Limita de cuantificare

„...Limita de cuantificare (LOQ) (în definițiile analitice): cea mai mică concentrație sau a unui analit într-un analit care poate fi cuantificată cu un nivel acceptabil de acuratețe și încredere, așa cum poate fi demonstrat prin teste de laborator în colaborare sau prin alte metode adecvate. validarea metodei..."

Sursă:

"PRODUSE ALIMENTARE. METODE DE ANALIZĂ PENTRU DETECȚIA ORGANISMELOR MODIFICATE GENETIC ȘI A PRODUSELOR DERIVATE DIN ESTE. CERINȚE GENERALE ȘI DEFINIȚII. GOST R 53214-2008 (ISO 24276:2006)"

(aprobat prin Ordinul Rostekhregulirovanie din 25 decembrie 2008 N 708-st)

Terminologie oficială. Akademik.ru. 2012 .

Vedeți care este „Limita de cuantificare” în alte dicționare:

limita de cuantificare- 3.7 limita de cuantificare [ LOQ ] estimarea de zece ori a abaterii standard a masei unei probe Notă Valoarea LOQ este utilizată ca valoare de prag peste care masa ......

limita de repetabilitate- 3,7 limită de repetabilitate Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

limita de reproductibilitate- 2.9 valoare limită de reproductibilitate sub care, cu o probabilitate de 95 %, se află valoarea absolută a diferenței dintre două rezultate ale testelor obținute în condiții de reproductibilitate Sursă … Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

limită de repetabilitate (convergență). 3.11 valoare limită de repetabilitate care, cu un nivel de încredere de 95 %, nu este depășită de valoarea absolută a diferenței dintre rezultatele a două măsurători (sau teste) obținute în condiții de repetabilitate... Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

Limita preciziei intralaboratoare- 3.11 limită de precizie în interiorul laboratorului: Diferența absolută permisă pentru o probabilitate asumată P între două rezultate analitice obținute în condiții de precizie în interiorul laboratorului. Sursă … Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

limita de reproductibilitate R- 2.19.2 limita de reproductibilitate R 2.19.1, 2.19.2 (Ediție schimbată, titlu = Modificare nr. 1, IUS 12 2002). ... ... Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

MI 2881-2004: Recomandare. GSI. Metode de analiză chimică cantitativă. Proceduri de verificare a acceptabilității rezultatelor analizei- Terminologie MI 2881 2004: Recomandare. GSI. Metode de analiză chimică cantitativă. Proceduri de verificare a acceptabilității rezultatelor analizei: 3.17 diferență critică: Diferența absolută permisă pentru probabilitatea acceptată de 95% între ... ... Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

GOST R 50779.11-2000: Metode statistice. Controlul statistic al calității. Termeni și definiții- Terminologie GOST R 50779.11 2000: Metode statistice. Controlul statistic al calității. Termeni și definiții document original: 3.4.3 (superioare și inferioare) limite de reglementare Limita de pe diagrama de control, peste care limita superioară, ... ... Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

GOST R 50779.10-2000: Metode statistice. Probabilitatea și bazele statisticii. Termeni și definiții- Terminologie GOST R 50779.10 2000: Metode statistice. Probabilitatea și bazele statisticii. Termeni și definiții document original: 2.3. (general) set Ansamblul tuturor unităților considerate. Notă Pentru o variabilă aleatoare ...... Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

RMG 61-2003: Sistem de stat pentru asigurarea uniformității măsurătorilor. Indicatori de acuratețe, corectitudine, precizie a metodelor de analiză chimică cantitativă. Metode de evaluare- Terminologie RMG 61 2003: Sistem de stat pentru asigurarea uniformităţii măsurătorilor. Indicatori de acuratețe, corectitudine, precizie a metodelor de analiză chimică cantitativă. Metode de evaluare: 3.12 Precizie în interiorul laboratorului: Precizie... Dicționar-carte de referință de termeni ai documentației normative și tehnice

BORD

DECIZIE

În conformitate cu articolul 30 din Tratatul privind Uniunea Economică Eurasiatică din 29 mai 2014 și paragraful 2 al articolului 3 din Acordul privind principiile și regulile uniforme pentru circulația medicamentelor în cadrul Uniunii Economice Eurasiatice din 23 decembrie 2014, Colegiul al Comisiei Economice Eurasiatice

a decis:

1. Aprobați Ghidul atașat pentru validarea metodelor analitice de testare a medicamentelor.

2. Prezenta decizie intră în vigoare după 6 luni de la data publicării sale oficiale.

Președinte al Consiliului
Comisia Economică Eurasiatică
T. Sargsyan

Ghid privind validarea metodelor analitice pentru testarea produselor medicamentoase

APROBAT
Decizia Consiliului
Comisia Economică Eurasiatică
din data de 17 iulie 2018 N 113

I. Prevederi generale

1. Prezentul Ghid definește regulile de validare a metodelor analitice de testare a medicamentelor, precum și o listă de caracteristici care urmează să fie evaluate în timpul validării acestor metode și incluse în dosarele de înregistrare depuse la organismele autorizate ale statelor membre ale Uniunea Economică Eurasiatică (denumită în continuare, respectiv, statele membre, Uniunea).

2. Scopul validării unei metode analitice de testare a medicamentelor este de a documenta caracterul adecvat al acesteia pentru scopul propus.

II. Definiții

3. În sensul prezentului Ghid, se folosesc termeni care înseamnă următoarele:

„procedură analitică” (procedură analitică) - o metodologie pentru testarea medicamentelor, care include o descriere detaliată a secvenței de acțiuni necesare pentru a efectua un test analitic (inclusiv o descriere a pregătirii probelor de testat, materiale de referință, reactivi, utilizarea echipament, construirea unei curbe de calibrare, formule de calcul utilizate etc.);

„reproductibilitate” - o proprietate care caracterizează precizia în testele interlaboratoare;

„domeniu de aplicare (zonă analitică)” (domeniu) - intervalul dintre cele mai mari și cele mai mici concentrații (cantitatea) de analit din probă (inclusiv aceste concentrații), pentru care metoda analitică se dovedește a avea un nivel acceptabil de precizie , acuratețe și liniaritate;

„liniaritate” (liniaritate) - dependență direct proporțională a semnalului analitic de concentrația (cantitatea) analitului din probă în domeniul de aplicare (zona analitică) a tehnicii;

„descoperire (recuperare)” (recuperare) - raportul dintre valorile medii și adevărate (de referință) obținute, ținând cont de intervalele de încredere corespunzătoare;

„repetabilitate (precizia intra-testare)” - precizia unei metode atunci când testele repetate sunt efectuate în aceleași condiții de funcționare (de exemplu, de același analist sau grup de analiști, pe același echipament, cu aceiași și aceiași reactivi , etc.) pentru o perioadă scurtă de timp;

„corectitudine” (acuratețe, corectitudine) - proximitatea dintre valoarea adevărată (de referință) acceptată și valoarea primită, care este exprimată prin valoarea deschiderii;

„limită de determinare cantitativă” (limită de cuantificare) - cea mai mică cantitate dintr-o substanță dintr-o probă care poate fi determinată cantitativ cu precizie și acuratețe corespunzătoare;

„limită de detecție” - cea mai mică cantitate de analit dintr-o probă care poate fi detectată, dar nu neapărat cuantificată cu acuratețe;

„precizie” (precizie) - expresie a apropierii (gradului de răspândire) a rezultatelor (valorilor) între serii de măsurători efectuate pe o multitudine de probe prelevate din aceeași probă omogenă, în condițiile prescrise de procedură;

„precizie intermediară (intralaborator)” (precizie intermediară) - efectul variațiilor din cadrul laboratorului (zile diferite, analiști diferiți, echipamente diferite, serii (loturi) diferite de reactivi etc.) asupra rezultatelor testelor de probe identice prelevate din aceeași serie;

„specificitate” (specificitate) - capacitatea unei tehnici analitice de a evalua fără ambiguitate substanța care se determină, indiferent de alte substanțe (impurități, produse de degradare, excipienți, matrice (mediu) etc.) prezente în proba de testat;

„stabilitate (robustețe)” (robustețe) - capacitatea unei metode analitice de a fi rezistentă la influența unor mici modificări specificate în condițiile de testare, ceea ce indică fiabilitatea acesteia în utilizarea normală (standard).

III. Tipuri de metode analitice de validat

4. Acest Ghid acoperă abordări de validare pentru cele mai comune 4 tipuri de metode analitice:

a) teste de identificare (autenticitate);

b) teste pentru determinarea continutului cantitativ de impuritati (teste cantitative pentru continutul de impuritati);

c) teste pentru determinarea limitei de impurități din probă (testări limită pentru impuritățile de control);

d) teste cantitative (pentru conținut sau activitate) (teste cantitative ale fragmentului activ) pentru a determina partea activă a moleculei substanței active din proba de testat.

5. Toate metodele analitice utilizate pentru controlul calității medicamentelor trebuie să fie validate. Acest Ghid nu acoperă validarea metodelor analitice pentru tipurile de teste care nu sunt incluse în paragraful 4 al acestui Ghid (de exemplu, teste pentru dizolvarea sau determinarea dimensiunii particulelor (dispersie) a unei substanțe farmaceutice etc.).

6. Testele de identificare (autenticitate) constau, de obicei, în compararea proprietăților (de exemplu, caracteristici spectrale, comportament cromatografic, reactivitate etc.) ale probelor de testare și de referință.

7. Testele pentru determinarea conținutului cantitativ de impurități și testele pentru determinarea limitei conținutului de impurități din probă au ca scop descrierea corectă a caracteristicilor purității probei. Cerințele pentru validarea metodelor de determinare cantitativă a impurităților sunt diferite de cerințele pentru validarea metodelor de determinare a conținutului limitativ de impurități dintr-o probă.

8. Metodele de testare cantitativă au ca scop măsurarea conținutului de analit din proba de testat. În aceste orientări, cuantificarea se referă la măsurarea cantitativă a principalelor componente ale unei substanțe farmaceutice. Parametrii de validare similari se aplică testării substanței active sau a altor componente ale medicamentului. Parametrii de cuantificare de validare pot fi utilizați în alte proceduri analitice (de exemplu, testarea de dizolvare).

Scopul metodelor analitice ar trebui să fie clar definit, deoarece acesta determină alegerea caracteristicilor de validare care ar trebui evaluate în timpul validării.

9. Următoarele caracteristici tipice de validare ale unei metode analitice sunt supuse evaluării:

a) corectitudinea (acuratețea (adevarul));

b) precizie (precizie):

repetabilitate;

precizie intermediară (intralaborator) (precizie intermediară);

c) specificitatea;

d) limita de detectare;

e) limită cantitativă;

f) liniaritate;

g) domeniul de aplicare (zona analitică) (domeniul).

10. Cele mai importante caracteristici de validare pentru validarea diferitelor tipuri de metode analitice sunt rezumate în tabel.

Masa. Caracteristici de validare pentru validarea diferitelor tipuri de metode analitice

Validare		Tip de tehnică analitică
caracteristică		teste pentru Identificare	teste de impuritate		teste cantitative
		(autenticitate)	cantitativ conţinut	limitează conținutul	dizolvare (numai măsurare), conținut (activitate)
Dreapta
precizie
	repetabilitate
	precizie intermediară
Specificitate**
Limita de detectare
Limita de cuantificare
Liniaritate
Domeniu de aplicare

________________
* Dacă se determină reproductibilitatea, nu este necesară determinarea preciziei intermediare.

** Specificitatea insuficientă a unei metode analitice poate fi compensată prin utilizarea uneia sau mai multor metode analitice suplimentare.

*** Poate fi necesar în unele cazuri (de exemplu, când limita de detecție și limita normalizată a conținutului de impuritate determinată sunt apropiate).

Notă. "-" - caracteristica nu este evaluată, "+" - caracteristica este evaluată.


Lista specificată trebuie considerată ca fiind tipică atunci când se validează metodele analitice. Pot exista excepții care necesită o justificare separată din partea producătorului medicamentului. O astfel de caracteristică a metodei analitice, cum ar fi stabilitatea (robustețea) nu este enumerată în tabel, dar ar trebui luată în considerare la etapa adecvată în dezvoltarea metodei analitice.

Revalidarea (revalidarea) poate fi necesară în următoarele cazuri (dar fără a se limita la):

modificarea schemei de sinteză a substanței farmaceutice;

modificarea compoziției medicamentului;

schimbarea metodologiei analitice.

Revalidarea nu se efectuează dacă producătorul oferă o justificare adecvată. Amploarea revalidării depinde de natura modificărilor efectuate.

IV. Metodologia de validare a metodelor analitice

1. Cerințe generale pentru metodologia de validare a metodelor analitice

11. Această secțiune prezintă caracteristicile care trebuie luate în considerare în validarea metodelor analitice și oferă câteva abordări și recomandări pentru stabilirea diferitelor caracteristici de validare ale fiecărei metode analitice.

12. În unele cazuri (de exemplu, atunci când se dovedește specificitatea), o combinație de mai multe metode analitice poate fi utilizată pentru a asigura calitatea unei substanțe farmaceutice sau a unui produs medicamentos.

13. Toate datele relevante colectate în timpul validării și formulele utilizate pentru calcularea performanței de validare trebuie prezentate și analizate.

14. Pot fi utilizate alte abordări decât cele prezentate în acest Ghid. Alegerea procedurii și protocolului de validare este responsabilitatea solicitantului. În acest caz, scopul principal al validării unei metode analitice este de a confirma adecvarea metodei pentru scopul propus. Datorită complexității lor, abordările metodelor analitice pentru produsele biologice și biotehnologice pot diferi de cele descrise în acest Ghid.

15. Pe parcursul studiului de performanță de validare, trebuie utilizate materiale de referință cu caracteristici cunoscute și documentate. Gradul necesar de puritate al materialelor de referință depinde de utilizarea prevăzută.

16. Diverse caracteristici de validare sunt discutate în subsecțiuni separate ale acestei secțiuni. Structura acestei secțiuni reflectă procesul de dezvoltare și evaluare a unei metodologii analitice.

17. Lucrările experimentale trebuie planificate astfel încât caracteristicile de validare relevante să fie studiate simultan, oferind date fiabile despre capacitățile metodei analitice (de exemplu, specificitatea, liniaritatea, domeniul de aplicare, corectitudinea și precizia).

2. Specificitatea

18. În timpul validării testelor de identificare, impurități și cuantificare ar trebui efectuate studii de specificitate. Procedurile de validare a specificității depind de utilizarea prevăzută a metodei analitice.

19. Modul în care poate fi confirmată specificitatea depinde de obiectivele cărora le este destinată metoda analitică. Nu în toate cazurile este posibil să se confirme că metoda analitică este specifică acestui analit (selectivitate completă). În acest caz, se recomandă utilizarea unei combinații de 2 sau mai multe metode analitice.

Lipsa de specificitate a unei metode analitice poate fi compensată prin utilizarea uneia sau mai multor metode analitice suplimentare.

20. Specificitatea pentru diferite tipuri de teste înseamnă următoarele:

a) la testarea pentru identificare - confirmarea faptului că metoda vă permite să identificați exact substanța de determinat;

b) la testarea impurităților, confirmarea că metoda identifică corect impuritățile din probă (de exemplu, testarea compușilor înrudiți, metale grele, solvenți reziduali etc.);

c) în teste cantitative - confirmarea că metoda vă permite să determinați conținutul sau activitatea substanței care se determină în probă.

Identificare

21. Testele de identificare satisfăcătoare ar trebui să poată face distincția între compușii strâns înrudiți din punct de vedere structural care pot fi prezenți în probă. Selectivitatea unei proceduri analitice poate fi confirmată prin obținerea de rezultate pozitive (poate prin comparație cu un standard cunoscut) pentru probele care conțin analitul și rezultate negative pentru probele care nu îl conțin.

22. Pentru a confirma absența rezultatelor fals pozitive, se poate efectua un test de identificare pentru substanțele cu o structură similară sau substanțele asociate cu analitul.

23. Alegerea substanțelor potențial interferente ar trebui justificată.

Cuantificare și testare pentru impurități

24. Atunci când se confirmă specificitatea unei proceduri analitice folosind o metodă de separare cromatografică, cromatogramele reprezentative ar trebui să fie furnizate cu identificarea adecvată a componentelor individuale. Abordări similare ar trebui utilizate pentru alte tehnici bazate pe separare.

25. Separările critice în cromatografie ar trebui studiate la nivelul corespunzător. În cazul separărilor critice, trebuie setată valoarea rezoluției celor 2 componente care eluează cel mai aproape.

26. Atunci când se utilizează o metodă de cuantificare nespecifică, trebuie utilizate metode analitice suplimentare și trebuie confirmată specificitatea întregului set de metode. De exemplu, dacă determinarea cantitativă este efectuată prin metoda titrimetrică în timpul eliberării substanței farmaceutice, aceasta poate fi completată cu un test adecvat pentru impurități.

27. Abordarea este similară atât pentru cuantificare, cât și pentru testarea impurităților.

Prezența probelor de impurități

28. În prezența probelor de impurități, determinarea specificității procedurii analitice este după cum urmează:

a) la cuantificare, este necesar să se confirme selectivitatea determinării unei substanțe în prezența impurităților și (sau) a altor componente ale probei. În practică, acest lucru se realizează prin adăugarea de impurități și (sau) excipienți la probă (substanță farmaceutică sau produs medicamentos) în cantitatea corespunzătoare și dacă există dovezi ale absenței influenței acestora asupra rezultatului determinării cantitative a substanței active. ;

b) la testarea impurităților, specificitatea poate fi stabilită prin adăugarea anumitor cantități de impurități la substanța farmaceutică sau produsul medicamentos și dacă există dovezi ale separării acestor impurități unele de altele și (sau) de alte componente ale probei.

Fără mostre de impurități

29. Dacă nu sunt disponibile mostre de referință de impurități sau produse de degradare, specificitatea poate fi confirmată prin compararea rezultatelor testelor de probe care conțin impurități sau produse de degradare cu rezultatele unei alte metode validate (de exemplu, o farmacopee sau alte analize validate (independente) metodă). Acolo unde este cazul, standardele de referință pentru impurități ar trebui să includă probe depozitate în condiții de stres specificate (lumină, căldură, umiditate, hidroliză acidă (bază) și oxidare).

30. În cazul unei determinări cantitative, trebuie comparate 2 rezultate.

31. În cazul testelor de impurități, profilele de impurități ar trebui comparate.

32. Pentru a demonstra că vârful analitului corespunde doar unei singure componente, este recomandabil să se efectueze studii privind puritatea vârfurilor (de exemplu, utilizarea detectiei matricei de diode, spectrometrie de masă).

3. Linearitate

33. O relație liniară trebuie evaluată pe întreaga gamă de aplicare a tehnicii analitice. Poate fi confirmat direct pe substanța farmaceutică (prin diluarea soluției standard principale) și (sau) pe eșantioane separate de amestecuri artificiale (model) de componente ale medicamentului folosind metoda propusă. Ultimul aspect poate fi studiat în cursul determinării domeniului de aplicare (zona analitică) a metodologiei.

34. Liniaritatea este evaluată vizual prin reprezentarea grafică a semnalului analitic în funcție de concentrația sau cantitatea de analit. Dacă există o relație liniară clară, rezultatele obținute trebuie prelucrate prin metode statistice adecvate (de exemplu, prin calcularea dreptei de regresie folosind metoda celor mai mici pătrate). Transformarea matematică a rezultatelor testelor poate fi necesară pentru a obține liniaritatea între rezultatele cuantificării și concentrațiile probei înainte de analiza de regresie. Rezultatele analizei dreptei de regresie pot fi folosite pentru o evaluare matematică a gradului de liniaritate.

35. Dacă nu există liniaritate, datele testului ar trebui să fie supuse unei transformări matematice înainte de analiza de regresie.

36. Pentru a confirma liniaritatea, trebuie determinat și prezentat coeficientul de corelație sau coeficientul de determinare, termenul constant al regresiei liniare, tangenta pantei dreptei de regresie și suma reziduală a abaterilor pătrate, precum și un grafic cu toate experimentele. datele sunt atasate.

37. Dacă nu se observă liniaritatea sub nici un tip de transformare matematică (de exemplu, la validarea metodelor de imunotest), semnalul analitic trebuie descris utilizând funcția corespunzătoare a concentrației (cantității) analitului din probă.

V. Domeniu de aplicare (zonă analitică)

39. Domeniul de aplicare a unei tehnici analitice depinde de scopul acesteia și este determinat în studiul liniarității. În domeniul de aplicare, tehnica ar trebui să ofere liniaritatea, corectitudinea și precizia necesare.

40. Următoarele domenii de aplicare (domenii analitice) ale metodelor analitice ar trebui considerate drept minim admisibil:

a) pentru determinarea cantitativă a substanței active dintr-o substanță farmaceutică sau produs medicamentos - de la o concentrație (conținut) de 80 la sută la o concentrație (conținut) de 120 la sută din concentrația (conținutul) nominală;

b) pentru uniformitatea dozei - de la o concentrație (conținut) de 70 la sută la o concentrație (conținut) de 130 la sută, cu excepția cazului în care se justifică o gamă mai largă pentru medicament în funcție de forma de dozare (de exemplu, inhalatoare cu doză măsurată);

c) pentru testul de dizolvare, ±20 la sută (absolut) din domeniul nominal de aplicare. De exemplu, dacă specificațiile pentru un produs cu eliberare modificată acoperă un interval de la 20 la sută în prima oră la 90 la sută din conținutul revendicat în 24 de ore, intervalul de utilizare validat ar trebui să fie de la 0 la 110 la sută din conținutul revendicat;

d) pentru determinarea impurităților - de la limita de detecție a unei impurități la 120% din valoarea specificată în caietul de sarcini;

e) pentru impuritățile care sunt extrem de puternice sau au un efect farmacologic toxic sau neașteptat, limita de detecție și limita de cuantificare trebuie să fie proporționale cu nivelul la care aceste impurități urmează să fie controlate. Pentru a valida metodele de testare a impurităților utilizate în timpul dezvoltării, poate fi necesar să se stabilească zona analitică aproape de limita așteptată (posibilă);

f) dacă cuantificarea și puritatea sunt studiate simultan cu același test și este utilizat doar un standard de 100%, relația trebuie să fie liniară pe întregul domeniu de aplicare a metodei analitice de la pragul de raportare pentru impuritate (în conformitate cu reguli pentru studierea impurităților din medicamente și stabilirea cerințelor pentru acestea în caietul de sarcini aprobat de Comisia Economică Eurasiatică) până la conținutul de 120 la sută specificat în caietul de sarcini pentru determinarea cantitativă.

VI. Dreapta

41. Trebuie stabilită corectitudinea pentru întreaga gamă de aplicare a procedurii analitice.

1. Determinarea cantitativă a substanței farmaceutice active

Substanță farmaceutică

42. Pot fi utilizate mai multe metode de evaluare a corectitudinii:

aplicarea unei tehnici analitice la o substanță analizată cu un grad cunoscut de puritate (de exemplu, la un material standard);

compararea rezultatelor analizei obținute folosind o metodă analitică validată și a rezultatelor obținute folosind o metodă a cărei corectitudine este cunoscută și (sau) o metodă independentă.

Concluzia despre corectitudine se poate face după stabilirea preciziei, liniarității și specificității.

medicament

43. Pot fi utilizate mai multe metode de evaluare a corectitudinii:

aplicarea unei tehnici analitice la amestecuri artificiale (model) de componente ale unui medicament, la care s-a adăugat o cantitate cunoscută anterior dintr-un analit;

în absența mostrelor din toate componentele medicamentului, este posibil să se adauge la medicament o cantitate cunoscută anterior de substanță farmaceutică sau să se compare rezultatele obținute folosind o altă metodă, a cărei corectitudine este cunoscută și (sau) o metodă independentă.

Concluzia despre corectitudine se poate face după determinarea preciziei, liniarității și specificității.

2. Cuantificarea impurităților

44. Precizia se determină pe probe (substanță farmaceutică și produs medicamentos) la care s-a adăugat o cantitate cunoscută de impurități.

45. În absența probelor de impurități detectabile și (sau) de produse de degradare, este acceptabil să se compare rezultatele cu rezultatele obținute folosind o metodă independentă. Este permisă utilizarea unui semnal analitic al substanței active.

46. ​​​​Este necesar să se indice modul specific de exprimare a conținutului de impurități individuale sau a sumei acestora (de exemplu, în procente de masă sau în procente în raport cu zona vârfului, dar în toate cazurile în raport cu analitul principal) .

47. Corectitudinea este evaluată pentru cel puțin 9 determinări a 3 concentrații diferite care acoperă întreaga gamă de aplicare (adică 3 concentrații și 3 replici pentru fiecare concentrație). Definițiile ar trebui să includă toți pașii metodologiei.

48. Acuratețea se exprimă prin valoarea deschiderii în procente pe baza rezultatelor unei determinări cantitative a unei substanțe adăugate într-o cantitate cunoscută la proba analizată, sau diferența dintre valorile medii și adevărate (de referință) obținute, ținând cont intervalele de încredere adecvate.

VII. precizie

49. Validarea testelor pentru cuantificare și impurități presupune determinarea preciziei.

50. Precizia este stabilită la 3 niveluri: repetabilitate, precizie intermediară și reproductibilitate. Precizia trebuie stabilită folosind mostre uniforme, autentice. Dacă este imposibil să se obțină o probă omogenă, este permisă determinarea preciziei folosind probe (model) preparate artificial sau o soluție de probă. Precizia unei proceduri analitice este de obicei exprimată în termeni de varianță, abatere standard sau coeficient de variație a unei serii de măsurători.

VIII. Repetabilitate

51. Repetabilitate se determină prin efectuarea a cel puțin 9 determinări de concentrație în domeniul de aplicare a tehnicii analitice (3 concentrații și 3 repetări pentru fiecare concentrație), sau cel puțin 6 determinări de concentrație pentru probele cu conținut de analit 100%.

IX. Precizie intermediară (intralaborator).

52. Măsura în care se stabilește precizia intermediară depinde de condițiile în care este utilizată metoda analitică. Solicitantul trebuie să stabilească influența factorilor aleatori asupra preciziei procedurii analitice. Factorii (variabili) tipici investigați sunt zile diferite, analiști, echipamente etc. Nu este necesar să studiem aceste influențe separat. Când se studiază influența diferiților factori, este de preferat să se folosească designul experimentului.

X. Reproductibilitatea

53. Reproductibilitatea caracterizează precizia într-un experiment interlaborator. Reproductibilitatea ar trebui determinată în cazul standardizării unei metode analitice (de exemplu, atunci când aceasta este inclusă în Farmacopeea Uniunii sau în farmacopeile statelor membre). Nu este necesară includerea datelor de reproductibilitate în dosarul de înregistrare.

XI. Reprezentarea datelor

54. Pentru fiecare tip de precizie, trebuie raportate abaterea standard, abaterea standard relativă (coeficientul de variație) și intervalul de încredere.

XII. Limita de detectare

55. Sunt posibile abordări diferite pentru determinarea limitei de detecție, în funcție de faptul că tehnica este instrumentală sau neinstrumentală. Pot fi utilizate și alte abordări.

XIII. evaluare vizuală

56. Evaluarea vizuală poate fi utilizată atât pentru metode non-instrumentale, cât și pentru cele instrumentale. Limita de detecție se stabilește prin analizarea probelor cu concentrații cunoscute de analit și determinarea conținutului minim al acestuia la care este detectat în mod fiabil.

XIV. Evaluarea limitei de detecție în ceea ce privește raportul semnal-zgomot

57. Această abordare este aplicabilă numai procedurilor analitice pentru care se observă zgomot de referință.

58. Determinarea raportului semnal-zgomot se realizează prin compararea semnalelor obținute din probele cu concentrații scăzute cunoscute cu semnalele obținute din probele martor și stabilirea concentrației minime la care analitul poate fi detectat în mod fiabil. Pentru a estima limita de detecție, un raport semnal-zgomot de 3:1 până la 2:1 este considerat acceptabil.

XV. Estimarea limitei de detecție din abaterea standard a semnalului analitic și panta curbei de calibrare

59. Limita de detecție (LO) poate fi exprimată astfel:

Unde:

60. Valoarea lui k se calculează din curba de calibrare pentru analit. Estimarea s se poate face în mai multe moduri:

b) conform curbei de calibrare. Este necesar să se analizeze curba de calibrare rezultată, construită pentru probe cu conținutul de analit apropiat de limita de detecție. Abaterea standard reziduală a dreptei de regresie sau abaterea standard a punctului de intersecție cu axa y (deviația standard a termenului liber al regresiei liniare) poate fi utilizată ca abatere standard.

XVI. Reprezentarea datelor

61. Este necesar să se precizeze limita de detecție și modalitatea de determinare a acesteia. Dacă determinarea limitei de detecție se bazează pe o evaluare vizuală sau pe o evaluare a raportului semnal-zgomot, prezentarea cromatogramelor relevante este considerată suficientă pentru a o justifica.

62. În cazul în care valoarea limitei de detecție se obține prin calcul sau extrapolare, estimarea trebuie confirmată prin testarea independentă a unui număr suficient de probe cu conținutul de analit corespunzător limitei de detecție sau apropiat de aceasta.

XVII. Limita de cuantificare

63. Limita de cuantificare este o caracteristică de validare necesară a procedurilor utilizate pentru determinarea conținutului scăzut de substanțe dintr-o probă, în special pentru determinarea impurităților și/sau a produselor de degradare.

64. Sunt posibile mai multe abordări pentru determinarea limitei de cuantificare, în funcție de faptul că tehnica este instrumentală sau neinstrumentală. Alte abordări sunt permise.

XVIII. evaluare vizuală

65. Evaluarea vizuală poate fi utilizată atât pentru metode non-instrumentale, cât și pentru cele instrumentale.

66. Limita de cuantificare se stabilește de obicei prin analizarea probelor cu concentrații cunoscute de analit și estimarea conținutului minim la care analitul este cuantificabil cu o acuratețe și precizie acceptabile.

XIX. Evaluarea limitei de cuantificare prin raportul semnal-zgomot

67. Această abordare este aplicabilă numai metodelor de măsurare în care se observă zgomot de referință.

68. Determinarea raportului semnal-zgomot se realizează prin compararea semnalelor măsurate obținute din probe cu concentrații scăzute cunoscute de analit cu semnalele obținute din probele martor și stabilirea concentrației minime la care analitul poate fi sigur. cuantificat. Raportul semnal-zgomot tipic este de 10:1.

XX. Evaluarea limitei de cuantificare din abaterea standard a semnalului și panta curbei de calibrare

69. Limita de cuantificare (LOQ) poate fi exprimată astfel:

Unde:

s este abaterea standard a semnalului analitic;

k este tangenta pantei curbei de calibrare.

70. Valoarea lui k se calculează din curba de calibrare pentru analit. Estimarea s se poate face în mai multe moduri:

a) conform abaterii standard a unei probe martor. Mărimea semnalului analitic este măsurată pentru un număr suficient de probe martor și se calculează abaterea standard a valorilor acestora;

b) conform curbei de calibrare. Este necesar să se analizeze curba de calibrare rezultată, construită pentru probe cu conținutul de analit apropiat de limita determinării cantitative. Abaterea standard reziduală a dreptei de regresie sau abaterea standard a punctului de intersecție cu axa y (deviația standard a termenului liber al regresiei liniare) poate fi utilizată ca abatere standard.

XXI. Reprezentarea datelor

71. Este necesar să se precizeze limita de cuantificare și metoda de determinare a acesteia.

72. Limita de cuantificare trebuie ulterior confirmată prin analiza unui număr suficient de probe cu conținut de analit egal sau apropiat de limita de cuantificare.

73. Alte abordări decât cele enumerate mai sus pot fi acceptabile.

XXII. Stabilitate (robustețe)

74. Studiul stabilității (robusteții) ar trebui efectuat în stadiul de dezvoltare, sfera studiilor depinde de metoda analitică luată în considerare. Este necesar să se arate fiabilitatea analizei sub variații deliberate ale parametrilor (condițiilor) metodei.

75. Dacă rezultatele măsurătorilor depind de modificări ale condițiilor de aplicare a metodei analitice, este necesar să se controleze cu strictețe respectarea acestor condiții sau să se stipuleze măsuri de precauție în timpul testului.

76. Pentru a se asigura că valabilitatea unei metode analitice este menținută atunci când este utilizată, una dintre consecințele studiilor de robustețe ar trebui să fie stabilirea unei serii de parametri de adecvare a sistemului (de exemplu, un test de rezoluție).

77. Variațiile comune ale parametrilor sunt:

stabilitatea soluțiilor utilizate în procedurile analitice;

timpul de extracție.

Parametrii de variație pentru cromatografia lichidă sunt:

modificarea pH-ului fazei mobile;

modificarea compoziției fazei mobile;

diferite coloane (diferiți serii și furnizori);

temperatura;

viteza fazei mobile (debitul).

Parametrii de variație pentru cromatografia gazoasă sunt:

diferite coloane (diferiți serii și furnizori);

temperatura;

viteza gazului purtător.

XXIII. Evaluarea adecvării sistemului

78. Evaluarea adecvării sistemului este o parte integrantă a multor proceduri analitice. Aceste teste se bazează pe conceptul că echipamentul, electronica, operațiunile analitice și probele analizate constituie un sistem complet și ar trebui evaluate ca atare. Criteriile de adecvare a sistemului trebuie stabilite pentru o anumită metodă și depind de tipul de metodă analitică validată. Informații suplimentare pot fi obținute de la Farmacopeea Uniunii sau de la farmacopeea statelor membre.



Textul electronic al documentului
pregătit de Kodeks JSC și verificat împotriva:
site-ul oficial
Uniunea Economică Eurasiatică
www.eaeunion.org, 20.07.2018

Fiecare metodă instrumentală este caracterizată de un anumit nivel de zgomot asociat cu specificul procesului de măsurare. Prin urmare, există întotdeauna o limită de abundență sub care o substanță nu poate fi deloc detectată în mod fiabil.

Limita de detectare C min , P - cel mai scăzut conținut la care poate fi detectată prezența unei componente cu o probabilitate de încredere dată folosind această metodă.

Limita de detecție poate fi stabilită și de semnalul analitic minim y min , care poate fi distins cu încredere de semnalul experimentului de control - fundal y.

Metodele statistice care utilizează inegalitatea Chebyshev au demonstrat că limita de detectare poate fi determinată cantitativ folosind expresia

Unde s background este abaterea standard a semnalului analitic de fundal; S este coeficientul de sensibilitate (uneori numit simplu „sensibilitate”), caracterizează răspunsul semnalului analitic la conținutul componentei. Coeficientul de sensibilitate este valoarea primei derivate a funcției de calibrare pentru o anumită determinare a concentrației. Pentru graficele de calibrare rectilinie, aceasta este tangenta unghiului de pantă:

(Atenţie: nu confunda factor de sensibilitateS co deviație standards!)

Există și alte moduri de a calcula limita de detecție, dar această ecuație este cea mai frecvent utilizată.

În analiza chimică cantitativă, se oferă de obicei o serie de conținuturi sau concentrații detectabile. Înseamnă intervalul de valori ale conținuturilor (concentrațiilor) determinate prevăzute de această metodă și limitate de limitele inferioare și superioare ale concentrațiilor determinate.

Analytics sunt mai des interesați de limita inferioară a concentrațiilor determinate cu n sau conținut m n componentă determinată prin această metodă. Dincolo de limita inferioară a conținuturilor determinate de obicei se ia cantitatea sau concentrația minimă care poate fi determinată cu o abatere standard relativă

. .

Exemplu

Concentrația masică a fierului din soluție a fost determinată prin metoda spectrofotometrică, prin măsurarea densităților optice ale soluțiilor colorate ca urmare a interacțiunii ionului Fe 3+ cu acidul sulfosalicilic. Pentru a construi o dependență de calibrare, au fost măsurate densitățile optice ale soluțiilor cu concentrații crescătoare (date) de fier tratate cu acid sulfosalicilic.

Densitățile optice ale soluției de referință (experimentul de control pentru reactivi, adică fără adăugare de fier, (fond) au fost 0,002; 0,000; 0,008; 0,006; 0,003.

calculati limita de detectare a fierului.

Decizie

1) Ca rezultat al calculelor prin metoda celor mai mici pătrate (vezi exemplul pentru sarcina de control nr. 5), au fost obținute valorile pentru construirea unui grafic de calibrare.

Valori calculate pentru construirea unui grafic de calibrare

2) Se calculează coeficientul de sensibilitate, adică coeficientul unghiular al dependenței de calibrare (S) conform tabelului.

3) Calculați abaterea standard a semnalului de fundal, ce este 0,0032 unități de densitate optică.

4) Limita de detecție va fi, mg/cm 3

Sarcina de control numărul 6

Determinați limita de detecție a fierului în apă.

Datele inițiale : valorile densității optice a fundalului (soluție de referință) la construirea unui grafic de calibrare pentru determinarea fierului s-au ridicat la 0,003; 0,001; 0,007; 0,005; 0,006; 0,003; 0,001; 0,005. Valorile densităților optice corespunzătoare concentrațiilor de fier din soluție sunt prezentate în tabelul sarcinii de control nr. 5.

Calculați limita de detecție a fierului în mg/cm 3 prin coeficienții de sensibilitate S, calculati pe baza datelor obținute pentru construirea unui grafic de calibrare folosind metoda celor mai mici pătrate la efectuarea sarcinii de control nr. 5;

MINISTERUL SĂNĂTĂȚII AL FEDERĂȚIA RUSĂ

AUTORIZARE FARMACOPEIANĂ GENERALĂ

Validarea procedurilor analitice OFS.1.1.0012.15

Introdus pentru prima dată

Validarea unei tehnici analitice este dovada experimentală că tehnica este adecvată pentru rezolvarea problemelor propuse.

Prezenta monografie din Farmacopeea Generală reglementează caracteristicile metodelor analitice determinate în scopul validării acestora, precum și criteriile corespunzătoare de adecvare a metodelor validate destinate controlului calității medicamentelor: substanțe farmaceutice și medicamente.

Metodele de determinare cantitativă, inclusiv metodele de determinare a impurităților și metodele de determinare a limitei de conținut, sunt supuse validării. Metodele de autentificare sunt validate dacă este necesar pentru a confirma specificul lor.

În timpul validării, metoda analitică este evaluată în funcție de caracteristicile enumerate mai jos, selectate ținând cont de recomandările tipice date în tabel:

• specificitate;
• limita detectiei;
• limita de determinare cantitativa (limita de cuantificare);
• zona analitică (gamă);
• liniaritate (liniaritate);
• corectitudine (adevarat);
• precizie (precizie);
• stabilitate (robustețe).

Tabelul 1 — Caracteristicile metodelor determinate în timpul validării

Nume caracteristici	Principalele tipuri de tehnici
	Test de autenticitate	Problema straina		cuantificarea
		Metode cantitative	Limită de conținut	Principala substanță activă, componente standardizate	Ingredient activ în testul „Dizolvare”.
Specificitate **)	da	da	da	da	da
Limita de detectare	Nu	Nu	da	Nu	Nu
Limita de cuantificare	Nu	da	Nu	Nu	Nu
Zona analitică	Nu	da	Nu	da	da
Liniaritate	Nu	da	Nu	da	da
Dreapta	Nu	da	*	da	da
precizie : – repetabilitate (convergență) – intermediar precizie (intralaborator).
Durabilitate	Nu	*	*	*	*

*) poate fi determinat dacă este necesar;

**) lipsa de specificitate a unei metode analitice poate fi compensată prin utilizarea unei alte metode analitice.

Revalidarea (revalidarea) metodelor se efectuează atunci când:

• tehnologii pentru obținerea obiectului de analiză;
• compoziția medicamentului (obiect de analiză);
• metodologia de analiză aprobată anterior.

1. Specificitate

Specificitatea este capacitatea unei proceduri analitice de a evalua unic un analit în prezența componentelor concomitente.

Dovada specificității unei tehnici validate se bazează de obicei pe luarea în considerare a datelor obținute folosindu-se din analiza amestecurilor model de compoziție cunoscută.

Specificitatea unei tehnici validate poate fi demonstrată și prin prelucrarea statistică adecvată a rezultatelor analizelor obiectelor reale efectuate cu ajutorul acesteia și, în paralel, folosind o altă tehnică, evident specifică (tehnică a cărei specificitate a fost dovedită).

1.1 Pentru procedurile de testare a identității

O metodă validată (sau un set de metode) ar trebui să ofere informații fiabile despre prezența unei anumite substanțe active într-o substanță sau într-o formă de dozare, dacă conține componentele prevăzute în formulare, care este supusă confirmării experimentale.

Autenticitatea substanței active din substanța farmaceutică sau medicamentul se stabilește în comparație cu o probă standard sau prin proprietăți fizico-chimice sau chimice care nu sunt caracteristice altor componente.

1.2 Pentru procedurile de cuantificare și de testare a impurităților

Pentru o metodă de cuantificare validată și testare pentru impurități, se folosesc aceleași abordări - trebuie evaluată specificitatea acesteia în raport cu analit, adică trebuie să se confirme experimental că prezența componentelor însoțitoare nu afectează rezultatul analizei într-un mod nedorit. cale.

Este permisă evaluarea specificității metodei validate atât prin analiza amestecurilor model de compoziție cunoscută care conțin analitul, cât și prin compararea rezultatelor analizelor obiectelor reale obținute concomitent cu utilizarea metodelor validate și a altor metode, evident specifice. Rezultatele experimentelor relevante ar trebui prelucrate statistic.

Lipsa specificității testului poate fi compensată de un alt test(e) suplimentar(e).

La validarea metodelor, dacă este cazul, se pot folosi mostre de medicamente supuse la condiții extreme (lumină, temperatură, umiditate) sau modificate chimic în orice mod adecvat, pentru a acumula impurități în acestea.

Pentru tehnicile cromatografice, arătați rezoluția dintre cele două substanțe care eluează cel mai aproape la concentrațiile respective.

1. LIMITĂ DE DETECȚIE

Limita de detecție este cea mai mică cantitate (concentrație) dintr-un analit dintr-o probă care poate fi detectată (sau aproximată) folosind o tehnică validată.

Limita de detecție în cazurile indicate în tabel este de obicei exprimată ca concentrație a analitului (în % relativ sau părți per milion - ppm).

În funcție de tipul de tehnică (vizuală sau instrumentală), se folosesc diferite metode pentru a determina limita de detecție.

2.1 Pentru metodele cu evaluare vizuală a rezultatului analizei

Probele sunt testate cu diferite cantități (concentrații) cunoscute de analit și se stabilește valoarea minimă la care rezultatul analizei poate fi evaluat vizual. Această valoare este o estimare a limitei de detectare.

2.2 Pentru metodele cu evaluare instrumentală a rezultatului analizei

2.2.1 Prin raportul semnal-zgomot

Această abordare este aplicabilă metodelor pentru care se observă zgomot de bază. Comparați valorile semnalului obținut pentru experimentul de control și pentru probele cu concentrații scăzute de analit. Setați cantitatea (concentrația) minimă a analitului din probă, la care raportul dintre semnalul analitic și nivelul de zgomot este egal cu 3.

Valoarea găsită este o estimare a limitei de detecție.

2.2.2 Prin valoarea deviației standard a semnalului și panta curbei de calibrare

Limita de detecție (LO) este găsită prin ecuația:

ON = 3,3 S/b,

Unde S

b este coeficientul de sensibilitate, care este raportul dintre semnalul analitic și valoarea determinată (tangenta pantei curbei de calibrare).

Sși b

S S a termen liber al ecuației acestui grafic. Valoarea obținută a limitei de detecție, dacă este necesar, poate fi confirmată prin experiment direct la cantități (concentrații) de analit apropiate de valoarea găsită a limitei de detecție.

De regulă, dacă există dovezi ale adecvării unei metode pentru determinarea fiabilă a unei substanțe la concentrații atât peste, cât și sub limita de conținut stabilită de caietul de sarcini, nu este necesară determinarea limitei efective de detectare pentru o astfel de metodă. .

1. LIMITA DE CUANTIFICARE

Limita de cuantificare este cea mai mică cantitate (concentrație) dintr-o substanță dintr-o probă care poate fi cuantificată folosind o metodă validată cu acuratețea și precizia în interiorul laboratorului (intermediară) necesare.

Limita de cuantificare este o caracteristică de validare necesară a procedurilor utilizate pentru a evalua cantități mici (concentrații) de substanțe dintr-o probă și, în special, pentru a evalua conținutul de impurități.

În funcție de tipul de tehnică, se folosesc următoarele metode pentru a găsi limita de cuantificare.

3.1 Pentru metodele cu evaluare vizuală a rezultatului analizei

Testați probe cu diferite cantități (concentrații) cunoscute de analit și stabiliți valoarea minimă la care rezultatul analizei poate fi obținut vizual cu acuratețea și precizia intralaborator (intermediară) cerute.

3.2 Pentru metodele cu evaluare instrumentală a rezultatului analizei

3.2.1 Raportul semnal-zgomot

Setați concentrația minimă a analitului din probă, la care raportul dintre semnalul analitic și nivelul de zgomot este de aproximativ 10:1.

3.2.2 Prin valoarea deviației standard a semnalului și panta curbei de calibrare

Limita de cuantificare (LOQ) se calculează folosind ecuația:

FSP = 10 S/b,

Unde S este abaterea standard a semnalului analitic;

b– coeficientul de sensibilitate, care este raportul dintre semnalul analitic și valoarea determinată.

În prezența datelor experimentale într-o gamă largă de valori măsurate Sși b poate fi estimat prin metoda celor mai mici pătrate.

Pentru o diagramă de calibrare liniară, valoarea S luate egale cu abaterea standard S a termen liber al ecuației acestui grafic. Valoarea obținută a limitei de determinare cantitativă, dacă este necesar, poate fi confirmată prin experiment direct la cantități (concentrații) de analit apropiate de valoarea găsită a limitei de determinare cantitativă.

dacă există dovezi ale capacității unei metode de a detecta în mod fiabil un analit la concentrații peste și sub limita sa de specificație, de obicei nu este necesar să se determine valoarea reală a limitei de cuantificare pentru o astfel de metodă.

1. DOMENIUL ANALITIC AL METODEI

Zona analitică a tehnicii este intervalul dintre valorile superioare și inferioare ale caracteristicilor analitice ale componentei determinate în obiectul analizei (cantitatea, concentrația, activitatea acesteia etc.). În acest interval, rezultatele obținute prin metoda validată trebuie să aibă un nivel acceptabil de acuratețe și precizie în interiorul laboratorului (intermediar).

Următoarele cerințe sunt impuse asupra dimensiunii zonei analitice a metodelor:

– metodele de determinare cantitativă ar trebui să fie aplicabile în intervalul de la 80 la 120% din valoarea nominală a caracteristicii analitice determinate;

- metodele de evaluare a uniformității dozării ar trebui să fie aplicabile în intervalul de la 70 la 130% din doza nominală;

- metodele de cuantificare utilizate în testul de dizolvare ar trebui să fie aplicabile în general în intervalul de la 50 la 120% din concentrația așteptată a substanței active în mediul de dizolvare;

- metodele de testare pentru puritate ar trebui să fie aplicabile în intervalul de la „Limita de cuantificare” sau „Limita de detectare” până la 120% din conținutul admisibil al impurității determinate.

Domeniul de aplicare analitic al tehnicii poate fi stabilit de gama de date experimentale care satisface modelul liniar.

1. LINEARITATE

Liniaritatea tehnicii este prezența unei dependențe liniare a semnalului analitic de concentrația sau cantitatea de analit din proba analizată în aria analitică a tehnicii.

La validarea unei metode, liniaritatea acesteia în regiunea analitică este verificată experimental prin măsurarea semnalelor analitice pentru cel puțin 5 probe cu cantități sau concentrații diferite de analit. Datele experimentale sunt procesate prin metoda celor mai mici pătrate folosind un model liniar:

y = b · X + A,

X- cantitatea sau concentrația analitului;

y este magnitudinea răspunsului;

b- coeficient unghiular;

A- termen liber (OFS „Prelucrarea statistică a rezultatelor unui experiment chimic”).

Valorile trebuie calculate și prezentate. b, Ași coeficientul de corelație r. În cele mai multe cazuri, se folosesc dependențe liniare care îndeplinesc condiția 0,99 și numai atunci când se analizează urme sunt luate în considerare dependențe liniare, pentru care 0,9.

În unele cazuri, posibilitatea de aproximare liniară a datelor experimentale este oferită numai după transformarea lor matematică (de exemplu, luarea de logaritmi).

Pentru unele metode de analiză, care în principiu nu se pot baza pe o relație liniară între datele experimentale, determinarea concentrației sau cantității unei substanțe se realizează folosind grafice de calibrare neliniară. În acest caz, graficul dependenței semnalului analitic de cantitatea sau concentrația analitului poate fi aproximat printr-o funcție neliniară adecvată folosind metoda celor mai mici pătrate, care este fezabilă cu software-ul validat corespunzător.

1. DREAPTA

Corectitudinea tehnicii se caracterizează prin abaterea rezultatului mediu al determinărilor efectuate cu utilizarea acesteia de la valoarea luată ca adevărată.

O tehnică validată este recunoscută ca fiind corectă dacă valorile luate ca adevărate se află în intervalele de încredere ale rezultatelor medii corespunzătoare ale analizelor obținute experimental folosind această tehnică.

Următoarele abordări sunt aplicabile pentru evaluarea validității procedurilor de cuantificare:

a) analiza folosind o metodă validată a probelor standard sau a amestecurilor model cu un conținut (concentrație) cunoscut de analit;

b) compararea rezultatelor obținute prin metoda validată și metoda exemplară, a cărei corectitudine a fost stabilită anterior;

c) luarea în considerare a rezultatelor studierii liniarității metodologiei validate: dacă termenul liber din ecuația dată în secțiunea 5 nu diferă semnificativ statistic de zero, atunci utilizarea unei astfel de metodologii dă rezultate lipsite de eroare sistematică.

Pentru abordările „a” și „b” este posibil să se prezinte datele obținute sub forma unei ecuații de dependență liniară (regresie) între valorile găsite experimental și cele adevărate. Pentru această ecuație, se verifică ipotezele despre egalitatea tangentei unghiului pantei la unitate. b iar pe egalitatea la zero a termenului liber A. De regulă, dacă aceste ipoteze sunt recunoscute ca adevărate cu un grad de fiabilitate egal cu 0,05, atunci utilizarea unei metodologii validate dă rezultate corecte, adică lipsite de erori sistematice.

1. PRECIZIE

Precizia unei tehnici se caracterizează prin dispersia rezultatelor obținute cu utilizarea acesteia în raport cu valoarea rezultatului mediu. O măsură a unei astfel de dispersii este valoarea abaterii standard a rezultatului unei singure determinări, obținută pentru o probă de o dimensiune suficient de mare.

Precizia este evaluată pentru orice procedură de cuantificare prin rezultatele a cel puțin trei determinări pentru fiecare dintre cele trei niveluri de analiți (inferior, mijlociu și superior) care se află în intervalul analitic al metodei. Repetabilitate poate fi, de asemenea, evaluată pentru orice tehnică de analiză din cel puțin șase determinări pentru probe cu conținut de analit aproape nominal. În multe cazuri, evaluarea preciziei poate fi efectuată pe baza rezultatelor prelucrării datelor experimentale folosind metoda celor mai mici pătrate, așa cum este indicat în Monografia Farmacopeei Generale „Prelucrarea statistică a rezultatelor unui experiment chimic”.

Precizia trebuie testată pe probe omogene și poate fi evaluată în trei moduri:

– ca repetabilitate (convergență);

– ca precizie intralaborator (intermediar);

– ca precizie interlaboratoare (reproductibilitate).

Rezultatele evaluării metodei de analiză pentru fiecare dintre opțiunile de precizie sunt de obicei caracterizate de valoarea corespunzătoare a abaterii standard a rezultatului unei determinări separate.

De obicei, la dezvoltarea unei tehnici originale, se determină repetabilitatea (convergența) rezultatelor obținute cu utilizarea acesteia. Dacă este necesară includerea metodei dezvoltate în documentația de reglementare, se determină suplimentar precizia ei intralaborator (intermediară). Precizia (reproductibilitatea) interlaboratoare a unei metode este evaluată atunci când se presupune că aceasta este inclusă într-un proiect de monografie generală de farmacopee, monografie farmacopee sau în documentația de reglementare pentru materialele de referință farmacopee.

7.1 Repetabilitate (convergență)

Repetabilitatea unei proceduri analitice este evaluată prin rezultate independente obținute în aceleași condiții reglementate în același laborator (același executant, același echipament, același set de reactivi) într-o perioadă scurtă de timp.

7.2 Precizie intralaborator (intermediar).

Precizia intralaborator (intermediară) a metodei care se validează este evaluată în condițiile aceluiași laborator (zile diferite, executanți diferiți, echipamente diferite etc.).

7.3 Precizie interlaboratoare (reproductibilitate)

Precizia interlaboratoare (reproductibilitatea) a unei metode validate este evaluată la testarea în diferite laboratoare.

1. STABILITATE

Stabilitatea unei tehnici validate este capacitatea de a menține caracteristicile găsite pentru aceasta în condiții optime (nominale), date în tabel, cu mici abateri probabile de la aceste condiții de analiză.

Robustețea metodei nu trebuie determinată în raport cu condițiile de testare ușor de controlat. Acest lucru reduce drastic necesitatea unui studiu special de stabilitate.

Stabilitatea ar trebui studiată numai atunci când metoda validată se bazează pe utilizarea unor metode de analiză deosebit de sensibile la mediu, cum ar fi diferite tipuri de cromatografie și analiză funcțională. Dacă este necesar, evaluarea stabilității metodologiei se realizează în stadiul dezvoltării acesteia. Dacă stabilitatea scăzută a tehnicii este probabilă, este obligatoriu să se verifice adecvarea acesteia direct în procesul de utilizare practică.

Validarea Sistemului Analitic

Validarea caracterului adecvat al unui sistem analitic este o verificare a îndeplinirii cerințelor de bază pentru acesta. Sistemul a cărui adecvare este testată este o colecție de instrumente specifice, reactivi, standarde și probe aflate în analiză. Cerințele pentru un astfel de sistem sunt de obicei specificate în monografia generală pentru metoda analitică corespunzătoare. Astfel, testarea adecvării sistemului analitic devine o procedură inclusă în metoda validată.

Prezentarea rezultatelor validării

Protocolul de validare pentru metoda analitică trebuie să conțină:

– descrierea sa completă, suficientă pentru reproducere și reflectând toate condițiile necesare efectuării analizei;

– caracteristici evaluate;

- toate rezultatele primare care au fost incluse în prelucrarea datelor statistice;

– rezultatele prelucrării statistice a datelor obţinute experimental în elaborarea sau verificarea unei metodologii validate;

- materiale ilustrative, cum ar fi copiile cromatogramelor obținute prin cromatografie lichidă de înaltă performanță sau cromatografie gazoasă; electroforegrame, spectre electronice și infraroșu; fotografii sau desene ale cromatogramelor obținute prin cromatografie în strat subțire sau pe hârtie; desene de curbe de titrare, grafice de calibrare;

– concluzie privind caracterul adecvat al metodologiei validate pentru includerea în documentul de reglementare.

Materialele de validare pentru metodele analitice individuale ar trebui să fie prezentate sub forma unui raport de validare combinat.