Centrifugarea Aceasta este separarea amestecurilor mecanice în părțile lor constitutive.
prin acţiunea forţei centrifuge. Instrumentele folosite pentru aceasta
țintele se numesc centrifuge.
Partea principală a centrifugei este un rotor cu montat în interior
se cuibărește pentru tuburi de centrifugă. Rotorul se rotește cu
viteză mare, rezultând în semnificative
magnitudinea forței centrifuge, sub influența căreia
amestecurile mecanice sunt separate, de exemplu
sedimentarea particulelor suspendate în lichid.

Procese care au loc într-o centrifugă

Centrifugile au următoarele procese:
1) Filtrare centrifuga.
2) Decantare centrifuga.
3) Limpezire centrifuga.

filtrare centrifuga

Filtrarea centrifuga este
procesul de separare a suspensiilor în centrifuge cu
tobe perforate. Suprafata interioara
a unui astfel de tambur este acoperit cu o pânză filtrantă.
Suspensia este aruncată cu forța centrifugă spre
pereții tamburului, în timp ce faza solidă rămâne activă
suprafața țesutului și lichidul sub acțiune
forţa centrifugă trece prin stratul de sedimente şi
materialul este îndepărtat spre exterior prin orificiile din tambur.
Filtrarea centrifugă constă de obicei din
trei procese fizice consecutive:
1) filtrare cu formarea unui precipitat;
2) compactarea sedimentelor;
3) îndepărtarea din sediment a lichidului reținut
forțe moleculare;

decantare centrifuga

decantare centrifuga
Decantare centrifuga - proces de separare
suspensii in centrifuge cu tamburi
ziduri solide. Suspensia este injectată în partea inferioară
parte a tamburului și sub acțiunea forței centrifuge
aruncat pe pereți. Pereții formează un strat
sediment, iar lichidul formează stratul interior și
deplasat din tambur intrând în separare
suspensie. Lichidul se ridică
se toarnă peste marginea tamburului și se îndepărtează
afară.
În acest caz, au loc două procese fizice:
1) Depunerea fazei solide.
2) Compactarea sedimentului.

Limpezire centrifuga

Limpezire centrifuga - proces de separare
suspensii subțiri și soluții coloidale. Asa de
același lucru se realizează în tobe solide.
Din punct de vedere fizic, centrifugal
clarificarea este un proces
depunerea liberă a particulelor solide în câmp
forțe centrifuge.
În tobe cu pereți solidi
se realizează şi separarea emulsiilor. Sub
acţiunea componentelor forţei centrifuge
emulsii în funcţie de densitate
situate sub forma unor straturi delimitate:
stratul exterior al unui lichid cu o densitate mai mare
și un strat interior dintr-un lichid mai ușor.
Lichidele sunt evacuate din tambur separat.

În laboratoarele clinice și sanitare
utilizare prin centrifugare
pentru a separa eritrocitele de
plasma sanguina, cheaguri de sange
ser, particule dense din
parte lichidă a urinei etc. Pentru
în acest scop, sau
centrifuge manuale sau
centrifuge electrice,
a cărui viteză de rotaţie
poate fi ajustat.
Ultracentrifuge, viteza
a căror rotaţie a rotoarelor
depășește 40.000 rpm,
folosit de obicei în
practica experimentala
pentru a separa organele
celule, separarea coloidalelor
particule, macromolecule,
polimeri.

Utilizarea centrifugării în parazitologie

Metoda este folosită pentru a diferenția complexul
amestec de sânge, urină sau fecale, urmate de
izolarea helminților de acesta pentru mai departe
examinarea la microscop și fixarea materialului. LA
procesul de centrifugare disponibil în probă
paraziții trec prin filtru și se acumulează în
compartimentul conic inferior al tubului. Filtru Mesh
cu celule de dimensiuni speciale
într-o eprubetă este situat vertical, ca urmare
ce se întâmplă orizontal (lateral)
filtrarea probei. Drept urmare, dur
particulele de alimente nedigerate în care sunt depuse fibre
camera de amestecare, și paraziții și ouăle acestora
trece liber prin filtru. Asa de
Astfel, paraziții sunt concentrați în
strat de suprafață de sediment fin și
medicul de laborator nu poate decât să selecteze cu grijă
proba pentru microscopie cu
pipeta automata si aplicati-o pe
diapozitiv.

Metoda de centrifugare în citologie

Metoda diferențială
se foloseste centrifugarea pentru
fracţionarea celulelor, adică stratificarea lor
conținutul în fracțiuni în funcție de specific
greutatea diferitelor organite și incluziuni celulare.
Pentru a face acest lucru, celulele fin divizate sunt rotite
aparat special - ultracentrifuga. LA
ca urmare a centrifugării, componentele celulare
precipită din soluție, depunându-se
după densitatea sa. Mai dens
structurile se depun la viteze mai mici
centrifugare și mai puțin dens - la mare
viteze. Straturile rezultate sunt separate și studiate
separat.

10. Centrifugarea în botanică și fiziologia plantelor

Centrifugarea face posibilă obținerea diverselor
fracții de particule subcelulare și explorați
proprietățile și funcțiile fiecărei facțiuni în
separat. De exemplu, din frunze de spanac se poate
izolați cloroplastele, spălați-le cu
recentrifugarea în mod corespunzător
mediu din fragmente celulare și examinați-le
comportament în diverse experimentale
condiţii sau determină compoziţia lor chimică.
În plus, este posibil, aplicând diverse modificări
tehnici, distruge aceste plastide și izolează
prin
centrifugare diferențială (în mod repetat
depunerea particulelor la valori diferite
acceleraţie) elementele lor constitutive. Asa de
prin s-a putut arăta că plastidele conţin
structuri care sunt foarte ordonate
structura, - așa-numitele boabe; toate cerealele
sunt în interiorul cloroplastului limită
membrane (membrana cloroplastului). Avantaje
această metodă sunt pur și simplu neprețuite pentru că
dezvăluie existenţa
subunităţile funcţionale care alcătuiesc
particule subcelulare mai mari; în special,
folosind metoda

11. Metoda de centrifugare în virologie

Metoda de centrifugare cu gradient de densitate Brakke poate fi
să fie utilizate atât pentru selecție, cât și pentru achiziție
caracteristicile cantitative ale virusurilor plantelor. După cum sa dovedit,
Această metodă este plină de multe posibilități și este în prezent
utilizat pe scară largă în domeniul virologiei și molecular
biologie. La efectuarea cercetării prin metodă
tub centrifugă cu centrifugare cu densitate
parțial umplut cu o soluție, a cărei densitate scade în
direcția de jos la menisc. Pentru a crea un gradient
cel mai des este folosită fracţionarea virusurilor plantelor
zaharoza. Înainte de a începe centrifugarea, particulele de virus pot
fie distribuit în volumul soluției, fie aplicat
vârful gradientului. Brakke a propus trei metode diferite
centrifugare cu gradient de densitate. La isopipic
(de echilibru) procesul de centrifugare continuă până când
până când toate particulele din gradient ating un nivel la care densitatea
mediu este egal cu propria lor densitate. Prin urmare,
fracţionarea particulelor are loc în acest caz în conformitate cu
diferențe în densitatea lor. Soluțiile de zaharoză nu au
densitate suficientă pentru separarea izopicnală a multor
virusuri. Cu centrifugare zonală de mare viteză, virusul
aplicat mai întâi gradientului creat anterior. Particule
sediment de fiecare tip în același timp printr-un gradient sub forma unei zone,
sau benzi, cu o viteza in functie de marimea, forma si
densitate. Centrifugarea se încheie când particulele
încă continuă să sedimenteze. Echilibrul zonal
centrifugare asemănătoare vitezei zonale
centrifugare, dar în acest caz centrifugare

12. Dificultăţi în utilizarea metodei centrifugării

Aplicarea metodei de centrifugare diferenţială
plină de multe dificultăţi metodologice. În primul rând, la
eliberarea particulelor le poate deteriora structura. Asa de
a fost necesar să se dezvolte metode speciale pentru distrugerea celulelor,
care nu ar provoca daune structurii subcelulare
fractii. În al doilea rând, deoarece particulele subcelulare au
membranele, în procesul de eliberare,
diverse efecte osmotice. Prin urmare, pentru asta
pentru ca ultrastructura obiectelor studiate să nu fie distrusă
chiar și atunci când sunt izolate, este necesar să selectați cu atenție compoziția
mediu în care distrugerea celulelor și depunerea
particule. Și în sfârșit, spălarea particulelor subcelulare
(resuspendandu-le in mediu si apoi re-
centrifugare) poate duce la pierderea unora
substanţe conţinute în ele, care, sub acţiunea forţelor de difuzie
intra in solutie.
În acest sens, uneori este dificil de înțeles care dintre moleculele mici
sunt într-adevăr elemente ale structurilor studiate, şi care
au fost pur și simplu adsorbite pe suprafața lor în timpul procesului de izolare.
Această situație face dificilă identificarea unora
proprietăţile funcţionale ale obiectelor selectate.

Metoda de centrifugare se bazează pe comportamentul diferit al particulelor în câmpul centrifug creat de centrifugă. Eșantionul din vasul centrifugei este plasat într-un rotor antrenat de o antrenare a centrifugei. Pentru a separa un amestec de particule, trebuie alese un set de condiții, cum ar fi viteza de rotație, timpul de centrifugare și raza rotorului. Pentru particulele sferice, viteza de decantare (sedimentare) depinde nu numai de accelerație, ci și de raza și densitatea particulelor, precum și de vâscozitatea mediului în care este depusă proba.

Centrifugarea poate fi împărțită în două tipuri: preparativă și analitică. Centrifugarea preparativă este utilizată atunci când este necesară izolarea unei porțiuni din probă pentru analiză ulterioară. Această metodă este folosită pentru izolarea celulelor din suspensie, macromolecule biologice etc.

Centrifugarea analitică este utilizată pentru a studia comportamentul macromoleculelor biologice într-un câmp centrifugal. Această metodă face posibilă obținerea de date privind masa, forma și dimensiunea moleculelor prezente în volume relativ mici de probă. Centrifugarea preparativă este tehnica cea mai frecvent utilizată în practica zilnică de laborator.

Centrifugele de laborator pregătitoare, la rândul lor, sunt împărțite în grupuri în funcție de scopul lor: ultracentrifuge preparative, centrifuge de uz general și centrifuge de mare viteză. Centrifugele de uz general au cea mai mare aplicatie practica in laboratoarele medicale, cu o viteza maxima de pana la 6.000 rpm. Caracteristica principală a acestui tip de dispozitive este capacitatea lor relativ mare - până la 6 litri, ceea ce permite utilizarea nu numai a tuburilor de centrifugare de până la 100 ml, ci și a recipientelor de până la 1,25 litri pentru centrifugare. La toate centrifugele de uz general, rotoarele sunt montate rigid pe arborele de antrenare, astfel încât recipientele centrifugate trebuie să fie echilibrate destul de precis. Pentru a evita spargerea, un număr impar de eprubete nu trebuie încărcat în rotor; în caz de încărcare incompletă, recipientul trebuie așezat unul vizavi de celălalt.

Centrifugele de mare viteză au o viteză maximă de 25 mii rpm și o accelerație de până la 89 mii g. Camera care conține rotorul și probele centrifugate este echipată cu un sistem de răcire pentru a preveni căldura generată de frecare atunci când rotorul se rotește la viteze mari. De obicei, aceste centrifuge pot gestiona volume de până la 1,5 litri și sunt echipate cu rotoare cu bol în unghi sau înlocuibile.

Ultracentrifugele preparative accelerează la 75.000 rpm și au o accelerație centrifugă maximă de 510 mii g. Sunt echipate cu unități de refrigerare și vid pentru a preveni supraîncălzirea rotorului din cauza frecării aerului. Rotoarele pentru aceste centrifuge sunt fabricate din titan sau aliaje de aluminiu de înaltă rezistență. Arborele ultracentrifugelor, spre deosebire de cele de mare viteză și pregătitoare, este flexibil pentru a reduce vibrațiile atunci când rotorul este dezechilibrat. Capacitățile rotorului trebuie echilibrate cu grijă până la cea mai apropiată zecime de gram.

Pe lângă filtrare, separarea unui amestec de substanțe lichide și solide este posibilă și prin centrifugare, adică separarea substanțelor în dispozitive numite centrifuge.

Utilizarea unei centrifuge se bazează pe utilizarea forței centrifuge. În timpul rotației rapide (centrifugarea), particulele solide suspendate într-un lichid (cu o densitate mai mare decât densitatea lichidului) sunt aruncate departe de centru sub acțiunea forței centrifuge care se dezvoltă în timpul rotației și sunt astfel separate de lichid.

Orez. 407. Aparat Thyssen pentru lucrări microanalitice

Orez. 408. Centrifuga manuala

Centrifugele sunt: ​​deschise si inchise, cu actionare manuala si mecanica. Partea principală a unei centrifuge manuale deschise (Fig. 408) este o axă de rotație fixată vertical, perpendiculară pe care la capătul superior al acesteia este atașată o bară cu două (sau patru) manșoane metalice întărite mobil. Aceste manșoane sunt introduse în tuburi speciale îngustate în jos (Fig. 409) cu un lichid din care trebuie îndepărtate particulele în suspensie,

În partea de jos a mânecii se pune o bucată de vată, „pentru a evita contactul direct între sticlă și metal. Când tuburile sunt introduse în manșoane, centrifuga este pusă în mișcare și după un timp (în funcție de vâscozitatea lichidului, dimensiunea particulelor în suspensie și diferența de densitate), solidele în suspensie sunt separate de lichid, după pe care centrifuga este oprită. În partea de jos a eprubetei este colectat un precipitat dens de solid, deasupra căruia se află un lichid limpede.

W centrifuge acoperite(Fig. 410), în funcție de mărime, conțin un număr diferit de manșoane, de la 2 la 12 sau mai mult, situate simetric la aceeași distanță între ele și față de axa centrifugei.

Centrifuge mecanice închise(Fig. 410, b) sunt mai convenabile decât cele manuale (Fig. 410, a). Ele dau de obicei 2000-3000 rpm, vă permit să obțineți o separare mai perfectă a lichidului și solidului.

Tuburile de centrifugare trebuie să aibă aceeași masă după ce au fost umplute cu lichid. Acolo unde o centrifugă trebuie utilizată frecvent, se recomandă să existe cântare speciale adaptate pentru cântărirea (sau mai degrabă, tararea) eprubetelor. La aceste cântare, cupele sunt suspendate de grinda folosind tije atașate de centrul cupelor. Aceste tije au inele în care sunt introduse eprubete.

După ce ați întărit eprubetele, turnați mai întâi lichidul de centrifugat într-o eprubetă (folosind, de exemplu, o pipetă), apoi în a doua, încercând să echilibrați cupele.

Nu puneți niciodată prea mult lichid în eprubete; eprubetele sunt umplute astfel încât distanța de la margine la nivelul lichidului să nu fie mai mică de 10 mm.

Când trebuie să echilibrați o mulțime de eprubete, este recomandabil să folosiți următoarea tehnică. După ce a echilibrat prima pereche de eprubete, una dintre ele se scoate și se pune în priza centrifugei, iar cealaltă se lasă pe balanță; această ultimă eprubetă va servi ca etalon pentru restul, introduceți o altă eprubetă în spațiul liber pe balanță, echilibrați-o cu etalonul și scoateți-o. De asemenea, este recomandabil să pre-umpleți eprubetele (luând cantitatea de lichid puțin mai mică decât este necesar) și să adăugați cantitatea necesară de lichid deja în timpul echilibrării. Această abordare accelerează munca.

Orez. 409. Eprubete pentru centrifuge.

Eprubetele echilibrate sunt introduse în prizele centrifugei.

Centrifuga nu trebuie pornită la viteză maximă imediat, ci treptat. Acest lucru se aplică atât centrifugelor manuale, cât și mecanice.

Orez. 410. Centrifuge închise: a - cu acţionare manuală; b - cu un motor electric.

Centrifugele mecanice pentru controlul vitezei au dispozitive adecvate. Deci, centrifugele electrice sunt echipate cu reostate pentru pornirea treptată la numărul complet de rotații. În centrifugele antrenate de o turbină cu apă, creșterea treptată a vitezei se realizează prin reglarea jetului de apă. Cu cât includerea a fost efectuată mai atent, cu atât centrifuga funcționează mai fiabil.

Centrifuga trebuie monitorizată în permanență; contaminarea acestuia, în special a pieselor mobile, este inacceptabilă. Manșoanele metalice ar trebui să se întoarcă ușor și liber. Angrenajele care antrenează centrifuga trebuie să fie ușor de mișcat; nu trebuie lubrifiate cu grăsimi care se pot îngroşa. Arborele centrifugei trebuie să fie, de asemenea, în ordine și întotdeauna curat.

Manipularea neglijentă a centrifugelor, în special a centrifugelor manuale, poate îndoi axa și, prin urmare, poate dezactiva centrifuga.

După oprirea centrifugei, autopornitorul este lăsat să se oprească și numai după aceea se scot eprubetele.

Recent, sunt tot mai răspândite așa-numitele supercentrifuge, care dau până la 40.000 rpm (Fig. 411).

Orez. 411 super centrifuga

Astfel de centrifuge sunt potrivite în special pentru centrifugarea tuturor tipurilor de soluții vâscoase, cum ar fi lacuri, dispersii fine și emulsii.

Lichidul de supracentrifugat intră în duza 1 situată în partea inferioară a aparatului. Apoi lichidul este turnat în cilindrul de lucru 2, rotindu-se cu o viteză de până la 40.000 rpm, în care particulele mai grele suspendate în lichid sunt separate. Lichidul se ridică treptat de-a lungul cilindrului 2 până la separatorul 5, iar dacă emulsia este distrusă, lichidul mai ușor curge prin scurgerea 8, iar cel mai greu - prin scurgerea 4. La separarea particulelor solide cu o densitate mai mare. de unul, lichidul curge prin scurgerea 3. Pe peretele interior cilindrul de lucru este depus sediment solid separabil. Supercentrifuga. Din când în când, supercentrifuga este oprită, cilindrul de lucru 2 este îndepărtat, este curățat de sedimente și, după ce o pune la loc, continuă să funcționeze. Întregul proces de curățare a cilindrului de lucru, de la momentul opririi până la momentul unei noi porniri a supercentrifugei, nu durează mai mult de 15 minute. Dacă trebuie să purificați cantități relativ mari de lichid, atunci utilizați trei88 de supercentrifuge: una funcționează, cealaltă este curățată, a treia este în rezervă,

Centrifugarea este separarea amestecurilor mecanice în părțile lor componente prin acțiunea forței centrifuge. Dispozitivele folosite în acest scop se numesc centrifuge. Partea principală a centrifugei este un rotor cu cuiburi pentru tuburile de centrifugă montate în el. Rotorul se rotește cu viteză mare, în urma cărora se creează forțe centrifuge semnificative, sub acțiunea cărora se separă amestecuri mecanice, de exemplu, se depun particule suspendate într-un lichid.

Centrifuge: 1 - manuale: 2 - cu actionare electrica.

În laboratoarele clinice și sanitare, centrifugarea este utilizată pentru a separa de plasma sanguină, de particule dense din partea lichidă a urinei etc. În acest scop, se folosesc fie centrifuge manuale (Fig., 1), fie centrifuge electrice, viteza de rotație a care poate fi reglat (Fig., 2).

Ultracentrifugele, a căror turație a rotorului depășește 40.000 rpm, sunt de obicei utilizate în practica experimentală pentru separarea organelelor celulare, separarea particulelor coloidale, macromoleculelor etc.

Centrifugarea este separarea sistemelor grosiere, formate din componente lichide și solide cu densități diferite, folosind aparate speciale numite centrifuge. Principiul de funcționare al centrifugei se bazează pe crearea unei forțe centrifuge mari, sub influența căreia rata de separare a componentelor amestecului plasat în centrifugă crește de multe ori în comparație cu viteza de separare a acestora sub acțiune. de gravitaţie.

Metoda de centrifugare este utilizată pe scară largă în biologie, medicină și tehnologie, înlocuind adesea procesele de filtrare, decantare și presare.

Centrifuga are o carcasă, un mecanism de antrenare, un rotor, o cameră de lucru (închidere) și un panou de control. Unele centrifuge sunt echipate cu un ceas electric care asigură oprirea și frânarea automată în intervalul de la 5 la 60 de minute. Centrifugele speciale au unități frigorifice și de vid cu dispozitive de urmărire și control automat. Partea principală a oricărei centrifuge este rotorul (în centrifugele de laborator acesta este de obicei amplasat pe un arbore de motor electric montat vertical sau rotit de diferite roți dințate de la arborele motorului, uneori chiar manual). Rotorul centrifugei este un disc (cruce) cu prize articulate pentru manșoane metalice, în care sunt așezate eprubete, care iau o poziție orizontală în timpul rotației.

Uneori, rotorul este realizat sub forma unui trunchi de con de metal solid cu celule pentru eprubete (rotor unghiular); tuburile din el sunt situate la un unghi constant față de axa de rotație (de obicei 40°). Odată cu poziția înclinată a eprubetelor, componentele amestecului se separă mai repede. Separarea amestecului se realizează în eprubete de diferite forme și volume (Fig. 1). Când se lucrează la viteze mari, se folosesc eprubete din polietilenă, deoarece cele de sticlă explodează. Eprubetele cu materialul prelucrat amplasate una împotriva alta în rotor trebuie să fie echilibrate. Aceasta asigură o sarcină uniformă pe arborele rotorului și asigură rotația uniformă a arborelui centrifugei. Pentru echilibrarea eprubetelor se folosesc cântare speciale (Fig. 2).

Orez. 1. Tuburi pentru centrifugare.

Orez. 2. Cântare de centrifugare.

Centrifugile utilizate în industrie diferă de centrifugele de laborator într-un design mai complex al rotorului, ceea ce face posibilă centrifugarea unei cantități mari de material în același timp sau efectuarea continuă a proceselor de separare.

Centrifugele cu viteză mică a rotorului sunt folosite în medicină pentru a separa sedimentele urinare, serul sanguin de cheaguri, sedimentarea eritrocitară, în studiile serologice etc.

Microcentrifuga (Fig. 4) este acţionată manual; echipat cu două duze înlocuibile, dintre care una are cuiburi pentru microtuburi și este folosită pentru a determina compatibilitatea sângelui; celălalt - cu priză pentru introducerea unei micropipete gradate (hematocrit) - are rolul de a determina procentul de celule sanguine.

Orez. 3. Centrifuga manuala.

Orez. 4. Microcentrifuga.

Centrifuga manuală (Fig. 3) are patru manșoane din metal sau plastic pentru tuburi de 15 ml.

Centrifuga clinică de laborator TsLK-1 (Fig. 5, 7) are trei viteze de rotație (1000, 1500, 3000 rpm). Rotorul încrucișat este adaptat pentru 12 tuburi de centrifugă convenționale. Cel mai mare volum de lichid centrifugat este de 150 ml.

Centrifugile cu o viteză mare a rotorului sunt în majoritatea cazurilor echipate cu rotoare interschimbabile proiectate pentru diferite volume de lichid și sunt folosite pentru separarea suspensiilor fine.

Centrifuga de laborator TsLN-2 (Fig. 5, 2) are un rotor înclinat pentru șase eprubete scurte cu o capacitate totală de 72 ml. Viteza maxima de rotatie -9000 rpm.

Orez. 5. Diverse centrifuge de laborator: 1 - clinice; 2 - desktop; 3 - colț mic; 4 - staționar; 5 - frigider.

Centrifuga cu unghi mic TsUM-1 (Fig. 5, 3) are trei rotoare unghiulare interschimbabile cu un număr diferit de eprubete și hematocrit: un rotor pentru 6 eprubete cu o capacitate totală de 150 ml, un rotor pentru 10 eprubete cu un total capacitate de 120 ml, un rotor pentru 24 eprubete cu o capacitate totală de 120 ml, hematocrit pentru două capilare. Viteza maximă de rotație este de 10.000 rpm.

Centrifuga este echipată cu un mecanism de ceas electric.

Centrifuga staționară de laborator TsLS-2 (Fig. 5, 4) are două rotoare înlocuibile. Rotorul încrucișat este echipat cu patru manșoane din oțel cu o capacitate de 500 ml și patru eprubete de sticlă pentru acestea cu o capacitate de 250 ml. Rotorul unghiular este furnizat cu 8 eprubete din polietilenă și oțel cu o capacitate de 50-75 ml. Rotația maximă a rotoarelor este de până la 6000 rpm. Centrifuga este echipată cu un mecanism de ceas electric.

Printre centrifugele speciale se numără centrifuga frigorifică de laborator CLR-1 (Fig. 5.5), destinată centrifugării la temperaturi scăzute (-5 ° și peste) a diferitelor substanțe care se modifică chiar și la temperatura camerei - în mare parte suspensii proteice. Centrifuga are trei rotoare înlocuibile care asigură diferite moduri de centrifugare. Două rotoare sunt identice cu caracteristicile tehnice ale rotoarelor de centrifugă de tip TsLS-2, al treilea rotor, care este pus pe o axă suplimentară, dezvoltă 18.000-18.500 rpm. Volumul maxim al medicamentului studiat este de 48 ml. Centrifuga este echipată cu un mecanism de ceas electric. Răcirea camerei de lucru se realizează cu ajutorul unei mașini frigorifice.

Vezi și Ultracentrifugarea.

2.5.1 Natura gradienților

Pentru a crea gradienți de densitate a soluțiilor, cel mai des se folosesc soluții de zaharoză, uneori cu un pH fix. În unele cazuri, se obține o bună separare prin utilizarea D 2 0 în locul apei obișnuite. 2.1 prezintă proprietăţile unor soluţii de zaharoză.

Alegerea gradientului este dictată de sarcinile specifice de fracţionare. De exemplu, ficol, fabricat de Pharmacia Fine Chemicals, poate înlocui zaharoza în cazurile în care este necesar să se creeze gradienți cu densitate mare și presiune osmotică scăzută. Un alt avantaj al ficolului este că nu trece prin membranele celulare. Sărurile de metale grele, cum ar fi rubidiu și cesiu, sunt folosite pentru a crea gradienți de densitate mai mare, totuși, datorită efectului coroziv al CsCl, astfel de gradienți sunt utilizați numai în rotoarele din metale rezistente, cum ar fi titanul.

2.5.2 Tehnica gradientului de densitate în trepte

Pentru a crea un gradient de densitate, mai multe soluții cu densitate în scădere succesiv sunt introduse cu grijă într-un tub de centrifugă folosind o pipetă. Apoi, pe stratul superior, care are cea mai mică densitate, proba este stratificată sub forma unei zone înguste, după care tubul este centrifugat. Gradienți liniari netezi pot fi obținuți prin netezirea gradienților treptat în timpul staționării prelungite a soluției. Procesul poate fi accelerat prin agitarea ușoară a conținutului tubului cu un fir sau prin agitarea ușoară a tubului.

2.5.3 Tehnica de creare a unui gradient de densitate neted

În cele mai multe cazuri, se folosește un dispozitiv special pentru a crea un gradient de densitate neted. Este format din două vase cilindrice cu diametru identic strict definit, comunicând între ele în partea inferioară cu un tub de sticlă cu o supapă de control, care vă permite să reglați proporțiile în care este amestecat conținutul ambelor vase. Unul dintre ele este echipat cu un agitator și are o ieșire prin care soluția curge în tuburile de centrifugă. O soluție mai densă se pune într-un mixer; al doilea cilindru este umplut cu o soluție de densitate mai mică. Înălțimea coloanei de soluții din ambii cilindri este stabilită în așa fel încât presiunea hidrostatică din acestea să fie aceeași. Soluția mai densă este descărcată treptat din mixer în tuburile de centrifugă și este înlocuită simultan cu un volum egal de soluție cu densitate mai mică care intră în mixer din al doilea cilindru prin supapa de control. Omogenitatea soluției din mixer este asigurată prin amestecarea constantă a soluției cu un agitator. Pe măsură ce soluția este drenată în tuburi de centrifugă, densitatea acesteia scade și se creează un gradient de densitate liniar în tuburi. Gradienții neliniari pot fi creați folosind un sistem format din doi cilindri cu diametru inegal.

Pentru a forma gradienți de densitate de abrupte diferită, se utilizează un sistem de două seringi controlate mecanic, care sunt umplute cu soluții de densitate inegală. Se pot crea diverse gradiente prin modificarea vitezei relative a pistoanelor.

2.5.4 Extragerea gradienților din tuburile de centrifugă

După ce centrifugarea este finalizată și particulele sunt separate, zonele formate trebuie îndepărtate. Acest lucru se face în mai multe moduri, cel mai adesea prin metoda deplasării. Un tub de centrifugă este străpuns la bază și un mediu foarte dens, de exemplu, o soluție de zaharoză 60-70%, este introdus lent în partea inferioară. Soluția de deasupra capului este deplasată și fracțiile sunt colectate folosind o seringă, o pipetă sau un dispozitiv special conectat printr-un tub la un colector de fracții. Dacă tuburile sunt din celuloid sau nitroceluloză, fracțiile sunt extrase prin tăierea tubului cu o lamă specială. Pentru a face acest lucru, un tub de centrifugă fixat într-un suport este tăiat direct sub zona dorită și fracțiunea este aspirată cu o seringă sau o pipetă. Cu un design adecvat al dispozitivului de tăiere, pierderea de soluție va fi minimă. Colectarea fracțiilor se realizează și prin străpungerea bazei eprubetei cu un ac subțire gol. Picăturile care curg din tub prin ac sunt colectate într-un colector de fracțiuni pentru analize ulterioare.

2.5.5 Centrifuge preparative și aplicațiile acestora

Centrifugele preparative pot fi clasificate în trei grupe principale: centrifuge de uz general, centrifuge de mare viteză și ultracentrifuge preparative. Centrifuge de uz general dați o viteză maximă de 6000 rpm -1 și OCU până la 6000 g . Se deosebesc unul de celălalt doar prin capacitate și au o serie de rotoare interschimbabile: unghiulare și cu ochelari suspendați. Una dintre caracteristicile acestui tip de centrifuge este capacitatea lor mare - de la 4 la 6 dm 3 , ceea ce le permite să fie încărcate nu numai cu tuburi de centrifugă de 10,50 și 100 cm 3 , ci și cu vase cu o capacitate de până la 1,25 dm 3 . La toate centrifugele de acest tip, rotoarele sunt montate rigid pe arborele de antrenare, iar tuburile centrifugei, împreună cu conținutul lor, trebuie echilibrate cu grijă și să difere în greutate cu cel mult 0,25 g. trebuie așezate simetric, unul împotriva altele, asigurând astfel o distribuție uniformă a eprubetelor în raport cu axa de rotație a rotorului.

Centrifuge de mare viteză oferă o viteză maximă de 25.000 rpm -1 și un OCU de până la 89.000 g. Camera rotorului este echipată cu un sistem de răcire care previne încălzirea care apare din cauza frecării în timpul rotației rotorului. De regulă, centrifugele de mare viteză au o capacitate de 1,5 dm 3 și sunt echipate cu rotoare înlocuibile, atât înclinate, cât și cu pahare suspendate.

Ultracentrifuge preparative oferă o viteză maximă de până la 75.000 rpm -1 și o accelerație centrifugă maximă de 510.000 g . Sunt echipate atât cu un frigider, cât și cu o unitate de vid pentru a preveni supraîncălzirea rotorului din cauza frecării acestuia cu aerul. Rotoarele unor astfel de centrifuge sunt fabricate din aliaje de aluminiu sau titan de înaltă rezistență. Rotoarele din aliaj de aluminiu sunt utilizate în principal, totuși, în cazurile în care sunt necesare viteze deosebit de mari, se folosesc rotoare de titan. Pentru a reduce vibrațiile rezultate din dezechilibrul rotorului din cauza umplerii neuniforme a tuburilor de centrifugă, ultracentrifugele au un arbore flexibil. Tuburile de centrifugare și conținutul lor trebuie echilibrate cu atenție la cel mai apropiat 0,1 g. Cerințe similare trebuie respectate la încărcarea rotoarelor centrifugelor în scopuri generale.

2.6 Proiectarea rotoarelor

2.6.1 Rotoare unghiulare și rotoare cu găleți suspendate

Rotoarele centrifugelor pregătitoare sunt de obicei de două tipuri - găleți înclinate și suspendate. Ele sunt numite unghiulare deoarece tuburile de centrifugă plasate în ele sunt întotdeauna la un anumit unghi față de axa de rotație. La rotoarele cu pahare suspendate, eprubetele sunt instalate vertical, iar atunci când sunt rotite sub acțiunea forței centrifuge rezultate, se deplasează în poziție orizontală; unghiul de înclinare față de axa de rotație este de 90°.

La rotoarele unghiulare, distanța parcursă de particule până la peretele corespunzător al eprubetei este foarte mică și, prin urmare, sedimentarea are loc relativ rapid. După ce se ciocnesc de pereții eprubetei, particulele alunecă în jos și formează un sediment în partea de jos. În timpul centrifugării, apar fluxuri de convecție, care complică foarte mult separarea particulelor cu proprietăți de sedimentare similare. Cu toate acestea, rotoarele cu un design similar sunt utilizate cu succes pentru a separa particulele ale căror viteze de sedimentare variază destul de mult.

La rotoarele cu cupe suspendate se observă și fenomene de convecție, dar nu sunt atât de pronunțate. Convecția este rezultatul faptului că, sub acțiunea accelerației centrifuge, particulele se depun într-o direcție nu strict perpendiculară pe axa de rotație și, prin urmare, ca și în rotoarele unghiulare, lovesc pereții eprubetei și alunecă spre fundul.

Efectele de convecție și turbionare pot fi evitate într-o oarecare măsură prin utilizarea tuburilor cu formă sectorială în rotoarele cu cupe suspendate și prin ajustarea vitezei rotorului; enumerate mai sus, metoda de centrifugare într-un gradient de densitate este, de asemenea, lipsită de dezavantaje.

2.6.2 Rotoare continue

Rotoarele continue sunt proiectate pentru fracționarea la viteză mare a cantităților relativ mici de material solid din suspensii de volum mare, de exemplu, pentru izolarea celulelor din mediile nutritive. În timpul centrifugării, o suspensie de particule este adăugată în rotor continuu; debitul rotorului depinde de natura preparatului depus și variază de la 100 cm3 la 1 dm3 pe 1 min. Particularitatea rotorului este că este o cameră izolată cu un design special; conținutul său nu comunică cu mediul extern și, prin urmare, nu este poluat sau pulverizat.

2.6.3 Rotoare zonale sau Anderson

Rotoarele zonale sunt fabricate din aliaje de aluminiu sau titan, care sunt capabile să reziste la accelerații centrifuge foarte semnificative. De obicei au o cavitate cilindrică, închisă cu un capac detașabil. În interiorul cavității, pe axa de rotație, se află un tub axial, pe care se pune o duză cu lame, care împarte cavitatea rotorului în patru sectoare. Paletele sau deflectoarele au canale radiale prin care se injectează un gradient de la tubul axial la periferia rotorului. Datorită acestui design al lamelor, convecția este redusă la minimum.

Umplerea rotorului se realizează în timpul rotației acestuia la o viteză de aproximativ 3000 rpm -1. Un gradient pre-creat este pompat în rotor, pornind de la un strat cu cea mai mică densitate, care este distribuit uniform de-a lungul periferiei rotorului și este menținut la peretele său exterior perpendicular pe axa de rotație datorită forței centrifuge. . Odată cu adăugarea ulterioară a straturilor de gradient cu densitate mai mare, are loc o deplasare continuă către centrul straturilor mai puțin dense. După ce întregul gradient a fost pompat în rotor, acesta este umplut la volumul său complet cu o soluție numită „pernă”, a cărei densitate este aceeași cu sau depășește puțin cea mai mare densitate a gradientului preformat.

Apoi, prin tubul axial, proba de testat este stratificată , care este deplasat din tub în volumul rotorului folosind o soluție de densitate mai mică, în timp ce același volum al „pernei” este îndepărtat de la periferie. După toate aceste proceduri, viteza de rotație a rotorului este adusă la viteza de lucru și se efectuează fie fracționarea zonal-viteză, fie zonal-izopicnică pentru perioada de timp necesară. . Extracția fracțiilor se realizează la o turație a rotorului de 3000 rpm -1 . Conținutul rotorului este deplasat prin adăugarea unei „perne” de la periferie, în primul rând, straturile mai puțin dense sunt deplasate . Datorită designului special al canalului axial al rotorului Anderson, nu există amestecarea zonelor în timpul deplasării lor. Gradientul de ieșire este trecut printr-un dispozitiv de înregistrare, de exemplu o celulă spectrofotometru, cu care conținutul de proteine ​​poate fi determinat prin absorbție la 280 nm, sau printr-un detector special de radioactivitate, după care se colectează fracțiile.

Capacitatea rotoarelor zonale utilizate la viteze medii variază de la 650 la 1600 cm 3 , ceea ce face posibilă obținerea unei cantități destul de mari de material. Rotoarele zonale sunt utilizate pentru a elimina contaminanții proteici din diferite preparate și pentru a izola și purifica mitocondriile, lizozomii, polizomii și proteinele.

2.6.4 Analiza fracțiilor subcelulare

Proprietățile preparării particulelor subcelulare obținute prin fracționare pot fi atribuite proprietăților particulelor în sine numai dacă preparatul nu conține impurități. Prin urmare, este întotdeauna necesar să se evalueze puritatea preparatelor obținute. Eficiența omogenizării și prezența impurităților în preparat pot fi determinate prin examinare microscopică. Cu toate acestea, absența impurităților vizibile nu este încă o dovadă de încredere a purității medicamentului. Pentru cuantificarea purității preparatului obținut, acesta este supus unei analize chimice, care permite determinarea conținutului de proteine ​​sau ADN din acesta, determinarea activității sale enzimatice, dacă este posibil, și a proprietăților imunologice.

Analiza distribuției enzimelor în țesuturile fracționate se bazează pe două principii generale. Prima dintre acestea este că toate particulele dintr-o anumită populație subcelulară conțin același set de enzime. Al doilea presupune că fiecare enzimă este localizată într-un anumit loc în interiorul celulei. Dacă această poziție ar fi adevărată, atunci enzimele ar putea acționa ca markeri pentru organitele corespunzătoare: de exemplu, citocrom oxidaza și monoaminoxidaza ar servi ca enzime marker mitocondrial, hidrolazele acide ca markeri de lizozom, catalaza ca marker de peroxizom și glucoza-6- fosfatază - marker microzomal membranar. S-a dovedit, însă, că unele enzime, cum ar fi malat dehidrogenaza, R-glucuronidaza, NADP „H-citocrom-c-reductaza, sunt localizate în mai mult de o fracție. Prin urmare, alegerea markerilor enzimatici ai fracțiilor subcelulare în fiecare caz concret trebuie abordată cu mare atenție. Mai mult decât atât, absența unei enzime marker. nu înseamnă absența organelelor adecvate Este probabil ca enzima să fie pierdută de organele în timpul fracționării sau să fie inhibată sau inactivată, astfel încât cel puțin două enzime marker sunt de obicei determinate pentru fiecare fracție.

Fracțiune	Volumul, cm"	Creștere generală	Exnulation, 660 nm	Unități de activitate enzimatică	Randamentul activității în fracții,%

2.7 Fracționarea prin centrifugare diferențială

2.7.1 Prezentarea rezultatelor

Rezultatele obţinute din fracţionarea ţesuturilor sunt prezentate cel mai convenabil sub formă de grafice. Astfel, atunci când se studiază distribuția enzimelor în țesuturi, datele sunt cel mai bine prezentate sub formă de histograme, care fac posibilă evaluarea vizuală a rezultatelor experimentelor.

Activitatea enzimatică a conținutului de proteine ​​din probă este determinată atât în ​​omogenatul original, cât și în fiecare fracție subcelulară izolată separat. Activitatea enzimatică totală și conținutul de proteine ​​din fracții nu ar trebui să difere semnificativ de valorile corespunzătoare din omogenatul original.

Apoi, activitatea enzimatică și conținutul de proteine ​​din fiecare fracție se calculează în % din randamentul total, pe baza căruia se realizează o histogramă. Cantitatea relativă de proteină din fiecare fracție este reprezentată secvenţial de-a lungul axei absciselor, în ordinea izolării lor, iar activitatea specifică relativă a fiecărei fracţiuni este reprezentată de-a lungul axei ordonatelor. Astfel, activitatea enzimatică a fiecărei fracțiuni este determinată din zona barelor.

2.7.2 Ultracentrifugarea analitică

Spre deosebire de centrifugarea preparativă, al cărei scop este separarea și purificarea substanțelor, ultracentrifugarea analitică este utilizată în principal pentru a studia proprietățile de sedimentare ale macromoleculelor biologice și ale altor structuri. Prin urmare, în centrifugarea analitică se folosesc rotoare și sisteme de înregistrare cu un design special: vă permit să monitorizați continuu sedimentarea materialului. în câmp centrifugal.

Ultracentrifugele analitice pot atinge viteze de până la 70.000 rpm -1, generând în același timp o accelerație centrifugă de până la 500.000 g . Rotorul lor, de regulă, are forma unui elipsoid și este conectat cu ajutorul unui șir de motor, ceea ce face posibilă variarea vitezei de rotație a rotorului. Rotorul se rotește într-o cameră de vid dotată cu un dispozitiv de refrigerare și are două celule, analitice și de echilibrare, care sunt instalate în centrifugă strict vertical, paralele cu axa de rotație. Celula de echilibrare servește la echilibrarea celulei analitice și este un bloc metalic cu sistem de precizie. De asemenea, are două orificii index situate la o distanță strict definită de axa de rotație, cu ajutorul cărora se determină distanțele corespunzătoare în celula analitică. Celula analitică, a cărei capacitate este de obicei de 1 cm 3 , are o formă sectorială. Când este instalat corect în rotor, în ciuda faptului că este vertical, funcționează pe același principiu ca un rotor cu găleți suspendate, creând condiții de sedimentare aproape ideale. La capetele celulei analitice sunt ferestre cu ochelari de cuarț. Ultracentrifugile analitice sunt echipate cu sisteme optice care permit monitorizarea sedimentarii particulelor pe toata perioada de centrifugare. La intervale de timp predeterminate, materialul de sedimentare poate fi fotografiat. La fracţionarea proteinelor şi ADN-ului, sedimentarea este monitorizată prin absorbţie în ultraviolete, iar în cazurile în care soluţiile studiate au indici de refracţie diferiţi, folosind un sistem schlieren sau un sistem de interferenţă Rayleigh. Ultimele două metode se bazează pe faptul că, atunci când lumina trece printr-o soluție transparentă constând din zone cu densități diferite, lumina este refractă la limita zonei. În timpul sedimentării, se formează o limită între zonele cu particule grele și ușoare, care acționează ca o lentilă de refracție; în acest caz, pe placa fotografică folosită ca detector apare un vârf. În cursul sedimentării, granița se mișcă și, în consecință, vârful, a cărui viteză poate fi folosită pentru a evalua viteza de sedimentare a materialului. Sistemele interferometrice sunt mai sensibile decât sistemele schlieren. Celulele analitice sunt cu un singur sector, care sunt utilizate cel mai des, și cu două sectoare, care sunt utilizate pentru studiul comparativ al solventului și al solutului.

În biologie, ultracentrifugarea analitică este utilizată pentru a determina greutățile moleculare ale macromoleculelor, pentru a verifica puritatea probelor obținute și pentru a studia modificările conformaționale în macromolecule.

2.8 Aplicarea ultracentrifugării analitice

2.8.1 Determinarea greutăților moleculare

Există trei metode principale pentru determinarea greutăților moleculare folosind ultracentrifugarea analitică: determinarea vitezei de sedimentare, metoda echilibrului de sedimentare și metoda de aproximare a echilibrului sedimentării.

Determinarea masei moleculare prin viteza de sedimentare - aceasta este cea mai comună metodă. Centrifugarea se efectuează la viteze mari, astfel încât particulele, inițial distribuite uniform în volum, încep să se miște în ordine de-a lungul razei de la centrul de rotație. Între zona solventului, deja lipsită de particule, și acea parte a acestuia care le conține, se formează o interfață clară. Această limită se mișcă în timpul centrifugării, ceea ce face posibilă determinarea vitezei de sedimentare a particulelor folosind una dintre metodele de mai sus, înregistrând această mișcare pe o placă fotografică.

Viteza de sedimentare este determinată de următoarea relație:

Unde X - distanta de la axa de rotatie in cm,

t - timpul în s,

w este viteza unghiulară în rad-s -1 ,

s - coeficientul de sedimentare „molecula.

Coeficientul de sedimentare este viteza pe unitatea de accelerație, se măsoară în unități Seedberg ; 1 unitate Swedberg este egală cu 10 _13 s. Valoarea numerică a lui s depinde de greutatea moleculară și forma particulelor și este o valoare caracteristică unei anumite molecule sau structuri supramoleculare. De exemplu, coeficientul de sedimentare al lizozimei este 2,15 S; catalaza are un coeficient de sedimentare de 11,35 S, subunități de ribozom bacteriene de la 30 la 50 S și subunități de ribozom eucariote de la 40 la 60 S.

Unde M este greutatea moleculară a moleculei, R este constanta gazului, T - temperatura absolută, s - coeficientul de sedimentare al moleculei, D este coeficientul de difuzie al moleculei, v - volumul specific parțial, care poate fi considerat ca volumul ocupat de un gram de dizolvat, p - densitatea solventului.

Metoda bilanţului de sedimentare. Determinarea greutăților moleculare prin această metodă se realizează la viteze relativ mici ale rotorului, de ordinul 7.000-8.000 rpm -1, astfel încât moleculele cu o greutate moleculară mare să nu se depună la fund. Ultracentrifugarea se efectuează până când particulele ajung la echilibru, care se stabilește sub acțiunea forțelor centrifuge, pe de o parte, și a forțelor de difuzie, pe de altă parte, adică până când particulele încetează să se miște. Apoi, în funcție de gradientul de concentrație rezultat, greutatea moleculară a substanței este calculată „conform formulei

Unde R este constanta gazului, T - temperatura absolută, o - viteza unghiulară, p - densitatea solventului, v - volum specific parțial, cu X și cu 2 este concentrația unui dizolvat pe distanțe G G şi r 2 din axa de rotaţie.

Dezavantajul acestei metode este că este nevoie de mult timp pentru a atinge echilibrul de sedimentare - de la câteva zile la câteva săptămâni cu funcționarea continuă a centrifugei.

Metoda de abordare a echilibrului de sedimentare a fost dezvoltată pentru a scăpa de dezavantajele metodei anterioare, asociate cu o mare investiție de timp necesară pentru „stabilirea echilibrului. Prin această metodă se pot determina greutăți moleculare atunci când soluția centrifugată se află într-un starea de apropiere a echilibrului În primul rând, macromoleculele sunt distribuite în întregul volum al celulei analitice în mod uniform, apoi, pe măsură ce centrifugarea continuă, moleculele se stabilesc, iar densitatea soluției în regiunea meniscului scade treptat. Modificarea densității este înregistrată cu atenție și apoi, prin calcule complexe care implică un număr mare de variabile, greutatea moleculară a unui anumit compus este determinată de formulele:

Unde R este constanta gazului, T este temperatura absolută, v - volum specific parțial, p - densitatea solventului, dcldr - gradientul de concentrație al macromoleculei, g m și g d - distanța până la menisc și respectiv fundul tubului, c m și s d - concentrația macromoleculelor la menisc și respectiv la fundul tubului, M m și M R -valori ale greutăților moleculare, determinate de distribuția concentrației substanței la menisc și, respectiv, la fundul eprubetei.

2.8.2 Evaluarea purității preparatelor

Ultracentrifugarea analitică este utilizată pe scară largă pentru a evalua puritatea preparatelor de ADN, virus și proteine. Puritatea preparatelor este, fără îndoială, foarte importantă în cazurile în care este necesară determinarea cu precizie a greutății moleculare a moleculei. În cele mai multe cazuri, omogenitatea preparatului poate fi judecată după natura limitei de sedimentare, folosind metoda vitezei de sedimentare: un preparat omogen dă de obicei o limită bine definită. Impuritățile prezente în preparat apar ca un vârf sau umăr suplimentar; ele determină şi asimetria vârfului principal.

2.8.3 Studiul modificărilor conformaționale în macromolecule

Un alt domeniu de aplicare a ultracentrifugării analitice este studiul modificărilor conformaționale în macromolecule. Molecula de ADN, de exemplu, poate fi monocatenară sau dublă, liniară sau circulară. Sub influența diverșilor compuși sau la temperaturi ridicate, ADN-ul suferă o serie de modificări conformaționale reversibile și ireversibile, care pot fi determinate prin modificarea vitezei de sedimentare a probei. Cu cât molecula este mai compactă, cu atât coeficientul său de frecare în soluție este mai mic și invers: cu cât este mai puțin compactă, cu atât coeficientul de frecare este mai mare și, în consecință, cu atât se va sedimenta mai lent. Astfel, diferențele în viteza de sedimentare a unei probe înainte și după diferite impacturi asupra acesteia fac posibilă detectarea modificărilor conformaționale care apar în macromolecule.

În proteinele alosterice, cum ar fi, de exemplu, aspartat transcarbamoilaza, apar modificări conformaționale ca urmare a legării lor la un substrat și liganzi mici. Disocierea unei proteine ​​în subunități poate fi indusă prin tratarea acesteia cu substanțe precum ureea sau paracloromercuribenzoatul. Toate aceste modificări pot fi monitorizate cu ușurință folosind ultracentrifugarea analitică.

Turnarea produselor tubulare prin metoda centrifugare. Sub centrifugareîn industria materialelor de construcții ... care se realizează un astfel de impact se numesc centrifugare. În industria Republicii Belarus, se folosesc centrifuge orizontale ...

Depunerea de particule

Lucrări de laborator >> Chimie

Celulele deja eliberate de viteză mică centrifugare din nucleu, mitocondrii si... ultracentrifugarea Caracteristici de acest tip centrifugare reflectată în cazurile sale de utilizare foarte... pentru noi centrifugareîn gradientul de densitate a zaharozei,...

Folosind o centrifugă

Cursuri >> Industrie, producție

În centrifugele discontinue, diferite operații centrifugare- încărcare, separare, descărcare - apar ... distinge între preparativ și analitic centrifugare. Cu preparativ centrifugare materialul biologic sursă este luat...