Verihiutaleet ja hemostaasi

M.A. Panteleev1-5, A.N. Sveshnikova 1-3

1Fysikaalisen ja kemiallisen farmakologian teoreettisten ongelmien keskus, Venäjän tiedeakatemia, Moskova; 2FGBU FNKTs DGOI niitä. Dmitri Rogachev, Venäjän terveysministeriö, Moskova; 3 Fysiikan tiedekunta, liittovaltion budjettitaloudellinen korkea-asteen ammatillinen koulutuslaitos Moskovan valtionyliopisto, nimetty M.V. M.V. Lomonosov";

4FGBU Venäjän terveysministeriön valtion tieteellinen keskus, Moskova; 5GemaKor LLC, Moskova

Yhteystiedot: Mihail Aleksandrovitš Pantelejev [sähköposti suojattu]

Verihiutaleet ovat ei-nukleaarisia solufragmentteja, joilla on tärkeä rooli hemostaasissa, pysäyttävät verenvuodon vaurion sattuessa ja myös patologisessa tromboosissa. Pääasiallinen tapa suorittaa tehtävänsä verihiutaleissa on muodostaa aggregaatteja, jotka menevät päällekkäin vauriokohdan kanssa. Ne saavat kyvyn aggregoitua ohimenevän prosessin, jota kutsutaan aktivaatioksi, seurauksena. Huolimatta suhteellisen yksinkertaisesta ja yksiselitteisestä toiminnasta, verihiutaleiden laite on erittäin monimutkainen: niissä on melkein täydellinen sarja organelleja, mukaan lukien endoplasminen verkkokalvo, mitokondriot ja muut muodostelmat; aktivoituessaan verihiutaleet erittävät erilaisia ​​rakeita ja ovat vuorovaikutuksessa plasmaproteiinien ja verisolujen ja muiden kudosten kanssa; itse niiden aktivaatiota säätelevät lukuisat reseptorit ja monimutkaiset signalointikaskadit. Tässä katsauksessa tarkastellaan verihiutaleiden laitetta, sen toiminnan mekanismeja normaaleissa ja patologisissa olosuhteissa, menetelmiä verihiutaleiden toimintahäiriöiden diagnosoimiseksi ja lähestymistapoja niiden korjaamiseen. Erityistä huomiota kiinnitetään niihin verihiutaletieteen osa-alueisiin, joilla mysteerit vielä piilevät.

Avainsanat: verihiutaleiden rakenne, verihiutaleiden toiminta

Verihiutaleet ja hemostaasi M.A. Panteleev1-5, A.N. Sveshnikova 1-3

"Fysikaalisen ja kemiallisen farmakologian teoreettinen ongelmakeskus, Venäjän tiedeakatemia, Moskova; 2 Federal Research Center of Pediatric Hematology, Onkologian ja Immunology, nimeltä Dmitriy Rogachev,

Venäjän terveysministeriö, Moskova; 3 Lomonosov Moskovan valtionyliopisto, fysiikan tiedekunta, Moskova; 4 Hematologinen tutkimuskeskus, Venäjän terveysministeriö, Moskova; 5HemaCore Company, Moskova

Verihiutaleet ovat tumasolufragmentteja, joilla on tärkeä rooli hemostaasissa, verenvuodon lopettamisessa vaurion jälkeen sekä patologisessa veritulpan muodostumisessa. Verihiutaleiden pääasiallinen toiminta on aggregaattien muodostuminen, jotka peittävät vaurion. He saivat kyvyn aggregoitua siirtymäprosessilla, jota kutsutaan aktivaatioksi. Suhteellisen yksinkertaisesta ja määrätystä toiminnasta huolimatta verihiutaleiden rakenne on erittäin vaikea: niillä on lähes täysi joukko organelleja, mukaan lukien endoplasminen verkkokalvo, mitokondriot ja muut kokonaisuudet. Kun aktivoidut verihiutaleet erittävät, erilaiset rakeet ovat vuorovaikutuksessa plasmaproteiinien ja punasolujen ja muiden kudosten kanssa. Niiden aktivaatiota ohjaavat useat reseptorit ja signaalikompleksointikaskadit. Tässä katsauksessa pohdittiin verihiutaleiden rakennetta, sen toimintamekanismeja terveydessä ja sairauksissa, verihiutaleiden toiminnan diagnostisia menetelmiä ja lähestymistapoja niiden korjaamiseen. Erityistä huomiota kiinnitetään niihin verihiutaletieteen osa-alueisiin, joilla on edelleen piilotettuja mysteereitä.

Avainsanat: verihiutaleiden rakenne, verihiutaleiden toiminta

Johdanto

Verihiutaleet ovat pieniä, halkaisijaltaan 2-4 mikrometriä, ei-ydinsolujen fragmentteja (vaikka niitä joskus kutsutaan soluiksi), jotka kiertävät verenkierrossa pitoisuutena 200-400 tuhatta mikrolitraa kohti ja ovat vastuussa prosessin tärkeimmistä vaiheista. verenvuodon pysäyttäminen - hemostaasi. Vamman sattuessa ne pystyvät kiinnittymään vaurioituneisiin kudoksiin ja toisiinsa muodostaen verihiutaletulppaaggregaatin (kuva 1), joka pysäyttää verenhukan ja estää mikrobien pääsyn verenkiertoelimistöön. Tämä ei ole ainoa hemostaasin mekanismi, mutta se on erittäin tärkeä. Perinnölliset ja hankitut verihiutaleiden toiminnan häiriöt, kuten

kuten Glanzmanin trombosthenia tai immuunitrombosytopenia, ovat vakavia sairauksia, joille on ominaista vaarallinen verenvuoto. Verihiutaleet osallistuvat aktiivisesti myös muihin hemostaasin mekanismin komponentteihin: jotkut niiden erittämät aineet aiheuttavat paikallista vasokonstriktiota, kun taas toiset kiihdyttävät veren hyytymisreaktioita.

Toisaalta liiallinen verihiutaleiden toiminta tai määrä tai muut sydän- ja verisuonijärjestelmän häiriöt voivat johtaa verihiutaleiden aggregaattien muodostumiseen ei suonen ulkopuolelle, vaan sen sisälle - trombeihin (kuva 2). Verihiutaletukoksia voi muodostua erilaisissa tilanteissa ja niillä on keskeinen rooli tällaisissa patologisissa tiloissa.

Riisi. 1. Verihiutaleiden muodostama hemostaattinen aggregaatti koiran valtimossa. Valomikroskoopilla (H) nähty verihiutaletulppa, joka tukkii repeytyneen suonen (V). Biopsia otettiin 3 minuuttia vamman jälkeen. Lukuisat punasolut kuvan yläosassa sijaitsevat haavan luumenissa, ulottuen vasemmalta oikealle. Oikeassa alakulmassa oleva kokoasteikko vastaa 10 mikrometriä. Toistettu kohteesta

Riisi. 2. Veritulpan muodostuminen valtimossa. Intravitaal DIC-mikroskooppi trombin muodostumisesta rotan suonessa, joka on vaurioitunut Rose Bengal -värin valoaktivaatiosta. Verisuonen seinämässä oleva veritulppa, joka peittää vauriokohdan, näkyy kuvan oikeassa yläkulmassa. Siinä voidaan erottaa yksittäiset verihiutaleet ja huomata, että ne säilyttävät levymäisen muotonsa kiinnittymisen ensimmäisissä vaiheissa. Virtaussuunta on merkitty nuolella. Asteikko vastaa 5 mikrometriä. Toistettu kohteesta

yaniyah, kuten sydänkohtaukset ja aivohalvaukset. Siten he ovat vastuussa leijonanosasta kuolemantapauksista ja vammaisuudesta nykymaailmassa, ja verihiutaleiden estäjät, kuten klopidogreeli, ovat ylpeitä planeetan myydyimpien lääkkeiden luettelossa.

Verihiutaleet ovat yksinkertaisia ​​monella tapaa: niissä ei ole ydintä, proteiinisynteesiä on vähän tai ei ollenkaan, eivätkä ne voi kasvaa tai jakautua. Verihiutaleen tehtävä - kiinnittyä vauriokohtaan - näyttää myös yksinkertaiselta ja yksiselitteiseltä verrattuna melkein minkä tahansa muun solun tehtäviin. Mutta käytännössä tämä yksinkertaisuus osoittautuu petolliseksi. Tehtävänsä suorittamiseksi ne on aktivoitava prosessissa, jota ohjaavat kymmenkunta aktivaattoria, jotka toimivat lukuisten reseptorien kautta. Verihiutaleen signaalireittien verkosto, joka ohjaa sen vastetta, on monimutkainen ja huonosti ymmärretty. Verihiutaleiden vaste sinänsä ei ole pelkkä "liima", vaan sisältää kymmeniä toimintoja primääriadheesiosta vesikulaatioon.

Perusvaikeuksien lisäksi verihiutaleet ovat täynnä monia käytännön mysteereitä: tällä hetkellä lääkäreiden käsissä ei ole riittävää testiä verihiutaleiden toiminnan arvioimiseksi eikä tehokasta työkalua sen parantamiseen. Huolimatta 1900-luvun lopulla saavutetusta valtavasta edistyksestä glykoproteiini IIb-IIIa- ja P2Y12-reseptoriantagonistilääkkeiden kehittämisessä, verihiutaleiden aktiivisuuden estäminen tromboosin torjumiseksi on edelleen ratkaisematon ongelma. Lopuksi on meneillään intensiivinen tutkimus verihiutaleiden roolista hemostaasin ulkopuolella - angiogeneesissä, immuniteetissa ja muissa järjestelmissä.

Sekä kliiniset että biologiset verihiutaleiden tutkimukset herättävät suurta kiinnostusta asiantuntijoilta ympäri maailmaa. Lähes joka vuosi tuo meille uusia löytöjä, ja ajatukset tärkeimmistä prosesseista ovat kokeneet radikaaleja muutoksia kirjaimellisesti viime vuosina. Tässä katsauksessa olemme yrittäneet keskittyä verihiutaleen peruskäsitteisiin ja puhua viimeisimmistä edistysaskeleista sen toiminnan ymmärtämisessä. Niille, jotka haluavat tutustua tämän hämmästyttävän solun elämän eri puoliin, voimme suositella perusoppikirjaa, jonka on kirjoittanut A.V. Mazurova. Englanninkieliset löytävät arvokasta tietoa Alan Michelsonin toimittamasta Verihiutaleet-viitekirjasta, jota painetaan säännöllisesti.

Verihiutaleiden rakenne

Alkuperäisessä, aktivoimattomassa muodossa verihiutaleet muistuttavat kaksoiskuperia "levyjä" (kuva 3, vasen). Pienen kokonsa (halkaisijaltaan 2-4 mikronia) ansiosta ne kulkevat vapaasti kapillaarien läpi,

Riisi. 3. Verihiutaleet. Elektronimikroskooppikuva aktivoimattomista kiekon muotoisista verihiutaleista (vasemmalla) ja ADP-aktivoiduista verihiutaleista yhdistelmänä (oikealla). Toistettu kohteesta

niin, että niiden muoto on vakio, toisin kuin pakko puristaa punasolujen kapillaarien läpi. Vain aktivoituessa verihiutaleiden muoto muuttuu ja muuttuu useimmissa tapauksissa ameboidiksi (kuva 3, oikea). Verihiutaleiden muotoa ylläpitävät sekä spektrininen sytoskeletoni, joka tekee niiden kuoresta elastisen, että tubuliinimikrotubulusten rengas (kuvio 4), joka tuhoutuu aktivoituessaan. Solun sytoplasmassa on lukuisia rakeita, joista pääasialliset ovat tiiviitä rakeita, jotka sisältävät pääosin pienimolekyylipainoisia aineita, kuten serotoniinia ja adenosiinidifosfaattia (ADP) sekä alfarakeita, jotka sisältävät proteiineja - fibrinogeenia, trombospondiinia, P-selektiiniä, hyytymistekijä V:tä. , von Willebrand factor ja monet muut . Näiden rakeiden sisältö erittyy aktivoitumisen yhteydessä

toimenpiteitä. On tärkeää huomata, että verihiutaleiden muoto on monella tapaa illusorinen. Sen sisäinen ympäristö on itse asiassa jatkuva "sieni", kalvokanavien verkosto, joka toimii kalvon pinnan lisälähteenä aktivoituna ja edistää rakeiden erittymistä.

Kyky aktivoitua - nopea ja useimmissa tapauksissa peruuttamaton siirtyminen uuteen tilaan - on verihiutaleiden tärkein laatu. Melkein mikä tahansa merkittävä ympäristön häiriö yksinkertaiseen mekaaniseen rasitukseen asti voi toimia aktivointiärsykkeenä. Tärkeimmät fysiologiset verihiutaleiden aktivaattorit ovat kuitenkin: 1) kollageeni - solunulkoisen matriisin pääproteiini; 2) trombiini - seriiniproteinaasi, plasman hyytymisjärjestelmän keskusentsyymi; 3) ADP - adeniininukleotidi, joka vapautuu suonen tuhoutuneista soluista tai erittyy itse verihiutaleiden tiheistä rakeista; 4) tromboksaani A2 - eikosanoidien luokkaan kuuluva lipidi, jota syntetisoivat ja erittävät verihiutaleet.

Jokaisen verihiutaleaktivaattorin vaikutus välittyy verihiutaleiden kalvossa olevien erikoistuneiden reseptorien kautta. Siten kollageeni aktivoi verihiutaleita glykoproteiini VI:n kautta, trombiinilla on 2 pääproteinaasiaktivoitua reseptoria PAR1 ja PAR4, ja ADP toimii purinoreseptorien P2Y1 ja P2Y12 kautta. Minkä tahansa reseptorin stimulaatio johtaa solun vastetta säätelevien solunsisäisten signalointikaskadien monimutkaisen verkoston aktivoitumiseen; eri reseptorien kanssa, jotka yleensä laukaisevat erilaisia ​​reittejä.

Kalvo

Avoin putkimainen järjestelmä

Mikrotubulusten rengas

Tiheät rakeet

a-rakeita

Mitokondriot

Tiukka putkimainen järjestelmä

Glykogeeni

Tiheät rakeet

Riisi. 4. Verihiutaleiden rakenne. Vasemmalla olevassa kaaviossa voit erottaa verihiutaleiden rakenteen pääelementit, jotka havaitaan elektronimikroskoopilla. Toistettu kohteesta . Oikealla on 3D-rekonstruktio verihiutaleiden sisäelinten elektronitomografialla. Huomaa, että sinisellä näkyvä kanavajärjestelmä vie valtavan osan solun tilavuudesta. Toistettu kohteesta

Verihiutaleiden aktivaatio ilmenee ulospäin lukuisina sisäisinä uudelleenjärjestelyinä ja ominaisuuksien muutoksina, joista tärkeimmät ovat: 1) muodon muutos ameboidiksi, joillekin verihiutaleille - pallomaiseksi; 2) tartuntakyvyn vahvistaminen - kiinnittyminen vauriokohtaan; 3) aggregoitumiskyvyn ilmaantuminen - kiinnittyminen muihin verihiutaleisiin täysimittaisen tulpan muodostamiseksi; 4) lukuisten edellä kuvattujen pieni- ja korkeamolekyylipainoisten yhdisteiden erittäminen tiheistä rakeista, alfarakeista ja muista lähteistä; 5) prokoagulanttikalvon altistuminen.

Jotkut näistä ominaisuuksista toteuttavat verihiutaleiden päätehtävän - hemostaattisen tulpan muodostumisen, toiset - nopeuttavat veren hyytymisreaktioita. Siten prokoagulanttikalvon paljastaminen ja alfarakeiden erittäminen ovat välttämättömiä juuri verihiutaleiden toisen toiminnon toteuttamiseksi.

Veren koagulaatio on veriplasman reaktioiden sarja, joka päättyy fibriinikuituverkoston muodostumiseen ja veren siirtymiseen nestemäisestä tilasta hyytelömäiseen tilaan. Monet tärkeimmät hyytymisreaktiot ovat kalvoriippuvaisia ​​(kuvio 5), ja ne kiihtyvät useiden suuruusluokkien verran negatiivisesti varautuneiden fosfolipidikalvojen läsnä ollessa, joihin hyytymisproteiinit sitoutuvat ns. kalsiumsiltojen kautta. Normaalisti verihiutalekalvo ei tue hyytymisreaktioita. Negatiivisesti varautuneet fosfolipidit, pääasiassa fosfatidyyliseriini, ovat keskittyneet sisäiseen

kalvokerros, ja ulkokerroksen fosfatidyylikoliini sitoo hyytymistekijöitä paljon huonommin. Huolimatta siitä, että jotkin hyytymistekijät voivat sitoutua aktivoimattomiin verihiutaleisiin, tämä ei johda aktiivisten entsymaattisten kompleksien muodostumiseen.

Verihiutaleiden aktivaatio oletettavasti johtaa scramblaasientsyymin aktivoitumiseen, joka alkaa nopeasti, spesifisesti, kahdenvälisesti ja ADP:stä riippumattomasti siirtää negatiivisesti varautuneita fosfolipidejä kerroksesta toiseen. Tämän seurauksena tapahtuu nopeutunut tasapainon muodostuminen, jolloin fosfatidyyliseriinin pitoisuus molemmissa kerroksissa tulee samaksi. Lisäksi aktivaation aikana tapahtuu monien kalvon ulkokerroksen transmembraanisten proteiinien altistuminen ja/tai konformaatiomuutos, ja ne saavat kyvyn sitoa spesifisesti hyytymistekijöitä kiihdyttäen reaktioita osallistumisellaan. Mielenkiintoista on, että vain osa verihiutaleista osoittaa näitä ominaisuuksia aktivoituna.

Yleisesti ottaen verihiutaleiden aktivoituminen voi olla erilainen: verihiutaleiden aktivaatiolla on useita asteita ja prokoagulanttipinnan ekspressio on yksi korkeimmista. Vain trombiini tai kollageeni voivat aiheuttaa niin voimakkaan vasteen. Heikommat aktivaattorit, erityisesti ADP, voivat edistää vahvojen aktivaattorien toimintaa. Ne eivät kuitenkaan pysty itsenäisesti aiheuttamaan fosfatidyyliseriinin vapautumista kalvon ulkokerrokseen; niiden vaikutukset vähenevät rakeiden osan muodon, aggregoitumisen ja erittymisen muutokseen.

Riisi. 5. Veren hyytymisen kalvoreaktiot. Verihiutaleiden aktivaatio johtaa fosfatidyyliseriinin ilmestymiseen verihiutalekalvon ulkokerrokseen. Hyytymistekijät sitoutuvat tällaisiin kalvoihin kalsiumsiltojen kautta muodostaen proteiinikomplekseja, joissa hyytymisreaktiot kiihtyvät suuruusluokkaa. Kuvassa näkyy protrombinaasikompleksi, joka koostuu tekijöistä Xa, Ya, II ja joka sijaitsee kaksikerroksisen kalvon pinnalla

Miten verihiutale toimii?

Yleisin menetelmä verihiutaleiden hemostaasijärjestelmän tilan testaamiseksi nykyaikaisessa diagnostisessa käytännössä on aggregaatio, jossa jonkin aktivaattorin lisäämisen vaikutus verihiutalesuspensioon arvioidaan optisella tiheydellä. Aktivaattori, yleisimmin ADP tai kollageeni, lisätään verihiutalepitoiseen plasmaan jatkuvasti sekoittaen useiden minuuttien ajan. Verihiutaleet aktivoituvat, ovat vuorovaikutuksessa keskenään ja tapahtuu aggregaattien muodostumista, mikä näkyy suspension sameuden vähenemisenä, joka johtuu valoa sirottavien hiukkasten määrän vähenemisestä. Aggregaatiotestistä on olemassa muunnelmia, joihin liittyy erilaisia ​​havaitsemisperiaatteita: esimerkiksi verihiutaleiden aggregaatiota kokoverestä voidaan mitata käyttämällä impedanssimenetelmää optisen menetelmän sijaan.

Ehkä juuri viime vuosikymmeninä tapahtuneen aggregaatiotestin yleisyyden yhteydessä on monien asiantuntijoiden mielessä vakiintunut ajatus, että verihiutaletukoksen tai hemostaattisen tulpan muodostuminen kehossa tapahtuu samalla tavalla: ensin aktivointi (esimerkiksi vapautettu solusta)

vaurioituneen ADP-suonen seinämän virta) ja sitten aggregaatio. Huolimatta siitä, että verihiutaleiden verihiutaleiden kasvun tutkimuksella virtauskammioissa on lähes puolen vuosisadan historia, tämä perinteinen näkemys on alettu kyseenalaistaa vasta viime vuosikymmeninä.

Harkitse trombin muodostumisen ensimmäistä vaihetta: verihiutaleiden tarttumista kollageeniin, joka on paljastunut vauriokohdassa. Yritetään arvioida tälle prosessille tyypilliset ajat ja etäisyydet. Olkoon vaurioalueen ominaiskoko esimerkiksi l = 10 mikrometriä (1 irronnut endoteelisolu). Olkoon virtausnopeus valtimosta, mikä tarkoittaa, että virtausnopeusgradientti seinällä on noin u = 1000 s - 1. Tällöin verihiutale, jonka ominaiskoko (suuruusjärjestyksessä) on noin x = 1 mikrometri, siirtyy lähelle seinään nopeudella v = x x u = 1000 mikrometriä sekunnissa. Tämä tarkoittaa, että se lentää vauriokohdan yli l/v = 10 mikrosekunnissa, kun taas tyypillinen verihiutaleiden aktivaatioaika on minuuttia, joissakin tapahtumissa (esimerkiksi integriinien aktivoituminen) useita sekunteja, mutta ei sekunnin sadasosaa. Tämä johtaa ainoaan mahdolliseen johtopäätökseen, jota on toistaiseksi kokeellisesti tuettu: jotta verihiutale aktivoituu normaalisti, sen täytyy ensin kiinnittyä vauriokohtaan.

Lisäksi sama koskee myöhempiä tapahtumia, joissa trombin koko kasvaa - aggregaatio. Valtimossa kasvavan veritulpan yläpuolella kelluvan verihiutaleen täytyy ehtiä liittyä siihen sekunnin sadasosissa. Siksi aggregoituminen kehossa voi myös edetä vain yhdellä tavalla: ensin aggregaatio ja sitten aktivointi.

Toinen ongelma on verihiutaleiden liike suonessa verenkierron poikki. Jos verihiutaleet jakautuivat tasaisesti veressä ja liikkuivat rauhallisesti laminaarivirralla suonet pitkin (ja vamman sattuessa haavaa pitkin), kukin omaa virtaviivaansa pitkin, ne eivät voineet lähestyä vauriokohtaa suorittaakseen Heidän tehtävänsä hemostaasissa: tukoksen tarttuminen vauriokohtaan tai jo aktivoituneeseen verihiutaleeseen tarvitaan jonkinlaista fyysistä voimaa solujen saattamiseksi kosketukseen. In vitro -testeissä tämä tehtävä suoritetaan yleensä magneettisekoittimella; mikä toimii kehossa?

Yllä oleva päättely ei tietenkään voi toimia todisteena uudesta kuvasta verihiutaleiden hemostaasista ja tromboosista. Tämä alla hahmoteltu uusi kuva on kehittynyt viimeisten 10 vuoden aikana monien tutkijoiden aktiivisen kokeellisen työn tuloksena, joiden joukossa Shaun P. Jacksonin laboratoriolla Australiassa on johtava rooli; Suurin osa tuloksista saatiin videomikroskoopilla

havainnot veritulpan muodostumisesta in vivo. Lukijan huomiolle esitetyt numeeriset arviot on tarkoitettu vain osoittamaan perinteisen verihiutaleiden aggregaatioidean epätodellisuutta ja sisäistä epäjohdonmukaisuutta.

Kuinka verihiutaletukos muodostuu todellisuudessa?

Ensimmäinen vaihe on punasolujen suorittama verihiutaleiden siirtyminen suonen seinämiin. Punasolut vievät lähes puolet sen tilavuudesta, ne ovat suuruusluokkaa suurempia kuin verihiutaleet sekä pitoisuudeltaan että massaltaan. Eri nopeuksilla eri virtauslinjoilla liikkuvien erytrosyyttien törmäykset johtavat niiden uudelleen jakautumiseen ja keskittymiseen lähellä suonen akselia. Monet tämän prosessin yksityiskohdat eivät ole selviä, mutta samanlaisia ​​uudelleenjakaumia on havaittu eri tyyppisten hiukkasten suspensioissa, ei vain veressä. Kevyet ja pienet verihiutaleet pakotetaan jatkuvasti ulos reuna-alueille, mikä on erittäin kätevää, koska juuri siellä, lähellä mahdollisia vauriokohtia, heidän työpaikkansa sijaitsee; siten verihiutaleiden paikallinen pitoisuus suonen seinämillä on suuruusluokkaa korkeampi kuin keskimääräinen pitoisuus veressä.

Lisäksi jopa suonen seinämillä verihiutaleet törmäävät jatkuvasti erytrosyyttien kanssa, mikä itse asiassa johtaa juuri siihen sekoittumiseen, joka on välttämätöntä vuorovaikutuksen tapahtumiseksi. Tällaisten törmäysten vuoksi verihiutaleet puristuvat usein seinää vasten, ja jos vauriokohta on, ne voivat kiinnittyä siihen. Kahden päämekanismin lisäksi, joille on rakennettu luotettavia teorioita - siirtyminen ja jatkuva työntäminen -, nyt keskustellaan muista, mutta kokeellinen tosiasia on kiistaton: punasolujen läsnäolo lisää verihiutaleiden aggregaatin kasvunopeutta vaurioituneella pinnalla. kuin 10 kertaa.

Toinen ongelma on tarve pysäyttää nopeasti ja varovasti verihiutale, joka on vauriokohdassa tai lähellä kasvavaa veritulppaa. Voidakseen osallistua hemostaattisen tulpan tai veritulpan muodostumiseen, verihiutaleen on sammutettava huomattava nopeus. Tätä varten verihiutaleissa oleva erityinen reseptori, glykoproteiini Ib-V-IX ja vereen liuennut von Willebrand -tekijä (kuva 6) palvelevat. Tämä tekijä, joka kiertää suurina, halkaisijaltaan jopa 100 nanometrin multimeereinä, pystyy sitoutumaan palautuvasti hyytymän kollageeniin ja verihiutaleisiin siten, että se peittää ne nopeasti. Ohittavat verihiutaleet tarttuvat von Willebrandin tekijään ja alkavat pysähtyä. Jos ne sitoisivat kollageenia suoraan, niiden äkillinen pysäyttäminen olisi vahingollista, mutta löyhästi sitoutunut von Willebrand -tekijä voi irrota ja kiinnittyä takaisin kollageeniin, jolloin verihiutaleet voivat asettua melko nopeasti.

liukuen vain muutaman sen pituuden läpi, kuin lentokone, joka laskeutuu vatsalleen.

Aktivointi tässä lähestymistavassa ei ole ensimmäinen, vaan viimeinen vaihe trombin muodostumisessa. Verihiutale, joka on palautuvasti kiinnittynyt vauriokohtaan, voi katketa; aktivointi voi kuitenkin vakauttaa sen. Ensimmäisen kerroksen verihiutaleet, jotka ovat asettuneet suoraan kollageeniin, aktivoituvat kollageenin vaikutuksesta glykoproteiini VI -reseptorin kautta ja sitoutuvat sitten lujasti kollageeniin integriini a2p1 -reseptorin kautta: tämän perheen proteiinit pystyvät muuttamaan konformaatiotaan ja sitoutumisvoimakkuutta. kohde solunsisäisten signaalien vaikutuksesta (kuvio 6). Normaalitilassaan se ei ole vuorovaikutuksessa kollageenin kanssa, mutta aktivoituessaan se on tiukasti kiinni siihen.

Seuraavien verihiutalekerrosten kiinnittyminen eli varsinainen veritulpan kasvu tapahtuu samalla tavalla: ensin solut istuvat löyhästi von Willebrand -tekijän päällä ja aktivoitumisen jälkeen ne kiinnittyvät turvallisesti integriinireseptorien kautta. Ero on siinä, että verihiutaleet kommunikoivat keskenään toisen integriinin, jota kutsutaan aPbp3:ksi (tai Pb-Sha-glykoproteiiniksi), kautta: nämä reseptorit "tarttuvat" fibrinogeenimolekyyliin kahdelta puolelta ja sitovat yksittäisiä verihiutaleita tällaisten "fibriini-geenisiltojen" kautta. Toinen ero on, että seuraavat verihiutalekerrokset eivät aktivoidu joutuessaan kosketuksiin kollageenin kanssa (joka on jo ensimmäisen kerroksen peitossa), vaan liukoisten aktivaattorien vaikutuksesta, joita joko verihiutaleet erittävät itse (ADP, tromboksaani A2) tai muodostuvat plasman hyytymisjärjestelmän (trombiini) toiminta . On tärkeää korostaa jälleen, että nämä aktivaattorit toimivat yksinomaan hyytymän sisällä: sen ulkopuolella oleva nopea virtaus kuljettaa ne pois estäen uusien solujen kerääntymisen hyytymään.

Kuva verihiutaletukoksen kasvusta in vivo on nyt melko vakiintunut, ja edellä kuvattu tapahtumasarja on yleisesti hyväksytty. Siitä huolimatta siinä on paljon epäselviä paikkoja, joista keskustellaan jäljempänä.

Ongelmia verihiutaleiden toiminnan diagnosoinnissa

Tällä hetkellä verihiutaleiden toiminnan diagnoosi tehdään vähintään 90 % aggregaatiotutkimuksella. Tämän lähestymistavan periaatteita ja puutteita on käsitelty edellä; suurin ongelma on, että mikään aggregaatiotesteistä ei vastaa sitä, mitä tapahtuu in vivo.

Todennäköisesti vielä 10 % toiminnallisesta arvioinnista saadaan virtaussytometrialla, jonka avulla voit määrittää proteiinien antigeenisen koostumuksen verihiutaleiden pinnalla. Koulutetuimmat asiantuntijat voivat myös käyttää sytometriaa verihiutaleiden toimintojen yksityiskohtaisempaan karakterisointiin: integriinin aktivaatioon, rakeiden ja fosfatidyyliseriinin vapautumiseen. Tämä tarjoaa hyödyllistä tietoa solun yksittäisistä molekyyleistä ja kyvyistä. Tämä kaikki ei kuitenkaan vastaa yleiseen kysymykseen: kuinka arvioida riittävästi verihiutaleiden toimintaa yleensä?

Luonnollisin vastaus on pakottaa verihiutaleet muodostamaan verihyytymiä olosuhteissa, jotka ovat lähellä fysiologisia. Virtauskammiot, joissa verihiutaleiden tarttumista kollageenipäällysteiseen alustaan ​​tutkitaan mikroskopialla, ovat saamassa yhä enemmän käyttöä. Tällä hetkellä kameroita on jo kaupallisesti saatavilla ja niiden standardointi on meneillään, vaikka se on vielä kaukana merkittävästä kliinisestä sovelluksesta diagnostisen kompleksin käytännössä. Videomikroskopian mahdollinen kilpailija on samanlaisia ​​käytettyjä lähestymistapoja

GP Ib-V-IX | GP VI

toimimaton teko

kollageeni

Riisi. 6. Verihiutaletukoksen alkukasvun päämekanismi. Verihiutaleen ensisijainen kiinnittyminen vauriokohtaan tapahtuu glykoproteiinin W-Y-1X:n pääadheesioreseptorin vuorovaikutuksen kautta paljastuneeseen kollageeniin kiinnittyneen von Willebrand-tekijän (VW) välittäjämolekyylin kanssa (vaihe 1). Signalointireseptorin glykoproteiini VI sitoutuu sitten kollageeniin, mikä johtaa verihiutaleiden aktivaatioon (vaihe 2). Integriinien a2p1 (toimii kollageenin sitomiseen) ja aIIIp3 (sitoutuu fibrinogeenisiltojen kautta muiden verihiutaleiden kanssa) aggregaatioreseptorien aktivoituminen edistää aktivoituneiden verihiutaleiden kiinnittymistä kollageeniin (vaihe 3) ja luo perustan veritulpan lisäkasvulle. Toistettu kohteesta

RBL-tyyppisissä laitteissa, jotka arvioivat verihiutaleiden kykyä tukkia patruuna aggregaatteilla, joiden läpi kokoveri pumpataan.

Verihiutaleiden toiminnan korjausongelmat

Verihiutaleiden toiminnan hallinta on yksi tärkeimmistä tavoista torjua melkein minkä tahansa tyyppistä valtimotromboosia. Aluksi päälääke tähän tarkoitukseen oli aspiriini, joka estää tromboksaani A2:n synteesiä: lääkkeen pitkästä historiasta huolimatta sen kyky estää veritulpan muodostumista ja vähentää sydänkohtauksen riskiä oli vasta 1900-luvun toisella puoliskolla. löydetty. 1990-luvulla ilmestyi tehokkaita verihiutaleiden estoaineita, jotka hyökkäsivät fibrinogeenireseptoriin, aPp3-integriiniin: absiksimabi, tirofibaani, eptifibatidi sekä kotimainen lääke Monafram. Nyt nämä molemmat lääkeluokat on suurelta osin korvattu adenosiinidifosfaattireseptorin P2Y12 estäjillä: tämä on ensisijaisesti klopidogreeli sekä prasugreeli, tikagrelori ja cangrelor. Parhaillaan kehitetään uusia lääkkeitä, jotka ovat tehokkaampia ja joilla on pienempi verenvuotoriski.

Vaikeampi tehtävä on mitä tehdä, kun verihiutaleita on vähän tai ne eivät toimi hyvin? Verihiutalekonsentraattien valmistus- ja varastointitekniikka saavutti parhaat tulokset 1980-luvun puoliväliin mennessä, eikä sen jälkeen ole tapahtunut perustavanlaatuisia läpimurtoja. Lyhyt elinikä, suuri immuunikomplikaatioiden ja potilaan infektioriski, jatkuvasti kasvava pula luovuttajista kaikkialla maailmassa ja keinotekoisten korvikkeiden puuttuminen aivan viime aikoihin asti tekevät verihiutaleiden siirrosta erittäin epätyydyttävän, ehkä ongelmallisimman. kaikkien veren komponenttien joukossa.

Viime vuosikymmeninä ainoa saatavilla kliiniseen käyttöön

Vaihtoehto perinteisille trombotiivisteille oli kylmäsäilytys, joka mahdollisti niiden käyttöiän pidentämisen useisiin vuosiin. Mutta verihiutaleiden ominaisuuksien säilyttämisongelmaa jäädytyksen ja sulatuksen aikana ei voitu ratkaista loppuun asti. Lisäksi näiden solujen jäädyttäminen on liitetty niin moniin teknisiin vaikeuksiin, että se ei ole toistaiseksi kyennyt kilpailemaan menestyksekkäästi jäätymättömien verihiutalekonsentraattien käytön kanssa.

Siksi joka vuosi kiinnitettiin yhä enemmän huomiota jo 1950-luvulla aloitettuun työhön sellaisten uusien lääkkeiden ja menetelmien luomiseksi, joilla voitaisiin radikaalisti pidentää luovuttajaverihiutaleiden käyttöikää ja helppokäyttöisyyttä ja jopa luoda mahdollisia analogeja, jotka hylättäisiin kokonaan. niiden käyttöä. Antibakteeriset lääkkeet ja verihiutaleiden estäjät, uudet kylmäsäilöntäaineet ja pakastusmenetelmät, lyofilisoidut verihiutaleet ja verihiutalekalvopohjaiset vesikkelit, hemostaattiset punasolut ja liposomit – tämä ei ole täydellinen luettelo lähestymistavoista, joita on käytetty tämän tavoitteen saavuttamiseksi. Jotkut niistä - esimerkiksi lyofilisoidut S1a$1x -verihiutaleet - ovat jo aktiivisissa kliinisissä tutkimuksissa.

Verihiutaleiden mysteerit

Alapopulaatiot. Yksi verihiutaleiden kiehtovimmista mysteereistä on niiden heterogeenisyys. Verihiutaleiden aktivoituessa muodostuu 2 alapopulaatiota, joilla on dramaattisesti erilaiset ominaisuudet. Niiden muodostumista ohjaavat tuntemattomat signalointireitit. Mielenkiintoista on, että yksi näistä alapopulaatioista kiihdyttää hyytymisreaktioita, kun taas toinen pystyy normaaliin aggregaatioon (kuva 7). Tämä verihiutaleiden kahden päätoiminnon jako on kiehtova, mutta selitystä ei ole vielä tarjottu.

Riisi. 7. Verihiutaleiden alapopulaatiot eroavat radikaalisti kyvystään nopeuttaa hyytymis- ja aggregaatioreaktioita. Pistekaaviot aktivoimattomien (vasemmalla) ja aktivoituneiden (oikealla) verihiutaleiden suspensiosta virtaussytometrillä. Abskissa osoittaa anneksiini V:n, fosfatidyyliseriinin merkkiaineen, fluoresenssin. Y-akselilla näkyy fibrinogeenifluoresenssi. Voidaan havaita, että aktivoitumisen aikana muodostuu 2 verihiutaleiden alapopulaatiota, joista toinen on fosfatidyyliseriinin tasoltaan suuruusluokkaa suurempi kuin toinen, mutta on yhtä huonompi fibrinogeenin sitoutumisen suhteen. Toistettu kohteesta

Veritulpan kasvun pysäyttäminen. Yllä tarkastelimme tapahtumasarjaa, joka tapahtuu verihiutaletukoksen kasvun aikana. Yksi suurimmista ongelmista, joka on edelleen ratkaisematta, on kysymys tämän kasvun pysäyttämisestä: miksi joissain tapauksissa suoni tukkeutuu kokonaan, kun taas toisissa suoni pysyy vapaana? Nyt on olemassa noin tusina hypoteesia, jotka selittävät veritulpan rajallisen koon. Yksi aktiivisimmin käsitellyistä on oletus, että trombin ylemmän, epävakaan osan ajoittain tuhoutuessa sisälle muodostunut fibriini paljastuu. Tämä ongelma on kuitenkin vielä kaukana ratkaisusta. Suurella todennäköisyydellä pysäytysmekanismeja voi olla useampi kuin yksi, ja eri suonille nämä mekanismit voivat olla erilaisia.

Verihiutaleet ja kosketusreitti. Melko kauan sitten tutkijat osoittivat, että verihiutaleet voivat mahdollisesti aktivoida veren hyytymistä kosketusreitin kautta. Tärkeimmät ehdokkaat aktivaattoreiden rooliin ovat polyfosfaatit, jotka syntyvät tiheistä rakeista aktivoinnin yhteydessä, vaikka tämä näkökulma on kumottu. Ilmeisesti tämän aktivaation vuoksi veren hyytymisen aktivoitumisen kontaktireitti on tärkeä verihiutaletukoksen kasvulle, kuten viimeaikaisissa töissä on osoitettu. Tämä löytö antaa meille mahdollisuuden toivoa uusien antitromboottisten lääkkeiden luomista.

Mikrovesikkelit. Aktivoituessaan verihiutaleet pilkkovat lipidimikrohiukkasia, joita kutsutaan myös mikrorakkuloiksi. Reseptorit ovat keskittyneet niiden pinnalle, ja siksi näillä hiukkasilla on valtava prokoagulanttiaktiivisuus: niiden pinta on 50-100 kertaa aktiivisempi kuin aktivoituneiden verihiutaleiden pinta. Miksi verihiutaleet tekevät tämän, on epäselvää. Tällaisten rakkuloiden määrä terveidenkin ihmisten veressä on kuitenkin merkittävä, ja se lisääntyy merkittävästi potilailla, joilla on erilaisia ​​sydän- ja verisuonisairauksia ja hematologisia sairauksia, mikä korreloi tromboosiriskin kanssa. Näitä opiskelemassa

rakkuloita haittaa niiden pieni koko (30-300 nm), joka on paljon pienempi kuin valon aallonpituus.

Verihiutaleet onkologiassa. Verihiutaleilla on kaksinkertainen rooli syövässä. Toisaalta ne lisäävät laskimotromboosin riskiä ja vakavuutta, mikä on tyypillistä kasvainpotilaille. Toisaalta ne vaikuttavat suoraan taudin kulkuun säätelemällä angiogeneesiä, kasvaimen kasvua ja etäpesäkkeitä useiden mekanismien kautta. Verihiutaleiden ja syöpäsolujen vuorovaikutusmekanismit ovat monimutkaisia ​​ja huonosti ymmärrettyjä, mutta niiden poikkeuksellinen merkitys on nyt kiistaton.

Johtopäätös

Verihiutaleet ovat tärkeimpiä osallistujia sekä normaalissa hemostaasissa että patologisessa tromboottisessa prosessissa, jonka tila on kriittinen useille sairauksille ja tiloille. Tällä hetkellä verihiutaleiden toiminnan ymmärtämisessä ja verihiutaleiden hemostaasin korjaamisessa on edistytty merkittävästi, mutta tieteellisten mysteerien määrä on edelleen erittäin suuri: verihiutaleiden vuorovaikutus plasman hemostaasin kanssa, signaloinnin monimutkaisuus, säätelymekanismit kasvua ja verihiutaleiden tukoksen pysäyttämistä. Viime aikoina on ilmestynyt tietoa verihiutaleiden vuorovaikutuksesta muiden kehon järjestelmien kanssa, mikä osoittaa niiden tärkeän roolin immuniteetissa ja morfogeneesissä. Suurin käytännön vaikeuksista on riittävien verihiutaleiden toiminnan integraalisten testien puute ja tämän toiminnan normalisoinnin vaikeus.

Kiitos

Kirjoittajien työtä ovat tukeneet Venäjän perustutkimussäätiön apuraha 14-04-00670 sekä Venäjän tiedeakatemian perustutkimusohjelmien "Molecular and Cellular Biology" ja "Perustutkimuksen kehittäminen Biolääketieteen teknologiat".

KIRJALLISUUS

1. Sixma J.J., van den Berg A. Hemostaattinen tulppa hemofilia A:ssa:

morfologinen tutkimus hemostaattisten tulppien muodostumisesta verenvuotoaikaisissa ihohaavoissa potilailla, joilla on vaikea hemofilia A. BrJ Haematol 1984;58(4):741-53.

2. Maxwell M.J., Westein E., Nesbitt W.S.

et ai. Leikkauksesta riippuvaista trombin muodostumista välittävän 2-vaiheisen verihiutaleiden aggregaatioprosessin tunnistaminen. Blood 2007; 109(2):566-76.

3. Mazurov A.V. Verihiutaleiden fysiologia ja patologia. M.: GEOTAR-Media, 2011. 480 s.

4 Michelson A.D. verihiutaleet. 3. painos, 2013. Lontoo; Waltham, MA: Academic Press, xliv, 1353 s.

5. Ohlmann P., Eckly A., Freund M. et ai. ADP indusoi osittaista verihiutaleiden aggregaatiota ilman muodonmuutosta ja voimistaa kollageenin aiheuttamaa aggregaatiota Galphaqin puuttuessa. Blood 2000;96(6):2134-9.

6. Valkoinen J.G. Elektronimikroskopiamenetelmät verihiutaleiden rakenteen ja toiminnan tutkimiseen. Methods Mol Biol 2004;272:47-63.

7. van Nispent tot Pannerden H., de Haas F., Geerts W. et ai. Verihiutaleiden sisäosat tarkistettiin:

elektronitomografia paljastaa putkimaisia ​​alfa-rakeiden alatyyppejä. Blood 2010;116(7):1147-56.

8. Blair P., Flaumenhaft R. Verihiutaleiden alfa-rakeet: perusbiologia ja kliiniset korrelaatit. Blood Rev 2009;23(4):177-89.

9. Abaeva A.A., Canault M., Kotova Y.N. et ai. Prokoagulanttiverihiutaleet muodostavat niiden pinnalle alfarakeisella proteiinilla peitetyn "korkin", joka edistää niiden kiinnittymistä

aggregaateille. J Biol Chem 2013;288(41):29621-32.

10. Kaplan Z.S., Jackson S.P. Rooli

verihiutaleiden määrä aterotromboosissa. Hematologia

Am Soc Hematol Education Program 2011;2011:51-61.

11. Tanaka K.A., Key N.S., Levy J.H. Veren hyytyminen: hemostaasi ja trombiinin säätely. Anesth Analg 2009; 108(5): 1433-46.

12. Panteleev M.A., Ananyeva N.M., Greco N.J. et ai. Kaksi alapopulaatiota

trombiiniaktivoitujen verihiutaleiden osuudet eroavat sitoutuessaan X-tekijää aktivoivan kompleksin komponentteihin. J Thromb Haemost 2005;3(11):2545-53.

13. Topalov N.N., Kotova Y.N., Vasil'ev S.A., Panteleev M.A. Signaalinvälitysreittien tunnistaminen, jotka liittyvät verihiutaleiden alapopulaatioiden muodostumiseen aktivoinnin yhteydessä. Br J Haematol 2012;157(1):105-15.

14. Yakimenko A.O., Verholomova F.Y., Kotova Y.N. et ai. Aktivoituneiden verihiutalealapopulaatioiden erilaisten proaggregaatiokykyjen tunnistaminen. Biophys J 2012;102(10):2261-9.

15. Kotova Y.N., Ataullakhanov F.I., Panteleev M.A. Pinnoitettujen verihiutaleiden muodostumista säätelee 5"-adenosiinidifosfaatin tiheä jyväeritys, joka toimii P2Y12-reseptorin kautta. J Thromb Haemost 2008;6(9):1603-5.

16. Uijttewaal W.S., Nijhof E.J., Bronkhorst P.J. et ai. Lähellä seinää oleva verihiutaleiden ylimäärä, joka johtuu erytrosyyttien sivuttaisesta kulkeutumisesta virtaavassa veressä. Am J Physiol 1993; 264 (4 Pt 2): H1239-44.

17. Tokarev A.A., Butylin A.A., Ataullakhanov F.I. Verihiutaleiden adheesiota leikkausveren virtauksesta säätelevät lähellä seinää pomppivat törmäykset erytrosyyttien kanssa. Biophys J 2011; 100(4):799-808.

18. Turitto V.T., Weiss H.J. Punaiset verisolut: niiden kaksoisrooli veritulpan muodostumisessa. Science 1980;207(4430):541-3.

19. Nieswandt B., Brakebusch C., Bergmeieret W. et ai. Glykoproteiini VI, mutta ei alfa2beta1-integriini, on välttämätön verihiutaleiden vuorovaikutukselle kollageenin kanssa. EMBO J 2001;20(9):2120-30.

20. Westein E., de Witt S., Lamers M. et ai. In vitro trombin muodostumisen seuranta uusilla mikrofluidilaitteilla. Verihiutaleet 2012;23(7):501-9.

21. Favaloro E.J., Bonar R. Ulkoinen laadunarviointi/pätevyystestaus ja sisäinen laadunvalvonta PFA-100:lle ja PFA-200:lle: päivitys. Semin Thromb Hemost 2014;40(2):239-53.

22. Kristensen S.D., Würtz M., Grove E.L. et ai., Glykoproteiini IIb/IIIa:n estäjien nykyaikainen käyttö. Thromb Haemost 2012; 107(2):215-24.

23 Ferri N., Corsini A.,

Bellosta S. Uusien P2Y12-reseptorin estäjien farmakologia: näkemyksiä farmakokineettisistä ja farmakodynaamisista ominaisuuksista. Drugs 2013;73(15):1681-709.

24. Bode A.P., Fischer T.H. Lyofilisoidut verihiutaleet: valmisteilla viisikymmentä vuotta. Artif Cells Blood Substit Immobil Biotechnol 2007;35(1):125-33.

25. Heemskerk J.W., Mattheij N.J., Cosemans J.M. Verihiutalepohjainen koagulaatio: eri populaatiot, erilaiset toiminnot.

J Thromb Haemost 2013;11(1):2-16.

26. Tosenberger A., ​​Ataullakhanov F., Bessonov N. et ai. Tromboskasvun mallinnus virtauksessa DPD-PDE-menetelmällä. J Theor Biol 2013;337:30-41.

27. Back J., Sanchez J., Elgue G. et ai. Aktivoidut ihmisen verihiutaleet indusoivat tekijä Xlla-välitteisen kontaktiaktivaation. Biochem Biophys Res Commun 2010;391(1):11-7.

28. Müller F., Mutch N.J., Schenk W.A. et ai. Verihiutalepolyfosfaatit ovat tulehdusta edistäviä ja prokoagulantteja välittäjiä in vivo. Cell 2009; 139(6):1143-56.

29. Faxälv L., Boknäs N., Ström J.O. et ai. Polyfosfaattien testaus: todisteita verihiutaleiden aiheuttamaa tekijä XII:n aktivaatiota vastaan. Blood 2013;122(23):3818-24.

30. Hagedorn I., Schmidbauer S., Pleines I. et ai. Tekijän XIIa estäjä rekombinantti ihmisen albumiini Infestin-4 poistaa tukkeutuneen valtimotukoksen muodostumisen vaikuttamatta verenvuotoon. Levikki 2010;121(13):1510-7.

31. Sinauridze E.I., Kireev D.A., Popenko N.Y. et ai. Verihiutaleiden mikrohiukkaskalvoilla on 50-100 kertaa korkeampi spesifinen prokoagulanttiaktiivisuus kuin aktivoiduilla verihiutaleilla. Thromb Haemost 2007;97(3):425-34.

32. Hargett L.A., Bauer N.N. Mikrohiukkasten alkuperästä: "Verihiutalepölystä"

solujen välisen viestinnän välittäjille. Pulm Circ 2013;3(2):329-40.

33. Riedl J., Pabinger I., Ay C. Trombots in cancer and thrombosis. Hamostaseologie 2014;34(1):54-62.

34. Sharma D., Brummel-Ziedins K.E., Bouchard B.A., Holmes C.E. Verihiutaleet kasvaimen etenemisessä: isäntätekijä, joka tarjoaa useita mahdollisia kohteita syövän hoidossa. J Cell Physiol 2014; 229(8):1005-15.

verihiutaleet- verisoluja, joiden lukumäärä on 150-400 109 / l. Nämä ovat ei-ytimiä, pigmentittömiä pyöreitä rakenteita, jotka näyttävät halkaisijaltaan noin 3,6 mikronin levyiltä. Ne muodostuvat luuytimessä suurista soluista-megakaryosyyteistä sytoplasman pirstoutuessa, niiden määrä veressä on vakio. Intensiivisellä käytöllä uusien verihiutaleiden muodostumisnopeus voi kuitenkin kasvaa 8-kertaiseksi. Trombosytopoieesin stimulaatio trombopoietiini, jota tuotetaan maksassa ja osittain munuaisissa. Trombosytopeniaa voivat aktivoida myös muut hematopoieettiset tekijät, erityisesti interleukiinit (1/1-3, IL-6, IL-11), mutta tämä prosessi ei ole spesifinen trombopoietiiniin verrattuna.

Verihiutaleiden rakenne ja toiminta

Tiheät rakeet (β) sisältävät ei-proteiiniaineita: ADP:tä ja serotoniinia; verihiutaleiden aggregaatiota edistävät tekijät sekä verihiutaleiden aggregaatiota estävät ATP ja Ca2. Lysosomaaliset rakeet sisältävät hydrolyyttisiä entsyymejä ja peroksisomit sisältävät katalaasia. Verihiutaleiden ja VKS:n ulkokuori on peitetty glykoproteiineilla, jotka edistävät verihiutaleiden adheesiota ja aggregaatiota.

Verihiutaleiden kalvolla on reseptoreja fysiologisille verihiutaleiden aktivaattoreille (ATP, adrenaliini, serotoniini, tromboksaani Aj).

Verihiutaleiden toiminnot:

■ verihiutaleet käynnistävät nopeasti hemostaasijärjestelmän. Verihiutaleiden tarttumisesta (tarttumisesta) ja aggregaatiosta (kerääntymisestä) johtuen mikroverisuonien verisuonissa muodostuu valkoinen veritulppa

■ erittää paikallisesti vaurioituneelle alueelle verisuonia supistavia aineita;

■ aktivoi hyytymishemostaasin alkamista fibriinitukoksen muodostumisen myötä,

■ säätelee paikallisia tulehdusreaktioita.

Lepotilassa verihiutaleilla on sytoplasminen kalvo, joka on paikallisesti tunkeutunut ja joka liittyy verihiutaleiden sisällä kanavaverkkoon, jota kutsutaan avoimeksi tubulaarijärjestelmäksi (OCS). Sisäkalvon toinen järjestelmä (tiheä putkimainen järjestelmä) muodostuu megakaryosyyttien endoplasmisesta retikulumista, eikä se liity solunulkoiseen tilaan. Aktivoimattomien verihiutaleiden sytoplasmassa on rakeita, mukaan lukien α-rakeita, tiheitä β-rakeita, lysosomi- ja peroksisomirakeita (kuva 9.20).

Suurin osa verihiutaleista on α-rakeita, jotka sisältävät erilaisia ​​peptidejä, jotka osallistuvat näiden prosessien hyytymis-, tulehdus-, immuniteetti-, korjaus- ja modulaatiomekanismeihin.

RIISI. 9.20.

Verihiutaleiden aktivaatio suoritetaan vain, kun verisuonen endoteeli on vaurioitunut ja on kosketuksissa subendoteliaaliseen matriisiin, jossa sijaitsevat kollageeni, muut proteiinit, von Willebrand -tekijä (endoteelin tuottama). Verihiutaleiden kalvoreseptorit sitoutuvat von Willebrand -tekijään (VWF), kollageeniin ja muihin proteiineihin, mikä johtaa verihiutaleiden aktivaatioon, adheesioon, muodon muutoksiin ja tiiviiden rakeiden ja α-rakeiden peruuttamattomaan erittymiseen. Verihiutaleiden muodon muutos johtuu supistuvien mikrofilamenttien solunsisäisestä järjestelmästä, mikä johtaa niiden kalvon pinnan kasvuun ja sen avoimien tubulusten kautta koagulaatiohemostaasiin osallistuvien aineiden vapautumiseen.

Fibrinogeeni kiinnittyy kalvon pintaan sen glykoproteiinien tilan muutoksen vuoksi, edistää verihiutaleiden aggregaatiota. Verihiutaleissa tromboksaani A2 syntetisoituu arakidonihaposta, joka vapautuu tiheän putkimaisen järjestelmän kalvon kautta, verihiutaleita aktivoivan tekijän (TAF) synteesi, mikä tehostaa verihiutaleiden aggregaatiota ja aktivoi neutrofiilejä. Trombiinin muodostuminen lisää myös verihiutaleiden aggregaatiota.

Tiedetään, että verihiutaleet syntetisoivat ja kerääntyvät α-rakeisiin veren hyytymistekijöitä V, VIII, XIII, von Willebrand -tekijää ja fibrinogeenia, jotka vapautuvat eksosytoosin kautta.

Verihiutalekalvon lipoproteiinit katalysoivat useita tekijöitä protrombinaasin muodostumisessa. Aktivoidut verihiutaleet sitovat trombiinia ja trombomoduliinia (α-rakeiden komponenttia), mikä edistää antikoagulanttiproteiini C:n aktivoitumista.

Verihiutaleet erittävät kasvutekijöitä α-rakeista vaurioituneelle alueelle, edistävät fibroblastien lisääntymistä ja vaurioituneen kudoksen korjaamista. Niillä on yhteys humoraaliseen immuunijärjestelmään ja ne sitovat IgG:tä, joka tulee soluun endosytoosin kautta, varastoituu a-rakeisiin, jotka erittyvät myöhemmin eksosytoosin kautta.

RIISI. 9.21. Verisuonten ja verihiutaleiden homeostaasin vaiheiden järjestys. EF - von Willebrand -tekijä, PF-6 - trombosteniini

Verihiutaleet, verihiutaleet, tuoreessa ihmisveressä näyttävät pieniltä värittömiltä kappaleilta, jotka ovat pyöreitä, soikeita tai fusiformisia, kooltaan 2-4 mikronia. Ne voivat yhdistyä (agglutinoitua) pieniksi tai suuriksi ryhmiksi (kuva 4.29). Niiden määrä ihmisen veressä vaihtelee välillä 2,0 × 10 9 /l - 4,0 × 10 9 /l. Verihiutaleet ovat sytoplasman ei-nukleaarisia fragmentteja, jotka on erotettu megakaryosyyteistä - luuytimen jättiläissoluista.

Verenkierrossa olevat verihiutaleet ovat kaksoiskuperan levyn muotoisia. Kun verisoluja värjätään taivaansinisellä eosiinilla, verihiutaleet paljastavat vaaleamman reunaosan - hyalomerin ja tummemman, rakeisen osan - granulomeerin, jonka rakenne ja väri voivat vaihdella verihiutaleiden kehitysvaiheen mukaan. Verihiutalepopulaatiossa on sekä nuorempia että erilaistuneempia ja ikääntyviä muotoja. Nuorten levyjen hyalomeeri muuttuu siniseksi (basofileeni) ja kypsillä levyillä vaaleanpunaiseksi (oksifyleeni). Nuoret verihiutalemuodot ovat suurempia kuin vanhat.

Verihiutalepopulaatiossa on 5 päätyyppiä verihiutaleita:

1) nuori - sinisellä (basofiilisellä) hyalomerillä ja yksittäisillä atsurofiilisillä rakeilla punertavan violetissa granulomeerissa (1-5%);

2) kypsä - hieman vaaleanpunainen (oksofiilinen) hyalomeeri ja hyvin kehittynyt atsurofiilinen rakeisuus granulomeerissa (88 %);

3) vanhat - tummemmalla hyalomeerilla ja granulomeerilla (4%);

4) rappeuttava - harmahtavansinisellä hyalomeerilla ja tiheällä tumman violetilla granulomeerilla (jopa 2%);

5) jättiläismäiset ärsytyksen muodot - punertavan lila hyalomerilla ja violetilla granulomeerilla, kooltaan 4-6 mikronia (2%).

Sairauksissa verihiutaleiden eri muotojen suhde voi muuttua, mikä otetaan huomioon diagnoosia tehtäessä. Nuorten muotojen määrän kasvua havaitaan vastasyntyneillä. Onkologisissa sairauksissa vanhojen verihiutaleiden määrä lisääntyy.

Plasmalemmassa on paksu glykokalyksinen kerros (15-20 nm), se muodostaa invaginaatioita, joissa on lähteviä tubuluksia, jotka ovat myös glykokalyksin peitossa. Plasmakalvo sisältää glykoproteiineja, jotka toimivat pintareseptoreina, jotka osallistuvat verihiutaleiden adheesio- ja aggregaatioprosesseihin.

Verihiutaleiden sytoskeletoni on hyvin kehittynyt ja sitä edustavat aktiinimikrofilamentit ja mikrotubulusten kimput (kumpaakin 10-15), jotka on järjestetty ympyrämäisesti hyolomeeriin ja plasmolemman sisäosan viereen (kuvio 46-48). Sytoskeleton elementit ylläpitävät verihiutaleiden muotoa, osallistuvat niiden prosessien muodostumiseen. Aktiinifilamentit osallistuvat muodostuneiden verihyytymien tilavuuden pienentämiseen (sisäänvetoon).

Verihiutaleissa on kaksi tubulusjärjestelmää ja tubulusjärjestelmää, jotka näkyvät selvästi hyalomeerissa elektronimikroskopialla. Ensimmäinen on avoin kanavien järjestelmä, joka liittyy, kuten jo mainittiin, plasmolemman invaginaatioihin. Tämän järjestelmän kautta verihiutalerakeiden sisältö vapautuu plasmaan ja aineiden imeytyminen tapahtuu. Toinen on niin kutsuttu tiheä putkimainen järjestelmä, jota edustavat putkiryhmät, joissa on elektronitiheää amorfista materiaalia. Se muistuttaa sileää endoplasmista verkkokalvoa, joka muodostuu Golgin laitteessa. Tiheä putkimainen järjestelmä on syklo-oksigenaasin ja prostaglandiinien synteesipaikka. Lisäksi nämä tubulukset sitovat selektiivisesti kaksiarvoisia kationeja ja toimivat Ca 2+ -ionien säiliönä. Edellä mainitut aineet ovat välttämättömiä veren hyytymisprosessin osia.

MUTTA

B

AT

G

D

Riisi. 4.30 Verihiutaleet. A - verihiutaleet ääreisveren kokeessa. B - kaavio verihiutaleen rakenteesta. B - TEM. D - aktivoimattomat (merkitty nuolella) ja aktivoidut (merkitty kahdella nuolella) verihiutaleet, SEM. D - verihiutaleet, jotka tarttuvat aortan seinämään endoteelikerroksen vaurioalueella (D, D - Yu.A. Rovenskikhin mukaan). 1 - mikrotubulukset; 2 - mitokondriot; 3 – u-rakeet; 4 - tiheiden putkien järjestelmä; 5 - mikrofilamentit; 6 - pintaan liittyvien putkien järjestelmä; 7 - glykokaliksi; 8 - tiheät kappaleet; 9 - sytoplasminen verkkokalvo.

Ca 2+:n vapautuminen tubuluksista sytosoliin on välttämätöntä verihiutaleiden toiminnan varmistamiseksi (adheesio, aggregaatio jne.).

Granumeerista löydettiin organelleja, sulkeumia ja erityisiä rakeita. Organelleja edustavat ribosomit (nuorilla levyillä), endoplasmisen retikulumin elementit, Golgi-laitteisto, mitokondriot, lysosomit, peroksisomit. Siellä on glykogeenia ja ferritiiniä pienten rakeiden muodossa.

Erikoisrakeet, joiden määrä on 60-120, muodostavat suurimman osan granulomeerista, ja niitä edustavat kaksi päätyyppiä - alfa- ja deltarakeita.

Ensimmäinen tyyppi: a-rakeet- Nämä ovat suurimpia (300-500 nm) rakeita, joissa on hienorakeinen keskiosa, joka on erotettu ympäröivästä kalvosta pienellä valotilalla. Ne sisältävät erilaisia ​​proteiineja ja glykoproteiineja, jotka osallistuvat veren hyytymisprosesseihin, kasvutekijöitä, hydrolyyttisiä entsyymejä.

Tärkeimpiä verihiutaleaktivaation aikana erittäviä proteiineja ovat verihiutaletekijä 4, p-tromboglobiini, von Willebrand -tekijä, fibrinogeeni, kasvutekijät (verihiutale-PDGF, transformoiva TGFp), hyytymistekijä - tromboplastiini; glykoproteiineja ovat fibronektiini ja trombospondiini, joilla on tärkeä rooli verihiutaleiden kiinnittymisprosesseissa. Hepariinia sitovia proteiineja (ohentavat verta, estävät veren hyytymistä) ovat tekijä 4 ja p-tromboglobuliini.

Toinen rakeiden tyyppi - δ-rakeet(delta-rakeet) - edustaa tiheitä kappaleita, joiden koko on 250-300 nm, joissa on epäkeskisesti sijoitettu tiheä ydin, jota ympäröi kalvo. Kryptien välissä on selkeästi rajattu valotila. Rakeiden pääkomponentit ovat plasmasta kertynyt serotoniini ja muut biogeeniset amiinit (histamiini, adrenaliini), Ca 2+, ADP, ATP suurina pitoisuuksina.

Lisäksi on olemassa kolmas tyyppi pieniä rakeita (200-250 nm), joita edustavat lysosomit (joskus kutsutaan A-rakeiksi), jotka sisältävät lysosomaalisia entsyymejä, sekä mikroperoksisomit, jotka sisältävät peroksidaasientsyymiä. Rakeiden sisältö levyjen aktivoituessa vapautuu plasmalemmaan liittyvän avoimen kanavajärjestelmän kautta.

Verihiutaleiden päätehtävä on osallistuminen veren hyytymisprosessiin - kehon suojaava reaktio vaurioille ja verenhukan estäminen. Verihiutaleet sisältävät noin 12 tekijää, jotka osallistuvat veren hyytymiseen. Kun suonen seinämä vaurioituu, levyt aggregoituvat nopeasti ja tarttuvat tuloksena oleviin fibriinilankoihin, jolloin muodostuu trombi, joka sulkee haavan. Tromboosiprosessissa havaitaan useita vaiheita, joihin osallistuu monia veren komponentteja.

Verihiutaleiden tärkeä tehtävä on niiden osallistuminen serotoniinin aineenvaihduntaan. Verihiutaleet ovat käytännössä ainoat veren elementit, joissa serotoniinivarat kerääntyvät plasmasta. Serotoniinin verihiutalesitoutuminen tapahtuu veriplasman suurimolekyylisten tekijöiden ja kaksiarvoisten kationien avulla.

Veren hyytymisprosessissa romahtavista verihiutaleista vapautuu serotoniinia, mikä vaikuttaa verisuonten läpäisevyyteen ja verisuonten sileiden lihassolujen supistumiseen. Serotoniinilla ja sen aineenvaihduntatuotteilla on kasvaimia estäviä ja säteilyä suojaavia vaikutuksia. Verihiutaleiden serotoniinin sitoutumisen estoa havaittiin useissa verisairauksissa - pahanlaatuisessa anemiassa, trombosytopeenisessa purppurassa, myeloosissa jne.

Verihiutaleiden elinikä on keskimäärin 9-10 päivää. Pernan makrofagit fagosytoivat ikääntyviä verihiutaleita. Pernan tuhoavan toiminnan vahvistaminen voi aiheuttaa merkittävää verihiutaleiden määrän laskua veressä (trombosytopenia). Tämän poistamiseksi tarvitaan leikkaus - pernan poisto (splenektomia).

Verihiutaleiden määrän vähentyessä, esimerkiksi verenhukan yhteydessä, trombopoietiini kerääntyy vereen - glykoproteiini, joka stimuloi levyjen muodostumista luuytimen megakaryosyyteistä.

© Sivuston materiaalien käyttö vain hallinnon suostumuksella.

Verihiutaleet (PLT) - verihiutaleet (Bizzoceron plakit), megakaryosyyttien fragmentit, ovat tärkeä rooli ihmiskehossa. Normaaliolosuhteissakin hieman aktivoituina ne ryntäävät aina suonen vaurioalueelle pysäyttääkseen verenvuodon yhdessä endoteelin kanssa muodostumalla. Verihiutaleet suorittavat mikroverenkiertoa (ensisijainen, verisuoni-verihiutale) hemostaasia, joka tapahtuu pienissä verisuonissa. Veren hyytymisreaktio suurissa verisuonissa toteutuu sekundaarisen hemostaasin mekanismilla, jota kutsutaan myös makroverenkierroksi tai hemokoagulaatioksi.

verihiutaleiden muodostuminen

Missä on kultainen keskitie?

Kuten muillakin muodostuneilla alkuaineilla, verihiutaleilla voi olla taipumus sekä pienentyä että lisääntyä, mikä on usein patologia, koska näiden solujen normi veressä on 200-400 * 10 9 / l ja riippuu organismin fysiologisesta tilasta. Niiden määrä vaihtelee vuorokaudenajan ja vuodenajan mukaan. Tiedetään, että yöllä ja keväällä verihiutaleiden määrä laskee. Naisten verihiutaleiden määrä on alhaisempi (180-320 x 10 9 / l), ja kuukautisten aikana niiden määrä voi laskea jopa 50%. Tässä tapauksessa verihiutaleet kuitenkin laskevat fysiologisesti suojaavana reaktiona (tromboosin ehkäisy naisilla), joten tämä tila ei vaadi hoitoa.

Verihiutaleiden määrä on hieman pienempi raskauden aikana, mutta jos niiden taso putoaa alle 140 x 10 9 /l, toimenpiteisiin on ryhdyttävä välittömästi koska verenvuotoriski synnytyksen aikana kasvaa.

Erikoistapahtumia järjestetään myös silloin, kun Alhaisia ​​verihiutaleiden määrää aiheuttavia sairauksia ovat:

• Hematopoieesin rikkominen luuytimessä;
• Maksasairaus;

Verihiutaleiden lisääntyminen voi olla myös fysiologista esimerkiksi korkealla vuoristoalueella oleskelun tai kovan fyysisen työn aikana. Mutta kun verihiutaleet ovat kohonneet veressä patologisten tilojen vuoksi, riski kasvaa ja koska verihiutaleet ovat vastuussa veren hyytymisestä, ja niiden ylimäärä johtaa lisääntyneeseen tromboosiin.

Lapsilla vuoden kuluttua punasolujen määrä ei eroa aikuisten tasosta. . Vuoteen asti verihiutaleiden määrä veressä on hieman pienempi ja on 150-350 x 10 9 / l. Vastasyntyneiden normi alkaa tasosta 100 x 10 9 / l.

On kuitenkin muistettava, että kun verihiutaleet lapsen veressä ovat koholla, tämä on varoitustekijä ja tällaisissa tapauksissa voidaan olettaa seuraava patologia:

Sanalla sanoen, tämä on tilaisuus kääntyä lääkärin puoleen, mutta ensin sinun on otettava verikoe uudelleen virheen sulkemiseksi pois.

Verihiutaleet yleisessä verikokeessa

Vaikka nykyaikainen kliininen laboratoriodiagnostiikka käyttää vanhoja hyväksi havaittuja menetelmiä verihiutaleiden värjäykseen ja laskemiseen lasilla, se turvautuu myös verihiutaleiden tutkimukseen hematologisella analysaattorilla, jonka mahdollisuudet ovat paljon laajemmat.

Hematologisen analysaattorin avulla voit määrittää, mitä se ei vain mittaa, vaan myös esittää histogrammin muodossa, jossa vanhat elementit ovat sen vasemmalla puolella ja nuoret oikealla. Solujen koon perusteella on mahdollista arvioida verihiutaleiden toiminnallista aktiivisuutta, ja mitä vanhempia ne ovat, sitä pienempi on niiden koko ja aktiivisuus.

a - normaalit verihiutaleet b - tilavuudeltaan erikokoiset verihiutaleet (lausuttu anisosytoosi) c - valtavat makroverihiutaleet

MPV:n nousua havaitaan verenvuodon jälkeisen anemian, Bernard-Soulierin makrosyyttisen trombostrofian yhteydessä ja muut patologiset tilat. Tämän indikaattorin lasku tapahtuu seuraavissa tapauksissa:

• raskaus;
• raudanpuuteanemia;
• tulehdus;
• kasvaimet;
• sydäninfarkti;
• kollagenoosit;
• Kilpirauhasen sairaudet;
• Munuaisten ja maksan sairaudet;
• Häiriöt veren hyytymisjärjestelmässä;
• Veren sairaudet.

Toinen verihiutaleiden laadun indikaattori on suhteellinen, mikä osoittaa verihiutaleiden koon muutoksen asteen (anisosytoosi), toisin sanoen se on solujen heterogeenisyyden indikaattori.

Sen poikkeamat osoittavat patologiaa, kuten:

1. Anemia;
2. Tulehduksellinen prosessi;
3. matotartunta;
4. Pahanlaatuiset kasvaimet.

Verihiutaleiden kykyä tarttua niille vieraaseen pintaan (kollageeni, tyydyttyneet rasvahapot, jotka muodostavat ateroskleroottisen plakin perustan) kutsutaan adheesioksi, ja kykyä tarttua toisiinsa ja muodostaa konglomeraatteja kutsutaan aggregaatioksi. Nämä kaksi käsitettä liittyvät erottamattomasti toisiinsa.

Verihiutaleiden aggregaatio on olennainen osa niin tärkeää prosessia kuin tromboosi, joka on tärkein suoja verenvuotoa vastaan ​​verisuonen seinämän vaurioituessa. Kuitenkin taipumus lisääntyneeseen veritulpan muodostumiseen (tai muuhun patologiaan) voi johtaa hallitsemattomaan verihiutaleiden aggregaatioon ja siihen liittyy patologista tromboosia.

Veri hyytyy joutuessaan kosketuksiin vieraiden pintojen kanssa, koska vain verisuonten endoteeli on sen alkuperäinen ympäristö, jossa se pysyy nestemäisessä tilassa. Mutta heti kun suoni vaurioituu, ympäristö muuttuu välittömästi vieraaksi ja verihiutaleet alkavat ryntää onnettomuuspaikalle, jossa ne aktivoituvat itsestään muodostaen veritulpan ja "paikata" reiän. Tämä on primaarisen hemostaasin mekanismi, ja se suoritetaan pienen suonen (enintään 200 µl) vaurioituessa. Tämän seurauksena muodostuu primaarinen valkoinen trombi.

Kun suuri suoni vaurioituu, kontaktitekijä (XII) aktivoituu spontaanisti, joka alkaa olla vuorovaikutuksessa tekijän XI kanssa ja entsyyminä aktivoi sen. Tätä seuraa reaktioiden ja entsymaattisten transformaatioiden kaskadi, jossa hyytymistekijät alkavat aktivoida toisiaan, eli tapahtuu eräänlainen ketjureaktio, jonka seurauksena tekijät keskittyvät vauriokohtaan. Sinne saapuu muiden kofaktorien (V ja korkean molekyylipainon kininogeenin) ohella myös veren hyytymistekijä VIII (antihemofiilinen globuliini), joka ei itse ole entsyymi, mutta se ottaa apuproteiinina aktiivisesti osaa hyytymisprosessiin.

Tekijöiden IX ja X välinen vuorovaikutus tapahtuu aktivoituneiden verihiutaleiden pinnalla, jotka ovat jo olleet kosketuksissa vaurioituneen suonen kanssa ja niiden kalvolle on ilmaantunut erityisiä reseptoreita. Aktiivinen tekijä X muuttuu trombiiniksi, ja tällä hetkellä tekijä II kiinnittyy myös verihiutaleiden pintaan. Siellä on myös apuproteiini - tekijä VIII.

Veren hyytymisprosessi voi alkaa endoteelin (vaskulaarisen seinämän) pinnan vaurioitumisesta, minkä jälkeen protrombinaasin muodostumisen sisäinen mekanismi laukeaa. Hyytymistä voi laukaista myös veren kosketus kudosten tromboplastiiniin, joka on piilossa kudossolussa, jos kalvo on ehjä. Mutta se tulee ulos, kun suoni on vaurioitunut (ulkoinen mekanismi protrombinaasin muodostumiselle). Tämän tai toisen mekanismin laukeaminen selittää sen tosiasian, että kapillaariverinäytteen hyytymisaika (ulkoinen reitti) on 2-3 kertaa lyhyempi kuin laskimoverinäytteiden (sisäinen reitti).

Veren hyytymiseen tarvittavan ajan määrittämiseksi käytetään näihin mekanismeihin perustuvia laboratoriotestejä. Lee-Whiten koagulaatiotutkimus suoritetaan ottamalla verta kahteen koeputkeen laskimosta, kun taas protrombinaasin muodostumista ulkoista polkua pitkin tutkitaan Sukharevin mukaan (veri sormesta). Tämä veren hyytymistesti on melko yksinkertainen suorittaa. Lisäksi se ei vaadi erityistä valmistelua (se otetaan tyhjään vatsaan) ja paljon aikaa tuotantoon, koska kapillaariveri (kuten edellä mainittiin) koaguloituu 2-3 kertaa nopeammin kuin laskimoveri. Veren hyytymisajan normi Sukharevin mukaan on 2 - 5 minuuttia. Jos hyytymän muodostumisaikaa lyhennetään, protrombinaasin muodostuminen kehossa on nopeutunut. Tämä tapahtuu seuraavissa tapauksissa:

• Massiivisen jälkeen, johon hyytymisjärjestelmä reagoi;
• DIC-oireyhtymä vaiheessa 1;
• Suun kautta otettavien ehkäisyvalmisteiden negatiivinen vaikutus.

Protrombinaasin viivästynyt muodostuminen ilmaistaan ​​hyytymän muodostumisajan pidentymisenä, ja se havaitaan tietyissä olosuhteissa:

1. I, VIII, IX, XII tekijöiden syvä puute;
2. perinnöllinen koagulopatia;
3. Maksavaurio;
4. Hoito antikoagulantteilla (hepariinilla).

Kuinka nostaa verihiutaleiden tasoa?

Kun verihiutaleiden määrä on alhainen, jotkut ihmiset yrittävät kasvattaa niitä itse vaihtoehtolääketieteen avulla käyttämällä veren verihiutaleiden määrää lisääviä elintarvikkeita ja parantavia yrttejä.

On huomattava, että ruokavaliota verihiutaleiden lisäämiseksi voidaan pitää todella kuninkaallisena:

• Tattari;
• Punainen liha, kypsennetty missä tahansa muunnelmassa;
• Kaikki kalalajikkeet;
• Munat ja juusto;
• Maksa (mieluiten naudanliha);
• Runsaat lihaliemet, makkarat ja pasteet;
• Nokkonen, kaali, punajuuri, porkkana, paprika-salaatti seesamiöljyllä;
• Kaikenlaiset vihreät (tilli, selleri, persilja, pinaatti);
• Pihlajan marjoja, banaaneja, granaattiomenia, ruusunmarjamehua, vihreitä omenoita, pähkinöitä.

Ihmiset sanovat, että voit lisätä verihiutaleiden määrää kansanlääkkeillä, jos syöt 1 ruokalusikallinen seesamiöljyä tyhjään vatsaan (kolme kertaa päivässä) tai juot tuoretta nokkosmehua (50 ml) saman määrän kanssa maitoa. Mutta kaikki tämä on todennäköisesti mahdollista, jos verihiutaleiden määrä vähenee hieman ja niiden tason laskun syy selvitetään. Tai lisätoimenpiteinä päähoidossa, joka suoritetaan sairaalassa ja koostuu luovuttajan veritulppamassan siirrosta, joka on erityisesti valmistettu tietylle potilaalle.

Hoitoon liittyy tiettyjä vaikeuksia, koska verihiutaleet eivät elä kauan, joten verihiutalekonsentraattia säilytetään enintään 3 päivää erityisissä "kiekkolevyissä" (soluja on sekoitettava jatkuvasti varastoinnin aikana). Lisäksi verihiutaleiden laadullisen lisääntymisen vuoksi niiden on juurtuttava uuden isännän kehoon, joten ennen verensiirtoa tehdään yksilöllinen valinta HLA-leukosyyttijärjestelmän mukaan (analyysi on kallista ja työlästä).

Vähennä verihiutaleiden määrää

Verihiutaleiden laskeminen on helpompaa kuin niiden nostaminen. Asetyylisalisyylihappoa (aspiriinia) sisältävät valmisteet edistävät veren ohenemista ja vähentävät siten verihiutaleiden määrää. Samankaltaisiin tarkoituksiin käytetään myös niitä, jotka hoitava lääkäri määrää, ei tasanteella oleva naapuri.

Potilas itse voi auttaa lääkäriä vain luopumalla huonoista tavoista (tupakointi, alkoholi), syömällä runsaasti jodia sisältäviä ruokia (mereneläviä) ja jotka sisältävät askorbiini-, sitruuna- ja omenahappoa. Näitä ovat viinirypäleet, omenat, karpalot, puolukat, mustikat, sitrushedelmät.

Verihiutaleiden alentamiseen tarkoitetuissa kansanresepteissä suositellaan valkosipulitinktuuria, teeksi haudutettua inkiväärijauhetta (1 ruokalusikallinen jauhetta kupillista kiehuvaa vettä kohden) ja kaakaota ilman sokeria aamulla tyhjään mahaan.

Kaikki tämä on tietysti hyvä, mutta on muistettava, että kaikki toimet tulisi suorittaa lääkärin valvonnassa, koska verielementit, kuten verihiutaleet, eivät ole kovin alttiina perinteisen lääketieteen menetelmille.

Video: mitä verikokeet sanovat?

Hemostaasijärjestelmää edustavat kolme pääkomponenttia - verisuonen seinämä, muodostuneet elementit, pääasiassa verihiutaleet, ja plasmaproteiinit. Kaikki nämä komponentit osallistuvat hemostaasijärjestelmän kahteen päätoimintoon. Ensimmäinen niistä on pitää veren nestemäisessä tilassa. Tämän varmistaa endoteelin tromboosiresistenssi, joka toimii esteenä kiertävän veren ja subendoteliaalisten rakenteiden välillä, pääosin inaktiivisten verihiutalemuotojen ja veren hyytymistekijöiden kierto verenkierrossa sekä luonnolliset antikoagulantit ja fibrinolyyttisen järjestelmän komponentit. Hemostaasijärjestelmän toinen, yhtä tärkeä tehtävä on suojata kehoa verenvuodolta, kun verisuonen seinämän eheys vaurioituu. Tämä toiminto sisältää myös kaikki osat, jotka muodostavat hemostaasijärjestelmän. Monimutkaisen neurohumoraalisen reaktion ansiosta hemostaattisessa järjestelmässä toimivat selkeästi positiiviset ja negatiiviset palautemekanismit, jotka luovat olosuhteet prosessin itserajoittumiselle, minkä seurauksena hemostaattisten mekanismien paikallinen aktivoituminen esim. suonivaurio terveellä henkilöllä, ei muutu yleiseksi veren hyytymiseksi.

Verisuonen seinämän rytmi hemostaasissa
Jo sekunnin murto-osan vamman jälkeen vamma-alueelle kehittyy verisuonten supistumista: aluksi aksonirefleksistä johtuen, myöhemmin neurohumoraalista spastista reaktiota ylläpidetään noin 2 tunnin ajan aktiivisilla endoteelisillä aineilla (endoteliini-1, angiotensiini ja verihiutaleita aktivoivat). tekijä - PAF), sekä verihiutaleaineet (serotoniini, adrenaliini, tromboksaani A2, PAF).

Suonen supistumisen myötä vian koko pienenee jonkin verran. Lisäksi vakuudet laajenevat lähialueilla ja verenpaine vaurioituneella alueella laskee. Nämä verisuonireaktiot vähentävät jonkin verran verenhukan voimakkuutta. Verisuonen seinämän osallistuminen hemostaasin toteuttamiseen ei kuitenkaan rajoitu yksinkertaiseen supistukseen, kuten aiemmin oletettiin, vaan sen määrää vuorovaikutus monimutkaisen hemostaattisen mekanismin kaikkien komponenttien kanssa. Siten verisuonen seinämän endoteelin vaurioitumiseen liittyy kudostekijän altistuminen verelle, mikä käynnistää veren hyytymisen aktivoitumisen. Lisäksi endoteelisolut syntetisoivat ja erittävät kudosplasminogeeniaktivaattoria (t-PA), jolla on suuri merkitys fibrinolyysin aktivoinnissa ja tromboosin ehkäisyssä. Endoteelisoluilla on myös merkittävä vaikutus verihiutaleiden toimintaan. Ne syntetisoivat ja erittävät plasmaan jatkuvasti von Willebrand -tekijää, joka on välttämätön verihiutaleiden kiinnittymiselle ja aggregaatiolle, ja tuottavat myös prostasykliiniä ja typpioksidia, jotka ovat luonnollisia verihiutaleiden aggregaation estäjiä.

Sanalla sanoen verisuonen seinämän osallistuminen hemostaasijärjestelmän reaktioihin on monitahoinen. Tämä tulee ottaa huomioon tutkittaessa verisuonisairauksien aiheuttamien sairauksien patogeneesiä.

Verihiutaleiden rooli hemostaasissa
Intaktit verihiutaleet ovat tumattomia, monimutkaisesti organisoituneita ja metabolisesti aktiivisia luuytimen megakaryosyyttien fragmentteja. Ne kiertävät veressä diskosyytteinä, joiden pinta on lähes sileä, keskimäärin 10 päivää. Niiden pitoisuus aikuisen veressä on 150-400x109 / l, koko on 1x3 mikronia. Ehjässä tilassa verihiutaleet eivät ole vuorovaikutuksessa verisuonen seinämän ehjän endoteelin ja muiden verisolujen kanssa.

Verihiutaleilla on monimutkainen ultrarakenteinen organisaatio, joka varmistaa, että ne suorittavat monitoimitehtävän kehossa. Niiden kaksikerroksinen fosfolipidikalvo sisältää suuren määrän proteiineja ja glykoproteiineja, jotka suorittavat reseptoritoimintoa, jonka ansiosta solut voivat reagoida herkästi muuttuviin ympäristöolosuhteisiin ja olla vuorovaikutuksessa monien aktivoivien aineiden, korpuskulaaristen aineiden ja pintaärsykkeiden kanssa. Kalvofosfolipideillä itsellään on olennainen rooli verihiutaleiden hyytymisaktiivisuudessa niiden stimulaation jälkeen. Stimuloidut verihiutaleet pyöristyvät (sferosyytit), muodostavat huomattavan määrän prosesseja (filopodia), jotka helpottavat niiden kosketusta toisiinsa myöhempien reaktioiden aikana.

Verihiutaleet sisältävät kaksi erillistä solunsisäistä kalvojärjestelmää: avoin putkimainen ja tiheä putkimainen. Ensimmäinen on plasmakalvon invaginaatio (plasmalemma), joka lisää solun pinta-alaa ja toimii kuljetusjärjestelmänä varastorakeiden sisällön erittymiselle tai tiettyjen aineiden pääsylle soluun (esim. esimerkiksi serotoniini). Tiheä putkimainen järjestelmä on samanlainen kuin muiden solujen endoplasminen retikulumi. Siihen varastoituu Ca2+-ioneja ja muodostuu prostaglandiineja.Verihiutaleiden sytoplasmassa on merkittävä määrä niiden supistumisjärjestelmään liittyviä polymeroituneita ja polymeroimattomia proteiineja (näitä proteiineja kutsutaan myös sytoskeletaalisiksi proteiineiksi). Niiden aktivoituminen ja uudelleenjärjestely stimuloidussa solussa saa aikaan sen tärkeimmät lopulliset toiminnalliset reaktiot: varastorakeiden sisällön erittymisen, verihiutaleaggregaattien konsolidoitumisen ja fibriinihyytymän vetäytymisen. Se sisältää myös suurimman osan subsellulaarisista organelleista: mitokondriot, peroksisomit, glykogeenirakeita.

Suuri merkitys verihiutaleiden toiminnan toteuttamiselle on varastorakeet: α-rakeet, δ-rakeet (tai tiheät kappaleet) ja y-rakeet (lysosomaaliset rakeet). Kun verihiutaleet aktivoituvat, niiden muoto, rakenteellinen organisaatio, metaboliset ja biokemialliset reaktiot muuttuvat. Kaikki tämä yhdessä on näiden solujen toiminnallisten ja ennen kaikkea hemostaattisten reaktioiden toteuttamisen taustalla.

Hemostaattisten reaktioiden kehittymisjärjestyksen tutkiminen pienikaliiperiisten verisuonten vaurioitumisen jälkeen johti ns. primaarisen hemostaasin eristämiseen, joka sisältää verisuonten supistumisen ja verihiutaletulpan muodostumisen aiheuttaman verenvuodon alkuvaiheen varhaisen pysäyttämisen prosessit. (siksi sitä kutsutaan myös verisuoni-verihiutaleiden hemostaasiksi) ja sekundaarinen hemostaasi, joka suorittaa kaiken loppuun, prosessoi ja lopulta pysäyttää verenvuodon, koska fibriinihyytymä vahvistaa verihiutaletulppaa. Peräkkäinen ja yhdistetty verihiutaleiden reaktioiden ketju on yleensä niin kutsuttu verihiutaleiden hemostaasi. Sen ensimmäinen vaihe on adheesio.

Verihiutaleiden adheesio - niiden tarttuminen subendoteliaalisiin rakenteisiin endoteelin poistamisen (vaurion) jälkeen. Se perustuu verihiutaleiden reseptorien ja subendoteliaalisten rakenteiden välisiin vuorovaikutusmekanismeihin, ja lisäksi vaurioalueella kiertävät verihiutaleet kiinnittyvät jo kiinnittyneisiin verihiutaleisiin ja toisiinsa. Tätä hemostaasin vaihetta kutsutaan palautuvaksi tai primaariseksi aggregaatioksi. Tuloksena se muodostaa verta läpäisevän, hauraan verihiutaletulpan, joka ei pysäytä verenvuotoa, mutta vähentää verenhukkaa, ja myöhemmässä vaiheessa vain plasma tihkuu ensisijaisen verihiutaletulpan läpi. Tässä vaiheessa verihiutaleiden väliset yhteydet ovat vielä hauraita ja osa niistä voi repeytyä verenvirtauksen vaikutuksesta, mutta aggregaattiin kiinnittyy uusia verellä tuotuja levyjä.

Seuraavaa vaihetta kutsutaan erittymisen ja palautumattoman aggregaation vaiheeksi. Tämän vaiheen reaktioiden seurauksena verihiutaleet lähestyvät toisiaan ja sulkevat tiukasti olemassa olevan vian pienissä verisuonissa - verihiutaletulppa muuttuu peruuttamattomaksi ja verelle läpäisemättömäksi, verenvuoto pysähtyy. Siten saavutetaan primaarinen (verihiutale-) hemostaasi, eli verenvuodon varhainen alkupysähdys verisuonten supistumisen ja palautumattoman verihiutaletulpan muodostumisen vuoksi. Koagulaation aktivointi, joka alkoi välittömästi suonen seinämän vaurioitumisen jälkeen useiden hyytymisproteiinien peräkkäisellä stimulaatiolla, johtaa tiheän fibriinihyytymän muodostumiseen, joka vahvistaa palautumatonta verihiutaleaggregaattia.

Verihiutaleiden supistumisreaktiot verihiutale-fibriini hemostaattisessa tulpassa johtavat sen vetäytymiseen, mikä lisää tämän rakenteen lujuutta entisestään. Tämän seurauksena terveellä ihmisellä hemostaattinen tulppa kestää korkeaa verenpainetta vaurioituneiden keskikokoisten verisuonten verenkierron palautumisen jälkeen, mikä tapahtuu yleensä 2 tunnin kuluttua.Tässä vaiheessa siis viimeinen eli toissijainen hemostaasi verenpaine, verisuoni-verihiutalereaktiot tarjoavat paitsi ensisijaisen, myös lopullisen hemostaasin. Fibriinin muodostuminen ei tässä tapauksessa ole edellytys verenvuodon lopulliselle pysäyttämiselle. Seurauksena on, että suoritettaessa verenvuodon ensisijaista kestoa koskevaa testiä, kun suoritetaan annosteltu standardivaurio pienille verisuonille (arteriolit ja hiussuonet), on mahdollista arvioida vain verisuoni-verihiutalereaktioiden tehokkuutta vuotoajan perusteella.

On tarpeen keskittyä tärkeimpiin biokemiallisiin ja molekyyliprosesseihin, joita havaitaan verihiutaleiden aktivoinnin aikana, ja määrittää verihiutaleiden toiminnallisten reaktioiden toteutuminen. Ilman tätä ymmärtämistä on mahdotonta tulkita riittävästi normaaleissa ja patologisissa olosuhteissa tehtyjen tutkimusten tuloksia, karakterisoida verihiutaleiden hemostaasihäiriöiden päämekanismeja patologisissa tiloissa. Kuten edellä todettiin, ehjässä tilassa verihiutaleet eivät ole vuorovaikutuksessa ehjien suonen seinämien tai muiden verisolujen kanssa. Aktivoidussa tilassa - kosketuksen jälkeen subendoteliaalisten rakenteiden ja vaurioituneen alueen stimuloivien aineiden kanssa - verihiutaleet saavuttavat erittäin nopeasti kyvyn olla vuorovaikutuksessa vaurioituneiden verisuonten seinämien, verisolujen ja toistensa kanssa. Tilasta toiseen siirtymisen alku on sellaisten aineiden vaikutus tiettyihin verihiutaleiden reseptoreihin, jotka ovat eksogeenisiä näille normaalissa verenkierrossa oleville soluille - niin sanotuille agonisteille. Agonistit eivät yleensä pysty tunkeutumaan verihiutaleiden kalvoon, mutta pystyvät olemaan vuorovaikutuksessa plasmalemmansa spesifisten reseptorien kanssa.

Verihiutaleita aktivoivia aineita edustaa kaksi ryhmää:
1) subendoteelin liukenemattomat liimaproteiinit, joiden kanssa verihiutaleet voivat joutua kosketuksiin endoteelin vaurion ja syvemmän kudosvaurion jälkeen;
2) luonnolliset liukoiset agonistit, joita esiintyy vaurioituneissa kudoksissa tai joita syntyy solustimulaation aikana.

Ensimmäinen aktiivisten aineiden ryhmä käynnistää verihiutaleiden adheesion. Adheesio sen mekanismissa on monimutkainen prosessi, joka alkaa, kun verihiutaleet joutuvat kosketuksiin subendoteelin vieraan pinnan kanssa. Spesifisten verihiutaleiden adheesioreseptorien ja subendoteliaalisen matriisirakenteiden välisen vuorovaikutuksen seurauksena verihiutaleet aktivoituvat, muuttavat muotoaan ja kiinnittyvät näihin rakenteisiin. Tämä huipentuu peruuttamattomaan tarttumiseen tai leviämiseen alustan pinnalle. Levitysvaiheessa verihiutaleiden kosketuspinta-ala ja molekyylivuorovaikutus subendoteelin kanssa kasvaa jyrkästi, mikä saa nämä solut ja verihiutaleaggregaatit kiinnittymään lujasti suonen seinämän vaurioituneisiin kudoksiin.

Normaalissa kehossa vaurioitunut suonen seinämä sisältää runsaasti solunulkoisen matriisin tarttuvia proteiineja ja ensisijaisesti kollageenia, jonka eri tyypit eroavat merkittävästi verihiutaleiden reaktiivisuudestaan. Muita subendoteelin tarttuvia proteiineja ovat von Willebrand -tekijä (vW), fibronektiini, vitronektiini, laminiini ja trombospondiini. Fibrinogeeni adsorboituu myös plasmasta altistuneisiin vaurioituneisiin kudoksiin. Vuorovaikutusta kollageenin ja muiden subendoteelin tarttuvien proteiinien kanssa välittävät useat verihiutaleiden glykoproteiini (GP) -reseptorit: GPIa-IIa, GPVI, GPIV, GPIIb-IIIa ja muut integriinit, ja kun kyseessä on von Willebrand -tekijän välittämä yhteys, GPIb-IX-V-kompleksi ja myös GPIIb-IIIa. Patologisissa olosuhteissa reaktiiviset pinnat voivat sisältää patologisesti muuttunutta endoteelikerrosta, ateroskleroottisia plakkeja, keinotekoisia sydänläppäitä ja verisuonten shuntteja. Verihiutaleiden tarttuminen subendoteliaalisiin rakenteisiin, ensisijaisesti kollageeniin, eroaa mekanismiltaan verenkiertovyöhykkeillä, joilla on alhainen virtausnopeus (ja pieni leikkausjännitys) ja korkea veren virtausnopeus (ja suuri leikkausjännitys).

Pienellä leikkausjännityksellä (jos suurien valtimoiden, suonien seinämät vaurioituvat) verihiutaleet kiinnittyvät kollageeniin ja fibronektiiniin suoraan ekspressoituneen GPIa-IIa:n ja GP VI:n kautta. Suurella leikkausjännityksellä (pienten valtimoiden ja valtimoiden vaurioituessa) verihiutaleiden kiinnittymistä kollageeniin välittää korkean molekyylipainon (jopa 20 miljoonaa Da) adheesiokofaktori. Vahinkoalueella tämä kofaktori sijaitsee yhdessä muiden liimaproteiinien kanssa subendoteeliinissa. Plasman vWF ei voi olla suoraan vuorovaikutuksessa verihiutaleiden kanssa ilman sen aikaisempaa aktivaatiota, koska se ei paljasta sitoutumiskohtia verihiutalereseptoreihin. Mutta tarkasteltavissa vaurioolosuhteissa veren suuren leikkausjännityksen vyöhykkeellä hemodynaamisten voimien vaikutuksesta ja kosketuksesta subendoteelin kanssa plasmasta peräisin oleva von Willebrand -tekijä käy läpi konformaatiomuutoksia, vastaavat kommunikaatioalueet paljastuvat siinä - verihiutaleiden GPIb:n kanssa. -IX-V ja kollageenilla. Tämän seurauksena se yhdistyy toisaalta kollageeniin ja toisaalta nimettyyn verihiutalereseptoriin. Jälkimmäisessä (GPIbα:ssa) suuren leikkausjännityksen tai verihiutaleiden primaarisen kosketuksen vaikutuksesta kollageenin kanssa ilmeisesti myös vW:n kanssa liittymiskohdat tulevat saataville. Siten muodostuu "adheesioakseli": kollageeni - plasma vW-GPIb. On myös mahdollista yhdistää verihiutaleet suoraan subendoteliumissa sijaitsevaan vWF:ään (jossa GPIb-sitoutumiskohdat ovat käytettävissä ilman lisäaktivointia), tässä tapauksessa "adheesioakseli" on kaksijäseninen: subendoteliaalinen VW-GPIb. Reversiibelin verihiutaleiden aggregaation vaihe .

Verihiutaleiden aktivaatioprosessia aiheuttavat vuorovaikutuksen lisäksi subendoteliaalisen matriisin tarttuvien proteiinien kanssa myös kaikki vaurioituneelle alueelle ilmestyvät luonnolliset liukoiset agonistit, joilla jokaisella on oma spesifinen reseptori tai useita reseptoreita kalvolla. Liukoisia agonisteja ovat esimerkiksi adenosiinidifosfaatti, serotoniini, epinefriini, PAF, tromboksaani A2 ja labiilit prostaglandiinit, jotka ovat peräisin verihiutaleista; PAF ja ADP - aktivoiduista endoteelisoluista ja verisuonen seinämän vaurioituneista kudoksista; ADP - erytrosyyteistä, jotka läpikäyvät mikrohemolyysin vaurioituneella alueella. Aggregaatiota indusoivat myös ensimmäiset pienet määrät vahvinta verihiutaleaktivaattoria, trombiinia, joka muodostuu kudostekijää ilmentävien subendoteliaalisten ja aktivoitujen endoteelisolujen pinnalle. Liukoiset agonistit sitoutuvat verihiutaleiden kalvon pinnalla oleviin reseptoreihinsa, minkä seurauksena lisääntyvä määrä veren mukana vaurioituneelle alueelle tulevia verihiutaleita osallistuu aggregaatioprosessiin. Verihiutaleet voivat myös aktivoitua ja aggregoitua veren liikkuvien hemodynaamisten voimien vaikutuksesta niiden kalvoon vyöhykkeellä, jossa on suuri leikkausjännitys, erityisesti paikoissa, joissa on patologinen verisuonten supistuminen ja turbulentti verenvirtaus.

Kalvon väliset kytkennät ja vaikutukset kalvoon aiheuttavat sarjan aktivaatiosignaalien siirtoja: ensinnäkin GPIIb-IIIa-integriiniin, joka välittää verihiutaleiden aggregaatiota, sekä kalvon ja sytoplasman kautta soluun, minkä seurauksena solunsisäiset aineet ja rakenteita stimuloidaan suorittaen suoraan lopulliset reaktiot. Membraaniaktivaatiosignaalin välittymisen seurauksena aggregaatioreaktion pääreseptorin, GPIIb-IIIa:n, saavutettavuus kehittyy, mikä johtuu tämän kompleksin molekyylin konformaatiomuutoksista, kun sitoutumiskohdat altistuvat fibrinogeenille ja muut liimaproteiinit. Tämän jälkeen fibrinogeeni, joka on symmetrinen molekyyli, sitoutuu Ca2+-ionien läsnä ollessa kahden lähellä olevan verihiutaleen GPIIb-IIIa-reseptoreihin. Ne edistävät verihiutaleiden yhdistämistä toisiinsa sekä tarttumista subendoteliaalisiin rakenteisiin, jotka muodostuvat tällä hetkellä niiden lukuisista prosesseista - filopodiasta. Näiden kytkentöjen toteuttamiseksi välttämätön yksittäisten levyjen törmäys tapahtuu verenvirtauksen olosuhteissa kehossa tai kiihtyneessä plasmassa aggregometrissä, joten verihiutaleiden hemostaasin alkuvaiheessa tapahtuvan kalvon aktivoitumisen seurauksena myöhemmän verenkierron aikaansaaminen tapahtuu GPIIb-IIIa-membraanireseptorin saatavuus on välttämätön edellytys aggregaatiovaiheen kehittymiselle. Tässä vaiheiden peräkkäisen kehityksen malli ilmenee siitä syystä, että biokemialliset ja molekyyliset muutokset missä tahansa niistä luovat edellytykset myöhempien kehittymiselle.

Verihiutaleiden erityksen vaihe ja sekundaarinen irreversiibeli aggregaatio. Adheesio ja primaarinen aggregaatio, jossa muodostuu suhteellisen pieni määrä pieniä ja hauraita aggregaatteja, ovat vasta alkuvaiheita verihiutaleiden hemostaattisten reaktioiden ketjussa, eivätkä ne pysty yksinään aikaansaamaan tehokasta hemostaasia. Kuitenkin lähes kaikki kalvomuutokset adheesion ja palautuvan aggregaation aikana liittyvät signaalin transduktioon ei vain GPIIb-IIIa:han, vaan myös soluun. Signaalin siirron aloittaminen kalvon läpi suoritetaan käyttämällä niin kutsuttujen G-proteiinien eli guanosiinitrifosfaattia sitovien proteiinien järjestelmää. Verihiutaleissa on useita toisiinsa yhteydessä olevia aktivaatiosignaalien solunsisäisen välittymisreittejä: prostaglandiini-tromboksaanireitti, polyfosfoinositidireitti ja tyrosiinikinaasireitti. Jokaisessa näistä reiteistä signaaliärsykkeen seurauksena kalvoon kehittyy peräkkäinen sarja entsymaattisia reaktioita, joissa muodostuu toissijaisia ​​lähettimiä - lähettiläitä. Samalla solun vapaan sytoplasmisen Ca2+:n taso nousee, joka on entsymaattisten reaktioiden pääasiallinen biosäätelijä kaikilla aktivaatiosignaalien ja loppuvaikutusten välitysteillä.

Kuten viime vuosisadan 60-luvulla todettiin, verihiutaleet ovat erityssoluja. Ne sisältävät varastorakeissa erittyviä aktiivisia aineita, jotka varmistavat, että nämä solut suorittavat useita tärkeitä hemostaattisia ja muita suojaavia toimintoja kehossa. Rakeet eroavat niihin varastoituneiden vaikuttavien aineiden pitoisuudesta ja niiden vapautumiseen tarvittavasta voimasta. Sekä vahvat että heikot agonistit voivat indusoida erittymistä tiheistä kappaleista ja α-rakeista, se tapahtuu 1-2 minuutissa 100%. Erittyminen lysosomaalisista rakeista syntyy vahvojen agonistien vaikutuksesta, etenee hitaammin - muutamassa minuutissa - ja päättyy rakeiden tyhjenemiseen vain 60 %. Verihiutaleilla on myös mekanismeja eritysprosessin toteuttamiseksi, nimittäin reitit stimulaatiosignaalien välittämiseksi, mikä johtaa aktomyosiinijärjestelmän aktivoitumiseen, mikä päättyy supistumisreaktioon, jossa vapautuminen (ekstruusio) avoimen putkiston kanavien kautta varastointirakeiden lukuisat sisällöt ympäristöön. Verihiutaleiden aktomyosiinin supistuminen varmistaa paitsi itse vapautumisen, myös verihiutaleiden konvergenssin aggregaatissa (eli verihiutaletulpan lujittumisen ja fibriinihyytymän vetäytymisen, mikä on välttämätöntä lopulliselle hemostaasille).

Mekanismit aktivaatiosignaalien välittämiseksi solun sisällä järjestelmiin, jotka toteuttavat sen lopulliset toiminnalliset reaktiot, mukaan lukien eritysreaktiot, ovat melko monimutkaisia ​​ja erilaisia ​​heikoille ja vahvoille agonisteille. Vahvoja agonisteja ovat trombiini ja kollageeni suurina annoksina. Sitoutuessaan reseptoreihinsa ja sitoutuessaan kalvon vastaaviin G-proteiineihin nämä agonistit pystyvät aktivoimaan fosfolipaasi C:n ja siten aktivoimaan polyfosfoinositidireitin stimulaatiosignaalin välityksessä, joka päättyy proteiinikinaasi C:n aktivoitumiseen ja syntymiseen. ionoforinen inositolitrifosfaatti (IP3). Tämän reitin molemmat päätelinjat luovat tarvittavat perusolosuhteet verihiutaleiden supistumisjärjestelmän stimulaatiolle, mikä aiheuttaa vastaavasti tämän järjestelmän proteiinien fosforylaation PKC:n kautta ja IP3:n kautta vapaan sytoplasmisen Ca2+:n (Cai2+) tason nousun.

On syytä korostaa, että ns. heikkojen agonistien (serotoniini, epinefriini ja pienet annokset kollageenia ja trombiinia) vuorovaikutus verihiutaleiden kalvoreseptoreiden kanssa ei anna riittävän vahvaa signaalia kuvattulle aktomyosiinin supistumisen suoralle stimulaatiolle. Siksi heikkojen agonistien vaikutuksesta täydellinen tehokas aktivaatio vaatii lisäreaktioita positiivisten palautteiden sisällyttämisellä, jotka vahvistavat ensisijaista signaalia palautuvan aggregaation kehittymisen jälkeen. Nämä lisäreaktiot liittyvät ensisijaisesti prostaglandiini-tromboksaani-aktivaatiosignalointireittiin. Muutokset, jotka aiheutuvat plasmamembraanissa reseptorien vuorovaikutuksessa luonnollisten heikkojen agonistien kanssa ja myöhemmässä kalvojen kosketuksessa primaarisen aggregaation aikana, johtavat kalvon fosfolipaasi A2:n aktivoitumiseen. Kalvofosfolipaasi A2 puolestaan ​​indusoi prostaglandiini-tromboksaanireitin reaktioketjun, joka alkaa arakidonihapon vapautumisella kalvon fosfolipideistä ja johtaa sellaisten aktiivisten tuotteiden, kuten labiilien prostaglandiinien ja erityisesti tromboksaani A2:n, muodostumiseen. Jälkimmäinen on lyhytikäinen ja erittäin voimakas vasokonstriktori ja endogeeninen agonisti.

Vapautuessaan verihiutaleista ja sitoutuessaan plasmakalvon reseptoreihin (sekä tähän soluun että muihin verenvirtauksen tuomiin verihiutaleisiin) tromboksaani A2, PGG2, PGH2 antavat ensimmäisen positiivisen palautteen, eli ne värväävät lisää fibrinogeenireseptoreita. , laajentaa aggregaation ponnahduslautaa ja parantaa myös solun sisäisiin efektorirakenteisiin lähetettyä aktivointisignaalia. Erittäin tärkeä on tromboksaani A2:n kyky sen yhdistelmän jälkeen plasmamembraanireseptorien kanssa stimuloida fosfolipaasi C:tä ja polyfosfoinositidin aktivaatioreittiä, mikä huipentuu supistuvien proteiinien fosforylaatioon. Tämä on merkittävintä, koska itse soluun muodostuva tromboksaani ei suoraan aiheuta näitä reaktioita.

Joten aktivaatiosignaalin lähetyksen viimeisessä vaiheessa, sekä vahvojen agonistien aiheuttaman verihiutaleiden aktomyosiinin vähenemisen että heikkojen agonistien pidemmän reitin vuoksi, suoritetaan joukko lopullisia reaktioita, joista seuraavat kaksi vaikutusta ovat tärkeimmät.
1. Koska aktomyosiinifilamentit ylittävät verihiutaleen koko sytoplasman ja liittyvät kalvon sisäpuolelta samoihin transmembraanisiin glykoproteiineihin IIb - IIIa, joiden kanssa verihiutaleiden väliset fibrinogeeni-/fibriinisillat ovat yhteydessä ulkopuolelta, aktomyosiini vähenee jokaisessa mukana olevassa levyssä verihiutale-fibriiniverkostossa johtaa koko järjestelmän heikkenemiseen. Tämän seurauksena tämä johtaa verihiutaleaggregaattien tiivistymiseen (konsolidoitumiseen) ja verihiutale-fibriinihyytymän vetäytymiseen.
2. Aktomyosiinin supistuminen on myös mekanismi eritysreaktioiden toteuttamiseksi. Varastorakeista vapautumisen mekanismi johtuu siitä, että eri suuntiin transmembraanisten glykoproteiinien IIb - IIIa sytoplasmiset päät solun sisällä vastakkaisilla puolilla sitovien aktomyosiinikuitujen supistuessa solunsisäinen paine kasvaa, rakeet, niiden kalvojen konvergenssi ja fuusio avoimen putkimaisen järjestelmän kalvojen ja plasmakalvon kanssa ja lopuksi rakeiden sisällön vapautuminen (ekstruusio) näiden paikkojen kautta avoimen putkimaisen järjestelmän kanaviin ja ympäristöön. Jälkimmäinen johtaa toisen aggregaatioaallon kehittymiseen (endogeenisten agonistien vapautumisen vuoksi) ja varmistaa sen peruuttamattomuuden (fibrinogeenisidoksia vahvistavien tarttuvien proteiinien vapautumisen vuoksi). Mutta erittymisen toiminnalliset seuraukset ovat paljon laajempia, ja ne määräytyvät erilaisten varastointirakeiden sisällön luonteen mukaan.

Tiheistä kappaleista (δ-rakeet) vapautuu hemostaattisesti aktiivisia aineita, jotka ovat välttämättömiä vasospasmin lisäämiseksi verisuonivaurioiden alueella (epinefriini, serotoniini) sekä verihiutaleiden aktivaatio ja aggregaatio. Adenosiinidifosfaatin, serotoniinin, epinefriinin erittymisen seurauksena ja sen jälkeen, kun ne yhdistyvät vastaaviin kalvoreseptoreihin, toteutuu tärkein toinen positiivinen palaute, joka yhdessä ensimmäisen kanssa mahdollistaa sekundaarisen aggregaation kehittymisen heikkoja agonisteja. Tässä on huomioitava, että kolmas verihiutaleiden aktivoitumisen palaute (vaikka se ei olekaan viimeinen merkitys) tapahtuu ensimmäisten pienten määrien kautta vahvinta verihiutaleiden aktivaattoria - trombiinia, jotka syntyvät vaurioalueella kudoksen aloitusvaikutuksen aikana. stimuloitujen monosyyttien ja verisuonten seinämän solujen (endoteliosyytit, makrofagit, fibroblastit) tekijä.

Lysosomaalisia entsyymejä vapautuu γ-rakeista (lysosomeista), jotka osallistuvat verisuonten uudelleenkanavaamiseen hemostaasin päätyttyä.α-rakeista erittyy yli 50 proteiinia, joilla on tärkeä rooli hemostaattisten reaktioiden lisäksi myös muissa fysiologisissa reaktioissa. ja kehon patologiset prosessit. Seuraavat aktiivisten erittyvien aineiden ryhmät voidaan nimetä. Hyytymisproteiinit (verihiutalefibrinogeeni, tekijä V, korkean molekyylipainon kininogeeni), antifibrinolyyttisiä komponentteja (α2-antiplasmiini, PAI-1) ja useita aineita, joilla on antikoagulanttiominaisuuksia (α2-makroglobuliini, α1:tä estävä proteiini, tekijä XIa:n estäjä, proteiini S, neksiini II, TFPI). He kaikki osallistuvat tavalla tai toisella veren hyytymisprosessiin ja sen säätelyyn. Liimaproteiinit (fibrinogeeni, vWF, trombospondiini, fibronektiini, vitronektiini, runsaasti histidiiniä sisältävä glykoproteiini) osallistuvat aggregoituvien verihiutaleiden irreversiibelin adheesion ja fibrinogeenisidosten vahvistumiseen. Kasvua stimuloivat tekijät ja ennen kaikkea ns. verihiutaleperäinen kasvutekijä ovat erittäin tärkeitä vaurioituneiden verisuonten seinämien korjaamisessa ja patologisissa olosuhteissa osallistuvat ateroskleroosin kehittymiseen.

Edellisen perusteella on siis selvää, miksi tarkasteltua aggregaatiovaihetta kutsutaan toissijaiseksi (se perustuu endogeenisten agonistien vapautumiseen verihiutaleista, mikä aiheuttaa myöhemmän aggregaatioreaktion) ja peruuttamattomaksi (seurauksena sen verihiutaleet eivät voi erota aggregaatti, koska ne ovat mahdollisimman lähellä aktomyosiinirakenteiden vähentymisen vuoksi, ja fibrinogeeni/fibriinisidoksia vahvistavat α-rakeista erittyneet liimaproteiinit). Sekundaarisen aggregaation vaihetta kutsutaan myös erittymisvaiheeksi ja irreversiibeliksi toissijaiseksi aggregaatioksi, koska eritysreaktiot saavuttavat huippunsa tässä vaiheessa ja ovat perusta tämän vaiheen kehittymiselle.

Plasman komponenttien osallistuminen hemostaasiin
Lopullisen hemostaasin mekanismin toteuttamiseksi, nimittäin sekundaarisen hemostaattisen tulpan muodostamiseksi, veren hyytymisprosessi on tärkeä. Tämä prosessi sisältää veren hyytymistekijöitä, joiden synteesi tapahtuu maksan parenkymaalisissa soluissa.

Ehjässä suonessa hyytymistekijät (prokoagulantit) kiertävät inaktiivisessa muodossa. Verisuonen seinämän vaurioitumiseen, kuten verihiutaleisiin, liittyy veren hyytymistekijöiden peräkkäinen aktivoituminen. Tämän seurauksena muodostuu kaksi koagulaatiohemostaasin pääkomponenttia - trombiini ja fibriini, jotka stabiloivat primaarista verihiutaletulppaa ja myötävaikuttavat siten lopulliseen hemostaasiin.

Vuonna 1964 tehdyn veren hyytymistekijöiden toiminnan ja vuorovaikutuksen tutkimuksen perusteella ehdotettiin veren hyytymisprosessin ns. kaskadimallia. Veren hyytymisen kaskadimallissa päähuomio kiinnitettiin hyytymisprosessin rakenteeseen sarjana proteolyyttisiä reaktioita, joiden seurauksena veren hyytymistekijät muuttuvat aktiiviseen muotoonsa. Tässä tapauksessa solukomponentteja, joissa entsymaattisten kompleksien koostumus esiintyy, pidettiin anionisten fosfolipidien lähteenä. Kaskadimallin mukaan hyytymistekijöiden aktivointi, mikä johtaa trombiinin ja fibriinin muodostumiseen, suoritetaan kahdella tavalla - ulkoisesti ja sisäisesti, riippuen aktivoivan pinnan luonteesta veren hyytymisprosessin alkuvaiheissa. Ulkoiselle polulle tällainen pinta on kudostekijä. Kosketus kudostekijän kanssa tapahtuu endoteelin vaurioitumisen jälkeen, koska se sijaitsee subendoteliaalisissa rakenteissa (tästä nimi - ulkoinen polku). Sisäinen reitti vaatii aktivoituneiden verihiutaleiden pinnan. Jälkimmäiset ovat veren komponentteja (tästä nimi - sisäinen polku).

Veren hyytymisen aktivoitumisen ulkoisten ja sisäisten reittien erottuva piirre on erilaisten prokoagulanttien osallistuminen protrombinaasin muodostumiseen, joka on aktivoitujen tekijöiden Xa ja Va kompleksi. Kuten esitetystä veren hyytymisen kaskadimallista voidaan nähdä, protrombinaasin muodostuminen ulkoisen reitin kautta laukaistaan ​​kudostekijällä, joka yhdessä tekijä VIIa:n kanssa ja kalsiumionien osallistuessa aktivoi tekijä X:n. protrombinaasin muodostuminen alkaa tekijän XII aktivoitumisesta veren kosketuksessa verisuonen seinämän subendoteliaalisten komponenttien kanssa, erityisesti kollageenin kanssa. Kallikreiini tehostaa tekijän XII aktivaatioprosessia. Myöhemmin XIIa muuntaa suurimolekyylisen kininogeenin osallistuessa tekijä XI:n aktiiviseen muotoon, joka puolestaan ​​aktivoi tekijä IX:n. Lisäksi tekijöiden IX ja VIII aktiiviset muodot muodostavat aktivoituneiden verihiutaleiden pinnalle tenaasikompleksin, joka muuttaa tekijän X suoraan Xa:ksi. Tekijän Xa ja sitten protrombinaasin (tekijöiden Xa/Va kompleksi) muodostumisesta lähtien veren hyytymisprosessi etenee yhteistä polkua pitkin muuttumattomilla tekijöillä. Veren hyytymisen kaskadimallia käytetään edelleen menestyksekkäästi seulonta- (yleisten) koagulaatiotestien tulkinnassa, joissa tekijä X:n aktivoitumisen olosuhteet sisäistä reittiä pitkin (laskimoveren hyytymisaika, aktivoitu plasman uudelleenkalkkiutumisaika ja aktivoitunut osittainen tromboplastiiniaika) tai ulkoinen reitti lisääntyy keinotekoisesti (protrombiinitesti).

Tämä malli ei kuitenkaan pystynyt selittämään verenvuodon hallintamekanismia in vivo. Jos siis hyväksymme kaskadimallin kannan veren hyytymisen sisäisten ja ulkoisten reittien olemassaolosta in vivo, ei ole selvää, miksi tekijä X:n aktivaatio ulkoisella reitillä kudostekijä/VIIa-kompleksin läpi ei kompensoi. tekijöiden VIII tai IX puute hemofiliapotilaalla. Samanlainen kysymys herää potilailla, joilla on tekijä VII:n puutos ja jotka kehittävät vakavia verenvuodon ilmenemismuotoja, jos sisäisessä reitissä ei ole häiriöitä. Sanalla sanoen, miksi mahdollisuus protrombinaasin muodostumiseen (Xa/Va-tekijöiden kompleksi) yhdessä reitissä ei kompensoi hajoamista toisessa? Jotkut kontaktivaihetta koskevat kohdat ovat myös epäselviä. Jos sisäinen reitti alkaa tekijä XII:n aktivoitumisesta, niin miksi sen puute, samoin kuin kallikreiini ja korkean molekyylipainon kininogeeni, ei aiheuta verenvuototaipumusta?

Tarve tarkistaa veren hyytymisen kaskadimallia aiheutti myös uudet tiedot erilaisten solurakenteiden roolista hyytymisreaktioissa. Kävi ilmi, että kalvolipidien samankaltaisesta rakenteesta huolimatta kudostekijöitä kantavat solut ja aktivoidut verihiutaleet ilmentävät reseptoreita, jotka paikantavat veren hyytymisjärjestelmän eri komponentteja niiden pinnalle. Juuri se tosiasia, että eri hyytymistekijät sijaitsevat subendoteliaalisten solujen ja verihiutaleiden pinnoilla, mahdollisti niiden sisällyttämisen järjestyksen harkitsemisen uudelleen fibriinihyytymän muodostumisprosessissa.

Kun otetaan huomioon tiedot hyytymisreaktioiden lokalisoinnista ja hallinnasta eri solupinnoilla, veren hyytymisprosessi voidaan esittää kolmena päällekkäisenä vaiheena.

Vaihe 1 - veren hyytymisen alkaminen, aloitussignaalin muodostuminen hyytymisprosessin aktivoimiseksi, kehittyy sillä hetkellä, kun verisuonen seinämän eheyden vaurioitumisen seurauksena subendoteliaaliset solut paljastuvat ja joutuvat kosketuksiin veren kanssa , jolla on spesifinen kiinteä proteiini-kudostekijä. Kudostekijä ilmentyy monissa solutyypeissä, jotka eivät ole kosketuksissa veren kanssa, mukaan lukien sileät lihassolut, fibroblastit ja makrofagit. Normaaleissa olosuhteissa useimmista soluista, jotka ovat suorassa kosketuksessa veren kanssa, puuttuu kudostekijä. Näitä ovat verisuonten endoteelisolut ja verihiutaleet. Patologisissa olosuhteissa, kuten tulehduksessa, monosyyteissä/makrofageissa ja endoteelisoluissa endotoksiinilipopolysakkaridit, immuunikompleksit, trombiini, useat sytokiinit, hapettuneet matalatiheyksiset lipoproteiinit ja jopa mekaaniset muutokset nestevirtauksessa niiden ympärillä voivat indusoida kudostekijöiden synteesiä. .

Näiden tietojen perusteella voidaan pitää kudostekijää tärkeänä tekijänä monien sairauksien patogeneesissä.Kudostekijän poikkeuksellinen ominaisuus on sen kyky sitoutua tekijä VII:ään muodostaen kudostekijä/VII-kompleksin. On tärkeää huomata, että toisin kuin muut prokoagulantit, jotka kiertävät veressä inaktiivisessa muodossa, terveellä henkilöllä 0,01 - 1 % tekijä VII:n kokonaismäärästä on läsnä verenkierrossa aktivoidussa muodossa VIIa. Altistuminen kudostekijälle johtaa aktiivisen kudostekijä/VIIa-kompleksin sekä kudostekijä/VII-kompleksin muodostumiseen. Jälkimmäisessä tekijä VII muuttuu VIIa:ksi johtuen TF/VIIa-kompleksin aktivoinnista ja tekijän Xa vaikutuksesta. On erittäin tärkeää, että yhdellä tekijällä VIIa ilman kudostekijää on hyvin alhainen proteolyyttinen aktiivisuus, mikä lisääntyy useilla suuruusluokilla kofaktorin - kudostekijän läsnä ollessa.

Koska kudostekijä on kiinteä kalvoproteiini, kudostekijä/VIIa-kompleksi liittyy aina solujen kalvopintaan. Tämä on erittäin tärkeä kohta, joka selittää hyytymiskaskadin lokalisoinnin verisuonivaurion alueella, eli tarkalleen paikassa, jossa verenvuoto on pysäytettävä. Aktiivinen kudostekijä/VIIa-kompleksi aktivoi rajoitetun proteolyysin kautta tekijät X ja IX. Samanaikaisesti muodostunut tekijä IXa "liukuu" pois kudostekijää kantavien subendoteliaalisten solujen pinnalta ja on vuorovaikutuksessa aktivoituneiden verihiutaleiden spesifisen reseptorin kanssa, jotka ovat lähellä verisuonivaurion alueella.

Tekijä Xa, joka jää subendoteliaalisten solujen pinnalle, yhdessä kofaktorinsa (tekijä Va) kanssa muodostaa protrombinaasia. Protrombinaasi pilkkoo proteolyyttisesti protrombiinia, mikä johtaa trombiinin muodostumiseen. Fysiologisissa olosuhteissa kudostekijä/VIIa-kompleksin vaikutuksesta muodostuu kuitenkin hyvin pieni määrä trombiinia, joka ei pysty muuttamaan fibrinogeenia sellaiseksi määräksi fibriiniä, joka riittää pysäyttämään verenvuodon. Tämä hemostaasijärjestelmän hämmästyttävä kyky rajoittaa trombiinin muodostumista veren hyytymisprosessin aktivoitumisen alkuvaiheessa on tärkeä ensisijaisesti tromboosin kehittymisen estämiseksi, joka, kuten hemostaattisen tulpan muodostumisessa, perustuu trombin muodostumiseen. fibriinistä. Muuten kudostekijälle altistuminen verisuonen seinämässä voi aiheuttaa tromboottisia komplikaatioita.

Trombiinin muodostumisen rajoitusta kudostekijää kantavien subendoteliaalisten solujen pinnalla kontrolloidaan useilla tavoilla: spesifisellä kudostekijäreitin estäjällä (TPFI), antitrombiinilla, ja tekijä VII:n inaktiivisen muodon kilpailevalla sitoutumisella kudostekijään. Kudostekijäreitin estäjällä on erityisen tärkeä rooli trombiinin muodostumisen rajoittamisessa kudostekijä/VIIa:n vaikutuksesta. Tätä inhibiittoria tuottavat endoteelisolut ja se toimii yksinomaan kudostekijä/VIIa-kompleksin muodostumispaikassa. Xa sitoutuu aluksi TPFI:hen. TFPI/Xa-kompleksin muodostuminen tehostaa merkittävästi estävää vaikutusta, koska TFPI/Xa, jonka aktiivisuus on korkeampi kuin TFPI yksinään, sitoutuu kudostekijään/VIIa:han.

Vaihtoehtoisen mallin mukaan TPFI sitoutuu aiemmin muodostuneeseen ternääriseen kudostekijä/VIIa/Xa-kompleksiin. Kudostekijä/VIIa/TFPI/Xa-tetramolekyylikompleksin muodostuminen vähentää erittäin nopeasti tekijän X:n suoraa aktivaatiota subendoteliaalisten solujen pinnalla ja siten sillä on tärkeä rooli tromboosin ehkäisyssä. Lisäosuuden prosessin rajoittamiseen antaa antitrombiini III, joka estää trombiinin lisäksi myös tekijä Xa:ta niiden siirtyessä kudostekijöitä kantavien solujen pinnalta ympäristöön. Tietyn panoksen trombiinin muodostumisen rajoittamiseen veren hyytymisprosessin aktivoitumisen alkuvaiheessa antaa myös aktivoimaton tekijä VII, joka kilpailee tekijän VIIa kanssa kudostekijän sitoutumiskohdista. Sen estävä vaikutus on merkittävin kudostekijän minimipitoisuudella, joka on yhtä suuri tai pienempi kuin 25 pM.

Siten verisuonen seinämän endoteelikerroksen vaurioituminen ja sitä seuraava kudostekijän kosketus veren kanssa johtaa kudostekijä/VIIa:n aktiivisen kompleksin muodostumiseen, mikä on kriittinen tapahtuma koko hyytymiskaskadin aktivoitumiselle. Pieni määrä trombiinia, joka muodostuu kudostekijää kantaviin soluihin, vaikka se ei riitäkään hemostaattisesti täydellisen fibriinimäärän muodostumiseen, on välttämätöntä seuraavien veren hyytymisvaiheiden muodostumiselle ja ennen kaikkea 2. vaihe - veren hyytymisprosessin vahvistaminen.

2. vaihe - veren hyytymisprosessin vahvistaminen. Subendoteliaalisten rakenteiden altistuminen verisuonen seinämän vaurioituessa luo olosuhteet paitsi veren hyytymisen alkuvaiheen, myös verihiutaleiden aktivoitumiseen. Verihiutaleiden aktivaatioprosessia tehostaa trombiini, joka muodostuu kudostekijä/VIIa-kompleksin vaikutuksesta kiinnittyneiden verihiutaleiden viereen. Merkittävää on, että aktivoimattomilla ja aktivoiduilla verihiutaleilla on useita trombiinin reseptoreita tai sitoutumiskohtia. Nämä ovat proteaasi 1:n aktivoimat reseptorit, glykoproteiini Ib-V-IX (GPIb-V-IX) jne. GPIb-V-IX-reseptoriin liittyvä trombiini aktivoi useita prokoagulantteja, mukaan lukien tekijä V, joka vapautuu erityksen aikana. verihiutaleiden α-rakeista ja jää niiden pinnalle.

Mielenkiintoista on, että GPIb-V-IX toimii reseptorina muutakin kuin trombiinille. Se on ensisijaisesti von Willebrand -tekijän sitoutumiskohta. Von Willebrand -tekijän ja trombiinin kohdat GPIb-V-IX:ssä ovat erilaiset, joten molemmat proteiinit voivat sitoutua tähän reseptoriin samanaikaisesti. Von Willebrand -tekijän sitoutuminen GPIb-V-IX:ään varmistaa verihiutaleiden kiinnittymisen verisuonen seinämän vauriokohtaan ja niiden osittaisen aktivoitumisen. Koska von Willebrand -tekijä kiertää plasmassa kompleksina tekijä VIII:n kanssa, sitoutumalla sen spesifiseen reseptoriin GPIb-V-IX, se paikallistaa myös tekijä VIII:n verihiutaleiden pinnalle. Läheisen trombiinin vaikutuksesta von Willebrandin tekijästä ja tekijä VIII:sta koostuvan kompleksin dissosiaatio tapahtuu. Tässä tapauksessa tekijä VIII pysyy paikan päällä verihiutaleiden pinnalla ja trombiini aktivoi sen. Kudostekijä/VIIa-kompleksin vaikutuksesta muodostuva trombiini puolestaan ​​aktivoi tekijän XI, joka sitoutuu aktivoituneiden verihiutaleiden pintaan GP1b-V-IX-kompleksin GP1ba-ketjun kautta.Täten trombiinin mikromolaariset määrät ovat muodostuvat soluihin, joissa on kudostekijää, mahdollistavat 2. vaiheen aikana veren hyytymisprosessin leviämisen verihiutaleiden pinnalle samalla kun ne muuttuvat tekijöiden XI, IX, VIII ja V aktiiviseen muotoon.

3. vaihe - veren hyytymisprosessin leviäminen. Siitä hetkestä lähtien, kun verihiutaleiden optimaalinen aktivaatio saavutetaan, hyytymisprosessi siirtyy viimeiseen vaiheeseensa - veren hyytymisprosessin leviämiseen. Tätä helpottavat verihiutaleiden ainutlaatuiset ominaisuudet, jotka selittyvät niiden pinnalla olevien tekijöiden XI, XIa, IX, IXa, X, VIII, VIIIa, V, Va ja Xa, protrombiinin ja trombiinin korkean affiniteetin reseptoreiden läsnäololla. Tämän vaiheen aikana tenaasi- ja protrombinaasikompleksien muodostuminen tapahtuu jo aktivoituneiden verihiutaleiden pinnalle. Tenaasikompleksin (VIIIa/IXa) muodostuminen edellyttää kahden tekijän - tekijän IXa:n ja tekijän VIIIa - aktiivisten muotojen läsnäoloa. On osoitettu, että tekijä IX aktivoituu kahdella tavalla. Ensimmäinen reitti on tekijä IX:n aktivaatio kudostekijä/VIIa-kompleksin vaikutuksesta. Tuloksena oleva tekijä IXa siirtyy kudostekijöitä kantavista soluista viereisten verihiutaleiden pinnalle käytännössä menettämättä aktiivisuuttaan, koska TPFI ei vaikuta siihen ja antitrombiini III ja muut plasman proteaasin estäjät estävät sitä hyvin hitaasti.

Aktiivisen tekijä IX:n kriittinen määrä, joka on välttämätön verenvuodon pysäyttämiseksi, muodostuu kuitenkin eri tavalla - verihiutaleihin liittyvän tekijä XIa:n vaikutuksesta. Kuten edellä mainittiin, tekijä XI:n sitoutumiskohta aktivoiduissa verihiutaleissa on GP Iba, joka tarjoaa optimaaliset olosuhteet sen aktivaatiolle trombiinilla, joka myös liittyy GPIb-V-IX-kompleksiin. Juuri verihiutaleiden pinnalle aktivoituva tekijä XIa varmistaa tekijä IX:n aktivoitumisen, mikä lisää merkittävästi jälkimmäisen hyytymispotentiaalia. Tämä saattaa selittää, miksi verihiutaleiden reseptorin GPIb:n puuttuminen Bernard-Soulier'n taudissa johtaa trombiinin muodostumisen vähenemiseen tekijästä XIa riippuen. Tekijä X:n 50-100-kertainen aktivaatio kudostekijä/VIIa-kompleksin vaikutuksesta. Aktivoituneiden verihiutaleiden pinnalle muodostuva protrombinaasikompleksi (Xa/Va) käynnistää protrombiinin proteolyysin muodostaen suuren määrän trombiinia.

Proteolyysin aikana protrombiinista lohkeaa 1+2-fragmentti (F1+2), jonka määrä heijastaa trombiinin muodostumisprosessin vakavuutta. Lisäksi trombiini pilkkoo fibrinogeenimolekyylistä kaksi fibrinopeptidiä A ja B. Fibrinogeenimolekyylin jäljelle jäävä osa - fibriinimonomeeri - saa kyvyn yhdistyä omanlaisensa kanssa ja muodostaa fibriinipolymeerin (liukoinen fibriini). Fibriinihyytymän muodostuminen ja stabiloituminen tapahtuu tekijä XIII:n vaikutuksesta, jonka trombiini aktivoi kalsiumionien läsnä ollessa transglutaminaasiaktiivisuuden vuoksi, mikä mahdollistaa kovalenttisten sidosten muodostumisen fibriinimonomeerien välille. Tekijän XIII A-alayksikkö sisältää tämän katalyyttisen reaktion aktiivisen kohdan, kun taas B-alayksikkö estää tämän entsymaattisen aktiivisuuden.

Siten vain tekijän XIII aktiivisella muodolla (tekijä XIIIa) on transglutaminaasitoiminto, joka muodostuu hyytymiskaskadin viimeisessä vaiheessa A-alayksikön osittaisella proteolyysillä trombiinin vaikutuksesta vapauttaen "aktivaatiopeptidiä". ", joka koostuu 37 aminohaposta ja sitä seuraavasta B-alayksikön dissosiaatiosta. Fibriinipolymeerit ovat tärkeä tekijä XIII:n aktivoitumisen kofaktori. Plasmassa tekijä XIII:n proentsyymimuoto kiertää A2B2-tetrameerinä, kun taas verihiutaleissa se esiintyy A2-dimeerinä. B-alayksikön puuttumisen vuoksi trombiini aktivoi paljon nopeammin tekijän XIII verihiutalemuotoa, joka sisältää 50 % tämän prokoagulantin transglutaminaasin kokonaisaktiivisuudesta, paljon nopeammin kuin plasmakomponentti. On osoitettu, että tekijä XIII:n verihiutaleihin liittyvä muoto on verihiutaleiden aktivaation merkki ja myötävaikuttaa niiden hyytymistä edistävien ominaisuuksien lisääntymiseen.

Siten trombiinin muodostumisnopeus veren hyytymisen viimeisen vaiheen aikana riippuu yksinomaan tekijä Xa määrästä, joka muodostuu aktivoituneiden verihiutaleiden fosfolipidipinnalle tenaasikompleksin (VIIIa/DCa) vaikutuksesta. Näiden tietojen valossa käy selväksi, miksi tekijä Xa:n muodostumisen ulkoinen reitti ei korjaa veren hyytymishäiriöitä potilailla, joilla on hemofilia ja tekijä VIII:n tai IX:n aktiivisuus on alentunut. Trombiinin mikromäärien muodostuminen ensimmäisessä vaiheessa - veren hyytymisen alkaessa - tekijän VIII tai IX puuttuessa ei häiriinny, koska se riippuu kudostekijä/VIIa-kompleksista. Hemofiliassa tenaasikompleksin muodostuminen häiriintyy, mikä johtaa X-aktivaationopeuden laskuun ja trombiinin muodostumisen estämiseen verihiutaleiden pinnalla.

On todettu, että 1 ml:n verta koaguloituessa trombiinia muodostuu määrä, joka riittää koaguloimaan koko fibrinogeenin 3 litrassa verta. Tätä tappavaa vaikutusta kehossa ei havaita antikoagulanttikomponenttien (solujen ja humoraalisten) vaikutuksesta. Solukomponentit, jotka pitävät verta nestemäisessä tilassa liikkeessä, sisältävät ensisijaisesti makrofagit ja maksan, jotka poistavat spesifisesti aktivoituneet veren hyytymistekijät ja fibriinin vaikuttamatta niiden esiasteisiin. Humoraalinen komponentti koostuu useista proteiineista, jotka tavalla tai toisella inaktivoivat (estävät) aktiivisia veren hyytymistekijöitä. Näihin proteiineihin kuuluvat antikoagulantit: antitrombiini III, kofaktori hepariini II ja α2-makroglobuliini, jotka inaktivoivat seriiniproteaaseja, nimittäin trombiinia ja kaikkia sen muodostumista edeltäviä tekijöitä (paitsi tekijät VIIIa ja Va), muodostamalla inaktiivisia komplekseja niiden kanssa. Tekijöiden VIIIa ja Va inaktivointi - vahvimmat katalysaattorit trombiinin muodostukselle suoritetaan muiden proteiinien, niin sanotun proteiini C- ja S-järjestelmän avulla, joka aktivoituu kompleksilla, joka muodostuu trombiinin vuorovaikutuksessa trombomoduliinin kanssa (spesifinen reseptori). verisuonen seinämä). Trombomoduliini on trombiinin reseptori. Endoteelisolut ilmentävät sitä suurina määrinä, erityisesti mikroverenkierron alueella. Trombiini, joka tulee vereen vaurioituneelta alueelta, sitoutuu trombobomoduliiniin koskemattomissa endoteelisoluissa.

Kun trombiini on vuorovaikutuksessa trombomoduliinin kanssa, trombiinin spesifisyys muuttuu. Se menettää hyytymisominaisuudet ja lakkaa aktivoimasta verihiutaleita ja muuttamasta fibrinogeenia fibriiniksi. Kuitenkin samaan aikaan trombiini saa antikoagulanttiominaisuuksia, jotka koostuvat kyvystä aktivoida proteiini C:tä, joka on yksi tärkeimmistä luonnollisista antikoagulanteista. Proteiini C:n aktivoituminen trombiini/trombomoduliinikompleksin vaikutuksesta tapahtuu endoteelisolujen pinnalla, johon proteiini C sitoutuu käyttämällä spesifistä EPCR-1-reseptoria (endoteliaalinen proteiini C -reseptori, endoteeliproteiini C -reseptori-1), mikä helpottaa sen aktivoitumista. . Aktivoitu proteiini C muodostaa S-proteiinin kanssa kompleksin, joka pilkkoo ja inaktivoi tekijät Va ja VIIIa.

Tekijä VIII:n inaktivaatiota tehostaa tekijä V:n inaktivoitu muoto, joka tässä tapauksessa toimii aktivoidun proteiini C:n kofaktorina. Tämä estää hyytymisentsyymien muodostumisen paikassa, jossa on terve ehjä endoteelin kerros. Kuten polysakkaridi, proteiini S on yksi K-vitamiinista riippuvaisista proteiineista. Sen lisäksi, että proteiini S osallistuu ei-entsymaattisena kofaktorina tekijöiden V ja VIII aktiivisten muotojen APS-välitteiseen (aktivoitu proteiini C) proteolyyttiseen hajoamiseen, sillä on itsenäinen antikoagulanttitoiminto johtuen sen suorasta vuorovaikutuksesta tekijöiden Va ja VIII kanssa. Xa. Normaaleissa fysiologisissa olosuhteissa noin 60 % plasman S-proteiinin kokonaismäärästä sitoutuu palautuvasti C4b:tä sitovaan proteiiniin, joka on klassisen komplementtireitin säätelykomponentti, ja vain S-proteiinin sitoutumattomaan muotoon ("vapaa proteiini S") on antikoagulanttiominaisuuksia. Sen lisäksi, että endoteelisolut osallistuvat proteiini C:n aktivaatioon trombomoduliinin kautta, niillä on myös muita yhtä tärkeitä trombogeenisia ominaisuuksia.

Ne tehostavat antitrombiini III:n hyytymistekijöiden inaktivaatiota, koska niiden pinnalla on hepariinin kaltaisia ​​glykosaminoglykaaneja. Normaaleissa olosuhteissa endoteelisolut kohdistetaan pääasiassa suorittamaan antikoagulanttitehtävää. Vasteena vauriolle tai tulehdukselle ne kuitenkin vähentävät trombomoduliinin ilmentymistä ja lisäävät siirtotekijän ja pintaadheesiomolekyylien ilmentymistä, mikä lisää hemostaattista potentiaalia vauriokohdassa. Tietyissä olosuhteissa tätä voidaan pitää kehon suojaavana reaktiona, jonka tarkoituksena on rajoittaa patologista prosessia. Kuitenkin, kun hemostaasia säätelevä mekanismi on heikentynyt, se voi johtaa paikallisen tromboosin tai suonensisäisen koagulaation kehittymiseen.

Inhiboivan vaikutuksen omaavien komponenttien ohella humoraalinen järjestelmä sisältää myös fibrinolyyttisen mekanismin. Tämän mekanismin tarkoituksena on liuottaa fibriinihyytymä (fibrinolyysi) sen muodostumisen ja hajoamisen välisen tasapainon ylläpitämiseksi verisuonten eheyden ja läpinäkyvyyden säilyttämiseksi. Fibrinolyysin aktiivinen entsyymi on plasmiini, joka muodostuu sen inaktiivisesta esiasteesta, plasminogeenista, sarjan peräkkäisten aktivaatioreaktioiden seurauksena. Merkittävin on plasminogeenin aktivaatio kudosaktivaattorin (t-PA) vaikutuksesta, jota verisuonen seinämän endoteelisolut syntetisoivat ja erittävät plasmaan. Fibriinin ilmestyminen verenkiertoon nopeuttaa merkittävästi fibrinolyysin aktivoitumista. Tämä selittyy kudosplasminogeeniaktivaattorin ja itse plasminogeenin suurella affiniteetilla fibriiniin, jonka pinta fysiologisissa olosuhteissa rajoittaa plasmiinin toimintaa (paikallinen fibrinolyysi). Plasminogeeni ja sen aktivaattori sitoutuvat fibriiniin muodostaen kolminkertaisen kompleksin - fibriinin, plasminogeenin ja aktivaattorin, joka saa aikaan plasminogeenin tehokkaimman aktivoinnin.

Plasminogeenin aktivaatio voi tapahtua myös urokinaasityyppisen aktivaattorin (u-PA) vuoksi. Jos plasminogeeniaktivaattorin kudostyyppi on osallisena suonen ontelossa sijaitsevan fibriinin liukenemisessa, niin urokinaasityyppinen plasminogeeniaktivaattori on tarkoitettu pääasiassa solun pinnalle, mukaan lukien endoteelille, levinneen fibriinin liukenemiseen. osallistuvat suoraan veritulpan muodostumiseen. Vaihtoehtoisen reitin plasminogeenin aktivoitumiselle plasmiiniksi fibriinin pinnalla aiheuttavat HPa-tekijä ja kallikreiini.Plasminogeenin aktivoitumisen aikana muodostuva plasmiini jakaa fibriini- ja fibrinogeenimolekyylit peräkkäin pienemmiksi fragmenteiksi - fibriini/fibrinogeenin hajoamistuotteiksi. Samanaikaisesti aikaisemmilla suuremmilla PDF-fragmenteilla X ja Y on antitrombiinivaikutus, myöhemmillä ja pienemmillä fragmenteilla D estävät fibriinimonomeerien polymeroitumista ja fragmentti E kilpailee trombiinin kanssa fibrinogeenimolekyylin reseptorikohdista. Fragmentit D ja E estävät lisäksi verihiutaleiden tarttumis- ja aggregaatioreaktioita. Fibriinin ohella plasmiini pilkkoo myös tekijöitä VIII ja V.

Aktiivisen plasmiinin leviämistä verenkierrossa estää α2-antiplasmiini, joka inaktivoi nopeasti ja peruuttamattomasti vapaan plasmiinin, joka ei ole adsorboitu fibriiniin tai solun pinnalle, ja suojaa siten kiertävää fibrinogeeniä.

Toinen tärkeä fibrinolyysin estäjä on plasminogeeniaktivaattori-inhibiittori-1 (PAI-1). Se estää kudosten ja urokinatoimintaa. Merkittävä osa siitä vapautuu verihiutaleista niiden aktivoitumisen aikana, mikä varmistaa paikallisen fibrinolyysin eston ja fibriinihyytymän stabiilisuuden säilymisen jonkin aikaa, mikä toimii hemostaattisena tulpana suonen vauriokohdassa. Toinen fibriinihyytymän stabiilisuutta edistävä inhibiittori on trombiinilla aktivoitu fibrinolyysin estäjä (TAFI). Sitä esiintyy plasmassa inaktiivisessa muodossa, ja sen aktivoivat suhteellisen suuret trombiinipitoisuudet, jotka ylittävät trombiinipitoisuuden, joka tarvitaan fibriinin muodostamiseen fibrinogeenista. Nämä korkeat trombiinipitoisuudet syntyvät aktivoituneiden verihiutaleiden trombiinin aiheuttaman tekijä XI -aktivaation seurauksena, ja trombomoduliini kiihdyttää niitä suuresti. Aktivoitu TAFI suojaa fibriinihyytymää proteolyysiltä pilkkomalla plasminogeenin sitoutumiseen tarvittavat lysiiniä sitovat kohdat. Tämän seurauksena t-PA:n aiheuttama fibrinolyysiaika pitenee merkittävästi. Estoa helpottaa myös TAFI:n sitoutuminen fibriiniin tekijän XIIIa kautta. Jälkimmäinen mekanismi tehostaa inhibiittorin aktivoitumista fibriinihyytymän pinnalla, stabiloi sen aktiivisuutta ja suojaa aktiivista entsyymiä lisähajoamiselta Proteiini S rajoittaa TAFI:n aktivaatiota Proteiini S:n tiedetään olevan aktivoidun proteiini C:n kofaktori, joka rajoittaa trombiinin aktivaatiota ja vastaavasti TAFI-aktivaatiota. On myös havaittu, että proteiini S itse estää trombiinin alkumuodostusta aktivoidusta proteiini C:stä riippumatta. Ja tämä puolestaan ​​vähentää TAFI-aktivaationopeutta. Merkittävä antifibrinolyyttinen vaikutus on myös α2-makroglobuliinilla, joka estää plasmiinia ja plasminogeeniaktivaattoreita. Plasminogeeniaktivaattori-inhibiittori-2:ta (PAI-2), jota on plasmassa erittäin alhaisena pitoisuutena, pidetään urokinaasityyppisenä plasminogeeniaktivaattorin estäjänä.

Yhteenvetona edellä esitetystä voimme päätellä, että kaikki verisuonen seinämän eheyden vauriot ovat voimakas ärsyke hemostaasijärjestelmän aktivaatiolle. Ihmiskehon mukautuvien reaktioiden ansiosta normaaleissa olosuhteissa saavutetaan kuitenkin täydellinen tasapaino, joka pysäyttää verenvuodon, eikä tämä synnytä hyperkoagulaatiotilaa. Epätasapaino, joka johtuu hemostaasin yhden tai toisen linkin rikkoutumisesta, voi epäilemättä johtaa joko hypokoagulaation ja verenvuodon kehittymiseen tai hyperkoagulaatioon ja tromboosiin.