2007;97(3):425-34.

32. Hargett L.A., Bauer N.N. Tentang asal mikropartikel: Dari "debu trombosit"

menjadi mediator komunikasi antar sel. Pulm Circ 2013;3(2):329-40.

33. Riedl J., Pabinger I., Ay C. Trombosit pada kanker dan trombosis. Hamostaseologie 2014;34(1):54-62.

34. Sharma D., Brummel-Ziedins K.E., Bouchard B.A., Holmes C.E. Trombosit dalam perkembangan tumor: faktor inang yang menawarkan beberapa target potensial dalam pengobatan kanker. J Cell Physiol 2014;229(8):105-15.

trombosit- sel darah, yang jumlahnya 150-400 109 / l. Ini adalah struktur bulat non-nuklir bebas pigmen yang terlihat seperti cakram dengan diameter sekitar 3,6 mikron. Mereka dibentuk di sumsum tulang dari sel besar-megakariosit dengan fragmentasi sitoplasma, jumlah mereka dalam darah konstan. Namun, dengan penggunaan intensif, laju pembentukan trombosit baru dapat meningkat hingga 8 kali lipat. Stimulasi trombositopoiesis trombopoietin, yang diproduksi di hati dan sebagian lagi di ginjal. Aktivasi trombositopenia juga dapat dilakukan oleh faktor hematopoietik lainnya, khususnya interleukin (1/1-3, IL-6, IL-11), tetapi proses ini tidak spesifik dibandingkan dengan trombopoietin.

Struktur dan fungsi trombosit

Butiran padat () mengandung zat non-protein: ADP dan serotonin; faktor yang mempromosikan agregasi trombosit, serta antiplatelet ATP dan Ca2. Granula lisosom mengandung enzim hidrolitik, dan peroksisom mengandung katalase. Kulit terluar dari trombosit dan VKS ditutupi dengan glikoprotein, yang mendorong adhesi dan agregasi trombosit.

Pada membran trombosit terdapat reseptor untuk aktivator trombosit fisiologis (ATP, adrenalin, serotonin, tromboksan Aj).

Fungsi Trombosit:

Trombosit dengan cepat memulai sistem hemostasis. Karena adhesi (pelekatan) dan agregasi (penumpukan) trombosit, trombus putih terbentuk di pembuluh mikrovaskular.

lokal di daerah yang rusak mengeluarkan zat yang menyempitkan pembuluh darah;

mengaktifkan timbulnya koagulasi hemostasis dengan pembentukan trombus fibrin,

mengatur reaksi inflamasi lokal.

Saat istirahat, trombosit memiliki membran sitoplasma yang terinvaginasi secara lokal dan terhubung ke jaringan saluran yang disebut sistem tubulus terbuka (OCS) di dalam trombosit. Sistem kedua membran dalam (sistem tubulus padat) terbentuk dari retikulum endoplasma megakariosit dan tidak terhubung ke ruang ekstraseluler. Dalam sitoplasma trombosit yang tidak teraktivasi, terdapat granula, termasuk granula , granula padat, lisosom, dan granula peroksisom (Gbr. 9.20).

Sebagian besar dari semua di trombosit ada -granul yang mengandung berbagai peptida yang terlibat dalam mekanisme koagulasi, peradangan, kekebalan, perbaikan dan modulasi proses ini.

NASI. 9.20.

Aktivasi trombosit dilakukan hanya ketika endotel vaskular rusak dan ada kontak dengan matriks subendotel, di mana kolagen, protein lain, faktor von Willebrand (diproduksi oleh endotelium) berada. Reseptor membran trombosit mengikat faktor von Willebrand (VWF), kolagen, dan protein lain, yang menyebabkan aktivasi trombosit, adhesi, perubahan bentuk, dan sekresi ireversibel granula padat dan -granul. Perubahan bentuk trombosit disebabkan oleh sistem mikrofilamen kontraktil intraseluler, yang mengarah pada peningkatan permukaan membran mereka dan pelepasan melalui tubulus terbuka zat yang terlibat dalam hemostasis koagulasi.

Fibrinogen melekat pada permukaan membran karena perubahan keadaan glikoproteinnya, mendorong agregasi trombosit. Dalam trombosit, tromboksan A2 disintesis dari asam arakidonat, dilepaskan oleh membran sistem tubular padat, sintesis faktor pengaktif trombosit (TAF), yang meningkatkan agregasi trombosit dan mengaktifkan neutrofil. Pembentukan trombin juga meningkatkan agregasi trombosit.

Diketahui bahwa trombosit mensintesis dan disimpan dalam -granula faktor pembekuan darah V, VIII, XIII, faktor von Willebrand dan fibrinogen, yang dilepaskan oleh eksositosis.

Lipoprotein membran trombosit mengkatalisis beberapa faktor dalam pembentukan protrombinase. Trombosit teraktivasi mengikat trombin dan trombomodulin (komponen granula ), yang berkontribusi pada aktivasi protein antikoagulan C.

Trombosit mengeluarkan faktor pertumbuhan dari -granul ke daerah yang rusak, mempromosikan proliferasi fibroblas dan perbaikan jaringan yang rusak. Mereka memiliki hubungan dengan sistem kekebalan humoral dan mengikat IgG, yang masuk ke dalam sel melalui endositosis, disimpan dalam granula-a, untuk disekresikan kemudian oleh eksositosis.

NASI. 9.21. Urutan tahapan homeostasis vaskular-trombosit. EF - faktor von Willebrand, PF-6 - trombostenin

Trombosit, trombosit, dalam darah manusia segar memiliki penampilan tubuh kecil tidak berwarna berbentuk bulat, oval atau fusiform berukuran 2-4 mikron. Mereka dapat bergabung (mengaglutinasi) menjadi kelompok kecil atau besar (Gbr. 4.29). Kuantitasnya dalam darah manusia berkisar dari 2,0×10 9 /l hingga 4,0×10 9 /l. Trombosit adalah fragmen non-nuklir sitoplasma, dipisahkan dari megakariosit - sel raksasa sumsum tulang.

Trombosit dalam aliran darah memiliki bentuk cakram bikonveks. Saat mewarnai apusan darah dengan azure-eosin, trombosit mengungkapkan bagian perifer yang lebih terang - hialomer dan bagian granular yang lebih gelap - granulomer, struktur dan warnanya dapat bervariasi tergantung pada tahap perkembangan trombosit. Dalam populasi trombosit, ada bentuk yang lebih muda dan lebih berdiferensiasi dan menua. Hyalomer pada lempeng muda berubah menjadi biru (basofilen), dan pada lempeng dewasa berubah menjadi merah muda (oksifil). Bentuk muda dari trombosit lebih besar dari yang lama.

Ada 5 jenis utama trombosit dalam populasi trombosit:

1) muda - dengan hialomer biru (basofilik) dan butiran azurofilik tunggal dalam granulomer ungu kemerahan (1-5%);

2) matang - dengan hialomer sedikit merah muda (oksifilik) dan granularitas azurofilik yang berkembang dengan baik di granulomer (88%);

3) yang lama - dengan hialomer dan granulomer yang lebih gelap (4%);

4) degeneratif - dengan hialomer biru keabu-abuan dan granulomer ungu tua pekat (hingga 2%);

5) bentuk iritasi raksasa - dengan hialomer ungu-merah muda dan granulomer ungu, berukuran 4-6 mikron (2%).

Pada penyakit, rasio berbagai bentuk trombosit dapat berubah, yang diperhitungkan saat membuat diagnosis. Peningkatan jumlah bentuk muda diamati pada bayi baru lahir. Pada penyakit onkologis, jumlah trombosit tua meningkat.

Plasmalemma memiliki lapisan glikokaliks yang tebal (15-20 nm), membentuk invaginasi dengan tubulus keluar, juga ditutupi dengan glikokaliks. Membran plasma mengandung glikoprotein yang berfungsi sebagai reseptor permukaan yang terlibat dalam proses adhesi dan agregasi trombosit.

Sitoskeleton dalam trombosit berkembang dengan baik dan diwakili oleh mikrofilamen aktin dan bundel (masing-masing 10-15) mikrotubulus yang tersusun melingkar dalam hiolomer dan berdekatan dengan bagian dalam plasmolemma (Gbr. 46-48). Elemen sitoskeleton mempertahankan bentuk trombosit, berpartisipasi dalam pembentukan prosesnya. Filamen aktin terlibat dalam pengurangan volume (retraksi) bekuan darah yang terbentuk.

Ada dua sistem tubulus dan tubulus di trombosit, yang terlihat jelas di hialomer dengan mikroskop elektron. Yang pertama adalah sistem kanal terbuka yang terkait, seperti yang telah disebutkan, dengan invaginasi plasmolemma. Melalui sistem ini, isi butiran trombosit dilepaskan ke dalam plasma dan terjadi penyerapan zat. Yang kedua adalah apa yang disebut sistem tubular padat, yang diwakili oleh kelompok tabung dengan bahan amorf padat elektron. Ini menyerupai retikulum endoplasma halus, terbentuk di aparatus Golgi. Sistem tubular padat adalah tempat sintesis siklooksigenase dan prostaglandin. Selain itu, tubulus ini secara selektif mengikat kation divalen dan bertindak sebagai reservoir ion Ca2+. Zat-zat di atas merupakan komponen penting dari proses pembekuan darah.

TETAPI

B

PADA

G

D

Beras. 4.30 Trombosit. A - trombosit dalam apusan darah tepi. B - diagram struktur trombosit. B - TEM. D - trombosit yang tidak diaktifkan (ditandai dengan panah) dan diaktifkan (ditandai dengan dua panah), SEM. D - trombosit yang menempel pada dinding aorta di area kerusakan lapisan endotel (D, D - menurut Yu.A. Rovenskikh).1 - mikrotubulus; 2 - mitokondria; 3 – butiran-u; 4 - sistem tubulus padat; 5 - mikrofilamen; 6 - sistem tubulus yang terkait dengan permukaan; 7 - glikokaliks; 8 - tubuh padat; 9 - retikulum sitoplasma.

Pelepasan Ca 2+ dari tubulus ke dalam sitosol diperlukan untuk memastikan fungsi trombosit (adhesi, agregasi, dll.).

Organel, inklusi dan butiran khusus ditemukan di granulomer. Organel diwakili oleh ribosom (dalam lempeng muda), elemen retikulum endoplasma, aparatus Golgi, mitokondria, lisosom, peroksisom. Ada inklusi glikogen dan feritin dalam bentuk butiran kecil.

Butiran khusus dalam jumlah 60-120 merupakan bagian utama dari granulomer dan diwakili oleh dua jenis utama - butiran alfa dan delta.

Jenis pertama: a-butiran- ini adalah butiran terbesar (300-500 nm) dengan bagian tengah berbutir halus yang dipisahkan dari membran sekitarnya oleh ruang cahaya kecil. Mereka mengandung berbagai protein dan glikoprotein yang terlibat dalam proses pembekuan darah, faktor pertumbuhan, enzim hidrolitik.

Protein paling penting yang disekresikan selama aktivasi trombosit termasuk faktor trombosit 4, p-tromboglobin, faktor von Willebrand, fibrinogen, faktor pertumbuhan (PDGF trombosit, transformasi TGFp), faktor koagulasi - tromboplastin; glikoprotein termasuk fibronektin, trombospondin, yang memainkan peran penting dalam proses adhesi trombosit. Protein pengikat heparin (mengencerkan darah, mencegah pembekuan darah) termasuk faktor 4 dan p-tromboglobulin.

Jenis butiran kedua - -butiran(butiran delta) - diwakili oleh benda padat berukuran 250-300 nm, di mana terdapat inti padat yang terletak eksentrik yang dikelilingi oleh membran. Ada ruang cahaya yang terdefinisi dengan baik di antara crypts. Komponen utama granula adalah serotonin, terakumulasi dari plasma, dan amina biogenik lainnya (histamin, adrenalin), Ca 2+ , ADP, ATP dalam konsentrasi tinggi.

Selain itu, ada jenis butiran kecil ketiga (200-250 nm), diwakili oleh lisosom (kadang-kadang disebut butiran A) yang mengandung enzim lisosom, serta mikroperoksisom yang mengandung enzim peroksidase. Isi granula setelah aktivasi pelat dilepaskan melalui sistem saluran terbuka yang terkait dengan plasmalemma.

Fungsi utama trombosit adalah partisipasi dalam proses pembekuan darah - reaksi pelindung tubuh terhadap kerusakan dan mencegah kehilangan darah. Trombosit mengandung sekitar 12 faktor yang terlibat dalam pembekuan darah. Ketika dinding pembuluh rusak, lempeng dengan cepat beragregasi, menempel pada benang fibrin yang dihasilkan, menghasilkan pembentukan trombus yang menutup luka. Dalam proses trombosis, beberapa tahap diamati dengan partisipasi banyak komponen darah.

Fungsi penting dari trombosit adalah partisipasi mereka dalam metabolisme serotonin. Trombosit praktis satu-satunya elemen darah di mana cadangan serotonin terakumulasi dari plasma. Pengikatan serotonin pada trombosit terjadi dengan bantuan faktor molekul tinggi plasma darah dan kation divalen.

Dalam proses pembekuan darah, serotonin dilepaskan dari trombosit yang kolaps, yang bekerja pada permeabilitas pembuluh darah dan kontraksi sel otot polos pembuluh darah. Serotonin dan produk metabolismenya memiliki efek antitumor dan radioprotektif. Penghambatan pengikatan serotonin oleh trombosit ditemukan pada sejumlah penyakit darah - anemia ganas, purpura trombositopenik, myelosis, dll.

Umur trombosit rata-rata 9-10 hari. Trombosit yang menua difagositosis oleh makrofag limpa. Penguatan fungsi destruktif limpa dapat menyebabkan penurunan yang signifikan dalam jumlah trombosit dalam darah (trombositopenia). Untuk menghilangkannya, diperlukan operasi - pengangkatan limpa (splenektomi).

Dengan penurunan jumlah trombosit, misalnya, dengan kehilangan darah, trombopoietin terakumulasi dalam darah - glikoprotein yang merangsang pembentukan pelat dari megakariosit sumsum tulang.

© Penggunaan materi situs hanya sesuai dengan administrasi.

Trombosit (PLT) - trombosit (plak Bizzocero), fragmen megakariosit, memainkan peran penting dalam tubuh manusia. Sedikit diaktifkan bahkan dalam kondisi normal, mereka selalu bergegas ke area kerusakan pembuluh darah untuk menghentikan pendarahan bersama dengan pembentukan endotel. Trombosit melakukan hemostasis mikrosirkulasi (primer, vaskular-trombosit), yang terjadi di pembuluh darah kecil. Reaksi pembekuan darah di pembuluh darah besar diwujudkan dengan mekanisme hemostasis sekunder, yang juga disebut makrosirkulasi atau hemokoagulasi.

pembentukan trombosit

Di mana mean emas?

Sama seperti elemen pembentuk lainnya, trombosit dapat memiliki kecenderungan untuk menurun dan meningkat, yang seringkali merupakan patologi, karena norma sel-sel ini dalam darah adalah 200-400 * 10 9 / l dan tergantung pada keadaan fisiologis organisme. Jumlah mereka bervariasi tergantung pada waktu hari dan musim. Diketahui bahwa pada malam hari dan musim semi jumlah trombosit turun. Tingkat trombosit pada wanita lebih rendah (180-320 x 10 9 / l), dan saat menstruasi jumlahnya bisa berkurang hingga 50%. Namun, dalam hal ini, trombosit secara fisiologis diturunkan sebagai reaksi protektif (pencegahan trombosis pada wanita), sehingga kondisi ini tidak memerlukan pengobatan.

Jumlah trombosit dalam darah sedikit lebih rendah selama kehamilan, tetapi jika levelnya turun di bawah 140 x 10 9 /l, maka tindakan harus segera diambil karena risiko perdarahan saat melahirkan meningkat.

Acara khusus juga dilakukan ketika Penyakit yang menyebabkan trombosit rendah adalah:

• Pelanggaran hematopoiesis di sumsum tulang;
• Penyakit hati;

Peningkatan trombosit juga dapat bersifat fisiologis, misalnya setelah tinggal di daerah pegunungan yang tinggi atau selama pekerjaan fisik yang berat. Tetapi ketika trombosit meningkat dalam darah karena kondisi patologis, maka risikonya meningkat dan, karena trombosit bertanggung jawab atas pembekuan darah, dan kelebihan jumlah mereka akan menyebabkan peningkatan trombosis.

Pada anak-anak setelah satu tahun, tingkat sel darah merah tidak berbeda dengan orang dewasa. . Hingga satu tahun, jumlah trombosit dalam darah sedikit lebih rendah dan berjumlah 150-350 x 10 9 / l. Norma pada bayi baru lahir dimulai pada level 100 x 10 9 / l.

Namun, harus diingat bahwa ketika trombosit dalam darah anak meningkat, ini akan menjadi faktor yang mengkhawatirkan dan dalam kasus seperti itu, patologi berikut dapat diasumsikan:

Singkatnya, ini akan menjadi kesempatan untuk berkonsultasi dengan dokter tanpa gagal, tetapi pertama-tama Anda harus melakukan tes darah lagi untuk mengesampingkan kesalahan.

Trombosit dalam tes darah umum

Meskipun diagnostik laboratorium klinis modern menggunakan metode lama yang telah terbukti untuk pewarnaan dan penghitungan trombosit pada kaca, ia juga menggunakan studi populasi trombosit menggunakan penganalisis hematologi, yang kemungkinannya jauh lebih luas.

Penganalisis hematologi memungkinkan Anda untuk menentukan yang tidak hanya diukur, tetapi juga disajikan dalam bentuk histogram, dengan elemen lama berada di sisi kiri, dan elemen muda di kanan. Ukuran sel memungkinkan untuk menilai aktivitas fungsional trombosit, dan semakin tua mereka, semakin kecil ukuran dan aktivitasnya.

a - trombosit normal b - trombosit dengan volume berbeda (diucapkan anisositosis) c - makroplatelet besar

Peningkatan MPV diamati dengan anemia setelah perdarahan, trombodistrofi makrositik Bernard-Soulier dan kondisi patologis lainnya. Penurunan indikator ini terjadi dalam kasus-kasus berikut:

• kehamilan;
• anemia defisiensi besi;
• peradangan;
• tumor;
• infark miokard;
• kolagenosa;
• penyakit tiroid;
• Penyakit ginjal dan hati;
• Gangguan pada sistem pembekuan darah;
• Penyakit darah.

Indikator lain dari kualitas trombosit adalah relatif, yang menunjukkan tingkat perubahan ukuran trombosit (anisositosis), dengan kata lain, itu adalah indikator heterogenitas sel.

Penyimpangannya menunjukkan patologi seperti:

1. Anemia;
2. proses inflamasi;
3. infestasi cacing;
4. Neoplasma ganas.

Kemampuan trombosit untuk menempel pada permukaan yang asing bagi mereka (kolagen, asam lemak jenuh, yang membentuk dasar dari plak aterosklerotik) disebut adhesi, dan kemampuan untuk menempel satu sama lain dan membentuk konglomerat disebut agregasi. Kedua konsep ini terkait erat.

Agregasi trombosit merupakan bagian integral dari proses penting seperti trombosis, yang merupakan perlindungan utama terhadap perdarahan jika terjadi kerusakan pada dinding pembuluh darah. Namun, kecenderungan peningkatan pembentukan trombus (atau patologi lain) dapat menyebabkan agregasi trombosit yang tidak terkontrol dan disertai dengan trombosis patologis.

Darah menggumpal saat kontak dengan permukaan asing, karena hanya endotel vaskular yang merupakan lingkungan asalnya, di mana ia tetap dalam keadaan cair. Tetapi begitu pembuluh darah rusak, lingkungan segera menjadi asing dan trombosit mulai bergegas ke lokasi kecelakaan, di mana mereka mengaktifkan diri untuk membentuk gumpalan darah dan "menambal" lubang. Ini adalah mekanisme hemostasis primer dan dilakukan jika terjadi cedera pada pembuluh darah kecil (hingga 200 l). Akibatnya, trombus putih primer terbentuk.

Ketika kapal besar rusak, faktor kontak (XII) diaktifkan secara spontan, yang mulai berinteraksi dengan faktor XI dan, sebagai enzim, mengaktifkannya. Ini diikuti oleh kaskade reaksi dan transformasi enzimatik, di mana faktor koagulasi mulai mengaktifkan satu sama lain, yaitu, semacam reaksi berantai terjadi, akibatnya faktor-faktor tersebut terkonsentrasi di lokasi kerusakan. Di sana, bersama dengan kofaktor lain (V dan kininogen dengan berat molekul tinggi), faktor pembekuan darah VIII (globulin antihemofilik) juga datang, yang bukan merupakan enzim itu sendiri, tetapi sebagai protein tambahan, ia mengambil bagian aktif dalam proses koagulasi.

Interaksi antara faktor IX dan X terjadi pada permukaan trombosit yang diaktifkan, yang telah bersentuhan dengan pembuluh darah yang rusak dan reseptor khusus telah muncul pada membrannya. Faktor X aktif berubah menjadi trombin, dan pada saat ini, faktor II juga menempel pada permukaan trombosit. Ada juga protein tambahan - faktor VIII.

Proses pembekuan darah dapat dimulai dengan kerusakan permukaan endotel (dinding pembuluh darah), kemudian dipicu mekanisme internal pembentukan protrombinase. Pembekuan juga dapat dipicu oleh kontak darah dengan tromboplastin jaringan, yang tersembunyi di dalam sel jaringan jika membrannya utuh. Tapi itu keluar ketika kapal rusak (mekanisme eksternal untuk pembentukan protrombinase). Pemicu mekanisme ini atau itu menjelaskan fakta bahwa waktu pembekuan sampel darah kapiler (rute eksternal) adalah 2-3 kali lebih kecil daripada sampel darah vena (rute internal).

Untuk menentukan waktu yang dibutuhkan darah untuk membeku, tes laboratorium berdasarkan mekanisme ini digunakan. Studi koagulasi Lee-White dilakukan dengan mengambil darah ke dalam dua tabung reaksi dari vena, sedangkan pembentukan protrombinase di sepanjang jalur eksternal dipelajari menurut Sukharev (darah dari jari). Tes pembekuan darah ini cukup sederhana untuk dilakukan. Selain itu, tidak memerlukan persiapan khusus (diminum saat perut kosong) dan banyak waktu untuk produksinya, karena darah kapiler (seperti yang disebutkan di atas) mengental 2-3 kali lebih cepat daripada darah vena. Norma waktu pembekuan darah menurut Sukharev adalah dari 2 hingga 5 menit. Jika waktu pembentukan bekuan dipersingkat, maka terjadi percepatan pembentukan protrombinase dalam tubuh. Ini terjadi dalam kasus berikut:

• Setelah yang masif, yang ditanggapi oleh sistem koagulasi;
• DIC-sindrom pada tahap 1;
• Dampak negatif kontrasepsi oral.

Pembentukan protrombinase yang tertunda akan diekspresikan dengan perpanjangan waktu pembentukan bekuan dan akan diamati dalam kondisi tertentu:

1. Defisiensi mendalam dari faktor I, VIII, IX, XII;
2. koagulopati herediter;
3. kerusakan hati;
4. Pengobatan dengan antikoagulan (heparin).

Bagaimana cara menaikkan kadar trombosit?

Ketika trombosit rendah dalam darah, beberapa orang mencoba menaikkannya sendiri dengan bantuan pengobatan alternatif, menggunakan makanan yang meningkatkan trombosit darah dalam darah dan herbal penyembuhan.

Perlu dicatat bahwa diet untuk meningkatkan trombosit darah dapat dianggap benar-benar royal:

• bubur soba;
• Daging merah, dimasak dalam varian apa pun;
• Semua jenis ikan;
• telur dan keju;
• Hati (lebih disukai daging sapi);
• Kaldu daging, sosis, dan pate yang kaya;
• Salad jelatang, kubis, bit, wortel, paprika dibalut dengan minyak wijen;
• Semua jenis sayuran (adas, seledri, peterseli, bayam);
• Berry rowan, pisang, delima, jus rosehip, apel hijau, kacang-kacangan.

Orang mengatakan bahwa Anda dapat meningkatkan trombosit dengan obat tradisional jika Anda makan 1 sendok makan minyak wijen saat perut kosong (tiga kali sehari) atau minum jus jelatang segar (50 ml) dengan jumlah susu yang sama. Tetapi semua ini mungkin terjadi jika trombosit sedikit berkurang dan alasan penurunan levelnya diklarifikasi. Atau sebagai tindakan tambahan dalam pengobatan utama, yang dilakukan di rumah sakit dan terdiri dari transfusi massa trombus donor, yang disiapkan khusus untuk pasien tertentu.

Perawatan dikaitkan dengan kesulitan tertentu, karena trombosit tidak hidup lama, oleh karena itu konsentrat trombosit disimpan tidak lebih dari 3 hari di "meja putar" khusus (sel harus terus-menerus dicampur selama penyimpanan). Selain itu, untuk peningkatan kualitatif trombosit, mereka harus berakar di tubuh inang baru, oleh karena itu, sebelum transfusi, pemilihan individu dibuat sesuai dengan sistem leukosit HLA (analisis mahal dan melelahkan).

Kurangi jumlah trombosit

Menurunkan trombosit lebih mudah daripada menaikkannya. Persiapan yang mengandung asam asetilsalisilat (aspirin) berkontribusi pada pengenceran darah dan dengan demikian mengurangi tingkat trombosit. Juga, untuk tujuan yang sama, mereka juga digunakan, yang diresepkan oleh dokter yang merawat, dan bukan oleh tetangga di pendaratan.

Pasien sendiri hanya dapat membantu dokter dengan menghentikan kebiasaan buruk (merokok, alkohol), makan makanan yang kaya yodium (makanan laut) dan mengandung asam askorbat, sitrat, malat. Ini adalah anggur, apel, cranberry, lingonberry, blueberry, buah jeruk.

Resep tradisional untuk menurunkan kadar trombosit merekomendasikan tingtur bawang putih, bubuk akar jahe, yang diseduh sebagai teh (1 sendok makan bubuk per cangkir air mendidih), dan kakao tanpa gula di pagi hari dengan perut kosong.

Semua ini tentu saja baik, tetapi harus diingat bahwa semua kegiatan harus dilakukan di bawah pengawasan dokter, karena unsur darah seperti trombosit tidak terlalu tunduk pada metode pengobatan tradisional.

Video: apa yang dikatakan tes darah?

Sistem hemostasis diwakili oleh tiga komponen utama - dinding pembuluh darah, elemen yang terbentuk, terutama trombosit, dan protein plasma. Semua komponen ini terlibat dalam dua fungsi utama sistem hemostasis. Yang pertama adalah menjaga darah dalam keadaan cair. Ini dipastikan oleh resistensi trombosis endotel, yang memainkan peran penghalang antara darah yang bersirkulasi dan struktur subendotel, sirkulasi dalam aliran darah dari bentuk trombosit dan faktor pembekuan darah yang tidak aktif, serta antikoagulan alami dan komponen sistem fibrinolitik. Kedua, fungsi yang tidak kalah pentingnya dari sistem hemostasis adalah melindungi tubuh dari pendarahan ketika integritas dinding pembuluh darah rusak. Fungsi ini juga melibatkan semua komponen yang membentuk sistem hemostasis. Karena reaksi neurohumoral yang kompleks, mekanisme umpan balik positif dan negatif jelas berfungsi dalam sistem hemostatik, yang menciptakan kondisi untuk membatasi diri proses, akibatnya aktivasi lokal mekanisme hemostatik, misalnya, di lokasi cedera pembuluh darah pada orang sehat, tidak berubah menjadi pembekuan darah umum.

Irama dinding pembuluh darah dalam hemostasis
Sudah sepersekian detik setelah cedera, kontraksi vaskular berkembang di zona cedera: awalnya karena refleks akson, kemudian, reaksi spastik neurohumoral dipertahankan selama kurang lebih 2 jam oleh zat endotel aktif (endotelin-1, angiotensin, dan pengaktifan platelet). faktor - PAF), serta agen trombosit ( serotonin, adrenalin, tromboksan A2, PAF).

Dengan kontraksi kapal, ukuran cacat agak berkurang. Selain itu, agunan meluas di area terdekat, dan tekanan darah di area yang rusak menurun. Reaksi vaskular ini agak mengurangi intensitas kehilangan darah. Namun, partisipasi dinding pembuluh darah dalam pelaksanaan hemostasis tidak terbatas pada kontraksi sederhana, seperti yang diasumsikan sebelumnya, tetapi ditentukan oleh interaksi dengan semua komponen mekanisme hemostatik yang kompleks. Dengan demikian, kerusakan pada endotelium dinding pembuluh darah disertai dengan paparan faktor jaringan ke darah, yang memulai aktivasi pembekuan darah. Selain itu, sel endotel mensintesis dan mensekresi aktivator plasminogen jaringan (t-PA), yang sangat penting dalam mengaktifkan fibrinolisis dan mencegah trombosis. Sel endotel juga memiliki efek yang signifikan pada fungsi trombosit. Mereka mensintesis dan terus-menerus mengeluarkan ke dalam plasma faktor von Willebrand, yang diperlukan untuk adhesi dan agregasi trombosit, dan juga menghasilkan prostasiklin dan oksida nitrat, penghambat alami agregasi trombosit.

Singkatnya, partisipasi dinding pembuluh darah dalam reaksi sistem hemostasis beragam. Ini harus diperhitungkan ketika mempelajari patogenesis penyakit yang disebabkan oleh gangguan pembuluh darah.

Peran trombosit dalam hemostasis
Trombosit utuh adalah fragmen megakariosit sumsum tulang yang bebas inti, terorganisir secara kompleks dan aktif secara metabolik. Mereka beredar dalam darah sebagai diskosit dengan permukaan yang hampir halus selama rata-rata 10 hari. Kandungannya dalam darah orang dewasa adalah 150-400x109 / l, ukurannya 1x3 mikron. Dalam keadaan utuh, trombosit tidak berinteraksi dengan endotelium utuh dari dinding pembuluh darah dan dengan sel darah lainnya.

Trombosit memiliki organisasi ultrastruktural yang kompleks, yang memastikan bahwa mereka melakukan peran multifungsi dalam tubuh. Membran fosfolipid dua lapis mereka mencakup sejumlah besar protein dan glikoprotein yang melakukan fungsi reseptor, yang memungkinkan sel untuk merespons secara sensitif terhadap perubahan kondisi lingkungan, berinteraksi dengan banyak zat pengaktif, agen sel darah, dan rangsangan permukaan. Fosfolipid membran sendiri memainkan peran penting dalam aktivitas koagulasi trombosit setelah stimulasi mereka. Trombosit yang dirangsang menjadi bulat (sferosit), membentuk sejumlah besar proses (filopodia), yang memfasilitasi kontak mereka satu sama lain selama reaksi selanjutnya.

Trombosit mengandung dua sistem membran intraseluler yang berbeda: tubular terbuka dan tubular padat. Yang pertama adalah invaginasi membran plasma (plasmalemma), yang meningkatkan luas permukaan sel, dan berfungsi sebagai sistem transportasi untuk sekresi isi granula penyimpanan atau masuknya zat tertentu ke dalam sel (untuk misalnya serotonin). Sistem tubular padat mirip dengan retikulum endoplasma sel lain. Ion Ca2+ disimpan di dalamnya dan prostaglandin terbentuk.Dalam sitoplasma trombosit ada sejumlah besar protein terpolimerisasi dan non-polimerisasi yang terkait dengan sistem kontraktilnya (protein ini juga disebut protein sitoskeletal). Aktivasi dan penataan ulang mereka dalam sel yang distimulasi memberikan reaksi fungsional terakhir yang paling penting: sekresi isi granula penyimpanan, konsolidasi agregat trombosit, dan retraksi bekuan fibrin. Ini juga mengandung sebagian besar organel subseluler: mitokondria, peroksisom, butiran glikogen.

Yang sangat penting untuk pelaksanaan fungsi trombosit adalah granula penyimpanan: -granul, -granul (atau badan padat) dan -granul (butiran lisosom). Ketika trombosit diaktifkan, bentuk, organisasi struktural, metabolisme, dan reaksi biokimia berubah. Semua ini bersama-sama mendasari penerapan sel-sel ini dari reaksi fungsionalnya, dan terutama hemostatik.

Studi tentang urutan perkembangan reaksi hemostatik setelah kerusakan pada pembuluh kaliber kecil menyebabkan isolasi yang disebut hemostasis primer, yang mencakup proses penghentian awal awal perdarahan karena kontraksi pembuluh darah dan pembentukan sumbat trombosit. (itulah sebabnya ia juga disebut hemostasis vaskular-trombosit) dan hemostasis sekunder, yang menyelesaikan semuanya, memproses dan akhirnya menghentikan pendarahan dengan memperkuat sumbat trombosit oleh gumpalan fibrin yang dihasilkan. Rantai reaksi trombosit yang berurutan dan terhubung secara umum disebut hemostasis trombosit. Fase pertama adalah adhesi.

Adhesi trombosit - adhesi mereka ke struktur subendotel setelah pengangkatan (kerusakan) endotelium. Ini didasarkan pada mekanisme interaksi antara reseptor trombosit dan struktur subendotel. Selanjutnya, trombosit darah yang bersirkulasi di area kerusakan menempel pada trombosit yang sudah melekat dan satu sama lain. Fase hemostasis ini disebut agregasi reversibel, atau primer. Akibatnya, ia membentuk sumbat trombosit rapuh yang dapat ditembus darah, yang tidak menghentikan pendarahan, tetapi mengurangi jumlah kehilangan darah, dan pada tahap selanjutnya hanya plasma yang merembes melalui sumbat trombosit primer. Pada tahap ini, hubungan antara trombosit masih rapuh, dan beberapa di antaranya dapat terputus oleh aliran darah, tetapi pelat baru yang dibawa dengan darah melekat pada agregat.

Fase berikutnya disebut fase sekresi dan agregasi ireversibel. Sebagai hasil dari reaksi fase ini, trombosit saling mendekat dan menutup erat cacat yang ada di pembuluh darah kecil - sumbat trombosit menjadi ireversibel dan kedap darah, pendarahan berhenti. Dengan demikian, hemostasis primer (vaskular-trombosit) tercapai, yaitu penghentian awal awal perdarahan karena kontraksi vaskular dan pembentukan sumbat trombosit yang ireversibel. Aktivasi koagulasi, yang dimulai segera setelah kerusakan pada dinding pembuluh darah, dengan stimulasi berurutan dari banyak protein koagulasi, mengarah pada pembentukan bekuan fibrin padat, yang memperkuat agregat trombosit yang ireversibel.

Reaksi kontraktil trombosit pada sumbat hemostatik trombosit-fibrin menyebabkan retraksi, yang selanjutnya meningkatkan kekuatan struktur ini. Akibatnya, pada orang yang sehat, sumbat hemostatik dapat menahan tekanan darah tinggi setelah pemulihan sirkulasi darah pada pembuluh darah berukuran sedang yang rusak, yang biasanya terjadi setelah 2 jam.Jadi, pada tahap ini, hemostasis akhir atau sekunder terjadi tekanan darah, reaksi vaskular-trombosit tidak hanya memberikan hemostasis primer, tetapi juga akhir. Pembentukan fibrin dalam hal ini bukanlah kondisi untuk penghentian terakhir pendarahan. Akibatnya, ketika melakukan tes untuk durasi utama perdarahan, ketika kerusakan standar dosis pada pembuluh darah kecil (arteriol dan kapiler) dilakukan, menjadi mungkin untuk mengevaluasi efektivitas hanya reaksi vaskular-trombosit dengan waktu perdarahan.

Penting untuk memikirkan proses biokimia dan molekuler utama yang diamati selama aktivasi trombosit dan menentukan implementasi reaksi fungsional trombosit. Tanpa memahami hal ini, tidak mungkin untuk menafsirkan hasil penelitian secara memadai dalam kondisi normal dan patologis, untuk mengkarakterisasi mekanisme utama gangguan hemostasis trombosit dalam kondisi patologis. Seperti disebutkan di atas, dalam keadaan utuh, trombosit tidak berinteraksi dengan dinding pembuluh darah yang utuh atau dengan sel darah lainnya. Dalam keadaan aktif - setelah kontak dengan struktur subendotel dan zat perangsang dari zona yang rusak - trombosit sangat cepat memperoleh kemampuan untuk berinteraksi dengan dinding pembuluh darah yang rusak, dengan sel darah, dan satu sama lain. Awal transisi dari satu keadaan ke keadaan lain adalah aksi pada reseptor trombosit spesifik zat yang eksogen untuk sel-sel ini dalam sirkulasi normal - yang disebut agonis. Agonis, sebagai suatu peraturan, tidak dapat menembus membran trombosit, tetapi mampu berinteraksi dengan reseptor spesifik pada plasmalemma mereka.

Agen pengaktif trombosit diwakili oleh dua kelompok:
1) protein perekat subendothelium yang tidak larut, yang dengannya trombosit dapat bersentuhan setelah kerusakan pada endotelium dan dengan kerusakan jaringan yang lebih dalam;
2) agonis larut alami hadir dalam jaringan yang rusak atau dihasilkan selama stimulasi sel.

Kelompok pertama agen aktif memulai adhesi trombosit. Adhesi dalam mekanismenya adalah proses kompleks yang dimulai ketika trombosit bersentuhan dengan permukaan subendotel, yang asing bagi mereka. Sebagai hasil interaksi reseptor adhesi trombosit spesifik dengan struktur matriks subendotel, trombosit teraktivasi, berubah bentuk, dan melekat pada struktur tersebut. Ini memuncak dalam adhesi ireversibel, atau menyebar, pada permukaan substrat. Pada fase penyebaran, area kontak dan tingkat interaksi molekuler trombosit dengan subendotel meningkat tajam, yang membuat sel-sel ini dan agregat trombosit melekat kuat pada jaringan dinding pembuluh yang rusak.

Dalam tubuh normal, dinding pembuluh darah yang rusak kaya akan protein adhesif dari matriks ekstraselular, dan terutama kolagen, yang jenisnya berbeda secara signifikan dalam reaktivitasnya terhadap trombosit. Protein perekat lain dari subendothelium termasuk faktor von Willebrand (vW), fibronektin, vitronektin, laminin, dan trombospondin. Fibrinogen juga diadsorpsi dari plasma pada jaringan yang rusak. Interaksi dengan kolagen dan protein perekat lain dari subendothelium dimediasi oleh beberapa reseptor glikoprotein (GP) trombosit: GPia-IIa, GPVI, GPIV, GPIIb-IIIa dan integrin lainnya, dan dalam kasus koneksi yang dimediasi oleh faktor von Willebrand, oleh kompleks GPIb-IX-V dan juga GPIIb-IIIa. Dalam kondisi patologis, permukaan reaktif mungkin termasuk lapisan endotel yang berubah secara patologis, plak aterosklerotik, katup jantung buatan, dan pirau vaskular. Adhesi trombosit darah ke struktur subendotel, terutama pada kolagen, berbeda dalam mekanismenya di zona sirkulasi dengan laju aliran rendah (dan tegangan geser rendah) dan kecepatan aliran darah tinggi (dan tegangan geser tinggi).

Pada tegangan geser rendah (dalam kasus kerusakan pada dinding arteri besar, vena), trombosit menempel pada kolagen dan fibronektin secara langsung melalui GPIa-IIa dan GP VI yang diekspresikan. Pada tegangan geser tinggi (dalam kasus kerusakan arteri kecil dan arteriol), adhesi trombosit ke kolagen dimediasi oleh kofaktor adhesi dengan berat molekul tinggi (hingga 20 juta Da). Di area kerusakan, kofaktor ini terletak bersama dengan protein perekat lainnya di subendotel. Plasma vWF tidak dapat langsung berinteraksi dengan trombosit tanpa aktivasi sebelumnya, karena tidak mengekspos situs pengikatan dengan reseptor trombosit. Tetapi di bawah kondisi kerusakan yang dipertimbangkan di zona tekanan geser darah tinggi di bawah pengaruh gaya hemodinamik dan kontak dengan subendotel, faktor von Willebrand dari plasma mengalami perubahan konformasi, domain komunikasi yang sesuai diekspos di dalamnya - dengan GPIb trombosit -IX-V dan dengan kolagen. Akibatnya, ia menggabungkan, di satu sisi, dengan kolagen, dan di sisi lain, dengan reseptor trombosit bernama. Dalam yang terakhir (dalam GPIbα), di bawah pengaruh tegangan geser tinggi atau kontak primer trombosit dengan kolagen, tampaknya, situs asosiasi dengan vW juga tersedia. Dengan demikian, "sumbu adhesi" terbentuk: kolagen - plasma vW-GPIb. Dimungkinkan juga untuk menghubungkan trombosit secara langsung dengan vWF yang terletak di subendotel (di mana situs pengikatan GPIb tersedia tanpa aktivasi tambahan), dalam hal ini "sumbu adhesi" terdiri dari dua anggota: VW-GPIb subendotel. Fase agregasi trombosit reversibel .

Proses aktivasi trombosit, selain interaksi dengan protein perekat matriks subendotel, juga disebabkan oleh semua agonis terlarut alami yang muncul di area yang rusak, yang masing-masing memiliki reseptor spesifiknya sendiri atau beberapa reseptor pada membran. Agonis terlarut meliputi, misalnya, adenosin difosfat, serotonin, epinefrin, PAF, tromboksan A2, dan prostaglandin labil yang diturunkan dari trombosit; PAF dan ADP - dari sel endotel yang diaktifkan dan jaringan dinding pembuluh darah yang rusak; ADP - dari eritrosit, yang mengalami mikrohemolisis di area yang rusak. Agregasi juga diinduksi oleh sejumlah kecil pertama dari aktivator platelet terkuat, trombin, yang dihasilkan pada permukaan sel-sel endotel subendotel dan teraktivasi yang mengekspresikan faktor jaringan. Agonis terlarut mengikat reseptornya pada permukaan membran trombosit, dan akibatnya, peningkatan jumlah trombosit yang memasuki area yang rusak dengan darah terlibat dalam proses agregasi. Trombosit juga dapat teraktivasi dan beragregasi sebagai akibat dari aksi gaya hemodinamik yang memindahkan darah pada membrannya di zona dengan tegangan geser yang tinggi, terutama di tempat vasokonstriksi patologis dan jika terjadi aliran darah turbulen.

Interkoneksi membran dan efek pada membran menyebabkan serangkaian transmisi sinyal aktivasi: pertama-tama, ke integrin GPIIb-IIIa, yang memediasi agregasi trombosit, dan juga melalui membran dan sitoplasma ke dalam sel, sebagai akibatnya zat intraseluler dan struktur dirangsang, langsung melakukan reaksi akhirnya. Sebagai hasil dari transmisi sinyal aktivasi membran, aksesibilitas reseptor utama untuk reaksi agregasi, GPIIb-IIIa, berkembang, yang disebabkan oleh perubahan konformasi dalam molekul kompleks ini dengan paparan situs pengikatan untuk fibrinogen dan protein perekat lainnya. Setelah itu, fibrinogen, yang merupakan molekul simetris, dengan adanya ion Ca2+ berikatan dengan reseptor GPIIb-IIIa dari dua trombosit di dekatnya. Mereka berkontribusi pada koneksi trombosit satu sama lain, serta adhesi ke struktur subendotel, yang saat ini dibentuk oleh banyak proses mereka - filopodia. Tabrakan pelat individu yang diperlukan untuk pelaksanaan koneksi ini terjadi di bawah kondisi aliran darah dalam tubuh atau dalam plasma yang diaduk dalam aggregometer. Jadi, sebagai akibat dari aktivasi membran pada fase awal hemostasis trombosit, penyediaan selanjutnya dari ketersediaan reseptor membran GPIIb-IIIa adalah kondisi yang diperlukan untuk pengembangan fase agregasi. Di sini, pola perkembangan fase yang berurutan dimanifestasikan karena fakta bahwa perubahan biokimia dan molekuler di dalamnya menciptakan prasyarat untuk pengembangan fase berikutnya.

Fase sekresi trombosit dan agregasi ireversibel sekunder. Adhesi dan agregasi primer dengan pembentukan sejumlah kecil agregat kecil dan rapuh hanya tahap awal dalam rantai reaksi hemostatik trombosit, dan mereka tidak mampu memberikan hemostasis efektif sendiri. Namun, hampir semua perubahan membran selama periode adhesi dan agregasi reversibel dikaitkan dengan transduksi sinyal tidak hanya ke GPIIb-IIIa, tetapi juga ke dalam sel. Awal transmisi sinyal melintasi membran dilakukan dengan menggunakan sistem yang disebut protein-G, yaitu protein yang mengikat guanosin trifosfat. Ada beberapa jalur yang saling berhubungan dari transmisi sinyal aktivasi intraseluler dalam trombosit: jalur prostaglandin-tromboksan, jalur polifosfoinositida, dan jalur tirosin kinase. Di masing-masing jalur ini, sebagai akibat dari stimulus sinyal, serangkaian reaksi enzimatik berurutan berkembang di membran dengan pembentukan pemancar sekunder - pembawa pesan. Pada saat yang sama, tingkat Ca2+ sitoplasma bebas meningkat dalam sel, yang merupakan bioregulator utama reaksi enzimatik di semua jalur untuk transmisi sinyal aktivasi dan efek akhir.

Seperti yang didirikan pada tahun 60-an abad terakhir, trombosit adalah sel sekretori. Mereka mengandung dalam butiran penyimpanan zat aktif yang akan disekresikan, yang memastikan bahwa sel-sel ini melakukan sejumlah fungsi hemostatik dan pelindung penting lainnya dalam tubuh. Butiran berbeda dalam kandungan zat aktif yang tersimpan di dalamnya dan kekuatan yang diperlukan untuk menginduksi pelepasan yang terakhir. Sekresi dari badan padat dan -granul dapat diinduksi oleh agonis kuat dan lemah, dilakukan dalam 1-2 menit sebesar 100%. Sekresi dari butiran lisosom disebabkan setelah aksi agonis kuat, berlangsung lebih lambat - dalam beberapa menit - dan berakhir dengan pengosongan butiran hanya 60%. Trombosit juga memiliki mekanisme pelaksanaan proses sekretorik yaitu jalur transmisi sinyal stimulasi yang mengarah pada aktivasi sistem aktomiosin, yang diakhiri dengan reaksi kontraktil dengan pelepasan (ekstrusi) melalui saluran tubulus terbuka. sistem ke lingkungan berbagai isi butiran penyimpanan. Kontraksi aktomiosin trombosit memastikan tidak hanya tindakan pelepasan itu sendiri, tetapi juga konvergensi trombosit dalam agregat (yaitu, konsolidasi sumbat trombosit dan retraksi bekuan fibrin, yang diperlukan untuk hemostasis akhir).

Mekanisme transmisi sinyal aktivasi di dalam sel ke sistem yang mengimplementasikan reaksi fungsional terakhirnya, termasuk reaksi sekretori, cukup kompleks dan berbeda untuk agonis lemah dan kuat. Agonis kuat termasuk trombin dan kolagen dalam dosis tinggi. Agonis ini, setelah berikatan dengan reseptornya dan berikatan dengan protein G membran yang sesuai, mampu mengaktifkan fosfolipase C dan dengan demikian mengaktifkan jalur transduksi sinyal stimulasi polifosfoinositida, yang berakhir dengan aktivasi protein kinase C dan pembentukan dari ionofor inositol trisfosfat (IP3). Kedua jalur akhir dari jalur ini menciptakan kondisi dasar yang diperlukan untuk stimulasi sistem kontraktil trombosit, yang masing-masing menyebabkan fosforilasi protein sistem ini melalui PKC, dan melalui IP3, peningkatan kadar Ca2+ (Cai2+) sitoplasma bebas.

Harus ditekankan bahwa interaksi yang disebut agonis lemah (serotonin, epinefrin, dan kolagen dan trombin dosis kecil) dengan reseptor membran trombosit tidak memberikan sinyal yang cukup kuat untuk stimulasi langsung kontraksi aktomiosin yang dijelaskan. Oleh karena itu, di bawah aksi agonis lemah, aktivasi efektif lengkap memerlukan reaksi tambahan dengan memasukkan umpan balik positif yang meningkatkan sinyal primer setelah pengembangan agregasi reversibel. Reaksi tambahan ini terutama terkait dengan jalur sinyal aktivasi prostaglandin-tromboksan. Perubahan yang disebabkan pada membran plasma selama interaksi reseptor dengan agonis lemah alami dan kontak berikutnya dari membran selama agregasi primer menyebabkan aktivasi membran fosfolipase A2. Membran fosfolipase A2, pada gilirannya, menginduksi rantai reaksi jalur prostaglandin-tromboksan, yang dimulai dengan pelepasan asam arakidonat dari fosfolipid membran dan mengarah pada pembentukan produk aktif seperti prostaglandin labil dan terutama tromboksan A2. Yang terakhir adalah vasokonstriktor dan agonis endogen yang berumur pendek dan sangat poten.

Dilepaskan dari trombosit dan mengikat reseptor membran plasma (sel ini dan trombosit lain yang dibawa oleh aliran darah), tromboksan A2, PGG2, PGH2 melakukan umpan balik positif pertama, yaitu, mereka merekrut sejumlah reseptor fibrinogen tambahan. , memperluas batu loncatan untuk agregasi , dan juga meningkatkan sinyal aktivasi yang ditransmisikan ke struktur efektor internal sel. Yang sangat penting adalah kemampuan tromboksan A2, setelah kombinasinya dengan reseptor membran plasma, untuk merangsang fosfolipase C dan jalur aktivasi polifosfoinositida, yang berpuncak pada fosforilasi protein kontraktil. Ini adalah yang paling signifikan, karena tromboksan itu sendiri yang terbentuk di dalam sel tidak secara langsung menyebabkan reaksi ini.

Jadi, pada tahap akhir transmisi sinyal aktivasi, karena pengurangan aktomiosin trombosit, yang diinduksi oleh agonis kuat dan jalur yang lebih panjang oleh agonis lemah, sejumlah reaksi akhir dilakukan, di mana dua efek berikut adalah yang paling penting.
1. Karena filamen aktomiosin melintasi seluruh sitoplasma trombosit dan terhubung di bagian dalam membran dengan glikoprotein transmembran yang sama IIb - IIIa, yang dengannya jembatan fibrinogen / fibrin interplatelet terhubung di bagian luar, aktomiosin berkurang di setiap pelat yang disertakan dalam jaringan platelet-fibrin , menyebabkan penurunan sistem secara keseluruhan. Akibatnya, hal ini menyebabkan pemadatan (konsolidasi) agregat trombosit dan retraksi bekuan fibrin-trombosit.
2. Kontraksi aktomiosin juga merupakan mekanisme pelaksanaan reaksi sekretorik. Mekanisme pelepasan dari granul penyimpanan disebabkan oleh kontraksi serat aktomiosin yang mengikat ke arah yang berbeda dari ujung sitoplasma glikoprotein transmembran IIb - IIIa di dalam sel pada sisi yang berlawanan, terjadi peningkatan tekanan intraseluler, pergerakan granula, konvergensi dan fusi membrannya dengan membran sistem tubular terbuka dan membran plasma dan, akhirnya, pelepasan (ekstrusi) melalui tempat-tempat isi butiran ke saluran sistem tubular terbuka dan ke dalam lingkungan. Yang terakhir mengarah pada pengembangan gelombang kedua agregasi (karena pelepasan agonis endogen) dan memastikan ireversibilitasnya (karena pelepasan protein perekat yang memperkuat ikatan fibrinogen). Tetapi konsekuensi fungsional dari sekresi jauh lebih luas, dan mereka ditentukan oleh sifat kandungan berbagai butiran penyimpanan.

Dari badan padat (granula ), zat aktif hemostatik dilepaskan, yang diperlukan untuk meningkatkan vasospasme di area kerusakan pembuluh darah (epinefrin, serotonin), serta aktivasi dan agregasi trombosit. Sebagai hasil dari sekresi adenosin difosfat, serotonin, epinefrin dan setelah hubungannya dengan reseptor membran yang sesuai, umpan balik positif kedua yang paling penting diwujudkan, yang, bersama dengan yang pertama, memungkinkan untuk mengembangkan agregasi sekunder di bawah aksi agonis lemah. Perlu dicatat di sini bahwa umpan balik ketiga dari aktivasi trombosit (walaupun bukan yang terakhir penting) dilakukan melalui sejumlah kecil pertama dari aktivator trombosit terkuat - trombin, yang dihasilkan di zona kerusakan selama efek awal jaringan. faktor stimulasi monosit dan sel dinding pembuluh darah (endoteliosit, makrofag, fibroblas).

Enzim lisosom dilepaskan dari -granules (lisosom), yang mengambil bagian dalam rekanalisasi pembuluh darah setelah hemostasis selesai.Lebih dari 50 protein disekresikan dari -granules, yang memainkan peran penting tidak hanya dalam reaksi hemostatik, tetapi juga fisiologis lainnya. dan proses patologis tubuh. Kelompok zat aktif yang disekresikan berikut dapat diberi nama. Protein koagulasi (fibrinogen trombosit, faktor V, kininogen dengan berat molekul tinggi), komponen antifibrinolitik (2-antiplasmin, PAI-1) dan sejumlah zat dengan sifat anti-koagulan (2-makroglobulin, protein penghambat 1, inhibitor faktor XIa, protein S, nexin II, TFPI). Semuanya dalam satu atau lain cara mengambil bagian dalam proses pembekuan darah dan pengaturannya. Protein perekat (fibrinogen, vWF, trombospondin, fibronektin, vitronektin, glikoprotein kaya histidin) terlibat dalam pengembangan lebih lanjut dari adhesi ireversibel dan penguatan ikatan fibrinogen dari trombosit agregat. Faktor perangsang pertumbuhan, dan di atas semua yang disebut faktor pertumbuhan yang diturunkan dari trombosit, sangat penting untuk perbaikan dinding pembuluh darah yang rusak, dan dalam kondisi patologis mereka mengambil bagian dalam perkembangan aterosklerosis.

Jadi, berdasarkan hal tersebut di atas, jelas mengapa fase agregasi yang dipertimbangkan disebut sekunder (didasarkan pada pelepasan agonis endogen dari trombosit, menyebabkan reaksi agregasi kemudian) dan ireversibel (akibatnya, trombositnya tidak dapat terpisah dari agregat, karena mereka sedekat mungkin karena pengurangan struktur aktomiosin, dan ikatan fibrinogen/fibrin diperkuat oleh protein perekat yang disekresikan dari butiran-). Fase agregasi sekunder juga disebut sebagai fase sekresi dan agregasi sekunder ireversibel, karena reaksi sekretori mencapai klimaksnya pada saat ini dan merupakan dasar untuk pengembangan fase ini.

Partisipasi komponen plasma dalam hemostasis
Untuk pelaksanaan mekanisme hemostasis akhir yaitu untuk pembentukan sumbat hemostatik sekunder, proses pembekuan darah menjadi penting. Proses ini melibatkan faktor pembekuan darah, yang sintesisnya terjadi di sel parenkim hati.

Dalam pembuluh yang utuh, faktor pembekuan (prokoagulan) bersirkulasi dalam bentuk tidak aktif. Kerusakan pada dinding pembuluh darah, seperti dalam kasus trombosit, disertai dengan aktivasi berurutan faktor pembekuan darah. Akibatnya, dua komponen utama hemostasis koagulasi terbentuk - trombin dan fibrin, yang menstabilkan sumbat trombosit primer dan dengan demikian berkontribusi pada hemostasis akhir.

Berdasarkan studi tentang fungsi dan interaksi faktor-faktor pembekuan darah pada tahun 1964, diusulkan apa yang disebut model kaskade dari proses pembekuan darah. Perhatian utama dalam model kaskade pembekuan darah diberikan pada struktur proses koagulasi sebagai serangkaian reaksi proteolitik, sebagai akibatnya faktor pembekuan darah diubah menjadi bentuk aktifnya. Dalam hal ini, komponen seluler di mana komposisi kompleks enzim terjadi dianggap sebagai sumber fosfolipid anionik. Menurut model kaskade, aktivasi faktor koagulasi, yang mengarah pada pembentukan trombin dan fibrin, dilakukan dengan dua cara - eksternal dan internal, tergantung pada sifat permukaan aktivasi pada tahap awal proses pembekuan darah. Untuk jalur eksternal, permukaan seperti itu adalah faktor jaringan. Kontak dengan faktor jaringan terjadi setelah kerusakan pada endotel, karena terletak di struktur subendotel (karena itu namanya - jalur eksternal). Jalur intrinsik membutuhkan permukaan trombosit yang diaktifkan. Yang terakhir adalah komponen darah (karenanya namanya - jalur internal).

Ciri khas dari jalur eksternal dan internal aktivasi pembekuan darah adalah partisipasi berbagai prokoagulan dalam pembentukan protrombinase, yang merupakan kompleks faktor aktif Xa dan Va. Seperti dapat dilihat dari model kaskade koagulasi darah yang disajikan, pembentukan protrombinase melalui jalur eksternal dipicu oleh faktor jaringan, yang, dalam kombinasi dengan faktor VIIa dan dengan partisipasi ion kalsium, mengaktifkan faktor X. Jalur internal dari Pembentukan protrombinase dimulai dengan aktivasi faktor XII pada kontak darah dengan komponen subendotel dinding pembuluh darah terutama dengan kolagen. Proses aktivasi faktor XII ditingkatkan oleh kalikrein. Selanjutnya, XIIa, dengan partisipasi kininogen molekul tinggi, mengubah faktor XI menjadi bentuk aktif, yang, pada gilirannya, mengaktifkan faktor IX. Selanjutnya, bentuk aktif faktor IX dan VIII membentuk kompleks tenase pada permukaan trombosit teraktivasi, yang secara langsung mengubah faktor X menjadi Xa. Sejak pembentukan faktor Xa dan kemudian protrombinase (kompleks faktor Xa / Va), proses pembekuan darah berlangsung di sepanjang jalur yang sama dengan serangkaian faktor yang tidak berubah. Model kaskade koagulasi darah masih berhasil digunakan untuk menginterpretasikan tes koagulasi skrining (umum), di mana kondisi untuk aktivasi faktor X di sepanjang jalur internal (waktu pembekuan darah vena, waktu rekalsifikasi plasma teraktivasi dan waktu tromboplastin parsial teraktivasi) atau sepanjang jalur eksternal direproduksi secara artifisial (uji protrombin).

Namun, model ini gagal menjelaskan mekanisme kontrol perdarahan in vivo. Jadi, jika kita menerima posisi model kaskade tentang keberadaan jalur internal dan eksternal pembekuan darah in vivo, maka tidak jelas mengapa aktivasi faktor X oleh jalur eksternal melalui kompleks faktor jaringan/VIIa tidak mengkompensasi karena kurangnya faktor VIII atau IX pada pasien dengan hemofilia. Pertanyaan serupa muncul pada pasien dengan defisiensi faktor VII, yang, tanpa adanya gangguan pada jalur intrinsik, mengalami manifestasi perdarahan yang parah. Singkatnya, mengapa kemungkinan pembentukan protrombinase (kompleks faktor Xa/Va) di satu jalur tidak mengimbangi kerusakan di jalur lain? Beberapa poin mengenai fase kontak juga tidak jelas. Jika jalur internal dimulai dengan aktivasi faktor XII, lalu mengapa defisiensinya, serta kallikrein dan kininogen dengan berat molekul tinggi, tidak menyebabkan kecenderungan perdarahan?

Kebutuhan untuk merevisi model kaskade koagulasi darah juga disebabkan oleh data baru tentang peran berbagai struktur seluler dalam reaksi koagulasi. Ternyata, terlepas dari struktur lipid membran yang serupa, sel pembawa faktor jaringan dan trombosit teraktivasi mengekspresikan reseptor yang melokalisasi berbagai komponen sistem pembekuan darah di permukaannya. Ini adalah fakta lokalisasi berbagai faktor koagulasi pada permukaan sel subendotel dan trombosit yang memungkinkan untuk mempertimbangkan kembali urutan inklusi mereka dalam proses pembentukan bekuan fibrin.

Dengan mempertimbangkan data lokalisasi dan kontrol reaksi koagulasi pada berbagai permukaan sel, proses koagulasi darah dapat direpresentasikan sebagai tiga fase yang tumpang tindih.

Fase 1 - inisiasi pembekuan darah, pembentukan sinyal awal untuk aktivasi proses koagulasi, berkembang pada saat, sebagai akibat dari kerusakan integritas dinding pembuluh darah, sel-sel subendotel terpapar dan kontak dengan darah , memiliki protein integral - faktor jaringan tertentu. Faktor jaringan diekspresikan dalam banyak jenis sel yang tidak berhubungan dengan darah, termasuk sel otot polos, fibroblas, dan makrofag. Dalam kondisi normal, sebagian besar sel yang kontak langsung dengan darah kekurangan faktor jaringan. Ini termasuk sel-sel endotel pembuluh darah dan trombosit. Dalam kondisi patologis, seperti peradangan, pada monosit/makrofag dan sel endotel, sintesis faktor jaringan dapat diinduksi oleh lipopolisakarida endotoksin, kompleks imun, trombin, sejumlah sitokin, lipoprotein densitas rendah teroksidasi, dan bahkan perubahan mekanis dalam aliran cairan di sekitarnya. .

Data ini memungkinkan kita untuk mempertimbangkan faktor jaringan sebagai faktor penting dalam patogenesis banyak penyakit.Properti luar biasa dari faktor jaringan adalah kemampuannya untuk mengikat faktor VII untuk membentuk kompleks faktor jaringan/VII. Penting untuk dicatat bahwa, tidak seperti prokoagulan lain yang beredar dalam darah dalam bentuk tidak aktif, pada orang sehat, 0,01 hingga 1% dari jumlah total faktor VII hadir dalam aliran darah dalam bentuk aktif VIIa. Paparan faktor jaringan menghasilkan pembentukan kompleks faktor jaringan/VIIa aktif serta kompleks faktor jaringan/VII. Pada yang terakhir, faktor VII diubah menjadi VIIa karena aktivasi oleh kompleks TF/VIIa dan di bawah aksi faktor Xa. Sangat penting bahwa satu faktor VIIa tanpa faktor jaringan memiliki aktivitas proteolitik yang sangat rendah, yang ditingkatkan beberapa kali lipat dengan adanya faktor kofaktor - jaringan.

Karena faktor jaringan merupakan protein membran integral, kompleks faktor jaringan/VIIa akan selalu berhubungan dengan permukaan membran sel. Ini adalah poin yang sangat penting, yang menjelaskan lokalisasi kaskade koagulasi di area kerusakan pembuluh darah, mis., Tepat di tempat yang diperlukan untuk menghentikan pendarahan. Kompleks aktif faktor jaringan/VIIa, melalui proteolisis terbatas, mengaktifkan faktor X dan IX. Pada saat yang sama, faktor IXa yang terbentuk "tergelincir" dari permukaan sel subendotel yang membawa faktor jaringan dan berinteraksi dengan reseptor spesifik pada trombosit yang diaktifkan, yang berada di dekat area kerusakan pembuluh darah.

Faktor Xa, yang tersisa di permukaan sel subendotel, bersama dengan kofaktornya (faktor Va) membentuk protrombinase. Protrombinase secara proteolitik memotong protrombin, menghasilkan pembentukan trombin. Namun, dalam kondisi fisiologis, di bawah pengaruh faktor jaringan/kompleks VIIa, sejumlah kecil trombin terbentuk, yang tidak mampu mengubah fibrinogen menjadi sejumlah fibrin yang cukup untuk menghentikan pendarahan. Kemampuan luar biasa dari sistem hemostasis untuk membatasi pembentukan trombin pada tahap awal aktivasi proses pembekuan darah penting terutama untuk mencegah perkembangan trombosis, yang, seperti dalam pembentukan sumbat hemostatik, didasarkan pada pembentukan dari fibrin. Jika tidak, setiap kerusakan pada dinding pembuluh darah dengan paparan faktor jaringan dapat menyebabkan komplikasi trombotik.

Keterbatasan pembentukan trombin pada permukaan sel subendotel yang mengandung faktor jaringan dikendalikan dalam beberapa cara: oleh inhibitor jalur faktor jaringan spesifik (TPFI), antitrombin, dan oleh pengikatan kompetitif bentuk tidak aktif dari faktor VII ke faktor jaringan. Penghambat jalur faktor jaringan memainkan peran yang sangat penting dalam membatasi pembentukan trombin di bawah aksi faktor jaringan/VIIa. Inhibitor ini diproduksi oleh sel endotel dan bekerja secara eksklusif pada tempat pembentukan kompleks faktor jaringan/VIIa. Xa awalnya mengikat ke TPFI. Pembentukan kompleks TFPI/Xa secara signifikan meningkatkan efek penghambatan, karena TFPI/Xa dengan aktivitas yang lebih tinggi daripada TFPI saja mengikat faktor jaringan/VIIa.

Menurut model alternatif, TPFI berikatan dengan kompleks faktor jaringan terner/VIIa/Xa yang telah terbentuk sebelumnya. Pembentukan kompleks jaringan faktor/VIIa/TFPI/Xa sangat cepat mengurangi aktivasi langsung faktor X pada permukaan sel subendotel dan dengan demikian memainkan peran penting dalam pencegahan trombosis. Kontribusi tambahan untuk pembatasan proses dibuat oleh antitrombin III, yang menghambat tidak hanya trombin, tetapi juga faktor Xa pada saat transfernya dari permukaan sel yang membawa faktor jaringan ke lingkungan. Kontribusi tertentu terhadap pembatasan pembentukan trombin pada tahap awal aktivasi proses pembekuan darah juga dibuat oleh faktor VII yang tidak teraktivasi, yang bersaing dengan faktor VIIa untuk tempat pengikatan pada faktor jaringan. Efek penghambatannya paling signifikan pada konsentrasi minimum faktor jaringan sama dengan atau kurang dari 25 pM.

Dengan demikian, kerusakan lapisan endotel dinding pembuluh darah dan kontak berikutnya dari faktor jaringan dengan darah mengarah pada pembentukan kompleks aktif faktor jaringan/VIIa, yang merupakan peristiwa penting untuk aktivasi seluruh kaskade koagulasi. Sejumlah kecil trombin yang dibentuk pada sel yang membawa faktor jaringan, meskipun tidak cukup untuk pembentukan jumlah fibrin yang lengkap secara hemostatik, sangat penting untuk pembentukan fase pembekuan darah berikutnya dan, di atas semua itu, untuk implementasi tahap kedua. fase - memperkuat proses pembekuan darah.

Fase 2 - penguatan proses pembekuan darah. Paparan struktur subendotel jika terjadi kerusakan pada dinding pembuluh darah menciptakan kondisi untuk aktivasi tidak hanya fase awal pembekuan darah, tetapi juga trombosit. Proses aktivasi trombosit ditingkatkan oleh trombin, yang terbentuk di bawah pengaruh kompleks faktor jaringan/VIIa di sebelah trombosit yang melekat. Secara signifikan, trombosit yang tidak teraktivasi dan teraktivasi memiliki banyak reseptor atau tempat pengikatan untuk trombin. Ini adalah reseptor yang diaktifkan oleh protease 1, glikoprotein Ib-V-IX (GPIb-V-IX), dll. Trombin yang terkait dengan reseptor GPIb-V-IX mengaktifkan sejumlah prokoagulan, termasuk faktor V, yang dilepaskan selama sekresi dari -granule trombosit dan tetap berada di permukaannya.

Menariknya, GPIb-V-IX berfungsi sebagai reseptor untuk lebih dari sekedar trombin. Ini terutama merupakan situs pengikatan untuk faktor von Willebrand. Situs faktor von Willebrand dan trombin pada GPIb-V-IX berbeda, sehingga kedua protein dapat mengikat reseptor ini secara bersamaan. Pengikatan faktor von Willebrand ke GPIb-V-IX memastikan adhesi trombosit ke tempat kerusakan pada dinding pembuluh darah dan aktivasi parsialnya. Karena faktor von Willebrand bersirkulasi dalam plasma sebagai kompleks dengan faktor VIII, dengan mengikat reseptor spesifiknya GPIb-V-IX, faktor tersebut juga melokalisasi faktor VIII pada permukaan trombosit. Di bawah pengaruh trombin di dekatnya, terjadi disosiasi kompleks yang terdiri dari faktor von Willebrand dan faktor VIII. Dalam hal ini, faktor VIII tetap terlokalisasi pada permukaan trombosit dan diaktifkan oleh trombin. Trombin yang terbentuk di bawah pengaruh kompleks faktor jaringan/VIIa, pada gilirannya, mengaktifkan faktor XI, yang berikatan dengan permukaan trombosit teraktivasi melalui rantai GP1ba dari kompleks GP1b-V-IX. Dengan demikian, jumlah mikromolar trombin yang terbentuk pada sel-sel yang mengandung faktor jaringan , menyediakan selama fase ke-2 penyebaran proses aktivasi pembekuan darah pada permukaan trombosit dengan transformasi simultan menjadi bentuk aktif faktor XI, IX, VIII dan V.

Fase ke-3 - penyebaran proses pembekuan darah. Dari saat aktivasi trombosit yang optimal tercapai, proses koagulasi memasuki fase terakhirnya - penyebaran proses pembekuan darah. Hal ini difasilitasi oleh sifat unik trombosit, yang dijelaskan oleh adanya reseptor afinitas tinggi pada permukaannya untuk faktor XI, XIa, IX, IXa, X, VIII, VIIIa, V, Va dan Xa, protrombin dan trombin. Selama fase ini, pembentukan kompleks tenase dan protrombinase terjadi pada permukaan trombosit yang sudah teraktivasi. Pembentukan kompleks tenase (VIIIa/IXa) membutuhkan adanya bentuk aktif dari dua faktor - faktor IXa dan faktor VIIIa. Telah ditetapkan bahwa aktivasi faktor IX dicapai dalam dua cara. Jalur pertama adalah aktivasi faktor IX oleh faktor jaringan/kompleks VIIa. Faktor IXa yang dihasilkan berpindah dari sel pembawa faktor jaringan ke permukaan trombosit yang berdekatan, praktis tanpa kehilangan aktivitasnya, karena tidak dipengaruhi oleh TPFI dan sangat lambat dihambat oleh antitrombin III dan inhibitor protease plasma lainnya.

Namun, jumlah kritis faktor IX aktif, yang diperlukan untuk menghentikan pendarahan, dibentuk dengan cara yang berbeda - di bawah pengaruh faktor XIa terkait trombosit. Seperti disebutkan di atas, tempat pengikatan faktor XI pada trombosit teraktivasi adalah GP Iba, yang menyediakan kondisi optimal untuk aktivasinya oleh trombin, juga terkait dengan kompleks GPIb-V-IX. Ini adalah faktor XIa yang diaktifkan pada permukaan trombosit yang memastikan aktivasi faktor IX, yang secara signifikan meningkatkan potensi koagulasi yang terakhir. Hal ini mungkin menjelaskan mengapa tidak adanya reseptor trombosit GPIb pada penyakit Bernard-Soulier menyebabkan penurunan pembentukan trombin yang bergantung pada faktor XIa.Aktivasi faktor X 50-100 kali lipat di bawah pengaruh kompleks faktor jaringan/VIIa. Kompleks protrombinase (Xa/Va), yang terbentuk pada permukaan trombosit teraktivasi, memulai proteolisis protrombin dengan pembentukan sejumlah besar trombin.

Selama proteolisis, fragmen 1+2 (F1+2) dipecah dari protrombin, jumlah yang mencerminkan tingkat keparahan proses pembentukan trombin. Selanjutnya, trombin memotong dua fibrinopeptida A dan B dari molekul fibrinogen. Bagian yang tersisa dari molekul fibrinogen - monomer fibrin - memperoleh kemampuan untuk bergabung dengan jenisnya sendiri dan membentuk polimer fibrin (fibrin larut). Pembentukan dan stabilisasi bekuan fibrin terjadi di bawah pengaruh faktor XIII, yang diaktifkan oleh trombin dengan adanya ion kalsium, karena aktivitas transglutaminase, yang memungkinkan pembentukan ikatan kovalen antara monomer fibrin. Subunit A dari faktor XIII berisi situs aktif untuk reaksi katalitik ini, sedangkan subunit B memblokir aktivitas enzimatik ini.

Jadi, hanya bentuk aktif faktor XIII (faktor XIIIa) yang memiliki fungsi transglutaminase, yang dibentuk pada tahap terakhir kaskade koagulasi oleh proteolisis parsial subunit A di bawah aksi trombin dengan pelepasan "peptida aktivasi. terdiri dari 37 asam amino, dan selanjutnya disosiasi subunit B. Polimer fibrin merupakan kofaktor penting untuk aktivasi faktor XIII. Dalam plasma, bentuk proenzim faktor XIII bersirkulasi sebagai tetramer A2B2, sedangkan dalam trombosit terjadi sebagai dimer A2. Karena tidak adanya subunit B, bentuk trombosit dari faktor XIII, yang mengandung 50% dari total aktivitas transglutaminase prokoagulan ini, diaktifkan oleh trombin jauh lebih cepat daripada komponen plasma. Telah ditunjukkan bahwa bentuk faktor XIII terkait trombosit adalah penanda aktivasi trombosit dan berkontribusi pada peningkatan sifat prokoagulannya.

Dengan demikian, kecepatan pembentukan trombin selama fase terakhir pembekuan darah hanya bergantung pada jumlah faktor Xa, yang terbentuk pada permukaan fosfolipid trombosit teraktivasi di bawah aksi kompleks tenase (VIIIa/DCa). Berdasarkan data ini, menjadi jelas mengapa jalur ekstrinsik generasi faktor Xa tidak memperbaiki gangguan pembekuan pada pasien dengan hemofilia dengan penurunan aktivitas faktor VIII atau IX. Pembentukan jumlah mikro trombin selama fase pertama - inisiasi pembekuan darah - tanpa adanya faktor VIII atau IX tidak terganggu, karena tergantung pada kompleks faktor jaringan/VIIa. Pada hemofilia, ada pelanggaran pembentukan kompleks tenase, yang menyebabkan penurunan laju aktivasi X dan penekanan pembentukan trombin pada permukaan trombosit.

Telah ditetapkan bahwa selama pembekuan 1 ml darah, trombin terbentuk dalam jumlah yang cukup untuk mengentalkan seluruh fibrinogen dalam 3 liter darah. Efek fatal dalam tubuh ini tidak diamati karena aksi komponen antikoagulan (seluler dan humoral). Komponen seluler yang mempertahankan darah dalam keadaan cair dalam sirkulasi terutama meliputi makrofag dan hati, yang secara khusus menghilangkan faktor pembekuan darah yang diaktifkan dan fibrin tanpa efek apa pun pada prekursornya. Komponen humoral terdiri dari beberapa protein yang dengan satu atau lain cara menonaktifkan (menghambat) faktor pembekuan darah yang aktif. Protein ini termasuk antikoagulan: antitrombin III, kofaktor heparin II dan 2-makroglobulin, yang menonaktifkan protease serin, yaitu trombin dan semua faktor sebelum pembentukannya (dengan pengecualian faktor VIIIa dan Va), dengan membentuk kompleks tidak aktif dengan mereka. Inaktivasi faktor VIIIa dan Va - katalis terkuat untuk pembentukan trombin dilakukan oleh protein lain, yang disebut sistem protein C dan S, yang diaktifkan oleh kompleks yang terbentuk selama interaksi trombin dengan trombomodulin (reseptor spesifik dinding pembuluh darah). Trombomodulin adalah reseptor untuk trombin. Ini diekspresikan dalam jumlah besar oleh sel endotel, terutama di zona mikrosirkulasi. Trombin, yang memasuki darah dari area yang rusak, berikatan dengan trombo-bomodulin pada sel endotel yang utuh.

Saat berinteraksi dengan trombomodulin, spesifisitas trombin berubah. Ia kehilangan sifat koagulatifnya dan berhenti mengaktivasi trombosit dan mengubah fibrinogen menjadi fibrin. Namun, pada saat yang sama, trombin memperoleh sifat antikoagulan, yang terdiri dari kemampuan untuk mengaktifkan protein C, salah satu antikoagulan alami yang paling penting. Aktivasi protein C di bawah aksi kompleks trombin/trombomodulin terjadi pada permukaan sel endotel, yang dengannya protein C berikatan menggunakan reseptor EPCR-1 spesifik (reseptor Protein C endotel, reseptor protein C endotel-1), memfasilitasi aktivasinya . Protein C yang teraktivasi membentuk kompleks dengan protein S, yang memotong dan menginaktivasi faktor Va dan VIIIa.

Inaktivasi faktor VIII ditingkatkan oleh bentuk faktor V yang tidak aktif, yang dalam hal ini bertindak sebagai kofaktor untuk protein C yang diaktifkan. Hal ini mencegah pembentukan enzim koagulasi di tempat di mana terdapat lapisan endotelium yang utuh dan sehat. Seperti polisakarida, protein S adalah salah satu protein yang bergantung pada vitamin K. Selain berpartisipasi sebagai kofaktor non-enzimatik dalam proses degradasi proteolitik yang dimediasi APS (protein C teraktivasi) dari bentuk aktif faktor V dan VIII, protein S memiliki fungsi antikoagulan independen karena interaksi langsungnya dengan faktor Va dan Xa. Dalam kondisi fisiologis normal, sekitar 60% dari jumlah total protein S dalam plasma terikat secara reversibel dengan protein pengikat C4b, komponen pengatur jalur komplemen klasik, dan hanya bentuk protein S yang tidak terikat (“protein S bebas”) memiliki sifat antikoagulan. Selain berpartisipasi dalam aktivasi protein C melalui trombomodulin, sel endotel juga memiliki sifat athrombogenic lain yang sama pentingnya.

Mereka meningkatkan inaktivasi faktor koagulasi oleh antitrombin III karena adanya glikosaminoglikan seperti heparin pada permukaannya. Dalam kondisi normal, sel-sel endotel terutama ditargetkan untuk peran antikoagulan. Namun, sebagai respons terhadap cedera atau peradangan, mereka mengurangi ekspresi trombomodulin dan meningkatkan ekspresi transfer factor dan molekul adhesi permukaan, yang meningkatkan potensi hemostatik di lokasi cedera. Dalam kondisi tertentu, ini dapat dianggap sebagai reaksi protektif tubuh, yang bertujuan membatasi proses patologis. Namun, ketika mekanisme yang mengontrol hemostasis terganggu, dapat menyebabkan pengembangan trombosis lokal atau koagulasi intravaskular.

Seiring dengan komponen yang menunjukkan efek penghambatan, sistem humoral juga mencakup mekanisme fibrinolitik. Mekanisme ini bertujuan untuk melarutkan bekuan fibrin (fibrinolisis) untuk menjaga keseimbangan antara pembentukan dan lisisnya untuk menjaga integritas dan patensi pembuluh darah. Enzim aktif dari fibrinolisis adalah plasmin, yang terbentuk dari prekursornya yang tidak aktif, plasminogen, sebagai hasil dari serangkaian reaksi aktivasi yang berurutan. Yang paling signifikan adalah aktivasi plasminogen di bawah aksi aktivator jaringan (t-PA), yang disintesis dan disekresikan ke dalam plasma oleh sel-sel endotel dinding pembuluh darah. Munculnya fibrin dalam aliran darah secara signifikan mempercepat aktivasi fibrinolisis. Ini dijelaskan oleh afinitas tinggi dari aktivator plasminogen jaringan dan plasminogen itu sendiri untuk fibrin, yang permukaannya dalam kondisi fisiologis membatasi aksi plasmin (fibrinolisis lokal). Plasminogen dan aktivatornya mengikat fibrin untuk membentuk kompleks rangkap tiga - fibrin, plasminogen dan aktivator, yang menyediakan aktivasi plasminogen yang paling efektif.

Aktivasi plasminogen juga dapat terjadi karena aktivator tipe urokinase (u-PA). Jika aktivator plasminogen jenis jaringan terlibat dalam pelarutan fibrin yang terletak di lumen pembuluh darah, maka aktivator plasminogen jenis urokinase ditujukan terutama untuk pelarutan fibrin yang tersebar pada permukaan sel, termasuk pada endotelium, yaitu terlibat langsung dalam pembentukan trombus. Jalur alternatif untuk aktivasi plasminogen menjadi plasmin pada permukaan fibrin disebabkan oleh faktor HPa dan kalikrein Plasmin yang terbentuk selama aktivasi plasminogen secara berurutan memecah molekul fibrin dan fibrinogen menjadi fragmen yang lebih kecil - produk degradasi fibrin/fibrinogen. Pada saat yang sama, fragmen PDF X dan Y yang lebih besar sebelumnya memiliki efek antitrombin, fragmen D yang lebih kecil dan selanjutnya mencegah polimerisasi monomer fibrin, dan fragmen E bersaing dengan trombin untuk situs reseptor pada molekul fibrinogen. Fragmen D dan E, selain itu, menghambat reaksi adhesi dan agregasi trombosit. Bersama dengan fibrin, plasmin juga memotong faktor VIII dan V.

Distribusi plasmin aktif dalam sirkulasi dicegah oleh 2-antiplasmin, yang secara cepat dan ireversibel menginaktivasi plasmin bebas yang tidak teradsorpsi baik pada fibrin maupun pada permukaan sel, dan dengan demikian melindungi fibrinogen yang bersirkulasi.

Inhibitor penting lain dari fibrinolisis adalah plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1). Ini menghambat aktivitas jaringan dan aktivator plasminogen urokinase. Sebagian besar dari itu dilepaskan dari trombosit selama aktivasi mereka, yang memastikan penghambatan lokal fibrinolisis dan pelestarian untuk beberapa waktu stabilitas bekuan fibrin, yang bertindak sebagai sumbat hemostatik di lokasi kerusakan pembuluh darah. Inhibitor lain yang berkontribusi terhadap stabilitas bekuan fibrin adalah trombin-activated fibrinolysis inhibitor (TAFI). Ini hadir dalam plasma dalam bentuk tidak aktif dan diaktifkan oleh konsentrasi trombin yang relatif tinggi, yang melebihi konsentrasi trombin yang dibutuhkan untuk membentuk fibrin dari fibrinogen. Konsentrasi trombin yang tinggi ini dihasilkan melalui aktivasi faktor XI oleh trombin pada trombosit yang teraktivasi dan sangat dipercepat oleh trombomodulin. TAFI yang teraktivasi melindungi bekuan fibrin dari proteolisis dengan memecah situs pengikatan lisin yang diperlukan untuk pengikatan plasminogen. Akibatnya, waktu fibrinolisis yang diinduksi oleh t-PA secara signifikan diperpanjang. Penghambatan juga difasilitasi oleh pengikatan TAFI ke fibrin melalui faktor XIIIa. Mekanisme terakhir meningkatkan aktivasi inhibitor pada permukaan bekuan fibrin, menstabilkan aktivitasnya, dan melindungi enzim aktif dari degradasi lebih lanjut Protein S membatasi aktivasi TAFI Protein S dikenal sebagai kofaktor untuk protein C teraktivasi, yang membatasi aktivasi trombin dan, karenanya, aktivasi TAFI. Juga telah ditemukan bahwa protein S sendiri menghambat pembentukan awal trombin secara independen dari protein C yang diaktifkan. Dan ini, pada gilirannya, mengurangi laju aktivasi TAFI. Efek antifibrinolitik yang signifikan juga diberikan oleh 2-makroglobulin, yang menghambat plasmin dan aktivator plasminogen. Penghambat aktivator plasminogen-2 (PAI-2), yang terdapat dalam plasma pada konsentrasi yang sangat rendah, dianggap sebagai penghambat aktivator plasminogen tipe urokinase.

Meringkas hal di atas, kita dapat menyimpulkan bahwa setiap kerusakan pada integritas dinding pembuluh darah merupakan stimulus kuat untuk aktivasi sistem hemostasis. Namun, karena reaksi adaptif tubuh manusia, dalam kondisi normal, keseimbangan lengkap tercapai, yang akan menghentikan pendarahan, dan ini tidak akan mengembangkan keadaan hiperkoagulabilitas. Tidak diragukan lagi, ketidakseimbangan karena kerusakan pada satu atau lain mata rantai hemostasis dapat menyebabkan perkembangan hipokoagulasi dan perdarahan, atau hiperkoagulasi dan trombosis.