சவ்வு புரதங்களின் உயிரியல் பங்கு. சுருக்கம்: சவ்வு புரதங்கள் சவ்வு புரதங்களின் செயல்பாடுகள் அடங்கும்

சொற்பொழிவு

தலைப்பு: "ஹிஸ்டாலஜி அறிமுகம். பிளாஸ்மா சவ்வு, கட்டமைப்பு மற்றும் செயல்பாடுகள். பிளாஸ்மா மென்படலத்தால் உருவாக்கப்பட்ட கட்டமைப்புகள்"

ஹிஸ்டாலஜி, அதாவது திசுக்களின் அறிவியல் என்று மொழிபெயர்க்கப்பட்டுள்ளது, ஆனால் இந்த உண்மையான மருத்துவ ஒழுக்கம் உள்ளடக்கிய உண்மையான பெரிய அளவிலான பொருள்களுக்கு இந்த கருத்து இடமளிக்கவில்லை. ஹிஸ்டாலஜி பாடநெறி சைட்டாலஜி படிப்புடன் தொடங்குகிறது, இது மூலக்கூறு மட்டத்தில் ஒளி-ஆப்டிகல் மட்டத்தில் இல்லை, இது நவீன மருத்துவத்தில் தர்க்கரீதியாக பல நோய்களின் நோயியல் மற்றும் நோய்க்கிருமி உருவாக்கத்தில் நுழைந்துள்ளது. ஹிஸ்டாலஜியில் கருவியல் படிப்பிலிருந்து தனித்தனி பிரிவுகளும் அடங்கும், நிச்சயமாக இவை அனைத்தும் அல்ல, ஆனால் திசு ப்ரிமார்டியாவின் உருவாக்கம் மற்றும் வேறுபாட்டின் சிக்கலைத் தொடும் அதன் ஒரு பகுதி. இறுதியாக, ஹிஸ்டாலஜி என்பது தனியார் ஹிஸ்டாலஜியின் ஒரு பெரிய பிரிவாகும், அதாவது, பல்வேறு உறுப்புகளின் கட்டமைப்பு மற்றும் செயல்பாடுகளை ஆய்வு செய்யும் ஒரு பிரிவு. ஹிஸ்டாலஜி பாடத்தின் பட்டியலிடப்பட்ட பிரிவுகள், செல்லுலார், திசு, உறுப்பு மற்றும் அமைப்பின் அமைப்பு நிலைகளின் ஒற்றுமையை பராமரிக்கும் அம்சத்தில் எங்கள் ஒழுக்கத்தின் ஆய்வு மேற்கொள்ளப்பட வேண்டும் என்பதில் சந்தேகமில்லை.

யூகாரியோடிக் உயிரணுவைப் படிப்பதன் மூலம் நாம் ஹிஸ்டாலஜியைத் தொடங்குகிறோம், இது வாழ்க்கையுடன் கூடிய எளிமையான அமைப்பாகும். ஒளி நுண்ணோக்கியின் கீழ் ஒரு கலத்தை ஆய்வு செய்யும் போது, ​​அதன் அளவு, வடிவம் பற்றிய தகவலைப் பெறுகிறோம், மேலும் இந்த தகவல் செல்களில் சவ்வு-பிணைப்பு எல்லைகள் இருப்பதோடு தொடர்புடையது. எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கியின் (EM) வளர்ச்சியுடன், செல் மற்றும் சுற்றுச்சூழலுக்கு இடையில் தெளிவாக வரையறுக்கப்பட்ட பிளவுக் கோடாக சவ்வு பற்றிய நமது கருத்துக்கள் மாறிவிட்டன, ஏனெனில் செல் மேற்பரப்பில் பின்வருவனவற்றைக் கொண்ட ஒரு சிக்கலான அமைப்பு உள்ளது. 3 கூறுகள்:

1. சுப்ரமெம்பிரேன் கூறு (கிளைகோகாலிக்ஸ்) (5-100 என்எம்)

2. பிளாஸ்மா சவ்வு (8-10 nm)

3. சப்மெம்பிரேன் கூறு (சைட்டோஸ்கெலிட்டல் புரதங்களின் மாறுபாட்டின் மண்டலம்)

அதே நேரத்தில், 1 மற்றும் 3 கூறுகள் மாறுபடும் மற்றும் உயிரணு வகையைச் சார்ந்தது, பிளாஸ்மா மென்படலத்தின் கட்டமைப்பை நாங்கள் கருத்தில் கொள்வோம்.

EM நிலைமைகளின் கீழ் பிளாஸ்மாலெம்மாவின் ஆய்வு, அதன் கட்டமைப்பு அமைப்பு சீரானது என்ற முடிவுக்கு வழிவகுத்தது, இதில் ஒரு ட்ரைலமினர் கோட்டின் தோற்றம் உள்ளது, அங்கு உள் மற்றும் வெளிப்புற அடுக்குகள் எலக்ட்ரான்-அடர்த்தியாக இருக்கும், மேலும் அவற்றுக்கிடையே அமைந்துள்ள பரந்த அடுக்கு தோன்றும். எலக்ட்ரான்-வெளிப்படையாக இருக்கும். மென்படலத்தின் இந்த வகை கட்டமைப்பு அமைப்பு அதன் வேதியியல் பன்முகத்தன்மையைக் குறிக்கிறது. இந்த சிக்கலைப் பற்றிய விவாதத்தைத் தொடாமல், பிளாஸ்மாலெம்மாவில் மூன்று வகையான பொருட்கள் உள்ளன: லிப்பிடுகள், புரதங்கள் மற்றும் கார்போஹைட்ரேட்டுகள்.

லிப்பிடுகள், சவ்வுகளின் ஒரு பகுதியாக இருக்கும் ஆம்பிஃபிலிக் பண்புகள்அவற்றின் கலவையில் ஹைட்ரோஃபிலிக் மற்றும் ஹைட்ரோபோபிக் குழுக்களின் இருப்பு காரணமாக.

சவ்வு லிப்பிடுகளின் ஆம்பிபாதிக் தன்மை லிப்பிட் பைலேயர் உருவாவதை ஊக்குவிக்கிறது. இந்த வழக்கில், இரண்டு களங்கள் சவ்வு பாஸ்போலிப்பிட்களில் வேறுபடுகின்றன: a) பாஸ்பேட்- மூலக்கூறின் தலை, இந்த டொமைனின் வேதியியல் பண்புகள் தண்ணீரில் அதன் கரைதிறனை தீர்மானிக்கிறது மற்றும் இது ஹைட்ரோஃபிலிக் என்று அழைக்கப்படுகிறது.

b) அசைல் சங்கிலிகள்,எஸ்டெரிஃபைட் கொழுப்பு அமிலங்கள் - இது ஒரு ஹைட்ரோபோபிக் டொமைன்.

சவ்வு லிப்பிட்களின் வகைகள். 1. உயிரியல் சவ்வுகளில் உள்ள கொழுப்புகளின் முக்கிய வகுப்பு பாஸ்போ (கிளிசரைடுகள்) (பாஸ்போலிப்பிடுகள்), அவை கட்டமைப்பை உருவாக்குகின்றன

உயிரியல் சவ்வு (படம் 1).

உயிர் சவ்வுகள்- இது இரட்டை அடுக்கு ஆம்பிஃபிலிக் கொழுப்புகள்(லிப்பிட் இரு அடுக்கு). நீர்வாழ் சூழலில், அத்தகைய ஆம்பிஃபிலிக் மூலக்கூறுகள் தன்னிச்சையாக ஒரு இரு அடுக்கை உருவாக்குகின்றன, இதில் மூலக்கூறுகளின் ஹைட்ரோபோபிக் பாகங்கள் ஒன்றையொன்று நோக்கியதாகவும், ஹைட்ரோஃபிலிக் பாகங்கள் தண்ணீரை நோக்கியதாகவும் இருக்கும் (படம் 2).

சவ்வுகளில் பின்வரும் வகையான லிப்பிடுகள் உள்ளன:

1. பாஸ்போலிப்பிட்கள்

2. ஸ்பிங்கோலிப்பிட்கள் "தலை" + 2 ஹைட்ரோபோபிக் "வால்கள்"

3.கிளைகோலிப்பிட்கள்

கொலஸ்ட்ரால் (CL)- முக்கியமாக இரு அடுக்குகளின் நடுத்தர மண்டலத்தில் மென்படலத்தில் அமைந்துள்ளது, இது ஆம்பிஃபிலிக் மற்றும் ஹைட்ரோபோபிக்(ஒரு ஹைட்ராக்ஸி குழுவைத் தவிர). லிப்பிட் கலவை சவ்வுகளின் பண்புகளை பாதிக்கிறது: புரதம்/கொழுப்பு விகிதம் 1:1 க்கு அருகில் உள்ளது, இருப்பினும், மெய்லின் உறைகள் லிப்பிட்களில் செறிவூட்டப்படுகின்றன, மேலும் உள் சவ்வுகள் புரதங்களில் செறிவூட்டப்படுகின்றன.

ஆம்பிஃபிலிக் லிப்பிட்களை பேக்கேஜிங் செய்வதற்கான முறைகள்: 1. இரு அடுக்குகள் (கொழுப்பு சவ்வு), 2. லிபோசோம்கள் இரண்டு அடுக்கு லிப்பிட்களைக் கொண்ட ஒரு வெசிகல் ஆகும், அதே நேரத்தில் உள் மற்றும் வெளிப்புற மேற்பரப்புகள் இரண்டும் துருவமாக இருக்கும். 3. மைக்கேல்ஸ் - ஆம்பிஃபிலிக் லிப்பிட்களின் அமைப்பின் மூன்றாவது மாறுபாடு - ஒரு வெசிகல், அதன் சுவர் லிப்பிட்களின் ஒரு அடுக்கால் உருவாகிறது, அதே நேரத்தில் அவற்றின் ஹைட்ரோபோபிக் முனைகள் மைக்கேலின் மையத்தை எதிர்கொள்ளும் மற்றும் அவற்றின் உள் சூழல் நீர்நிலை அல்ல, ஆனால் ஹைட்ரோபோபிக்.

லிப்பிட் மூலக்கூறுகளின் பேக்கேஜிங் மிகவும் பொதுவான வடிவம் அவற்றின் உருவாக்கம் ஆகும் தட்டையானதுசவ்வு இரு அடுக்கு. லிபோசோம்கள் மற்றும் மைக்கேல்கள் ஆகியவை விரைவான போக்குவரத்து வடிவங்கள் ஆகும், அவை செல்லுக்குள் மற்றும் வெளியே பொருட்களின் பரிமாற்றத்தை உறுதி செய்கின்றன. மருத்துவத்தில், லிபோசோம்கள் நீரில் கரையக்கூடிய பொருட்களைக் கொண்டு செல்லப் பயன்படுகின்றன, மேலும் கொழுப்பில் கரையக்கூடிய பொருட்களைக் கொண்டு செல்ல மைக்கேல்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

சவ்வு புரதங்கள்:

1. ஒருங்கிணைந்த (லிப்பிட் அடுக்குகளில் சேர்க்கப்பட்டுள்ளது)

2. புற

ஒருங்கிணைந்த (டிரான்ஸ்மெம்பிரேன் புரதங்கள்):

1. மோனோடோபிக்- (உதாரணமாக, கிளைகோபோரின். அவை மென்படலத்தை 1 முறை கடக்கின்றன), மற்றும் வாங்கிகள், அவற்றின் வெளிப்புற - எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் டொமைன் - மூலக்கூறின் அங்கீகாரப் பகுதிக்கு சொந்தமானது.

2. பாலிடோபிக்- மீண்டும் மீண்டும் மென்படலத்தில் ஊடுருவி - இவையும் ஏற்பி புரதங்கள், ஆனால் அவை சிக்னல் பரிமாற்ற பாதையை கலத்திற்குள் செயல்படுத்துகின்றன.

லிப்பிட்களுடன் தொடர்புடைய சவ்வு புரதங்கள்.

4. சவ்வு புரதங்கள்,கார்போஹைட்ரேட்டுகளுடன் தொடர்புடையது.

புற புரதங்கள் -லிப்பிட் பைலேயரில் மூழ்கவில்லை மற்றும் அதனுடன் இணையாக இணைக்கப்படவில்லை. அவை அயனி தொடர்புகளால் ஒன்றாக இணைக்கப்படுகின்றன. புற புரதங்கள் தொடர்பு காரணமாக மென்படலத்தில் உள்ள ஒருங்கிணைந்த புரதங்களுடன் தொடர்புடையவை - புரதம்-புரதம்தொடர்புகள்.

இந்த புரதங்களின் உதாரணம்:

1. ஸ்பெக்ட்ரின், இது கலத்தின் உள் மேற்பரப்பில் அமைந்துள்ளது

2. ஃபைப்ரோனெக்டின்,மென்படலத்தின் வெளிப்புற மேற்பரப்பில் உள்ளூர்மயமாக்கப்பட்டது

புரதங்கள் -பொதுவாக சவ்வு வெகுஜனத்தில் 50% வரை இருக்கும். இதில்

ஒருங்கிணைந்த புரதங்கள்பின்வரும் செயல்பாடுகளைச் செய்யவும்:

அ) அயன் சேனல் புரதங்கள்

b) ஏற்பி புரதங்கள்

2. புற சவ்வு புரதங்கள்(fibrillar, globular) பின்வரும் செயல்பாடுகளைச் செய்கிறது:

a) வெளிப்புற (ஏற்பி மற்றும் ஒட்டுதல் புரதங்கள்)

b) உள் - சைட்டோஸ்கெலட்டன் புரதங்கள் (ஸ்பெக்ட்ரின், அங்கிரின்), இரண்டாவது தூதர் அமைப்பின் புரதங்கள்.

அயன் சேனல்கள்- இவை ஒருங்கிணைந்த புரதங்களால் உருவாக்கப்பட்ட சேனல்கள், அவை ஒரு சிறிய துளையை உருவாக்குகின்றன, இதன் மூலம் அயனிகள் ஒரு மின் வேதியியல் சாய்வு வழியாக செல்கின்றன. மிகவும் பிரபலமான சேனல்கள் Na, K, Ca 2, Cl க்கான சேனல்கள்.

நீர் சேனல்களும் உள்ளன - இவை அக்வாபோரின்கள்(எரித்ரோசைட்டுகள், சிறுநீரகம், கண்).

சுப்ரமெம்பிரேன் கூறு- கிளைகோகாலிக்ஸ், தடிமன் 50 நா.மீ. இவை கிளைகோபுரோட்டின்கள் மற்றும் கிளைகோலிப்பிட்களின் கார்போஹைட்ரேட் பகுதிகளாகும், அவை எதிர்மறையான கட்டணத்தை வழங்குகின்றன. EM இன் கீழ் பிளாஸ்மாலெம்மாவின் வெளிப்புற மேற்பரப்பை உள்ளடக்கிய மிதமான அடர்த்தியின் தளர்வான அடுக்கு உள்ளது. கார்போஹைட்ரேட் கூறுகளுக்கு கூடுதலாக, கிளைகோகாலிக்ஸில் புற சவ்வு புரதங்கள் (அரை ஒருங்கிணைந்த) உள்ளன. அவற்றின் செயல்பாட்டு பகுதிகள் சுப்ரா-மெம்பிரேன் மண்டலத்தில் அமைந்துள்ளன - இவை இம்யூனோகுளோபின்கள் (படம் 4).

கிளைகோகாலிக்ஸின் செயல்பாடு: 1. ஒரு பாத்திரத்தை வகிக்கவும் ஏற்பிகள்.

2. இன்டர்செல்லுலர் அங்கீகாரம்.

3. இன்டர்செல்லுலர் இடைவினைகள்(பிசின் இடைவினைகள்).

4. ஆர் histocompatibility ஏற்பிகள்.

5. என்சைம் உறிஞ்சுதல் மண்டலம்(parietal digestion).

6. ஹார்மோன் ஏற்பிகள்.

சப்மெம்பிரேன் கூறுஅல்லது சைட்டோபிளாஸின் வெளிப்புற மண்டலம், பொதுவாக ஒப்பீட்டு விறைப்புத்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் இந்த மண்டலம் குறிப்பாக இழைகளால் நிறைந்துள்ளது (d 5-10 nm). உயிரணு சவ்வை உருவாக்கும் ஒருங்கிணைந்த புரதங்கள் சப்மெம்பிரேன் மண்டலத்தில் இருக்கும் ஆக்டின் இழைகளுடன் நேரடியாகவோ அல்லது மறைமுகமாகவோ தொடர்புடையவை என்று கருதப்படுகிறது. அதே நேரத்தில், ஒருங்கிணைந்த புரதங்களின் தொகுப்பின் போது, ​​​​இந்த மண்டலத்தில் அமைந்துள்ள ஆக்டின் மற்றும் மயோசின் ஆகியவை ஒருங்கிணைக்கப்படுகின்றன என்பது சோதனை ரீதியாக நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது, இது செல் வடிவத்தை ஒழுங்குபடுத்துவதில் ஆக்டின் இழைகளின் பங்கேற்பைக் குறிக்கிறது.

பிளாஸ்மாலெம்மாவால் உருவாக்கப்பட்ட கட்டமைப்புகள்

கலத்தின் வரையறைகள், ஒளி-ஆப்டிகல் மட்டத்தில் கூட, சமமாகவும் மென்மையாகவும் தோன்றாது, மேலும் எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி அதன் செயல்பாட்டு நிபுணத்துவத்தின் தன்மையை பிரதிபலிக்கும் கலத்தில் உள்ள பல்வேறு கட்டமைப்புகளைக் கண்டறிந்து விவரிக்க உதவுகிறது. பின்வரும் கட்டமைப்புகள் வேறுபடுகின்றன:

1. மைக்ரோவில்லி -பிளாஸ்மலெம்மாவால் மூடப்பட்ட சைட்டோபிளாஸின் நீண்டு. மைக்ரோவில்லஸ் சைட்டோஸ்கெலட்டன் ஆக்டின் நுண்ணுயிரிகளின் மூட்டையால் உருவாகிறது, அவை செல்களின் நுனி பகுதியின் முனைய நெட்வொர்க்கில் பிணைக்கப்படுகின்றன (படம் 5). ஒளி ஒளியியல் மட்டத்தில் ஒற்றை மைக்ரோவில்லி தெரியவில்லை. கலத்தின் நுனிப் பகுதியில் கணிசமான எண்ணிக்கையில் (2000-3000 வரை) இருந்தால், ஒளி நுண்ணோக்கியுடன் கூட ஒரு "தூரிகை எல்லை" வேறுபடுத்தப்படுகிறது.

2. கண் இமைகள் –கலத்தின் நுனி மண்டலத்தில் அமைந்துள்ளன மற்றும் இரண்டு பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளன (படம். 6): a) வெளி - ஆக்சோன்

B) உள் - becal உடல்

ஆக்சோனேம்நுண்குழாய்கள் (9 + 1 ஜோடிகள்) மற்றும் தொடர்புடைய புரதங்களின் சிக்கலானது. நுண்குழாய்கள் டூபுலின் புரதத்தால் உருவாகின்றன, மற்றும் கைப்பிடிகள் புரதம் டைனினால் உருவாகின்றன - இந்த புரதங்கள் சேர்ந்து டூபுலின்-டைனைன் வேதியியல் மின்மாற்றியை உருவாக்குகின்றன.

அடித்தள உடல்சிலியத்தின் அடிப்பகுதியில் அமைந்துள்ள 9 மும்மடங்கு நுண்குழாய்களைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் ஆக்சோனைமை ஒழுங்கமைப்பதற்கான மேட்ரிக்ஸாக செயல்படுகிறது.

3. அடித்தள தளம்- இவை அடித்தள பிளாஸ்மாலெம்மாவின் ஆழமான ஊடுருவல்கள், அவற்றுக்கிடையே மைட்டோகாண்ட்ரியா உள்ளது. இது தண்ணீரை செயலில் உறிஞ்சுவதற்கான ஒரு பொறிமுறையாகும், அதே போல் ஒரு செறிவு சாய்வுக்கு எதிரான அயனிகள்.

1. போக்குவரத்து குறைந்த மூலக்கூறு எடை கலவைகள்மூன்று வழிகளில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது:

1. எளிய பரவல்

2. எளிதாக்கப்பட்ட பரவல்

3. செயலில் போக்குவரத்து

எளிய பரவல்- குறைந்த மூலக்கூறு எடை ஹைட்ரோபோபிக் கரிம சேர்மங்கள் (கொழுப்பு அமிலங்கள், யூரியா) மற்றும் நடுநிலை மூலக்கூறுகள் (HO, CO, O). மென்படலத்தால் பிரிக்கப்பட்ட பெட்டிகளுக்கு இடையே உள்ள செறிவு வேறுபாடு அதிகரிக்கும் போது, ​​பரவல் வீதமும் அதிகரிக்கிறது.

எளிதாக்கிய பரவல்- பொருள் செறிவு சாய்வு திசையிலும் சவ்வு வழியாக செல்கிறது, ஆனால் போக்குவரத்து புரதத்தின் உதவியுடன் - இடமாற்றங்கள்.இவை கடத்தப்பட்ட பொருட்களுக்கான தனித்தன்மை கொண்ட ஒருங்கிணைந்த புரதங்கள். இவை, எடுத்துக்காட்டாக, அயன் சேனல்கள் (எரித்ரோசைட்), கே சேனல்கள் (உற்சாகமான செல்களின் பிளாஸ்மோலெமா) மற்றும் Ca சேனல்கள் (சர்கோபிளாஸ்மிக் ரெட்டிகுலம்). இடமாற்றம் H O க்கு இது அக்வாபோரின் ஆகும்.

டிரான்ஸ்லோகேஸின் செயல்பாட்டின் வழிமுறை:

1. ஒரு குறிப்பிட்ட அளவு மற்றும் கட்டணம் கொண்ட பொருட்களுக்கு திறந்த ஹைட்ரோஃபிலிக் சேனல் இருப்பது.

2. ஒரு குறிப்பிட்ட தசைநார் பிணைக்கப்படும் போது மட்டுமே சேனல் திறக்கும்.

3. இது போன்ற சேனல் எதுவும் இல்லை, மற்றும் டிரான்ஸ்லோகேஸ் மூலக்கூறு, லிகண்டை பிணைத்து, மென்படலத்தின் விமானத்தில் 180 சுழலும்.

செயலில் போக்குவரத்து- இது அதே போக்குவரத்து புரதத்தைப் பயன்படுத்தி போக்குவரத்து ஆகும் (இடமாற்றங்கள்),ஆனால் ஒரு செறிவு சாய்வு எதிராக. இந்த இயக்கத்திற்கு ஆற்றல் தேவைப்படுகிறது.

தற்போது, ​​தனிப்பயனாக்கப்பட்ட மருத்துவம் மற்றும் தனிப்பட்ட மூலக்கூறுகள் மற்றும் சில நோய்களின் வளர்ச்சிக்கு காரணமான செல் அமைப்புகளில் இலக்கு மற்றும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட செல்வாக்கின் முறைகள் தீவிரமாக விவாதிக்கப்படுகின்றன. சவ்வு புரதங்கள் சிகிச்சைக்கான சாத்தியமான இலக்குகளின் முக்கிய வகுப்பாக முன்னிலைப்படுத்தப்படுகின்றன, ஏனெனில் அவை உயிரணுக்களுக்கு சமிக்ஞைகளை நேரடியாக அனுப்புகின்றன. தற்போது அனைத்து மருந்துகளிலும் பாதிக்கும் மேற்பட்டவை செல் சவ்வு மீது இலக்கைக் கொண்டுள்ளன என்பதைக் கவனத்தில் கொள்ளலாம், மேலும் எதிர்காலத்தில் இதுபோன்ற கலவைகள் மட்டுமே இருக்கும்.

பிளாஸ்மா மென்படலத்தின் அமைப்பு

உயிருள்ள உயிரணு எவ்வாறு செயல்படுகிறது என்பதை பலர் தங்கள் பள்ளி உயிரியல் பாடத்திலிருந்து நினைவில் வைத்திருக்கிறார்கள் என்று நினைக்கிறேன். மற்றும் சந்தேகத்திற்கு இடமின்றி, பிளாஸ்மா சவ்வு செல் கட்டமைப்பில் ஒரு சிறப்பு இடத்தைப் பிடித்துள்ளது. இதுவே உயிரணுவிற்குள் இருக்கும் இடத்தை புற-செல்லுலார் இடத்திலிருந்து பிரிக்கிறது மற்றும் கலத்தின் எல்லையாகும். இந்த யோசனைக்கு இணங்க, உயிரியல் மென்படலத்தின் முக்கிய செயல்பாடு "வாழும்" உள்ளக இடைவெளி மற்றும் சுற்றுச்சூழலுக்கு இடையில் ஒரு தடையை உருவாக்குவதாகும். பிந்தையது பாக்டீரியா போன்ற ஒற்றை செல் உயிரினங்களுக்கு "உயிரற்றது" என்று நிபந்தனையுடன் கருதலாம். பாக்டீரியா, ஆர்க்கியா, பூஞ்சை மற்றும் தாவரங்களின் செல்கள் மென்படலத்தின் மேல் மிகவும் நீடித்த, திடமான ஷெல் - செல் சுவர் மூலம் மூடப்பட்டிருக்கும். வெளிப்புற தாக்கங்களிலிருந்து செல்லைப் பாதுகாக்கவும் இது உதவுகிறது. இருப்பினும், பிளாஸ்மா சவ்வு பல செயல்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளது.

1925 ஆம் ஆண்டில், I. Gorter மற்றும் A. Grendel ஆகியோர் உயிரணு சவ்வு கொழுப்பு மூலக்கூறுகளின் இரட்டை அடுக்கு (பைலேயர்) என்பதைக் காட்டினார்கள். அவற்றின் முக்கிய அம்சம் ஆம்பிஃபிலிசிட்டி, அதாவது வெவ்வேறு பண்புகளைக் கொண்ட இரண்டு பகுதிகளின் மூலக்கூறில் இருப்பது. இவ்வாறு, ஒரு ஹைட்ரோஃபிலிக் (அதாவது 'நீர்-அன்பான') துருவ "தலை" மற்றும் லிபோபிலிக் (அதாவது 'கொழுப்பை விரும்பும்') அசைல் சங்கிலிகள் தனிமைப்படுத்தப்படுகின்றன. ஒரு சவ்வு உருவாகும்போது, ​​​​மூலக்கூறின் லிபோபிலிக் பகுதிகள் இரு அடுக்கின் உட்புறத்தை எதிர்கொள்கின்றன, மேலும் ஹைட்ரோஃபிலிக் பகுதிகள் வெளியே எதிர்கொள்ளும். இந்த சவ்வு அமைப்பு திட்டம் பெரும்பாலான உயிரினங்களுக்கு பொதுவானது, எனவே லிப்பிட் பைலேயருடன் நேரடியாக தொடர்பு கொள்ள பல உயிர் மூலக்கூறுகள் "இலக்கு" உள்ளன. உயிரணு உறுப்புகளின் சவ்வுகள் அதே கொள்கையின்படி உருவாகின்றன என்பதைக் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும், ஆனால் அவற்றில் உள்ள லிப்பிட்களின் கலவை பிளாஸ்மா மென்படலத்திலிருந்து வேறுபடுகிறது.

1935 ஆம் ஆண்டில், ஜே. டேனியெல்லி மற்றும் எச். டாசன் ஆகியோர் உயிரணு சவ்வு, லிப்பிட்களுடன் கூடுதலாக, புரதங்களைக் கொண்டிருப்பதைக் காட்டினர். "சாண்ட்விச்" மாதிரி உருவானது, இதில் பிளாஸ்மா சவ்வு புரதங்களின் இரண்டு அடுக்குகளாக குறிப்பிடப்படுகிறது, அவற்றுக்கு இடையே ஒரு லிப்பிட் பிளேயர் அமைந்துள்ளது. இந்த மாதிரியானது சவ்வுகளின் எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கியின் முதல் சோதனைகளால் உறுதிப்படுத்தப்பட்டது, எனவே 1960 இல் ஜே. ராபர்ட்சன் ஒரு உயிரணுவின் அனைத்து சவ்வுகளுக்கும் ஒரே மூன்று அடுக்கு அமைப்பை முன்வைத்தார்.


இருப்பினும், இந்த மாதிரி திரட்டப்பட்ட சோதனைத் தரவை விளக்க முடியவில்லை, மேலும் 1972 இல், எஸ்.டி. சிங்கர் மற்றும் ஜி.எல். நிக்கல்சன் ஆகியோர் சவ்வின் திரவ மொசைக் மாதிரியை முன்மொழிந்தனர், அங்கு சவ்வு புரதங்கள் திறந்த கடலில் உள்ள பனிப்பாறைகள் போன்ற திரவ லிப்பிட் பைலேயரில் "மிதக்கும்". புரதங்கள் எந்த வகையிலும் வரிசைப்படுத்தப்படவில்லை மற்றும் சவ்வில் சுதந்திரமாக நகர முடியும் என்று கருதப்பட்டது. புரதங்கள், இந்த மாதிரியின் படி, சவ்வின் மேற்பரப்புடன் தொடர்பு கொள்ளலாம், எனவே அதன் ஒரு பக்கத்தில் (புற புரதங்கள்) அமைந்திருக்கலாம் அல்லது (ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்கள்) மூலம் சவ்வுக்குள் ஊடுருவலாம். பிந்தையது புற-செல்லுலார் சூழல் மற்றும் செல்லின் சைட்டோபிளாசம் ஆகியவற்றுடன் தொடர்பு கொள்ளும் திறனைக் கொண்டுள்ளது. சில நேரங்களில் அரை-ஒருங்கிணைந்த புரதங்களும் தனிமைப்படுத்தப்படுகின்றன, பகுதியளவு சவ்வுக்குள் மூழ்கிவிடுகின்றன, ஆனால் அதன் வழியாக ஊடுருவுவதில்லை.

ஆயினும்கூட, 1980 களில் லிப்பிட் ராஃப்ட்ஸ் என்ற கருத்து வளர்ந்தபோது, ​​உயிரியல் சவ்வு அமைப்பின் அத்தகைய சிக்கலான மாதிரிக்கு கூட தெளிவு தேவை. "லிப்பிட் ராஃப்ட்ஸ்" என்ற சொல் முதன்முதலில் 1988 இல் கே. சைமன்ஸ் மற்றும் ஜி. வான் மீர் ஆகியோரால் அடர்த்தியாக நிரம்பிய லிப்பிட் தனிமைப்படுத்தப்பட்ட பகுதிகளை விவரிக்க முன்மொழியப்பட்டது. தற்போது, ​​பிளாஸ்மா மென்படலத்தில் லிப்பிட் டொமைன்கள் (அதாவது, குறிப்பிட்ட பண்புகளைக் கொண்ட பகுதிகள்) இருப்பது ஏராளமான ஆய்வுகள் மூலம் உறுதிப்படுத்தப்பட்டுள்ளது. அவற்றின் உருவாக்கம் மற்றவற்றுடன், பரிசீலனையில் உள்ள சவ்வின் பகுதியில் அமைந்துள்ள புரதங்களால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது என்று நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது. சவ்வு புரதங்கள் செல் மேற்பரப்பில் தோராயமாக விநியோகிக்கப்படுவதில்லை, ஆனால் அதிக வரிசைப்படுத்தப்பட்ட கட்டமைப்பை அடையக்கூடிய சில பகுதிகளை ஆக்கிரமித்துள்ளன.

சவ்வு புரதங்கள்

ஒரு உயிருள்ள உயிரணு நமது வழக்கமான உணர்வு உறுப்புகளை இழக்கிறது என்பதை நாம் புரிந்து கொள்ள வேண்டும், அவை சில வகையான செல்களைக் கொண்டிருக்கின்றன. இருப்பினும், உங்களையும் என்னையும் போலவே, செல் அதன் சூழலுடன் தொடர்பு கொள்ள வேண்டும். இருப்பினும், சில தாக்கங்களுக்கு, உதாரணமாக ஒளி அல்லது சிறிய லிபோபிலிக் மூலக்கூறுகளுக்கு, பிளாஸ்மா சவ்வு ஒரு தடையாக இல்லை, எனவே அவை நேரடியாக உள்செல்லுலார் புரதங்களுடன் தொடர்பு கொள்ளலாம். வெளிப்புற தாக்கங்களுக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக, கலத்தில் இரசாயன எதிர்வினைகளின் அடுக்குகள் நிகழ்கின்றன, எடுத்துக்காட்டாக, சில புரதங்களின் உற்பத்தியின் தொடக்கத்தில் அல்லது உயிரணு வாழ்க்கையின் சில நிரல்களின் தொடக்கத்துடன் முடிவடைகிறது என்பதை இங்கே நினைவுபடுத்த வேண்டும். இவ்வாறு, சில தாக்கங்களுக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக, ஒரு செல் வெளிப்புற சூழலில் ஹார்மோன்கள் அல்லது என்சைம்களை வெளியிடலாம், பிரிவைத் தொடங்கலாம் அல்லது அதன் சொந்த மரணத்தின் திட்டமிடப்பட்ட பொறிமுறையை தொடங்கலாம் - அப்போப்டொசிஸ். இவை அனைத்தும் சாத்தியமான பதில்கள் அல்ல, ஆனால் அவை அனைத்தும் உள்ளக இடைவெளியில் இரசாயன மாற்றங்களின் அடுக்கைத் தூண்டுவதற்கான பொதுவான கொள்கையைக் கொண்டுள்ளன.

மேலும், வாழ்க்கையை பராமரிக்க, சவ்வு வழியாக பொருளின் நிலையான போக்குவரத்து அவசியம். ஒரு செல் பதிலளிக்கக்கூடிய பல்வேறு வெளிப்புற சமிக்ஞைகள் இருப்பதால், அதன் மேற்பரப்பில் பல்வேறு வகையான பல்வேறு சவ்வு புரதங்கள் உள்ளன. அவற்றில் ஏற்பிகள், அயன் சேனல்கள், போரின்கள், டிரான்ஸ்போர்ட்டர்கள், மூலக்கூறு மோட்டார்கள் மற்றும் கட்டமைப்பு புரதங்கள் உள்ளன. ரிசெப்டர் புரோட்டீன்கள், ஹார்மோன்கள் மற்றும் சிக்னலிங் மூலக்கூறுகள் வெளியில் தோன்றுவதற்கு பதில் செல் உள்ளே ஒரு சமிக்ஞையை உருவாக்குகின்றன. எடுத்துக்காட்டாக, இன்சுலின் ஏற்பி ஆகியவை இதில் அடங்கும், இது கலத்திற்குள் குளுக்கோஸின் நுழைவுக்கு பொறுப்பாகும். அயனி சேனல்கள் அயனிகளின் போக்குவரத்து மற்றும் வெளிப்புற சூழல் மற்றும் செல்லின் சைட்டோபிளாசம் ஆகியவற்றுக்கு இடையே உள்ள செறிவுகளின் சாய்வு (அதாவது செறிவு வேறுபாடு) பராமரிப்பை வழங்குகிறது. சோடியம் மற்றும் பொட்டாசியம் சேனல்கள் நேரடியாக நரம்பு தூண்டுதலின் பரிமாற்றத்தில் ஈடுபட்டுள்ளன. போரின்கள் மற்றும் டிரான்ஸ்போர்ட்டர்கள் சவ்வு முழுவதும் நீர் மற்றும் சில மூலக்கூறுகளின் போக்குவரத்துக்கு மத்தியஸ்தம் செய்கின்றன. மூலக்கூறு மோட்டார்கள் பல பாக்டீரியாக்களில் உள்ளன மற்றும் செல் இயக்கத்தை வழங்குகின்றன. இறுதியாக, கட்டமைப்பு புரதங்கள் மென்படலத்தின் கட்டமைப்பை பராமரிக்கின்றன மற்றும் பிற புரதங்களுடன் தொடர்பு கொள்கின்றன. குறைவான சிக்கலானது எதிர்வினை அடுக்குகள் மூலம் உள்செல்லுலார் சிக்னலிங் பாதைகளின் நெட்வொர்க் ஆகும். இன்டராக்டோமிக்ஸ் எனப்படும் ஒரு சிறப்பு அறிவியல் துறையானது ஒரு கலத்தில் உள்ள புரதங்களின் தொடர்புகளையும், அதன்படி, சமிக்ஞை பரிமாற்ற பாதைகளையும் கையாள்கிறது. தொடர்பு- 'தொடர்பு').

புரத தொடர்புக்கான ஊடகமாக சவ்வு

சவ்வு புரதங்களின் பல்வேறு வகுப்புகள் மற்றும் பிளாஸ்மா மென்படலத்தில் அவற்றின் விநியோகம் ஏற்கனவே மேலே விவரிக்கப்பட்டுள்ளன. சவ்வு கட்டமைப்பைப் பற்றிய தற்போதைய கருத்துக்கள் செல் மேற்பரப்பில் தனித்தனி களங்கள் உருவாகின்றன, குறிப்பிட்ட புரதங்கள் மற்றும் லிப்பிட்களைக் கொண்டிருக்கின்றன மற்றும் குறிப்பிட்ட செயல்பாடுகளைச் செய்ய வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன. இடைக்கணிப்பு இடைவினைகளின் செயல்முறைகளின் சிக்கலான அமைப்பு மற்றும் உயிருள்ள உயிரணுவின் வாழ்க்கையை ஒழுங்குபடுத்துவதன் காரணமாக இத்தகைய இடஞ்சார்ந்த பிரிப்பு அவசியமாக இருக்கலாம். இயற்கையாகவே, புரதங்கள் தனியாக வேலை செய்யாது. அவர்களில் பலர் தங்கள் கூட்டாளர்கள் இல்லாமல் தங்கள் செயல்பாடுகளைச் செய்ய முடியாது. இந்த சிக்கலான பொறிமுறையில் ஏற்படும் இடையூறுகள் செல் வெளிப்புற சமிக்ஞைகளுக்கு தவறாக பதிலளிக்கத் தொடங்கும். இது புற்றுநோய் மற்றும் நீரிழிவு போன்ற கடுமையான நோய்களின் வளர்ச்சிக்கு வழிவகுக்கிறது, மேலும் பல. அவர்களுக்கு சிகிச்சையளிக்க, இந்த செல் சிக்னலிங் அமைப்புகள் எவ்வாறு செயல்படுகின்றன மற்றும் அவற்றை எவ்வாறு பாதிக்கலாம் என்பதை நாம் புரிந்து கொள்ள வேண்டும். அத்தகைய தாக்கத்திற்கு இயற்கையே நமக்கு பல கருவிகளை வழங்குகிறது: ஹார்மோன் மூலக்கூறுகள், அத்துடன் பல்வேறு விஷங்களிலிருந்து நச்சுகள், பிளாஸ்மா மென்படலத்தின் மேற்பரப்பில் தங்கள் இலக்குகளை துல்லியமாக தேர்ந்தெடுக்க முடியும்.

இருப்பினும், அவற்றை எப்போதும் அவற்றின் அசல் வடிவத்தில் பயன்படுத்த முடியாது, எனவே நவீன மூலக்கூறு உயிரியலின் பணிகளில் ஒன்று புதிய மாற்றியமைக்கப்பட்ட சேர்மங்களை உருவாக்குவதாகும், அவை சவ்வு இலக்குகளைத் தேர்ந்தெடுத்து செயல்படுகின்றன, அதே நேரத்தில் அசல் இயற்கை மூலக்கூறுகளின் தீமைகளிலிருந்து விடுபடுகின்றன. . இத்தகைய ஆய்வுகள் இலக்கு மற்றும் சிகிச்சை முகவருக்கு இடையிலான அங்கீகார பொறிமுறையை மட்டுமல்லாமல், சவ்வு புரதங்களின் பரஸ்பர அமைப்பின் அனைத்து பிரத்தியேகங்களையும் ஒட்டுமொத்தமாக சவ்வுகளையும் புரிந்து கொள்ள வேண்டும்.

ஒரு சவ்வு என்பது புரதங்கள் குடியேறுவதற்கும் அதில் வேலை செய்வதற்கும் தேவையான ஒரு செயலற்ற அணி மட்டுமல்ல என்பதை நாம் புரிந்து கொள்ள வேண்டும். சவ்வு மிகவும் சுறுசுறுப்பான மற்றும் மாறும் சூழலாகும், இது அதில் உள்ள புரதங்களின் செயல்பாட்டை கணிசமாக பாதிக்கிறது. இது லிப்பிட் பைலேயரின் பண்புகளை மாற்றுவதன் மூலம் சவ்வு புரதங்களை பாதிக்க புதிய வழிகளைத் திறக்கிறது. புரதங்களின் டிரான்ஸ்மெம்பிரேன் டொமைன்களுக்கு இடையிலான தொடர்பும் மிகவும் முக்கியமானது. இது ஒரு பெரிய எண்ணிக்கையிலான முக்கிய உயிரணு அமைப்புகளின் சரியான அமைப்பு மற்றும் செயல்பாட்டை தீர்மானிக்கிறது. எனவே, குறிப்பிட்ட புரதங்களின் செயல்பாடுகளை மட்டுமல்ல, அவற்றின் வேலைக்கும் சவ்வுகளின் பண்புகளுக்கும் இடையே என்ன உறவுகள் உள்ளன என்பதையும் நாம் புரிந்து கொள்ள வேண்டும். இந்த திசையில் முதல் முடிவுகள் ஏற்கனவே பெறப்பட்டுள்ளன, ஆனால் இந்த கட்டத்தில் உயிரணு மென்படலத்தின் செயல்பாட்டின் முழுமையான படம் இன்னும் கிடைக்கவில்லை.

செல் ஏற்பி அமைப்புகள்

மேலே குறிப்பிட்டுள்ள அனைத்து சவ்வு புரதங்களிலும், ஏற்பிகள் ஒரு சிறப்பு நிலையை ஆக்கிரமித்துள்ளன. அவை பிளாஸ்மா சவ்வு முழுவதும் செல்லுக்குள் தகவல் பரிமாற்றத்தை உறுதி செய்கின்றன. பலசெல்லுலர் உயிரினங்களில் (மற்றும் காலனிகளை உருவாக்கும் பல பாக்டீரியாக்களில்), வெளிப்புற சூழலில் வெளியிடப்படும் சிறப்பு சமிக்ஞை மூலக்கூறுகளைப் பயன்படுத்தி செல்களுக்கு இடையில் தகவல் பரிமாற்றப்படுகிறது. இந்த சமிக்ஞை மூலக்கூறுகளில் ஹார்மோன்கள் உள்ளன - சிறப்பு உறுப்புகளில் சிறப்பாக சுரக்கும் (வெளியிடப்பட்ட) புரத மூலக்கூறுகள். புரோட்டீன் அல்லாத கலவைகள் மற்றும் உருவாகும் அல்லது வெளியிடப்படும் அயனிகள் கூட, எடுத்துக்காட்டாக, அண்டை செல்கள் சேதமடையும் போது, ​​சமிக்ஞை மூலக்கூறுகளாகவும் செயல்பட முடியும். வலி சமிக்ஞைகளின் பரிமாற்றம் எவ்வாறு ஏற்பாடு செய்யப்படுகிறது, இது உடலில் மிக முக்கியமான பாதுகாப்பு செயல்பாட்டை செய்கிறது. ரிசெப்டர்கள் குறிப்பாக எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் ஸ்பேஸில் தோன்றும் சிக்னல்களை (லிகண்ட் மூலக்கூறுகள்) அடையாளம் கண்டு, அவற்றுக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக எதிர்வினைகளின் அடுக்கைத் தூண்டுகின்றன. இரண்டு முக்கிய வகை ஏற்பிகளை வேறுபடுத்தி அறியலாம்: ஜி புரதம்-இணைந்த ஏற்பிகள் (ஜிபிசிஆர்) மற்றும் ரிசெப்டர் டைரோசின் கைனேஸ்கள் (ஆர்டிகேக்கள்).

ரிசெப்டர் டைரோசின் கைனேஸ்கள் சவ்வு புரதங்களின் ஒரு பெரிய வகுப்பாகும். இவற்றில் பல வளர்ச்சி காரணிகள் மற்றும் ஹார்மோன்களுக்கான ஏற்பிகள் அடங்கும். இந்த வகுப்பின் சிறந்த அறியப்பட்ட புரதங்களில் ஒன்று இன்சுலின் ஏற்பி ஆகும். இது இல்லாமல், கலத்தில் குளுக்கோஸின் கட்டுப்படுத்தப்பட்ட போக்குவரத்து சாத்தியமற்றது, மேலும் இந்த புரதத்தின் செயல்பாட்டில் ஏற்படும் இடையூறுகள் வகை II நீரிழிவு நோயின் வளர்ச்சிக்கு வழிவகுக்கும். எபிடெர்மல் வளர்ச்சி காரணி ஏற்பிகள் செல் சுழற்சியை ஒழுங்குபடுத்துவதால் இன்னும் முக்கியமானதாகத் தோன்றுகிறது. அவற்றின் முறையற்ற செயல்பாடு பெரும்பாலும் புற்றுநோயின் வளர்ச்சியை ஏற்படுத்துகிறது. இந்த ஏற்பிகளில் பெரும்பாலானவை வெளித்தோற்றத்தில் மிகவும் எளிமையான அமைப்பைக் கொண்டுள்ளன: ஒரு புற-செல்லுலார் டொமைன், ஒரு டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் ஆல்பா ஹெலிக்ஸ் மற்றும் ஒரு சைட்டோபிளாஸ்மிக் கைனேஸ் டொமைன். இருப்பினும், எல்லாம் மிகவும் எளிதானது அல்ல, மேலும் RTK கள் தனியாக வேலை செய்யாது. செயல்படுத்த, அவர்கள் ஒரு ஜோடியை உருவாக்க வேண்டும் (அல்லது, அறிவியல் அடிப்படையில், ஒரு டைமர்). ஒரு ஹார்மோன் அல்லது வளர்ச்சி காரணி RTK இன் எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் டொமைனுடன் தொடர்பு கொள்கிறது மற்றும் அதன் டைமரைசேஷனை ஊக்குவிக்கிறது, அதாவது, இரண்டாவது ஒத்த ஏற்பியுடன் ஒரு டைமரின் உருவாக்கம். இதற்குப் பிறகு, டிரான்ஸ்மெம்பிரேன் மற்றும் கைனேஸ் களங்களில் டைமரைசேஷன் ஏற்படுகிறது. இதன் விளைவாக, கைனேஸ் டொமைன் டைமர் இரசாயன எதிர்வினைகளின் அடுக்கின் தொடக்கப் புள்ளியாகிறது. RTK இன் செயல்பாட்டின் பொறிமுறையின் பொதுவான யோசனை மட்டுமே இங்கே விவரிக்கப்பட்டுள்ளது, ஏனெனில் இந்த செயல்முறையின் விவரங்கள் மிகவும் சிக்கலானவை மற்றும் இன்றுவரை முழுமையாக புரிந்து கொள்ளப்படவில்லை.

GPCR களில் காட்சி ரோடாப்சின், சுவை ஏற்பிகள், நாற்றம் ஏற்பிகள் மற்றும் பல உள்ளன. இவை பிளாஸ்மா மென்படலத்தில் ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட பெரிய மூலக்கூறுகள். அவை ஏழு டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் ஆல்பா ஹெலிக்ஸைக் கொண்டிருக்கின்றன, அவை தூண்கள் போன்ற சவ்வுகளை பரப்புகின்றன. சவ்வுக்கு வெளியே உள்ள தசைநார் பிணைப்புக்கு பதிலளிக்கும் விதமாக, இந்த புரதங்கள் பிளாஸ்மா மென்படலத்தின் உள் மேற்பரப்புக்கு அருகில் அமைந்துள்ள ஒரு ஜி புரதத்துடன் தொடர்பு கொள்ளத் தொடங்கும் வகையில் இணக்கமான மறுசீரமைப்பிற்கு உட்படுகின்றன. இந்த வழக்கில், அசல் சமிக்ஞையை பெருக்க முடியும், ஏனெனில் செயல்படுத்தப்பட்ட ஏற்பி பல ஜி புரத மூலக்கூறுகளை செயல்படுத்த முடியும்.

மருந்தியல் இலக்குகள்

முந்தைய பிரிவில் செல் ஏற்பி அமைப்புகள் பற்றி பேசினோம். பெரும்பாலான சமிக்ஞைகள் அவற்றின் வழியாக செல்வதால், அவை மருந்தியல் முகவர்களின் உதவியுடன் நாம் பாதிக்கக்கூடிய புள்ளிகள். உண்மையில், தற்போதுள்ள மருந்துகளில் பாதிக்கும் மேற்பட்டவை சவ்வு புரதங்களை "இலக்கு" செய்கின்றன. அவை தொடர்புடைய லிகண்ட்களுடன் பிணைப்பதைத் தடுக்கலாம் அல்லது அதற்கு மாறாக, தொடர்புடைய சமிக்ஞையை செயல்படுத்துதல் மற்றும் பரிமாற்றம் செய்யலாம். மருந்துகள் மற்றும் இயற்கை நச்சுகளுக்கான இரண்டாவது பாரம்பரிய இலக்கு அயன் சேனல்கள் ஆகும்.

இங்குள்ள முக்கிய பிரச்சனை என்னவென்றால், மிக உயர்ந்த தேர்வுத்திறன் கொண்ட மருத்துவ கலவைகளை உருவாக்குவது, அதாவது, ஒரு வகை ஏற்பி அல்லது ஒரு குறிப்பிட்ட துணை வகையை மட்டுமே தேர்ந்தெடுக்கும். எடுத்துக்காட்டாக, உடலில் உள்ள சில வகையான செல்களை மட்டுமே பாதிக்க இது அனுமதிக்கிறது, ஏனெனில் வெவ்வேறு உயிரணுக்களில், அவற்றின் நிபுணத்துவத்தைப் பொறுத்து, சவ்வுகளில் சற்று வித்தியாசமான ஏற்பிகள் இருக்கலாம். அவற்றில் ஒரு குறிப்பிட்ட துணை வகையின் மீது மட்டுமே தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட நடவடிக்கை, எடுத்துக்காட்டாக, ஆரோக்கியமானவற்றிலிருந்து கட்டி செல்களை பிரிக்க உதவும்.

இந்த சொத்து தற்போது மட்டு கட்டமைப்புகளை உருவாக்கும் கருத்தில் பயன்படுத்தப்படுகிறது, ஒரு மருந்தியல் முகவர் பல மூலக்கூறுகள் (அல்லது நானோ துகள்கள் கூட) ஒன்றுடன் ஒன்று இணைந்து ("குறுக்கு-இணைக்கப்பட்ட") கொண்டிருக்கும் போது. இந்த வழக்கில், ஒரு மருந்தில் பல்வேறு செயல்பாடுகளுடன் பல பகுதிகளை இணைக்க முடியும். எனவே, செல் மேற்பரப்பில் சில ஏற்பிகளை அங்கீகரிக்கும் ஒரு "இலக்கு" பகுதியை உருவாக்க முடியும், எடுத்துக்காட்டாக, புற்றுநோயின் வளர்ச்சியுடன். ஒரு சவ்வு-லைடிக் (அதாவது, சவ்வு-அழிக்கும்) முகவர் அல்லது டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் அல்லது மொழிபெயர்ப்பு செயல்முறைகளின் சவ்வு-ஊடுருவக்கூடிய தடுப்பான் அதில் சேர்க்கப்படுகிறது (அதாவது, கலத்தில் புரத உற்பத்தி செயல்முறை நிறுத்தப்படுகிறது). இதன் விளைவாக, குறைந்தபட்ச பக்க விளைவுகள் கொண்ட மிகவும் பயனுள்ள மருந்தியல் முகவர். புதிய தலைமுறையின் முதல் மருந்துகள் ஏற்கனவே மருத்துவ பரிசோதனைகளுக்கு உட்பட்டுள்ளன, விரைவில் அவை மிகவும் பயனுள்ள சிகிச்சைக்கு பயன்படுத்தப்படும்.

உயிரியல் வேதியியல் Lelevich Vladimir Valeryanovich

சவ்வு புரதங்கள்.

சவ்வு புரதங்கள்.

சவ்வு புரதங்கள் சவ்வுகளின் செயல்பாட்டு செயல்பாட்டிற்கு பொறுப்பாகும் மற்றும் 30 முதல் 70% வரை உள்ளன. சவ்வு புரதங்கள் மென்படலத்தில் அவற்றின் நிலையில் வேறுபடுகின்றன. அவை லிப்பிட் பிளேயரில் ஆழமாக ஊடுருவலாம் அல்லது அதை ஊடுருவலாம் - ஒருங்கிணைந்த புரதங்கள், பல்வேறு வழிகளில் சவ்வுடன் இணைக்கின்றன - மேற்பரப்பு புரதங்கள், அல்லது அதனுடன் இணைந்த தொடர்பு - நங்கூரமிட்ட புரதங்கள். மேற்பரப்பு புரதங்கள் எப்போதும் கிளைகோசைலேட்டாக இருக்கும். ஒலிகோசாக்கரைடு எச்சங்கள் புரோட்டியோலிசிஸிலிருந்து புரதத்தைப் பாதுகாக்கின்றன மற்றும் தசைநார் அங்கீகாரம் மற்றும் ஒட்டுதலில் ஈடுபட்டுள்ளன.

மென்படலத்தில் உள்ளமைக்கப்பட்ட புரதங்கள் கட்டமைப்பு மற்றும் குறிப்பிட்ட செயல்பாடுகளைச் செய்கின்றன:

1. போக்குவரத்து;

2. நொதி;

3. ஏற்பி;

4. ஆன்டிஜெனிக்.

யாரையும் உருவாக்கு, ஆனால் முதலை அல்ல என்ற புத்தகத்திலிருந்து! Orsag Mihai மூலம்

அணில் பற்றி என்ன? அறுபதுகளில், நான் மீண்டும் மீண்டும் வீட்டில் அணில்களை வைத்திருக்க முயற்சித்தேன், ஆனால் அத்தகைய ஒவ்வொரு முயற்சியும் மிகவும் சோகமான வழியில் முடிந்தது. சிறிது நேரம் கழித்து, அணில்கள் வலுவிழந்தன, அவற்றின் பின்னங்கால்கள் எடுக்கப்பட்டன மற்றும் துரதிர்ஷ்டவசமான விலங்குகள் வலிப்புத்தாக்கத்தில் இறந்தன. முதலில் ஐ

The Human Genome: An Encyclopedia Written in Four Letters என்ற புத்தகத்திலிருந்து நூலாசிரியர்

மனித ஜீனோம் புத்தகத்திலிருந்து [என்சைக்ளோபீடியா நான்கு எழுத்துக்களில் எழுதப்பட்டுள்ளது] நூலாசிரியர் டரான்டுல் வியாசஸ்லாவ் சல்மானோவிச்

அனைத்து மரபணுக்களும் புரதங்களை குறியாக்கம் செய்வதில்லை முதலில், மரபணு குறியீட்டு புரதங்களுடன் கூடுதலாக, மரபணுவில் ஆர்என்ஏவை ஒருங்கிணைக்கும் மரபணுக்களும் உள்ளன, அவை எம்ஆர்என்ஏ அல்ல (அதாவது புரதங்களை குறியாக்கம் செய்யாது), ஆனால் பல சுயாதீனமான செயல்களைச் செய்கின்றன. உயிரணுக்களில் முக்கியமான செயல்பாடுகள். IN

வாழும் கடிகாரம் புத்தகத்திலிருந்து வார்டு ரிச்சி மூலம்

11. ஒரு சக்கரத்தில் அணில் வாழ்க்கை கடிகாரங்களின் பிரச்சனைக்கு தீர்வுக்கான நவீன தேடலைப் பற்றி தெரிந்துகொள்ள, சமீபத்திய ஆண்டுகளில் உயிரியலாளர்கள் நடத்திய ஆராய்ச்சிக்கு திரும்புவோம். முதல், ஒருவேளை, பாட்ரிசியா டி கோர்சி வேலை, 1955 இல், டி கோர்சி டிப்ளோமா பெற்றார்

உயிரியல் புத்தகத்திலிருந்து [ஒருங்கிணைந்த மாநிலத் தேர்வுக்குத் தயாராவதற்கான முழுமையான குறிப்பு புத்தகம்] நூலாசிரியர் லெர்னர் ஜார்ஜி இசகோவிச்

Blood: River of Life [பண்டைய புனைவுகள் முதல் அறிவியல் கண்டுபிடிப்புகள் வரை] ஐசக் அசிமோவ் மூலம்

அத்தியாயம் 11 இந்த மொபைல் புரோட்டீன்கள் முந்தைய அத்தியாயத்தின் தொடக்கத்தில், உணவின் கரிம கூறுகள் மூன்று குழுக்களாக பிரிக்கப்பட்டுள்ளன என்று குறிப்பிட்டேன். நான் இந்த குழுக்களில் ஒன்றைப் பற்றி பேசினேன்: கார்போஹைட்ரேட்டுகள். அடுத்து, புரதங்களுக்குச் செல்வது தர்க்கரீதியானதாக இருக்கும், ஏனென்றால் உடலில் அவற்றின் வளர்சிதை மாற்றம் இணையாக நிகழ்கிறது.

லாஜிக் ஆஃப் சான்ஸ் புத்தகத்திலிருந்து [உயிரியல் பரிணாம வளர்ச்சியின் தன்மை மற்றும் தோற்றம் குறித்து] நூலாசிரியர் குனின் எவ்ஜெனி விக்டோரோவிச்

அத்தியாயம் 12 வாழ்வின் தோற்றம். மொழிபெயர்ப்பு, பிரதி, வளர்சிதை மாற்றம் மற்றும் சவ்வுகளின் தோற்றம்: உயிரியல், புவி வேதியியல் மற்றும் அண்டவியல் அணுகுமுறைகள் டிரான்ஸ். A. Neizvestny முந்தைய அத்தியாயத்தில் செல்கள் தோன்றுவதற்கான சாத்தியமான காட்சிகளைப் பற்றி விவாதித்தோம் மற்றும் (நம்பிக்கையுடன்) அடையப்பட்டது

மரபணுக்கள் மற்றும் உடலின் வளர்ச்சி புத்தகத்திலிருந்து நூலாசிரியர் நெய்ஃபாக் அலெக்சாண்டர் அலெக்ஸாண்ட்ரோவிச்

2. குரோமாடின் புரதங்கள் குரோமாடின் டிஎன்ஏ மற்றும் ஹிஸ்டோன்களை சம எடை அளவு மற்றும் ஹிஸ்டோன் அல்லாத புரதங்கள் (எச்பிபி) கொண்டுள்ளது என்பதை நாம் ஏற்கனவே அறிவோம், இதில் குரோமோசோமின் செயலற்ற பகுதிகளில் 0.2 டிஎன்ஏ எடைகள் மட்டுமே உள்ளன, மேலும் செயலில் உள்ள பகுதிகளில் - 1.2 க்கும் அதிகமானவை. (சராசரியாக என்ஜிபி டிஎன்ஏவை விட சிறியது). ஹிஸ்டோன்கள் என்பதையும் நாம் அறிவோம்

விலங்கு உலகம் புத்தகத்திலிருந்து நூலாசிரியர் சிட்னிகோவ் விட்டலி பாவ்லோவிச்

உயிர்க்கோளத்தின் தற்போதைய நிலை மற்றும் சுற்றுச்சூழல் கொள்கை புத்தகத்திலிருந்து எழுத்தாளர் கோல்ஸ்னிக் யூ.

4.1 சவ்வுகளின் உருவாக்கம், நவீன உயிரினங்களின் பிரம்மாண்டமான பன்முகத்தன்மையைக் கருத்தில் கொண்டு, நினைவுச்சின்ன வாழ்க்கை வடிவங்களிலிருந்து பல வளர்ச்சி பாதைகள் இருந்தன என்ற முடிவுக்கு வரலாம். உண்மையில், மூலக்கூறு பரிணாம வளர்ச்சி பற்றிய ஆய்வு

மனித பரம்பரையின் ரகசியங்கள் புத்தகத்திலிருந்து நூலாசிரியர் அஃபோன்கின் செர்ஜி யூரிவிச்

உயிரணுக்கள், புரதங்கள் மற்றும் மரபணுக்கள் வாழ்க்கை என்பது புரத உடல்கள் இருப்பதற்கான ஒரு வழியாகும். எஃப். ஏங்கெல்ஸ் நமது உடல் உயிரணுக்களின் பேரரசு ஆகும், அவை ஒவ்வொன்றும் புரதங்களின் உற்பத்திக்கான ஒரு சிறிய தொழிற்சாலை. இந்த அத்தியாவசிய மேக்ரோமிகுலூக்கள் பல உடலில் இருந்து வெளியேற்றப்படலாம்

மானுடவியல் மற்றும் உயிரியலின் கருத்துக்கள் புத்தகத்திலிருந்து நூலாசிரியர் குர்ச்சனோவ் நிகோலாய் அனடோலிவிச்

புரதங்கள் உயிரினங்களின் வாழ்க்கையில் புரதங்கள் மிக முக்கியமானவை. உயிரினங்களின் மகத்தான பன்முகத்தன்மை பெரும்பாலும் அவற்றின் உடலில் இருக்கும் புரதங்களின் கலவையில் உள்ள வேறுபாடுகளால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, அவற்றில் 5 மில்லியனுக்கும் அதிகமான புரதங்கள் மனித உடலில் அறியப்படுகின்றன, அவை பாலிமர்கள்.

உயிரியல் வேதியியல் புத்தகத்திலிருந்து நூலாசிரியர் Lelevich Vladimir Valeryanovich

சவ்வுகளின் வேதியியல் கலவை. சவ்வுகள் லிப்பிட் மற்றும் புரத மூலக்கூறுகளால் ஆனவை, அவற்றின் ஒப்பீட்டு அளவுகள் வெவ்வேறு சவ்வுகளில் பரவலாக வேறுபடுகின்றன. கார்போஹைட்ரேட்டுகள் கிளைகோபுரோட்டின்கள், கிளைகோலிப்பிட்கள் மற்றும் சவ்வு பொருட்களில் 0.5% -10% வரை உள்ளன. திரவ மொசைக் படி

ஆசிரியரின் புத்தகத்திலிருந்து

சவ்வு கொழுப்புகள். மெம்பிரேன் லிப்பிடுகள் ஆம்பிஃபிலிக் மூலக்கூறுகள், அதாவது. மூலக்கூறு ஹைட்ரோஃபிலிக் குழுக்கள் (துருவ தலைகள்) மற்றும் அலிபாடிக் ரேடிக்கல்கள் (ஹைட்ரோபோபிக் வால்கள்) ஆகிய இரண்டையும் கொண்டுள்ளது, அவை தன்னிச்சையாக ஒரு இரு அடுக்கை உருவாக்குகின்றன, இதில் லிப்பிட்களின் வால்கள் ஒருவருக்கொருவர் எதிர்கொள்ளும். தடிமன்

ஆசிரியரின் புத்தகத்திலிருந்து

புரதங்கள் புரதத்தின் ஊட்டச்சத்து மதிப்பு அத்தியாவசிய அமினோ அமிலங்கள் இருப்பதால் உறுதி செய்யப்படுகிறது, ஹைட்ரோகார்பன் எலும்புக்கூடுகள் மனித உடலில் ஒருங்கிணைக்க முடியாது, அதன்படி அவை உணவுடன் வழங்கப்பட வேண்டும். அவை நைட்ரஜனின் முக்கிய ஆதாரங்களாகவும் உள்ளன. தினசரி கொடுப்பனவு

ஆசிரியரின் புத்தகத்திலிருந்து

தசை திசு புரதங்கள் புரதங்களில் மூன்று குழுக்கள் உள்ளன: 1. myofibrillar புரதங்கள் - 45%;2. சர்கோபிளாஸ்மிக் புரதங்கள் - 35%;3. ஸ்ட்ரோமல் புரதங்கள் - 20% இந்த குழுவில் அடங்கும்: 1. மயோசின்; 2. ஆக்டின்;3. ஆக்டோமயோசின் மற்றும் ஒழுங்குமுறை புரதங்கள் என்று அழைக்கப்படுபவை: 4. ட்ரோபோமயோசின்;5.

வகைப்பாடு

சவ்வு புரதங்களை இடவியல் அல்லது உயிர்வேதியியல் கொள்கைகளின்படி வகைப்படுத்தலாம். இடவியல் வகைப்பாடு லிப்பிட் பைலேயருடன் தொடர்புடைய புரதத்தின் உள்ளூர்மயமாக்கலை அடிப்படையாகக் கொண்டது. உயிர்வேதியியல் வகைப்பாடு சவ்வுடன் புரதத்தின் தொடர்புகளின் வலிமையை அடிப்படையாகக் கொண்டது.

பாலிடோபிக் புரதங்களின் பல்வேறு வகைகள். சவ்வு பிணைப்பு காரணமாக (1) ஒரு ஒற்றை டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் ஆல்பா ஹெலிக்ஸ், (2) பல டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் ஆல்பா ஹெலிஸ்கள், (3) ஒரு பீட்டா-ஷீட் அமைப்பு.

ஒருங்கிணைந்த மோனோடோபிக் புரதங்களின் பல்வேறு வகைகள். (1) சவ்வின் விமானத்திற்கு இணையான ஒரு ஆம்பிபாடிக் ஆல்பா-ஹெலிக்ஸ், (2) ஒரு ஹைட்ரோபோபிக் லூப், (3) ஒரு கோவலன்ட்லி இணைக்கப்பட்ட கொழுப்பு அமில எச்சம், (4) மின்னியல் தொடர்பு (நேரடி அல்லது கால்சியம்-மத்தியஸ்தம்) காரணமாக சவ்வுடன் பிணைப்பு )

இடவியல் வகைப்பாடு

சவ்வு தொடர்பாக, சவ்வு புரதங்கள் பாலி- மற்றும் மோனோடோபிக் என பிரிக்கப்படுகின்றன.

  • பாலிடோபிக், அல்லது டிரான்ஸ்மேம்பிரேன், புரதங்கள்சவ்வுக்குள் முழுமையாக ஊடுருவி, லிப்பிட் பைலேயரின் இரு பக்கங்களுடனும் தொடர்பு கொள்கிறது. பொதுவாக, ஒரு புரதத்தின் டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் துண்டு என்பது ஹைட்ரோபோபிக் அமினோ அமிலங்களைக் கொண்ட ஆல்பா ஹெலிக்ஸ் ஆகும் (ஒருவேளை 1 முதல் 20 துண்டுகள் வரை இருக்கலாம்). பாக்டீரியாவிலும், மைட்டோகாண்ட்ரியா மற்றும் குளோரோபிளாஸ்ட்களிலும், டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் துண்டுகளை பீட்டா-ஷீட் அமைப்பாக ஒழுங்கமைக்க முடியும் (பாலிபெப்டைட் சங்கிலியின் 8 முதல் 22 திருப்பங்கள் வரை).
  • ஒருங்கிணைந்த மோனோடோபிக் புரதங்கள்லிப்பிட் பைலேயரில் நிரந்தரமாக உட்பொதிக்கப்பட்டுள்ளது, ஆனால் எதிர் பக்கத்தில் ஊடுருவாமல், ஒரு பக்கத்தில் மட்டுமே சவ்வுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது.

உயிர்வேதியியல் வகைப்பாடு

உயிர்வேதியியல் வகைப்பாட்டின் படி, சவ்வு புரதங்கள் பிரிக்கப்படுகின்றன ஒருங்கிணைந்தமற்றும் புற.

  • ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்கள்மென்படலத்தில் உறுதியாக பதிக்கப்பட்டுள்ளது மற்றும் சவர்க்காரம் அல்லது துருவமற்ற கரைப்பான்களின் உதவியுடன் மட்டுமே கொழுப்பு சூழலில் இருந்து அகற்ற முடியும். லிப்பிட் பைலேயர் தொடர்பாக, ஒருங்கிணைந்த புரதங்கள் டிரான்ஸ்மெம்பிரேன் பாலிடோபிக் அல்லது ஒருங்கிணைந்த மோனோடோபிக் ஆக இருக்கலாம்.
  • புற சவ்வு புரதங்கள்மோனோடோபிக் புரதங்கள். அவை லிப்பிட் சவ்வுடன் பலவீனமாக பிணைக்கப்பட்டுள்ளன அல்லது ஹைட்ரோபோபிக், எலக்ட்ரோஸ்டேடிக் அல்லது பிற கோவலன்ட் அல்லாத சக்திகளின் காரணமாக ஒருங்கிணைந்த புரதங்களுடன் தொடர்புடையவை. எனவே, ஒருங்கிணைந்த புரதங்களைப் போலல்லாமல், அவை பொருத்தமான அக்வஸ் கரைசலுடன் (எ.கா., குறைந்த அல்லது அதிக pH, அதிக உப்பு செறிவு அல்லது ஒரு குழப்பமான முகவர்) சிகிச்சையின் போது சவ்வுகளிலிருந்து பிரிகின்றன. இந்த விலகலுக்கு சவ்வு இடையூறு தேவையில்லை.

கொழுப்பு அமிலம் அல்லது ப்ரீனைல் எச்சங்கள் அல்லது கிளைகோசைல்பாஸ்பாடிடைலினோசிட்டால் புரதத்துடன் இணைக்கப்பட்டதால், அவற்றின் மொழிபெயர்ப்புக்குப் பிந்தைய மாற்றத்தின் போது சவ்வு புரதங்கள் சவ்வுக்குள் ஒருங்கிணைக்கப்படலாம்.

இணைப்புகள்


விக்கிமீடியா அறக்கட்டளை. 2010.

: பண்புகள் மற்றும் கட்டமைப்பு கொள்கைகள்

1. சவ்வு புரதங்களின் அமைப்பு

சவ்வுகளில் லிப்பிட்களின் முக்கிய பங்கு இரு அடுக்கு கட்டமைப்பை உறுதிப்படுத்துவதாகும், மேலும் புரதங்கள் பயோமெம்பிரேன்களின் செயலில் உள்ள கூறுகளாகும். சவ்வு புரதங்களின் கட்டமைப்பு அம்சங்களை தெளிவுபடுத்துவதில் பயனுள்ளதாக நிரூபிக்கப்பட்ட சில கொள்கைகளை நாங்கள் விவாதிப்போம். இந்த கொள்கைகளை விளக்குவதற்கு நாங்கள் எடுத்துக்காட்டுகளைத் தருவோம்.

சவ்வு வளர்ச்சியின் விடியலில், சவ்வு புரதங்கள் அவற்றின் கட்டமைப்பில் மிகவும் ஒரே மாதிரியானவை என்று நம்பப்பட்டது மற்றும் இரு அடுக்குகளின் மேற்பரப்பில் 3 அடுக்குகளின் வடிவத்தில் போடப்பட்டது. குறைந்த பட்சம் டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் புரதங்களுக்கு, சவ்வில் மூழ்கியிருக்கும் அந்த பாகங்களில் α- ஹெலிஸ்கள் உள்ளன என்று இப்போது நாம் நம்புகிறோம். நிச்சயமாக, இந்த விஷயத்தில் சில தெளிவற்ற முடிவுகளை எடுக்க விரும்புகிறேன், ஆனால் அவை உண்மையான தரவுகளின் அடிப்படையில் இருக்க வேண்டும். கரையக்கூடிய புரதங்களின் மகத்தான கட்டமைப்பு பன்முகத்தன்மையை எதிர்கொண்டு, ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்கள் நாம் தற்போது கற்பனை செய்வதை விட மிகவும் சிக்கலானதாக இருக்கலாம் என்ற முடிவுக்கு வரலாம். 100 க்கும் மேற்பட்ட வெவ்வேறு புரதங்களின் கட்டமைப்புகள் உயர் தெளிவுத்திறனில் தீர்மானிக்கப்பட்ட பின்னரே கட்டமைப்பின் வகை மூலம் கரையக்கூடிய புரதங்களின் வகைப்பாடு மேற்கொள்ளப்பட்டது. டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் புரதங்களைப் பொறுத்தவரை, இது ஒரு வழக்கில் மட்டுமே செய்யப்பட்டது - பாக்டீரியாவின் ஒளிச்சேர்க்கை எதிர்வினை மையத்தின் புரதத்திற்கு. பாக்டீரியோஹோடோப்சின் கட்டமைப்பில் குறைந்த தெளிவுத்திறன் கொண்ட எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி தரவுகளுடன், மற்ற பெரும்பாலான டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் புரதங்களுக்கான மாதிரிகளை அடிப்படையாகக் கொண்ட ஒரே ஆதாரம் இதுதான்.

மற்றொரு முக்கியமான விஷயம் சவ்வுக்கு புரதங்களை இணைக்கும் முறைகள். அவை படத்தில் திட்டவட்டமாக காட்டப்பட்டுள்ளன. 3.1

1. பைலேயரில் மூழ்கியிருக்கும் புரதங்களுடன் பிணைத்தல். எடுத்துக்காட்டுகளில் H + -ATPase இன் Fi பகுதி அடங்கும், இது மென்படலத்தில் பதிக்கப்பட்ட Fo பகுதியுடன் பிணைக்கிறது; சில சைட்டோஸ்கெலிட்டல் புரதங்களும் குறிப்பிடப்படலாம்.

2. இரு அடுக்கு மேற்பரப்பில் பிணைத்தல். இந்த தொடர்பு முதன்மையாக மின்னியல் அல்லது ஹைட்ரோபோபிக் இயல்புடையது. சில சவ்வு புரதங்களின் மேற்பரப்பில் இரண்டாம் நிலை அல்லது மூன்றாம் நிலை கட்டமைப்பின் அம்சங்களால் உருவாக்கப்பட்ட ஹைட்ரோபோபிக் டொமைன்கள் உள்ளன. இந்த மேற்பரப்பு இடைவினைகள் டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் நங்கூரம் போன்ற பிற இடைவினைகளுடன் கூடுதலாகப் பயன்படுத்தப்படலாம்.

3. ஹைட்ரோபோபிக் "நங்கூரம்" பயன்படுத்தி பிணைத்தல்; இந்த அமைப்பு பொதுவாக துருவமற்ற அமினோ அமில எச்சங்களின் வரிசையாக வெளிப்படுத்தப்படுகிறது. சில சவ்வு புரதங்கள் இணை பிணைக்கப்பட்ட கொழுப்பு அமிலங்கள் அல்லது பாஸ்போலிப்பிட்களை நங்கூரங்களாகப் பயன்படுத்துகின்றன.

4. டிரான்ஸ்மேம்பிரேன் புரதங்கள். அவர்களில் சிலர் மென்படலத்தை ஒரு முறை மட்டுமே கடக்கின்றனர், மற்றவர்கள் பல முறை.

வெளிப்புற மற்றும் உள் சவ்வு புரதங்களுக்கிடையேயான வேறுபாடுகள் இரு அடுக்குடன் இணைக்கும் முறையைத் தனித்துவமாகத் தீர்மானிக்கவில்லை; இந்த வேறுபாடுகள் அவற்றின் பிணைப்பின் ஒப்பீட்டு வலிமையை மட்டுமே தீர்மானிக்கின்றன.


2. சவ்வு புரதங்களின் சுத்திகரிப்பு

ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களை சுத்திகரிப்பதற்கும், உயிர்வேதியியல் ரீதியாக செயல்படும் வடிவத்தில் அவற்றைப் பெறுவதற்கும், புரதங்களை கரைத்து கரைசலில் பாதுகாக்க சவர்க்காரம் தேவைப்படுகிறது. அதனுடன் தொடர்புடைய சோப்பு தேவைகள் மற்றும் கையாளுதல் ஆகியவை புரதச் சுத்திகரிப்புகளில் பொதுவாக எதிர்கொள்ளும் சவால்களை விட கூடுதல் சவால்களை ஏற்படுத்துகின்றன. ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களை தனிமைப்படுத்த பல குறிப்பிட்ட முறைகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன, ஆனால் பெரும்பாலான சுத்திகரிப்பு திட்டங்கள் கரையக்கூடிய புரதங்களுக்கு பயன்படுத்தப்படும் அதே குரோமடோகிராஃபிக் மற்றும் ஹைட்ரோடினமிக் நுட்பங்களை அடிப்படையாகக் கொண்டவை. இது DEAE-செல்லுலோஸ், செபரோஸ் அல்லது ஹைட்ராக்சில்-படைட், ஜெல் வடிகட்டுதல், சுக்ரோஸ் அடர்த்தி சாய்வில் மையவிலக்கு போன்றவற்றின் குரோமடோகிராபி ஆகும். சவர்க்காரத்தின் சரியான தேர்வு மிகவும் முக்கியமானது, ஏனெனில் இது உயிரியக்கத்தை அழிக்கும் சோப்பு, லிப்பிடுகளின் இடத்தைப் பெறுகிறது. ஒரு குறிப்பிட்ட புரதத்தைச் சுற்றி, கரைசலில் உள்ள புரதத்தின் நிலைத்தன்மையைத் தீர்மானிக்கிறது. சவர்க்காரங்களின் செயல்பாட்டின் வழிமுறைகள் மதிப்பாய்வில் விவாதிக்கப்படுகின்றன.

2.1. சவர்க்காரம்

கடந்த இரண்டு தசாப்தங்களாக, ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களின் சுத்திகரிப்புக்கு ஏற்ற சவர்க்காரங்கள் அதிக எண்ணிக்கையில் கிடைக்கின்றன. கொள்கையளவில், சவ்வு புரதங்களின் இரண்டாம் நிலை மற்றும் மூன்றாம் நிலை கட்டமைப்புகளை சீர்குலைக்காத ஒரு சவர்க்காரத்தை கண்டுபிடிக்க முயற்சிக்க வேண்டும், ஆனால் புரத மூலக்கூறின் ஹைட்ரோபோபிக் பகுதிகளுடன் தொடர்புள்ள பெரும்பாலான அல்லது அனைத்து சவ்வு லிப்பிட்களை மட்டுமே மாற்றும். கரையாதலின் இறுதி இலக்கு புரதத்தை ஒரு சோப்பு மைக்கேலில் சேர்ப்பதாகும்; அத்தகைய புரோட்டீன்-சோப்பு வளாகங்களை பிரிப்பதே அடுத்தடுத்த சுத்திகரிப்பு உத்தி.

முதல் சிக்கல் ஆய்வு செய்யப்படும் புரதத்தின் கரைதிறன் உகந்த நிலைமைகளின் தேர்வு ஆகும். இந்த நுட்பமான பணிக்கு புரதத்தை குறைக்கும் சவர்க்காரம் ஏற்றது அல்ல. மறுபுறம், பல சவர்க்காரம் சவ்வுகளை திறம்பட சீர்குலைக்காது மற்றும் புரதம் கொண்ட கலப்பு மைக்கேல்களை உருவாக்குகிறது. இத்தகைய சவர்க்காரங்கள் சவ்வு கொழுப்புகளுடன் திறம்பட கலக்க முடியாத அளவுக்கு ஹைட்ரோபோபிக் அல்லது மிகவும் ஹைட்ரோஃபிலிக் ஆக இருக்கலாம் மற்றும் அவற்றின் செறிவு போதுமான அளவு அதிகமாக இருந்தால், இரு அடுக்கை குளோபுலர் கலப்பு மைக்கேல்களாக மாற்றும். முதலில், ஹைட்ரோஃபிலிக்-லிபோபிலிக் பேலன்ஸ் எனப்படும் ஒற்றை அளவுருவைப் பயன்படுத்தி தேவையான சவர்க்காரத்தின் தேர்வு முறைப்படுத்தப்படலாம் என்று நம்பப்பட்டது. இந்த அளவுரு, 1 முதல் 20 வரை மாறுபடும், இது சார்பக்டான்ட்களின் தயாரிப்பில் தொடர்புடைய ஹைட்ரோபோபிசிட்டியின் அளவீடாக பயன்படுத்தப்படுகிறது. உண்மையில், சில தொடர்புகள் பெறப்பட்டுள்ளன, அதிலிருந்து சவர்க்காரத்தின் HLB மதிப்பை உயிரியல் அமைப்புகளில் அதன் நடத்தையை கணிக்க பயன்படுத்தலாம். பொதுவாக, 12.5 முதல் 14.5 வரையிலான HLB மதிப்பைக் கொண்ட சவர்க்காரங்கள் ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களுக்கு மிகவும் பயனுள்ள கரைப்பான்கள் என்று கூறலாம். எவ்வாறாயினும், ஒரு குறிப்பிட்ட சவ்வு புரதத்திற்கான உகந்த சவர்க்காரங்களைத் தேடுவதற்கு பல காரணிகளை கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ள வேண்டும் மற்றும் எப்போதும் அனுபவ சோதனையுடன் இருக்க வேண்டும் என்பது பின்னர் தெளிவாகியது. பின்வருவனவற்றைக் கருத்தில் கொள்ள வேண்டும்.

1.ஆய்வின் கீழ் உள்ள புரதத்தின் அதிகபட்ச கரைதிறன். இந்த அளவுகோல் மையவிலக்குக்குப் பிறகு புரதத்தை சூப்பர்நேட்டண்டிற்கு மாற்றுவதாகும், இதன் போது சவ்வு படிவுகள்.

2.விரும்பிய வடிவத்தில் புரதத்தை கரைத்தல். வழக்கமாக நாம் அதன் நொதி செயல்பாட்டைப் பாதுகாப்பதைப் பற்றி பேசுகிறோம், ஆனால் சில நேரங்களில் சில நிறமாலை பண்புகள் அல்லது குறிப்பிட்ட புரத கூட்டாளிகளின் இருப்பு பயன்படுத்தப்படுகிறது. கூடுதலாக, கரைதிறன் பிறகு புரத நிலைத்தன்மை ஒரு முன்நிபந்தனை ஆகும். சில சமயங்களில், உயிர்வேதியியல் செயல்பாட்டைப் பராமரிக்க சவர்க்காரத்துடன் வெளிப்புற பாஸ்போலிப்பிட்கள் சேர்க்கப்படுகின்றன. ஈ. கோலை லாக்டோஸ் பெர்மீஸ் மற்றும் சோடியம் சேனல் புரதம் உற்பத்தி ஒரு உதாரணம். கரைதிறன் பிறகு புரதத்தை நிலைப்படுத்த சில சமயங்களில் கிளிசரால் அல்லது வேறு பாலியோல் சேர்க்கப்படுகிறது. புரோட்டீஸ் தடுப்பான்களைப் பயன்படுத்துவதும் அவற்றின் புரோட்டியோலிடிக் சிதைவின் வாய்ப்பைக் குறைக்கும் நிலைமைகளின் கீழ் கரைதிறனை மேற்கொள்வதும் அர்த்தமுள்ளதாக இருக்கிறது.

3. இந்த நுட்பத்தில் சோப்பு பயன்படுத்துவதற்கான சாத்தியம். சவர்க்காரத்தின் கட்டணம், கொடுக்கப்பட்ட pH மதிப்பில் உள்ள நடத்தை, CMC மற்றும் சோப்பு மைக்கேல்களின் அளவு ஆகியவற்றை கணக்கில் எடுத்துக்கொள்வது முதலில் அவசியம். பிந்தைய பண்புகள் குறிப்பாக முக்கியம். பெரிய மைக்கேல்களை உருவாக்கும் குறைந்த CMC சவர்க்காரம் டயாலிசிஸ் அல்லது அல்ட்ராஃபில்ட்ரேஷன் மூலம் அகற்றப்படுவதில்லை, ஏனெனில் சோப்பு மோனோமர்களின் செறிவு மிகவும் குறைவாக உள்ளது. நடைமுறைச் சொற்களில், அல்ட்ராஃபில்ட்ரேஷன் மூலம் புரதம் செறிவூட்டப்பட்டால், குறைந்த CMC டிடர்ஜெண்டின் செறிவும் அதிகரிக்கும், இது புரதக் குறைப்புக்கு வழிவகுக்கும். இந்த காரணத்திற்காக, பல ஆராய்ச்சியாளர்கள் ஆக்டைல் ​​குளுக்கோசைடு, பித்த உப்புகள் அல்லது நவீன ஸ்விட்டெரியோனிக் சவர்க்காரம் போன்ற உயர் CMCகளுடன் சவர்க்காரங்களைப் பயன்படுத்த விரும்புகிறார்கள். Biobidz SM-2 போன்ற பாலிஸ்டிரீன் ரெசின்கள் மிகவும் மதிப்புமிக்கவை. அவை டிரைட்டான் எக்ஸ்-100 போன்ற சவர்க்காரங்களைத் தேர்ந்தெடுத்துப் பிணைத்து, கரைசலில் இருந்து அகற்றி, முழுவதுமாக டயாலிசிஸ் இல்லாமல் செய்வதை சாத்தியமாக்குகின்றன. கருத்தில் கொள்ள வேண்டிய மற்றொரு காரணி சவர்க்காரத்தின் ஒளி உறிஞ்சுதல் ஆகும். ட்ரைடன் X-100 போன்ற சில சவர்க்காரங்கள், UVக்கு அருகில் உள்ள பகுதியில் உறிஞ்சி, 280 nm இல் உறிஞ்சுதலை அளவிடுவதன் மூலம் புரதச் செறிவைக் கண்டறிய இயலாது.

இந்த அனைத்து காரணிகளையும் கணக்கில் எடுத்துக் கொண்டால், பல சந்தர்ப்பங்களில் ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களை தனிமைப்படுத்தும் போது வெவ்வேறு சவர்க்காரங்களைப் பயன்படுத்துவது ஏன் என்பது தெளிவாகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, டிரைட்டான் எக்ஸ்-100 கரைதிறனைப் பயன்படுத்தலாம், ஆனால் DEAE-செல்லுலோஸுடன் பிரிப்பது ஆக்டைல் ​​குளுக்கோசைட்டின் முன்னிலையில் சிறப்பாகச் செய்யப்படுகிறது. சவர்க்காரங்களை க்ரோமடோகிராபி கட்டத்தில், அடர்த்தி சாய்வு மையவிலக்கலின் போது மற்றும் சில சமயங்களில் டயாலிசிஸ் மூலம் மாற்றலாம். ஒரு குறிப்பிட்ட புரதத்தைக் கரைப்பதற்குப் பொருத்தமற்ற ஒரு சவர்க்காரம், சோப்பு மாற்றத்திற்குப் பிறகு கரைசலில் புரதத்தை பராமரிப்பதில் மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும் என்பதை நினைவில் கொள்ள வேண்டும். சுத்திகரிப்பு எப்போதும் கரைசலில் அதிகப்படியான சோப்பு மூலம் மேற்கொள்ளப்பட வேண்டும், இல்லையெனில் சமநிலை புரத-சோப்பு வளாகங்களை உருவாக்குவதை விட சவ்வு புரதங்களின் ஒருங்கிணைப்பை நோக்கி மாற்றப்படும். சில சந்தர்ப்பங்களில், அத்தகைய திரட்டல் விரும்பத்தக்கதாக இருக்கலாம், மேலும் இறுதி சுத்திகரிப்பு படி சவர்க்காரத்தை அகற்றுவதாக இருக்கலாம். ஆனால், ஒரு விதியாக, சவர்க்காரம் இல்லாததால், மீளமுடியாத மழைப்பொழிவு மற்றும் புரத இழப்பு ஏற்படுகிறது.

ஒரு குறிப்பிட்ட மட்டத்தில் சோப்பு செறிவை பராமரிக்க வேண்டிய அவசியம், புரதச் சுத்திகரிப்புக்கு பொதுவாக எதிர்கொள்ளும் சிரமங்களைத் தாண்டி கூடுதல் சிரமங்களை உருவாக்குகிறது; அவற்றில் சிலவற்றைப் பற்றி நாங்கள் ஏற்கனவே பேசினோம். அம்மோனியம் சல்பேட்டின் அதிக செறிவுகளில் நிலையான உப்பிடுதல் முறையைப் பயன்படுத்தும் போது சிக்கல்களும் எழுகின்றன: பல சந்தர்ப்பங்களில், புரதம் சவர்க்காரம் மற்றும் லிப்பிடுடன் இணைந்து துரிதப்படுத்தப்படுகிறது. உப்புக் கரைசல் அதிக அடர்த்தியைக் கொண்டிருப்பதாலும், மொத்தத்தில் உள்ள சவர்க்காரம் ஒப்பீட்டளவில் குறைவாக இருப்பதாலும், மையவிலக்கு செய்யும் போது வீழ்படிவு மேற்பரப்பில் இருக்கும். புரத-சோப்பு வளாகங்கள் சுத்திகரிப்புக்கு உட்பட்டவை என்பதை நினைவில் கொள்வது அவசியம், பெரும்பாலும் கணிசமான அளவு பிணைக்கப்பட்ட பாஸ்போலிப்பிட். இது குரோமடோகிராஃபியின் போது பிரித்தலின் தரத்தையும், இறுதி சார்பு-கரையக்கூடிய புரதங்களின் குணாதிசயங்களின் முடிவுகளையும் பாதிக்கிறது, பாலிபெப்டைட் துணைக்குழுக்களின் எண்ணிக்கை மற்றும் மூலக்கூறு எடை, அவற்றின் ஸ்டோச்சியோமெட்ரி, அளவு மற்றும், சாத்தியமான வடிவத்தை தீர்மானிக்க வேண்டியது அவசியம்; மூலக்கூறு, அத்துடன், தேவைப்பட்டால், உயிர்வேதியியல் செயல்பாடு.


சவர்க்காரம் 1

அட்டவணையில் அட்டவணைகள் 1 மற்றும் 2 மிகவும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் சவர்க்காரங்களைப் பட்டியலிடுகின்றன மற்றும் அவற்றின் பண்புகளைக் குறிப்பிடுகின்றன, அவை நாம் விவாதிக்கும் சிக்கல்களுக்கு முக்கியமானவை. அனுபவ ரீதியாக, மிகவும் பயனுள்ளவை: 1) அயனி அல்லாத சவர்க்காரம் (டிரைடன் எக்ஸ்-100, ஆக்டைல் ​​குளுக்கோசைடு); 2) பித்த உப்புகள் (சோலேட், டிஆக்ஸிகோலேட்); 3) zwitterionic detergents (CHAPS, zvnttergent). ஆனால் ஒரு குறிப்பிட்ட சவ்வு நொதியை கரைத்து சுத்திகரிக்க மிகவும் பொருத்தமான சவர்க்காரத்தைத் தேர்ந்தெடுப்பது இன்னும் சோதனை மற்றும் பிழையின் விஷயம்.

சி.எம்.சி., எம்.எம் மோல் எடை 1 அளவு A mncella .தொகுதி எண் x குறிப்பிட்ட அளவு, ml/g இணைப்புகள்
டோலிசில் சல்பேட் 1,33 288 24 500 85 0,864
சோடியம்
சோடியம் சோலேட்" 3 408 2100 5 0,778 (612, 1383]
டிஆக்ஸிகோலேட் 0,91 392 23 000 55 0,771
சோடியம்"
0,11 538 68 000 12 0,973
டிரிடோய் எக்ஸ்-100 2) 0,24 628 90 000 140 0,908
இரட்டை 80 2) 0,012 1300 76 000 60 0,8%
லாரில்டிமெதில்- 2,2 229 17 000 75 1,112 |612]
அமீன் ஆக்சைடு
^-டி-ஆக்டைல்- 25 293 8000 27 0,820
^-டி-லாரில்- 0,16 510 50 000 98 0,820
மால்டோசைடு
அத்தியாயங்கள் 8 615 6150 10 0,802
Zwittergeit 3,6 335 - - 0,957

3. சுத்திகரிக்கப்பட்ட ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களின் பண்புகள்

சுத்திகரிக்கப்பட்ட சவ்வு புரதங்களின் சிறப்பியல்பு, எளிமையானவை கூட சவாலாக இருக்கலாம். வழக்கில் என

3.1 துணை உறுப்புகளின் மூலக்கூறு எடை

சோடியம் டோடெசில் சல்பேட்டின் முன்னிலையில் பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் ஒரு பொதுவான நுட்பமாகும், ஆனால் ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களின் விஷயத்தில் இது சிறப்பு சிக்கல்களை ஏற்படுத்துகிறது. இந்த முறையில், டோடெசில் சல்பேட் பாலிபெப்டைட் சங்கிலிகளுடன் இணைக்கப்படுகிறது மற்றும் புரதம்-டிஎன்எஸ் வளாகங்கள் அவற்றின் ஸ்டோக்ஸ் ஆரத்தின் படி பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்லில் பிரிக்கப்படுகின்றன, இது பெரும்பாலான சந்தர்ப்பங்களில் மூலக்கூறு எடையைப் பொறுத்தது. கொடுக்கப்பட்ட சிக்கலான மற்றும் அறியப்பட்ட தரநிலையின் எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் இயக்கத்தை ஒப்பிடுவதன் மூலம் மூலக்கூறு நிறை தீர்மானிக்கப்படுகிறது. இருப்பினும், SDS ஐ அறியப்படாத புரதத்துடன் பிணைப்பது தரநிலைகளுக்கு பிணைப்பதில் இருந்து தரமான முறையில் வேறுபட்டதாக இருக்கலாம், பின்னர் தவறான முடிவு பெறப்படும். துருவமற்ற அமினோ அமில எச்சங்களின் அதிக உள்ளடக்கம் கொண்ட ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களுக்கும் இதேபோன்ற நிலைமை காணப்படுகிறது. SDS ஆனது 1 கிராம் புரதத்திற்கு 1.4 கிராம் SDS என்ற விகிதத்தில் மிகவும் கரையக்கூடிய புரதங்களைக் கொண்ட வளாகங்களை உருவாக்குகிறது, மேலும் அதிக சவர்க்காரம் அதிக அளவு துருவமற்ற எச்சங்களைக் கொண்ட புரதங்களுடன் பிணைக்க முடியும். இந்த வழக்கில் எழும் கூடுதல் எதிர்மறை கட்டணம் எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் இயக்கத்தில் அசாதாரண அதிகரிப்புக்கு வழிவகுக்கிறது, மேலும் தீர்மானிக்கப்பட்ட மூலக்கூறு எடை உண்மையில் இருப்பதை விட குறைவாக இருக்கும். மற்றொரு சூழ்நிலையும் சாத்தியமாகும். SDS உடன் பிணைக்கும் சவ்வு புரதம் முழுமையாக வெளிப்படாமல் போகலாம், இது மிகவும் கச்சிதமான புரதம்-SDS வளாகத்தை உருவாக்குவதன் காரணமாக எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் இயக்கத்தில் அசாதாரண அதிகரிப்புக்கு வழிவகுக்கும். இந்த விளைவுகள் அனைத்தும் மிகவும் குறிப்பிடத்தக்கவை. எடுத்துக்காட்டாக, லாக்டோஸ் ஊடுருவலில் ஒரு வெளிப்படையான மோல் உள்ளது. SDS முன்னிலையில் PAGE மூலம் அளவிடப்படும் போது நிறை 33,000; உண்மையில், மரபணு பகுப்பாய்வு முடிவுகள் காட்டுவது போல், அவர் கூறுகிறார். நிறை 46 000. பல சந்தர்ப்பங்களில், ஃபெர்குசன் ப்ளாட்டை உருவாக்குவதன் மூலம் மூலக்கூறு எடையை மிகவும் துல்லியமாக மதிப்பிட முடியும், இது நிலையான புரதங்கள் மற்றும் ஆய்வின் கீழ் உள்ள புரதம் ஆகிய இரண்டிற்கும் அக்ரிலாமைடு உள்ளடக்கத்தில் எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் இயக்கம் சார்ந்திருப்பதைக் குறிக்கிறது. இந்த வரைபடம் ஸ்டோக்ஸ் ஆரம் மற்றும், குறைந்த அளவிற்கு, வளாகத்தின் கட்டணத்தைப் பொறுத்தது. எடுத்துக்காட்டாக, 12% அக்ரிலாமைடு ஜெல்லில் உள்ள எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் முடிவுகளின்படி, ஈ.கோலியின் சைட்டோக்ரோம் ஓ காம்ப்ளக்ஸ் துணைக்குழுக்களில் ஒன்று வெளிப்படையான மூலக்கூறு எடையைக் கொண்டுள்ளது. நிறை 28,000, மற்றும் பெர்குசன் வரைபடத்திலிருந்து மதிப்பு 43,000 ஆகும், இது மோல் உடன் ஒத்துப்போகிறது. தொடர்புடைய டிஎன்ஏவின் வரிசைமுறை தரவுகளிலிருந்து கணக்கிடப்படும் நிறை.

மற்றொரு சிக்கல் குவாட்டர்னரி கட்டமைப்பின் சாத்தியமான இருப்பு ஆகும். சில சவ்வு புரதங்கள் SDS முன்னிலையில் கூட ஒருங்கிணைகின்றன. எடுத்துக்காட்டாக, கிளைகோபோரின் ஏ அல்லது பாக்டீரியோபேஜ் M13 இன் உறை புரதம் முக்கியமாக எஸ்டிஎஸ் உடன் பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்களில் எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் போது டைமர்களின் வடிவத்தில் காணப்படுகிறது. சில நேரங்களில் புரதம்-SDS கலவையை சூடாக்குவதன் மூலம் திரட்டுதல் மேலும் மேம்படுத்தப்படுகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, மைட்டோகாண்ட்ரியல் மற்றும் பாக்டீரியல் டெர்மினல் ஆக்சிடேஸ்கள் இரண்டின் துணைக்குழுக்களுக்கு இந்தப் படம் காணப்படுகிறது. மீளமுடியாமல் திரட்டும் புரதத்தின் திறனை மதிப்பிடுவதற்கு, சூடான மற்றும் சூடாக்கப்படாத மாதிரிகளுக்கு SDS உடன் பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்லில் எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் முடிவுகளின் ஒப்பீட்டு பகுப்பாய்வு மேற்கொள்ளப்பட வேண்டும். சவ்வு புரத சுத்திகரிப்புக்கு பயன்படுத்தப்படும் சவர்க்காரம் இருப்பதால் இதே போன்ற பிரச்சனை சில நேரங்களில் எழுகிறது. இந்த சவர்க்காரம் அகற்றப்பட்டு SDS உடன் மாற்றப்பட வேண்டும், ஏனெனில் சில சந்தர்ப்பங்களில் நொதி கரையக்கூடிய சவர்க்காரத்தின் முன்னிலையில் எலக்ட்ரோஃபோரெடிக் இயக்கத்தின் தெளிவான சார்பு உள்ளது.

எனவே, SDS-PAGE ஐப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்படும் அதிக துருவமற்ற ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களின் துணைக்குழுக்களின் மூலக்கூறு எடையின் மதிப்பீடு தவறாக இருக்கலாம் என்று நினைப்பதற்கு காரணம் உள்ளது. துரதிர்ஷ்டவசமாக, இந்த முறைக்கு எளிய மாற்று எதுவும் இல்லை, மேலும் சரியான மதிப்பு பெரும்பாலும் முழுமையான முதன்மை வரிசை தரவு அல்லது துல்லியமான ஹைட்ரோடினமிக் பகுப்பாய்வு மூலம் பெறப்படுகிறது.

3.2 ஹைட்ரோடைனமிக் முறைகளைப் பயன்படுத்தி பூர்வீக புரதத்தின் மூலக்கூறு எடையை தீர்மானித்தல்

சவ்வு புரதங்களுக்கு இந்த முறைகளைப் பயன்படுத்துவது சோப்பு பிணைப்பு காரணமாக சிரமங்கள் நிறைந்ததாக இருக்கும். இதை முழுமையாகப் பாராட்ட, முதலில் ஒரு எளிய கரையக்கூடிய புரதத்தைக் கருத்தில் கொள்வோம், அதற்காக மோல். SDS-PAGE ஐப் பயன்படுத்தி துணை அலகுகளின் நிறை மற்றும் அதன் கட்டுப்பாடற்ற, செயலில் உள்ள வடிவத்தில் என்ன என்பதைக் கண்டுபிடிப்பது அவசியம் - ஒரு மோனோமர், டைமர் அல்லது உயர் வரிசை ஒலிகோமர். ஜெல் வடிகட்டுதல், இது நிலையான புரதங்களுடன் ஒப்பிடுவதை உள்ளடக்கியது, புரதங்களின் மூலக்கூறு எடையை தீர்மானிக்க பெரும்பாலும் பயன்படுத்தப்படுகிறது; அனைத்து நிலையான புரதங்களும் ஒரு கோள வடிவத்தைக் கொண்டிருப்பதாலும், ஆய்வின் கீழ் உள்ள புரதம் கோளமாக இல்லாமல், சற்று நீளமாக இருப்பதாலும் இங்கு சிக்கல்கள் எழுகின்றன. mol உடன் அத்தகைய புரதம். 50,000 எடையுள்ளவை மோலுக்கு ஒத்த வேகத்தில் எலுட் செய்யலாம். மே

se 100 LLC. இது சம்பந்தமாக, ஜெல் வடிகட்டுதல் நெடுவரிசை ஸ்டோக்ஸ் ஆரம், அதாவது, "சமமான ஹைட்ரோடினமிக் கோளத்தின்" பரிமாணங்களுக்கு ஏற்ப அளவீடு செய்யப்பட வேண்டும், மேலும் கூடுதலாக, வேறு சில முறைகள் இணையாக பயன்படுத்தப்பட வேண்டும். பொதுவாக, வண்டல் வீதங்கள் பகுப்பாய்வு அல்ட்ரா சென்ட்ரிஃபிகேஷன் அல்லது சுக்ரோஸ் அடர்த்தி சாய்வு மையவிலக்கு ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி அளவிடப்படுகிறது. வண்டல் குணகம் சமம்

m என்பது புரதத்தின் மூலக்கூறு எடை,

v என்பது அதன் பகுதி குறிப்பிட்ட தொகுதி, ij என்பது கரைசலின் பாகுத்தன்மை, b என்பது கரைசலின் அடர்த்தி.

e மற்றும் H அறியப்பட்டதால், ஜெல் வடிகட்டுதலைப் பயன்படுத்தி aRc ஐ தீர்மானிக்க முடியும், இரண்டு அறியப்படாத அளவுகள் மட்டுமே உள்ளன - v மற்றும் m நீரில் கரையக்கூடிய புரதங்களுக்கு, v அமினோ அமில கலவையின் அடிப்படையில் கணக்கிடப்படலாம் அல்லது நேரடியாக அளவிடலாம் அல்லது சமமாக எடுத்துக் கொள்ளலாம். 0.72-0.75 மிலி/ ஜி. எனவே, S 0 ஐ அளவிடுவதன் மூலம், m ஐக் காணலாம்.

இப்போது ஒரு சவ்வு புரதத்தின் நிலைமையைக் கருத்தில் கொள்வோம். ஹைட்ரோடினமிக் துகள் ஒரு புரத-சோப்பு வளாகம் என்பதால், கூடுதல் சிக்கல்கள் இங்கே எழுகின்றன, எனவே இந்த விஷயத்தில் m மற்றும் v ஆகியவை மூலக்கூறு எடை மற்றும் வளாகத்தின் குறிப்பிட்ட அளவு, M k மற்றும் K. துரதிர்ஷ்டவசமாக, வளாகத்தின் கலவை பற்றி எதுவும் தெரியாமல் K ஐ மதிப்பிட முடியாது. இந்த வழக்கில், புரதத்தின் மூலக்கூறு எடையைக் கண்டறிய இரண்டு முறைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

1. 1 கிராம் புரதத்திற்கு பிணைக்கப்பட்ட சோப்பு அளவை நேரடியாக அளவிடவும். இந்த நோக்கத்திற்காக, நிறமாலை முறைகள் அல்லது கதிரியக்கமாக பெயரிடப்பட்ட சோப்பு பயன்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் ஜெல் வடிகட்டுதல் போன்ற பல்வேறு முறைகள் வளாகங்களை தனிமைப்படுத்த பயன்படுத்தப்படுகின்றன. வளாகத்தில் புரதம் மற்றும் சவர்க்காரத்தின் ஒப்பீட்டு உள்ளடக்கத்தை நிறுவிய பின்னர், K மதிப்பு தூய புரதம் மற்றும் தூய சோப்புக்கான தொடர்புடைய மதிப்புகளின் சராசரியாக பெறப்படுகிறது. இதற்குப் பிறகு, m எளிதில் கண்டறியப்படுகிறது, மேலும் வளாகத்தில் உள்ள புரதத்திற்கும் சோப்புக்கும் இடையிலான விகிதம் அறியப்பட்டதால், புரதத்தின் மூலக்கூறு எடை காணப்படுகிறது.

2. S0 வெவ்வேறு தீர்வு அடர்த்தி கொண்ட ஊடகங்களில் அளவிடப்படுகிறது d இத்தகைய ஊடகங்கள் பொதுவாக HgO மற்றும் D2O கலவைகளைப் பயன்படுத்தி தயாரிக்கப்படுகின்றன. S° மற்றும் q இன் வரைபடத்திலிருந்து, L/„ மற்றும் v t இரண்டும் காணப்படுகின்றன. K என்பது தூய புரதம் மற்றும் தூய சோப்புக்கான தொடர்புடைய மதிப்புகளின் எடையுள்ள சராசரி என்று கருதப்படுகிறது.


Kvelo* ஐ மதிப்பிடுவது மற்றும் அட்டவணையில் இருந்து சவர்க்காரம் எடுத்து, புரதக் கூறு m இன் மூலக்கூறு எடை பெறப்படுகிறது.

q இல் 5° சார்ந்திருப்பதைத் திட்டமிட, பகுப்பாய்வு மையவிலக்கு செய்யப்படுகிறது. மையவிலக்கு H2O மற்றும் D2O கலவைகளைப் பயன்படுத்தி சுக்ரோஸ் அடர்த்தி சாய்வில் மேற்கொள்ளப்படலாம், ஆனால் இந்த வழக்கில் முடிவுகளின் பகுப்பாய்வு மிகவும் சிக்கலானது, இருப்பினும் இது முந்தைய வழக்கிலிருந்து அடிப்படையில் வேறுபட்டதல்ல.

ஒரு சவ்வு புரதத்தின் பூர்வீக வடிவத்தின் மூலக்கூறு எடையை தீர்மானிப்பதற்கான ஒரு மாற்று முறை சமநிலை அல்ட்ரா சென்ட்ரிஃபிகேஷன் ஆகும். சமநிலையில் ஒரு பொருளின் பரவலானது, செறிவு மடக்கையின் வரைபடத்தின் சாய்வு மற்றும் r 2 க்கு சமமாக இருக்கும்

இதில் r என்பது சுழலியின் மையத்திலிருந்து மையவிலக்குக் குழாயில் கொடுக்கப்பட்ட புள்ளிக்கு உள்ள தூரம், W என்பது சுழற்சி அதிர்வெண்.

பெரும்பாலான கரையக்கூடிய புரதங்களைப் போலவே, Y இன் மதிப்பு அறியப்பட்டால் அல்லது மதிப்பிடுவதற்கு எளிதாக இருந்தால், இந்த சிக்கல் மிகவும் எளிமையாக தீர்க்கப்படும். சவ்வு புரதங்களைப் பொறுத்தவரை, இந்த விஷயத்தில்

அட்டவணை 3. சில சவ்வு புரதங்களுடன் சவர்க்காரங்களை பிணைத்தல்

HgO மற்றும் D2O ஆகியவற்றைக் கலப்பதன் மூலம் பெறப்பட்ட q இன் வெவ்வேறு மதிப்புகளில் சுட்டிக்காட்டப்பட்ட நேர்க்கோட்டின் குளோன். முன்பு போலவே, Mk மற்றும் K ஆகியவை ஒரே நேரத்தில் காணப்படுகின்றன, பின்னர் புரதத்தின் மூலக்கூறு எடை தீர்மானிக்கப்படுகிறது.

வளாகத்தில் மூன்றாவது கூறு இருந்தால், கூடுதல் சிக்கல்கள் எழுகின்றன. எப்படியிருந்தாலும், விவரிக்கப்பட்ட அனைத்து நடைமுறைகளும் மிகவும் சிக்கலானவை மற்றும் தவறான முடிவுகளை கொடுக்கலாம். சுத்திகரிக்கப்பட்ட ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களுடன் தொடர்புடைய சவர்க்காரத்தின் அளவு மிகவும் குறிப்பிடத்தக்கதாக இருக்கலாம் - புரதத்தின் எடையால் 0.3 முதல் 1.5 வரை, மேலும் இந்த மதிப்பில் சிறிய பிழைகள் கூட புரதத்தின் மூலக்கூறு எடையின் குறிப்பிடத்தக்க சிதைவுக்கு வழிவகுக்கும். அட்டவணையில் அட்டவணை 3.3 சில புரத தயாரிப்புகளில் இருக்கும் சவர்க்காரங்களின் அளவு பற்றிய தரவை வழங்குகிறது. கரையக்கூடிய புரதங்கள் இந்த சவர்க்காரங்களுடன் பிணைக்காது என்பதை நினைவில் கொள்க; இது புரதத்தின் துருவமற்ற பகுதியாகும், பொதுவாக சவ்வு லிப்பிட்களுடன் தொடர்பு கொள்கிறது, இது சவர்க்காரத்துடன் பிணைக்கப்படுவதற்கு பொறுப்பாகும் என்பதை இது மீண்டும் குறிக்கிறது.

3.3 கதிர்வீச்சு செயலிழக்கச் செய்யும் முறை

இலக்கு அளவை தீர்மானிக்க கதிர்வீச்சு செயலிழக்கச் செய்யும் முறை சவ்வு புரதங்களின் ஆய்வில் அதிகளவில் பயன்படுத்தப்படுகிறது. சுத்திகரிக்கப்பட்ட புரோட்டீன்கள் மற்றும் கச்சா தயாரிப்புகள், அப்படியே உயிரி சவ்வுகள் உட்பட இரண்டையும் ஆய்வு செய்யலாம். கதிர்வீச்சினால் சேதமடைந்த புரத மூலக்கூறுகளின் விகிதத்தை தீர்மானிப்பதே முறையின் சாராம்சம். இந்த நோக்கத்திற்காக, பிணைப்பு ஹார்மோன்களின் நொதி முறைகள் அல்லது பிற தசைநார்கள் அல்லது நிறமாலை முறைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. செயல்முறை பின்வருமாறு. மாதிரி, பொதுவாக உறைந்திருக்கும், உயர் ஆற்றல் கதிர்வீச்சுக்கு வெளிப்படும். வெவ்வேறு இடைவெளிகளில், மாதிரிகள் எடுக்கப்பட்டு, கரைக்கப்பட்டு அளவீடுகள் எடுக்கப்படுகின்றன. கதிர்வீச்சின் செல்வாக்கின் கீழ் ஒரு புரதத்திற்கு சேதம் கண்டறியப்பட்டது, எடுத்துக்காட்டாக, SDS-PAGE ஐப் பயன்படுத்தி. பாலிபெப்டைட் சங்கிலியில் எந்த இடத்திலும் கதிர்வீச்சு சேதம் ஏற்படும் போது சில துணைக்குழுக்கள் தங்கள் உயிரியல் செயல்பாட்டை முற்றிலும் இழக்கின்றன என்பதை அனுபவம் காட்டுகிறது. முக்கிய விஷயம் என்னவென்றால், புரத மூலக்கூறு பெரியதாக இருந்தால், சேதம் ஏற்படுவதற்கான வாய்ப்புகள் அதிகம் மற்றும் அதனால் செயலிழக்க வாய்ப்பு உள்ளது. இந்த நிகழ்தகவு மூலக்கூறின் வடிவத்தைப் பொறுத்தது அல்ல, ஆனால் அதன் வெகுஜனத்தைப் பொறுத்தது. பொதுவாக, அறியப்பட்ட மூலக்கூறு எடை கொண்ட ஒரு புரதம் முடிவுகளின் விளக்கத்தை எளிதாக்குவதற்கு இணையாக கதிர்வீச்சு செய்யப்படுகிறது. ஆய்வின் கீழ் உள்ள புரதத்தில் ஒன்றுக்கு மேற்பட்ட துணைப்பிரிவுகள் இருந்தால், முடிவுகளை பகுப்பாய்வு செய்யும் போது சில சிக்கல்கள் எழுகின்றன. ஒரு துணை அலகுக்கு ஏற்படும் சேதம் மற்ற துணைக்குழுக்களில் கோவலன்ட் பிணைப்புகளின் சிதைவுடன் அவசியமில்லை. எனவே, வெவ்வேறு செயல்பாடுகளைக் கொண்ட வெவ்வேறு துணைக்குழுக்களைக் கொண்ட நொதிகளுக்கு, செயலிழப்பின் அளவைத் தீர்மானிக்கும் முறையைப் பொறுத்து வெவ்வேறு இலக்கு அளவுகளைப் பெறலாம்.

இந்த முறையின் குறிப்பிடத்தக்க அம்சம் என்னவென்றால், ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களை சிட்டுவில் ஆய்வு செய்ய இது பயன்படுத்தப்படலாம். எழும் கலைப்பொருட்கள் மற்றும் சிக்கல்கள் படைப்பில் விவாதிக்கப்படுகின்றன. ஒரு வெளிப்படையான பிரச்சனை உயர் ஆற்றல் கதிர்வீச்சைப் பயன்படுத்த வேண்டிய அவசியம். இது சம்பந்தமாக, பெரும்பாலான வேலைகள் பொருத்தமான ஆதாரங்களைக் கொண்ட மற்றும் சிறப்பு பகுப்பாய்வு முறைகளில் தேர்ச்சி பெற்ற ஆய்வகங்களுடன் இணைந்து மேற்கொள்ளப்பட வேண்டும்.


3.4 ஸ்பெக்ட்ரல் முறைகள் மற்றும் இரண்டாம் நிலை அமைப்பு

சவ்வு புரதங்களில் α-ஹெலிஸ் மற்றும் β-தாள்களின் உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிக்க பல முறைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. முப்பரிமாண அமைப்பு இல்லாத நிலையில், அவற்றின் அடிப்படையில் பொருத்தமான மாதிரிகளை உருவாக்க முயற்சி செய்யலாம். மிகவும் பொதுவாக பயன்படுத்தப்படும் முறை வட்ட இருகுரோயிசம் ஆகும். அகச்சிவப்பு மற்றும் ராமன் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி, அதே போல் என்எம்ஆர் ஆகியவை அதிகளவில் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

1. வட்ட டைக்ரோயிசம் முறையானது இடது மற்றும் வலது கை துருவப்படுத்தப்பட்ட ஒளியை உறிஞ்சுவதில் உள்ள வேறுபாட்டை அளவிடுவதை அடிப்படையாகக் கொண்டது; இந்த ஒளியியல் செயல்பாடு என்பது மூலக்கூறுகளின் கைராலிட்டியின் அளவீடு அல்லது அவற்றின் சமச்சீரற்ற அளவீடு ஆகும். தொலைதூர புற ஊதா பகுதியில், சிடி முக்கியமாக பாலிபெப்டைட் முதுகெலும்பின் கார்போனைல் குழுக்களின் அமைடுகளை உறிஞ்சுவதன் மூலம் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்பின் பகுதிகளின் முன்னிலையில், எடுத்துக்காட்டாக, α- ஹெலிஸ்கள், குறுவட்டு ஸ்பெக்ட்ரம் இந்த கட்டமைப்புகளில் உள்ள அமிடோ குழுக்களின் மின்னணு சூழலின் பண்புகளுடன் தொடர்புடைய மிகவும் குறிப்பிட்ட அம்சங்களைக் கொண்டுள்ளது. புரதங்களின் குறுவட்டு நிறமாலையை பகுப்பாய்வு செய்யும் போது, ​​இது பொதுவாக புரத மூலக்கூறின் வெவ்வேறு பகுதிகளின் உறிஞ்சுதலுடன் தொடர்புடைய கூறுகளின் கூட்டுத்தொகையாக குறிப்பிடப்படுகிறது: α- ஹெலிஸ்கள், β- அடுக்குகள் மற்றும் சீரற்ற சுருள்கள். இந்த கட்டமைப்புகள் ஒவ்வொன்றின் நிறமாலையையும் ஒரு வழியில் அல்லது வேறு வழியில் தீர்மானித்த பிறகு, அவை சுருக்கமாக, அளவிடப்பட்ட நிறமாலைக்கு சிறந்த பொருத்தத்தை அடையக்கூடிய வகையில் பொருத்தமான குணகங்களைத் தேர்ந்தெடுக்கின்றன. தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட எடை குணகங்கள் ஒவ்வொரு வகை இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்பிற்கும் மூலக்கூறில் விழும் விகிதத்தைக் குறிக்கின்றன.

இந்த முறைகள் கரையக்கூடிய புரதங்களுக்காக உருவாக்கப்பட்டன, ஆனால் அவை சவ்வு புரதங்களுக்கு வெற்றிகரமாக பயன்படுத்தப்படலாம் என்பதில் சந்தேகம் இல்லை. பெரும்பாலும், பிந்தையது கரையக்கூடிய புரதங்களின் அதே வகையான இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்பைக் கொண்ட பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் அவற்றைப் படிக்கும்போது அதே சிரமங்கள் எழும். சவ்வு இடைநீக்கங்களைப் பயன்படுத்தி சில புரதங்களை சிட்டுவில் ஆய்வு செய்யலாம். ஹாலோபாக்டீரியம்ஹாலோபியத்தின் ஊதா நிற சவ்விலிருந்து பாக்டீரியோஹோடோப்சின் மற்றும் சர்கோபிளாஸ்மிக் ரெட்டிகுலத்தின் சவ்விலிருந்து Ca 2 + -ATPase ஆகியவை இந்த வகையான எடுத்துக்காட்டுகள். சுத்திகரிக்கப்பட்ட சவ்வு புரதங்கள் குறுவட்டு மற்றும் சவர்க்காரங்களின் முன்னிலையில், தொலைதூர புற ஊதா மண்டலத்தில் பிந்தையவற்றின் உறிஞ்சுதல் அதிகமாக இல்லாவிட்டால் அல்லது புனரமைக்கப்பட்ட வெசிகல்களின் கலவையில் ஆய்வு செய்யலாம். இங்கே இரண்டு சிக்கல்கள் எழுகின்றன: 1) ஒளியின் அலைநீளத்தை விட சவ்வுத் துகள்களின் அளவு மிகப் பெரியதாக இருக்கும் போது வேறுபட்ட ஒளிச் சிதறல்; 2) சவ்வுகள் அல்லது வெசிகிள்களில் புரதத்தின் செறிவு காரணமாக உறிஞ்சுதலின் சமன்பாடு, அதாவது கரைசலில் அதன் விநியோகத்தின் சீரற்ற தன்மை காரணமாக. இந்த கலைப்பொருட்கள் மிகவும் குறிப்பிடத்தக்கதாக இருக்கலாம், ஆனால் பொருத்தமான முறைகளைப் பயன்படுத்துவதற்கு கணக்கிடப்படலாம்.

துரதிர்ஷ்டவசமாக, உள்ளார்ந்த சவ்வு புரதங்களுக்கு உயர்-தெளிவு கட்டமைப்பு தரவு கிடைக்கவில்லை, எனவே CD ஸ்பெக்ட்ராவின் துல்லியமான விளக்கம் சாத்தியமில்லை. ஒரு சில விதிவிலக்குகளுடன், ஒரே புரதத்தைப் படிக்க வெவ்வேறு நிறமாலை முறைகள் பயன்படுத்தப்படவில்லை, மேலும் முடிவுகளின் அளவு ஒப்பீடு எதுவும் செய்யப்படவில்லை. சிடி, ஐஆர் மற்றும் என்எம்ஆர் முறைகளால் ஆய்வு செய்யப்பட்ட பாக்டீரியோஹோடோப்சினுக்கு, மூன்று நிகழ்வுகளிலும் ஒரே முடிவுகள் பெறப்பட்டன, இது இந்த புரதத்தில் 3-அடுக்குகளின் குறிப்பிடத்தக்க உள்ளடக்கத்தைக் குறிக்கிறது. இருப்பினும், ஒவ்வொரு முறையும் குறிப்பிடத்தக்க குறைபாடுகளைக் கொண்டுள்ளது. எனவே, பாக்டீரியோஹோடோப்சினில் உள்ள டி-லேயர்களின் உயர் உள்ளடக்கம் பற்றிய தரவு பெரும்பாலும் ஆப்டிகல் கலைப்பொருட்களைக் கணக்கிடும் முறையைப் பொறுத்தது. எலக்ட்ரான் நுண்ணிய புனரமைப்புத் தரவு மூலம் ஆராயும்போது, ​​ஒப்பீட்டளவில் குறைந்த தெளிவுத்திறனுடன் வகைப்படுத்தப்படுகிறது, 80% பாக்டீரியோஹோடோப்சின் α-ஹெலிஸ்களைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் 0-அடுக்குகள் முற்றிலும் இல்லை. இந்த முரண்பாடுகளுக்கான காரணத்தை புரிந்து கொள்ள, அணு தீர்மானத்தில் புரதத்தின் கட்டமைப்பு பகுப்பாய்வு செய்வது அவசியம். மற்ற இரண்டு உயர் மிகுதியான சவ்வு விரியும் புரதங்கள் மற்றும் ஸ்டேஃபிளோகோகஸ் ஆரியஸ் ஏ-டாக்சின் உள்ளன. இந்த இரண்டு புரதங்களும் இரு அடுக்குகளில் துளைகளை உருவாக்குவதில் ஈடுபட்டுள்ளன.

2. அகச்சிவப்பு நிறமாலை மற்றும் ராமன் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபி. இந்த முறைகள் சவ்வு லிப்பிட்களின் இணக்கம் பற்றிய தகவலை வழங்குவதோடு மட்டுமல்லாமல், புரதங்களின் இரண்டாம் கட்டமைப்பைப் படிக்கவும் பயன்படுத்தப்படலாம். பாலிபெப்டைட் முதுகெலும்பின் அதிர்வு நிறமாலை இரண்டாம் நிலை கட்டமைப்பின் வகையைப் பொறுத்தது மற்றும் மூலக்கூறில் உள்ள a- மற்றும் / 3-கட்டமைப்புகளின் உள்ளடக்கம் பற்றிய தகவலை வழங்குகிறது. இந்த முறைகள் காற்றில் உலர்ந்த படங்கள், சவ்வுகளின் நீர் சஸ்பென்ஷன்கள் மற்றும் சுத்திகரிக்கப்பட்ட புரதங்கள், ஒரு சவர்க்காரத்தின் முன்னிலையில் மற்றும் புனரமைக்கப்பட்ட வெசிகல்களின் ஒரு பகுதியாக ஆய்வு செய்ய பயன்படுத்தப்படலாம். எடுத்துக்காட்டாக, ஃபோரியர் டிரான்ஸ்ஃபார்ம் ஐஆர் ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபியின் படி, சவ்வில் உள்ள Ca 2+ -ATPase வளாகம் முக்கியமாக α-ஹெலிகல் பகுதிகள் மற்றும் புள்ளியியல் சுருள் இணக்கத்துடன் கூடிய பகுதிகளைக் கொண்டுள்ளது, மேலும் புனரமைக்கப்பட்ட வெசிகிள்களில் ஹைட்ரோஃபோபிக் புரதம் மெய்லின் α- மற்றும் / இரண்டையும் கொண்டுள்ளது. 3-அடுக்கு.

3. சவ்வு புரதங்களைப் படிக்க NMR ஸ்பெக்ட்ரோஸ்கோபியையும் பயன்படுத்தலாம். இருப்பினும், இந்த வழக்கில் முறையின் திறன்கள் குறைவாகவே உள்ளன, இது முக்கியமாக சிட்டு மற்றும் சவர்க்காரம் கொண்ட வளாகங்களில் ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களின் ஒப்பீட்டளவில் மெதுவான இயக்கங்கள் காரணமாகும். எனவே, கரைசலில் ஒப்பீட்டளவில் சிறிய புரதங்களின் இணக்க நிலையின் விரிவான படத்தை வழங்கக்கூடிய இரு பரிமாண என்எம்ஆர் போன்ற சக்திவாய்ந்த முறை, சவ்வு புரதங்களைப் படிப்பதற்கு இன்னும் பொருத்தமானதாக இல்லை. திட மாதிரிகளின் NMR முறை மிகவும் ஏற்றுக்கொள்ளத்தக்கது. 2H- மற்றும் 3C-NMR முறைகள் பெரும் ஆற்றலைக் கொண்டுள்ளன, இருப்பினும் அவை மிகவும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படவில்லை. மையத்தின் சராசரி இணக்கம் மற்றும் பக்க சங்கிலிகளின் இயக்கவியல் பற்றிய தரவு பெறப்பட்டது. திட நிலை NMR முறைகள் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படவில்லை என்பது மட்டுமல்லாமல், பெரும்பாலான சந்தர்ப்பங்களில் அவற்றைப் பயன்படுத்த முடியாது என்பதைக் கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும். இருப்பினும், அவற்றின் பயன்பாடு சாத்தியமான அரிதான சூழ்நிலைகளில், அவை மிகவும் மதிப்புமிக்கவை.

3.5 என்சைம் செயல்பாடு

சுத்திகரிக்கப்பட்ட சவ்வு புரதங்களை வகைப்படுத்துவதற்கான மிக முக்கியமான முறைகளில் ஒன்று சந்தேகத்திற்கு இடமின்றி உயிர்வேதியியல் செயல்பாட்டை தீர்மானிப்பதாகும். இந்த வழக்கில், அடிப்படையில் கரையக்கூடிய புரதங்களைப் போலவே அதே அளவுகோல்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, ஆனால் அவற்றின் சொந்த சிரமங்கள் ஏற்படலாம். இவற்றில் முதன்மையானது சவ்வு புரதங்களின் உயிர்வேதியியல் செயல்பாடு பெரும்பாலும் கொழுப்பு மற்றும் சவர்க்காரங்களை புரதத்துடன் பிணைப்பதைப் பொறுத்தது. செயல்பாட்டின் இழப்பு மீளக்கூடியதாகவோ அல்லது மீள முடியாததாகவோ இருக்கலாம். விவோ அல்லது சவ்வுகளின் ஒரு பகுதியாக ஆய்வுக்கு உட்பட்ட புரதத்தின் குறிப்பிட்ட செயல்பாட்டின் சில மதிப்பீடுகளை கரையாதலுக்கு முன் வைத்திருப்பது நல்லது. அதிகப்படியான சோப்பு ஒரு தடுப்பு விளைவை ஏற்படுத்தும், உதாரணமாக மைக்கேல் மக்கள்தொகையில் துருவமற்ற அடி மூலக்கூறுகளை நீர்த்துப்போகச் செய்வதன் மூலம் மற்றும் நொதி செயல்பாட்டைக் குறைப்பதன் மூலம். எந்த சவ்வு புரதத்தின் செயல்பாட்டை அளவிடும் போது, ​​அது உகந்த செயல்பாட்டை உறுதி செய்யும் லிப்பிட்களால் சூழப்பட்டுள்ளது என்பதை மனதில் கொள்ள வேண்டும். இரண்டாவது சிக்கல் "டிரான்ஸ்பிலேயர்" செயல்பாட்டைக் கொண்ட புரதங்களைப் பற்றியது; எடுத்துக்காட்டுகளில் சேனல்-உருவாக்கும் புரதங்கள் மற்றும் போக்குவரத்து புரதங்கள் அடங்கும். இந்த சந்தர்ப்பங்களில், ஒரு பெட்டியிலிருந்து மற்றொன்றுக்கு கரைசல்களின் இயக்கம் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்பட வேண்டும்.

3.6 குவாட்டர்னரி அமைப்பு மற்றும் இரசாயன குறுக்கு புறணி

பல சவ்வு நொதிகள் பல துணைக்குழுக்களைக் கொண்ட வளாகங்களாகும். எடுத்துக்காட்டுகளில் H + -ATPase, Na + /K + -ATPase, மைட்டோகாண்ட்ரியல் எலக்ட்ரான் போக்குவரத்து வளாகங்கள் மற்றும் ஒளிச்சேர்க்கை எதிர்வினை மையங்கள் ஆகியவை அடங்கும். சில ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்கள், கோவலன்ட் இடைவினைகள் மூலம் கரையக்கூடிய புரதங்களுடன் இறுக்கமாக தொடர்புடையவை. E. coli இல், SDS-PAGE எலக்ட்ரோபோரேசிஸின் படி மூன்று வகையான துணைக்குழுக்களைக் கொண்ட ஃபோ கூறு, ஐந்து வகையான துணைக்குழுக்களைக் கொண்ட ஒரு புரோட்டான் சேனலை உருவாக்குகிறது, இது ATP இன் நீராற்பகுப்பில் ஈடுபட்டுள்ளது. அத்தகைய புரதங்களுக்கு, துணைக்குழுக்களின் தன்மை, சிக்கலான ஸ்டோச்சியோமெட்ரி மற்றும் அதன் கூறுகளின் உடனடி தொடர்புகளை தீர்மானிக்க மிகவும் முக்கியமானது. புரத வளாகம் ஏற்கனவே தனிமைப்படுத்தப்பட்டிருந்தாலும் இது மிகவும் கடினமான பணியாகும். இங்கு எழும் சிக்கல்கள் அடிப்படையில் கரையக்கூடிய புரத வளாகங்களிலிருந்து வேறுபட்டவை அல்ல, ஆனால் கூடுதல் சிரமங்கள் உள்ளன.

முதலாவதாக, துணைக்குழுக்களுக்கு இடையிலான தொடர்பு புரதங்கள் தொடர்புடைய லிப்பிடுகள் மற்றும் சவர்க்காரங்களின் வகையைப் பொறுத்தது என்பதை நினைவில் கொள்ள வேண்டும். எடுத்துக்காட்டாக, E. coli இன் சக்சினேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ், லுப்ரோல் PX உடன் கரையும் போது, ​​நான்கு துணை அலகுகளைக் கொண்டதாகத் தோன்றுகிறது, ஆனால் ட்ரைடன் X-100 உட்பட மற்ற சவர்க்காரங்களுடன் கரையும் போது, ​​இரண்டு மட்டுமே. sdh ஓபரான் நான்கு பாலிபெப்டைட்களையும் குறியாக்கம் செய்வதாக அறியப்படுகிறது, மேலும் இரண்டு-துணை வடிவமானது அசாதாரண ER நிறமாலையைக் கொண்டுள்ளது. எனவே, விவோவில் நொதி நான்கு துணைக்குழுக்களைக் கொண்டுள்ளது என்பது தெளிவாகிறது. இருப்பினும், இரண்டு வடிவங்களும் சக்சினேட் டீஹைட்ரோஜினேஸ் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளன, எனவே சரியான வடிவம் கரைந்ததா என்பதை முடிவு செய்வதில் பயன்படுத்தப்படும் உயிர்வேதியியல் அளவுகோல்கள் முக்கியமானவை.

மற்றொரு சிக்கல் என்னவென்றால், சவ்வு புரதங்கள் அவற்றின் அதிக உள்ளூர் செறிவு காரணமாக இரு அடுக்கில் வளாகங்களை உருவாக்கலாம். கரைதிறன் போது, ​​பயன்படுத்தப்படும் சோப்பு பொருட்படுத்தாமல், சவ்வு புரதங்கள் நீர்த்த மற்றும் அவர்களின் பிரிப்பு ஏற்படலாம். வெகுஜன நடவடிக்கை சட்டத்தின் படி, இது கூறுகளுக்கு இடையிலான தொடர்பு மிகவும் வலுவாக இல்லாத வளாகங்களின் விலகலுக்கு வழிவகுக்கும். சிட்டுவில் எந்த வளாகம் உருவாகிறது மற்றும் கரைதிறன் மற்றும் சுத்திகரிப்புக்குப் பிறகு எது என்பதை தீர்மானிக்க கடினமாக உள்ளது. பல சிக்கலான அமைப்புகளின் ஆய்வில் இதே போன்ற சிக்கல்கள் எழுகின்றன, எடுத்துக்காட்டாக, /3-அட்ரினெர்ஜிக் ஏற்பி-அடிலாசில் சைக்லேஸ் அமைப்பு, மைட்டோகாண்ட்ரியாவில் எலக்ட்ரான் போக்குவரத்து சங்கிலிகள் மற்றும் மைக்ரோசோமல் சைட்டோக்ரோம் பி450 மற்றும் பி$ அமைப்பு.

ஒரு சுத்திகரிக்கப்பட்ட வளாகத்தில் துணை அலகுகளின் ஸ்டோச்சியோமெட்ரி மற்றும் அவற்றின் தொடர்பைப் படிக்க, சில முறைகள் மட்டுமே பயன்படுத்தப்படுகின்றன: 1) இரசாயன குறுக்கு இணைப்பு; 2) என்-டெர்மினல் அமினோ அமிலங்களின் அளவு பகுப்பாய்வு; 3) ஆட்டோரேடியோகிராபி அல்லது இம்யூனோபிளாட்டிங் பயன்படுத்தி கறையின் தீவிரத்தை தீர்மானிப்பதன் மூலம் SDS-பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்களில் உள்ள துணை அலகுகளின் வெகுஜன விகிதத்தை தீர்மானித்தல். ஒவ்வொரு முறைக்கும் அதன் வரம்புகள் உள்ளன, ஆனால் அவை அனைத்தும் நடைமுறையில் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. எடுத்துக்காட்டாக, நிகோடினிக் அசிடைல்கோலிக் ஏற்பியின் ஐந்து துணைக்குழுக்களின் ஸ்டோச்சியோமெட்ரியானது N-காய்க் அமினோ அமிலங்களின் அளவு பகுப்பாய்வு மற்றும் E. coli H + -ATPase இன் Fo கூறுகளின் மூன்று துணைக்குழுக்கள் SDS-polyacrylamide ஜெல்களில் பிரிப்பதன் மூலம் தீர்மானிக்கப்பட்டது. Coomassie புத்திசாலித்தனமான நீலமானது, பொதுவாக SDS-PAGE பிரித்தலுக்குப் பிறகு புரதங்களைக் கறைப்படுத்தப் பயன்படுகிறது, அடிப்படை அமினோ அமில எச்சங்களைக் கொண்ட புரதங்களுடன் முன்னுரிமையுடன் பிணைக்கிறது.

சுத்திகரிக்கப்பட்ட புரத வளாகங்கள் மற்றும் சிட்டு வளாகங்கள் இரண்டிலும் குறுகிய தூர இடைவினைகளைத் தீர்மானிக்க இரசாயன குறுக்கு இணைப்பு பயன்படுத்தப்படுகிறது. சவ்வு புரதங்களில் குறுகிய தூர இடைவினைகளை பகுப்பாய்வு செய்ய பல குறிப்பிட்ட ஹைட்ரோபோபிக் குறுக்கு இணைப்பிகள் பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன. அவற்றில் சில அட்டவணையில் வழங்கப்பட்டுள்ளன. 3.4 பயன்படுத்தப்படும் முறைகள் கரையக்கூடிய அமைப்புகளிலிருந்து வேறுபடுவதில்லை. குறுக்கு-இணைக்கும் தயாரிப்புகள் பொதுவாக PAGE ஆல் பகுப்பாய்வு செய்யப்படுகின்றன, பெரும்பாலும் பிளவுபடுத்தக்கூடிய குறுக்கு-இணைப்பு முகவர்களைப் பயன்படுத்துகின்றன, இது பாலிபெப்டைட்களை பகுப்பாய்வு செய்ய அனுமதிக்கிறது. தனிப்பட்ட பாலிபெப்டைட்களுக்கு ஆன்டிபாடிகள் SDS-PAGE க்குப் பிறகு இம்யூனோபிளாட்டிங்கிற்குப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, இதன் விளைவாக வரும் ஒவ்வொரு தயாரிப்புகளின் கூறுகளையும் அடையாளம் காணவும். வினைப்பொருட்களின் ஒப்பீட்டளவில் நீண்ட ஆயுட்காலத்துடன், இரு அடுக்குகளில் எளிமையான பரவலின் விளைவாக உயிரியக்கங்களில் உள்ள புரதங்கள் குறுக்கு-இணைக்கப்படும் என்று ஒருவர் கருதலாம். இருப்பினும், பல ஆய்வுகளின்படி, இது அவ்வாறு இல்லை: குறுக்கு-இணைப்பு தயாரிப்புகள் குறிப்பிட்ட புரதக் கூட்டாளிகள், சீரற்ற வடிவங்கள் அல்ல. எனவே, ரோடோபாக்டர் காப்சுலேட்டாவின் ஒளிச்சேர்க்கை மென்படலத்தில், எதிர்வினை மையத்தின் கூறுகளின் துணைக்குழுக்களுக்கு இடையில் மட்டுமே குறுக்கு இணைப்புகள் உருவாகின்றன, அதே போல் எதிர்வினை மையம் மற்றும் ஆற்றல் பரிமாற்றத்தில் ஈடுபட்டுள்ள "ஆன்டெனா" வளாகம் B870 ஆகியவற்றுக்கு இடையில் மட்டுமே. எதிர்வினை மையத்திற்கு.

இறுதியாக, அறியப்பட்ட கரையக்கூடிய கூறுகளுடன் பிணைக்கும் ஒருங்கிணைந்த சவ்வு புரதங்களை அடையாளம் காண வேதியியல் குறுக்கு-இணைப்பு அடிக்கடி பயன்படுத்தப்படுகிறது என்பதை நாங்கள் கவனிக்கிறோம். 1 இன் குறுக்கு-இணைப்பு ஒரு எடுத்துக்காட்டு) H + -ATPase இன் Fo-kom கூறுகளின் a- மற்றும் b-துணைக்குழுக்கள் கரையக்கூடிய கூறு Fi இன் /3-துணை அலகுடன்; 2) மைட்டோகாண்ட்ரியல் சைட்டோக்ரோம் சி ஆக்சிடேஸின் சைட்டோக்ரோம் சி துணைக்குழுக்கள்; 3) ஹார்மோன் ஏற்பிகளுடன் பெப்டைட் ஹார்மோன்கள்.


அட்டவணை 4. சவ்வு புரதங்களின் குவாட்டர்னரி கட்டமைப்பைத் தீர்மானிக்கப் பயன்படுத்தப்படும் சில குறுக்கு-இணைப்பு எதிர்வினைகள்"