Für den Zeitraum vom 9. Januar bis 10. Oktober 2014. Die Abteilung für Veterinär- und Gesundheitsgutachten der Bundesstaatlichen Haushaltsanstalt "Tula MVL" erhielt - 302 durchgeführte Wasserproben - 693 Studien, davon für die Indikatoren des Konstruktionsbüros TKB-458-Studien.

Was sind diese Indikatoren und warum genau werden sie bei der Beurteilung von Trinkwasser berücksichtigt?

Wasser - der Hauptbestandteil eines jeden Organismus, spielt eine große Rolle in seinem Leben. Es ist ein Lebensraum für verschiedene Mikroorganismen, einschließlich Krankheitserreger. Der Erregernachweis ist der genaueste Indikator für die Wasserverschmutzung. Zu diesen Mikroorganismen gehören Bakterien der Gruppe Escherichia coli - E. coli (Bakterien der Gruppe Escherichia coli, auch colimorphe und coliforme Bakterien genannt) - eine Gruppe von Bakterien der Familie Enterobacteriaceae, die sich bedingt durch morphologische und kulturelle Merkmale auszeichnet und von der Sanitärmikrobiologie verwendet wird als Marker für fäkale Kontamination. Unter coliformen Bakterien wird häufig das Vorhandensein von gewöhnlichen und thermotoleranten coliformen Bakterien (TCB, TKB) im Trinkwasser festgestellt, was auf eine schlechte Wasserversorgung und eine mögliche fäkale Verunreinigung der Wasserquelle hinweist, was eine potenzielle Bedrohung für die Entwicklung und Ausbreitung darstellt von Darmerkrankungen.

In Wasserversorgungssystemen mit aufbereitetem Wasser sollten keine Kolibakterien nachgewiesen werden (SanPiN). Das Vorhandensein von Kolibakterien weist auf eine unzureichende Wasserreinigung, seine sekundäre Verschmutzung und das Vorhandensein von Nährstoffen im Wasser hin. Das versehentliche Eindringen von coliformen Organismen in das System ist zulässig, jedoch nicht mehr als 5 % der im Laufe des Jahres entnommenen Proben. Werden TKB, OKB) in einer Trinkwasserprobe nachgewiesen, werden diese sofort in Wiederholungsproben bestimmt.

TKB (thermotolerante coliforme Bakterien). Dies ist eine Gruppe von coliformen Organismen, die Laktose bei 44-45°C fermentieren können. Sie werden schnell erkannt und dienen daher zur Beurteilung der Wirksamkeit der Wasserreinigung von Fäkalienbakterien.

OKB (Common Coliform Bacteria) - Die OKB-Gruppe umfasst eine ziemlich große Anzahl von Gattungen der Familie Enterobacteriacea, deren Vertreter Laktose fermentieren können: Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Pantoea, Rahnella usw. Unter diesen Mikroorganismen gibt es auch eine große Anzahl freilebender Saprophyten, daher ist der TKB-Indikator ein wichtiger technologischer (Indikator-)Indikator.

Werden diese Bakterien demnach im Trinkwasser gefunden, besteht die Möglichkeit einer Gewässerbelastung durch Abwässer.

Die Ergebnisse der Bestimmung der Indikatoren von OKB, TKB werden als CFU / 100 ml dargestellt; coliforme Bakterien sollten in 100 ml Trinkwasser bei einer dreifachen Untersuchung des normalisierten Volumens nicht nachgewiesen werden.

Wie dem auch sei, ein erhöhter Bakteriengehalt im Wasser ist ein Warnsignal, und wenn er auftritt, muss etwas mit dem Wasser gemacht werden.

Um mikrobiologische Untersuchungen des Trinkwassers durchzuführen, können Sie sich an die Bundesstaatliche Haushaltsanstalt Tula MVL wenden.

Titrationsmethode

Das Verfahren basiert auf der Akkumulation von Bakterien nach Inokulation bestimmter Wasservolumina in flüssigen Nährmedien, gefolgt von einer erneuten Inokulation auf einem differentiell dichten Medium mit Lactose und der Identifizierung von Kolonien durch kulturelle und biochemische Tests. Bei der Untersuchung von Trinkwasser nach einer qualitativen Methode werden drei Volumina von 100 cm3 gesät. Im Studium des Wassers mit einem Ziel | quantitative Bestimmung von OKB und TKB (wiederholte Analyse), 1,10 bzw. 100 cm3 werden inokuliert – drei Volumina jeder Serie.

Inokulationen von 10 und 100 cm3 Wasser werden jeweils in 1 und 10 cm3 des Akkumulationsmediums durchgeführt - konzentriertes LPS ohne Indikator. Die Aussaat von 1 cm3 der Probe erfolgt in 10 cm3 LPS der üblichen Konzentration. Die Inokulationen werden 48 Stunden bei einer Temperatur von 37 °C inkubiert Nach 24 Stunden erfolgt eine vorläufige Bewertung der Inokulationen im Akkumulationsmedium. Aus den Behältern, wo das Vorhandensein von Wachstum (Trübung) und die Bildung von Gas festgestellt wird, wird das Material mit einer bakteriologischen Schleife auf die Sektoren des Endo-Mediums gesät, um isolierte Kolonien zu erhalten. Behälter ohne sichtbare Anzeichen von Wachstum und Gasbildung werden bis zu 48 Stunden im Thermostat belassen und zur endgültigen Bewertung erneut betrachtet.

Die Ergebnisse von Kulturen ohne Anzeichen von Wachstum werden als negativ angesehen und unterliegen keiner weiteren Untersuchung. Aus Behältern, in denen eine Trübung festgestellt wird, erfolgt die Aussaat auf Sektoren des Endo-Mediums. Inokulationen auf Endo-Medium werden bei einer Temperatur von 37 ° C für 18-20 Stunden inkubiert.Wenn eine Trübung auftritt, bildet sich Gas im Akkumulationsmedium und Kolonien wachsen auf Endo-Medium, typisch für Lactose-positive Bakterien: dunkelrot oder rot, mit oder ohne metallischen Glanz, konvex mit rotem Zentrum und einem Aufdruck auf dem Nährmedium, geben einen positiven Rückschluss auf das Vorhandensein von OKB in einem bestimmten Probenvolumen.

Die Anwesenheit des OKB muss in folgenden Fällen bestätigt werden:

ü im Akkumulationsmedium wurde nur eine Trübung festgestellt;

ü Die Zugehörigkeit zu laktosepositiven Kolonien ist fraglich.

Führen Sie die folgenden Schritte aus, um das Vorhandensein des OKB zu bestätigen:

1. Überprüfen Sie das Endo-Medium auf das Vorhandensein eines Abdrucks, nachdem Sie die verdächtige Kolonie mit einer Öse entfernt haben.

2. Führen Sie einen Oxidase-Test durch;

3. Zugehörigkeit zur Gram-Gruppe prüfen;

4. Bestätigen Sie die Fähigkeit zur Gasbildung, indem Sie 1-2 isolierte Kolonien aller Arten aus jedem Sektor in das Bestätigungsmedium (LPS mit Indikator) inokulieren, gefolgt von einer Inkubation der Inokulationen bei einer Temperatur von 37 °C für 24-48 Stunden.

In Abwesenheit von isolierten Kolonien wird das Sieben auf Endo-Medium durch herkömmliche Verfahren durchgeführt. Ein negatives Gutachten wird abgegeben, wenn:

ü es gibt keine Anzeichen für Wachstum im Akkumulationsumfeld;

ü es gibt kein Wachstum in den Sektoren des Endo-Umfelds;

ü für coliforme Bakterien uncharakteristische Kolonien (durchsichtig, mit gezackten Rändern, undeutlich) wuchsen auf den Sektoren des Endo-Mediums;

ü alle Kolonien waren Oxidase-positiv;

alle Kolonien waren grampositiv;

ü im Bestätigungstest auf dem LPS-Medium mit dem Indikator wurde keine Gasbildung beobachtet.

Um den TCB zu bestimmen, arbeiten Sie mit Sektoren des Endo-Mediums, in denen typische Lactose + -Kolonien gewachsen sind. Zwei oder drei isolierte Kolonien jedes Typs aus jedem Sektor werden in Teströhrchen mit irgendeinem der Lactoseakkumulationsmedien inokuliert und bei einer Temperatur von 44°C für einen Tag inkubiert. Mit der Bildung von Gas in einem Lactose-Akkumulationsmedium, dem Wachstum von Lactose-positiven Bakterien auf einem Endo-Medium und dem Nachweis der Fähigkeit, Lactose zu Säure und Gas zu fermentieren, in bestätigenden Lactose-Medien bei einer Temperatur von 44°C für 24 Stunden wird ein positiver Schluss auf das Vorhandensein von TKB in diesem Wasservolumen gezogen. In einer qualitativen Untersuchung (bei Untersuchung von drei Volumina zu je 100 cm3 wird bei Nachweis von OKB und TKB zumindest in einem der drei Volumina vermerkt: „OKB und TBC wurden in 100 cm3 gefunden“.

In der Studie nach einer quantitativen Methode werden NVCh, OKB und TKB nach speziellen Tabellen bestimmt. Wenn die Ergebnisse der Untersuchung auf das Vorhandensein von OKB und TKB in allen untersuchten Volumina negativ sind, wird eine Schlussfolgerung ausgegeben: „In 100 cm3 wurden keine OKB und TKB gefunden.“

8.1. Bestimmung der Gesamtzahl der Mikroorganismen, die auf Nähragar Kolonien bilden

8.1.1. Definition des Begriffs eines Indikators

Das Verfahren bestimmt im Trinkwasser die Gesamtzahl der mesophilen aeroben und fakultativ anaeroben Mikroorganismen (FMC), die in der Lage sind, auf Nähragar bei einer Temperatur von 37 °C für 24 Stunden Kolonien zu bilden, sichtbar mit einem 2-fachen Anstieg.

8.1.2. Analyse durchführen

Von jeder Probe werden mindestens zwei Volumina von 1 ml inokuliert.

Nach gründlichem Mischen werden Wasserproben 1 ml in sterile Petrischalen gegeben, wobei die Deckel leicht geöffnet werden. Nach Zugabe von Wasser werden (8–12) ml (auf einem Becher mit einem Durchmesser von 90–100 mm) geschmolzener und auf (45–49)°C gekühlter Nähragar in jeden Becher gegossen, nachdem der Rand der Schale eingeflammt wurde die es enthält. Mischen Sie dann schnell den Inhalt der Becher, verteilen Sie ihn gleichmäßig auf dem gesamten Boden, vermeiden Sie die Bildung von Luftblasen und lassen Sie Agar an den Rändern und am Deckel des Bechers gelangen. Dieses Verfahren wird auf einer horizontalen Oberfläche durchgeführt, wo die Platten belassen werden, bis sich der Agar verfestigt.

Der geschmolzene Agar wird für den Zeitraum der Analyse in ein Wasserbad oder einen Thermostat gestellt, der eine Temperatur von (45-49) °C aufrechterhält.

Nachdem sich der Agar verfestigt hat, werden die Platten mit den Kulturen kopfüber in einen Thermostaten gestellt und (24 ± 2) Stunden lang bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C inkubiert.

8.1.3. Gleichmäßige Ergebnisse

Alle auf der Platte gewachsenen Kolonien, beobachtet bei 2-facher Vergrößerung, werden gezählt. Es werden nur solche Schalen berücksichtigt, auf denen nicht mehr als 300 isolierte Kolonien gewachsen sind.

Die Anzahl der Kolonien auf beiden Platten wird summiert und durch zwei geteilt. Das Ergebnis wird als Anzahl der koloniebildenden Einheiten (KBE) in 1 ml der Testwasserprobe ausgedrückt.

Wenn die Zählung auf einer der 2 Platten nicht möglich ist, wird das Ergebnis basierend auf der Anzahl der Kolonien auf einer Platte angegeben. Wenn zwei Platten ein diffuses Koloniewachstum aufweisen, das nicht die gesamte Oberfläche der Platte bedeckt, oder wenn mehr als 300 Kolonien gewachsen sind und der Assay nicht wiederholt werden kann, zählen Sie den Sektor der Schale und berechnen Sie dann die gesamte Oberfläche neu. In diesen Fällen vermerkt das Protokoll „die Anzahl der KBE / ml - ungefähr“.

Wenn Koloniezählungen auf den Platten nicht möglich sind, tragen Sie „kontinuierliches Wachstum“ in das Protokoll ein.

8.2. Bestimmung häufiger und thermotoleranter coliformer Bakterien durch Membranfiltration (Hauptmethode)

8.2.1. Definition des Begriffs eines Indikators

Gemeinsame coliforme Bakterien (CBC) sind gramnegative, oxidasenegative, sporenfreie Stäbchen, die in der Lage sind, auf unterschiedlichen Lactosemedien zu wachsen und Lactose zu Säure, Aldehyd und Gas bei einer Temperatur von (37 ± 1) ° C für (24- 48) h .

Thermotolerante coliforme Bakterien (TCB) gehören zu den verbreiteten coliformen Bakterien, haben alle ihre Eigenschaften und sind darüber hinaus in der Lage, Laktose bei einer Temperatur von (44 ± 0,5) °C für 24 Stunden zu Säure, Aldehyd und Gas zu fermentieren.

8.2.2. Methodenprinzip

Das Verfahren basiert auf dem Filtern eines festgelegten Wasservolumens durch Membranfilter, dem Anbau von Pflanzen auf einem differenzierten Nährmedium mit Laktose und der anschließenden Identifizierung von Kolonien anhand kultureller und biochemischer Eigenschaften.

8.2.3. Analyse durchführen

8.2.3.1. Forschungsauftrag

Bei der Untersuchung von Trinkwasser werden 3 Volumina von 100 ml analysiert.

Bei stabil negativen Ergebnissen können 300 ml Wasser durch einen Filter filtriert werden.

Beim Filtern von Wasser unbekannter Qualität ist es ratsam, die Anzahl der gefilterten Volumina zu erhöhen, um isolierte Kolonien auf dem Filter zu erhalten (z. B. 10, 40, 100, 150 ml Wasser).

Die abgemessene Wassermenge wird durch Membranfilter gemäß den Anforderungen nach Absatz 7 gefiltert.

Die Filter werden auf das gemäß Abschnitt 5.4 vorbereitete Endo-Medium gelegt. Becher mit Filter werden verkehrt herum in einen Thermostaten gestellt und (24 ± 2) Stunden lang bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C inkubiert.

Wenn auf den Filtern kein Wachstum auftritt oder die Kolonien häutig, schwammig, verschimmelt, durchsichtig, undeutlich sind, geben sie eine negative Antwort: das Fehlen von OKB und TKB in 100 ml des Testwassers. Die Analyse ist nach 24 Stunden abgeschlossen.

Wenn auf den Filtern das Wachstum von isolierten typischen laktosepositiven Kolonien festgestellt wird: dunkelrot, rot mit oder ohne metallischen Glanz oder andere ähnliche Kolonien mit einem Aufdruck auf der Rückseite des Filters, zählen Sie die Anzahl der Kolonien jeder Art getrennt und bestätigen Sie ihre Zugehörigkeit zu OKB und TKB.

Um das Vorhandensein von OKB zu bestätigen, untersuchen Sie:

Alle Kolonien, wenn weniger als 5 Kolonien auf den Filtern wuchsen;

Mindestens 3-4 Kolonien jeder Art.

Um das Vorhandensein von TKB zu bestätigen, werden alle typischen Kolonien untersucht, jedoch nicht mehr als 10.

Jede ausgewählte isolierte Kolonie wird untersucht auf:

Das Vorhandensein von Oxidase-Aktivität;

Gram-Zugehörigkeit (Mikroskopie einer Gram-gefärbten Präparation oder Gregersen-Test);

Vergärung von Laktose zu Säure und Gas.

8.2.3.2. Einrichten eines Oxidase-Tests

Ein Streifen Filterpapier wird in eine saubere Petrischale gelegt und mit 2-3 Tropfen des Oxidase-Testreagenzes gemäß Abschnitt 5.7 befeuchtet. Fertige Papiersysteme werden mit destilliertem Wasser befeuchtet. Ein Teil der isolierten Kolonie wird mit einem Glasordner oder einer Platinschlaufe (eine Metallschlaufe aus Nichrom kann falsch positiv reagieren) auf das vorbereitete Filterpapier ausgestrichen. Die Reaktion gilt als positiv, wenn innerhalb von 1 Minute eine violett-braune (Abschnitt 5.7.1 Option 1) oder blaue (Abschnitt 5.7.2 Option 2 und NIB-Oxidase) Färbung des Schlaganfalls auftritt. Bei einer negativen Reaktion ändert sich die Farbe an der Applikationsstelle der Kultur nicht. Bei positivem Ergebnis wird diese Kolonie von der weiteren Forschung ausgeschlossen.

Ergibt sich bei der Untersuchung von dunkelrot gefärbten Kolonien ein ungenügend klares Ergebnis, muss die Kultur von Endo-Medium auf Nähragar überführt werden. Nach der Inkubation wird der Test wiederholt.

8.2.3.3. Bestimmung der Zugehörigkeit zu Gram

Von der Oxidase-negativen Kolonie wird ein Abstrich genommen, Gram-gefärbt und mikroskopisch untersucht.

Auf einen mit Alkohol entfetteten Objektträger wird 1 Tropfen destilliertes Wasser in einer Schleife aufgetragen, eine kleine Menge Kultur der analysierten Kolonie wird hinzugefügt und auf der Oberfläche des Glases verteilt. Der Ausstrich wird bei Raumtemperatur getrocknet und dreimal durch die Flamme des Brenners fixiert. Auf das Präparat wird ein Streifen Filterpapier gelegt und (0,5-1) min lang eine karbolische Lösung von violettem Enzian darauf gegossen, das Papier wird entfernt, Lugol-Lösung wird (0,5-1) min lang gegossen, Lugol-Lösung wird abgelassen und das Glas wird (0,5–1) Minuten lang in Ethylalkohol gewaschen, bis der Farbstoff nicht mehr austritt. Dann wird das Glas gründlich mit Wasser gewaschen und für (1-2) min mit Ziel's Fuchsin, verdünnt 1:10 mit destilliertem Wasser, gefärbt. Nach Waschen und Trocknen des Präparates wird der Ausstrich mikroskopisch untersucht.

Die Vorbereitung der Reagenzien für die Gram-Färbung ist in Abschnitt 5.9 beschrieben.

Gramnegative Mikroorganismen sind rosa, grampositive sind blau. Coliforme Bakterien sind gramnegative Stäbchen.

Die Gram-Färbung kann durch den Gregersen-Test ersetzt werden, der keine Optik erfordert.

Gregersen-Test: In einem Tropfen einer 3%igen wässrigen KOH-Lösung auf einem Glasobjektträger wird eine aus einem festen Medium entnommene Bakterienmasse emulgiert. Nach einigen Sekunden Rühren mit der Öse wird die Suspension schleimig und hinter der Öse ziehen sich Schleimfäden, was darauf hindeutet, dass die Testkultur oder -kolonie zu einer gramnegativen Spezies gehört. Bei grampositiven Bakterien bilden sich keine Schleimfäden - die Reaktion ist negativ.

8.2.3.4. Bestimmung der Laktosegärung

Der Rest der oxidasenegativen gramnegativen isolierten Kolonie wird parallel in zwei Reagenzgläser mit Lactosemedium (S. 5.6) ausgesät:

Um das Vorhandensein von OKB zu bestätigen, wird die Kultur 48 Stunden lang bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C inkubiert;

Um das Vorhandensein von TKB zu bestätigen, wird die Inokulation in einem auf eine Temperatur von (43–44) °C vorgewärmten Medium durchgeführt und 24 Stunden lang bei einer Temperatur von (44 ± 0,5) °C inkubiert.

Nach (4-6) Stunden ist eine primäre Berücksichtigung der Bildung von Säure und Gas bei der Bestätigung von halbflüssigen Medien und NIB (Abschnitt 5.6) möglich.Wenn Säure und Gas nachgewiesen werden, wird eine positive Antwort gegeben. In Abwesenheit von Säure und Gas oder in Anwesenheit von nur Säure werden Röhrchen mit Kulturen für die endgültige TKB-Zählung bis zu 24 Stunden belassen Röhrchen mit Kulturen zur Bestätigung des Vorhandenseins von TTB nach Sichtung nach 24 Stunden und Erhalt eines negativen Ergebnisses verbleiben bis zu 48 Stunden für die endgültige Zählung.

Wenn die zu untersuchende Kolonie klein ist, subkultivieren Sie sie auf schrägem Nähragar und führen Sie nach (18-24) Stunden Inkubation alle erforderlichen Bestätigungstests durch.

8.2.3.5. Führen Sie Bestätigungstests in Kolonieüberlagerung oder kontinuierlichem Wachstum durch

Wenn Kolonien oder kontinuierliches Wachstum auf einem Teil oder der gesamten Filteroberfläche beobachtet werden, wird ein Oxidasetest durchgeführt, indem der Membranfilter auf einen Kreis aus Filterpapier mit einem größeren Durchmesser als der Filter, das reichlich mit dem Reagenz befeuchtet ist, oder auf eine NIB gelegt wird Oxidasescheibe mit destilliertem Wasser angefeuchtet. Bei ersten Anzeichen einer Reaktion, spätestens jedoch 5 Minuten später, wird der Membranfilter wieder in das Endo-Medium überführt. Nach einer deutlichen Manifestation der Reaktion wird das Ergebnis bestimmt. Erscheint eine violett-braune oder blaue Farbe (je nach verwendetem Reagenz), gilt der Oxidase-Test als positiv.

Wenn alle Kolonien auf den Filtern Oxidase-positiv sind, werden sie nicht berücksichtigt und geben eine Antwort über das Fehlen von OKB und TKB und vervollständigen die Analyse.

Im Falle einer negativen Oxidase-Reaktion wird gesiebt, bis isolierte Kolonien erhalten werden und ihre Zugehörigkeit zu OKB und TKB gemäß den Abschnitten 8.2.3.3-8.2.3.4 (qualitative Analyse) bestätigt wird.

8.2.4. Bilanzierung von Ergebnissen

8.2.4.1. Gram-negative Kolonien werden als TBCs für einen negativen Oxidase-Test und eine Lactose-Fermentation bei 37 °C zur Erzeugung von Säure und Gas gezählt.

Gramnegative Kolonien werden in einem negativen Oxidasetest und einer Lactosefermentation bei 44°C mit Säure- und Gasproduktion als TKB gezählt.

8.2.4.2. In Abwesenheit von gewöhnlichen und thermotoleranten coliformen Bakterien auf allen Filtern wird das Ergebnis als „keine KBE von TCB in 100 ml“ und „keine KBE von TCB in 100 ml“ aufgezeichnet.

8.2.4.3. Sind alle gewachsenen verdächtigen Kolonien identifiziert, wird die Anzahl der koloniebildenden Einheiten TKB und TKB auf allen Filtern gezählt und das Ergebnis der CFU-Analyse in 100 ml Wasser ausgedrückt.

Die Berechnung erfolgt nach der Formel:

X ist die Anzahl der Kolonien in 100 ml;

das gefilterte Wasservolumen durch die Filter, auf denen das Konto geführt wurde;

a ist die Gesamtzahl der auf diesen Filtern gezählten Kolonien.

1. Bei der Aussaat von 3 Filtern von 100 ml wuchsen zwei Kolonien in 100 ml, auf den anderen beiden Filtern gab es kein Wachstum. Die Anzahl der gesamten oder thermotoleranten Coliformen wäre:

KBE OKB (TKB) in 100 ml

2. Bei der Aussaat von 10, 40, 100 und 150 ml auf Filter mit einem Filtervolumen von 40 ml wuchsen 4 isolierte Kolonien mit einem Filtervolumen von 100-3 OKB. Filter mit Volumen von 10 ml und 150 ml sind bewachsen und unterliegen nicht der Abrechnung. Die Gesamtzahl der OKB (TKB)-Kolonien auf den Filtern, auf denen isolierte Kolonien erhalten wurden, wird summiert und für ein Volumen von 100 ml neu berechnet.

KBE in 100 ml

8.2.4.4. Werden bei einer selektiven Kontrolle gleichartiger Kolonien ungleiche Ergebnisse erzielt, so werden die OKB- bzw. TKB-Zahlen unter Kolonien dieser Art nach folgender Formel berechnet:

, wo

X ist die Anzahl bestätigter Bakterien des gleichen Typs;

a ist die Gesamtzahl der Kolonien dieses Typs;

- Anzahl der getesteten;

c ist die Anzahl der Kolonien mit einem positiven Ergebnis.

Die Bilanzierungsergebnisse für jeden Kolonietyp werden summiert und dann gemäß den Abschnitten 8.2.4.3-8.2.4.4 berechnet.

8.2.4.5. Als Endergebnis wird angegeben: die Anzahl CFU TCB in 100 ml, davon die Anzahl CFU TCB in 100 ml.

Ein indikatives Ergebnis kann durch den Nachweis typischer coliformer Kolonien auf Endos Medium, gebildet von gramnegativen Oxidase-negativen Bakterien, ausgegeben werden. Die endgültige Antwort wird durch die Ergebnisse der Laktosefermentation bestätigt.

8.2.4.6. Bei Überlagerung von Kolonien oder kontinuierlichem Wachstum auf allen Filtern (Abschnitt 8.2.3.5) wird bei Bestätigung der Zugehörigkeit zu OKB und TKB ein qualitatives Ergebnis „Nachgewiesenes OKB in 100 ml“ ausgegeben.

Wenn alle Kolonien auf dem Filter Oxidase-positiv sind oder ihre Zugehörigkeit zu OKB und TKB nicht bestätigt wird, ist die Analyse abgeschlossen, das Protokoll sagt „Filter begraben“.

In beiden Fällen wird die Analyse wiederholt.

8.3. Bestimmung von gewöhnlichen und thermotoletalen coliformen Bakterien durch Titrationsverfahren

8.3.1. Definition des Begriffs eines Indikators

Definition des Konzepts der OKB- und TKB-Indikatoren gemäß Abschnitt 8.2.1.

8.3.2. Anwendungsgebiet

Die Titrationsmethode kann verwendet werden:

In Ermangelung von Materialien und Geräten, die zur Durchführung der Analyse durch Membranfiltration erforderlich sind;

Bei der Analyse von Wasser mit einem hohen Gehalt an Schwebstoffen;

Im Falle des Vorherrschens fremder Mikroflora im Wasser, die die Produktion isolierter Kolonien gewöhnlicher coliformer Bakterien auf den Filtern verhindert.

8.3.3. Methodenprinzip

Das Verfahren basiert auf der Akkumulation von Bakterien nach der Inokulation eines festen Wasservolumens in ein flüssiges Nährmedium, gefolgt von einer erneuten Ausplattierung auf einem differentiell dichten Nährmedium mit Lactose und der Identifizierung von Kolonien durch kulturelle und biochemische Tests.

8.3.4. Analyse durchführen

In der Studie des Trinkwassers qualitative Methode(laufende hygienische und epidemiologische Überwachung, Produktionskontrolle) 3 Volumina von 100 ml inokulieren.

Beim Studium von Wasser für den Zweck Quantifizierung OKB und TKB werden bei erneuter Analyse inokuliert: 3 Volumina von 100 ml, 3 Volumina von 10 ml, 3 Volumina von 1 ml.

Jedes Volumen des Testwassers wird in ein gemäß Abschnitt 5.5 hergestelltes Lactose-Pepton-Medium inokuliert. Inokulation von 100 ml und 10 ml Wasser wird in 10 und 1 ml konzentriertem Lactose-Pepton-Medium durchgeführt, Inokulation von 1 ml der Probe wird in 10 ml Medium normaler Konzentration durchgeführt.

Die Kulturen werden 48 Stunden lang bei (37 ± 1) °C inkubiert, nicht früher als 24 Stunden. Inkubation wird eine vorläufige Bewertung der Kulturpflanzen durchgeführt. Aus den Behältern, in denen Wachstum (Trübung) und Gasbildung festgestellt werden, wird eine bakteriologische Öse in Sektoren des Endo-Mediums (Abschnitt 5.4.1) inokuliert, um isolierte Kolonien zu erhalten.

Die Behälter ohne Wachstum und Gasbildung werden in einem Thermostat belassen und nach 48 Stunden endgültig untersucht.Kulturen ohne Anzeichen von Wachstum werden als negativ angesehen und werden nicht weiter untersucht. Aus den Behältern, in denen Trübung und Gasbildung oder nur Trübung festgestellt werden, erfolgt die Aussaat auf die Sektoren des Endo-Mediums.

Beimpfungen auf Endo-Medium werden bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C für (18-20) Stunden inkubiert.

Mit der Trübungs- und Gasbildung im Anreicherungsmedium und dem Wachstum auf dem Endo-Medium von Kolonien, die für Lactose-positive Bakterien typisch sind: dunkelrot oder rot, mit oder ohne metallischen Glanz, konvex mit rotem Zentrum und einem Aufdruck auf dem Nährstoff Medium reagieren sie positiv auf das Vorhandensein von gewöhnlichen coliformen Bakterien in einem gegebenen Probenvolumen.

Die Anwesenheit des OKB muss bestätigt werden:

Wenn im Akkumulationsmedium nur eine Trübung festgestellt wird;

Ob eine Zugehörigkeit zu laktosepositiven Kolonien vorliegt, wird vom Forscher bezweifelt. In diesen Fällen:

Suchen Sie nach einem Abdruck auf Endos Medium, nachdem Sie eine verdächtige Kolonie geloopt haben;

Führen Sie den Oxidase-Test gemäß Abschnitt 8.2.3.2 durch;

Bestätigen Sie die Zugehörigkeit zum Gram gemäß Abschnitt 8.2.3.3;

Die Fähigkeit zur Gasbildung wird bestätigt durch Inokulation von 1–2 isolierten Kolonien jedes Typs aus jedem Sektor auf dem Medium mit Lactose gemäß Abschnitt 5.6, gefolgt von einer Inkubation der Inokulationen bei einer Temperatur von (37 ± 1) ° C für ( 24-48) Stunden.

In Abwesenheit isolierter Kolonien wird auf dem Endo-Medium nach herkömmlichen bakteriologischen Methoden gesiebt.

Eine negative Antwort wird gegeben, wenn:

Es gibt keine Anzeichen für Wachstum im Akkumulationsumfeld;

Es gibt kein Wachstum in den Sektoren des Endo-Umfelds;

Auf den Sektoren des Endo-Mediums wuchsen Kolonien, die für coliforme Bakterien nicht charakteristisch sind (transparent mit gezackten Rändern, verschwommen usw.);

Alle Kolonien waren Oxidase-positiv;

Alle Kolonien waren Gram-positiv;

Wenn im Bestätigungstest auf dem Medium mit Kohlenhydraten keine Gasbildung festgestellt wird.

Zum Bestimmen thermotolerante coliforme Bakterien Arbeiten Sie mit Sektoren des Endo-Mediums, in denen typische Lactose-positive Kolonien gewachsen sind. Aussaat von 2-3 isolierten Kolonien jedes Typs aus jedem Sektor in Reagenzgläser mit einem der gemäß Absatz 5.6 hergestellten Lactosemedien.

Vor der Aussaat wird das Medium im Wasserbad oder in einem Thermostat auf 44 °C erhitzt. Unmittelbar nach der Inokulation werden die Röhrchen in einen Thermostat gestellt und bei einer Temperatur von (44 ± 0,5) °C für 24 Stunden inkubiert.Die Inokulationen können nach (4–6) Stunden betrachtet werden.

Mit der Gasbildung im Anreicherungsmedium, dem Wachstum von Lactose-positiven Bakterien auf dem Endo-Medium und dem Nachweis der Fähigkeit dieser Bakterien, 24 Stunden lang bei einer Temperatur von 44 °C Lactose zu Säure und Gas zu fermentieren, werden sie geben eine positive Antwort auf das Vorhandensein einer TKB-Wasserprobe in diesem Volumen. In allen anderen Fällen geben sie eine negative Antwort.

Es ist zulässig, die Abgabe einer Reaktion auf das Vorhandensein von TKB zu beschleunigen, um 1 ml aus den Volumina des Anreicherungsmediums zu inokulieren, wobei Trübung und Gasbildung in einem Reagenzglas mit einem Lactose-Pepton-Medium mit einem Schwimmer gemäß festgestellt werden Abschnitt 5.6 und auf eine Temperatur von 44 ° C vorgewärmt. Die Pflanzen werden 24 Stunden lang in einem Thermostat bei einer Temperatur von (44 ± 0,5) ° C aufbewahrt.Wenn Säure und Gas nachgewiesen werden, geben sie eine positive Antwort.

8.3.5. Bilanzierung von Ergebnissen

Bei der Untersuchung von 3 Volumina à 100 ml werden die Ergebnisse qualitativ ausgewertet und wenn OKB und TKB in mindestens einem der 3 Volumina nachgewiesen werden, erfolgt ein Eintrag im Protokoll „gefunden in 100 ml“.

Bei der Untersuchung der quantitativen Methode wird die wahrscheinlichste Zahl (MPN) der OKB und TKB gemäß Tabelle bestimmt. 1.1 Bewerbungen 1.

Das Ergebnis wird ohne Konfidenzintervall angegeben.

Im Falle einer negativen Antwort auf das Vorhandensein von TKB und TKB in allen untersuchten Volumina wird im Protokoll eine Schlussfolgerung „nicht in 100 ml gefunden“ ausgegeben.

8.4. Bestimmung von Sporen sulfitreduzierender Clostridien

8.4.1. Definition des Begriffs eines Indikators

Sulfit-reduzierende Clostridien sind sporenbildende anaerobe stäbchenförmige Mikroorganismen, die Natriumsulfit auf Eisensulfit-Agar bei einer Temperatur von (44 ± 1) °C für (16-18) Stunden reduzieren.

8.4.2. Methodenprinzip

Das Verfahren basiert auf dem Züchten von Feldfrüchten in Eisensulfit-Agar unter nahezu anaeroben Bedingungen und dem Zählen der Anzahl schwarzer Kolonien.

8.4.3. Analyse durchführen

8.4.3.1. Eine 20-ml-Wasserprobe wird in einem Wasserbad in Reagenzgläsern 15 Minuten lang auf eine Temperatur von (75 ± 5) °C erhitzt, um vegetative Formen auszuschließen.

Bei der Untersuchung von gechlortem Wasser kann auf das Erhitzen der Probe verzichtet werden.

Von jeder Trinkwasserprobe werden 20 ml kultiviert oder filtriert. Volumina ggf. so wählen, dass in Kulturen (auf Filtern) nicht mehr als 10-15 Kolonien wachsen. Dabei orientieren sie sich an den Ergebnissen früherer Studien.

Die Wasserfiltration wird gemäß den Anforderungen in Absatz 7 durchgeführt.

8.4.3.2. Bestimmung durch Filtration in Reagenzgläsern

Röhrchen mit nach 5.8 hergestelltem Eisensulfit-Agar werden vor der Inokulation im Wasserbad geschmolzen (nicht kochen!). Während der Aussaat wird das Medium in einem Wasserbad auf (70-80) °C erhitzt gehalten.

Nach Filtrieren der eingestellten Wassermenge wird der Membranfilter mit einer flambierten Pinzette an zwei gegenüberliegenden Kanten gefasst und in Form eines Röhrchens gebogen in ein Reagenzglas mit heißem Agar gestellt. Die Seite des Filters mit abgesetzten Bakterien zeigt nach innen. In diesem Fall wird der Filter begradigt und entlang der Wand des Reagenzglases angeordnet.

Unmittelbar nach der Inokulation wird das Röhrchen mit Agar und Filter zur Schaffung anaerober Bedingungen schnell abgekühlt, indem es in einen Behälter mit kaltem Wasser gegeben wird. Pflanzen bei (44 ± 1) °C für (16-18) Stunden kultivieren.

8.4.3.3. Bestimmung durch Filtration in Petrischalen

Petrischalen mit einem Durchmesser von (55-60) mm werden mit einer dünnen Schicht Eisen-Sulfit-Agar gefüllt. Legen Sie den Filter nach der Filtration mit der Filterfläche nach unten auf das erstarrte Nährmedium, damit keine Luftblasen unter dem Filter entstehen. Gießen Sie dann geschmolzenen Eisensulfit-Agar bis zur Oberseite der Schale, so dass der Deckel eng auf dem Medium sitzt, um anaerobe Bedingungen zu schaffen. Pflanzen bei (44 ± 1) °C für (16 - 1 8) Stunden kultivieren.

8.4.3.4. Bestimmung durch Direktsaat

Eisensulfit-Agarfläschchen und Wasserprobe werden wie in 8.4.3.1 beschrieben vorbereitet.

In sterile Reagenzgläser geben:

10 ml in 2 Reagenzgläsern (mindestens 30 ml Volumen) oder

5 ml in 4 Reagenzgläsern (je 15 ml).

Die Pflanzen werden mit heißem Eisensulfit-Agar in einer Menge gegossen, die das Wasservolumen um das Zweifache übersteigt. Gießen Sie das Medium entlang der Wand des Reagenzglases und vermeiden Sie die Bildung von Luftblasen. Danach wird das Röhrchen schnell abgekühlt, indem es in einen Behälter mit kaltem Wasser gelegt wird, um anaerobe Bedingungen zu schaffen. Die Inokulationen werden bei (44 ± 1) °C für (16–18) Stunden inkubiert.

8.4.4. Bilanzierung von Ergebnissen

Nur die Kulturen, bei denen isolierte Kolonien gewonnen werden, unterliegen der mengenmäßigen Erfassung. Es werden schwarze Kolonien gezählt, die sowohl auf Filtern als auch in der Dicke des Nährmediums gewachsen sind.

Das Ergebnis der Analyse wird als Anzahl koloniebildender Einheiten (KBE) von Sporen sulfitreduzierender Clostridien in 20 ml Wasser ausgedrückt.

Wenn auf allen Filtern keine schwarzen Kolonien wachsen, lautet die Antwort „nicht in 20 ml Wasser gefunden“.

Wenn aufgrund von konfluentem Wachstum keine Kolonien gezählt werden können, wird das Ergebnis als qualitativ bewertet, das Protokoll vermerkt „gefunden in 20 ml“. Um ein quantitatives Ergebnis zu erhalten, wird die Analyse gegebenenfalls wiederholt.

8.5. Definition von Coliphagen

8.5.1. Definition des Begriffs eines Indikators

Coliphagen sind Bakterienviren, die E. coli lysieren können und bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C nach (18 ± 2) h Bakterienrasen-Lysezonen (Plaques) auf Nähragar bilden.

8.5.2. Titrationsverfahren zur Bestimmung von Coliphagen

8.5.2.1. Methodenprinzip

Die Bestimmung von Coliphagen im Trinkwasser besteht in der vorläufigen Akkumulation von Coliphagen im Anreicherungsmedium auf der Kultur von E. coli und der anschließenden Identifizierung von Lysezonen (Aufhellung) des E. coli-Rasens auf Nähragar.

8.5.2.2. Anwendungsgebiet

Das Verfahren dient der laufenden Überwachung der Trinkwasserqualität.

8.5.2.3. Herstellung der Testkultur E. coli K12 StrR.

In allen Phasen der Studie wird eine wie folgt hergestellte Bakteriensuspension verwendet: Die Kultur von E. coli wird in ein Reagenzglas mit schrägem Nähragar mit Streptomycin (Abschnitt 5.3.5) inokuliert. Nach (18 ± 2) Stunden Inkubation bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C die Bakterien aus dem Gelenk mit 5 ml steriler Kochsalzlösung (0,85 %ige NaCl-Lösung) waschen und entsprechend dem Trübungsstandard eine Suspension herstellen von E. coli in einer Konzentration von 109 Bakterienzellen in 1 ml.

Es ist erlaubt, eine 4-Stunden-Brühenkultur von E. coli zu verwenden, die durch Züchten in einem Thermostat bei einer Temperatur von 37°C erhalten wurde. In 2 ml ist die Konzentration von 109 E. coli Bakterienzellen enthalten.

8.5.2.4. Durchführung einer qualitativen Analyse

10 ml einer 10-fachen Nährbouillon (hergestellt nach Abschnitt 5.2.2) und 1 ml einer vorbereiteten Waschlösung der Testkultur oder 2 ml einer 4-Stunden-Bouillonkultur (Abschnitt 8.5.2.3) in das Testwasser geben Probe mit einem Volumen von 100 ml.

Zur Kulturkontrolle werden 0,1 ml einer E. coli-Waschung (oder 0,2 ml einer 4-stündigen Bouillonkultur) in eine Petrischale gegeben und mit Nähragar bedeckt.

Die Testwasserprobe (100 ml) und die Petrischale mit E. coli-Kontrolle werden in einen Thermostaten gestellt und bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C für (18 ± 2) Stunden inkubiert.

Nach der Inkubation werden 10 ml der Testwasserprobe in ein Reagenzglas gegossen und 1 ml Chloroform zugegeben.

Das Reagenzglas wird mit einem sterilen Gummi- oder Silikonstopfen verschlossen, kräftig geschüttelt, um das Chloroform gleichmäßig über das Probenvolumen zu verteilen, und mindestens 15 Minuten lang bei Raumtemperatur belassen, bis das Chloroform vollständig ausgefällt ist.

Fügen Sie in vorgeschmolzenem und auf (45-49) °C gekühltem Nähragar die vorbereitete Auswaschlösung von E. coli-Bakterien (Abschnitt 8.5.2.3) in einer Menge von 1,0 ml Auswaschlösung (oder 2 ml einer 4-Stunden-Bouillon) hinzu Kultur) pro 100 ml Agar.

1 ml der mit Chloroform behandelten Probe (ohne Chloroform zu berühren) in eine sterile Petrischale mit einer Pipette aus einem Reagenzglas überführen und mit einer Mischung aus geschmolzenem und auf (45-49) °C gekühltem Nähragar mit einem Volumen von füllen (12-15) ml sowie eine zusätzliche Petridenschale für E. coli-Kontrollkulturen und schütteln Sie sie vorsichtig, um die Wasser- und Agarproben gleichmäßig zu mischen. Zur vollständigen Erstarrung werden die Becher 10 Minuten bei Raumtemperatur auf dem Tisch belassen. Nach dem Erstarren werden die Becher umgedreht und für (18 ± 2) Stunden bei 37 °C in einen Thermostat gestellt.

Bei der Durchführung einer Probenserie wird eine allgemeine Kontrolle für die gesamte Serie platziert.

Bilanzierung von Ergebnissen

Anzeigen von Kulturen, die im Durchlicht durchgeführt wurden.

Die Probe gilt als positiv bei vollständiger Lyse, Beseitigung mehrerer Plaques, einer Plaque auf der Platte mit einer Wasserprobe in Abwesenheit von Lysezonen auf der Kontrollplatte.

Das Analyseprotokoll vermerkt: Coliphagen wurden in 100 ml Wasser gefunden oder nicht gefunden (qualitatives Ergebnis).

Wenn in der Kulturkontrolle Lysezonen vorhanden sind, gilt das Ergebnis als ungültig.

8.5.2.5. Durchführung quantitativer Analysen

Gießen Sie die untersuchte Wasserprobe in einer Menge von 100 ml in 6 Volumina: 1 Flasche mit 50 ml und 5 Reagenzgläser mit 10 ml. Zu 50 ml der Probe werden 5 ml zehnfache Nährbouillon (gemäß 5.2.2) und 0,5 ml einer Waschlösung (oder 1 ml einer 4-stündigen Bouillonkultur) von E. coli-Bakterien (Abschnitt 8.5.2.3) hinzugefügt. . In jeweils 10 ml der Probe 1 ml zehnfache Nährbouillon und 0,1 ml einer Waschlösung (oder 0,2 ml einer 4-stündigen Bouillonkultur) von E. coli-Bakterien zugeben.

Zur Kulturkontrolle werden OD ml Bakterienwaschlösung (oder 0,2 ml 4-stündige Kulturbrühe) von E. coli in eine Petrischale gegeben und mit Nähragar gefüllt.

Die Pflanzen werden bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C für 18 ± 2 Stunden inkubiert.

Nach der Inkubation 10 ml aus einem Volumen von 50 ml in ein Reagenzglas geben. 1 ml Chloroform zu allen 6 Testvolumina geben. Verschließen Sie die Reagenzgläser mit sterilen Gummi- oder Silikonstopfen, schütteln Sie kräftig, um das Chloroform gleichmäßig über das Probenvolumen zu verteilen, und lassen Sie es mindestens 15 Minuten lang bei Raumtemperatur stehen, um das Chloroform auszufällen.

In den zuvor geschmolzenen und auf (45–49) °C gekühlten Nähragar die vorbereitete Auswaschung von E. coli-Bakterien (Abschnitt 8.5.2.3) mit einer Rate von 1,0 ml Auswaschung (oder 2 ml einer 4-Stunden-Brühenkultur) hinzufügen ) pro 100 ml Agar . Gießen Sie die vorbereitete Mischung in Petrischalen: 1 Tasse zur Kontrolle der E. coli-Kultur auf Lysogenität und eine Tasse für jede zu untersuchende Wasserprobe. Bei gleichzeitiger Analyse mehrerer Wasserproben wird eine Kontrolle der E. coli-Kultur platziert.

Nachdem sich der Agar verfestigt hat, werden die Schalen, die für die Inokulation der Proben bestimmt sind, in 6 Sektoren unterteilt, die gemäß den zu untersuchenden Volumina gekennzeichnet sind. 1 Tropfen Überstand (ohne Chloroform) mit einer Pasteurpipette (Mikropipette oder bakteriologische Öse mit Längshub) auf jeden Sektor aus dem entsprechenden Reagenzglas auftragen.

Nachdem die Tropfen getrocknet sind, die Becher mit den Testproben und den Kontrollbecher (18 ± 2) Stunden lang in einen Thermostaten bei (37 ± 1) °C stellen.

Bilanzierung von Ergebnissen

Die Ergebnisse werden im Durchlicht betrachtet.

Die Abrechnung erfolgt durch das Vorhandensein von Aufklärungszonen (Lyse) auf den Sektoren des E. coli-Rasens.

Bei Anwendung des Tropfbesiedelungsverfahrens mit einer Pipette bildet sich eine Lysezone in Form eines abgerundeten Flecks oder einzelner Plaques. Bei der Aussaat eines Längsstrichs mit einer bakteriologischen Schleife wird eine Lyse entlang des Strichs festgestellt.

Die Probe gilt als positiv, wenn auf mindestens einem Sektor eine Lysezone vorhanden ist, ohne Lysezonen auf der Kontrollplatte.

Die Bewertung erfolgt nach der Tabelle der wahrscheinlichsten Anzahl (MPN) von Plaque-bildenden Einheiten (PFU) (Tab. 1.2). Das Analyseprotokoll gibt die wahrscheinlichste Anzahl von Coliphagen in 100 ml Wasser und den Bereich möglicher Schwankungen an: LF PFU (untere Grenze – obere Grenze) von Coliphagen in 100 ml. Das Ergebnis ist halbquantitativ.

Wenn in der Kontrollschale Lysezonen vorhanden sind, gilt das Ergebnis als ungültig.

8.5.3. Direkte Methode zur Bestimmung von Coliphagen

.ein. Methodenprinzip

Die Bestimmung von Coliphagen in Trinkwasser besteht in der Untersuchung eines normalisierten Wasservolumens (100 ml) durch direkte Inokulation und anschließende Registrierung von Lysezonen (Plaques) auf dem E. coli-Rasen in Petrischalen mit Nähragar.

8.5.3.2. Domain

Die direkte Methode zur Isolierung von Coliphagen aus Wasser wird parallel zur Titrationsmethode in Studien nach epidemischen Indikationen durchgeführt.

8.5.3.3. Durchführung einer Analyse

In Nähragar doppelter Konzentration (S. 5.3.2), geschmolzen und auf (45-49) °C gekühlt, E. coli-Waschlösung (S. 8.5.2.3) in einer Menge von 2,0 ml Waschflüssigkeit (oder 4 ml einer 4-stündigen Bouillonkultur) pro 100 ml Agar, mischen. Die untersuchten 100 ml Wasser in 20 ml große Reagenzgläser gießen, auf (35-44) °C erhitzen und sofort (nicht später als 5 Minuten nach Erreichen der erforderlichen Temperatur) in 5 Petrischalen gießen und sofort 20 ml in jede Schale geben Agarmischungen mit E. coli-Kultur.

Zur Kontrolle der E. coli-Kultur 20 ml steriles, auf (35-44) °C vorgewärmtes Leitungswasser in eine Petrischale geben, 20 ml des vorbereiteten E. coli-Agars gießen und vorsichtig mischen.

Rühren Sie den Inhalt der Tassen vorsichtig um und lassen Sie ihn bei Raumtemperatur stehen, bis er fest geworden ist. Die Platten mit gefrorenem Agar kopfüber in einen Thermostaten stellen und (18 ± 2) Stunden bei einer Temperatur von (37 ± 1) °C inkubieren.

Bilanzierung von Ergebnissen

Das Betrachten von Pflanzen erfolgt im Durchlicht.

Die Bilanzierung der Ergebnisse erfolgt durch Zählen und Summieren der auf 5 Petrischalen gewachsenen Plaques. Die Ergebnisse werden in Plaque-bildenden Einheiten (PFU) pro 100 ml Wasserprobe ausgedrückt. In der Kontrollschale sollten sich keine Plaques befinden.

Am häufigsten sehen die Lysezonen wie transparente Flecken vor dem Hintergrund des Nähragar-Testkulturrasens in Form von runden isolierten Plaques (von 1 bis 5-7) mm im Durchmesser mit klar definierten oder gelöschten Rändern aus.

Bei hohen Phagenkonzentrationen wird ein anderes Lysemuster beobachtet.

Die Fusion negativer Kolonien ergibt einen „durchbrochenen“ Rasen von E. coli, das Wachstum einzelner Kolonien von E. coli vor dem Hintergrund einer kontinuierlichen Lyse oder ein vollständiges Fehlen von Wachstum auf der Schale.

Bei direkter Inokulation ist eine Lyse möglich, maskiert durch inhomogen verfestigten Agar, sowie verschlossen durch begleitende Mikroflora. Kondensattröpfchen und inhomogen abgebundener Agar aus der Direktinokulation können zur Bildung von Artefakten im E. coli-Rasen führen, die optisch einer Lyse ähneln.

Eine vorläufige Abrechnung der Ergebnisse kann nach (5-6) Stunden Inkubation erfolgen. In diesem Stadium kann bei Vorhandensein klarer Lysezonen eine vorläufige Antwort auf das Vorhandensein von Coliphagen im Wasser gegeben werden.

Die endgültige quantitative Erfassung der Direktimpfung erfolgt nach (18 ± 2) Stunden Die Ergebnisse werden als Anzahl der Plaque-bildenden Einheiten (PFU) pro 100 ml Wasserprobe ausgedrückt.

Wird ein konfluentes Plaquewachstum festgestellt und ist das Zählen schwierig, so kann ein qualitatives Ergebnis nach Direktsaat ausgegeben werden: „Gefunden in 100 ml Wasser“.

Wird beim Arbeiten mit der direkten Methode ein negatives Ergebnis erzielt, wird die endgültige Antwort nach den Ergebnissen der Titradion-Methode ausgegeben.

Wenn in der Kontrollschale Lysezonen vorhanden sind, wird das Ergebnis der Studie als ungültig angesehen.

8.5.4. Steuerelemente einrichten

8.5.4.1. Negative Kontrolle

Die Negativkontrolle bestätigt das Fehlen einer Phagenkontamination von Nährmedien, Laborglaswaren, Geräten in den Phasen der Vorbereitung und Analyse und ermöglicht Ihnen auch, die Fähigkeit der Testkultur E zu bewerten. coli für einen einheitlichen Rasen.

Die Negativkontrolle ist die Untersuchung von sterilem Leitungswasser, die analog zur analysierten Wasserprobe durchgeführt wird. Bei der Wasseranalyse nach der Titrationsmethode werden also 10 ml steriles Leitungswasser in ein zusätzliches Reagenzglas gegeben. Bei der Analyse von Wasser durch Direktimpfung werden 20 ml steriles Leitungswasser in eine zusätzliche sechste Petrischale gegeben.

Weitere Kulturen werden in gleicher Weise wie die Hauptproben auf Coliphagen untersucht.

Bei der Analyse einer Probenserie kann es für jede Analyseart eine Negativkontrolle geben: Titration und direkt. In diesem Fall wird die Negativkontrolle nach Bearbeitung aller Proben dieser Serie durchgeführt.

Wenn in den Negativkontrollplatten Plaques von Coliphagen gefunden werden, sind die Ergebnisse der Untersuchung der gesamten Serie von Wasserproben ungültig.

Es ist notwendig, die Sterilität von Laborgeräten, Utensilien, Nährmedien zu überprüfen und die Kontrollimpfung für die Reinheit des E. coli K12 F + StrR-Teststamms zu wiederholen.

Die Häufigkeit der Negativkontrolle - 1 Mal pro Tag.

8.5.4.2. Verfahren zur Bestätigung der Phagennatur der Lyse

In Zweifelsfällen, wenn sowohl mit Titrations- als auch mit direkten Methoden gearbeitet wird, ist es notwendig, eine Kontrollimpfung durchzuführen, um die Phagennatur der Lyse zu bestätigen.

Dazu wird mit einer bakteriologischen Öse ein coliphagenverdächtiges Agarstück entnommen, in 5 ml Nährbouillon gegeben, dort mit einem Tropfen E. coli-Testkultur versetzt und bei 37 °C für (16 -18) Stunden Die resultierende Kultur wird mit Chloroform behandelt und auf das Vorhandensein von Phagen untersucht. Die Aussaat erfolgt mit einer Öse oder Pipette auf Nähragarsektoren auf die gleiche Weise wie in Abschnitt 8.5.2.5 beschrieben. Die Lyse auf einem der Sektoren wird als Bestätigung des Vorhandenseins des Phagen angesehen.

Kommentare zur Tabelle. Bei der Schätzung der OKB- und TKB-Menge in 100 cm 3 Wasser sollten mindestens drei Volumen Wasser (jeweils 100 cm 3 ) analysiert werden. Bei der Bewertung von OKB und MCH ist eine Überschreitung des Standards bei 95 % der im Laufe des Jahres entnommenen Proben nicht zulässig. Coliphagen werden nur in Wasserversorgungssystemen aus Oberflächenquellen bestimmt, bevor Wasser in das Verteilungsnetz eingespeist wird, gleiches gilt für das Vorhandensein von Giardia-Zysten. Der Gehalt an Sporen sulfitreduzierender Clostridien wird nur bei der Bewertung der Wirksamkeit der Wasseraufbereitungstechnologie bestimmt. Bei Nachweis von TKB, OKB, Coliphagen oder mindestens einem der angegebenen Indikatoren wird eine erneute Notfalluntersuchung des Wassers auf TKB, OKB und Coliphagen durchgeführt. Parallel dazu wird Wasser auf Chloride, Ammoniumstickstoff, Nitrate und Nitrite untersucht. Werden in der Nachprobe mehr als zwei TKB pro 100 cm 3 und/oder TKB und/oder Coliphagen nachgewiesen, so erfolgt eine Untersuchung auf pathogene Bakterien der Darmgruppe und/oder Enteroviren. Dieselbe Studie für pathogene Enterobakterien und Enteroviren wird nach epidemiologischen Indikationen auf Beschluss der territorialen Zentren von Rospotrebnadzor durchgeführt.

Thermotolerante coliforme Bakterien (TCB) sind Teil der OKB und haben alle ihre Eigenschaften, aber im Gegensatz zu ihnen sind sie in der Lage, Lactose zu Säure, Aldehyd und Gas bei einer Temperatur von +44 ° C für 24 Stunden zu fermentieren.Daher unterscheiden sich TKB von OKB in der Fähigkeit dazu Milchzucker bei höherer Temperatur zu Säure und Gas vergären.

Die zu bestimmenden Indikatoren, die Anzahl und Häufigkeit der Studien hängen von der Art der Wasserversorgungsquelle und der Größe der Bevölkerung ab, die mit Wasser aus diesem Wasserversorgungssystem versorgt wird. Diese Daten sind in angegeben SanPiN 2.1.4.1074–01. In den Richtlinien für die hygienische und mikrobiologische Untersuchung von Trinkwasser ( MUK 4.2.1018-01 des Gesundheitsministeriums der Russischen Föderation) werden Verfahren zur sanitären und mikrobiologischen Kontrolle der Trinkwasserqualität geregelt.

Gesamtzahl der Mikroorganismen- dies ist die Gesamtzahl der mesophilen (mit einem Temperaturoptimum von +37 °C) aeroben und fakultativ anaeroben Mikroorganismen (MAFAnM), die mit einer zweifachen Erhöhung sichtbar sind und bei einer Temperatur von +37 °C Kolonien auf Nähragar bilden können für 24 Stunden Um diesen Indikator zu identifizieren, wird 1 ml Wasser in eine sterile Petrischale gegeben und mit geschmolzenem (Temperatur nicht höher als +50 ° C) Fleisch-Pepton-Agar gefüllt, und einen Tag später wird die Anzahl der gewachsenen Kolonien gezählt .

BESTIMMUNG VON OKB UND TKB NACH DER METHODE VON MEMBRANFILTERN

Das Verfahren basiert auf dem Filtern bestimmter Wassermengen durch Membranfilter. Für diese Zwecke werden Filter mit einem Porendurchmesser von 0,45 Mikron und einer Größe von 35 oder 47 mm Durchmesser verwendet (Haushaltsfilter "Vladipor" MFAS-S-1, MFAS-S-2, MFAS-MA (Nr. 4- 6) oder ausländisch - ISO 9000 oder EN 29000). Membranfilter werden nach Herstellerangaben für die Analyse vorbereitet.

BESTIMMUNG VON OKB UND TKB NACH DER TITRIERMETHODE

Das Verfahren basiert auf der Akkumulation von Bakterien nach Inokulation bestimmter Wasservolumina in flüssigen Nährmedien, gefolgt von einer erneuten Inokulation auf einem differentiell dichten Medium mit Lactose und der Identifizierung von Kolonien durch kulturelle und biochemische Tests. Bei der Untersuchung von Trinkwasser nach einer qualitativen Methode (aktuelle sanitäre und epidemiologische Überwachung) werden drei Volumina von 100 cm 3 gesät. Bei der Untersuchung von Wasser zur Quantifizierung von OKB und TKB (Reanalyse) werden 100, 10 bzw. 1 cm 3 inokuliert – drei Volumina jeder Serie.

SANITÄR-MIKROBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNG DES BODENS

Der Boden bietet einer Vielzahl von Mikroorganismen Unterschlupf. Allein die Anzahl der Bakterien im Boden erreicht also 10 Milliarden Zellen pro 1 g. Mikroorganismen sind an der Bodenbildung und Bodenselbstreinigung, am Kreislauf von Stickstoff, Kohlenstoff und anderen Elementen in der Natur beteiligt. Neben Bakterien leben darin Pilze, Protozoen und Flechten, die eine Symbiose von Pilzen mit Cyanobakterien darstellen. Aufgrund der schädlichen Wirkung von UV-Strahlen, Austrocknung und anderen Faktoren gibt es relativ wenige Mikroorganismen auf der Bodenoberfläche. Die Ackerbodenschicht mit einer Dicke von 10–15 cm enthält die meisten Mikroorganismen. Mit zunehmender Tiefe nimmt die Anzahl der Mikroorganismen ab, bis sie in einer Tiefe von 3–4 m verschwinden Die Zusammensetzung der Bodenmikroflora hängt von Art und Zustand, Vegetationszusammensetzung, Temperatur, Feuchtigkeit usw. ab. Die meisten Bodenmikroorganismen können sich bei neutralem pH-Wert, hoher relativer Luftfeuchtigkeit und Temperaturen von 25 bis 45 °C entwickeln.

Im Boden leben sporenbildende Stäbchen Bazillus und Closlridium. Nicht pathogene Bazillen (Vas. megaterium, Vas. subtilis usw.). Zusammen mit Pseudomonas, Proteus und einigen anderen Bakterien sind sie ammonifizierend und bilden eine Gruppe von Fäulnisbakterien, die organische Substanzen mineralisieren. Pathogene sporenbildende Stäbchen (Erreger von Anthrax, Botulismus, Tetanus, Gasbrand) können lange überleben und sich teilweise sogar im Boden vermehren ( ClostridiumBotulinus). Der Boden ist auch ein Lebensraum für stickstofffixierende Bakterien, die molekularen Stickstoff assimilieren. (Azotobacter, Azomonas, Mycobacterium usw.). Stickstofffixierende Arten von Cyanobakterien oder Blaualgen werden verwendet, um die Fruchtbarkeit von Reisfeldern zu verbessern.

Mitglieder der Familie der Darmbakterien (Fam. Enterobakterien) - E. coli, Erreger von Typhus, Salmonellose und Ruhr, sterben, sobald sie mit Kot im Boden sind, ab. In sauberen Böden sind Escherichia coli und Proteus selten; Der Nachweis von Bakterien der Escherichia coli-Gruppe (coliforme Bakterien) in signifikanten Mengen ist ein Indikator für die Kontamination des Bodens mit menschlichen und tierischen Fäkalien und weist auf seinen hygienischen und epidemiologischen Nachteil aufgrund der Möglichkeit der Übertragung von Erregern von Darminfektionen hin. Die Anzahl der Protozoen im Boden reicht von 500 bis 500.000 pro 1 g Boden. Protozoen ernähren sich von Bakterien und organischen Rückständen und verursachen Veränderungen in der Zusammensetzung der organischen Bodensubstanz. Es gibt auch zahlreiche Pilze im Boden, deren Toxine, die sich in der menschlichen Nahrung ansammeln, Vergiftungen verursachen - Mykotoxikose und Aflatoxikose.

Die Ergebnisse der Bodenforschung werden berücksichtigt bei der Bestimmung und Vorhersage des Grades ihrer Gefährdung der Gesundheit und der Lebensbedingungen der Bevölkerung in Siedlungen (nach epidemiologischen Indikationen), der Prävention von Infektionskrankheiten und nicht ansteckenden Krankheiten (präventive Hygieneüberwachung) , die aktuelle Hygienekontrolle von Gegenständen , die direkt oder indirekt die Umwelt beeinflussen .

Bei der Durchführung der aktuellen sanitären Überwachung des Bodenzustands beschränken sie sich auf eine kurze sanitäre und mikrobiologische Analyse, die das Vorhandensein und den Grad der fäkalen Kontamination angibt. Die in dieser Gruppe enthaltenen Indikatoren charakterisieren auch die Prozesse der Bodenselbstreinigung von organischen Schadstoffen und Enterobakterien. Eine vollständige hygienische und mikrobiologische Analyse des Bodens wird in Form einer vorbeugenden sanitären Überwachung durchgeführt. Der Einfluss chemischer Schadstoffe auf die Biogeozänose beinhaltet die Untersuchung ihrer bakteriziden Wirkung auf die Bodenmikrobiota, als Ergebnis: eine Veränderung der Gemeinschaft von Bodenmikroorganismen, die enzymatische Aktivität des Bodens. Nach epidemischen Indikationen erfolgt eine Indikation pathogener Mikrobiota.

Im Labor wird eine durchschnittliche Probe aus 5-Punkt-Bodenproben hergestellt, die an einem Standort entnommen, gründlich gemischt und in einem sterilen Porzellanbecher mit einem Gummistößel 5 Minuten lang gerieben werden. Fremde Verunreinigungen (Pflanzenwurzeln, Steine, Späne) werden entfernt, indem der Boden durch ein Sieb gesiebt wird, das vorher mit einem mit 96% Ethylalkohol angefeuchteten Wattestäbchen abgewischt wird. Aus der gemittelten Probe werden Proben entnommen (von 1 bis 50–55 g, je nach Liste der ermittelten Indikatoren) und eine 1:10-Suspension in sterilem Leitungswasser (10 g Erde pro 90 cm 3 Wasser) hergestellt. Zur Desorption von Mikroorganismen von der Oberfläche von Bodenpartikeln wird die vorbereitete Bodensuspension 3 min auf einem mechanischen Dispergiermischer geschüttelt. Nach dem Absetzen der Suspension für 30 s werden aufeinanderfolgende 10-fache Verdünnungen des Bodens auf eine Konzentration von 10 –4 –10 –5 g/cm 3 hergestellt.

Die Bewertung der Ergebnisse sanitärer und mikrobiologischer Untersuchungen von Böden erfolgt durch Vergleich der Daten, die auf Versuchs- und Kontrollparzellen mit Böden gleicher Zusammensetzung in unmittelbarer territorialer Nähe erhalten wurden. Schemata zur Bewertung des sanitären Zustands des Bodens anhand individueller sanitärer und mikrobiologischer Kriterien sind in dargestellt MU-Nr. 14446–76(Tabelle 2).

Tabelle 2

	Titer (g)			Index thermophiler Mikroorganismen (Anzahl Zellen/g)
	BGKP	Nitrifizierende Bakterien	Clostridien
			0,01 und darüber
verschmutzt
Stark verschmutzt	0,009 und darunter	0,0009 und darunter	0,00009 und darunter

BEIM MU 2.1.7.730–99 „Hygienische Beurteilung der Bodenqualität in besiedelten Gebieten“ ein Schema zur Bewertung der Seuchengefährdung von Böden in besiedelten Gebieten wird vorgestellt. In diesem Dokument werden zur Beurteilung der Intensität der biologischen Belastung des Bodens Indikatoren wie CGB und der Enterococcus-Index und zur Beurteilung der Seuchengefahr des Bodens pathogene Enterobakterien und Enteroviren herangezogen.

STUDIE DER MIKROBIELLEN BEOBACHTUNG DER LUFTUMWELT

Mikroorganismen gelangen aus dem Boden, dem Wasser sowie von der Körperoberfläche, aus den Atemwegen und mit Speicheltropfen von Menschen und Tieren in die Luft. Hier finden sich kokken- und stäbchenförmige Bakterien, Bazillen, Clostridien, Actinomyceten, Pilze und Viren. Luft gilt als Faktor bei der Übertragung von Atemwegsinfektionen, bei denen der Erreger durch Tröpfchen oder Staub in der Luft übertragen wird. Sonnenlicht und andere Faktoren tragen zum Absterben der Luftmikroflora bei. Um die mikrobielle Belastung der Luft zu reduzieren, wird eine Nassreinigung der Räumlichkeiten in Kombination mit einer Belüftung und Reinigung (Filtration) der einströmenden Luft durchgeführt. Aerosoldesinfektion und Behandlung von Räumen mit UV-Strahlungslampen werden ebenfalls verwendet (z. B. in mikrobiologischen Labors und Operationseinheiten).

In der Luft von Innenräumen sind viele Mikroorganismen enthalten, deren mikrobielle Kontamination von den Reinigungsbedingungen der Räume, der Beleuchtungsstärke, der Anzahl der Personen im Raum, der Häufigkeit der Belüftung usw. abhängt. Eine größere Anzahl von Mikroorganismen ist in der Luft von Großstädten vorhanden, eine kleinere Anzahl - in der Luft ländlicher Gebiete. Besonders wenig Mikroorganismen gibt es in der Luft über Wäldern, Bergen und Meeren.

Die mikrobiologische Untersuchung der Luft sieht die Bestimmung des Gesamtgehalts an Mikroorganismen sowie Staphylokokken in 1 m 3 Luft vor. In einigen Fällen wird die Luft auf gramnegative Bakterien, Schimmelpilze und hefeähnliche Pilze getestet. Je nach Seuchenindikation kann das Spektrum der in der Luft nachgewiesenen Erreger erweitert werden.

Luftproben werden durch Aspiration mit dem Krotov-Apparat genommen.

Die Anwendung der Koch-Sedimentationsmethode ist durchaus akzeptabel. Die folgenden Räumlichkeiten der Gesundheitseinrichtungen sind Gegenstand der Untersuchung - Operationsblöcke, Umkleide- und Behandlungsräume, aseptische Stationen (Boxen), Stationen der Abteilung für Anästhesiologie und Reanimation, Stationen und Korridore von medizinischen Abteilungen, Räumlichkeiten von Apotheken, Sterilisation und Geburtshilfe - gynäkologische Abteilungen und Stationen (Abteilungen) für Bluttransfusionen.

Die Untersuchung der Luft nach der Koch-Methode wird in äußerst seltenen Fällen zur ungefähren Einschätzung des Grades der mikrobiellen Luftverschmutzung verwendet. Um die Gesamtzahl der Mikroorganismen in der Luft von Operationssälen zu bestimmen, werden vor Arbeitsbeginn Platten mit Nähragar geöffnet und etwa auf Höhe des OP-Tisches aufgestellt – eine Platte in der Mitte und vier in den Ecken des Raums („ Envelope-Methode“) für 10 Minuten und zum Nachweis von Staphylococcus aureus (Becher mit Eigelb-Salz-Agar (YSA) werden verwendet – für 40 Minuten werden die Kulturen in einem Thermostat bei +37 ° C und einen Tag bei Raumtemperatur inkubiert, dann die Anzahl Kolonien werden gezählt Auf 2 Oberflächen des Nährmediums wird in 5 Minuten Exposition eine solche Bakterienmenge abgelagert, die in 10 Liter Luft enthalten ist (1000 Liter sind in 1 m 3 enthalten), gleichzeitig mehr auf Nähragarplatten sollten nicht mehr als 5 Mikroorganismenkolonien wachsen, und Staphylococcus aureus sollte nicht auftauchen.

GESUNDHEITLICHE UND MIKROBIOLOGISCHE KONTROLLE VON LEBENSMITTELN

Lebensmittelprodukte können mit verschiedenen Mikroorganismen kontaminiert sein, was zu ihrem Verderben, der Entwicklung von Lebensmittelvergiftungen und -vergiftungen sowie zu Infektionen wie Anthrax, Brucellose, Tuberkulose usw. führt. Tierkrankheiten, Verletzungen oder ungünstige Haltungsbedingungen tragen zur Verletzung der Schutzbarrieren des Körpers und zur Translokation (Übertragung) von Mikroorganismen in normalerweise sterile Gewebe und Organe bei (intravitale Aussaat). Dadurch wird das Gewebe des geschlachteten Tieres mit Protozoen, Clostridien und anderen Mikroben kontaminiert; mit Mastitis in der Milch von Staphylokokken und Streptokokken getroffen. Auch eine Sekundärkontamination von Lebensmitteln mit Mikroorganismen ist möglich. In diesem Fall sind Umweltobjekte (Boden, Wasser, Transport usw.) sowie kranke Menschen und Bakterienträger die Quelle der Verschmutzung. Bei einer niedrigen Lagertemperatur von Fleisch und Fleischprodukten, sogar in gefrorenem Fleisch, können Mikroben, die sich unter psychrophilen Bedingungen vermehren können (Pseudomonas, Proteus, Aspergillus, Penicillium usw.), überwiegen. Im Fleisch lebende Mikroben verursachen Schleimbildung; es entwickelt die Fermentations- und Fäulnisprozesse, die durch Clostridium, Proteus, Pseudomonas und Pilze verursacht werden.

Getreide, Nüsse bei hoher Luftfeuchtigkeit können mit Pilzen (Aspergillus, Penicillium, Fusarium usw.) kontaminiert sein, was zur Entwicklung von Lebensmittelmykotoxikosen führt.

Fleischgerichte (Gelee, Fleischsalate, Hackfleischgerichte) können Krankheiten verursachen, die mit Salmonellen, Shigellen, durchfallerzeugenden Escherichia coli, Proteus, enterotoxigenen Stämmen von Staphylokokken, Enterokokken, die sich in ihnen vermehren, verbunden sind, Closlridium perfringens und Bacillus cereus.

Milch und Milchprodukte können ein Übertragungsfaktor für Brucellose, Tuberkulose und Shigellose sein. Möglich ist auch die Entwicklung einer Lebensmittelvergiftung durch Vermehrung von Salmonellen, Shigellen und Staphylokokken in Milchprodukten. Eier, Eipulver und Melange bei endogener Salmonellen-Primärinfektion von Eiern, insbesondere Enteneiern, sind die Ursache der Salmonellose.

Fisch und Fischprodukte sind eher mit Bakterien kontaminiert Closlridium botulinum und Vibrio parahaemolylicus- Erreger von Lebensmittelvergiftungen und Toxikoinfektionen. Diese Krankheiten werden auch beim Verzehr von Fischprodukten beobachtet, die mit einer großen Menge von Salmonellen, Proteus, Bacillus cereus, Closlridium perfringens.

Gemüse und Obst können mit durchfallerzeugenden Escherichia coli, Shigella, Proteus, enteropathogenen Staphylokokkenstämmen kontaminiert und ausgesät werden. Gesalzene Gurken können die Ursache einer Toxikoinfektion sein, die durch verursacht wird Vibrio parahaemolyticus.

Alle Ergebnisse der mikrobiologischen Analyse von Lebensmitteln können frühestens nach 48–72 Stunden, d.h. wenn das Produkt bereits verkauft werden kann. Daher ist die Kontrolle dieser Indikatoren rückblickend und dient der sanitären und hygienischen Bewertung eines Unternehmens, das Lebensmittel herstellt oder verkauft.

Der Nachweis einer erhöhten allgemeinen mikrobiellen Kontamination, coliformer Bakterien, deutet auf eine Verletzung des Temperaturregimes bei der Herstellung und/oder Lagerung des Fertigproduktes hin. Der Nachweis von pathogenen Mikroorganismen gilt als Indikator für die epidemiologische Belastung des Kantinen-Handwerksbetriebes.

Die Rationierung mikrobiologischer Indikatoren der Lebensmittelsicherheit erfolgt für die meisten Gruppen von Mikroorganismen nach einem alternativen Prinzip, d.h. Die Masse des Produkts ist normalisiert, in der Bakterien der Escherichia coli-Gruppe, die meisten bedingt pathogenen Mikroorganismen sowie pathogene Mikroorganismen, inkl. Salmonellen u Listeria monocytogenes. In anderen Fällen spiegelt der Standard die Anzahl der koloniebildenden Einheiten in 1 g (cm 3) des Produkts wider (CFU / g, cm 3).

In Massenverbrauchsprodukten, für die in den Tabellen SanPiN 2.3.2.1078-01. Hygienische Anforderungen an die Sicherheit und den Nährwert von Lebensmitteln es gibt keine mikrobiologischen Standards, pathogene Mikroorganismen, inkl. Salmonellen sind in 25 g des Produkts nicht erlaubt.

Die hygienische und bakteriologische Kontrolle muss Gegenstand der Zubereitung und des Verkaufs von Lebensmitteln sein.

Die Daten der sanitären und mikrobiologischen Untersuchung ermöglichen es, den sanitären und hygienischen Zustand der untersuchten Objekte objektiv zu beurteilen, Verstöße gegen das Hygieneregime zu erkennen und gezielte Maßnahmen zu deren Beseitigung zeitnah durchzuführen.

Es gibt verschiedene Methoden zur Probenahme aus verschiedenen Geräten und Beständen für die mikrobiologische Forschung: Methoden der Abstriche, Abdrücke, Agarfüllung. Von diesen wird am häufigsten die Methode der Tamponwäsche verwendet.

Die hygienische und mikrobiologische Kontrolle basiert auf dem Nachweis von Bakterien der E. coli-Gruppe (BGKP) in den Wäschen - Indikatoren für eine fäkale Kontamination der untersuchten Objekte. Untersuchungen zu Staphylococcus aureus, pathogene Bakterien der Darmfamilie, Bestimmung der Gesamtkeimbelastung werden nach Indikation durchgeführt. So ist beispielsweise bei der Untersuchung von Konditoreien, Molkereien und Lebensmittelabteilungen medizinischer Einrichtungen die Entnahme von Abstrichen zum Nachweis von Staphylokokken erforderlich.

Objekte der sanitären und mikrobiologischen Kontrolle:

∨ Waschen von Händen und Overalls von Arbeitern in der Lebensmittelversorgung (Wasserversorgung);

∨ Ausrüstung, Inventar, Utensilien und andere Gegenstände;

∨ Fertiggerichte, kulinarische und verderbliche Produkte;

∨ Rohstoffe und Halbfabrikate im Laufe des technologischen Prozesses (nach epidemiologischen Angaben);

∨ Trinkwasser aus zentralen und insbesondere dezentralen Wasserversorgungsquellen.

Handwaschmittel von den Händen des Personals, das an der Verarbeitung von Rohprodukten beteiligt ist, werden vor Arbeitsbeginn eingesammelt. Die Abstriche werden innerhalb von 2 Stunden an das bakteriologische Labor geliefert und können maximal 6 Stunden bei einer Temperatur von +1–10 °C gelagert und transportiert werden.

Im Labor werden Tupfer auf Kessler-Medium mit Lactose oder KODA inokuliert, während ein Tupfer mit dem Medium in das Reagenzglas abgesenkt und die restliche Waschflüssigkeit überführt wird. Kulturen auf Kessler- und KODA-Medien werden bei 37°C inkubiert.

Nach 18–24 Stunden werden alle Reagenzgläser mit Kessler-Medium auf Sektoren von Bechern mit Endo-Medium beimpft, bei KODA-Medium wird nur dann beimpft, wenn sich die Farbe des Mediums ändert (von ursprünglich violett zu gelb oder grün) oder trüb wird . Inokulationen auf Endo-Medium werden bei 37 °C für 18–24 Stunden gezüchtet.

Abstriche werden aus Kolonien hergestellt, die für BGKP charakteristisch sind, mit Gram gefärbt, mikroskopisch, falls erforderlich, werden sie zusätzlich gemäß allgemein anerkannten Tests für Bakterien der Escherichia coli-Gruppe identifiziert. Bei der Bewertung der Ergebnisse einer hygienischen und mikrobiologischen Untersuchung gehen sie von den Standards aus, dass in den aus Lebensmittelbetrieben entnommenen Abstrichen BGKP fehlen sollte. Der Nachweis von BGKP in Abstrichen von Oberflächen von sauberen, für die Arbeit vorbereiteten Gegenständen, Inventar, Ausrüstung, Händen und Hygienekleidung des Personals weist auf einen Verstoß gegen das Hygieneregime hin. Bei wiederholtem Nachweis von CGB in einem signifikanten Prozentsatz von Abstrichen wird empfohlen, die Abstriche auf das Vorhandensein von pathogenen Enterobakterien zu testen. Gleichzeitig werden der Tupfer und die Spülflüssigkeit auf Anreicherungsmedien geimpft - Selenitbrühe oder Magnesiummedium (Muller- und Kaufman-Medium können verwendet werden). Die weitere Recherche erfolgt nach der allgemein anerkannten Methode.

STUDIE VON MILCH UND MILCHPRODUKTEN

Mikroflora von Milchprodukten

Milch ist ein sehr günstiger Nährboden für die Entwicklung vieler Mikroorganismen. Nach dem Verzehr von infizierter Milch und Milchprodukten Infektionen wie Typhus, Ruhr, Cholera, Escherichiose, Brucellose, Tuberkulose, Scharlach, Mandelentzündung, Q-Fieber, Maul- und Klauenseuche, Zeckenenzephalitis, Salmonellen-toxische Infektionen, Staphylokokken-Enterotoxin-Vergiftung, etc.

Es gibt spezifische und unspezifische Mikroflora von Milch und Milchprodukten.

Zu spezifische Mikroflora von Milch und Milchprodukten umfassen Mikroben - Krankheitserreger der Milchsäure-, Alkohol- und Propionsäuregärung. Mikrobiologische Prozesse aufgrund der lebenswichtigen Aktivität dieser Mikroorganismen liegen der Herstellung von fermentierten Milchprodukten (Hüttenkäse, Kefir, Sauermilch, Acidophilus usw.) zugrunde.

Milchsäuregärungsbakterien kommen in Frage normale Mikroflora von Milch und Milchprodukten . Die Hauptrolle bei der Säuerung von Milch und Milchprodukten spielen Milchstreptokokken. S. lactis, S. cremaris und andere Weniger aktive Rassen von Milchsäure-Streptokokken ( S. citrovorus, S. lactis subsp. Diacetylactis) produzieren flüchtige Säuren und Aromastoffe und werden daher häufig in der Käseherstellung verwendet. Zur Gruppe der Milchsäurebakterien gehören auch Milchsäuresticks: Lactobacterium bulgaricum, Lactobacterium casei, Lactobacterium acidophilus usw.

Die Hauptverursacher der alkoholischen Gärung in Milch und Milchprodukten sind Hefen ( Saccharomyces lactis usw.).

Unspezifische Mikroflora der Milch bestehend aus Fäulnisbakterien Proteus), aerobe und anaerobe Bazillen ( B. subtilis, B. megatherium, C. putrificum) und viele andere

Die mikrobielle Kontamination der Milch beginnt bereits im Euter. Beim Melken erfolgt die zusätzliche Aussaat von der Oberfläche der Euterhaut, von den Händen, vom Gefäß, wo es aus der Raumluft eintritt. Die Intensität dieser zusätzlichen Kontamination hängt im Allgemeinen davon ab, wie grundlegende sanitäre und hygienische Bedingungen bei der Milchgewinnung eingehalten werden. Auch schlechte Lagerbedingungen für Milch können zum weiteren Wachstum der Mikroflora beitragen.

bakterizide Phase. Frisch gemolkene Milch, obwohl sie bereits Hunderte von Mikroben pro 1 cm 3 enthält (hauptsächlich Staphylokokken und Streptokokken), hat aufgrund des Vorhandenseins normaler Antikörper bakterizide Eigenschaften. Daher wird die Entwicklung von Bakterien in der Milch für einige Zeit verzögert. Dieser Zeitraum wird als bakterizide Phase bezeichnet. Die Dauer der bakteriziden Phase reicht von 2 bis 36 Stunden, abhängig von den physiologischen Eigenschaften des Tieres (in der frühen Laktationsphase ist die bakterizide Aktivität von Milch höher).

Die Lagerung von Milch bei erhöhter Temperatur (30–37 °C) verkürzt die Dauer der bakteriziden Phase drastisch. Den gleichen Effekt hat die intensive zusätzliche Kontamination der Milch mit Mikroben.

Nach Ablauf der bakteriziden Phase beginnt die Entwicklung der Mikroflora. Seine Artenzusammensetzung ändert sich im Laufe der Zeit unter dem Einfluss von Änderungen der biochemischen Eigenschaften der Umwelt und aufgrund antagonistischer und symbiotischer Beziehungen zwischen mikrobiellen Arten.

Phase der gemischten Mikroflora. Sie dauert ca. 12 Std. In dieser Zeit kommt es noch nicht zu einer Vorherrschaft irgendwelcher Artengruppen von Mikroben, da sich aufgrund der Fülle an Nährsubstrat und räumlichen Möglichkeiten viele Arten von Mikroorganismen recht frei entwickeln können.

Phase der Milchsäurestreptokokken. In dieser Phase überwiegen die Mikroorganismen der genannten Gruppe ( S. lactis, S. termofilus, S. cremoris usw.). Laktose wird von ihnen intensiv in Milchsäure umgewandelt, die Reaktion wechselt auf die saure Seite. Die Akkumulation von Milchsäure führt zukünftig zum Absterben von Milchsäurestreptokokken und deren Ersatz durch säureresistentere Milchsäurebakterien. Dies geschieht nach 48 Stunden und markiert den Beginn der dritten Phase.

Phase der Milchsäure-Sticks. Darin nehmen stäbchenförmige Formen von Milchsäurebakterien die dominierende Stellung ein. ( L. lactis, L. crusei, L. bulgaricum usw.). Die daraus resultierende Säurereaktion der Umgebung führt zur Wachstumshemmung und zum allmählichen Absterben anderer Bakterienarten.

Am Ende der dritten Phase sind weitere Möglichkeiten zur Entwicklung der Milchsäuremikroflora erschöpft und werden durch Pilze ersetzt, für die Milchsäure als Nährsubstrat dient.

Phase der Pilzmikroflora. Während dieser Zeit entwickeln sich Schimmelpilze und Hefen, deren vitale Aktivität dazu führt, dass das Produkt seinen Nährwert verliert. Hefen werden hauptsächlich durch Arten der Gattung vertreten Torula, kommen einige Arten von Saccharomyceten weniger häufig vor.

Von den gefundenen Schimmelpilzen: Milchschimmel ( Oidium lactis), die die Oberfläche von geronnener Milch und saurer Sahne in Form eines Flaums bedeckt, sowie Aspergillus, Penicillium und Mucoraceae.

Die Wirkung der Pilzflora führt zur Neutralisierung der Umgebung und macht sie dadurch wieder für Bakterien geeignet. Es kommt zur Entwicklung von Fäulnisbakterien, die eine Proteolyse von Casein verursachen, und schließlich einer Gruppe von anaeroben sporenbildenden Buttersäurebakterien.

Die Aktivität der sich verändernden Mikroflora hört erst mit dem Beginn der vollständigen Mineralisierung aller organischen Milchsubstanzen auf.

Der Prozess der Veränderung mikrobieller Biozönosen kann unter bestimmten Bedingungen von obigem Schema abweichen. So können Milchsäurebakterien durch die Mikroben der Escherichia coli-Gruppe von vornherein gehemmt werden, wenn letztere in großer Zahl vorhanden sind. Hefen können merkliche Alkoholkonzentrationen produzieren, was bei Produkten wie Kefir (0,2–0,6 %) und insbesondere Kumiss (0,9–2,5 %) der Fall ist. Das Vorhandensein von Alkohol schafft Bedingungen für die nachfolgende Entwicklung von Essigsäurebakterien, die Alkohol zu Essigsäure fermentieren. Auch das Vorhandensein von Antibiotika und anderen Substanzen, die die Mikroflora in der Milch hemmen und neutralisieren, kann die Milchsäureprozesse verlangsamen.

Hygienische Anforderungen an die Qualität von Trink- und Haushaltswasser basieren auf dem Grundsatz, dass die Wasserqualität, von der die menschliche Gesundheit und die Lebensbedingungen abhängen, in den Mittelpunkt gestellt wird. Gemäß moderner Sanitärgesetzgebung muss Trinkwasser seuchen- und strahlensicher, in seiner chemischen Zusammensetzung unbedenklich und über günstige organoleptische Eigenschaften verfügen.

Die Seuchensicherheit des Trinkwassers wird durch die Einhaltung der Normen für mikrobiologische Indikatoren bestimmt. Die mikrobiologische Zusammensetzung des Trinkwassers ist der Hauptindikator für dessen Qualität und Genusstauglichkeit. Dabei werden sowohl bakterielle als auch virale Kontaminationen berücksichtigt.

Die epidemiologische Unbedenklichkeit des Trinkwassers in SanPiN wird anhand mehrerer Indikatoren bewertet. Unter ihnen wird den thermotoleranten Coliformen eine große Rolle als echte Indikatoren für die Verschmutzung durch Fäkalien und die Gesamtzahl der Coliformen zugeschrieben.

Gewöhnliche coliforme Bakterien (CBC) sind gramnegative, oxidasenegative, nicht sporenbildende Stäbchen, die auf unterschiedlichen Lactosemedien wachsen können und Lactose bei einer Temperatur von +37 für 24-48 Stunden zu Säure und Gas fermentieren.

Thermotolerante coliforme Bakterien (TCB) sind Teil des OKB und haben alle ihre Eigenschaften, aber im Gegensatz zu ihnen sind sie in der Lage, Laktose bei einer Temperatur von +44 für 24 Stunden zu Säure, Aldehyd und Gas zu fermentieren. Somit unterscheidet sich TKB von OKB in seiner Fähigkeit, Lactose bei einer höheren Temperatur zu Säure und Gas zu fermentieren. Thermotolerante und gewöhnliche Coliforme sollten in 100 ml Trinkwasser fehlen (in jeder der Proben mit einer dreifachen Wiederholung der Analyse).

Im Verteilungsnetz großer zentraler Trinkwasserversorgungssysteme (mit einer Anzahl von mindestens 100 untersuchten Proben pro Jahr) sind 5 % nicht standardmäßiger Proben für gewöhnliche Coliformen zulässig, jedoch nicht in zwei aufeinanderfolgenden Proben, die an einem Punkt entnommen werden.

Die Gesamtzahl der Mikroorganismen (Total Microbial Number - TMC) wird durch Wachstum auf Fleisch-Pepton-Agar bei einer Inkubationstemperatur von 37 bestimmt. Dieser Indikator dient zur Charakterisierung der Effizienz der Trinkwasseraufbereitung, er muss bei der Überwachung der Wasserqualität berücksichtigt werden Dynamik. Eine starke Abweichung von TMF sogar innerhalb der Grenzen des Standardwerts (jedoch nicht mehr als 50 in 1 ml) dient als Signal für einen Verstoß in der Wasseraufbereitungstechnologie. Das Wachstum von TMP im Wasser des Verteilungsnetzes kann auf seinen ungünstigen hygienischen Zustand hinweisen, der zur Vermehrung von Mikroorganismen aufgrund der Ansammlung organischer Substanzen oder Leckagen beiträgt, die das Absaugen von kontaminiertem Grundwasser zur Folge haben.

Aerobe Saprophyten machen nur einen Teil der Gesamtkeimzahl im Wasser aus, sind aber ein wichtiger hygienischer Indikator für die Wasserqualität, da ein direkter Zusammenhang zwischen dem Verschmutzungsgrad durch organische Stoffe und der Keimzahl besteht. Außerdem wird angenommen, dass je höher die Gesamtkeimzahl ist, desto wahrscheinlicher ist das Vorhandensein von pathogenen Mikroorganismen im Wasser. Die Keimzahl im Leitungswasser sollte 100 nicht überschreiten.

Die Sicherheit von Trinkwasser im epidemischen Sinne wird durch die Einhaltung der Standards für mikrobiologische Indikatoren bestimmt (Tabelle 1).

Tabelle 1. Mikrobiologische Indikatoren des Trinkwassers

Das Konzept der sanitären indikativen Mikroorganismen

Die Hauptanforderungen an gesundheitlich-indikative Mikroorganismen: 1. Sie müssen einen gemeinsamen natürlichen Lebensraum mit pathogenen Mikroorganismen haben und in großen Mengen in die äußere Umgebung freigesetzt werden; 2. Im Außenbereich sollten gesundheitsrelevante Mikroorganismen möglichst gleichmäßig verteilt und widerstandsfähiger sein als pathogene. Sie sollten länger im Wasser bleiben, sich praktisch nicht vermehren, widerstandsfähiger gegen verschiedene nachteilige Faktoren sein, sie sollten weniger Variabilität in Eigenschaften und Eigenschaften aufweisen; 3. Methoden zur Bestimmung gesundheitsrelevanter Mikroorganismen sollten einfach und ausreichend zuverlässig sein.

Vom Standpunkt der sanitären Mikrobiologie aus wird eine Bewertung der Wasserqualität durchgeführt, um ihre sanitäre und epidemiologische Gefahr oder Sicherheit zu bestimmen. Für die menschliche Gesundheit. Wasser spielt eine wichtige Rolle bei der Übertragung von Krankheitserregern vieler Infektionen, hauptsächlich Darminfektionen.

Eine direkte quantitative Bestimmung aller Infektionen zur Wasserqualitätskontrolle ist aufgrund der Artenvielfalt und der Komplexität der Analyse nicht durchführbar.

Die Analyse nur einer Wasserprobe auf das mögliche Vorhandensein von Erregern von Typhus, Paratyphus A, Paratyphus B, Ruhr, infektiöser Gelbsucht, Wasserfieber und Tularämie würde das gesamte Personal selbst eines großen bakteriologischen Labors völlig belasten. Außerdem würde die Antwort in diesem Fall erst nach 2-3 Wochen erfolgen, d.h. wenn die Bevölkerung das untersuchte Wasser schon lange getrunken hat.

Angesichts der offensichtlichen Unzweckmäßigkeit einer detaillierten Definition der Wassersicherheit wurde bereits Ende des 19. Jahrhunderts versucht, die Suche nach allen wasserpathogenen Mikroben durch eine zwar nicht pathogene, aber ständig vorhandene Mikrobe zu ersetzen im menschlichen Kot. Dann könnte man in Betracht ziehen, dass, wenn das untersuchte Wasser tatsächlich mit Fäkalien kontaminiert ist, es für das Trinken gefährlich sein kann, da sowohl Kranke als auch Bazillenträger unter der gesunden Bevölkerung zu finden sind. Die Suche nach solchen bakteriologischen Indikatoren für fäkale Kontamination war erfolgreich. Es stellte sich heraus, dass drei der folgenden Mikroben ständig im menschlichen Kot vorhanden sind: 1) Escherichia coli; 2) Enterokokken; 3) anaerobe sporenbildende Bakterien, hauptsächlich Bac. perfingen.

Somit überwiegen E. coli im häuslichen Abwasser. Aber es geht nicht nur um den Inhalt. Der Hauptwert des bakteriellen Indikators für fäkale Kontamination liegt in der Tatsache, dass seine Todesrate die meisten pathogenen Mikroben abtötet. Nur wenn diese Bedingung erfüllt ist, ist eine ständig im menschlichen Kot vorhandene Mikrobe ein Indikator für eine fäkale Kontamination.

Nähert man sich unter diesem Gesichtspunkt den entdeckten Dauerbewohnern des Darms, so findet man folgendes: Mikroben der Bac-Gruppe. perfingens überdauert viel länger im Wasser als pathogene Mikroben; Enterokokken hingegen sterben viel früher; wie bei Escherichia coli entspricht die Zeit seiner Konservierung in Wasser ungefähr der Überlebenszeit von pathogenen Mikroben.

Daher ist Escherichia coli der wichtigste hygienisch-bakteriologische Indikator für Wasser. Nur in Russland, dem einzigen Land der Welt, wird die Wasserqualität durch das Bakterium der Escherichia coli-Gruppe (BGKP-Index) kontrolliert. Zu dieser Gruppe gehören alle Vertreter der Gruppe der Darmbakterien und opportunistische Vertreter.

Gemäß GOST 2874-73 und GOST 18963-73 umfassen Bakterien der Escherichia coli-Gruppe (ECG) gramnegative, nicht sporenbildende Bazillen, die Laktose oder Glucose bei 37 ° C in 24 Stunden zu Säure und Gas fermentieren und nicht Oxidase-Aktivität haben. CGBs umfassen Vertreter verschiedener Gattungen - Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, aber sie werden alle aus dem Darm von Menschen und Tieren in die Umwelt freigesetzt. In diesem Zusammenhang sollte ihr Nachweis in der Umwelt als Indikator für eine fäkale Kontamination betrachtet werden.

Von den im BGKP enthaltenen Gattungen hat die Gattung Escherichia den größten hygienischen und indikativen Wert. Das Vorhandensein all dieser Bakterien in der Umwelt gilt als frische Fäkalienkontamination.

Escherichia - ist eine der Hintergrundarten des Darms von Menschen und Tieren. Die Gattung Escherichia, einschließlich der Typusart E. coli, ist ein Indikator für eine frische fäkale Kontamination, eine mögliche Ursache für toxische Infektionen. Vertreter der Gattung im Wasser werden als thermotolerante Kolibakterien behandelt.

Citrobacter - leben in Abwasser, Boden und anderen Umweltobjekten sowie im Kot von gesunden und AII-Patienten. Sie gehören zur Gruppe der opportunistischen Bakterien. (Mikrobiologisches Wörterbuch-Nachschlagewerk, 1999)

Zu den Nachteilen von Citrobacter als SPMO gehören:

1. eine Fülle von Analoga in der äußeren Umgebung.

2. Variabilität in der externen Umgebung.

3. unzureichende Beständigkeit gegen Nebenwirkungen.

4. die Fähigkeit, sich im Wasser zu vermehren.

5. unscharfer Indikator auch für das Vorhandensein von Salmonellen.

Jüngste Studien haben das Fehlen einer direkten Korrelation zwischen dem Vorhandensein pathogener Bakterien und Indikatoren im Wasser gezeigt. In Regionen mit starker anthropogener Belastung der Gewässer wurde vor dem Hintergrund des quantitativen Überwiegens potenziell pathogener und pathogener Bakterien eine Abnahme des Gehalts an Indikatormikroorganismen mit einer Änderung ihrer biologischen und kulturellen Eigenschaften festgestellt.

Enterobacter - leben im Darm von Menschen und anderen Tieren, kommen im Boden, Wasser, Lebensmitteln vor und rufen Darm-, Urogenital-, Atemwegs-, eitrig-entzündliche Erkrankungen des Menschen auf.

Klebsiella - leben im Wasser, Boden, Nahrung, im Darm und in den Atemwegen von Menschen, Säugetieren, Vögeln.

1910 Enterokokken (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium) wurden für die Rolle von SPMO vorgeschlagen.

Enterokokken sind eine Gattung fakultativ anaerober, asporogener, chemoorganotropher Gram+-Bakterien. Zellen sind polymorph. In der Natur weit verbreitet. Sie sind eine der Hintergrundarten des Darms von Menschen, Säugetieren und Vögeln. Häufig in der Flora der Haut des Damms und des Genitaltrakts, der Nasenhöhlen, des Rachens und der Nase zu finden. Lebensmittel überleben lange im Boden.

Vorteile von Enterococcus als SPMO:

1. befindet sich ständig im menschlichen Darm und wird ständig in die äußere Umgebung abgegeben. Gleichzeitig lebt Enterococcus faecalis hauptsächlich im menschlichen Darm, sodass sein Nachweis auf eine Kontamination mit menschlichen Fäkalien hindeutet. In geringerem Maße kommt Enterococcus faecium beim Menschen vor. Letzteres kommt vor allem im Darm von Tieren vor, obwohl Enterococcus faecalis auch relativ selten vorkommt.

2. kann sich in der äußeren Umgebung nicht vermehren, Enterococcus faecium vermehrt sich hauptsächlich, hat aber weniger epidemiologische Bedeutung.

3. ändert seine Eigenschaften in der äußeren Umgebung nicht.

4. hat keine Analoga in der äußeren Umgebung.

5. beständig gegen widrige Umwelteinflüsse. Enterococcus ist 4-mal resistenter gegen Chlor als Escherichia coli. Dies ist sein Hauptverdienst. Aufgrund dieser Eigenschaft wird Enterococcus zur Überprüfung der Qualität der Wasserchlorung sowie als Indikator für die Qualität der Desinfektion verwendet. Widersteht einer Temperatur von 60 ° C, wodurch es als Indikator für die Qualität der Pasteurisierung verwendet werden kann. beständig gegen Kochsalzkonzentrationen von 6,5-17%. Beständig gegen pH im Bereich von 3-12.

6. Für die Indikation Enterokokken wurden hochselektive Medien entwickelt. Die Überlebensrate von Enterococcus in Wasser nähert sich der von pathogenen Enterobakterien. Enterococcus ist zu Recht der zweite hygienisch-indikative Test nach E. coli in der Untersuchung von Trinkwasser.

Derzeit ist die Enterokokkometrie im internationalen Wasserstandard als Indikator für frische fäkale Kontamination legalisiert. Wenn atypische Escherichia coli im Wasser gefunden werden, wird das Vorhandensein von Enterokokken zum Hauptindikator für eine frische fäkale Kontamination. Leider ist in SanPiN 2.1.4.1074-01 für Trinkwasser keine Definition von Enterococcus enthalten.

Die Proteus-Gruppe gilt als Verursacher von Fäulnisprozessen in der Natur und damit als Indikator für das Vorhandensein organischer Substanzen im Wasser von Stauseen. Dies gilt hauptsächlich für eine Art - Pr. vulgaris; die zweite Art - Pr.mirabilis - ist ein Bewohner des Darms von Menschen und Tieren. Dieser ökologische Unterschied ermöglichte es, die Art der Gewässerverschmutzung und den Grad ihrer Seuchensicherheit zu beurteilen. Pr.vulgaris kann ein Indikator für fäkale Verschmutzung sein, Pr.vulgaris - ein Indikator für eine Erhöhung der Konzentration organischer Substanz im Allgemeinen. Die Schwächen dieses Indikators sind das intermittierende Vorkommen von Pr.mirabilis im menschlichen Darm und die Fähigkeit beider Arten, sich recht intensiv im Wasser zu vermehren. Es gibt auch keine Untersuchungsmethode, die eine unterschiedliche Berücksichtigung beider Arten erlauben würde, wenn sie gleichzeitig in der Untersuchungsprobe vorhanden sind. Das vorgeschlagene Verfahren erfüllt diese Aufgabe nicht.

Es konnte nun gezeigt werden, dass Bakterien der Gattung Proteus in 98 % der Fälle in den Darmsekreten von Mensch und Tier zu finden sind, davon sind 82 % der Fälle Pr.mirabilis. Der Nachweis von Proteus in Wasser weist auf eine Verunreinigung des Objekts mit verrottenden Substraten hin und weist auf extreme hygienische Probleme hin. Die Proteometrie ist in den USA offiziell anerkannt.

Die Identifizierung von Sporen sulfidreduzierender Clostridien wird an Wasserleitungen von Oberflächenquellen durchgeführt, um die Wirksamkeit der technologischen Wasserbehandlung zu bewerten. Sporen sulfidreduzierender Bakterien sollten nach Abschluss der Wasseraufbereitung nicht in 20 ml Trinkwasser vorhanden sein.

Als Indikator für die virale Kontamination des Trinkwassers enthält SanPiN Coliphagen, die in ihrer biologischen Herkunft, Größe, Eigenschaften und Resistenz gegenüber Umweltfaktoren den Darmviren am nächsten kommen. Coliphagen sollten in 100 ml aufbereitetem Trinkwasser nicht nachgewiesen werden.