2014 წლის 9 იანვრიდან 10 ოქტომბრის ჩათვლით პერიოდში. ფედერალური სახელმწიფო საბიუჯეტო დაწესებულების ვეტერინარული და სანიტარული ექსპერტიზის დეპარტამენტმა მიიღო 302 წყლის ნიმუში, ჩაატარა 693 კვლევა, რომელთაგან საპროექტო ბიუროს ინდიკატორებისთვის, TKB-458 კვლევები.
რა არის ეს მაჩვენებლები და რატომ ექცევა მათ ყურადღება სასმელი წყლის შეფასებისას?
წყალი - ნებისმიერი ორგანიზმის მთავარი კომპონენტი, უდიდეს როლს თამაშობს მის ცხოვრებაში. ეს არის სხვადასხვა მიკროორგანიზმების, მათ შორის პათოგენების ჰაბიტატი. პათოგენის გამოვლენა წყლის დაბინძურების ყველაზე ზუსტი მაჩვენებელია. ამ მიკროორგანიზმებს მიეკუთვნება Escherichia coli ჯგუფის ბაქტერიები - BGKP (Escherichia coli ჯგუფის ბაქტერიები, რომელსაც ასევე უწოდებენ კოლიმორფულ და კოლიფორმულ ბაქტერიებს) - Enterobacteriaceae ოჯახის ბაქტერიების ჯგუფი, პირობითად გამოირჩევა მორფოლოგიური და კულტურული მახასიათებლებით, გამოიყენება სანიტარული მიკრობიოლოგიის მიერ, როგორც ფეკალური დაბინძურების მარკერი. კოლიფორმულ ბაქტერიებს შორის ხშირად დგინდება ჩვეულებრივი და თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერიების (TCB, TKB) არსებობა სასმელ წყალში, რაც მიუთითებს უხარისხო წყალმომარაგებაზე და წყლის წყაროს შესაძლო ფეკალური დაბინძურებაზე, რაც პოტენციურ საფრთხეს უქმნის განვითარებას და გავრცელებას. ნაწლავის დაავადებების.
მომზადებული წყლით წყალმომარაგების სისტემებში კოლიფორმული ბაქტერიები არ უნდა გამოვლინდეს (SanPiN). კოლიფორმული ორგანიზმების არსებობა მიუთითებს წყლის არასაკმარის გაწმენდაზე, მის მეორად დაბინძურებაზე და წყალში საკვები ნივთიერებების არსებობაზე. ნებადართულია კოლიფორმული ორგანიზმების სისტემაში შემთხვევით შეყვანა, მაგრამ არა უმეტეს წლის განმავლობაში აღებული ნიმუშების 5%-ისა. თუ TKB, OKB) აღმოჩენილია სასმელი წყლის ნიმუშში, ისინი დაუყოვნებლივ განისაზღვრება განმეორებით ნიმუშებში.
TKB (თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერია). ეს არის კოლიფორმული ორგანიზმების ჯგუფი, რომელსაც შეუძლია ლაქტოზას დუღილი 44-45°C ტემპერატურაზე. ისინი სწრაფად გამოვლენილია, ამიტომ ისინი ემსახურებიან ფეკალური ბაქტერიებისგან წყლის გაწმენდის ეფექტურობის შეფასებას.
OKB (საერთო კოლიფორმული ბაქტერია) - OKB ჯგუფში შედის Enterobacteriacea ოჯახის საკმაოდ დიდი რაოდენობით გვარები, რომელთა წარმომადგენლებს შეუძლიათ ლაქტოზას დუღილი: Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Pantoea, Rahnella და ა.შ. ამ მიკროორგანიზმებს შორის არის ასევე. თავისუფლად მცხოვრები საპროფიტების დიდი რაოდენობა, ამიტომ TKB მაჩვენებელი მნიშვნელოვანი ტექნოლოგიური (ინდიკატორი) მაჩვენებელია.
შესაბამისად, თუ ეს ბაქტერიები გვხვდება სასმელ წყალში, მაშინ ეს ნიშნავს, რომ არსებობს წყლის დაბინძურების შესაძლებლობა კანალიზაციით.
OKB, TKB ინდიკატორების განსაზღვრის შედეგები წარმოდგენილია CFU / 100 მლ; კოლიფორმული ბაქტერიები არ უნდა გამოვლინდეს 100 მლ სასმელ წყალში ნორმალიზებული მოცულობის სამჯერ შესწავლისას.
როგორც არ უნდა იყოს, წყალში ბაქტერიების ნებისმიერი გაზრდილი შემცველობა საგანგაშო ნიშანია და როდესაც ის გამოჩნდება, წყალთან დაკავშირებით რაიმეს გაკეთებაა საჭირო.
სასმელი წყლის მიკრობიოლოგიური კვლევების ჩასატარებლად შეგიძლიათ დაუკავშირდეთ Tula MVL ფედერალური სახელმწიფო ბიუჯეტის ინსტიტუტს.
ტიტრების მეთოდი
მეთოდი ეფუძნება ბაქტერიების დაგროვებას წყლის გარკვეული მოცულობის ინოკულაციის შემდეგ თხევად საკვებ გარემოში, რასაც მოჰყვება ხელახალი ინოკულაცია დიფერენციალურ მკვრივ გარემოზე ლაქტოზით და კოლონიების იდენტიფიცირება კულტურული და ბიოქიმიური ტესტებით. სასმელი წყლის ხარისხობრივი მეთოდით შესწავლისას ითესება სამი ტომი 100 სმ3. წყლის შესწავლისას მიზანი | OKB-ისა და TKB-ის რაოდენობრივი განსაზღვრა (განმეორებითი ანალიზი), 1,10 და 100 სმ3, შესაბამისად, ინოკულირებულია - თითოეული სერიის სამი ტომი.
10 და 100 სმ3 წყლის ინოკულაცია ტარდება, შესაბამისად, აკუმულაციური საშუალების 1 და 10 სმ3-ში - კონცენტრირებული LPS ინდიკატორის გარეშე. ნიმუშის 1 სმ3 თესვა ხორციელდება ჩვეულებრივი კონცენტრაციის 10 სმ3 LPS-ში. ინოკულაციები ინკუბირებულია 37 °C ტემპერატურაზე 48 საათის განმავლობაში, 24 საათის შემდეგ ტარდება ინოკულაციების წინასწარი შეფასება დაგროვების გარემოში. კონტეინერებიდან, სადაც აღინიშნა ზრდის (სიბურღვის) არსებობა და გაზის წარმოქმნა, მასალას ითესება ბაქტერიოლოგიური მარყუჟით ენდო გარემოს სექტორებზე იზოლირებული კოლონიების მისაღებად. კონტეინერები ზრდისა და გაზის წარმოქმნის თვალსაჩინო ნიშნების გარეშე რჩება თერმოსტატში 48 საათამდე და ხელახლა უყურებენ საბოლოო შეფასებისთვის.
ზრდის ნიშნების გარეშე კულტურების შედეგები უარყოფითად ითვლება და ისინი შემდგომ შესწავლას არ ექვემდებარება. კონტეინერებიდან, სადაც აღინიშნება სიმღვრივე, დათესვა ხდება ენდო გარემოს სექტორებზე. ინოკულაციები ენდო გარემოზე ინკუბირებულია 37°C ტემპერატურაზე 18-20 საათის განმავლობაში. თუ სიმღვრივე გამოჩნდება, დაგროვების გარემოში წარმოიქმნება გაზი და კოლონიები იზრდება ლაქტოზადადებითი ბაქტერიებისთვის დამახასიათებელ ენდო გარემოზე: მუქი წითელი ან წითელი, ან მეტალის ბზინვარების გარეშე, ამოზნექილი წითელი ცენტრით და ანაბეჭდით მკვებავ გარემოზე, იძლევა დადებით დასკვნას OKB-ის არსებობის შესახებ მოცემულ ნიმუშის მოცულობაში.
OKB-ს არსებობა უნდა დადასტურდეს შემდეგ შემთხვევებში:
ü მხოლოდ სიმღვრივე აღინიშნა დაგროვების გარემოში;
ü ლაქტოზადადებით კოლონიებთან კუთვნილება საეჭვოა.
OKB-ის არსებობის დასადასტურებლად, შეასრულეთ შემდეგი ნაბიჯები:
1. საეჭვო კოლონიის მარყუჟით ამოღების შემდეგ შეამოწმეთ ანაბეჭდის არსებობა ენდო გარემოზე;
2. ოქსიდაზას ტესტის ჩატარება;
3. ჩეკი, რომელიც ეკუთვნის გრამ ჯგუფს;
4. დაადასტურეთ გაზის წარმოქმნის უნარი 1-2 იზოლირებული ყველა ტიპის კოლონიის დანერგვით თითოეული სექტორიდან დადასტურების გარემოში (LPS ინდიკატორით), რასაც მოჰყვება ინკუბაციები 37 °C ტემპერატურაზე 24-48 საათის განმავლობაში.
იზოლირებული კოლონიების არარსებობის შემთხვევაში, ენდოს გარემოზე გაცრა ხდება ჩვეულებრივი მეთოდებით. უარყოფითი აზრი მოცემულია, თუ:
ü დაგროვების გარემოში არ შეინიშნება ზრდის ნიშნები;
ü არ არის ზრდა ენდო გარემოს სექტორებში;
ü კოლონიები, რომლებიც არ იყო დამახასიათებელი კოლიფორმული ბაქტერიებისთვის (გამჭვირვალე, დაკბილული კიდეებით, ბუნდოვანი) გაიზარდა ენდო გარემოს სექტორებზე;
ü ყველა კოლონია იყო ოქსიდაზადადებითი;
ყველა კოლონია იყო გრამდადებითი;
ü დამადასტურებელ ტესტში LPS საშუალოზე ინდიკატორით, გაზის წარმოქმნა არ დაფიქსირდა.
TCB-ის დასადგენად, იმუშავეთ ენდო გარემოს სექტორებთან, სადაც გაიზარდა ტიპიური ლაქტოზა + კოლონიები. თითოეული ტიპის ორი ან სამი იზოლირებული კოლონია თითოეული სექტორიდან ინოკულირებულია საცდელ მილებში ლაქტოზის დაგროვების ნებისმიერი საშუალებით, ინკუბირებული 44 ° C ტემპერატურაზე დღეში. ლაქტოზის დაგროვების გარემოში გაზის წარმოქმნით, ლაქტოზადადებითი ბაქტერიების გამრავლებით ენდო გარემოზე და ლაქტოზას მჟავად და გაზად დუღილის უნარის გამოვლენით ლაქტოზას დადასტურებაში 44 ° C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში. , დადებითი დასკვნა კეთდება ამ მოცულობის წყალში TKB-ის არსებობის შესახებ. ხარისხობრივ კვლევაში (თითოეული 100 სმ3 სამი მოცულობის შემოწმებისას, როდესაც OKB და TKB აღმოჩენილია, მინიმუმ სამი ტომიდან ერთში, შემდეგი ჩანაწერი კეთდება: „OKB და TBC ნაპოვნია 100 სმ3-ში“.
რაოდენობრივი მეთოდით კვლევაში NVCh, OKB და TKB განისაზღვრება სპეციალური ცხრილების მიხედვით. თუ ყველა გამოკვლეულ ტომში OKB და TKB არსებობის კვლევის შედეგები უარყოფითია, გამოდის დასკვნა: „100 სმ3-ში OKB და TKB არ აღმოჩნდა“.
8.1. მიკროორგანიზმების საერთო რაოდენობის განსაზღვრა მკვებავი აგარის კოლონიებს
8.1.1. ინდიკატორის ცნების განმარტება
მეთოდი განსაზღვრავს სასმელ წყალში მეზოფილური აერობული და ფაკულტატური ანაერობული მიკროორგანიზმების (FMC) საერთო რაოდენობას, რომლებსაც შეუძლიათ შექმნან კოლონიები მკვებავ აგარს 37 °C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში, ხილული 2-ჯერ გაზრდით.
8.1.2. ანალიზის ჩატარება
თითოეული ნიმუშიდან, სულ მცირე, ორი ტომი 1 მლ ინოკულირებულია.
საფუძვლიანი შერევის შემდეგ წყლის ნიმუშებს ამატებენ 1 მლ სტერილურ პეტრის ჭურჭელში, ოდნავ გახსნიან სახურავებს. წყლის დამატების შემდეგ, (8-12) მლ (თითო ჭიქა 90-100 მმ დიამეტრით) გამდნარი და გაციებული (45-49) ° C-მდე მკვებავი აგარი ასხამენ თითოეულ ფინჯანს, ჭურჭლის კიდეზე ადუღების შემდეგ. რომელსაც იგი შეიცავს. შემდეგ სწრაფად აურიეთ ჭიქების შიგთავსი, თანაბრად გადანაწილდით მთელ ფსკერზე, თავიდან აიცილეთ ჰაერის ბუშტების წარმოქმნა, ჭიქის კიდეებზე და სახურავზე აგარის მიღება. ეს პროცედურა ტარდება ჰორიზონტალურ ზედაპირზე, სადაც ფირფიტები რჩება აგარის გამაგრებამდე.
ანალიზის პერიოდის მდნარი აგარი მოთავსებულია წყლის აბაზანაში ან თერმოსტატში, რომელიც ინარჩუნებს ტემპერატურას (45-49) °C.
აგარის გამაგრების შემდეგ, კულტურებთან ერთად ფირფიტები თავსდება თავდაყირა თერმოსტატში და ინკუბირებულია (37 ± 1)°C ტემპერატურაზე (24 ± 2) საათის განმავლობაში.
8.1.3. შედეგებიც კი
თეფშზე გაზრდილი ყველა კოლონია, რომელიც შეინიშნება 2-ჯერ გადიდებით, დათვლილია. მხედველობაში მიიღება მხოლოდ ის კერძები, რომლებზეც 300-ზე მეტი იზოლირებული კოლონიაა გაშენებული.
ორივე ფირფიტაზე კოლონიების რაოდენობა შეჯამებულია და იყოფა ორზე. შედეგი გამოიხატება როგორც კოლონიების ფორმირების ერთეულების რაოდენობა (CFU) საცდელი წყლის ნიმუშის 1 მლ-ში.
თუ 2 ფირფიტიდან ერთ-ერთზე დათვლა შეუძლებელია, შედეგი მოცემულია ერთ ფირფიტაზე კოლონიების დათვლის საფუძველზე. თუ ორი ფირფიტა აჩვენებს დიფუზურ კოლონიას, რომელიც არ ფარავს ფირფიტის მთელ ზედაპირს, ან გაიზარდა 300-ზე მეტი კოლონია და ანალიზის გამეორება შეუძლებელია, დათვალეთ კერძის სექტორი და შემდეგ ხელახლა გამოთვალეთ მთელი ზედაპირი. ამ შემთხვევებში, ოქმში აღნიშნულია „CFU/ml-ის რაოდენობა - დაახლოებით“.
თუ ფირფიტებზე კოლონიების დათვლა შეუძლებელია, ჩაწერეთ „უწყვეტი ზრდა“ პროტოკოლზე.
8.2. ჩვეულებრივი და თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერიების განსაზღვრა მემბრანული ფილტრაციით (ძირითადი მეთოდი)
8.2.1. ინდიკატორის ცნების განმარტება
საერთო კოლიფორმული ბაქტერიები (CBC) არის გრამუარყოფითი, ოქსიდაზა-უარყოფითი, სპორების გარეშე ღეროები, რომლებსაც შეუძლიათ გაიზარდონ ლაქტოზას დიფერენციალურ გარემოზე, ადუღონ ლაქტოზა მჟავად, ალდეჰიდამდე და გაზამდე (37 ± 1) ° C ტემპერატურაზე (24- 48) სთ.
თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერიები (TCB) არის საერთო კოლიფორმულ ბაქტერიებს შორის, გააჩნიათ ყველა მათი მახასიათებელი და, გარდა ამისა, შეუძლიათ ლაქტოზას დუღილის მჟავა, ალდეჰიდი და აირი (44 ± 0,5) °C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში.
8.2.2. მეთოდის პრინციპი
მეთოდი ემყარება წყლის გარკვეული მოცულობის გაფილტვრას მემბრანული ფილტრების მეშვეობით, კულტურების მოყვანას დიფერენციალურ მკვებავ გარემოზე ლაქტოზასთან და კოლონიების შემდგომ იდენტიფიკაციაზე კულტურული და ბიოქიმიური თვისებებით.
8.2.3. ანალიზის ჩატარება
8.2.3.1. კვლევის ბრძანება
სასმელი წყლის შესწავლისას გაანალიზებულია 3 ტომი 100 მლ.
თუ სტაბილური უარყოფითი შედეგები მიიღება, 300 მლ წყალი შეიძლება გაიფილტროს ერთი ფილტრით.
უცნობი ხარისხის წყლის გაფილტვრისას მიზანშეწონილია გაფილტრული მოცულობების რაოდენობის გაზრდა ფილტრზე იზოლირებული კოლონიების მისაღებად (მაგალითად, 10, 40, 100, 150 მლ წყალი).
წყლის გაზომილი მოცულობა იფილტრება მემბრანული ფილტრებით მე-7 პუნქტში მოცემული მოთხოვნების დაცვით.
ფილტრები მოთავსებულია 5.4 პუნქტის მიხედვით მომზადებულ ენდო გარემოზე. ფილტრებით ჭიქები მოთავსებულია თერმოსტატში თავდაყირა და ინკუბირებულია (37 ± 1) °C ტემპერატურაზე (24 ± 2) საათის განმავლობაში.
თუ ფილტრებზე არ არის ზრდა ან კოლონიები არის მემბრანული, სპონგური, დაბნეული, გამჭვირვალე, ბუნდოვანი, ისინი უარყოფით პასუხს იძლევიან: OKB და TKB-ის არარსებობა 100 მლ საცდელ წყალში. ანალიზი სრულდება 24 საათის შემდეგ.
თუ ფილტრებზე აღმოჩენილია იზოლირებული ტიპიური ლაქტოზადადებითი კოლონიების ზრდა: მუქი წითელი, წითელი მეტალის ბზინვარებით ან მის გარეშე, ან სხვა მსგავსი ტიპის კოლონიები ფილტრის უკანა მხარეს ანაბეჭდით, დაითვალეთ თითოეული ტიპის კოლონიების რაოდენობა. ცალკე და გააგრძელეთ მათი კუთვნილების დადასტურება OKB და TKB.
OKB-ს არსებობის დასადასტურებლად შეამოწმეთ:
ყველა კოლონია, თუ 5-ზე ნაკლები კოლონია გაიზარდა ფილტრებზე;
ყოველი ტიპის მინიმუმ 3-4 კოლონია.
TKB-ს არსებობის დასადასტურებლად, ყველა ტიპიური კოლონია გამოკვლეულია, მაგრამ არაუმეტეს 10.
თითოეული შერჩეული იზოლირებული კოლონია გამოკვლეულია:
ოქსიდაზას აქტივობის არსებობა;
გრამის კუთვნილება (გრამით შეღებილი პრეპარატის მიკროსკოპია ან გრეგერსენის ტესტი);
ლაქტოზის დუღილი მჟავასა და გაზამდე.
8.2.3.2. ოქსიდაზას ტესტის დაყენება
ფილტრის ქაღალდის ზოლი მოთავსებულია სუფთა პეტრის ჭურჭელში და სველდება ოქსიდაზას ტესტის რეაგენტის 2-3 წვეთი 5.7 პუნქტის მიხედვით. დასრულებული ქაღალდის სისტემები ტენიანდება გამოხდილი წყლით. იზოლირებული კოლონიის ნაწილი შუშის საქაღალდეით ან პლატინის მარყუჟით (ნიქრომისგან დამზადებულ ლითონის მარყუჟს შეუძლია ცრუ დადებითი რეაქციის გამოწვევა) იდება მომზადებულ ფილტრის ქაღალდზე. რეაქცია დადებითად ითვლება, თუ ინსულტის იისფერი-ყავისფერი (სექცია 5.7.1 ვარიანტი 1) ან ლურჯი (სექცია 5.7.2 ვარიანტი 2 და NIB ოქსიდაზა) შეღებვა გამოჩნდება 1 წუთში. უარყოფითი რეაქციით, კულტურის გამოყენების ადგილზე ფერი არ იცვლება. დადებითი შედეგით, ეს კოლონია გამორიცხულია შემდგომი კვლევისგან.
თუ მუქ წითლად შეღებილი კოლონიების გამოკვლევისას მიიღება არასაკმარისად მკაფიო შედეგი, აუცილებელია კულტურის გადატანა ენდო გარემოდან მკვებავ აგარში. ინკუბაციის შემდეგ, ტესტი მეორდება.
8.2.3.3. გრამის კუთვნილების განსაზღვრა
ნაცხი აღებულია ოქსიდაზა-უარყოფითი კოლონიიდან, გრამებით შეღებილი და მიკროსკოპული გამოკვლევა.
სპირტით გაცხიმებულ შუშის სლაიდზე, 1 წვეთი გამოხდილი წყალი მარყუჟის სახით გამოიყენება, მცირე რაოდენობით კულტურა ემატება გაანალიზებული კოლონიიდან და ვრცელდება შუშის ზედაპირზე. ნაცხი აშრება ოთახის ტემპერატურაზე და სამჯერ ფიქსირდება დამწვრობის ალით. პრეპარატზე დაიტანება ფილტრის ქაღალდის ზოლი და მასზე (0,5-1) წთ ასხამენ იისფერი გენტიანის კარბოლურ ხსნარს, აცლიან ქაღალდს, ასხამენ ლუგოლის ხსნარს (0,5-1) წთ, ლუგოლის ხსნარს დრენირებას. და ჭიქა ირეცხება ეთილის სპირტში (0,5-1) წუთის განმავლობაში, სანამ საღებავი არ ტოვებს. შემდეგ ჭიქა კარგად გარეცხილია წყლით და (1-2) წუთის განმავლობაში შეღებილია Ziel's ფუქსინით, განზავებული 1:10 გამოხდილი წყლით. პრეპარატის გარეცხვისა და გაშრობის შემდეგ ნაცხის მიკროსკოპული გამოკვლევა ხდება.
გრამის შეღებვისთვის რეაგენტების მომზადება აღწერილია 5.9 ნაწილში.
გრამუარყოფითი მიკროორგანიზმები ვარდისფერია, გრამდადებითი ლურჯი. კოლიფორმული ბაქტერიები გრამუარყოფითი ღეროებია.
გრამის ლაქა შეიძლება შეიცვალოს გრეგერსენის ტესტით, რომელიც არ საჭიროებს ოპტიკის გამოყენებას.
გრეგერსენის ტესტი: შუშის სლაიდზე KOH-ის 3%-იანი წყალხსნარის წვეთში ემულსირდება მყარი გარემოდან აღებული ბაქტერიული მასა. მარყუჟით მორევის რამდენიმე წამის შემდეგ, სუსპენზია ხდება ლორწოვანი და ლორწოვანი ძაფები იჭიმება მარყუჟის უკან, რაც მიუთითებს, რომ საცდელი კულტურა ან კოლონია ეკუთვნის გრამუარყოფით სახეობას. გრამდადებით ბაქტერიებში ლორწოვანი ძაფები არ წარმოიქმნება - რეაქცია უარყოფითია.
8.2.3.4. ლაქტოზის დუღილის განსაზღვრა
ოქსიდაზა-უარყოფითი გრამუარყოფითი იზოლირებული კოლონიის დანარჩენი ნაწილი დათესეს პარალელურად ორ სინჯარაში ლაქტოზის შემცველობით (გვ. 5.6):
OKB-ის არსებობის დასადასტურებლად, კულტურა ინკუბირებულია (37 ± 1) °C ტემპერატურაზე 48 საათის განმავლობაში;
TKB-ს არსებობის დასადასტურებლად, ინოკულაცია ტარდება წინასწარ გახურებულ გარემოში (43-44) °C ტემპერატურამდე და ინკუბირებულია (44 ± 0.5) °C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში.
მჟავისა და აირის წარმოქმნის პირველადი აღრიცხვა დამადასტურებელ ნახევრად თხევად მედიაზე და NIB (სექცია 5.6) შესაძლებელია (4-6) საათის შემდეგ, თუ მჟავა და აირი აღმოჩენილია, დადებითი პასუხია. მჟავისა და აირის არარსებობის შემთხვევაში ან მხოლოდ მჟავას თანდასწრებით, ტუბები კულტურებით TKB-ის საბოლოო დათვლისთვის რჩება 24 საათამდე. მილები კულტურებით TTB-ის არსებობის დასადასტურებლად 24 საათის შემდეგ დათვალიერებისა და უარყოფითი შედეგის მიღების შემდეგ. რჩება საბოლოო დასათვლელად 48 საათამდე.
თუ გამოსაკვლევი კოლონია მცირე ზომისაა, მოამზადეთ იგი მკვებავი აგარის ფერდობზე და ინკუბაციის შემდეგ (18-24) საათის განმავლობაში, ჩაატარეთ ყველა საჭირო დამადასტურებელი ტესტი.
8.2.3.5. შეასრულეთ დამადასტურებელი ტესტები კოლონიის გადაფარვაში ან უწყვეტ ზრდაში
თუ ფილტრის ზედაპირის ნაწილზე ან მთელზე შეინიშნება კოლონიები ან უწყვეტი ზრდა, ოქსიდაზას ტესტი ტარდება მემბრანული ფილტრის მოთავსებით ფილტრზე უფრო დიდი დიამეტრის ფილტრის ქაღალდის წრეზე, რეაგენტით უხვად დასველებულ ან NIB-ზე. გამოხდილი წყლით დასველებული ოქსიდაზას დისკი. როდესაც რეაქციის პირველი ნიშნები გამოჩნდება, მაგრამ არაუმეტეს 5 წუთის შემდეგ, მემბრანული ფილტრი გადადის ისევ ენდო გარემოში. რეაქციის მკაფიო გამოვლინების შემდეგ, შედეგი განისაზღვრება. თუ იისფერი-ყავისფერი ან ლურჯი ფერი გამოჩნდება (გამოყენებული რეაგენტის მიხედვით), ოქსიდაზას ტესტი დადებითად ითვლება.
თუ ფილტრებზე ყველა კოლონია არის ოქსიდაზადადებითი, ისინი მხედველობაში არ მიიღება და პასუხობენ OKB და TKB არარსებობის შესახებ და ასრულებენ ანალიზს.
უარყოფითი ოქსიდაზას რეაქციის შემთხვევაში, გაცრა ტარდება მანამ, სანამ არ მიიღება იზოლირებული კოლონიები და არ დადასტურდება მათი კუთვნილება OKB-სა და TKB-ის მიმართ 8.2.3.3-8.2.3.4 (ხარისხობრივი ანალიზი) მიხედვით.
8.2.4. შედეგების აღრიცხვა
8.2.4.1. გრამუარყოფითი კოლონიები ითვლება როგორც TBC უარყოფითი ოქსიდაზას ტესტისთვის და ლაქტოზას დუღილისთვის 37°C-ზე მჟავისა და აირის წარმოქმნისთვის.
გრამუარყოფითი კოლონიები ითვლება როგორც TKB უარყოფითი ოქსიდაზას ტესტში და ლაქტოზას ფერმენტაციაში 44°C-ზე მჟავისა და აირის წარმოებით.
8.2.4.2. ყველა ფილტრზე საერთო და თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერიების არარსებობის შემთხვევაში, შედეგი აღირიცხება, როგორც „არ არის TCB-ის CFU 100 მლ-ში“ და „არ არის TCB-ის CFU 100 მლ-ში“.
8.2.4.3. ყველა გაზრდილი საეჭვო კოლონიის იდენტიფიკაციის შემთხვევაში, TKB და TKB კოლონიების წარმომქმნელი ერთეულების რაოდენობა ითვლება ყველა ფილტრზე და CFU ანალიზის შედეგი გამოხატულია 100 მლ წყალში.
გაანგარიშება ხორციელდება ფორმულის მიხედვით:
X არის კოლონიების რაოდენობა 100 მლ-ში;
წყლის გაფილტრული მოცულობა ფილტრების მეშვეობით, რომლებზეც ინახებოდა ანგარიში;a არის ამ ფილტრებზე დათვლილი კოლონიების საერთო რაოდენობა.
1. 100 მლ 3 ფილტრის დათესვისას 100 მლ-ში ორი კოლონია გაიზარდა, დანარჩენ ორ ფილტრზე ზრდა არ ყოფილა. მთლიანი ან თერმოტოლერანტული კოლიფორმების რაოდენობა იქნება:
CFU OKB (TKB) 100 მლ2. 40 მლ გაფილტრული მოცულობის ფილტრებზე 10, 40, 100 და 150 მლ თესვისას გაიზარდა 4 იზოლირებული კოლონია, გაფილტრული მოცულობით 100-3 OKB. ფილტრები 10 მლ და 150 მლ მოცულობით გადაჭარბებულია და არ ექვემდებარება აღრიცხვას. OKB (TKB) კოლონიების საერთო რაოდენობა იმ ფილტრებზე, სადაც იზოლირებული კოლონიები იქნა მიღებული, შეჯამებულია და ხელახლა გამოითვლება 100 მლ მოცულობისთვის.
CFU 100 მლ8.2.4.4. თუ იმავე ტიპის კოლონიების შერჩევითი შემოწმების დროს მიიღება არათანაბარი შედეგები, მაშინ ამ ტიპის კოლონიებს შორის OKB ან TKB რიცხვები გამოითვლება ფორმულის მიხედვით:
, სადX არის იმავე ტიპის დადასტურებული ბაქტერიების რაოდენობა;
a არის ამ ტიპის კოლონიების საერთო რაოდენობა;
- ტესტირებულთა რაოდენობა;c არის დადებითი შედეგის მქონე კოლონიების რაოდენობა.
თითოეული ტიპის კოლონიების აღრიცხვის შედეგები შეჯამებულია და შემდეგ გამოითვლება 8.2.4.3-8.2.4.4 პუნქტების მიხედვით.
8.2.4.5. საბოლოო შედეგი მოცემულია: CFU TCB-ის რაოდენობა 100 მლ-ში, საიდანაც CFU TCB რაოდენობა 100 მლ-ში.
ინდიკატური შედეგის მიღება შესაძლებელია ენდოს გარემოზე ტიპიური კოლიფორმული კოლონიების გამოვლენით, რომლებიც წარმოიქმნება გრამუარყოფითი ოქსიდაზა-უარყოფითი ბაქტერიებით. საბოლოო პასუხი დასტურდება ლაქტოზის დუღილის შედეგებით.
8.2.4.6. ყველა ფილტრზე კოლონიების ან უწყვეტი ზრდისას (პუნქტი 8.2.3.5), OKB-სა და TKB-ს კუთვნილების დადასტურების შემთხვევაში, გამოდის ხარისხობრივი შედეგი „გამოვლენილი OKB 100 მლ-ში“.
თუ ფილტრზე ყველა კოლონია არის ოქსიდაზადადებითი ან მათი კუთვნილება OKB და TKB არ არის დადასტურებული, ანალიზი დასრულებულია, პროტოკოლში ნათქვამია "ფილტრები დამარხულია".
ორივე შემთხვევაში ანალიზი მეორდება.
8.3. საერთო და თერმოტოლერული კოლიფორმული ბაქტერიების დადგენა ტიტრაციის მეთოდით
8.3.1. ინდიკატორის ცნების განმარტება
OKB და TKB ინდიკატორების ცნების განმარტება 8.2.1 პუნქტის მიხედვით.
8.3.2. განაცხადის არეალი
ტიტრირების მეთოდი შეიძლება გამოყენებულ იქნას:
მემბრანული ფილტრაციით ანალიზის ჩასატარებლად საჭირო მასალებისა და აღჭურვილობის არარსებობის შემთხვევაში;
შეჩერებული მყარი ნივთიერებების მაღალი შემცველობის წყლის ანალიზისას;
წყალში უცხო მიკროფლორის ჭარბობის შემთხვევაში, რაც ხელს უშლის ფილტრებზე საერთო კოლიფორმული ბაქტერიების იზოლირებული კოლონიების წარმოქმნას.
8.3.3. მეთოდის პრინციპი
მეთოდი ეფუძნება ბაქტერიების დაგროვებას წყლის ფიქსირებული მოცულობის თხევად მკვებავ გარემოში ინოკულაციის შემდეგ, რასაც მოჰყვება ლაქტოზით დიფერენციალურ მკვრივ მკვებავ გარემოზე და კოლონიების იდენტიფიცირება კულტურული და ბიოქიმიური ტესტებით.
8.3.4. ანალიზის ჩატარება
სასმელი წყლის შესწავლაში ხარისხობრივი მეთოდი(მიმდინარე სანიტარიული და ეპიდემიოლოგიური ზედამხედველობა, წარმოების კონტროლი) ინოკულაცია 3 ტომი 100 მლ.
წყლის დანიშნულებისამებრ შესწავლისას რაოდენობრივი OKB და TKB, ხელახალი ანალიზის დროს, ინოკულაცია: 3 ტომი 100 მლ, 3 ტომი 10 მლ, 3 ტომი 1 მლ.
საცდელი წყლის თითოეული მოცულობა ინოკულირებულია ლაქტოზა-პეპტონის გარემოში, რომელიც მომზადებულია 5.5 პუნქტის მიხედვით. 100 მლ და 10 მლ წყლის ინოკულაცია ტარდება 10 და 1 მლ კონცენტრირებულ ლაქტოზა-პეპტონურ გარემოში, ნიმუშის 1 მლ ინოკულაცია ხდება 10 მლ ნორმალური კონცენტრაციის გარემოში.
ნათესები ინკუბირებულია (37 ± 1) °C 48 საათის განმავლობაში, არა უადრეს 24 საათისა. ინკუბაცია, ტარდება კულტურების წინასწარი შეფასება. კონტეინერებიდან, სადაც აღინიშნება ზრდის არსებობა (სიბურდულობა) და გაზის წარმოქმნა, ბაქტერიოლოგიური მარყუჟი ინოკულირებულია ენდო გარემოს სექტორებში (სექცია 5.4.1) იზოლირებული კოლონიების მისაღებად.
ზრდისა და გაზის წარმოქმნის გარეშე კონტეინერებს ტოვებენ თერმოსტატში და ბოლოს 48 საათის შემდეგ ათვალიერებენ, ზრდის ნიშნების გარეშე ნათესები უარყოფითად ითვლება და ისინი შემდგომ კვლევას არ ექვემდებარება. კონტეინერებიდან, სადაც აღინიშნება სიმღვრივე და გაზის წარმოქმნა ან მხოლოდ სიმღვრივე, დათესვა ხდება ენდო გარემოს სექტორებზე.
ინოკულაციები ენდო გარემოზე ინკუბირებულია (37 ± 1) °C ტემპერატურაზე (18-20) საათის განმავლობაში.
დაგროვების გარემოში სიმღვრივისა და გაზის წარმოქმნით და ლაქტოზადადებითი ბაქტერიებისთვის დამახასიათებელი კოლონიების ენდო გარემოზე ზრდით: მუქი წითელი ან წითელი, მეტალის ბზინვარებით ან მის გარეშე, ამოზნექილი წითელი ცენტრით და ანაბეჭდით საკვებ ნივთიერებაზე. საშუალო, ისინი დადებით პასუხს აძლევენ საერთო კოლიფორმების, ბაქტერიების არსებობას მოცემულ ნიმუშის მოცულობაში.
OKB-ს არსებობა საჭიროა დაადასტუროს:
თუ მხოლოდ სიმღვრივე აღინიშნება დაგროვების გარემოში;
თუ ლაქტოზაზე დადებით კოლონიებს მიეკუთვნება მკვლევარი საეჭვოა. ამ შემთხვევებში:
შეამოწმეთ ანაბეჭდი ენდოს მედიუმზე საეჭვო კოლონიის მარყუჟის შემდეგ;
ჩაატარეთ ოქსიდაზას ტესტი 8.2.3.2 პუნქტის მიხედვით;
დაადასტურეთ გრამის კუთვნილება 8.2.3.3 პუნქტის მიხედვით;
გაზის წარმოქმნის უნარი დასტურდება თითოეული სექტორიდან თითოეული ტიპის იზოლირებული 1-2 კოლონიის ლაქტოზით გარემოზე ინოკულაციის გზით 5.6 პუნქტის მიხედვით, რასაც მოჰყვება ინკუბაციების ინკუბაციით (37 ± 1) ° C ტემპერატურაზე ( 24-48) საათი.
იზოლირებული კოლონიების არარსებობის შემთხვევაში, გაცრა ტარდება ენდო გარემოზე ჩვეულებრივი ბაქტერიოლოგიური მეთოდებით.
უარყოფითი პასუხი მოცემულია, თუ:
დაგროვების გარემოში ზრდის ნიშნები არ შეინიშნება;
არ არის ზრდა ენდო გარემოს სექტორებზე;
კოლიფორმული ბაქტერიებისთვის დამახასიათებელი კოლონიები (გამჭვირვალე დაკბილული კიდეებით, ბუნდოვანი და ა.შ.) გაიზარდა ენდო გარემოს სექტორებზე;
ყველა კოლონია იყო ოქსიდაზა დადებითი;
ყველა კოლონია იყო გრამდადებითი;
თუ გაზის წარმოქმნა არ შეინიშნება დამადასტურებელ ტესტში ნახშირწყლების შემცველ გარემოზე.
დადგენისთვის თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერიებიიმუშავეთ ენდო გარემოს სექტორებთან, სადაც გაიზარდა ტიპიური ლაქტოზადადებითი კოლონიები. თითოეული ტიპის 2-3 იზოლირებული კოლონიის დათესვა თითოეული სექტორიდან საცდელ მილებში 5.6 პუნქტის მიხედვით მომზადებული ნებისმიერი ლაქტოზის შემცველობით.
თესვის წინ ნიადაგი თბება წყლის აბაზანაში ან თერმოსტატში 44 °C-მდე. ინოკულაციის შემდეგ დაუყოვნებლივ, მილები მოთავსებულია თერმოსტატში და ინკუბირებულია (44 ± 0,5) °C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში, ნებადართულია ინოკულაციების ნახვა (4-6) საათის შემდეგ.
დაგროვების გარემოში გაზის წარმოქმნით, ლაქტოზადადებითი ბაქტერიების ზრდით ენდო გარემოზე და ამ ბაქტერიების უნარის გამოვლენით ლაქტოზას მჟავასა და გაზამდე დუღილის უნარი 24 საათის განმავლობაში 44 ° C ტემპერატურაზე. მიეცით დადებითი პასუხი ამ მოცულობაში TKB წყლის ნიმუშის არსებობაზე. ყველა სხვა შემთხვევაში უარყოფით პასუხს აძლევენ.
დასაშვებია TKB-ის არსებობაზე პასუხის გაცემის დაჩქარება დაგროვების საშუალების მოცულობებიდან 1 მლ ინოკულაციაზე, სადაც აღინიშნება სიმღვრივე და გაზის წარმოქმნა ლაქტოზა-პეპტონური გარემოთი საცდელ მილაკში, ფლაკონის მიხედვით. პუნქტი 5.6 და წინასწარ გახურებულია 44 ° C ტემპერატურამდე. ნათესები ინახება თერმოსტატში (44 ± 0,5) °C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში, თუ მჟავა და აირი აღმოჩენილია, ისინი დადებით პასუხს იძლევიან.
8.3.5. შედეგების აღრიცხვა
100 მლ 3 მოცულობის შესწავლისას შედეგები ფასდება ხარისხობრივად და თუ OKB და TKB გამოვლინდა 3 ტომიდან მინიმუმ ერთში, ჩანაწერი კეთდება ოქმში "აღმოაჩინეს 100 მლ".
რაოდენობრივი მეთოდის შესწავლისას OKB-სა და TKB-ის ყველაზე სავარაუდო რიცხვი (MPN) განისაზღვრება ცხრილის მიხედვით. 1.1 აპლიკაცია 1.
შედეგი მოხსენებულია ნდობის ინტერვალის გარეშე.
ყველა გამოკვლეულ ტომში TKB-სა და TKB-ის არსებობაზე უარყოფითი პასუხის შემთხვევაში გამოდის დასკვნა ოქმში „არ არის ნაპოვნი 100 მლ-ში“.
8.4. სულფიტ-აღმდგენი კლოსტრიდიების სპორების განსაზღვრა
8.4.1. ინდიკატორის ცნების განმარტება
სულფიტის შემამცირებელი კლოსტრიდიები არის სპორის წარმომქმნელი ანაერობული ღეროს ფორმის მიკროორგანიზმები, რომლებიც ამცირებენ ნატრიუმის სულფიტს რკინა-სულფიტ აგარზე (44 ± 1) ° C ტემპერატურაზე (16-18) საათის განმავლობაში.
8.4.2. მეთოდის პრინციპი
მეთოდი ეფუძნება ნათესების მოყვანას რკინის სულფიტ აგარში ანაერობულთან მიახლოებულ პირობებში და შავი კოლონიების რაოდენობის დათვლას.
8.4.3. ანალიზის ჩატარება
8.4.3.1. 20 მლ წყლის ნიმუში თბება წყლის აბაზანაში საცდელ მილებში (75 ± 5)°C ტემპერატურაზე 15 წუთის განმავლობაში მცენარეული ფორმების გამორიცხვის მიზნით.
ქლორირებული წყლის შესწავლისას ნიმუშის გათბობა შეიძლება გამოტოვდეს.
სასმელი წყლის თითოეული ნიმუშიდან 20 მლ კულტივირებული ან გაფილტრულია. საჭიროების შემთხვევაში შეარჩიეთ მოცულობები ისე, რომ ნათესებში (ფილტრებზე) გაიზარდოს არაუმეტეს 10-15 კოლონია. ამ შემთხვევაში ისინი წინა კვლევების შედეგებით ხელმძღვანელობენ.
წყლის ფილტრაცია ხორციელდება მე-7 პუნქტით გათვალისწინებული მოთხოვნების შესაბამისად.
8.4.3.2. განსაზღვრა ფილტრაციით საცდელ მილებში
ინოკულაციამდე, 5.8-ის მიხედვით მომზადებული რკინის სულფიტის აგარის მილები დნება წყლის აბაზანაში (არ ადუღოთ!). თესვის დროს გარემო ინახება (70-80) °C-მდე გაცხელებულ წყლის აბაზანაში.
წყლის განსაზღვრული მოცულობის გაფილტვრის შემდეგ მემბრანული ფილტრი მიიღება დაფქული პინცეტით ორი მოპირდაპირე კიდით და მილის სახით მოქცეულია საცდელ მილში ცხელ აგართან ერთად. ფილტრის მხარე დასახლებული ბაქტერიებით არის მიმართული შიგნით. ამ შემთხვევაში, ფილტრი გასწორებულია და მდებარეობს საცდელი მილის კედლის გასწვრივ.
ინოკულაციის შემდეგ დაუყოვნებლივ, ანაერობული პირობების შესაქმნელად მილის აგარი და ფილტრი სწრაფად გაცივდება ცივ წყალში მოთავსებით. კულტურების მოყვანა (44 ± I) °C ტემპერატურაზე (16-18) საათის განმავლობაში.
8.4.3.3. განსაზღვრა ფილტრაციით პეტრის ჭურჭელში
პეტრის ჭურჭელი დიამეტრის (55-60) მმ ივსება რკინა-სულფიტ აგარის თხელი ფენით. ფილტრაციის შემდეგ მოათავსეთ ფილტრი ფილტრის ზედაპირით ქვემოთ გამაგრებულ საკვებ გარემოზე ისე, რომ ფილტრის ქვეშ არ იყოს ჰაერის ბუშტები. შემდეგ დაასხით გამდნარი რკინის სულფიტის აგარი ჭურჭლის ზევით ისე, რომ თავსახური მჭიდროდ მოერგოს გარემოს ანაერობული პირობების შესაქმნელად. კულტურების გაშენება (44 ± 1) ° C ტემპერატურაზე (16 - 1 8) საათის განმავლობაში.
8.4.3.4. განსაზღვრა პირდაპირი დათესვით
რკინის სულფიტის აგარის ფლაკონები და წყლის ნიმუში მომზადებულია როგორც აღწერილია 8.4.3.1-ში.
დაამატეთ სტერილურ სინჯარებში:
10 მლ 2 სინჯარაში (მინიმუმ 30 მლ მოცულობით) ან
5 მლ 4 სინჯარაში (თითოეული 15 მლ).
ნათესებს ასხამენ ცხელ რკინა-სულფიტ აგარს იმ რაოდენობით, რომელიც აღემატება წყლის მოცულობას 2-ჯერ. დაასხით საშუალო საცდელი მილის კედლის გასწვრივ, თავიდან აიცილოთ ჰაერის ბუშტების წარმოქმნა. ამის შემდეგ მილის სწრაფად გაგრილება ხდება ცივ წყალში მოთავსებით ანაერობული პირობების შესაქმნელად. ინოკულაციები ინკუბირებულია (44 ± 1) °C (16-18) საათის განმავლობაში.
8.4.4. შედეგების აღრიცხვა
რაოდენობრივ აღრიცხვას ექვემდებარება მხოლოდ ის კულტურები, სადაც მიიღება იზოლირებული კოლონიები. შავი კოლონიები დათვლილია, იზრდება როგორც ფილტრებზე, ასევე მკვებავი გარემოს სისქეში.
ანალიზის შედეგი გამოიხატება 20 მლ წყალში სულფიტის აღმდგენი კლოსტრიდიების სპორების კოლონიების წარმომქმნელი ერთეულების (CFU) რაოდენობით.
თუ ყველა ფილტრზე არ არის შავი კოლონიების ზრდა, პასუხი არის "არ არის ნაპოვნი 20 მლ წყალში".
თუ შერწყმული ზრდის გამო შეუძლებელია კოლონიების დათვლა, შედეგი ფასდება ხარისხობრივად, ოქმში აღნიშნულია „ნაპოვნი 20 მლ-ში“. საჭიროების შემთხვევაში, რაოდენობრივი შედეგის მისაღებად, ანალიზი მეორდება.
8.5. კოლიფაგების განმარტება
8.5.1. ინდიკატორის ცნების განმარტება
კოლიფაგები არის ბაქტერიული ვირუსები, რომლებსაც შეუძლიათ E. coli-ის ლიზირება და წარმოქმნა (37 ± 1)°C ტემპერატურაზე (18 ± 2) საათის შემდეგ ბაქტერიული გაზონის ლიზისის ზონების (დაფების) მკვებავი აგარს.
8.5.2. ტიტრირების მეთოდი კოლიფაგების დასადგენად
8.5.2.1. მეთოდის პრინციპი
კოლიფაგების განსაზღვრა სასმელ წყალში მოიცავს კოლიფაგების წინასწარ დაგროვებას გამდიდრებულ გარემოში E. coli-ს კულტურაზე და შემდგომში E. coli გაზონის ლიზისის (განათების) ზონების იდენტიფიცირებას საკვებ აგარს.
8.5.2.2. განაცხადის არეალი
მეთოდი განკუთვნილია სასმელი წყლის ხარისხის მიმდინარე მონიტორინგისთვის.
8.5.2.3. სატესტო კულტურის მომზადება E. coli K12 StrR.
კვლევის ყველა ეტაპზე გამოიყენება შემდეგნაირად მომზადებული ბაქტერიული სუსპენზია: E. coli-ს კულტურა ინოკულირებულია საცდელ მილში დახრილი საკვები აგარი სტრეპტომიცინთან ერთად (ნაწილი 5.3.5). ინკუბაციიდან (18 ± 2) საათის შემდეგ (37 ± 1) ° C ტემპერატურაზე, გარეცხეთ ბაქტერიები სახსრიდან 5 მლ სტერილური ფიზიოლოგიური ხსნარით (0,85% NaCl ხსნარი) და სიმღვრივის სტანდარტის მიხედვით მოამზადეთ სუსპენზია. E. coli-ს 109 ბაქტერიული უჯრედის კონცენტრაციით 1 მლ.
დასაშვებია 37°C ტემპერატურაზე თერმოსტატში გაზრდის შედეგად მიღებული E. coli-ს 4-საათიანი ბულიონის კულტურის გამოყენება. 109 E. coli ბაქტერიული უჯრედის კონცენტრაცია შეიცავს 2 მლ.
8.5.2.4. თვისებრივი ანალიზის ჩატარება
სატესტო წყალში დაამატეთ 10 მლ 10-ჯერადი მკვებავი ბულიონი (მომზადებული პუნქტის 5.2.2 მიხედვით) და 1 მლ სატესტო კულტურის მომზადებული სარეცხი ან 2 მლ 4-საათიანი ბულიონის კულტურა (პუნქტი 8.5.2.3). ნიმუში 100 მლ მოცულობით.
კულტურის კონტროლისთვის, 0,1 მლ E. coli სარეცხი (ან 0,2 მლ 4-საათიანი ბულიონის კულტურა) მოთავსებულია პეტრის ჭურჭელში და დაფარულია მკვებავი აგარით.
ტესტის წყლის ნიმუში (100 მლ) და პეტრის ჭურჭელი E. coli კონტროლით მოთავსებულია თერმოსტატში და ინკუბირებულია (37 ± 1) °C ტემპერატურაზე (18 ± 2) საათის განმავლობაში.
ინკუბაციის შემდეგ საცდელი წყლის ნიმუშის 10 მლ შეედინება სინჯარაში და ემატება 1 მლ ქლოროფორმი.
საცდელი მილი იხურება სტერილური რეზინის ან სილიკონის საცობით, ენერგიულად შეანჯღრიეთ, რათა თანაბრად გადანაწილდეს ქლოროფორმი ნიმუშის მოცულობაზე და დატოვეთ ოთახის ტემპერატურაზე მინიმუმ 15 წუთის განმავლობაში, სანამ ქლოროფორმი მთლიანად არ დალექდება.
წინასწარ გამდნარ და (45-49) °C-მდე გაცივებულ ნუტრიენტ აგარში, დაამატეთ E. coli ბაქტერიის მომზადებული გამორეცხვა (პუნქტი 8.5.2.3) 1.0 მლ გამორეცხვის სიჩქარით (ან 2 მლ 4-საათიანი ბულიონი. კულტურა) 100 მლ აგარს.
ქლოროფორმით დამუშავებული ნიმუშის 1 მლ (ქლოროფორმის შეხების გარეშე) გადაიტანეთ სტერილურ პეტრის ჭურჭელში პიპეტით საცდელი მილიდან და შეავსეთ იგი გამდნარი და გაციებული (45-49) °C მკვებავი აგარის ნარევით მოცულობით. (12-15) მლ, ისევე როგორც ერთი დამატებითი პეტრიდის ჭურჭელი საკონტროლო E. coli კულტურებისთვის და ნაზად შეანჯღრიეთ, რომ თანაბრად აირიოს წყალი და აგარის ნიმუშები. სრული გამაგრებისთვის ჭიქები 10 წუთის განმავლობაში ტოვებენ მაგიდაზე ოთახის ტემპერატურაზე. გამაგრების შემდეგ ჭიქებს აბრუნებენ და ათავსებენ თერმოსტატში (18 ± 2) საათის განმავლობაში 37 °C ტემპერატურაზე.
ნიმუშების სერიის შესრულებისას, ზოგადი კონტროლი მოთავსებულია მთელი სერიისთვის.
შედეგების აღრიცხვა
დაათვალიერეთ გადაცემული შუქით მიღებული კულტურები.
ნიმუში განიხილება დადებითად სრული ლიზისის, რამდენიმე დაფის გასუფთავების, ერთი დაფა ჭურჭელზე წყლის ნიმუშით საკონტროლო ჭურჭელზე ლიზისის ზონების არარსებობის შემთხვევაში.
ანალიზის პროტოკოლში აღნიშნულია: 100 მლ წყალში აღმოაჩინეს ან არ აღმოაჩინეს კოლიფაგები (ხარისხობრივი შედეგი).
თუ კულტურის კონტროლში არის ლიზისის ზონები, შედეგი ჩაითვლება არასწორი.
8.5.2.5. რაოდენობრივი ანალიზის ჩატარება
დაასხით გამოკვლეული წყლის ნიმუში 100 მლ ოდენობით 6 ტომად: 1 ბოთლი 50 მლ და 5 სინჯარა 10 მლ. ნიმუშის 50 მლ-ს დაამატეთ 5 მლ ათჯერადი მკვებავი ბულიონი (5.2.2-ის მიხედვით) და 0.5 მლ სარეცხი (ან 1 მლ 4-საათიანი ბულიონის კულტურა) E. coli ბაქტერია (პუნქტი 8.5.2.3). . ნიმუშის თითოეულ 10 მლ-ში დაამატეთ 1 მლ ათჯერადი საკვები ბულიონი და 0,1 მლ სარეცხი (ან 0,2 მლ 4-საათიანი ბულიონის კულტურა) E. coli ბაქტერია.
კულტურის კონტროლისთვის, ბაქტერიების OD მლ სარეცხი (ან 0,2 მლ 4-საათიანი ბულიონის კულტურა) E. coli მოთავსებულია პეტრის ჭურჭელში და ივსება მკვებავი აგარით.
ნათესები ინკუბირებულია (37 ± 1) °C ტემპერატურაზე 18 ± 2 საათის განმავლობაში.
ინკუბაციის შემდეგ 50 მლ მოცულობიდან 10 მლ ჩაასხით სინჯარაში. დაამატეთ 1 მლ ქლოროფორმი 6 ტესტის მოცულობას. დახურეთ ტესტი მილები სტერილური რეზინის ან სილიკონის საცობებით, შეანჯღრიეთ ენერგიულად, რათა თანაბრად გადანაწილდეს ქლოროფორმი ნიმუშის მოცულობაზე და დატოვეთ ოთახის ტემპერატურაზე მინიმუმ 15 წუთის განმავლობაში ქლოროფორმის დასალექად.
ადრე გამდნარ და (45-49) °C-მდე გაცივებულ მკვებავ აგარში დაამატეთ E. coli ბაქტერიის მომზადებული სარეცხი საშუალება (8.5.2.3) 1.0 მლ რეცხვის სიჩქარით (ან 2 მლ 4-საათიანი ბულიონი. კულტურა) 100 მლ აგარს. მომზადებული ნარევი ჩაასხით პეტრის ჭურჭელში: 1 ჭიქა E. coli-ს კულტურის გასაკონტროლებლად ლიზოგენურობისთვის და თითო ჭიქა წყლის თითოეული ნიმუშისთვის. რამდენიმე წყლის ნიმუშის ერთდროული ანალიზით მოთავსებულია E. coli კულტურის ერთი კონტროლი.
აგარის გამაგრების შემდეგ, ნიმუშების ინოკულაციისთვის განკუთვნილი კერძები იყოფა 6 სექტორად, ეტიკეტირებული შესასწავლი მოცულობების შესაბამისად. პასტერის პიპეტით (მიკროპიპეტი ან ბაქტერიოლოგიური მარყუჟი გრძივი დარტყმით) დაასხით 1 წვეთი ზედაპირული სითხის (ქლოროფორმის გარეშე) თითოეულ სექტორზე შესაბამისი საცდელი მილიდან.
წვეთების გაშრობის შემდეგ, მოათავსეთ ჭიქები ტესტის ნიმუშებთან და საკონტროლო თასთან ერთად თერმოსტატში (37 ± 1) °C (18 ± 2) საათის განმავლობაში.
შედეგების აღრიცხვა
შედეგები განიხილება გადაცემული შუქით.
აღრიცხვა ხორციელდება E. coli გაზონის სექტორებზე განმანათლებლობის (ლიზის) ზონების არსებობით.
პიპეტით წვეთოვანი დათესვის მეთოდის გამოყენებისას წარმოიქმნება ლიზისის ზონა მომრგვალებული ლაქის ან ცალკეული დაფების სახით. ბაქტერიოლოგიური მარყუჟით გრძივი დარტყმის დათესვისას აღინიშნება ლიზისი ინსულტის გასწვრივ.
ნიმუში ითვლება დადებითად, თუ არსებობს ლიზისის ზონა მინიმუმ ერთ სექტორზე საკონტროლო ფირფიტაზე ლიზისის ზონების არარსებობის შემთხვევაში.
შეფასება ტარდება დაფების წარმომქმნელი ერთეულების (PFU) ყველაზე სავარაუდო რაოდენობის (MPN) ცხრილის მიხედვით (ცხრილი 1.2). ანალიზის პროტოკოლში მითითებულია კოლიფაგების ყველაზე სავარაუდო რაოდენობა 100 მლ წყალში და შესაძლო რყევების დიაპაზონი: LF PFU (ქვედა ზღვარი - ზედა ზღვარი) კოლიფაგების 100 მლ-ში. შედეგი ნახევრად რაოდენობრივია.
თუ საკონტროლო ჭურჭელში არის ლიზისის ზონები, შედეგი ითვლება ბათილად.
8.5.3. კოლიფაგების განსაზღვრის პირდაპირი მეთოდი
.ერთი. მეთოდის პრინციპისასმელ წყალში კოლიფაგების განსაზღვრა გულისხმობს წყლის ნორმალიზებული მოცულობის (100 მლ) შესწავლას პირდაპირი ინოკულაციის გზით და შემდგომში ლიზისის ზონების (დაფების) რეგისტრაციაში E. coli გაზონზე პეტრის ჭურჭელში მკვებავი აგარით.
8.5.3.2. დომენი
წყლიდან კოლიფაგების გამოყოფის პირდაპირი მეთოდი ტარდება ტიტრირების მეთოდის პარალელურად კვლევებში ეპიდემიური ჩვენებების მიხედვით.
8.5.3.3. ანალიზის ჩატარება
ორმაგი კონცენტრაციის ნუტრიენტ აგარში (გვ. 5.3.2), გადნებულ და გაცივებულ (45-49) ° C-მდე, დაამატეთ E. coli wash (გვ. 8.5.2.3) 2.0 მლ სარეცხი სიჩქარით (ან 4 მლ). 4-საათიანი ბულიონის კულტურა) ყოველ 100 მლ აგარს, შეურიეთ. გამოკვლეული 100 მლ წყალი ჩაასხით 20 მლ დიდ სინჯარებში, გაათბეთ (35-44) °C-მდე და დაუყოვნებლივ (საჭირო ტემპერატურის მიღწევიდან არაუმეტეს 5 წუთისა) ჩაასხით 5 პეტრის ჭურჭელში და დაუყოვნებლივ დაუმატეთ 20 მლ თითოეულ ჭურჭელს. აგარის ნარევები E. coli კულტურასთან.
E. coli კულტურის გასაკონტროლებლად, ერთ პეტრის ჭურჭელში დაამატეთ 20 მლ სტერილური ონკანის წყალი, წინასწარ გახურებული (35-44) ° C, დაასხით 20 მლ მომზადებული E. coli აგარი და ნაზად აურიეთ.
ჭიქების შიგთავსი ნაზად აურიეთ და დატოვეთ ოთახის ტემპერატურაზე გამაგრებამდე. გაყინული აგარის მქონე ფირფიტები მოათავსეთ თავდაყირა თერმოსტატში და ინკუბაცია (37 ± 1) °C ტემპერატურაზე (18 ± 2) საათის განმავლობაში.
შედეგების აღრიცხვა
ნათესების დათვალიერება ხორციელდება გადაცემული შუქით.
შედეგების აღრიცხვა ხორციელდება 5 პეტრის ჭურჭელზე მოყვანილი დაფების დათვლით და შეჯამებით. შედეგები გამოხატულია დაფის ფორმირების ერთეულებში (PFU) 100 მლ წყლის ნიმუშზე. საკონტროლო ჭურჭელში არ უნდა იყოს დაფები.
ყველაზე ხშირად, ლიზისის ზონები ჰგავს გამჭვირვალე ლაქებს მკვებავი აგარის ტესტის კულტურის გაზონის ფონზე მრგვალი იზოლირებული ფირფიტების სახით (1-დან 5-7) მმ დიამეტრში, მკაფიოდ განსაზღვრული ან წაშლილი საზღვრებით.
ფაგის მაღალი კონცენტრაციის დროს შეინიშნება ლიზისის განსხვავებული ნიმუში.
ნეგატიური კოლონიების შერწყმა იძლევა E. coli-ს "აჟურულ" გაზონს, E. coli-ს ცალკეული კოლონიების ზრდას უწყვეტი ლიზისის ფონზე ან კერძზე ზრდის სრულ ნაკლებობას.
პირდაპირი ინოკულაციით შესაძლებელია ლიზისი, რომელიც დაფარულია არაჰომოგენურად გამაგრებული აგარით, ასევე დახურულია თანმხლები მიკროფლორით. კონდენსატის წვეთებმა და არაჰომოგენურად დაყენებულმა აგარს პირდაპირი ინოკულაციის შედეგად შეიძლება გამოიწვიოს არტეფაქტების წარმოქმნა E. coli გაზონში, რომლებიც ვიზუალურად წააგავს ლიზას.
შედეგების წინასწარი აღრიცხვა შეიძლება განხორციელდეს ინკუბაციიდან (5-6) საათის შემდეგ. ამ ეტაპზე ლიზისის მკაფიო ზონების არსებობისას შეიძლება წინასწარი პასუხის გაცემა წყალში კოლიფაგების არსებობის შესახებ.
პირდაპირი ინოკულაციის საბოლოო რაოდენობრივი ჩანაწერი ტარდება (18 ± 2) საათის შემდეგ, შედეგები გამოიხატება როგორც დაფების წარმომქმნელი ერთეულების რაოდენობა (PFU) 100 მლ წყლის ნიმუშზე.
თუ შერწყმული დაფის ზრდა შეინიშნება და დათვლა რთულია, მაშინ შესაძლებელია ხარისხობრივი შედეგის მიღება პირდაპირი დათესვის მიხედვით: „ნახულია 100 მლ წყალში“.
თუ პირდაპირი მეთოდით მუშაობისას უარყოფითი შედეგი მიიღება, საბოლოო პასუხი მოცემულია ტიტრადიონის მეთოდის შედეგების მიხედვით.
თუ საკონტროლო ჭურჭელში არის ლიზისის ზონები, კვლევის შედეგი ითვლება ბათილად.
8.5.4. კონტროლის დაყენება
8.5.4.1. უარყოფითი კონტროლი
უარყოფითი კონტროლი ადასტურებს მკვებავი მედიის, ლაბორატორიული მინის ჭურჭლის, აღჭურვილობის ფაგური დაბინძურების არარსებობას მომზადებისა და ანალიზის ეტაპებზე და ასევე საშუალებას გაძლევთ შეაფასოთ E საცდელი კულტურის უნარი. coli ერთიანი გაზონის მისაცემად.
უარყოფითი კონტროლი არის სტერილური ონკანის წყლის შესწავლა, რომელიც ტარდება გაანალიზებული წყლის ნიმუშის მსგავსად. ასე რომ, წყლის ტიტრირების მეთოდით გაანალიზებისას დამატებით სინჯარას ემატება 10 მლ სტერილური ონკანის წყალი. წყლის პირდაპირი ინოკულაციის გზით გაანალიზებისას დამატებით მეექვსე პეტრის ჭურჭელს ემატება 20 მლ სტერილურ ონკანის წყალი.
დამატებითი კულტურების გამოკვლევა ხდება კოლიფაგებისთვის ისევე, როგორც ძირითადი ნიმუშები.
ნიმუშების სერიის ანალიზისას, თითოეული ტიპის ანალიზისთვის შეიძლება არსებობდეს ერთი უარყოფითი კონტროლი: ტიტრირება და პირდაპირი. ამ შემთხვევაში უარყოფითი კონტროლი იდგმება ამ სერიის ყველა ნიმუშის დამუშავების შემდეგ.
თუ ნეგატიურ საკონტროლო ფირფიტებში აღმოჩენილია კოლიფაგების დაფები, წყლის ნიმუშების მთელი სერიის კვლევის შედეგები არასწორია.
აუცილებელია ლაბორატორიული აღჭურვილობის, ჭურჭლის, მკვებავი საშუალებების სტერილობის შემოწმება და საკონტროლო ინოკულაციის გამეორება E. coli K12 F + StrR ტესტის შტამის სიწმინდისთვის.
უარყოფითი კონტროლის სიხშირე - 1-ჯერ დღეში.
8.5.4.2. ლიზისის ფაგური ბუნების დადასტურების მეთოდი
საეჭვო შემთხვევებში, როგორც ტიტრაციით, ასევე პირდაპირი მეთოდებით მუშაობისას, აუცილებელია ჩატარდეს საკონტროლო ინოკულაცია ლიზისის ფაგური ხასიათის დასადასტურებლად.
ამ მიზნით, ბაქტერიოლოგიური მარყუჟი გამოიყენება აგარის ნაწილის მოსაშორებლად, რომელიც საეჭვოა კოლიფაგებზე, მოათავსეთ იგი 5 მლ მკვებავ ბულიონში, სადაც ემატება E. coli ტესტის კულტურის წვეთი და ინკუბირებულია 37 ° C-ზე (16 -18) საათი.მიღებულ კულტურას ამუშავებენ ქლოროფორმით და იკვლევენ ფაგის არსებობას. დათესვა ხორციელდება მარყუჟით ან პიპეტით მკვებავი აგარის სექტორებზე ისევე, როგორც აღწერილია 8.5.2.5 პუნქტში. ლიზისი რომელიმე სექტორზე განიხილება, როგორც ფაგის არსებობის დადასტურება.
კომენტარები მაგიდაზე. OKB-ისა და TKB-ის რაოდენობის შეფასებით 100 სმ 3 წყალში, უნდა გაანალიზდეს მინიმუმ სამი მოცულობის წყალი (თითოეული 100 სმ 3). OKB და MCH შეფასებისას სტანდარტის გადამეტება დაუშვებელია წლის განმავლობაში აღებული ნიმუშების 95%-ში. კოლიფაგები განისაზღვრება მხოლოდ წყალმომარაგების სისტემებში ზედაპირული წყაროებიდან, სანამ წყალი მიეწოდება სადისტრიბუციო ქსელს, იგივე ეხება ჯიარდიას ცისტების არსებობას. სულფიტ-შემმცირებელი კლოსტრიდიების სპორების შემცველობა განისაზღვრება მხოლოდ წყლის დამუშავების ტექნოლოგიის ეფექტურობის შეფასებისას. TKB, OKB, კოლიფაგების ან რომელიმე მითითებული ინდიკატორის გამოვლენის შემთხვევაში, კვლავ ტარდება წყლის გადაუდებელი შესწავლა TKB, OKB და კოლიფაგებისთვის. პარალელურად, წყლის ტესტირება ხდება ქლორიდებზე, ამონიუმის აზოტზე, ნიტრატებზე და ნიტრიტებზე. თუ ხელახლა აღებულ ნიმუშში აღმოჩენილია ორზე მეტი TKB 100 სმ 3-ზე და/ან TKB და/ან კოლიფაგი, მაშინ ტარდება გამოკვლევა ნაწლავის ჯგუფის პათოგენურ ბაქტერიებზე და/ან ენტეროვირუსებზე. იგივე კვლევა პათოგენურ ენტერობაქტერიებსა და ენტეროვირუსებზე ტარდება ეპიდემიოლოგიური ჩვენებების მიხედვით როსპოტრებნადზორის ტერიტორიული ცენტრების გადაწყვეტილებით.
თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერია (TCB)შედიან OKB-ის შემადგენლობაში და აქვთ ყველა მათი მახასიათებელი, მაგრამ მათგან განსხვავებით, მათ შეუძლიათ ლაქტოზის დადუღება მჟავებამდე, ალდეჰიდამდე და აირამდე +44 ° C ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში. ამრიგად, TKB განსხვავდება OKB-სგან OKB-ის უნარით. ლაქტოზას დუღილი მჟავად და აირამდე მაღალ ტემპერატურაზე.
დასადგენი ინდიკატორები, კვლევების რაოდენობა და სიხშირე დამოკიდებულია წყალმომარაგების წყაროს ტიპზე, ამ წყალმომარაგების სისტემიდან წყლით უზრუნველყოფილი მოსახლეობის რაოდენობაზე. ეს მონაცემები მოცემულია SanPiN 2.1.4.1074–01. სასმელი წყლის სანიტარული და მიკრობიოლოგიური ანალიზის სახელმძღვანელოში ( MUK 4.2.1018-01 რუსეთის ფედერაციის ჯანდაცვის სამინისტროს) რეგულირდება სასმელი წყლის ხარისხის სანიტარიული და მიკრობიოლოგიური კონტროლის მეთოდები.
მიკროორგანიზმების საერთო რაოდენობა- ეს არის მეზოფილური (ტემპერატურის ოპტიმალური +37 °C) აერობული და ფაკულტატური ანაერობული მიკროორგანიზმების (MAFAnM) ჯამური რაოდენობა, რომლებიც ჩანს ორჯერ გაზრდით, რომლებსაც შეუძლიათ შექმნან კოლონიები საკვები აგარზე +37 °C ტემპერატურაზე. 24 საათის განმავლობაში.ამ ინდიკატორის იდენტიფიცირებისთვის 1მლ წყალს უმატებენ სტერილურ პეტრის ჭურჭელს და ავსებენ გამდნარი (ტემპერატურა არაუმეტეს +50°C) ხორც-პეპტონის აგარით და ერთი დღის შემდეგ ითვლებიან გაზრდილი კოლონიების რაოდენობას. .
OKB და TKB-ის განსაზღვრა მემბრანული ფილტრების მეთოდით
მეთოდი ემყარება წყლის გარკვეული მოცულობის ფილტრაციას მემბრანული ფილტრების მეშვეობით. ამ მიზნებისათვის გამოიყენება ფილტრები ფორების დიამეტრით 0,45 მიკრონი და ზომით 35 ან 47 მმ დიამეტრი (შიდა ფილტრები "Vladipor" MFAS-S-1, MFAS-S-2, MFAS-MA (No. 4- 6) ან უცხოური - ISO 9000 ან EN 29000). მემბრანული ფილტრები მზადდება ანალიზისთვის მწარმოებლის ინსტრუქციის შესაბამისად.
OKB და TKB-ის განსაზღვრა ტიტრარების მეთოდით
მეთოდი ეფუძნება ბაქტერიების დაგროვებას წყლის გარკვეული მოცულობის ინოკულაციის შემდეგ თხევად საკვებ გარემოში, რასაც მოჰყვება ხელახალი ინოკულაცია დიფერენციალურ მკვრივ გარემოზე ლაქტოზით და კოლონიების იდენტიფიცირება კულტურული და ბიოქიმიური ტესტებით. სასმელი წყლის ხარისხობრივი მეთოდით შესწავლისას (მიმდინარე სანიტარიული და ეპიდემიოლოგიური ზედამხედველობა) ითესება სამი ტომი 100 სმ 3. წყლის შესწავლისას OKB-ისა და TKB-ის რაოდენობრივი დასადგენად (ხელახალი ანალიზი) ინოკულირებულია 100, 10 და 1 სმ 3, შესაბამისად - თითოეული სერიის სამი ტომი.
ნიადაგის სანიტარიულ-მიკრობიოლოგიური შესწავლა
ნიადაგი თავშესაფარს აძლევს სხვადასხვა მიკროორგანიზმებს. ასე რომ, მხოლოდ ბაქტერიების რაოდენობა ნიადაგში აღწევს 10 მილიარდ უჯრედს 1 გ-ზე მიკროორგანიზმები მონაწილეობენ ნიადაგის ფორმირებაში და ნიადაგის თვითგაწმენდაში, ბუნებაში აზოტის, ნახშირბადის და სხვა ელემენტების მიმოქცევაში. ბაქტერიების გარდა, მასში ცხოვრობენ სოკოები, პროტოზოები და ლიქენები, რომლებიც წარმოადგენს სოკოების სიმბიოზს ციანობაქტერიებთან. ულტრაიისფერი სხივების მავნე ზემოქმედების, გამოშრობის და სხვა ფაქტორების გამო ნიადაგის ზედაპირზე შედარებით ცოტა მიკროორგანიზმებია. ნიადაგის სახნავი ფენა 10–15 სმ სისქის შეიცავს მიკროორგანიზმების უდიდეს რაოდენობას. სიღრმის გაღრმავებასთან ერთად მიკროორგანიზმების რაოდენობა მცირდება 3–4 მ სიღრმეზე გაქრებამდე.ნიადაგის მიკროფლორის შემადგენლობა დამოკიდებულია მის ტიპზე და მდგომარეობაზე, მცენარეულობის შემადგენლობაზე, ტემპერატურაზე, ტენიანობაზე და ა.შ. ნიადაგის მიკროორგანიზმების უმეტესობას შეუძლია განვითარდეს ნეიტრალურ pH-ზე, მაღალი ფარდობითი ტენიანობისა და 25-დან 45 °C-მდე ტემპერატურაზე.
სპორის წარმომქმნელი ღეროები ცხოვრობენ ნიადაგში ბაცილიდა კლოსლირიდიუმი.არაპათოგენური ბაცილები (Vas. megaterium, Vas. subtilisდა ა.შ.). ფსევდომონასთან, პროტეუსთან და ზოგიერთ სხვა ბაქტერიასთან ერთად ისინი ამონიფიკაციას ახდენენ, რაც ქმნიან დამპალი ბაქტერიების ჯგუფს, რომლებიც მინერალიზებენ ორგანულ ნივთიერებებს. პათოგენური სპორის წარმომქმნელი ღეროები (ჯილეხის, ბოტულიზმის, ტეტანუსის, გაზის განგრენის გამომწვევი აგენტები) შეიძლება დიდხანს გაგრძელდეს, ზოგი კი ნიადაგში მრავლდება ( კლოსტრიდიუმიბოტულინი). ნიადაგი ასევე არის აზოტის დამფიქსირებელი ბაქტერიების ჰაბიტატი, რომლებიც ითვისებენ მოლეკულურ აზოტს. (Azotobacter, Azomonas, Mycobacteriumდა ა.შ.). ბრინჯის მინდვრების ნაყოფიერების გასაუმჯობესებლად გამოიყენება ციანობაქტერიების აზოტიანი ჯიშები, ან ცისფერ-მწვანე წყალმცენარეები.
ნაწლავის ბაქტერიების ოჯახის წევრები (ფამ. Enterobacteriaceae) - E. coli, ტიფური ცხელების, სალმონელოზისა და დიზენტერიის გამომწვევი აგენტები, როდესაც მიწაში მოხვდება განავლით, იღუპება. სუფთა ნიადაგებში იშვიათია Escherichia coli და Proteus; Escherichia coli ჯგუფის ბაქტერიების (კოლიფორმული ბაქტერიების) გამოვლენა მნიშვნელოვანი რაოდენობით არის ნიადაგის დაბინძურების მაჩვენებელი ადამიანის და ცხოველის განავლით და მიუთითებს მის სანიტარიულ და ეპიდემიოლოგიურ არახელსაყრელობაზე ნაწლავური ინფექციების პათოგენების გადაცემის შესაძლებლობის გამო. პროტოზოების რაოდენობა ნიადაგში 500-დან 500000-მდე მერყეობს 1 გრ ნიადაგზე. იკვებება ბაქტერიებითა და ორგანული ნარჩენებით, პროტოზოები იწვევს ნიადაგის ორგანული ნივთიერებების შემადგენლობის ცვლილებებს. ნიადაგში ასევე უამრავი სოკოა, რომელთა ტოქსინები ადამიანის საკვებში დაგროვებით იწვევს ინტოქსიკაციას - მიკოტოქსიკოზს და აფლატოქსიკოზს.
ნიადაგის კვლევის შედეგები მხედველობაში მიიღება დასახლებებში მათი ჯანმრთელობისა და მოსახლეობის საცხოვრებელი პირობების საფრთხის ხარისხის დადგენისა და პროგნოზირებისას (ეპიდემიოლოგიური ჩვენებების მიხედვით), ინფექციური და არაინფექციური დაავადებების პროფილაქტიკა (პროფილაქტიკური სანიტარული ზედამხედველობა). , იმ ობიექტების მიმდინარე სანიტარული კონტროლი , რომლებიც პირდაპირ თუ ირიბად ზემოქმედებენ გარემოზე .
ნიადაგის მდგომარეობის მიმდინარე სანიტარიული ზედამხედველობის განხორციელებისას, ისინი შემოიფარგლება მოკლე სანიტარული და მიკრობიოლოგიური ანალიზით, რომელიც მიუთითებს ფეკალური დაბინძურების არსებობასა და ხარისხზე. ამ ჯგუფში შემავალი ინდიკატორები ასევე ახასიათებს ნიადაგის თვითგაწმენდის პროცესებს ორგანული დამაბინძურებლებისა და ენტერობაქტერიებისგან. პრევენციული სანიტარიული ზედამხედველობის სახით ტარდება ნიადაგის სრული სანიტარული და მიკრობიოლოგიური ანალიზი. ქიმიური დამაბინძურებლების ზემოქმედება ბიოგეოცენოზზე გულისხმობს მათი ბაქტერიციდული მოქმედების შესწავლას ნიადაგის მიკრობიოტაზე, შედეგად: ნიადაგის მიკროორგანიზმების საზოგადოების ცვლილება, ნიადაგის ფერმენტული აქტივობა. ეპიდემიური ჩვენებების მიხედვით ტარდება პათოგენური მიკრობიოტის ჩვენება.
ლაბორატორიაში საშუალო სინჯს ამზადებენ ერთი ადგილიდან აღებული 5-პუნქტიანი ნიადაგის ნიმუშებიდან, საფუძვლიანად აურიეთ და შეიზილეთ სტერილურ ფაიფურის თასში რეზინის ღვეზელით 5 წუთის განმავლობაში. უცხო მინარევები (მცენარის ფესვები, ქვები, ჩიპები) ამოღებულია ნიადაგის გაცრილით საცრით, რომელიც წინასწარ იწმინდება 96% ეთილის სპირტით დასველებული ბამბის ტამპონით. ნიმუშები აღებულია საშუალო ნიმუშიდან (1-დან 50-55 გ-მდე, განსაზღვრული ინდიკატორების ჩამონათვალის მიხედვით) და 1:10 სუსპენზია მზადდება სტერილურ ონკანის წყალში (10 გ ნიადაგი 90 სმ 3 წყალზე). ნიადაგის ნაწილაკების ზედაპირიდან მიკროორგანიზმების დეზორბციისთვის მომზადებული ნიადაგის სუსპენზია 3 წუთის განმავლობაში შეანჯღრიეთ მექანიკურ დისპერსერ მიქსერზე. სუსპენზიის 30 წმ დაბინავების შემდეგ ამზადებენ ნიადაგის თანმიმდევრულ 10-ჯერ განზავებას 10 -4 -10 -5 გ/სმ 3 კონცენტრაციამდე.
ნიადაგების სანიტარიული და მიკრობიოლოგიური კვლევების შედეგების შეფასება ხორციელდება ტერიტორიულ სიახლოვეს მდებარე ერთი და იმავე შემადგენლობის ნიადაგების ექსპერიმენტულ და საკონტროლო ნაკვეთებზე მიღებული მონაცემების შედარებით. ინდივიდუალური სანიტარული და მიკრობიოლოგიური კრიტერიუმების საფუძველზე ნიადაგის სანიტარული მდგომარეობის შეფასების სქემები წარმოდგენილია ქ. MU No 14446–76(ცხრილი 2).
ცხრილი 2
|
ტიტრი (გ) |
თერმოფილური მიკროორგანიზმების ინდექსი (უჯრედების რაოდენობა/გრ) |
|||
|
ბგკპ |
ნიტრიფიცირებული ბაქტერიები |
კლოსტრიდია |
||
|
0.01 და ზემოთ | ||||
|
დაბინძურებული | ||||
|
მძიმედ დაბინძურებული |
0.009 და ქვემოთ |
0.0009 და ქვემოთ |
0.00009 და ქვემოთ | |
AT MU 2.1.7.730–99 "ნიადაგის ხარისხის ჰიგიენური შეფასება დასახლებულ ადგილებში"წარმოდგენილია დასახლებულ პუნქტებში ნიადაგების ეპიდემიური საშიშროების შეფასების სქემა. ამ დოკუმენტში ნიადაგზე ბიოლოგიური დატვირთვის ინტენსივობის შესაფასებლად გამოიყენება ისეთი ინდიკატორები, როგორიცაა CGB და ენტეროკოკის ინდექსი, ხოლო ნიადაგის ეპიდემიური საფრთხის შესაფასებლად გამოიყენება პათოგენური ენტერობაქტერიები და ენტეროვირუსები.
ჰაერის გარემოს მიკრობული ობსემინაციის შესწავლა
მიკროორგანიზმები ჰაერში შედიან ნიადაგიდან, წყლიდან, აგრეთვე სხეულის ზედაპირიდან, სასუნთქი გზებიდან და ადამიანისა და ცხოველის ნერწყვის წვეთებით. აქ გვხვდება კოკოიდური და ღეროს ფორმის ბაქტერიები, ბაცილები, კლოსტრიდიები, აქტინომიცეტები, სოკოები და ვირუსები. ჰაერი განიხილება რესპირატორული ინფექციების გადაცემის ფაქტორად, რომლის დროსაც პათოგენი გადადის საჰაერო ხომალდის წვეთებით ან ჰაერის მტვერით. მზის შუქი და სხვა ფაქტორები ხელს უწყობს ჰაერის მიკროფლორას სიკვდილს. ჰაერის მიკრობული დაბინძურების შესამცირებლად, შენობის სველი გაწმენდა ხორციელდება ჰაერის ვენტილაციასთან და გაწმენდასთან (ფილტრაციასთან) ერთად. ასევე გამოიყენება აეროზოლური დეზინფექცია და შენობების დამუშავება ულტრაიისფერი გამოსხივების ნათურებით (მაგალითად, მიკრობიოლოგიურ ლაბორატორიებში და საოპერაციო განყოფილებებში).
ბევრი მიკროორგანიზმი შეიცავს შიდა შენობების ჰაერს, რომელთა მიკრობული დაბინძურება დამოკიდებულია შენობის დასუფთავების პირობებზე, განათების დონეზე, ოთახში მყოფთა რაოდენობაზე, ვენტილაციის სიხშირეზე და ა.შ. მიკროორგანიზმების დიდი რაოდენობა. იმყოფება დიდი ქალაქების ჰაერში, უფრო მცირე რაოდენობა - სოფლის ჰაერში. განსაკუთრებით ცოტა მიკროორგანიზმებია ჰაერში ტყეებში, მთებსა და ზღვებში.
ჰაერის მიკრობიოლოგიური გამოკვლევა ითვალისწინებს მიკროორგანიზმების, აგრეთვე სტაფილოკოკების მთლიანი შემცველობის დადგენას 1 მ 3 ჰაერში. ზოგიერთ შემთხვევაში, ჰაერი ტესტირება ხდება გრამუარყოფით ბაქტერიებზე, ობის და საფუარის მსგავს სოკოებზე. ეპიდემიური ჩვენებების მიხედვით, ჰაერში გამოვლენილი პათოგენების სპექტრი შეიძლება გაფართოვდეს.
ჰაერის ნიმუშები აღებულია ასპირაციით კროტოვის აპარატის გამოყენებით.
საკმაოდ მისაღებია კოხის დალექვის მეთოდის გამოყენება. შესწავლას ექვემდებარება ჯანდაცვის დაწესებულებების შემდეგი შენობები - საოპერაციო ოთახები, გასახდელი და სამკურნალო ოთახები, ასეპტიკური პალატები (ბოქსები), ანესთეზიოლოგიისა და რეანიმაციის განყოფილების პალატები, სამედიცინო განყოფილებების პალატები და დერეფნები, აფთიაქების შენობები, სტერილიზაცია და მეანობა - გინეკოლოგიური განყოფილებები და სისხლის გადასხმის სადგურები (განყოფილებები).
ჰაერის შესწავლა კოხის მეთოდით გამოიყენება უკიდურესად იშვიათ შემთხვევებში ჰაერის მიკრობული დაბინძურების ხარისხის სავარაუდო შეფასებისთვის. საოპერაციო ოთახების ჰაერში მიკროორგანიზმების საერთო რაოდენობის დასადგენად, სამუშაოს დაწყებამდე გახსენით ფირფიტები მკვებავი აგარით და დააყენეთ ისინი დაახლოებით საოპერაციო მაგიდის სიმაღლეზე - ერთი ფირფიტა ცენტრში და ოთხი ოთახის კუთხეებში (“ კონვერტის მეთოდი”) 10 წუთის განმავლობაში, ხოლო Staphylococcus aureus-ის გამოსავლენად ( გამოიყენება ჭიქები yolk-მარილის აგარით (YSA) - 40 წუთის განმავლობაში მოსავალი ინკუბირებულია თერმოსტატში +37 ° C და დღეში ოთახის ტემპერატურაზე, შემდეგ ნომერი ითვლება კოლონიების 2 ზედაპირი მკვებავი გარემოს 5 წუთში ექსპოზიციის დროს დეპონირდება ისეთი რაოდენობის ბაქტერია, რომელიც შეიცავს 10 ლიტრ ჰაერში (1000 ლიტრი შეიცავს 1 მ 3-ში). მიკროორგანიზმების 5-ზე მეტი კოლონია არ უნდა გაიზარდოს მკვებავი აგარის ფირფიტებზე და Staphylococcus aureus არ უნდა გამოჩნდეს.
კვების ობიექტების სანიტარიული და მიკრობიოლოგიური კონტროლი
საკვები პროდუქტები შეიძლება დაბინძურდეს სხვადასხვა მიკროორგანიზმებით, რაც იწვევს მათ გაფუჭებას, საკვებით მოწამვლისა და ინტოქსიკაციის განვითარებას, აგრეთვე ინფექციებს, როგორიცაა ჯილეხი, ბრუცელოზი, ტუბერკულოზი და ა.შ. ცხოველთა დაავადებები, დაზიანებები ან მისი შენარჩუნების არახელსაყრელი პირობები ხელს უწყობს სხეულის დამცავი ბარიერების დარღვევას და მიკროორგანიზმების გადატანას (გადატანას) ჩვეულებრივ სტერილურ ქსოვილებსა და ორგანოებში (ინტრავიტალური დათესვა). შედეგად, მოკლული ცხოველის ქსოვილები დაბინძურებულია პროტოზოებით, კლოსტრიდიებით და სხვა მიკრობებით; მასტიტით მოხვდა სტაფილოკოკის და სტრეპტოკოკის რძეში. ასევე შესაძლებელია საკვები პროდუქტების მეორადი დაბინძურება მიკროორგანიზმებით. ამ შემთხვევაში დაბინძურების წყაროა გარემოს ობიექტები (ნიადაგი, წყალი, ტრანსპორტი და ა.შ.), ასევე ავადმყოფი ადამიანები და ბაქტერიების მატარებლები. ხორცისა და ხორცპროდუქტების შენახვის დაბალ ტემპერატურაზე, თუნდაც გაყინულ ხორცში, შეიძლება ჭარბობდეს ფსიქოფილურ პირობებში გამრავლების უნარის მქონე მიკრობები (ფსევდომონა, პროტეუსი, ასპერგილუსი, პენიცილიუმი და სხვ.). მიკრობები, რომლებიც ცხოვრობენ ხორცში, იწვევენ მას ლორწოვანს; ის ავითარებს კლოსტრიდიუმის, პროტეუსის, ფსევდომონას და სოკოების მიერ გამოწვეულ დუღილისა და დაშლის პროცესებს.
მარცვლეული კულტურები, თხილი მაღალი ტენიანობის პირობებში შეიძლება დაბინძურდეს სოკოებით (ასპერგილუსი, პენიცილიუმი, ფუსარიუმი და სხვ.), რაც იწვევს საკვების მიკოტოქსიკოზის განვითარებას.
ხორცის კერძებმა (ჟელე, ხორცის სალათები, ხორცის კერძები) შეიძლება გამოიწვიოს დაავადებები, რომლებიც დაკავშირებულია სალმონელასთან, შიგელასთან, დიარეაგენურ Escherichia coli-სთან, პროტეუსთან, სტაფილოკოკის ენტეროტოქსიგენურ შტამებთან, ენტეროკოკებთან, რომლებიც მრავლდებიან მათში. Closlridium perfringensდა bacillus cereus.
რძე და რძის პროდუქტები შეიძლება იყოს ბრუცელოზის, ტუბერკულოზისა და შიგელოზის გადაცემის ფაქტორი. ასევე შესაძლებელია კვებითი მოწამვლის განვითარება სალმონელას, შიგელას და სტაფილოკოკის რძის პროდუქტებში გამრავლების შედეგად. კვერცხები, კვერცხის ფხვნილი და მელანჟი კვერცხების, განსაკუთრებით იხვის კვერცხების, ენდოგენური პირველადი სალმონელას ინფექციით არის სალმონელოზის მიზეზი.
თევზი და თევზის პროდუქტები უფრო მეტად დაბინძურებულია ბაქტერიებით Closlridium botulinumდა Vibrio parahaemolylicus- კვებითი ინტოქსიკაციისა და ტოქსიკოინფექციების გამომწვევი აგენტები. ეს დაავადებები ასევე შეინიშნება დიდი რაოდენობით სალმონელებით, პროტეუსით დაბინძურებული თევზის პროდუქტების მიღებისას. Bacillus cereus, Closlridium perfringens.
ბოსტნეული და ხილი შეიძლება იყოს დაბინძურებული და დათესილი დიარეაგენური Escherichia coli, Shigella, Proteus, სტაფილოკოკის ენტეროპათოგენური შტამებით. დამარილებული კიტრი შეიძლება იყოს გამოწვეული ტოქსიკოინფექციის მიზეზი Vibrio parahaemolyticus.
საკვები პროდუქტების მიკრობიოლოგიური ანალიზის ყველა შედეგის მიღება შესაძლებელია არა უადრეს 48-72 საათისა, ე.ი. როდესაც პროდუქტი უკვე შეიძლება გაიყიდოს. შესაბამისად, ამ ინდიკატორებზე კონტროლი რეტროსპექტული ხასიათისაა და ემსახურება საკვები პროდუქტების მწარმოებელი ან რეალიზებული საწარმოს სანიტარიულ-ჰიგიენური შეფასების მიზნებს.
გაზრდილი მთლიანი მიკრობული დაბინძურების, კოლიფორმული ბაქტერიების გამოვლენა მიუთითებს მზა პროდუქტის მომზადების ან/და შენახვის დროს ტემპერატურის რეჟიმის დარღვევაზე. პათოგენური მიკროორგანიზმების გამოვლენა განიხილება, როგორც სასადილო, სავაჭრო საწარმოს ეპიდემიოლოგიური პრობლემების მაჩვენებელი.
სურსათის უვნებლობის მიკრობიოლოგიური მაჩვენებლების რაციონირება ხორციელდება მიკროორგანიზმების უმრავლესობისთვის ალტერნატიული პრინციპის მიხედვით, ე.ი. პროდუქტის მასა ნორმალიზდება, რომელშიც Escherichia coli ჯგუფის ბაქტერიები, ყველაზე ოპორტუნისტული მიკროორგანიზმები, ასევე პათოგენური მიკროორგანიზმები, მათ შორის. სალმონელა და Listeria monocytogenes. სხვა შემთხვევებში, სტანდარტი ასახავს კოლონიის ფორმირების ერთეულების რაოდენობას პროდუქტის 1 გ (სმ 3) (CFU / გ, სმ 3).
მასობრივი მოხმარების პროდუქტებში, რისთვისაც ცხრილებში SanPiN 2.3.2.1078-01. ჰიგიენური მოთხოვნები საკვები პროდუქტების უსაფრთხოებისა და კვებითი ღირებულებისთვისარ არსებობს მიკრობიოლოგიური სტანდარტები, პათოგენური მიკროორგანიზმები, მათ შორის. სალმონელა დაუშვებელია 25 გ პროდუქტში.
სანიტარული და ბაქტერიოლოგიური კონტროლი უნდა ექვემდებარებოდეს საკვები პროდუქტების მომზადებისა და რეალიზაციის ობიექტებს.
სანიტარიული და მიკრობიოლოგიური კვლევის მონაცემები საშუალებას იძლევა ობიექტურად შეფასდეს გამოკვლეული ობიექტების სანიტარიული და ჰიგიენური მდგომარეობა, სანიტარული რეჟიმის დარღვევების იდენტიფიცირება და მათი აღმოსაფხვრელად მიზანმიმართული ღონისძიებების დროულად განხორციელება.
მიკრობიოლოგიური კვლევისთვის სხვადასხვა აღჭურვილობისა და ინვენტარიდან ნიმუშის აღების რამდენიმე მეთოდი არსებობს: ნაცხის, ანაბეჭდის, აგარის შევსების მეთოდები. ამათგან ყველაზე ხშირად გამოიყენება ტამპონის რეცხვის მეთოდი.
სანიტარული და მიკრობიოლოგიური კონტროლი ეფუძნება ბაქტერიების გამოვლენას Escherichia coli (BGKP) ჯგუფის გამორეცხვაში - შესასწავლი ობიექტების ფეკალური დაბინძურების მაჩვენებლები. ჩვენებების მიხედვით ტარდება კვლევები ოქროსფერი სტაფილოკოკზე, ნაწლავის ოჯახის პათოგენურ ბაქტერიებზე, ტოტალური მიკრობული დაბინძურების დადგენა. მაგალითად, ნაცხის აღება სტაფილოკოკის გამოსავლენად აუცილებელია საკონდიტრო მაღაზიების, რძის სამზარეულოს და სამედიცინო დაწესებულებების კვების განყოფილებების შემოწმებისას.
სანიტარული და მიკრობიოლოგიური კონტროლის ობიექტები:
∨ საკვების (წყალმომარაგების) მუშაკების ხელებიდან და სპეცტანსაცმლის დაბანა;
∨ აღჭურვილობა, ინვენტარი, ჭურჭელი და სხვა ობიექტები;
∨ მზა კერძები, კულინარიული და მალფუჭებადი პროდუქტები;
∨ ნედლეული და ნახევარფაბრიკატები ტექნოლოგიური პროცესის მიმდინარეობისას (ეპიდემიოლოგიური ჩვენებების მიხედვით);
∨ სასმელი წყალი ცენტრალიზებული და განსაკუთრებით დეცენტრალიზებული წყალმომარაგების წყაროებიდან.
ნედლეულის გადამუშავებაში ჩართული პერსონალის ხელიდან ხელების დაბანა გროვდება სამუშაოს დაწყებამდე. ნაცხები ბაქტერიოლოგიურ ლაბორატორიას 2 საათის განმავლობაში მიეწოდება, მათი შენახვა და ტრანსპორტირება შესაძლებელია არაუმეტეს 6 საათისა +1–10 °C ტემპერატურაზე.
ლაბორატორიაში კესლერის მედიაზე ტამპონები ინოკულირებულია ლაქტოზით ან KODA-ით, ხოლო ნაცხი ჩაედინება საცდელ მილში საშუალების საშუალებით და დარჩენილი სარეცხი სითხე გადადის. კესლერისა და KODA მედიაზე კულტურები ინკუბირებულია 37°C-ზე.
18-24 საათის შემდეგ, კესლერის საშუალების ყველა საცდელი მილი ინოკულირებულია ჭიქების სექტორებზე Endo საშუალებით; KODA მედიუმიდან ინოკულაცია ხორციელდება მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ გარემოს ფერი იცვლება (თავდაპირველი მეწამულიდან ყვითელ ან მწვანეში) ან ხდება მოღრუბლული. . ინოკულაციები ენდო გარემოზე იზრდებიან 37 °C ტემპერატურაზე 18-24 საათის განმავლობაში.
ნაცხი მზადდება BGKP-სთვის დამახასიათებელი კოლონიებიდან, შეღებილი გრამით, მიკროსკოპულად, საჭიროების შემთხვევაში, ისინი დამატებით იდენტიფიცირდება Escherichia coli ჯგუფის ბაქტერიების ზოგადად მიღებული ტესტების მიხედვით. სანიტარიული და მიკრობიოლოგიური გამოკვლევის შედეგების შეფასებისას ისინი გამომდინარეობენ სტანდარტებიდან, რომ კვების ობიექტებიდან აღებულ ნაცხებში BGKP არ უნდა იყოს. პერსონალის სუფთა, სამუშაო ნივთებისთვის მომზადებული, ინვენტარის, აღჭურვილობის, ხელებისა და სანიტარული ტანსაცმლის ზედაპირებიდან ნაცხებში BGKP-ის აღმოჩენა მიუთითებს სანიტარული რეჟიმის დარღვევაზე. ნაცხის მნიშვნელოვან პროცენტში CGB-ის განმეორებითი გამოვლენის შემთხვევაში რეკომენდებულია ნაცხის შემოწმება პათოგენური ენტერობაქტერიების არსებობაზე. ამავდროულად, ტამპონი და გამრეცხი სითხე ინოკულირებულია გამდიდრებელ გარემოზე - სელენიტის ბულიონზე ან მაგნიუმის საშუალებებზე (შესაძლებელია მიულერის და კაუფმანის საშუალებების გამოყენება). შემდგომი კვლევა ტარდება ზოგადად მიღებული მეთოდის მიხედვით.
რძის და რძის პროდუქტების შესწავლა
რძის პროდუქტების მიკროფლორა
რძე არის ძალიან ხელსაყრელი მკვებავი საშუალება მრავალი მიკროორგანიზმების განვითარებისთვის. ინფიცირებული რძისა და რძის პროდუქტების ჭამის შემდეგ, ინფექციები, როგორიცაა ტიფოიდური ცხელება, დიზენტერია, ქოლერა, ეშერიხიოზი, ბრუცელოზი, ტუბერკულოზი, ალისფერი ცხელება, ტონზილიტი, Q ცხელება, ფეხისა და პირის დაავადება, ტკიპებით გამოწვეული ენცეფალიტი, სალმონელას ტოქსიკური ინფექციები, სტაფილოტოკოკური ინექცია, და ა.შ.
არსებობს რძისა და რძის პროდუქტების სპეციფიკური და არასპეციფიკური მიკროფლორა.
რომ რძისა და რძის პროდუქტების სპეციფიკური მიკროფლორა მოიცავს მიკრობებს - რძემჟავას, ალკოჰოლისა და პროპიონის მჟავას დუღილის პათოგენებს. ამ მიკროორგანიზმების სასიცოცხლო აქტივობით გამოწვეული მიკრობიოლოგიური პროცესები საფუძვლად უდევს ფერმენტირებული რძის პროდუქტების (ხაჭო, კეფირი, ხაჭო, აციდოფილუსი და ა.შ.) მომზადებას.
განიხილება რძემჟავა ფერმენტაციის ბაქტერიები რძისა და რძის პროდუქტების ნორმალური მიკროფლორა . რძისა და რძის პროდუქტების გამოწურვაში მთავარ როლს ლაქტური სტრეპტოკოკები თამაშობენ. S. lactis, S. cremarisდა სხვა. რძემჟავა სტრეპტოკოკების ნაკლებად აქტიური რასები ( S. citrovorus, S. lactis subsp. დიაცეტილაქტი) წარმოქმნის აქროლად მჟავებს და არომატულ ნივთიერებებს და ამიტომ ფართოდ გამოიყენება ყველის წარმოებაში. რძემჟავა ბაქტერიების ჯგუფში ასევე შედის რძემჟავა ჩხირები: Lactobacterium bulgaricum, Lactobacterium casei, Lactobacterium acidophilusდა ა.შ.
რძესა და რძის პროდუქტებში ალკოჰოლური დუღილის ძირითადი გამომწვევი აგენტია საფუარი ( Saccharomyces lactisდა ა.შ.).
რძის არასპეციფიკური მიკროფლორა შედგება გაფუჭებული ბაქტერიებისგან პროტეუსი), აერობული და ანაერობული ბაცილები ( B. subtilis, B. megatherium, C. putrificum) და მრავალი სხვა
რძის მიკრობული დაბინძურება იწყება უკვე ძუძუს. წველების პროცესში მისი დამატებითი დათესვა ხდება წვის კანის ზედაპირიდან, ხელებიდან, ჭურჭლიდან, სადაც ის შედის ოთახის ჰაერიდან. ამ დამატებითი დათესვის ინტენსივობა ზოგადად დამოკიდებულია იმაზე, თუ რამდენად დაცულია ძირითადი სანიტარული და ჰიგიენური პირობები რძის მიღებისას. რძის შენახვის ცუდი პირობები ასევე ხელს უწყობს მასში მიკროფლორას შემდგომ ზრდას.
ბაქტერიციდული ფაზა. ახლად რძიან რძეს, თუმცა ის უკვე შეიცავს ასობით მიკრობს 1 სმ 3-ზე (ძირითადად სტაფილოკოკები და სტრეპტოკოკები), აქვს ბაქტერიციდული თვისებები მასში ნორმალური ანტისხეულების არსებობის გამო. ამიტომ, გარკვეული პერიოდის განმავლობაში, რძეში ბაქტერიების განვითარება შეფერხებულია. ამ პერიოდს ბაქტერიციდულ ფაზას უწოდებენ. ბაქტერიციდული ფაზის ხანგრძლივობა მერყეობს 2-36 საათის განმავლობაში, რაც დამოკიდებულია ცხოველის ფიზიოლოგიურ მახასიათებლებზე (ლაქტაციის ადრეულ პერიოდში რძის ბაქტერიციდული აქტივობა უფრო მაღალია).
რძის შენახვა მაღალ ტემპერატურაზე (30-37 °C) მკვეთრად ამცირებს ბაქტერიციდული ფაზის ხანგრძლივობას. იგივე ეფექტს ახდენს რძის ინტენსიური დამატებითი დაბინძურება მიკრობებით.
ბაქტერიციდული ფაზის დასრულების შემდეგ იწყება მიკროფლორის განვითარება. მისი სახეობრივი შემადგენლობა იცვლება დროთა განმავლობაში გარემოს ბიოქიმიური თვისებების ცვლილების გავლენით და მიკრობული სახეობების ანტაგონისტური და სიმბიოტური ურთიერთობების შედეგად.
შერეული მიკროფლორის ფაზა. ეს გრძელდება დაახლოებით 12 საათის განმავლობაში.ამ პერიოდში მიკრობების არცერთი სახეობის ჯგუფის ჭარბობა ჯერ არ ხდება, ვინაიდან მკვებავი სუბსტრატის სიმრავლე და სივრცითი შესაძლებლობები საშუალებას აძლევს მრავალი სახის მიკროორგანიზმებს საკმაოდ თავისუფლად განვითარდეს.
რძემჟავა სტრეპტოკოკის ფაზა. ამ ფაზაში ჭარბობს დასახელებული ჯგუფის მიკროორგანიზმები ( S. lactis, S. termofilus, S. cremorisდა ა.შ.). ლაქტოზა მათ მიერ ინტენსიურად გარდაიქმნება რძემჟავად, რეაქცია იცვლება მჟავას მხარეს. რძემჟავას დაგროვება მომავალში იწვევს რძემჟავა სტრეპტოკოკების სიკვდილს და მათ ჩანაცვლებას უფრო მჟავა რეზისტენტული რძემჟავა ბაქტერიებით. ეს ხდება 48 საათის შემდეგ, რაც მესამე ფაზის დასაწყისს აღნიშნავს.
რძემჟავა ჩხირების ფაზა. მასში დომინანტურ პოზიციას იძენს რძემჟავა ბაქტერიების ღეროს ფორმის ფორმები. ( L. lactis, L. crusei, L. bulgaricumდა ა.შ.). გარემოს შედეგად მიღებული მჟავა რეაქცია იწვევს ზრდის დათრგუნვას და სხვა ტიპის ბაქტერიების თანდათანობით სიკვდილს.
მესამე ფაზის ბოლოს, რძემჟავა მიკროფლორას განვითარების შემდგომი შესაძლებლობები ამოიწურება და მათ ნაცვლად სოკოები მოდიან, რისთვისაც რძემჟავა მკვებავი სუბსტრატია.
სოკოვანი მიკროფლორის ფაზა. ამ პერიოდში ვითარდება ობის და საფუარი, რომელთა სასიცოცხლო აქტივობა იწვევს პროდუქტის მიერ მისი კვებითი ღირებულების დაკარგვას. საფუარი ძირითადად წარმოდგენილია გვარის სახეობებით ტორულა, საქარომიცეტების ზოგიერთი სახეობა ნაკლებად გვხვდება.
ნაპოვნი ფორმებიდან: რძის ყალიბი ( Oidium lactis), ფარავს ხაჭოსა და არაჟნის ზედაპირს ფუმფულას სახით, ასევე ასპერგილუსს, პენიცილიუმს და მუკორაცეას.
სოკოვანი ფლორის მოქმედება იწვევს გარემოს ნეიტრალიზაციას და ეს მას ისევ შესაფერისს ხდის ბაქტერიებისთვის. ჩნდება გაფუჭებული ბაქტერიების განვითარება, რაც იწვევს კაზეინის პროტეოლიზს და, ბოლოს, ანაერობული სპორის წარმომქმნელი ბუტირული ბაქტერიების ჯგუფს.
ცვალებადი მიკროფლორის აქტივობა ჩერდება მხოლოდ რძის ყველა ორგანული ნივთიერების სრული მინერალიზაციის დაწყებით.
გარკვეულ პირობებში, მიკრობული ბიოცენოზების შეცვლის პროცესი შეიძლება გადავიდეს ზემოაღნიშნული სქემიდან. ამრიგად, რძემჟავა ბაქტერიების თავიდანვე დათრგუნვა შესაძლებელია Escherichia coli ჯგუფის მიკრობებით, თუ ეს უკანასკნელი დიდი რაოდენობითაა წარმოდგენილი. საფუარებს შეუძლიათ გამოიმუშავონ ალკოჰოლის შესამჩნევი კონცენტრაცია, რაც ხდება ისეთ პროდუქტებში, როგორიცაა კეფირი (0,2–0,6%) და განსაკუთრებით კუმისი (0,9–2,5%). ალკოჰოლის არსებობა ქმნის პირობებს ძმარმჟავას ბაქტერიების შემდგომი განვითარებისათვის, რომლებიც ადუღებენ ალკოჰოლს ძმარმჟავად. ანტიბიოტიკების და სხვა ნივთიერებების არსებობა, რომლებიც აფერხებენ და ანეიტრალებს მიკროფლორას რძეში, ასევე შეუძლია შეანელოს რძემჟავა პროცესები.
სასმელი და საყოფაცხოვრებო საჭიროებისთვის წყლის ხარისხის ჰიგიენური მოთხოვნები ეფუძნება პრინციპს, რომელიც აქცენტს აკეთებს წყლის ხარისხზე, რაზეც დამოკიდებულია ადამიანის ჯანმრთელობა და საცხოვრებელი პირობები. თანამედროვე სანიტარული კანონმდებლობის შესაბამისად, სასმელი წყალი უნდა იყოს უსაფრთხო ეპიდემიური და რადიაციული თვალსაზრისით, ქიმიური შემადგენლობით უვნებელი და ჰქონდეს ხელსაყრელი ორგანოლეპტიკური თვისებები.
სასმელი წყლის უსაფრთხოება ეპიდემიური თვალსაზრისით განისაზღვრება მისი შესაბამისობით მიკრობიოლოგიური მაჩვენებლების სტანდარტებთან. სასმელი წყლის მიკრობიოლოგიური შემადგენლობა მისი ხარისხისა და მოხმარებისთვის ვარგისობის მთავარი მაჩვენებელია. ეს ითვალისწინებს როგორც ბაქტერიულ, ასევე ვირუსულ დაბინძურებას.
SanPiN-ში სასმელი წყლის ეპიდემიოლოგიური უსაფრთხოება ფასდება რამდენიმე ინდიკატორით. მათ შორის დიდი როლი ენიჭება თერმოტოლერანტ კოლიფორმებს, როგორც ფეკალური დაბინძურების და მთლიანი კოლიფორმების ნამდვილ მაჩვენებლებს.
საერთო კოლიფორმული ბაქტერიები (CBC) არის გრამუარყოფითი, ოქსიდაზა-უარყოფითი, სპორის არწარმომქმნელი ღეროები, რომლებიც შეიძლება გაიზარდოს დიფერენციალურ ლაქტოზაზე, ლაქტოზას დუღილის მჟავად და გაზამდე +37 ტემპერატურაზე 24-48 საათის განმავლობაში.
თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერიები (TCB) OKB-ის ნაწილია და აქვთ ყველა მათი მახასიათებელი, მაგრამ მათგან განსხვავებით, მათ შეუძლიათ ლაქტოზას მჟავა, ალდეჰიდი და გაზით დუღილი +44 ტემპერატურაზე 24 საათის განმავლობაში. ამდენად, TKB განსხვავდება OKB-სგან ლაქტოზას მჟავასა და გაზამდე დუღილის უნარით მაღალ ტემპერატურაზე. თერმოტოლერანტული და ჩვეულებრივი კოლიფორმები არ უნდა იყოს 100 მლ სასმელ წყალში (ნებისმიერ ნიმუშში ანალიზის სამჯერ გამეორებით).
დიდი ცენტრალიზებული სასმელი წყალმომარაგების სისტემების სადისტრიბუციო ქსელში (შესწავლილი ნიმუშების რაოდენობა წელიწადში მინიმუმ 100) დასაშვებია არასტანდარტული ნიმუშების 5% ჩვეულებრივი კოლიფორმებისთვის, მაგრამ არა ერთ წერტილში აღებული ზედიზედ ორ სინჯში.
მიკროორგანიზმების მთლიანი რაოდენობა (მიკრობული საერთო რაოდენობა - TMC) განისაზღვრება ხორც-პეპტონ აგარზე ზრდით ინკუბაციურ ტემპერატურაზე 37. ეს მაჩვენებელი გამოიყენება სასმელი წყლის გაწმენდის ეფექტურობის დასახასიათებლად, ის გასათვალისწინებელია წყლის ხარისხის მონიტორინგის დროს. დინამიკა. TMF-ის მკვეთრი გადახრა სტანდარტული მნიშვნელობის ფარგლებშიც კი (მაგრამ არაუმეტეს 50 1 მლ-ში) ემსახურება წყლის დამუშავების ტექნოლოგიაში დარღვევის სიგნალს. გამანაწილებელი ქსელის წყალში TMP–ის ზრდა შეიძლება მიუთითებდეს მის არახელსაყრელ სანიტარიულ მდგომარეობაზე, რაც ხელს უწყობს მიკროორგანიზმების რეპროდუქციას ორგანული ნივთიერებების დაგროვების ან გაჟონვის გამო, რაც იწვევს დაბინძურებული მიწისქვეშა წყლების შეწოვას.
აერობული საპროფიტები შეადგენენ წყალში მიკრობების მთლიანი რაოდენობის მხოლოდ ნაწილს, მაგრამ ისინი წყლის ხარისხის მნიშვნელოვანი სანიტარული მაჩვენებელია, რადგან არსებობს პირდაპირი კავშირი ორგანული ნივთიერებებით დაბინძურების ხარისხსა და მიკრობული რაოდენობას შორის. გარდა ამისა, ითვლება, რომ რაც უფრო მაღალია მიკრობების საერთო რაოდენობა, მით უფრო სავარაუდოა წყალში პათოგენური მიკროორგანიზმების არსებობა. ონკანის წყალში მიკრობების რაოდენობა არ უნდა აღემატებოდეს 100-ს.
სასმელი წყლის უსაფრთხოება ეპიდემიური გაგებით განისაზღვრება მისი შესაბამისობით მიკრობიოლოგიური მაჩვენებლების სტანდარტებთან (ცხრილი 1).
ცხრილი 1. სასმელი წყლის მიკრობიოლოგიური მაჩვენებლები
სანიტარული ინდიკატორი მიკროორგანიზმების კონცეფცია
ძირითადი მოთხოვნები სანიტარულ-საჩვენებელი მიკროორგანიზმების მიმართ: 1. მათ უნდა ჰქონდეთ საერთო ბუნებრივი ჰაბიტატი პათოგენურ მიკროორგანიზმებთან და დიდი რაოდენობით გათავისუფლდნენ გარე გარემოში; 2. გარე ჰაბიტატში სანიტარულ-საჩვენებელი მიკროორგანიზმები მაქსიმალურად თანაბრად უნდა იყოს განაწილებული და პათოგენებთან შედარებით უფრო მდგრადი. ისინი უფრო დიდხანს უნდა დარჩნენ წყალში, პრაქტიკულად არ გამრავლდნენ, იყვნენ უფრო მდგრადი სხვადასხვა მავნე ფაქტორების მიმართ, უნდა გამოავლინონ თვისებებითა და მახასიათებლებით ნაკლები ცვალებადობა; 3. სანიტარიული ინდიკატური მიკროორგანიზმების განსაზღვრის მეთოდები უნდა იყოს მარტივი და ჰქონდეს სანდოობის საკმარისი ხარისხი.
სანიტარული მიკრობიოლოგიის თვალსაზრისით, წყლის ხარისხის შეფასება ტარდება მისი სანიტარული და ეპიდემიოლოგიური საფრთხის ან უსაფრთხოების დასადგენად. ადამიანის ჯანმრთელობისთვის. წყალი მნიშვნელოვან როლს ასრულებს მრავალი ინფექციის პათოგენების გადაცემაში, ძირითადად ნაწლავური.
წყლის ხარისხის კონტროლისთვის ყველა ინფექციის პირდაპირი რაოდენობრივი განსაზღვრა შეუძლებელია მათი ტიპების მრავალფეროვნებისა და ანალიზის სირთულის გამო.
მხოლოდ ერთი წყლის ნიმუშის ანალიზი მასში ტიფური ცხელების, პარატიფოიდური A, პარატიფოიდი B, დიზენტერიის, ინფექციური სიყვითლის, წყლის ცხელების და ტულარემიის პათოგენების შესაძლო არსებობისთვის სრულად დატვირთავს თუნდაც დიდი ბაქტერიოლოგიური ლაბორატორიის მთელ პერსონალს. ამასთან, პასუხი ამ შემთხვევაში მხოლოდ 2-3 კვირის შემდეგ იქნებოდა, ე.ი. როდესაც მოსახლეობა უკვე დიდი ხანია სვამს შესწავლილ წყალს.
წყლის უსაფრთხოების დეტალური განმარტების აშკარა მიზანშეწონილობის გათვალისწინებით, ჯერ კიდევ მე-19 საუკუნის ბოლოს, ცდილობდნენ ყველა წყლის პათოგენური მიკრობების ძიების შეცვლას ერთი მიკრობით, თუმცა არაპათოგენური, მაგრამ მუდმივად არსებული. ადამიანის განავალში. მაშინ შეიძლება ჩაითვალოს, რომ თუკი შესწავლილი წყალი მართლაც დაბინძურებულია განავლით, მაშინ ის შეიძლება იყოს სახიფათო სასმელად, ვინაიდან ჯანმრთელ მოსახლეობაში გვხვდება როგორც ავადმყოფები, ასევე ბაცილის მატარებლები. ფეკალური დაბინძურების ასეთი ბაქტერიოლოგიური მაჩვენებლების ძიება წარმატებით დასრულდა. აღმოჩნდა, რომ შემდეგი მიკრობებიდან სამი მუდმივად იმყოფება ადამიანის განავალში: 1) Escherichia coli; 2) ენტეროკოკები; 3) ანაერობული სპორის წარმომქმნელი ბაქტერიები, ძირითადად Bac. perfingens.
ამრიგად, საყოფაცხოვრებო ჩამდინარე წყლებში E. coli ჭარბობს. მაგრამ ეს არ ეხება მხოლოდ შინაარსს. ფეკალური დაბინძურების ბაქტერიული ინდიკატორის მთავარი მნიშვნელობა მდგომარეობს იმაში, რომ მისი სიკვდილიანობის მაჩვენებელი პათოგენური მიკრობების უმეტესობაა. მხოლოდ ამ პირობის დაკმაყოფილების შემთხვევაში, ადამიანის განავალში მუდმივად არსებული მიკრობი იქნება ფეკალური დაბინძურების მაჩვენებელი.
თუ ნაწლავის აღმოჩენილ მუდმივ ბინადრებს ამ თვალსაზრისით მივუდგებით, აღმოვაჩენთ შემდეგს: ბაკ ჯგუფის მიკრობებს. perfingens წყალში ნარჩუნდება ბევრად უფრო დიდხანს, ვიდრე პათოგენური მიკრობები; ენტეროკოკები, პირიქით, გაცილებით ადრე კვდებიან; რაც შეეხება Escherichia coli-ს, მისი წყალში შენარჩუნების დრო დაახლოებით შეესაბამება პათოგენური მიკრობების გადარჩენის დროს.
ამიტომ წყლის ძირითადი სანიტარულ-ბაქტერიოლოგიური მაჩვენებელია ეშერიხია კოლი. მხოლოდ რუსეთში, მსოფლიოში ერთადერთ ქვეყანაში, წყლის ხარისხს აკონტროლებს Escherichia coli ჯგუფის ბაქტერია (BGKP ინდექსი). ამ ჯგუფში შედის ნაწლავის ბაქტერიების ჯგუფის ყველა წარმომადგენელი და ოპორტუნისტი წარმომადგენლები.
GOST 2874-73 და GOST 18963-73 შესაბამისად, Escherichia coli ჯგუფის ბაქტერიები (ECG) მოიცავს გრამუარყოფით, არასპორის წარმომქმნელ ბაცილებს, რომლებიც ფერმენტირებენ ლაქტოზას ან გლუკოზას მჟავად და გაზად 37o 24 საათში და არ აქვს ოქსიდაზას აქტივობა. CGB-ებში შედიან სხვადასხვა გვარის წარმომადგენლები - Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, მაგრამ ისინი ყველა გამოიყოფა გარემოში ადამიანისა და ცხოველის ნაწლავებიდან. ამასთან დაკავშირებით, მათი აღმოჩენა გარემოში უნდა ჩაითვალოს ფეკალური დაბინძურების ინდიკატორად.
BGKP-ში შემავალი გვარებიდან ყველაზე სანიტარული და ინდიკატური მნიშვნელობა აქვს Escherichia-ს გვარს. ყველა ამ ბაქტერიის გარემოში არსებობა განიხილება როგორც ახალი ფეკალური დაბინძურება.
ეშერიხია - ადამიანისა და ცხოველის ნაწლავების ერთ-ერთი ფონური სახეობაა. გვარი Escherichia, მათ შორის E. coli ტიპის სახეობა, არის ახალი ფეკალური დაბინძურების მაჩვენებელი, ტოქსიკური ინფექციების შესაძლო მიზეზი. წყალში გვარის წარმომადგენლები განიხილება როგორც თერმოტოლერანტული კოლიფორმული ბაქტერიები.
ციტრობაქტერია - ცხოვრობს ჩამდინარე წყლებში, ნიადაგში და სხვა გარემოსდაცვით ობიექტებში, ასევე ჯანმრთელი და AII პაციენტების განავალში. ისინი მიეკუთვნებიან ოპორტუნისტული ბაქტერიების ჯგუფს. (მიკრობიოლოგიური ლექსიკონი-საცნობარო წიგნი, 1999 წ.)
ციტრობაქტერიის, როგორც SPMO-ს უარყოფითი მხარეები მოიცავს შემდეგს:
1. ანალოგების სიმრავლე გარე გარემოში.
2. ცვალებადობა გარე გარემოში.
3. არასაკმარისი წინააღმდეგობა არასასურველი ეფექტების მიმართ.
4. წყალში გამრავლების უნარი.
5. ბუნდოვანი მაჩვენებელი სალმონელას არსებობისთვისაც კი.
ბოლო კვლევებმა გამოავლინა პირდაპირი კორელაციის არარსებობა პათოგენური ბაქტერიების არსებობასა და წყალში მაჩვენებლებს შორის. წყლის ობიექტებზე ინტენსიური ანთროპოგენური წნევის მქონე რეგიონებში აღინიშნა ინდიკატორი მიკროორგანიზმების შემცველობის შემცირება მათი ბიოლოგიური და კულტურული თვისებების ცვლილებით, პოტენციური პათოგენური და პათოგენური ბაქტერიების რაოდენობრივი დომინირების ფონზე.
ენტერობაქტერია - ცხოვრობს ადამიანის და სხვა ცხოველების ნაწლავებში, გვხვდება ნიადაგში, წყალში, საკვებ პროდუქტებში, იწვევენ ნაწლავის, უროგენიტალური, რესპირატორული, ჩირქოვან-ანთებითი ადამიანის დაავადებებს.
კლებსიელა - ცხოვრობს წყალში, ნიადაგში, საკვებში, ადამიანის, ძუძუმწოვრების, ფრინველების ნაწლავებსა და სასუნთქ გზებში.
1910 წელს ენტეროკოკები (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium) შემოთავაზებულია SPMO-ს როლისთვის.
ენტეროკოკები არის ფაკულტატური ანაერობული ასპოგენური ქიმიოორგანოტროფული გრამ + ბაქტერიების გვარი. უჯრედები პოლიმორფულია. ფართოდ არის გავრცელებული ბუნებაში. ისინი ადამიანის, ძუძუმწოვრების, ფრინველების ნაწლავების ერთ-ერთი ფონური სახეობაა. ხშირად გვხვდება პერინეუმის და სასქესო ტრაქტის კანის ფლორაში, ცხვირის ღრუში, ფარინქსი, ცხვირი. დიდხანს გადარჩება ნიადაგში, საკვებ პროდუქტებში.
Enterococcus-ის, როგორც SPMO-ს სარგებელი:
1. მუდმივად იმყოფება ადამიანის ნაწლავში და მუდმივად გამოიყოფა გარე გარემოში. ამასთან, Enterococcus faecalis ძირითადად ადამიანის ნაწლავში ცხოვრობს, ამიტომ მისი აღმოჩენა ადამიანის განავლით დაბინძურებაზე მიუთითებს. უფრო მცირე რაოდენობით, Enterococcus faecium გვხვდება ადამიანებში. ეს უკანასკნელი ძირითადად ცხოველების ნაწლავებში გვხვდება, თუმცა Enterococcus faecalis ასევე შედარებით იშვიათია.
2. არ შეუძლია გამრავლება გარე გარემოში, Enterococcus faecium ძირითადად მრავლდება, მაგრამ აქვს ნაკლები ეპიდემიოლოგიური მნიშვნელობა.
3. არ ცვლის თავის თვისებებს გარე გარემოში.
4. არ აქვს ანალოგი გარე გარემოში.
5. მდგრადია გარემოზე უარყოფითი გავლენის მიმართ. ენტეროკოკი 4-ჯერ უფრო მდგრადია ქლორის მიმართ, ვიდრე Escherichia coli. ეს მისი მთავარი დამსახურებაა. ამ მახასიათებლის გამო ენტეროკოკი გამოიყენება წყლის ქლორირების ხარისხის შესამოწმებლად, ასევე დეზინფექციის ხარისხის ინდიკატორად. გაუძლებს 60°C ტემპერატურას, რაც საშუალებას იძლევა გამოიყენოს როგორც პასტერიზაციის ხარისხის მაჩვენებელი. მდგრადია 6,5-17% მარილის საერთო კონცენტრაციის მიმართ. მდგრადია pH-ის მიმართ 3-12 დიაპაზონში.
6. შემუშავებულია მაღალი შერჩევითი საშუალებები ენტეროკოკების აღსანიშნავად. წყალში ენტეროკოკუსის გადარჩენის მაჩვენებელი უახლოვდება პათოგენურ ენტერობაქტერიას. Enterococcus სამართლიანად არის მეორე სანიტარულ-ინდიკატური ტესტი E. coli-ს შემდეგ სასმელი წყლის შესწავლაში.
ამჟამად ენტეროკოკომეტრია დაკანონებულია წყლის საერთაშორისო სტანდარტში, როგორც ახალი ფეკალური დაბინძურების მაჩვენებელი. როდესაც წყალში ატიპიური Escherichia coli გვხვდება, ენტეროკოკის არსებობა ხდება ახალი განავლის დაბინძურების მთავარი მაჩვენებელი. სამწუხაროდ, SanPiN 2.1.4.1074-01 სასმელი წყლისთვის, ენტეროკოკის განმარტება არ არის მოწოდებული.
Proteus ჯგუფი განიხილება, როგორც ბუნებაში გაფუჭებული პროცესების დამნაშავე და, შესაბამისად, წყალსაცავების წყალში ორგანული ნივთიერებების არსებობის ინდიკატორი. ეს ძირითადად ერთ სახეობას ეხება - Pr.vulgaris; მეორე სახეობა - Pr.mirabilis - ადამიანის და ცხოველის ნაწლავების ბინადარია. ამ ეკოლოგიურმა განსხვავებამ შესაძლებელი გახადა ვიმსჯელოთ წყლის დაბინძურების ბუნებაზე და მისი ეპიდემიური უსაფრთხოების ხარისხზე. Pr.vulgaris შეიძლება იყოს ფეკალური დაბინძურების მაჩვენებელი, Pr.vulgaris - ზოგადად ორგანული ნივთიერებების კონცენტრაციის ზრდის მაჩვენებელი. ამ ინდიკატორის სუსტი მხარეა Pr.mirabilis-ის წყვეტილი არსებობა ადამიანის ნაწლავში და ორივე სახეობის უნარი საკმაოდ ინტენსიურად გამრავლდეს წყალში. ასევე არ არსებობს კვლევის მეთოდი, რომელიც საშუალებას მისცემს განსხვავებულად გავითვალისწინოთ ორივე სახეობა, როდესაც ისინი ერთდროულად იმყოფებიან ტესტის ნიმუშში. შემოთავაზებული მეთოდი არ ასრულებს ამ ამოცანას.
ახლა უკვე დადასტურდა, რომ Proteus-ის გვარის ბაქტერიები 98%-ში გვხვდება ადამიანებისა და ცხოველების ნაწლავების სეკრეტში, რომელთაგან 82% არის Pr.mirabilis. წყალში პროტეუსის აღმოჩენა მიუთითებს ობიექტის დაბინძურებაზე დაშლილი სუბსტრატებით და მიუთითებს უკიდურეს სანიტარიულ პრობლემებზე. პროტეომეტრია ოფიციალურად არის აღიარებული აშშ-ში.
სულფიდ-აღმდგენი კლოსტრიდიების სპორების იდენტიფიცირება ხორციელდება ზედაპირული წყაროებიდან წყლის მილებზე წყლის ტექნოლოგიური დამუშავების ეფექტურობის შესაფასებლად. სულფიდის შემამცირებელი ბაქტერიების სპორები არ უნდა იყოს 20 მლ სასმელ წყალში წყლის დამუშავების დასრულების შემდეგ.
როგორც სასმელი წყლის ვირუსული დაბინძურების მაჩვენებელი, SanPiN მოიცავს კოლიფაგებს, რომლებიც ყველაზე ახლოს არიან ნაწლავის ვირუსებთან მათი ბიოლოგიური წარმოშობით, ზომით, თვისებებით და გარემო ფაქტორებისადმი გამძლეობით. კოლიფაგები არ უნდა გამოვლინდეს 100 მლ დამუშავებულ სასმელ წყალში.
